FERMENTACIN MICROBIANA

La fermentacin microbiana es el uso de microorganismos para generar un producto

de consumo humano o utilidad veterinaria, ya sea alterado genticamente o no. Entre
los productos generados se encuentran: bebidas alcohlicas, enzimas, comidas y
aditivos de comida, vitaminas, vacunas, antibiticos, etc.
Anteriormente las bacterias haban sido utilizadas para la produccion de vino y
antibioticos,cosa que no se ha dejado de hacer. La utilizacin de la biotecnologa en la
fermentacin microbiana empez en el 1973 con el gen del African clawed toad que
fue insertado en el laboratorio en la bacteria de Escerichia coli; este fue el primer
experimento de ingenieria genetica y con esto comenzo la era de la tecnologia de DNA
recombinante. El primer medicamento generado mediante la utilizacion de estas dos
tecnicas (fermentacion microbiana y DNA recombinante) fue una forma de insulina.
La fermentacin microbiana es el mtodo mas aplicado en la biotecnologa. La ventaja
de la fermentacin microbiana es que al utilizar bacterias y levaduras estas crecen
rpidamente en un medio a bajo costo, ofrecen una alta expresin de los niveles de la
protena que deseamos obtener, de las cuales ellos a veces secretan en el medio y
esto hace mas fcil la purificacin. Tambin estos microorganismos pueden resistir
fuertes tratamientos comparados con las clulas animales. Sin embargo, existen
ciertas limitaciones en la utilizacion de bacterias y hongos para procesos industriales
ya que no llevan a cabo procesos post-translacionales como lo es la glicosilacion
(bacterias) y muchas veces estos organismos liberan proteasas junto con la proteina
de interes, tambien puede haber presencia de endotoxinas en el caso de las bacterias
y muchas veces las bacterias forman cuerpos de inclusion lo que dificulta la tarea de
recolectar el producto.
Entre los principales microorganismos utilizados se encuentran: E. coli y B. subtilis. E.
coli es el organismo ms comn como fuente de produccin de protena recombinante
ya que se conoce su mapa gentico. B. subtilis ha sido utilizado principalmente por su
gran tendencia de secretar protenas en su ambiente. La fermentacin de bacterias y
hongos ofrecen la opcin ms econmica y algunos criterios la convierten en la
respuesta mas obvia.
Produccin microbiana industrial: Fermentacin
Las tcnicas de ingeniera gentica sin duda permitirn avances espectaculares en la
eficiencia y rendimiento en la produccin de los ms variados productos microbianos.
Sin embargo, es necesario recalcar que estos microorganismos, naturales o
manipulados genticamente, deben colocarse en un ambiente favorable tanto para su
crecimiento como para la ptima expresin del producto buscado a fin de poder
producirlo a nivel industrial. En efecto, el crecimiento microbiano depende tanto del
genotipo como del medio ambiente en que ste se desarrolla. Este ambiente
controlado y propicio al crecimiento microbiano se logra, ya sea en el laboratorio o en
la industria, gracias a un instrumento especial, llamado fermentador (figura 1).
En los ltimos aos se han logrado avances significativos en el diseo de los
fermentadores as como en el grado de control que se ejerce durante el proceso de
fermentacin. El fermentador no es ms que un instrumento que permite al operador
controlar el estado del medio de cultivo, el cual determina el crecimiento y produccin
de un microorganismo. De ah que este artculo tratar, en primer trmino, sobre
algunas caractersticas fisiolgicas generales de los microorganismos que deben ser
consideradas durante la fermentacin. Luego nos referiremos a los nutrientes
necesarios para sostener el crecimiento y, finalmente, a los medios tecnolgicos para
lograr la ptimainteraccin entre nutrientes y microorganismos, con el fin de obtener el
metablico deseado con la mxima eficiencia.


Requerimientos fisiolgicos del crecimiento microbiano

Para su crecimiento, los microorganismos utilizados en los procesos tecnolgicos,
requieren estrictas condiciones del medio ambiente, tales como:

Medio acuoso.Todas las reacciones biolgicas se realizan en presencia de agua.
Esta ltima es por lo general el principal componente del medio de cultivo. Incluso
aquellos microorganismos que crecen en un medio slido como granos de cereales,
pajas a heno, necesitan que estos sustratos estn humedecidos para poder
colonizarlos.

Temperatura de crecimiento. Las temperaturas entre las cuales se puede desarrollar
una clula microbiana vara entre 10 y 600C. Segn el rango de temperatura en el cual
el crecimiento es posible podemos distinguir microorganismos sicrfilos (4-25 0C),
mesfilos (30-40 0C) y termfilos (40-65 0C y ms).

La temperatura del medio de cultivo dentro de un fermentador es medida en forma
continua gracias a una termocupla inmersa en l. Esta ltima est conectada a un
sistema de calentamiento-enfriamiento del fermentador, el cual permite mantener la
temperatura constante durante toda la operacin.

Acidez. El pH de crecimiento de los microorganismos vara entre 3.0 y 8.0. En forma
general, las bacterias crecen a pH cercanos a la neutralidad (pH 7.0), con la
importante excepcin de las bacterias lcticas que resisten pH cidos. Por el contrario,
la mayora de los hongos filamentosos y levaduras prefieren pH cidos, de alrededor
de 5.0. Esta cido-tolerancia otorga una ventaja importante a las fermentaciones con
hongos, ya que el riesgo de contaminacin bacteriana es bajo.

Durante la fermentacin, hay produccin o consumo de cido en el medio segn el
microorganismo, lo cual produce una variacin del pH. Este ltimo es detectado
gracias a un electrodo inmerso en el medio. Este electrodo acciona dos bombas (una
con cido y otra con lcali) que equilibran constantemente este parmetro.

Presin parcial de oxgeno. Se distinguen dos tipos de microorganismos en funcin
de su requerimiento en oxgeno: Los microorganismos aerobios, para los cuales la
disponibilidad del oxgeno es indispensable; y los microorganismos anaerobios, para
los cuales el oxgeno es txico. Existen, por ltimo, algunos microorganismos capaces
de adaptar su metabolismo a las condiciones de oxigenacin imperantes en el medio y
que son por lo tanto aerobios facultativos (ste es el caso de Escherichia coli y
Saccharomyces cerevisae, entre otros).

La fermentacin aerobia es hasta hoy la ms utilizada ya que el crecimiento es mucho
ms rpido en aerobiosis que en anaerobiosis. Sin embargo, los microorganismos
anaerobios son capaces de sintetizar una serie de compuestos nicos (metano, etanol,
solventes, etc), lo que ha provocado un nuevo inters en su cultivo y estudio, en
particular para la industria qumica. Por otra parte es necesario mencionar dos
limitantes que presentan las fermentaciones aerobias:

a) Muy baja solubilidad del oxgeno en el agua, lo que hace necesario airear y agitar
fuertemente el medio de cultivo.

b) Produccin elevada de calor que debe ser constantemente removida a fin de
mantener estable la temperatura.

Las concentraciones de oxgeno y CO
2
disueltos en el medio son controladas por
sondas de O
2
y CO
2
, respectivamente.

Nutrientes requeridos para el crecimiento de microorganismos

En primer lugar, el microorganismo requerir de una fuente de carbono de la cual
extraer la energa necesaria para su metabolismo. Las fuentes de carbono ms
comunes son los hidratos de carbono, tales como almidn y azcares.

Durante los aos sesenta, algunos hidrocarburos derivados del petrleo fueron
intensamente estudiados como fuentes de carbono de bajo costo. Esta situacin
cambi radicalmente en la dcada del 70, debido al alza del precio del petrleo y hoy
en da, por el contrario, se investiga la conversin biolgica de hidratos de carbono en
combustibles. En la bsqueda de nuevas fuentes de carbono, se est estudiando,
desde hace poco, la utilizacin de recursos lignocelulsicos (pajas de cereales,
rboles y sus residuos, etc.), principal fuente de biomasa renovable (captulo 4).

Muchas de estas fuentes de carbono requieren un pretratamiento previo a su
utilizacin; es el caso, por ejemplo, del almidn que debe ser cocido e hidrolizado
hasta glucosa antes de ser trasformado en etanol por los microorganismos que
realizan esta transformacin. Es tambin el caso de la celulosa y de los substratos
lignocelulsicos en general, los cuales necesitan drsticos tratamientos fsicos y/o
qumicos antes de ser utilizables con este fin.

Otros nutrientes que son necesarios en cantidades importantes para el crecimiento
microbiano son el nitrgeno, el fsforo y el azufre. Estos elementos son incorporados
en las molculas estructurales y funcionales de la clula. El nitrgeno, en particular,
debe ser provisto en proporciones variables bajo la forma de nitrgeno proteico
obtenido a partir de subproductos de la industria del maz, extracto de levadura u
otros, y no proteico (sales de amonio, urea, etc.). Los otros dos elementos son
entregados como sales de fosfato y sulfato, respectivamente.

Por ltimo, una serie de micronutrientes (vitaminas, hierro, cobalto, cobre, zinc, etc.),
deben ser suministrados al medio.

La determinacin de varios de estos nutrientes en forma continua durante la
fermentacin permitir en un futuro prximo espectaculares avances en el control de
los procesos. Esto ha sido posible gracias al reciente desarrollo de sensores o
electrodos biolgicos (enzimticos y microbianos). Esta tecnologa, novedosa y
especfica, promete un gran desarrollo en un futuro prximo, ya que tiene grandes
ventajas en materia de anlisis, tales como respuesta rpida, aplicacin en muestras
coloreadas, uso repetido de los biocatalizadores, etc. El principal problema para su
puesta en operacin es la dificultad de esterilizar el biosensor sin inactivarlo.


Tipos de fermentadores

Un fermentador es un recipiente de vidrio o acero inoxidable si el uso es farmacutico,
o de material menos noble, como acero al carbono, en el caso de aplicaciones menos
exigentes en pureza. Por lo general, el reservorio tiene una altura 2.5 a 4 veces
superior a su dimetro, y en funcin de la aplicacin, su volumen vara entre 1000-10
000 lt en el caso de un producto farmacutico, a 1500000 lt, y ms en el caso de la
produccin de microorganismos como fuente de protena animal.

El diseo de un fermentador, aparte de asegurar que la operacin s desempee en
forma asptica, debe responder a tres requisitos principales: Mezcla adecuada, buena
trasferencia del oxgeno del aire al microorganismo y remocin del calor. Este ltimo
imperativo explica que, a pesar de las bajas temperaturas a que operan los procesos
biolgicos con respecto a la catlisis qumica; sea necesario considerar superficies
importantes de intercambio trmico dentro del fermentador para mantener la
temperatura de crecimiento. Esto explica tambin en parte el inters que presentan los
microorganismos termfilos, capaces de trabajar a temperaturas ms elevadas que
otros microorganismos, lo cual reduce por una parte los problemas de remocin de
calor durante la fermentacin y, por otra parte, los riesgos de contaminacin por los
microorganismos mesfilos.

En forma general existen tres tipos principales de fermentadores para cultivos
aerbicos (figuras 1 y 2):

1) Estanques aireados agitados. Estos son los ms tradicionales y tuvieron un gran
desarrollo durante los aos 50 y se usan para la produccin de antibiticos como la
penicilina a escala industrial. El diseo implementado en aquella poca se ha
mantenido hasta hoy, a pesar que se han efectuado varias modificaciones
importantes, en particular en el sistema de agitacin.

El fermentador agitado consiste en un cilindro vertical que posee varios deflectores
para prevenir la formacin de un torbellino durante la agitacin. El aire estril penetra
por la base del reservorio, a travs de un distribuidor circular. El eje vertical lleva una o
varias hlices en funcin de la relacin altura/dimetro. En los ltimos veinte aos,
varias compaas han modificado los agitadores de sus fermentadores, con el fin de
disminuir los gastos en energa de agitacin.

A pesar de que este modelo de fermentador no es el ms econmico de instalar ni de
operar, sigue siendo el ms corrientemente utilizado desde los ltimos treinta aos. La
razn de su xito reside en su gran versatilidad para ser usado a cualquier escala de
produccin y para un gran nmero de procesos sin modificaciones del diseo. Por lo
tanto, los costos relativamente elevados de inversin y operacin se encuentran
compensados por su flexibilidad.

2) Reactores tubulares (Air-1ift). Se trata de un reactor en forma de torre o columna,
en el cual el aire es introducido en la base del tubo, y la ascensin de las burbujas de
aire constituye el nico tipo de agitacin existente.

A pesar de que el modelo agitado permite concentraciones superiores de biomasa, el
fermentador tubular, por su simplicidad y costos inferiores de energa, mantencin e
instalacin, es preferido en algunos procesos al anterior. Estos fermentadores son
utilizados en la produccin de cerveza, vinagre y cido ctrico.

3)< Estanques a recirculacin. Todos los fermentadores de este tipo tienen en
comn el flujo del medio de cultivo en una direccin definida. Esto se ha logrado
gracias a la incorporacin de tubos de aspiracin en el diseo, lo cual permite una
recirculacin interna del fluido, o por el uso de un conducto de recirculacin, el que
permite una recirculacin externa.

La fuerza motora se desarrolla por el efecto de ascensin de las burbujas de aire (air
lift) o por un sistema de flujo hidrodinmico. Existe gran polmica sobre las virtudes de
este tipo de sistema, el cual para muchos, es tan eficiente a ms que el tanque agitado
con respecto a la trasferencia de masa, y con una economa sustancial de energa.

Este sistema es usado, por ejemplo, por la compaa ICI (Imperial Chemical
Industries), de Inglaterra, para producir protena unicelular (ver captulo 4) en un
fermentador de 1.500.000 lt. Este tipo de fermentadores ha producido un inters
creciente por la reduccin en los costos de produccin. Sin embargo, no se conocen
bien an los problemas en la sntesis de un producto que pueden derivar de las
fluctuaciones ambientales a las que es sometido un microorganismo en este tipo de
fermentadores por la falta de agitacin. Por lo tanto, el desarrollo de la investigacin en
este sentido es indispensable.


Etapas para la obtencin de un producto microbiano

La secuencia de etapas envueltas en la obtencin de un producto o de clulas enteras,
por fermentacin, son las siguientes:

a) Produccin del biocatalizador (clula o enzima) o starter. EL costo de los
catalizadores que hay que agregar puede ser elevado, en particular cuando se trata de
enzimas purificadas. En efecto, en este ltimo caso, el costo de muchas de ellas es tal,
que el proceso solo es econmico si stas pueden ser utilizadas varias veces. Por lo
tanto, durante los ltimos das se han realizado grandes esfuerzos por recuperar la
mayor cantidad de catalizador de cada ciclo.

Una forma de realizar este objetivo es reciclar las clulas microbianas a las enzimas.
Esto resulta muy difcil de operar con las enzimas y provoca a menudo lesiones en las
clulas y contaminacin con organismos forneos del reactor.

Otra manera de reducir las prdidas del catalizador, es mantenindolo dentro del
fermentador, inmovilizado. Esto se logra gracias a la transformacin de la enzima
soluble o de la clula microbiana, en una nueva forma de catalizador, una forma fija
sobre un soporte slido (figura 3).

El primer mtodo de inmovilizacin que fue desarrollado y el ms simple, es la
adsorcin: Las enzimas o clulas se adhieren por atraccin fsica a la superficie de un
material inerte como celulosa, carbn, arcilla, entre otros. Una unin ms estrecha y
estable puede resultar de la formacin de un enlace qumico, covalente, entre el
catalizador y el soporte. Este ltimo puede ser de celulosa, perlas de vidrio, plsticos o
polmeros sintticos. En estos dos tipos de inmovilizacin, el soporte se encuentra bajo
la forma de partculas de pequeo tamao lo que permite una gran superficie de
contacto entre el sustrato y el catalizador. Un tercer tipo de inmovilizacin consiste en
atrapar el catalizador en una matriz formada por un polmero como almidn, slica u
otros. Otro tipo de atrapamiento es la microencapsulacin. Esta consiste en encerrar el
biocatalizador en una cpsula de un dimetro muy pequeo, del orden de los 100
micrones. La cpsula funciona como una membrana semi-permeable: deja pasar las
pequeas molculas de sustrato y producto libremente, pero retiene las ms grandes
(enzimas o clulas).

Estos biocatalizadores inmovilizados, pueden tener varias formas (cilindros, hojas,
partculas, etc.) y han sido utilizados en todo tipo de reactores.

Las potencialidades de la inmovilizacin de enzimas y en particular de clulas enteras
son considerables, ya que se ha demostrado que no slo se puede reutilizar el
biocatalizador, sino que, muchas veces, los rendimientos y la vida media de ste
aumentan en forma significativa. Sin embargo, muchos problemas debern ser
resueltos, como la eleccin del mejor soporte, asegurar un control adecuada del pH,
suplementar adecuadamente con oxgeno en los casos que sea necesario, etc., para
asegurar el ptimo funcionamiento de estos biocatalizadores.

b) Preparacin del medio de cultivo (pretratamiento de la materia prima, adicin de
nutrientes, ajuste de pH).

c) Esterilizacin del medio de cultivo. Para evitar la contaminacin del medio por
microorganismos indeseables, es necesario esterilizarlo y mantener condiciones
aspticas durante la fermentacin (aireacin estril, adicin de nutrientes estriles,
etc.). Esto se debe a que la mayora de los productas biolgicos obtenidos hasta hoy
son producidos en cultivo puro, es decir, por un solo microorganismo. La
contaminacin de este cultivo por otros microorganismos puede resultar en la
destruccin del catalizador, en su inhibicin o en la destruccin del producto. Por
ltimo, pueden introducirse sustancias txicas difciles de separar del producto que
nos interesa (como en el caso de un antibitico, por ejemplo).

d) Sntesis del producto. En funcin del producto y del catalizador empleado se
determina la modalidad de funcionamiento del fermentador: Contina a discontinua.

En los procesos discontinuos o tipo batch, el aporte de nutrientes es nico, el tiempo
de fermentacin es limitado y el producto es recuperado ntegramente al final de la
fermentacin por vaciado de la cuba del fermentador. Este mtodo es actualmente el
ms utilizado para los productos que necesitan condiciones de esterilidad muy
estrictas.

En los procesos continuos, en cambio, el aporte de nutrientes es renovado
regularmente y el producto es removido al mismo tiempo. Este tipo de procesos
presenta varias ventajas con respecto a los procesos discontinuos. As, por ejemplo,
los volmenes de produccin por unidad instalada son muy superiores en un sistema
continuo. Por otra parte, el catalizador no es eliminado en este tipo de proceso, lo cual
permite economas sustanciales, ya que se considera que el precio del biocatalizador
es, por lo menos, igual al de los nutrientes empleados en su crecimiento. Por ltimo y
sobre todo, este tipo de cultivo abierto permite una versatilidad inherente de operacin,
en el cual todos los parmetros (concentracin microbiana velocidad de crecimiento,
concentracin de sustratos y productos) pueden ser controlados indefinidamente.

Existen dos tipos principales de fermentadores continuos: El quemostato, en el cual el
crecimiento est controlado por uno o ms sustratos que son limitantes, y el
turbidostato, que opera a tasas mximas de crecimiento, gracias al ajuste del flujo de
nutrientes a una velocidad tal que el crecimiento no se encuentre en ningn momento
limitado por ningn sustrato.

La mxima velocidad de crecimiento de un microorganismo es el resultado de las
caractersticas inherentes de ste, ms que la consecuencia de la disponibilidad de
nutrientes. En las mejores condiciones, el crecimiento es exponencial. Una
disminucin en la velocidad de crecimiento puede operarse limitando la disponibilidad
de cualquier nutriente esencial. En esta nueva situacin el crecimiento se encuentra
desequilibrado y los nutrientes divergen hacia otras rutas metablicas que no son
aparentemente indispensables para el crecimiento. Aquellos metabolitos que son
producidos cuando el microorganismo se encuentra en fase exponencial de
crecimiento, se llaman primarios (cido ctrico, aminocidos, alcoholes, etc.), por
oposicin a los metabolitos secundarios (vitaminas, antibiticos, etc.), los cuales son
sintetizados en condiciones de crecimiento sub-ptimas. El tipo de metabolito
secundario que ser sintetizado depender del microorganismo involucrado y del
nutriente limitante en el medio de cultivo (carbono, nitrgeno, fsforo, azufre, etc.).

Segn el tipo de metabolito requerido, la estrategia de fermentacin a seguir deber
en primer lugar tomar en cuenta en qu momento del crecimiento ste se expresa. As,
por ejemplo, en el caso de un metabolito secundario, muchas veces convendr utilizar
un sistema doble de fermentacin. En el primer recipiente, Se har crecer el
microorganismo en condiciones ptimas a fin de obtener el mximo de biomasa
microbiana. Luego, esta biomasa se trasladar al segundo recipiente donde la
limitacin de un nutriente particular permitir la sntesis del metabolito. Este sistema
permite tambin el ptimo aprovechamiento de la materia prima utilizada, la cual sera
de otra manera en gran parte desperdiciada.

e) Separacin del medio y del catalizador. El producto puede encontrarse dentro de
la clula (producto intracelular), como en el caso de la vitamina B12 o la enzima
glucosa isomerasa, por ejemplo; tambin es la situacin de los productos obtenidos
por transformacin gentica en Escherichia coli.. O bien puede ser liberado al medio
de cultivo (extracelular), como es el caso de la penicilina, amilasa, aminocidos y
otros.

f) Purificacin del producto. Si el producto es extracelular, es decir, es excretado al
medio por la bacteria, se encontrar relativamente puro, pero diluido en un gran
volumen de agua. Si es intracelular (no excretado al medio) estar mezclado con todos
los constituyentes celulares y habr que separarlo de ellos.

En el caso de E. coli, por ejemplo, los productos son intracelulares. En primer trmino
hay que concentrar las bacterias, lo que se logra por filtracin o centrifugacin.

Para obtener el producto, hay que romper las bacterias, quedando ste mezclado con
todos los constituyentes celulares. Para separarlo se utilizan diversos mtodos, tales
como precipitacin con sales o alcohol y/o tcnicas cromatogrficas, (que separan las
molculas de acuerdo a tamao, carga elctrica o por su afinidad por algn reactivo
qumico).

En cada caso, hay que adaptar las diversas alterativas de purificacin y extraccin.
Dentro de estos procesos, especialmente para los productos de alto valor comercial,
los anticuerpos monoclonales estn comenzando a ser de gran utilidad (ver captulo
12). Ella se debe a su tremenda especificidad y sensibilidad. Sin embargo,
paradojalmente, esta ltima propiedad trae problemas en el caso de productos lbiles,
ya que la separacin final del complejo antgeno-anticuerpo es difcil de romper y
requiere de tratamientos drsticos y muchas veces denaturantes.


Fermentacin con microorganismos recombinantes

Las tcnicas de recombinacin de DNA, estn permitiendo lograr microorganismos
que produzcan las sustancias que se desean, de acuerdo a como hayan sido
programadas. El cultivar estas bacterias modificadas en reactores industriales agregan
problemas que es necesario considerar. El DNA que se les introduce es extrao a
ellas. Al crecer y multiplicarse la bacteria, tiende a eliminar el plasmidio, volviendo as
a su condicin natural.

Los reactores que deben usarse en estos casos tendrn que tener algunas
modificaciones para impedir esta inestabilidad del plasmidio. Cuando se preparan los
plasmidios para introducirlos en las bacterias, se agrega un trozo extra de DNA, lo que
permitir la expresin del gen deseado slo a altas temperaturas. Esto significa que el
reactor tiene que tener dos compartimentos: uno a baja temperatura, en que las
bacterias puedan crecer y desarrollarse ptimamente sin expresar el plasmidio.
Cuando se logra un nmero suficiente de bacterias, se pasan a un segundo reactor,
con mayor temperatura, y all se activa y transcribe el plasmidio.

El trabajar con microorganismos recombinantes, que son ms delicados, requiere
tambin de adaptaciones en los reactores. La mayor parte de las industrias de
fermentacin tienen, por ejemplo, agitadores convencionales y probablemente sea
conveniente modificarlos. De igual forma, el volumen de los fermentadores tendr que
ser menor, para permitir una mayor versatilidad.

Sin lugar a dudas, trabajar con microorganismos recombinantes, tiene muchos
problemas que an no han sido resueltos y que requieren de mayor investigacin. El
proceso de clonacin de un microorganismo, es relativamente sencillo, pero de all a la
produccin industrial en fermentadores, hay un largo camino que recorrer. La verdad
sea dicha que en esta etapa est uno de los mayores obstculos para el desarrollo de
la biotecnologa. Todava falta mucho que conocer acerca de la fisiologa de los
microorganismos y su respuesta cuando se introducen genes extraos.

Por ejemplo, la mayora de las protenas humanas son glicosiladas (contienen ligada a
la parte proteica, residuos de carbohidratos). No se sabe si esta glicosilacin es
importante para la actividad biolgica de la protena. La que s se sabe, es que ni E.
coli, ni ninguna otra bacteria puede hacer esta glicosilacin. Por eso ahora se buscan
otras alternativas, como levaduras u hongos filamentosos capaces de glicosilar las
protenas y que, adems, tienen la ventaja que pueden secretar al medio la protena
que producen.

En todo caso, las investigaciones siguen avanzando y se siguen produciendo
innovaciones, no todas divulgadas a causa del secreto industrial. Por ejemplo, Gene
Link, una compaa australiana, est estudiando el efecto de irradiar microorganismos
con pequeas dosis de rayos gama, con el fin de destruir el DNA de las bacterias,
dejando indemne el plasmidio. Este producira solamente la protena codificada por l.

En todo caso, los problemas que se han ido presentando, no parecen insalvables, y
nuevas investigaciones harn que el proceso productivo sea ms seguro, eficiente y
econmico.