Tatiana Xavier de Castro

Universidade Federal Fluminense

Departamento de Microbiologia e Parasitologia
Introduo ao estudo dos Vrus
Vrus:
???
Os vrus desafiam o conceito humano do que significa
estar vivo, mas sua influncia e importncia para todas
as outras criaturas do planeta so indiscutveis
Caractersticas dos vrus

Extremamente pequenos, no visualizados em microscopia tica
Parasitas Intracelulares obrigatrios, necessitando de metabolismo
celular ativo para replicao
Possuem uma nica espcie de cido nuclico: DNA ou RNA





1 micron
Bactria (Staphyllococcus aureus)
m

cm 10
-2
m

mm 10
-3
m

m 10
-6
m

nm 10
-9
m

10
-10
m

O primeiro relato de uma
infeco viral: hieroglifo de
Memphis (370 AC): sinais
tpicos de poliemielite
paraltica
O Fara Ramses V, que morreu em
1196 aC, parace ter contrado
varola: leses pustulares na face da
mmia
Histrico
Vacinao para varola: sculo 19
Originada na China se difunde para o
Ocidente e aprimorada
1881: Louis Pasteur em seu
laboratrio primeira Vacina
contra a Raiva
Histrico
1882: Meyer- Deteco de partculas no filtrveis
Vrus do mosaico do tabaco

Filtrabilidade dos vrus: material filtrado continha um veneno ou
um agente desconhecido to pequeno que era capaz de atravessar
os poros de um filtro que retinha bactria



1898: Beijenrick - Diluies seriadas -

Natureza reprodutiva do agente
Fluidum vivum contagiosum =

1898: Loeffler & Frosch
vrus da febre aftosa

1901: Walter Reed
vrus da febre amarela
Vrus = Veneno
Histrico
Microscpio eletrnico
1937: Felix dHerrelle Microscopia
eletrnica
bacterifagos : agentes slidos
Histrico
1953: W M Stanley et al. cristalizou o vrus do mosaico do
tabaco

Evidncia de estrutura e composio qumica

1950-1960: Necessidade de classificao e nomenclatura
universal

Vrus cido nucleico (DNA ou RNA) + protenas

upload.wikimedia.org

Histrico

Genoma DNA ou
RNA
Informao gentica
Infectividade
NUCLEOCAPSDEO
(todos)

Capsdeo Protenas
Proteo do genoma
Unio a receptores
celulares
Determinantes
antignicos
ENVELOPE
(alguns)

Lipdeos
Glicoprote-
nas virais
Unio a receptores
celulares
Determinantes
antignicos

Estrutura de um vrion:
AS CONFORMAES DO CIDO NUCLEICO VIRAL
RNA DNA
FITA SIMPLES


LINEAR

Ex : Picornavrus, Paramixovrus
FITA SIMPLES

LINEAR
Ex : Parvovrus

SEGMENTADO





Ex : Ortomixovrus

FITA DUPLA

LINEAR


Ex: Adenovrus, Herpesvrus
FITA DUPLA SEGMENTADO





Ex : Reovirus
CIRCULAR




Ex: Papovavirus


Estrutura de um vrion:
Estrutura da partcula viral:
(a) Vrus no envelopado: genoma + capsdeo nucleocapsdeo
(b) Vrus envelopados: genoma + capsdeo + envelope com glicoprotenas
(a)



(b)
Estrutura de um vrion:
Simetria do Capsdeo : Helicoidal (espiral)
Icosadrica (cbica)
Complexa
Estrutura de um vrion:
Simetria complexa
Retrovrus
Estrutura de um vrion:
Estrutura de um vrion:
Envelope:

Camada bilipdica
Glicoprotenas que projetam para o exterior
(peplmeros)
Derivado de membranas celulares com
incorporao de glicoprotenas codificadas
pelos vrus

Enzimas:

Polimerases ou transcriptases necessrias
replicao viral

Temperatura
pH
Solventes de lipdeos e detergentes vrus envelopados
Hipoclorito de sdio protenas
Formaldedo protenas
Luz UV genoma
Estabilidade da partcula viral
Classificao dos Vrus (ICTV)
ESTRUTURA:
TIPO DE GENOMA, SIMETRIA DO CAPSDEO,
PRESENA OU NO DE ENVELOPE, TAMANHO, FORMA,
ENZIMAS ADICIONAIS, SUSCEPTIBILIDADE A
AGENTES QUMICOS E FSICOS, ESTRATGIAS DE
REPLICAO, QUADROS CLNICOS,
EPIDEMIOLOGIA...:

FAMLIAS

GNEROS

ESPCIES

SUB-ESPCIES, VARIANTES...
c.
Nucleico
Simetria Envelope Tamanho Tipo Ac.
nucleico
Famlia Virus Doena
Icosadrica Ausente 50nm f.d.circular Papovaviridae HPV verrugas
DNA Presente 100nm f.d.linear Herpesviridae HSV herpes
Complexa Presente 42nm f.d.circular Hepadnaviridae HBV hepatite B
Icosadrica Ausente 20nm f.simples Picornaviridae Poliovirus Polio
RNA 80nm f.dupla
segment.
Reoviridae Rotavirus diarria
infantil
Presente 60nm f.simples Togaviridae Rubola Rubola
Complexa Presente
40nm f.simples Flaviviridae Dengue Dengue
F.Amarela
100nm f.simples
diplide
Retroviridae HIV Aids
80x160 f.simples Rhabdoviridae Raiva Raiva
Helicoidal Presente 200nm f.simples Paramyxoviridae Sarampo Sarampo
100nm f.simples
segment.
Ortomyxoviridae Influenza Gripe
Classificao dos Vrus (ICTV)
Classificao dos Vrus (ICTV)
http://encarta.msn.com/
1. Adsoro
2. Penetrao
3. Desnudamento
4. Replicao
5. Maturao
6. Liberao
Fases da replicao viral:
Replicao viral

Unio do vrus ao receptor celular

Receptores: protenas, carboidratos ou lipdeos na
membrana celular

Suscetibilidade celular presena de receptor
1. Adsoro
Vrus no envelopado Vrus envelopado


Entrada do vrus na clula
Translocao: passagem direta da partcula viral atravs
da membrana celular

Endocitose mediada por receptor: vrus envelopados
vrus no envelopados

Fuso: somente para vrus envelopados
2. Penetrao
2. Penetrao

Endocitose mediada por receptor: vrus envelopados
www.rsc.org
Membrana da clula
forma uma vescula
ao redor do vrus
Vescula funde com
endosoma

vrus no endosoma
Fuso do envelope do
vrus com membrana
do endosoma
Aps adsoro
Nucleocapsdeo viral
no citoplasma
2. Penetrao

Endocitose mediada por receptor: vrus no envelopados
microbiologybytes.wordpress.com
Aps adsoro
Membrana da clula
forma uma vescula
ao redor do vrus
Vescula funde com
endosoma

vrus no endosoma
Desestruturao
do capsdeo viral
Genoma viral no
citoplasma
2. Penetrao


Fuso do envelope do vrus com a membrana celular: somente
para vrus envelopados
www.cat.cc.md.us/.../images/u2fig6a1a.jpg
pathmicro.med.sc.edu
Aps adsoro
Fuso direta do
envelope do vrus com
a membrana celular
Nucleocapsdeo viral
no citoplasma
3. Desnudamento ou Decapsidao

Refere-se a separao fsica das protenas do capsdeo e genoma
viral. Aps o desnudamento o genoma viral fica livre no citoplasma
ou ncleo da clula para o processo de replicao viral.
http://www-micro.msb.le.ac.uk/109/structure.html
4. Replicao
Formao de novas cpias do genoma viral

Sntese das protenas virais: enzimas associadas ao genoma
protenas de capsdeo
glicoprotenas de envelope
Adsoro
Penetrao
Decapsidao

Replicao

Sntese de prot

Montagem
Liberao
Vrus RNA
Adsoro
Penetrao
Decapsidao

Replicao
Sntese
de prot
Montagem
Liberao
Vrus DNA
citoplasma
ncleo
citoplasma
ncleo
4. Replicao
Genoma viral

Transcrio dos genes precoces RNAm early

Protenas fase precoce (early): protenas no estruturais
- param a sntese de cido nucleico e protenas celulares
- regulam a expresso do genoma viral
- enzimas requeridas para a replicao do genoma viral

Replicao do genoma

Transcrio dos genes tardios RNAm late

Protenas fase tardia (late) protenas estruturais
4. Replicao
Vrus com genoma RNA simples fita (RNA ss) polaridade positiva (+)
Atuar como RNAm traduo sntese de protenas
Atuar como molde para sntese de uma fita complementar negativa (RNA -)*
molde para sntese de uma fita complementar positiva RNA (+) genmico
RNA (+) RNA (-) RNA (+) genoma viral
* Intermedirio replicativo
4. Replicao
Vrus com genoma RNA simples fita (RNA ss) polaridade negativa (-):
transcriptase (RNA pol RNA dep) associada ao genoma
RNA (+)
Sntese do RNA (+)
Atuar como RNAm traduo em protenas
Atuar como molde para sntese da fita
complementar RNA (-) RNA genmico
RNA (-)
4. Replicao
Vrus com genoma RNA dupla fita (RNA ds)
transcriptase (RNA pol RNA dep) associada fita negativa (-)
RNA (+)
Sntese do RNA (+)
Atuar como RNAm traduo em protenas
Atuar como molde para sntese da fita
complementar RNA genmico
RNA (-)
RNA (+)
(-)
(+)
Atuar como RNAm
T
T
T
Expresso da fita (-)
traduo protenas
4. Replicao
Vrus com genoma RNA simples fita (RNA ss) polaridade positiva (+):
transcriptase reversa (DNA pol RNA dep) associada ao genoma
transcriptase reversa : sntese de DNA dupla fita a partir do RNA genmico
DNA dupla fita integra ao genoma celular formando o provirus
Expresso do provirus formao de novas cpias de RNA(+) genmico
sntese das protenas virais
provirus
DNA ds
RNA (+)
4. Replicao
Vrus com genoma DNA simples fita (DNA ss)
transcrio traduo
DNA ds*
Formao de fitas
DNA (+)
e
DNA (-)
genoma viral
RNAm
protenas virais
DNA ss
*intermedirio replicativo
4. Replicao
Vrus com genoma DNA dupla fita (DNA ds)
RNAm
transcrio traduo
DNA ds
duplicao semi-conservativa
novas cpias de DNA ds
RNAm protenas virais
4. Replicao:

De acordo com o tipo de cido nuclico os vrus utilizam
diferentes estratgias para assegurar a replicao do genoma e a
sntese de protenas virais, confome o esquema abaixo:

DNA sf
DNA df
RNAm
RNA +
RNA + RNA -
RNA df
Parvovrus
Adenovirus
Herpesvrus
Poxvrus
Picornavrus
Coronavrus
Flavivrus
Rotavrus
Paramixovrus
Rabdovrus
Ortomixovrus
Retrovrus
=
5. Maturao ou Montagem
Protenas estruturais se associam espontaneamente
capsmeros capsdeo viral onde o cido nucleico inserido
6. Liberao
Vrus no envelopados: Lise da clula

Vrus envelopados: Brotamento envelope da membrana celular
Exocitose envelope de membranas internas
6. Liberao de vrus envelopados: Brotamento
Vrus adquire o
envelope da
membrana
celular com as
glicoprotenas
virais inseridas
Sntese das protenas
no glicosiladas
ribosomas livres no
citoplasma
Sntese das glicoprotenas
ribosomas associados ao RER
Transporte das
glicoprotenas para a
membrana Golgi
Protenas se
associam ao
genoma viral
glicoprotenas
na membrana
6. Liberao de vrus envelopados: Exocitose
Vrus adquire envelope de
membranas intermas:
Complexo de Golgi
Vrus transportado
pelo citoplasma
atravs de vescula
Vescula contendo vrus se funde
com a membrana da clula
vrus liberado para o meio
extracelular Exocitose