Este documento presenta un manual de laboratorio para el curso de Química Biológica. Incluye información sobre seguridad en el laboratorio, normas, equipamiento, e instrucciones para realizar informes de laboratorio. Además, describe las prácticas de introducción a las técnicas de laboratorio y el análisis cualitativo con la llama, explicando el funcionamiento del mechero de Bunsen y la formación de las llamas.
Este documento presenta un manual de laboratorio para el curso de Química Biológica. Incluye información sobre seguridad en el laboratorio, normas, equipamiento, e instrucciones para realizar informes de laboratorio. Además, describe las prácticas de introducción a las técnicas de laboratorio y el análisis cualitativo con la llama, explicando el funcionamiento del mechero de Bunsen y la formación de las llamas.
Este documento presenta un manual de laboratorio para el curso de Química Biológica. Incluye información sobre seguridad en el laboratorio, normas, equipamiento, e instrucciones para realizar informes de laboratorio. Además, describe las prácticas de introducción a las técnicas de laboratorio y el análisis cualitativo con la llama, explicando el funcionamiento del mechero de Bunsen y la formación de las llamas.
ASIGNATURA: QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO
ELABORADO POR: HELDA DEL CASTILLO C. HELMER LEZAMA HUGO VILLANUEVA DANILO BARRETO JEAN PAUL MIRANDA ROXANA SIFUENTES V.
PRIMER AO I-SEMESTRE LIMA PERU 2005 USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 2
PRACTICA N 1
SEGURIDAD, NORMAS Y EQUIPAMIENTO DE LABORATORIO
1. EL LABORATORIO QUMICO
El laboratorio es el ambiente fsico donde los cientficos y los tcnicos obtienen datos experimentales que permitirn sustentar una investigacin.
OBJETIVOS GENERALES
El objeto de los ejercicios y experimentos en el laboratorio de Qumica Orgnica estriba en el aprendizaje de tcnicas y en adquirir una comprensin general de la forma en que reaccionan los compuestos.
Al trmino del curso, el alumno deber estar en condiciones de:
Realizar las operaciones y reacciones ms usuales en Qumica. Conocer las propiedades qumicas y fsicas de las diferentes funciones estudiadas en la Teora de la asignatura. Desarrollar su destreza manual mediante la realizacin de experimentos individuales y siguiendo las tcnicas adecuadas. Registrar sus observaciones en forma metdica, exacta y completa.
2. INSTRUCCIONES PARA EL TRABAJO EN EL LABORATORIO
- Leer muy cuidadosamente y con anticipacin las instrucciones que se dan en cada experimento. Antes de ir al laboratorio, el alumno debe saber bien lo que se va a hacer. - Efectuar solamente las experiencias sealadas o aprobadas por el profesor. Las experiencias no autorizadas estn prohibidas. - Llevarn un atuendo barato, una bata o un mandil de laboratorio, dado que es posible estropear el vestido en un accidente de laboratorio. - Leer las etiquetas antes de utilizar los reactivos qumicos. - Obtener las sustancias qumicas de los frascos de reactivos, en un vaso de precipitados o en un tubo de ensayos limpio, cuidando de no usar cantidades mayores que las necesarias. - Nunca regresar sustancia alguna no utilizada al frasco original ni emplear un reactivo, sin estar seguro que tal, es el requerido. - No abandonar aparatos funcionando sin vigilancia.
USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 3
3. SEGURIDAD EN EL LABORATORIO
- Todas las sustancias que se utilizan y las operaciones y reacciones que se realizan en Qumica Orgnica, son potencialmente peligrosas. - Al calentar o destilar lquidos voltiles o inflamables, como ter etlico, sulfuro de carbono, cloroformo, acetona, etc. se debe hacer siempre en bao de agua, aceite, arena o en parrillas elctricas con cubierta metlica y preferentemente en la campana de humos. - Por ningn motivo se dejarn disolvente voltiles cerca de flamas. - En el caso de inflamarse un lquido, procurar cubrir el recipiente con una luna de reloj, tela de asbesto, vaso de precipitados o con un matraz vaci; cerrar las llaves del gas, evitar la propagacin del fuego y CONSERVAR LA SERENIDAD. - Al usar BENCENO trabajar siempre en una vitrina bien ventilada. No respirar nunca los vapores de benceno y evitar cualquier situacin que provoque salpicaduras sobre la piel o los vestidos. Si salpicara benceno sobre el vestido, se lavar la salpicadura, se quitar la ropa y se lavar el cuerpo. Si se vertiera benceno sobre la mesa de laboratorio, se lavar la zona afectada con agua y si fuera posible, se confinar el vestido en la vitrina.
4. INFORMES DE LABORATORIO
La obtencin de datos confiables no es un fin en s mismo. La meta en el trabajo de laboratorio es comunicar los resultados y las ideas en forma tal que sean comprensibles y tiles para otros.
- Antes de ir al laboratorio, hacer un esquema mostrando el orden en que se adicionarn los reactivos y se efectuarn las operaciones. Por ejemplo:
cido sulfrico + Propanol + Bromuro de sodio Reflujar y Destilar lentamente Mezclar
- Registrar y anotar claramente los datos y observaciones realizadas durante el experimento y su discusin, si fuera necesario. - Usar una forma tabular, siempre que sea apropiada.
Indicar las unidades usadas en cada medicin, en lo posible expresadas en el Sistema Internacional.
CUESTIONARIO
1. Mencione el procedimiento de primeros auxilios en caso de quemaduras con cidos , lcalis y sustancias corrosivas. 2. Qu sustancias pueden ser cancergenas.
USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 4
PRCTICA N 2
INTRODUCCION A LAS TECNICAS DE LABORATORIO
1. INTRODUCCION
El xito del trabajo en el laboratorio y la seguridad del estudiante, depende del uso adecuado de los instrumentos disponibles. Es por ello importante una buena preparacin y entrenamiento prctico de las tcnicas de laboratorio.
2. OBJETIVOS
Reconocer materiales y equipos de laboratorio de uso comn. Hacer uso adecuado del instrumental de acuerdo a sus funciones. Aplicar las tcnicas fundamentales de separacin de mezclas.
3. MATERIALES Y REACTIVOS
1. Mechero de Bunsen 2. Materiales de vidrio 3. Soportes 4. Rejilla de asbesto 5. Balanza 6. Termmetro 7. Alambre de Nicromo 8. cido clorhdrico 6M
A. MECHERO DE BUNSEN: Fundamento. Es un mechero de uso comn en el laboratorio. Funciona con gas propano ( C 3 H 8 ) que al ser mezclado en proporciones adecuadas con oxgeno ( O 2 ) del aire, se quema generando energa calorfica y emitiendo luz ( llama ) .
Partes del mechero : (Figura. 1)
1. Base : en ella se encuentra un tubo lateral para el ingreso del gas. Este se conecta mediante una manguera de ltex, con la llave de suministro de gas.
2. Regulador de aire : es un anillo mvil que contiene aberturas y se emplea para graduar la llama. Cuando ingresa ms aire, la llama es ms efectiva. USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 5
3. Tubo : Se encuentra fijo en el extremo inferior y tiene aberturas por donde ingresa el aire.
Tipos de llama : (Figura 2)
Luminosa: Se produce cuando el aire que entra en el mechero es insuficiente (combustin Incompleta) . La descomposicin del gas produce pequeas partculas de carbn (holln) que se calienta a incandescencia dando luminosidad a la llama (amarilla).
No luminosa : La combustin es completa. El gas y el aire se combinan ntimamente, no se forman partculas slidas siendo el color de la llama azul . Se distinguen 3 zonas :
Cono fro : Formada por la mezcla de aire y gas sin quemar (a)
Cono medio : Donde se producen las reacciones iniciales, la combustin es incompleta . Se llama tambin zona reductora por la presencia de carbn y monxido de carbono (b)
Cono externo : La combustin es completa, la llama es menos luminosa y la temperatura ms elevada. El exceso de oxgeno del aire lo convierte en una zona oxidante (c)
(3)
(2)
(1) Figura 1 Llama oxidante; zona de fusin; puede alcanzar los 1500 C. Color azul oscuro transparente. ( c) Cono de reduccin; insuficiencia de oxgeno. (b)
Cono fro; azul claro bien visible, escasez de oxgeno; combustin incompleta. (a)
Figura 2 USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 6
Tcnica Operatoria
Funcionamiento del mechero :
- Verificar que la llave reguladora de aire esta cerrada. - Encender un fsforo y sostngalo sobre la boquilla, abrir con cuidado la llave de suministro de gas. Con el regulador de gas controlar el flujo de gas necesario. - Describir el tipo de llama. - Sostener una cpsula de porcelana sobre la llama y anotar lo observado - Girar el anillo regulador de aire hasta obtener la combustin total. - Repetir la prueba con la cpsula de porcelana - Sealar las diferencias observadas - Escribir las ecuaciones para cada caso
B.- ANALISIS CUALITATIVO CON LA LLAMA
Fundamento.
El tomo, al ser excitado por una fuente externa de energa, emite una luz caracterstica. La explicacin es que al excitarse un tomo, mediante una energa externa, los electrones de niveles de energa inferiores ascienden a niveles superiores. El estado de excitacin de un tomo es fugaz y los electrones as desplazados, vuelven nuevamente a sus niveles originales, a la vez que emiten energa en forma de ondas luminosas.
Los colores obtenidos con la llama del mechero de Bunsen son muy simples y fciles de distinguir, por lo que sirven para confirmar o reconocer un gran nmero de elementos, especialmente los alcalinos y los alcalino-trreos .
Tcnica Operatoria
Limpieza del alambre de Nicromo: - tomar el alambre de Nicromo y sumergir en la cpsula que contiene HCl 6M . - llevar a la llama en la parte incolora y observar si existe coloracin ( presencia de impurezas en el alambre ) - repetir la operacin hasta que el alambre no coloree la llama del mechero. - Luego proceder como se indica a continuacin:
Sodio : - colocar en el alambre limpio, un poco de la solucin de cloruro de sodio ( NaCl ) y llevar a la parte azul de la llama. USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 7 - Observar el color que se produce en la llama y anotar.
Potasio, Calcio , Estroncio y Bario : - con el alambre limpio, proceder en forma similar a la indicada en el ensayo de Sodio, con cada una de las muestras de Cloruros de Potasio, Calcio, Estroncio y Bario. - Observar el color producido en cada caso y anotar sus resultados.
C.- MEDICION DE LIQUIDOS Para la medicin de lquidos se emplean diversos equipos de laboratorio, de acuerdo a la precisin que se quiera obtener. Los ms usados son: vasos de precipitacin (beaker), probetas, buretas, matraces, fiolas y pipetas .
Lectura del menisco Al medir el nivel de un lquido, se debe determinar la porcin de la curva de la interfase Lquido-aire que se debe considerar. (Figura 3) Por convencin, esta porcin de curva es : - La parte baja del menisco si ste es cncavo - La parte superior del menisco si ste es convexo
Adems se debe observar la posicin correcta del observador, el cual debe ubicarse a la misma altura del menisco (Figura 4).
Figura 3 Figura 4 USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 8 Seleccin del material de medicin 1.- Para medir volmenes aproximados, cuya precisin vara entre 1- 2ml se puede emplear las probetas graduadas. Para una menor precisin, tambin son tiles los vasos de precipitacin (beaker) y los matraces (erlenmeyer) graduados.
2.- Para medir volmenes con mayor exactitud (+/- 0,01 ml) se emplean los materiales volumtricos o aforados, como las fiolas y pipetas (de una sola medida o volumen) as como las buretas y pipetas graduadas (con un rango de medicin). Los materiales aforados se caracterizan por medir un volumen determinado de lquido, el cual est sealado por una marca o seal de aforo en la parte estrecha superior del material de vidrio.
Las fiolas se emplean para la preparacin de soluciones, efectuar diluciones, y para medir volmenes fijos.
Las pipetas estn diseadas para verter un volumen determinado de un lquido. Se tienen de dos tipos: a) Graduadas o de medida : se encuentran calibradas y sealan pequeas fracciones del volumen total y pueden dar un volumen cualquiera hasta su mxima capacidad.
b) Volumtricas, aforadas o de transferencia : estn diseadas para medir nicamente un volumen especfico y son de alta precisin .
Las buretas estn diseadas para medir con precisin volmenes variables. Consta de tres partes: un cilindro calibrado, una llave reguladora de flujo y una extremidad angosta en la punta por la que fluye el lquido. Se emplean principalmente en las titulaciones y para medir con precisin.
Beaker Probeta Fiola Pipeta Bureta Figura 5. Materiales de medicin de lquidos USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 9 Modo de empleo ! Antes de emplear el material, verifique que est limpio y seco.
Vaso , matraz Erlenmeyer y probeta : Verter el lquido en el recipiente escogido y leer teniendo en cuenta el menisco que debe coincidir con la marca de graduacin segn la convencin indicada.
Fiola : Llenar el recipiente con la muestra hasta la seal de enrase ubicada en la parte estrecha o cuello. En el caso de preparacin de soluciones, tapar la fiola con la tapa y homogenizar el contenido antes de emplearlo.
Pipeta : Colocar la bombilla de succin cuando se trabaja con cidos concentrados o lquidos txicos. En caso contrario puede succionarse con la boca.
- Introducir el extremo inferior de la pipeta en la solucin a medir, succionar y enjuagar.
- Llenar la pipeta hasta aproximadamente 2 cm. por encima de la marca de enrase. Si succiona con la boca, retirarla y colocar de inmediato el dedo ndice sobre el extremo superior de la pipeta. Colocar en posicin vertical y verificar la ausencia de burbujas de aire en el interior.
- Disminuir la presin para vaciar el contenido. Mantener unos segundos en esta posicin. Si se descarga todo el volumen, no debe soplarse la pequea cantidad que queda en la punta, ya que est diseada para proporcionar con exactitud el volumen desplazado por accin de la gravedad.
Bureta: - Verificar que la llave de paso est lubricada.
- Enjuagar una vez con agua destilada y luego 2 veces con 10ml de la solucin que se va a usar.
- Llenar lentamente con la solucin para evitar las burbujas de aire. Dar unos pequeos golpes con los dedos para eliminar su presencia. Drenar rpidamente unos mililitros si las burbujas estn ubicadas debajo de la llave de paso.
- Ajustar el nivel del menisco hasta la marca cero.
- Tomar el volumen necesario controlando el flujo de salida con la llave reguladora.
USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 10 D.- TECNICAS DE SEPARACIN
Fundamento Se conoce como mezcla a aquella materia compuesta por dos o ms sustancias unidas fsicamente, es decir que cada componente conserva su identidad y propiedades fundamentales.
Para separar o purificar los componentes de la mezcla, se conocen diversas tcnicas, cuya eleccin depender de las caractersticas de la muestra, disponibilidad de materiales y reactivos, grado de pureza del producto final, factores econmicos entre otros.
Entre las tcnicas ms empleadas se tienen : la decantacin, filtracin, destilacin y extraccin.
1. Decantacin .- Se emplea para separar slidos de lquidos o lquidos inmiscibles que conforman una mezcla. Si la naturaleza de la muestra lo permite, se deja en reposo para que las partculas slidas sedimenten por la accin de la gravedad. En caso contrario, se procede a decantar, inclinando el recipiente y dejando verter el lquido a otro recipiente (Figura 6).
2. Filtracin.- Procedimiento para separar slidos de lquidos. Se emplea un medio filtrante de superficie porosa, que retiene el precipitado mientras que el lquido pasa a travs de l. El lquido que pasa recibe el nombre de filtrado y los slidos retenidos se conocen como residuo o precipitado. Hay dos formas de filtracin : por gravedad y por succin o al vaco (Figura 7).
a. Filtracin por gravedad : Comnmente se emplea el embudo de vstago largo y papel de filtro, cuyas dimensiones dependen del volumen del precipitado (tamao del embudo) y del tamao de las partculas (porosidad del papel de filtro)
Figura 6 USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 11 b. Filtracin por succin o al vaco : En ella se acelera la separacin mediante el uso de un matraz, llamado kitazato, y la aplicacin de succin. Como medio filtrante se emplea los crisoles filtrantes de vidrio, de porcelana o de Gooch y los embudos de Buchner y Hirsh (cuando los precipitados son voluminosos y gelatinosos). A excepcin del crisol de vidrio, se coloca un disco de papel de filtro o una capa filtrante de lana de vidrio o fibra de asbesto sobre el fondo perforado para poder efectuar la filtracin.
3. Destilacin .- Mtodo de separacin de los componentes de una solucin basndose en sus presiones de vapor relativas. Consiste en la conversin de un lquido a vapor mediante la ebullicin (vaporizacin) y el enfriamiento de ste para retornar al estado lquido (condensacin). El lquido que posee menor temperatura de ebullicin se evapora primero y se separa de la mezcla.
Destilacin Simple : Para separar un lquido voltil de impurezas no voltiles. Ejemplo: el agua potable que contiene sales disueltas en ella (Figura 7)
Figura 7 Entrada agua Salida agua Figura 8 Termmetro Refrigerante USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 12 4. Extraccin .- Es una operacin que tiene como objeto separar una sustancia del material slido o lquido que lo contiene, con el fin de purificarla mediante el uso de un solvente inmiscible con el material en el que se encuentra la sustancia que se quiere aislar.
Los solventes ms comunes son agua, ter etlico, ter de petrleo, etanol, benceno.
Por extraccin se aslan y purifican numerosos productos naturales como: vitaminas, alcaloides, grasas, hormonas, colorantes, etc.
Los tipos de extraccin pueden ser :
a) Extraccin lquido slido : Cuando la muestra a extraer se encuentra al estado slido (Figura 9) b) Extraccin lquido-lquido.- Cuando la muestra a extraer es una solucin o una suspensin (Figura 10)
5. RESULTADOS
1.- MECHERO DE BUNSEN : Anotar si hay alguna diferencia al exponer la cpsula de porcelana a la llama luminosa y a la no luminosa: Dibujar los tipos de llama. _______________________________________________________________
Figura 9 Figura 10. Extraccin Lquido Lquido. Pera de Decantacin USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 13
2.- COLORACION A LA LLAMA:
Muestra color a la llama NaCl KCl CaCl 2
BaCl 2
SrCl 2
6. CUESTIONARIO
1.-Escribir las ecuaciones correspondientes a la combustin completa e incompleta del propano (C 3 H 8 ).
2.- Qu diferencia(s) podra encontrar al efectuar la medicin del volumen de un lquido, si el observador se ubica : a ) por encima b ) por debajo , del nivel del menisco 3.- Qu es la centrfuga y cul es su utilidad 4.- Explicar en qu propiedades se fundamentan cada una de las tcnicas de separacin observadas. Dar ejemplos de su aplicacin.
USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 14 PRCTICA N 3
SISTEMA PERIODICO : REACCIONES QUMICAS
1. OBJETIVOS
Analizar algunas propiedades peridicas, a partir de sustancias elementales.
Reconocer e identificar las sustancias alcalinas, alcalino trreos y halogenuros.
2. FUNDAMENTO
Todos los tomos de la tabla peridica estn descritos por su estructura electrnica de acuerdo a la teora cuntica moderna. As si el ltimo electrn de un determinado elemento, ubicado en el orbital s, pertenece al grupo de los metales. Si lo es en un orbital p pertenece a los no metales .El orbital d distingue a los metales de transicin. Finalmente los elementos cuyo ultimo electrn esta en el orbital f corresponden a las tierras raras.
Es de sumo inters saber que todos los elementos que tienen su ltimo electrn con los tres nmeros cunticos iguales gozan de propiedades fsicas y qumicas parecidas. Esto es, pertenecen a una misma familia solo se diferencian por el primer numero cuntico n, es decir su tamao. Toda propiedad fsica y qumica asociada a su estructura externa o electrnica de los tomos muestra periodicidad.
3. MATERIALES
-12 tubos de ensayo -1 esptula de vidrio -1 gradilla -2 goteros -3 vasos 250 mL -1 luna de reloj
REACTIVOS
- Solucin 0.1 M de NaF. - Solucin 0.1 M de NaCl. - Solucin 0.1 M de NaBr. - Solucin 0.1 M de NaI. - Cloroformo - Sol. AgNO 3 0,1 M - Sol NH 3 0,1 M - Sales de NaF, NaCl, NaBr, NaI USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 15 - Sol. Acuosas de Cl 2 , Br 2 , I 2
- Alcohol 95 - cido sulfrico conc. - Papel tornasol azul - Sol. de fenolftaleina - Sol. Ac. sulfrico 2 M - Sol. cido fosfrico 0,1 M - Litio - Sodio - Potasio - Sol. 0,1 M de MgCl 2 , CaCl 2 y SrCl 2
- Cobre - Magnesio - Zinc - Sol. CuCl 2 1M
4. PROCEDIMIENTO
FAMILIA DE LOS HALOGENOS
Coloque en 4 tubos de ensayo 10 gotas de soluciones de NaF, NaCl, NaBr y NaI. Adicinele 3 gotas de solucin de AgNO 3 . Agite y espere a que sedimenten los precipitados formados. En los tubos de la experiencia anterior elimine el liquido sobrenadante usando un gotero. Adicione 20 gotas de amoniaco. En otros 4 tubos tome cantidades iguales de sales slidas. Adicineles 20 gotas de H 2 SO 4 concentrado. Acerque a la boca de los tubos el papel tornasol azul humedecido con agua destilada. Anote el cambio de color del papel tornasol. Repita la experiencia con NaI usando H 3 PO 4 en lugar de H 2 SO 4 . En 3 tubos de ensayo agregue 10 gotas de agua de cloro, bromo y yodo. Aada 2ml de cloroformo a cada tubo y agite. En dos tubos ponga 10 gotas de soluciones de NaBr, NaI separadamente. Aada 20 gotas de agua de cloro en ambos tubos y agite Luego aada 20 gotas de cloroformo a cada tubo y agite. Anote el color de la capa inferior. En dos tubos coloque 10 gotas de soluciones de NaBr y NaI separadamente. Al primero aada agua de yodo y al segundo agua de bromo, y agite. Luego aada 20 gotas de cloroformo a cada tubo y agite. Anote el color de la capa inferior.
FAMILIA DE LOS METALES ALCALINOS
Deje caer en un vaso 100 ml de agua, un trozo de litio. Cbrase el vaso con una luna de reloj. USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 16 Cuando haya cesado la reaccin de inmediato, pruebe la inflamabilidad del gas producido acercando un fsforo encendido al vaso deslizando un poco la luna de reloj. Agregue 3 gotas de fenolftalena. Anote sus observaciones. Repita la misma experiencia con un trozo de sodio. Anote sus observaciones Repita lo mismo con un trozo de potasio. Aqu tenga mayor cuidado con los trozos del metal.
FAMILIA DE LOS METALES ALCALINO-TERREOS
En 3 tubos de ensayo coloque separadamente 10 gotas de soluciones de MgCl 2 , CaCl 2 , SrCl 2 . Agregue 2 ml de H 2 SO 4 2M agite y espere la sedimentacin de los precipitados. Al tubo que contiene MgCl 2 agregue 2 ml de alcohol. Anote sus observaciones.
5. RESULTADOS
Halgenos
COLOR SOLUBILIDAD EN NH 3
Precipitado de AgF
Precipitado de AgCl
Precipitado de AgBr
Precipitado de AgI
PAPEL TORNASOL Reaccin de H 2 SO 4 con NaF
Reaccin de H 2 SO 4 con NaCl
Reaccin de H 2 SO 4 con NaBr
Reaccin de H 2 SO 4 con NaI
Reaccin de H 3 PO 4 con NaI
Color de Cl 2 en Cloroformo
USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 17 Color de Br 2 en Cloroformo
Color de I 2 en Cloroformo
Metales alcalinos
Ordene en forma creciente de reactividad del agua con el K, Na, Li.
1) 2) 3)
Metales Alcalino Trreos
Color del precipitado de MgSO 4
Color del precipitado de CaSO 4
Color del precipitado de SrSO 4
5. CUESTIONARIO
1. Qu es la fenolftalena y para que se emplea en el experimento?
2. Cul es la diferencia entre alcalinos y alcalino trreos?
3. Al adicionar solucin de AgNO 3 a los halogenuros Qu reacciones se producen?. Exprese con ecuaciones en cada caso
4. Nombre en forma ascendente de reactividad los metales alcalinos.
USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 18
PRCTICA N 4
COMPUESTOS IONICOS Y COVALENTES
1. INTRODUCCIN
Cuando un metal activo reacciona con un elemento no metlico activo , el metal adquiere carga positiva por prdida de uno o ms electrones, que son ganados por el elemento no metlico, el que a su vez se carga negativamente. Cada elemento tiende a asumir su configuracin electrnica ms estable como en los gases nobles . Por ejemplo :
Na . + . Cl : Na + : Cl - :
Tales tomos o radicales elctricamente cargados, son llamados iones. La fuerza que mantiene unidos los iones, la cual es primariamente debida a diferentes cargas elctricas, se le llama enlace ionico . Por otro lado, cuando dos elementos con electronegatividades similares reaccionan entre si , esto conduce a la formacin de un par de electrones estable, el cual es mutuamente atrado por ambos ncleos atmicos por ejemplo :
H . + . H H : H ( H 2 )
Este tipo de enlace se denomina, enlace covalente.
ELECTROLITOS: Los cidos, las bases y las sales pueden poseer enlaces inicos o enlaces poco polares. Cuando estas sustancias se disuelven en agua, los iones se separan como partculas con movimiento independiente, de acuerdo a ecuaciones de ionizacin tales como :
NaOH Na + + OH -
K 2 SO 4 2 K + + SO 4 2-
En las sales slidas, los iones se encuentran formando parte de las unidades estructurales del cristal as cuando la sal es fundida y la estructura cristalina es rota, los iones se hallan libres para moverse independientemente. USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 19 Los cidos, las bases y las sales son llamados electrolitos a causa de que sus soluciones acuosas conducen la corriente elctrica. Soluciones de compuestos covalentes tales como sacarosa (C 12 H 22 O 11 ) y acetona ( CH 3 COCH 3 ) son no electrolitos.
Los cidos fuertes, bases fuertes y la mayora de las sales, se ionizan completamente en soluciones diluidas. En soluciones de cidos y bases dbiles, una gran parte de la sustancia disuelta esta presente en forma molecular, as, aunque la concentracin total pueda ser alta, la concentracin de iones es baja.
2. OBJETIVO
Diferenciar compuestos inicos de compuestos covalentes asndonos en diferencias de conductividad de la corriente elctrica.
3. FUNDAMENTO
La corriente elctrica , es transportada por un alambre metlico, esto implica una corriente de electrones movindose a lo largo del alambre de tomo a tomo. La corriente elctrica a travs de una solucin consiste de una corriente de iones negativos movindose hacia el nodo (electrodo positivo), y una corriente de iones positivos movindose hacia el ctodo (electrodo negativo).
Durante la conduccin de la corriente elctrica a travs de una solucin ocurren cambios qumicos en cada electrodo. Los iones capturan electrones del ctodo mientras que por otro lado depositan electrones en el nodo.
USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 20 IONES COMO SUSTANCIAS INDIVIDUALES Consideremos los cidos : HCl , HBr , HNO 3 y H 2 SO 4 . Como sustancias puras, cada una es distinta, y cada una tiene caractersticas individuales. Pero si las colocamos en agua sus soluciones asumiran varias propiedades en comn : sabor cido , neutralizan bases, viran a rojo el papel azul de tornasol . Estas son las propiedades del ion hidrgeno ( H + ) . Pero tambin las soluciones son diferentes, poseen respectivamente las propiedades del in cloruro ( Cl - ) , bromuro ( Br - ) , nitrato ( NO 3 - ) y ion sulfato ( SO 4 2- ) .
4. MATERIALES Y REACTIVOS
- 3 vasos de precipitados de 250ml - 1 Aparato para comparar las conductividades elctricas de varias soluciones. - 1 cpsula de porcelana - 50 ml de cido actico glacial - 2 picetas con agua destilada - 12 vasos de precipitados de 150ml - etanol de 95% , NaCl slido , KclO 3 slido. - sacarosa , trozos de marmol, granallas de zinc. - soluciones de HCl 6M , HCl 0,1M , c. actico 0,1M , NH 4 OH 0,1M , NH 4 C 2 H 3 O 2 0,1M , NaOH 0,1M , HC 2 H 3 O 2 6M , NaCl 0,1M
5. TCNICA OPERATORIA
Midiendo las conductividades elctricas relativas de varias sustancias puras y de sus soluciones obtendremos evidencias concernientes a la presencia y concentracin relativa de iones en estas sustancias.
a) ELECTROLITOS Y NO ELECTROLITOS: En cada una de las siguientes pruebas clasificar cada sustancia como buen conductor , pobre conductor o como no conductor de la electricidad.
SUSTANCIAS PURAS Y SUS SOLUCIONES: Comparar la conductividad del agua destilada con el agua potable. Ensayar la conductividad de 10ml de alcohol etlico al 95% , luego adicionar 10ml de agua destilada y ensayar la solubilidad de la solucin formada . Ensayar pequeas cantidades de las muestras puras : cido actico glacial (HC 2 H 3 O 2 ) , sacarosa ( C 12 H 22 O 11 ) , cloruro de sodio (NaCl).
USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 21
RESULTADOS:
MUESTRA Buen conductor Pobre conductor No conductor H 2 O H 2 O + agua potable Alcohol etlico Alcohol etlico + H 2 O HC 2 H 3 O 2
HC 2 H 3 O 2 + H 2 O C 12 H 22 O 11
C 12 H 22 O 11 + H 2 O NaCl NaCl + H 2 O
CONCLUSION:
b) EL EFECTO DE LA FUSION DE UNA SAL : Colocar una pequea cantidad de clorato de potasio KClO 3 en un crisol y ensayar su conductividad . Calentar el crisol hasta que el clorato de potasio funda y ensaye nuevamente la conductividad. Despus de esto lavar y secar los electrodos cuidadosamente.
RESULTADOS:
CONCLUSION:
USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 22 c) COMPARACION DEL COMPORTAMIENTO DE ACIDOS FUERTES Y DEBILES , BASES FUERTES Y DEBILES , SALES FUERTES Y DEBILES: Determinar la conductividad relativa de 5-10ml de: HCl 0,1M, HC 2 H 3 O 2 0,1M; NaOH 0,1M, NH 4 OH 0,1M; NaCl 0,1M , NH 4 C 2 H 3 O 2 0,1M.
RESULTADOS: MUESTRA Buen conductor pobre conductor no conductor HCl 0,1M HC 2 H 3 O 2 0,1M NaOH 0,1M NH 4 OH 0,1M NaCl 0,1M NH 4 C 2 H 3 O 2 0,1M
CONCLUSION:
d) COMPARACION DE DATOS DE CONDUCTIVIDAD CON EL COMPORTAMIENTO QUIMICO : Comparar el comportamiento de HCl 6M y de HC 2 H 3 O 2 6M en los siguientes casos: # reaccin frente a trozos de marmol (CaCO 3 ): verificar la velocidad del desprendimiento de gas CO 2 # reaccin frente a granallas
de zinc: verificar la velocidad de desprendimiento de gas H 2
1.-Explicar de manera sencilla el trmino ionizacin 2.-Explicar la conduccin de una corriente elctrica a travs de un cable metlico 3.-Defina el trmino ctodo y nodo 4.-Escriba el nombre y frmula de cinco sustancias covalentes no conductoras de la corriente elctrica.
USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 24 PRACTICA N 5
CINETICA QUIMICA
1. INTRODUCCIN Cintica Qumica: estudia a la velocidad de reaccin considerando todos los factores que influyen sobre ella y explicando la causa de la magnitud de dicha velocidad.
Velocidad de Reaccin: se entiende como la rapidez con que se consumen los reactantes o se forman los productos en una unidad de tiempo.
Consideremos la siguiente ecuacin :
A B
Podemos definir la velocidad de esta reaccin como la velocidad con que va apareciendo el producto B
Velocidad de reaccin = Velocidad con que aparece el producto B
Suponiendo que la concentracin del producto es [B] 1 en un tiempo t 1 y [B] 2 en un tiempo t 2 . Entonces el aumento en la concentracin de B por una unidad de tiempo, se expresa de la siguiente manera:
[B] 2 - [B] 1 B = t 2 - t 1 t
lo cual es por definicin, igual a la velocidad de la reaccin :
VELOCIDAD = B t
Al definir la velocidad de la reaccin como el descenso en la concentracin del reactante A por unidad de tiempo, la expresin es:
VELOCIDAD = - A t
El signo negativo ( - ) se emplea con el fin de que la velocidad resulte una cantidad positiva ya que A , igual a [A] 2 - [A] 1 es necesariamente negativa, siendo A el reactante.
USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 25 En los sistemas homogneos (Cuando la reaccin se efecta en una sola fase) la velocidad de una reaccin qumica es afectada por las variables: temperatura, naturaleza de las sustancias, concentracin de los reactantes, estado de divisin de los mismos, catalizadores, energa de activacin y presin en los gases.
2. PARTE EXPERIMENTAL
A. EFECTO DE LA CONCENTRACION
# Objetivo: Verificar el efecto de la variacin de la concentracin de reactante sobre la velocidad de la reaccin.
Cuando los iones iodato y los iones sulfito reaccionan qumicamente forman yodo. Sin embargo el yodo tambin reacciona con el sulfito de modo tal que no habr yodo libre mientras la mezcla de reaccin contenga iones sulfito. Se sabe que el yodo libre en presencia de almidn soluble forma un compuesto azul intenso a prpura, de tal forma que cuando todo el sulfito haya sido consumido en la mezcla de reaccin la solucin se tornar azul intenso.
KIO 3 + 3 Na 2 SO 3 H 2 SO 4 KI + 3 Na 2 SO 4
KIO 3 + 5 KI + 3 H 2 SO 4 3 H 2 SO 4 + 3 I 2 + 3 H 2 O
I 2 + almidn Complejo de color azul intenso
# Metodologa:
1 Medir 10ml de solucin de iodato de potasio y 80ml de agua en un beaker de 400ml colocado sobre una hoja de papel blanco. Adicionar 10ml de solucin de almidn sulfito a la solucin en el beaker cronometrar a partir de la adicin. Agitar la solucin con varilla y anotar el tiempo transcurrido hasta la aparicin de color azul (tiempo requerido para que el sulfito sea consumido)
Tiempo : ________________
2 Repetir el experimento usando 20ml de iodato , 70ml de agua y 10ml de la solucin almidn-sulfito. Nuevamente registrar el tiempo requerido para que el sulfito sea consumido.
Tiempo : ___________________
3 Repetir el experimento usando 30ml de iodato, 60ml de agua y 10ml de solucin de almidn sulfito.
Tiempo : __________________
USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 26 4 Graficar en papel milimetrado los datos de concentracin de iodato frente al tiempo de reaccin.
B. EFECTO DE LA TEMPERATURA
Para estudiar el efecto de la temperatura deben mantenerse constantes la concentracin y otros factores, luego la reaccin es determinada a varias temperaturas.
Los siguientes ensayos se realizan en base a la reaccin entre el tiosulfato de sodio y el cido sulfrico, siendo el punto de referencia para la determinacin del tiempo de reaccin la aparicin de azufre como producto . La presencia de este elemento, al ser slido insoluble en agua, produce una opalescencia blanquecina en el medio acuoso:
S 2 O 3 2- + 2 H + H 2 SO 3 + S (s)
# Metodologa
1 Medir 10ml de solucin 0,05M de tiosulfato de sodio en cada uno de 4 tubos de prueba, colocar los 4 tubos dentro de un beaker que contenga agua suficiente para cubrir el lquido dentro de los tubos de prueba. Agitar el lquido dentro de los tubos con ayuda de un termmetro y verificar que la temperatura es constante en los 4 tubos, luego elija uno de los 4 tubos e inmediatamente adicionar 1,0ml de cido sulfrico 0,3M y anotar el tiempo en que se adiciona, agitar la solucin con el termmetro y anotar el tiempo requerido para la aparicin de una ligera turbidez:
Temperatura : ______________ Tiempo : _________
2 Retirar el tubo utilizado anteriormente y temperar el agua del beaker de modo tal que la temperatura del lquido en los tubos restantes se incremente entre 8-10C agitar con el termmetro hasta que la temperatura sea constante, elegir uno de los tubos e inmediatamente adicionar 1,0ml de solucin de cido sulfrico 0,3M anotar el tiempo d la adicin y luego agitar con el termmetro y anotar el tiempo requerido hasta la aparicin de una ligera turbidez :
Temperatura : _______________ Tiempo : _____________
3 Repetir el procedimiento para los otros dos tubos restantes incrementando la temperatura 8-10C para cada prueba sucesiva.
Temperatura : ______________ Tiempo : _____________
Temperatura : _____________ Tiempo : _____________
USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 27 4 Graficar en papel milimetrado los datos de temperatura frente al tiempo de reaccin.
3. CUESTIONARIO
1. Cmo afecta al tiempo de reaccin, el cambio de concentracin del reactante? 2. Cmo afecta un cambio de temperatura de unos 10C al tiempo de reaccin? 3. Seale 5 factores que influyen en la velocidad de reacciones qumicas. 4. A qu se llama tiempo de vida media en la velocidad de reaccin? 5. Explique los trminos catlisis homognea y catlisis heterognea.
USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 28 PRACTICA N 6
SOLUCIONES
PREPARACIN DE SOLUCIONES NORMALES Y ESTANDARIZACIN
1. INTRODUCCIN:
Las disoluciones son mezclas de dos o ms elementos o compuestos que tienen aspecto homogneo incluso a la mayor amplificacin posible de la luz visible. Las sustancias en disolucin usualmente se hallan dispersas como molculas o iones simples o como agregados de unas pocas molculas.
En un sistema, las proporciones de las sustancias en disolucin varan dentro de los lmites de solubilidad. La solubilidad de una sustancia en determinado medio es la cantidad mxima de dicha sustancia que puede formar una disolucin (que puede ser disuelta) a determinadas presin y temperatura. Tal disolucin, que contiene una cantidad mxima de la sustancia dada, se dice que est saturada con respecto a aquella misma.
En una disolucin la sustancia o sustancias presentes en mayor cantidad se suelen denominar solventes y la que se halla presente en menor cantidad se llama soluto. Por ejemplo, el agua es el disolvente y el cloruro de sodio el soluto en una disolucin de sal de mesa y agua. Si las sustancias pueden formar disoluciones en cualquier proporcin (tal como ocurre con el alcohol etlico y agua ), los trminos disolventes y soluto se hacen ambiguos.
Las Expresiones ms comunes de las soluciones se describen a continuacin.
1.1 PORCENTUALIDAD A) Porcentaje % ( Peso en Volumen ) Es la cantidad de gramos de soluto en 100ml de solucin.
P % V = N
G
soluto 100ml Solucin USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 29 B) Porcentaje % ( Volumen en Volumen ) Es la cantidad de volumen de soluto en 100mL de solucin.
C) Porcentaje % ( Peso en Peso ) Es la cantidad de gramos de soluto en 100g de solucin.
1.2 MOLARIDAD Para tener en cuenta las cantidades de sustancia que intervienen en una reaccin qumica resulta mucho ms cmodo, segn se desprende de las relaciones estequiomtricas y, para cuantificar la cantidad de especie qumica que participa en una reaccin, emplear como unidad los moles de sustancia en lugar de la masa de reactivo participante, ya que con ello se facilitan de manera significativa los procedimientos de clculo necesarios.
Como unidad de volumen de referencia e uso cmodo se emplea el litro, y por esto se define como unidad de concentracin la Molaridad (M) que se establece como el nmero de moles de soluto o especie de inters que se encuentra disuelta de manera homognea en un litro de la solucin en la que se encuentra. Tngase en cuenta que el mismo valor de concentracin se tendr al emplear simultneamente la milsima parte de la cantidad de sustancia y la milsima parte del volumen definido antes. Es decir una solucin de la que se pueda afirmar que un mililitro de solucin, contiene un milimol (mmol) de sustancia, es una solucin 1 Molar de esa sustancia.
Es fcil transformar la cantidad de sustancia expresada en moles para convertirla en gramos o en cualquier otra unidad de masa y as se tienen expresiones equivalentes de la concentracin de una especie determinada. Para ciertas especies qumicas tenemos evidencia de que no existen como las entidades simples aisladas que representamos en la frmulas qumicas, la sales son un ejemplo tpico de ellas, en este caso se prefiere utilizar en lugar de la designacin de mol, la de peso frmula y de manera correspondiente la designacin de Normalidad en lugar de la de Molaridad.
V % V = N de mL
soluto 100 ml de Solucin
P % P = N de G
de
soluto 100g de Solucin USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 30 Para su utilizacin el clculo relacionado con una transformacin qumica, la cantidad de reactivo se expresa de la manera ms conveniente de tal forma que su empleo resulte lo ms simple posible.
Molaridad: Nmero de moles de un soluto Q.P. en 1 Litro de solucin.
Nmero de Moles = g PM
g : gramos de soluto PM : Masa molecular
1.3 NORMALIDAD: Nmero de equivalentes de un soluto Q.P. en 1 Litro de solucin.
El Nmero de Equivalentes se deduce a partir de los gramos de soluto y su peso equivalente.
Nmero de Equivalentes: g Peso Equivalente
Peso Equivalente = PM X X= Nmero de iones activos y/o electrones participantes en la reaccin.
M = Nmero de Moles
Volumen en Litros de solucin
N = Nmero de Equivalentes
Volumen en Litros de solucin G NaOH = USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 31 Clculos de la Normalidad Exacta Se aplica la siguiente frmula
N NaOH x Volumen (Gasto ) = g Peq
Ejemplo: N NaOH x 0.0098 L = 0.200g 204.23g/Eq
2. OBJETIVO:
Preparar y estandarizar una solucin de concentracin conocida.
3. FUNDAMENTO
3.1 PREPARACIN: El NaOH es soluble en H 2 O y desaloja sus iones hidroxilo ( -OH) que pueden ser cuantificados por una muestra patrn de Biftalato de potasio. De la Normalidad despejamos g: g = N x Peq x V g = 0.1Eq/L x 40g/Eq x 0.1L
El equivalente (Peso Equivalente del NaOH ser su masa molecular 40 entre 1, puesto que presenta un solo hidroxilo
Advertencia: Ponderar mas de 0,4g (0,45 , 0,50g), pues el NaOH tiende a carbonatarse
3.2 ESTANDARIZACIN Se usan patrones primarios: En este caso el Biftalato de Potasio, la reaccin es la siguiente:
+ NaOH + H 2 O
PM = 204.23 g/mol PM = 40 g/mol
En base a esta reaccin se deduce N NaOH = 0.0999 Eq/L g = 0,4g COOK COONa COOK COOH USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 32
N NaOH x V NaOH = G biftalato K+
Eqte Bift.K+
De la cantidad de Biftalato de K + y del volumen de NaOH se deduce la Normalidad exacta del NaOH.
5. TCNICA OPERATORIA Pesar ms de 2 g (2,1 2,2) de NaOH. Una vez ponderada la masa aadir el NaOH a un beaker de 50 a 100 mL y aadir 10 mL de agua destilada, disolviendo con ayuda de una varilla de vidrio. El contenido del beaker aadirlo a una fiola de 500 mL; se lava el beaker con sendas cantidades de H 2 O destilada (10 mL, 3 a 4 veces) repitiendo el paso anterior. Agitar la fiola con su contenido y llenar con H 2 O hasta la lnea de aforo. Homogenizar. Etiquetar como NaOH 0,2 N. Colocar el NaOH 0,2 N en una bureta hasta la lnea de referencia cero. Por otro lado, en un matraz tipo erlenmeyer, colocar 200 mg de biftalato de potasio y disolver con 20 mL de H 2 O destilada y agitar; aadir luego fenolftalena al 1% en etanol, III gotas. Aadir gota a gota desde la bureta el NaOH 0,2 N sobre la solucin del erlenmeyer hasta la aparicin de un color ligeramente rosado. Anotar el gasto: G. Aplicar la frmula respectiva y hallar la normalidad exacta. USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 33
6. REGISTRO DE DATOS Y CONCLUSIONES Preparacin de NaOH 0,1 N y estandarizacin.
Masa de NaOH 0,1 N Masa de biftalato de potasio Gasto de NaOH 0,1 N Normalidad exacta NaOH
Aplicaciones
HCl diluido (N) HNO 3 diluido (N) cido actico (N)
7. CUESTIONARIO 1. Se prepara NaOH en solucin acuosa de la siguiente manera: se ponderarn 2 g de masa de dicho compuesto y se diluyeron con H 2 O cantidad suficiente para 250 mL; Cul ser su normalidad aproximada? 2. Del problema anterior, se estandariza usando 200 mg de Biftalato de Potasio (M = 204,23 g/mol) y se deja caer desde una bureta gota a gota el hidrxido de sodio 0,2 N; gastndose 5,1 mL, usando fenolftalena como indicador. Cul es la normalidad exacta? 3. Se tiene un cido actico en solucin acuosa; la concentracin es desconocida. De dicha muestra se miden 10 mL y se valoran con la solucin anterior gastndose 5 mL. Cul es la reaccin que ha ocurrido y la normalidad exacta del cido actico? 4. Cmo preparara HCl 0,2 N a partir de un HCl concentrado 33 p/p y = 1,18 g/mL?. Asumir un volumen de preparacin igual a 500 mL. 5. Por qu las soluciones usadas en el laboratorio deben ser estandarizadas, cuando se trabaja en valoraciones?
USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 34 PRCTICA N 7
DETERMINACIN EXPERIMENTAL DEL pH Y SOLUCIONES AMORTIGUADORAS
1. INTRODUCCIN
La escala del pH utilizada para medir la concentracin de iones hidronio fue desarrollada por Sorensen en 1909. Segn su propia definicin el pH de una solucin es el valor negativo del logaritmo de la concentracin de iones hidrgeno. Con la introduccin del concepto de actividad, y la concentracin del H+ hidrgeno no suelen ser muy diferentes en una solucin determinada, el pH se puede calcular con cualquiera de los valores.
2. OBJETIVOS Aprender a utilizar diferentes mtodos de medicin de pH de soluciones Determinar experimentalmente el pH de las siguientes soluciones:
$ NaOH 0.01 M $ HCl 0.01 M $ CH3COOH 0.1 M $ NH4OH 0.1 M $ NH4Cl 0.1 M
Verificar el comportamiento anftero de la albmina frente a cidos y bases. Verificar el efecto del pH en la solubilidad de sustancias orgnicas.
3. FUNDAMENTO Para obtener el pH se determina con la concentracin de H+ en moles / Litro y se calcula el pH mediante la siguiente frmula:
pH =-log[H+] =Log 1/[H+]
USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 35 DETERMINACIN DEL pH POR EL MTODO COLORIMTRICO
Ciertos cidos y bases dbiles, llamados indicadores cido base, cambian su color dentro de un cierto margen de variacin del pH.
Por debajo del limite inferior el indicador muestra un color y por encima del limite superior del margen del pH el indicador muestra un valor diferente.
Los indicadores tienen un cambio de color dentro de un margen perfectamente definido de pH, generalmente del orden de una a 2 unidades de pH, como este margen puede caer por completo en el lado cido o en el lado bsico, un indicador se puede definir como una sustancia cuyo color cambia dentro de un margen definido de pH.
El equilibrio entre las dos formas de color se afecta por la concentracin de los iones hidrgeno de la solucin.
SOLUCIN AMORTIGUADORA
Es aquella que pone una resistencia al cambio en la concentracin de iones hidrgenos, o el pH, an cuando se agrega un cido a una base fuerte a la solucin.
A. Concentracin de una Solucin Amortiguadora: La soluciones buffer estn constituidas por cidos dbiles (Ejm. CH3COOH) ms una sal de base conjugada (Ejm. CH3COONa) o por una base dbil (Ejm. NH4OH) ms una sal de cido conjugado (Ejm. NH4Cl )
Ejemplos:
SOLUCIONES REGULADORAS PK A INTEVALO DEL pH
CH 3 COOH + CH 3 COONa 4.76 3.7 a 5.8 NaH 2 PO 4 + NaHPO 4 7.21 5.8 a 8.0 H 3 BO 3 + NaBO 3 9.24 8.2 a 10.2
USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 36 B. Mecanismo de accin de las Soluciones Buffer
La regulacin del pH de una solucin se da por una reaccin de neutralizacin, por ejemplo:
a. CH3COOH + CH3COONa HCl CH3COOH + NaCl
b. CH3COOH + CH3COONa NaOH CH3COONa +H2O
C. Ecuacin de pH de una solucin reguladora de un cido dbil y una sal de base conjugada .
pH =pKA + log (sal) / (cido) D. Ecuacin de pH de una base dbil y una sal de cido conjugado. pH =pKw -pkB + log (base) / (sal)
pH =pKw -pkB + log ( no ionizado) / (ionizado) E. Aplicacin de las Soluciones Buffer
Estas soluciones permiten mantener la solubilidad y aumentar la estabilidad de determinadas drogas. ! En la accin farmacolgica de las drogas, primero se identifica la naturaleza de las mismas, que pueden ser cidas o bsicas.
! Administracin por va oral. -nivel estomacal : pH cido. -nivel intestinal : pH alcalino.
! En todas las drogas, la forma no inica es absorbidas por la membrana celular, que es de carcter lipdica.
4. MATERIALES Y REACTIVOS
% Tubos de ensayo % Gradillas % Fiolas % Pipetas 5 10 mL % Beaker 50 mL % Frascos de vidrio % Papel indicadores:. Azul, amarillo y rojo. % Potencimetro USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 37
Reactivos :
Soluciones indicadoras :
% Fenoftaleina 1% % Azul de timol % Azul de bromofenol % Rojo metilo % Azul de bromotimol
Solucion buffer (pH =4) % Tampn de boratos % Fenobarbital sodico 2% % HCL 0.1M, 0.03 M , 0.01M % NaOH 0.1 M, NaOH 0,01 M % CH3COOH 0.1M % NH4OH 0.1M % NH4CL 0.1 M 5. PROCEDIMIENTO Y TECNICA OPERATORIA 5.1 MEDICION DEL pH DE SOLUCIONES A) METODO COLORIMETRO: A..1 Calculamos el pH terico de las soluciones. NaOH 0.01M pOH = - log [OH"] pOH = - log [0.01] pOH = 2 pH=14 - pOH pH=14 - 2 pH= 12
B) METODO POTENCIOMETRICO Tomamos 10 ml de cada solucin y medimos el pH real sumergiendo el electrodo del potencimetro en la solucin. Antes se sigue a los pasos previos: 1. Lavar electrodo con agua destilada. 2. Calibrar el potencimetro con una solucin buffer (pH= 4)
POTENCIMETRO pH
NaOH 0.01M 9.5
HCl 0.01 M 2
CH 3 COOH 0.1 M 2.5
NH 4 OH. 0.1M 9.5
NH 4 Cl 0.1 M 5.5
USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 39 5.2 INFLUENCIA DEL pH EN LA SOLUBILIDAD DE LAS DROGAS.
Fenobarbital 2% 2 mL 2 mL 2 mL HCl 0,01 M 2 mL - - HCl 0,03 M - 2 mL - HCl 0,1 M - - 2 mL
AGITACIN pH Resultados pp
IMPORTANCIA DEL TAMPONAMIENTO EN LA SOLUBILIDAD DE UNA DROGA.
1. Cul es el sistema amortiguador que usa la sangre para mantener el pH en 7,35 aproximadamente? 2. Cul es el pH de un cido dbil (cido actico K A =1,8 X 10 -5 ) 0,01M? 3. Cul ser el pH de una base dbil 0,01 M de K B = 2,3 X 10 -5 ? 4. Cul ser elpH de un HCl 0,001 M? 5. Cul ser el pH de una base fuerte 0,01M? 6. Cul es la estructura del fenobarbital sdico y por qu precipita? 7. Qu tipo de amortiguador usa el sistema intracelular?
7. REGISTRO DE DATOS Y CONCLUSIONES
A. pH mtodo colorimtrico
pHt pHp NaOH 0,01 M HCl 0,01 M CH 3 COOH 0,1 M NH 4 OH 0,1 M NH 4 Cl 0,1 M
B. pH mtodo potenciomtrico
pHt pHp NaOH 0,01 M HCl 0,01 M CH 3 COOH 0,1 M NH 4 OH 0,1 M NH 4 Cl 0,1 M pHt = terico pHp = prctico
C. Influencia del pH en solubilidad de drogas
(1) (2) (3) Fenobarbital sdico 2 % 2 mL + HCl 0,01 M 2 mL + HCl 0,02 M 2 mL + HCl 0,1 M pH pp (precipitado)
D. Importancia del tamponamiento en la solubilidad de las drogas
pH Presencia de precipitado A1 + A2 B1 + B2
USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 41 PRCTICA N 8
ESTEREOQUMICA DE COMPUESTOS ORGNICOS
1. Definir brevemente cada uno de los trminos siguientes y dar un ejemplo: a) (R) y (S) b) Cis y Trans c) Ismeros pticos d) Mezcla racmica e) Quiral y aquiral f) Meso
2. Determinar el tipo de ismero geomtrico en cada uno de los siguientes casos:
3. Dibujar la estructura de cada uno de los siguientes compuestos: a) (E)-3-metil-2-hexeno b) (Z)-2-cloro-2-buteno c) (2E,5Z)-nonadieno d) (Z)-3,7-dimetil-2,6-octadieno-1-ol C C Br CH 3 CH 2 CH 3 Cl C C F H Cl Br C C HOOC CH 3 OH OHC C C H CH(CH 3 ) 2 CH 2 CH 3 C H 3 C C H H Cl Cl C C C H 3 H COOH C C HOOC H CH 3 USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 42 4. Asignar la configuracin (R) o (S) a los centros quirales de las molculas siguientes:
5. Asignar configuracin (R) o (S) a los siguientes compuestos, representndoles mediante frmulas dimensionales.
a) (S)-2-bromopentano b) (R)-3-metilhexano racmico c) (S)-1-cloro-2-propanol d) (R)-3-cloro-3-yodoheptano
6. En cada uno de los compuestos siguientes, marcar los tomos de carbono asimtricos con un asterisco. En el caso de los estereoismeros dibujar las frmulas de proyeccin de Fisher, indicar los pares de enantimeros, compuestos Meso y por lo menos 2 pares de diasteremeros.
a) CH 3 -CHCl-CHOH-COOH b) HOOC-CHBr-COOH c) Acido Lctico: HOOC-CHOH-CH 3
d) Acido Tartrico: HOOC-CHOH-CHOH-COOH e) Hidrobenzona: C 6 H 5 -CHOH-CHOH-C 6 H 5
f) Efedrina: C 6 H 5 -CHOH-CH(NHCH 3 )-CH 3
g) CH 3 -CHF-CH 2 F h) CH 2 Cl-CHCl-CHCl-CH 2 Cl CH 3 OH H Cl C H 3 I H COOH Et Me H Br F CN O 2 N C CH COOH H 3 C OH HO H CHO Cl H O USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 43 7. Dibujar las proyecciones de Fischer para:
a) enantimero (S) del cido 3 bromo 3 etilheptano b) enantimero (R) de la Alanina
8. Dar la relacin entre los dos compuestos para cada uno de los siguientes pares:
a) (2R, 3S)-2,3-dibromohexano y (2S, 3R)-2,3-dibromohexano b) (2R, 3S)-2,3-dibromohexano y (2R, 3R)-2,3-dibromohexano
c)
d)
e)
Br Br H OH H OH CH 2 OH CHO OH H H OH CH 2 OH CHO C C H 3 C H Br Br H CH 3 C C Br H 3 C H H CH 3 Br USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 44 PRCTICA N 9
COMPUESTOS HIDROXILICOS Y CARBONILICOS
1. INTRODUCCION
1.1 ALCOHOLES Y FENOLES
Los alcoholes son compuestos de formula general R - OH , donde R es cualquier grupo alquilo y OH es el grupo hidroxilo . Los fenoles tambin son compuestos que poseen el grupo - OH, pero ste esta unido a un radical aromtico ( arilo ). Con frecuencia se estudian separadamente los alcoholes y los fenoles, pues las propiedades qumicas de estos ltimos son muy diferentes .
Entre las propiedades de los alcoholes destacan su acidez y su basicidad, estas propiedades se le atribuyen al grupo hidroxilo que es similar al del agua ( H - OH ) . Los alcoholes al igual que el agua, son cidos y bases dbiles, casi tan cidos y tan bsicos como el agua. Lo mismo que el agua los alcoholes son lo suficientemente como para reaccionar con metales activos, como el sodio, liberando hidrgeno gaseoso. Los productos formados se llaman alcxidos , que son bases fuertes al igual que el NaOH.
Los grupos OH en los fenoles son mucho ms cidos que en los alcoholes, debido a que el grupo fenilo atrae electrones con ms fuerza que los grupos alquilo de los alcoholes.
1.1.1 ALCOHOLES: Segn el nmero de tomos de hidrgeno unidos al carbono que contiene al -OH existen tres tipos de alcoholes :
H H R
R - C - OH R - C - OH R - C - OH
H R R ( RCH 2 OH ) ( R 2 CHOH ) ( R 3 C-OH ) Alcohol Primario Alcohol Secundario Alcohol Terciario
USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 45
1.1.1.1 REACCION CON EL SODIO METALICO: Cuando se agrega sodio o potasio metlico, el alcohol reacciona desprendiendo gran energa y liberando hidrgeno. La solucin resultante contiene alcxido de sodio o potasio :
CH 3 OH + Na CH 3 ONa + H 2
Metanol Metxido de sodio
La facilidad con que se forman estos alcxidos va de acuerdo a la acidez. Un alcohol primario libera ms rpidamente el hidrgeno que uno secundario y que uno terciario :
Reactividad frente al sodio metlico : alc. 1 > alc. 2 > alc. 3
1.1.1.2 SUSTITUCION POR HALOGENO : El grupo OH de los alcoholes puede ser sustituido por halgenos. Esta reaccin ocurre ms rpido con los alcoholes terciarios, mientras que con los alcoholes secundarios es lenta y con los alcoholes primarios es ms lenta:
R 3 C - OH + HCl ZnCl 2 R 3 C - Cl + H 2 O Rpido Cloruro de alquilo
ZnCl 2
R 2 CHOH + HCl R 2 CH - Cl + H 2 O Lento
ZnCl 2
RCH 2 OH + HCl RCH 2 - Cl + H 2 O Muy lento
Alcohol isoproplico Alcohol tert-butlico 1,2,3 propanotriol Alcohol allico Alcohol benclico USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 46 1.1.1.3 OXIDACION DE ALCOHOLES : Los alcoholes primarios y secundarios son fcilmente oxidables, mientras que los terciarios difcilmente se oxidan :
Los alcoholes primarios se oxidan y pasan a aldehdos, y a menos que se retire el aldehdo formado, del sistema, se oxidar hasta cido carboxlico.
Los alcoholes secundarios se oxidan hasta cetonas, las cuales son difciles de oxidar, por ello la oxidacin se detiene en esta etapa.
1.1.2 FENOLES.- Son compuestos hidroxlicos donde le grupo -OH se une directamente a un anillo aromtico. Se caracterizan por ser mas cidos que los alcoholes y por formar complejos coloreados con iones metlicos como el Fe 3+
ALDEHIDOS Y CETONAS
Los aldehdos y cetonas son compuestos orgnicos que se caracterizan por la presencia del grupo CARBONILO :
C = O
EJEMPLOS :
Aldehdos Cetonas
C O R R C O H R USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 47
La presencia del grupo carbonilo puede ser detectado por reaccin con la 2,4- dinitrofenilhidrazina ( 2,4-DNFH ), por formacin de precipitados de color amarillo o naranja de 2,4-dinitrofenilhidra-zonas del aldehdo o cetona :
Los aldehdos pueden ser detectados por el reactivo de Schiff (Fucsina decolorada) con el cual dan una coloracin violeta o rosa azuloso . Esta prueba es especfica para aldehdos, aunque es ligeramente positiva para la acetona y es negativa para las otras cetonas.
Los aldehdos se pueden obtener por oxidacin de alcoholes primarios con oxidantes suaves por ejemplo el CuO caliente.
USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 48 Los aldehdos se diferencian de las cetonas porque los primeros son compuestos reductores debido a la presencia del grupo - CHO , que puede ser oxidado a - COOH por accin de oxidantes suaves como el cobre Cu 2+ , en medio alcalino , o por la plata Ag 1+ en medio amoniacal . Las cetonas se portan como sustancias no reductoras:
+ 2 Cu 2+ + 5 OH + Cu 2 O + 3 H 2 O
Sal de cido Oxido cuproso espejo de plata
2. OBJETIVOS
Verificar las principales propiedades de los compuestos hidroxilicos como alcoholes y fenoles. Verificar las principales propiedades qumicas de los compuestos carbonilicos como aldehidos y cetonas.
3. MATERIALES Y REACTIVOS
- Gradilla - acetaldehido al 10% - tubos de prueba - benzaldehido - cocinilla - n-butanol , 2-butanol , ter-butanol - baomaria - acetona - pipetas de 5ml y 10ml - sodio metlico - reactivo de Tollens - reactivo cido crmico - reactivo de Schiff - reactivo de Lucas - solucin de borax al 1% - reactivo 2,4-dinitrofenilhidrazina - solucin indicador fenolftaleina - cido sulfrico concentrado - metanol - cido saliclico - fenol al 1% - reactivo de Fehling (A y B)
C O H R C O -O R USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 49 4. PARTE EXPERIMENTAL
4.1 REACCION CON SODIO METALICO:
OBJETIVO : Verificar la presencia del grupo OH en alcoholes, adems utilizar la reaccin para diferenciar alcoholes 1 , 2 y 3 . METODO OPERATORIO: En tubos de prueba limpios y secos colocar aproximadamente 1ml de de los alcoholes a ensayar, luego adicionar a cada tubo un pequeo trozo de sodio metlico (CUIDADO! es muy custico, manipule con pinzas). Observar si se desprende hidrgeno gaseoso y si hay reaccin con el sodio. Si se sospecha que el alcohol contiene agua, secarlo primero con cloruro de calcio anhidro o sulfato de magnesio anhidro. Ver el orden de reactividad de los diferentes tipos de alcoholes. Al terminar la prueba se puede comprobar la presencia del alcxido, adicionando gotas de fenolftalena al tubo de prueba por aparicin de una coloracin rojo grosella . Si quedase un remanente de sodio metlico sin reaccionar, no se debe desechar arrojndolo al lavadero ( peligro de explosin ) consultar con el profesor.
RESULTADOS:
Alcohol
Rvo. Sodio
DISCUSION:
CONCLUSION:
USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 50 4.2 PRUEBA CON EL REACTIVO DE LUCAS ( ZnCl 2 / HCl ) OBJETIVO : Diferenciar los 3 tipos de alcohol por la velocidad de formacin de haluro de alquilo insoluble en el reactivo. METODO OPERATORIO: Colocar en tubos de prueba aproximadamente 0,5 ml de los alcoholes a ensayar, luego adicionar 2ml del reactivo de Lucas agitar y observar. La prueba ser positiva si hay formacin de turbidez o formacin de dos fases inmiscibles (El producto, cloruro de alquilo, es insoluble en el reactivo de Lucas) RESULTADOS:
Alcohol
Rvo. de Lucas
DISCUSION:
CONCLUSION:
4.3 PRUEBA DE OXIDACION OBJETIVO : Diferenciar los tipos de alcohol por su comportamiento frente al cido crmico. METODO OPERATORIO: En tubos de prueba colocar 1ml de acetona luego, adicionar una gota del alcohol problema y luego una gota del reactivo cido crmico, agitar y observar si hay viraje del color del reactivo a un color verde azulado y/o formacin de precipitado.
4.4 REACCION CON EL REACTIVO TRICLORURO FERRICO OBJETIVO: Diferenciar fenoles de alcoholes . METODO OPERATORIO : En tubos de prueba colocar 1ml de solucin problema, en otro tubo colocar 1ml de etanol, finalmente a cada tubo adicionar dos gotas del reactivo tricloruro frrico.
RESULTADOS:
DISCUSION:
CONCLUSION:
USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 52 4.5 PRUEBA DEL ACIDO BORICO OBJETIVO: Diferenciar alcoholes polihidroxilados de monohidroxilados. METODO OPERATORIO: En 2 tubos de prueba colocar 2ml de solucin de borax al 1% , luego agregar 2 gotas de solucin indicadora de fenolftaleina, finalmente al primer tubo adicionar 5 gotas de etanol y al segundo tubo 5 gotas de glicerina, agitar y observar. RESULTADOS:
DISCUSION:
CONCLUSION:
4.6 REACCION CON LA 2,4-DINITROFENILHIDRAZINA OBJETIVO: Comprobar la presencia de grupo carbonilo en aldehdos y cetonas METODO OPERATORIO: En un tubo de prueba colocar gotas de aldehdo cetona luego adicionar 10 gotas de Rvo. 2,4- dinitrofenilhidrazina agitar y observar si se forma algn precipitado. Si no hay formacin de precipitado inmediatamente , esperar 5 minutos, si no hay precipitado , llevar a bao mara por 3 minutos enfriar y observar si hay formacin de precipitado .
4.7 PRUEBA CON EL REACTIVO DE SCHIFF OBJETIVO : Detectar presencia de aldehdo METODO OPERATORIO: Colocar en tubos de prueba aproximadamente 1ml de reactivo de Schiff, luego a cada tubo adicionar gotas de la muestra analizar . Agitar por un minuto como mximo. Observar si hay la aparicin de una coloracin rojo azuloso.
RESULTADOS:
Muestra
Rvo. De Schiff
DISCUSION:
CONCLUSION:
USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 54 4.8 PRUEBA DE TOLLENS : OBJETIVO: Diferenciar aldehdos de cetonas. METODO OPERATORIO: En tubos de prueba colocar a cada uno 0,5ml de reactivo de Tollens, luego a cada tubo adicionar 0,5ml de muestra mezclar bien y dejar en reposo unos minutos . Observar si hay formacin del espejo de plata. Si no se observase la aparicin del espejo, llevar los tubos al bao mara por 30 a 60 segundos y observar . Precaucin : No calentar los tubos por mas de un minuto, peligro de explosin !
RESULTADOS:
Muestra
Rvo. Tollens
DISCUSION:
CONCLUSION:
4.9 REACCION CON EL REACTIVO DE FEHLING OBJETIVO : Diferenciar aldehdos de cetonas METODO OPERATORIO : El reactivo de Fehling se prepara instantes antes de su empleo mezclando 1ml de la solucin Fehling A + 1ml de la solucin Fehling B se agita hasta la formacin de un complejo azul intenso. La prueba consiste en colocar 1ml del reactivo de Fehling y adicionar 0,5ml de la muestra, mezclar bien y llevar al bao mara por 3 minutos retirar y observar si hay formacin de un precipitado color rojo ladrillo.
1. Escriba la ecuacin qumica de las reacciones llevadas a cabo durante la prctica. 2. Una sustancia reacciona lentamente con el sodio metlico, y se oxida con el cido crmico. Que tipo de sustancia ser? Explique 3. Escriba las principales propiedades fsicas y qumicas y toxicidad del formaldehdo. 4. Se tiene una muestra M a la cual se le ha practicado las siguientes pruebas (ver cuadro) :
PRUEBA Acido crmico Rvo . de Tollens 2,4-Dinitrofenilhidrazina
RESULTADO Solucin verdosa formacin del Formacin de un precipitado y precipitado espejo de plata anaranjado
Sealar a que familia de compuestos orgnicos pertenece la muestra M y Por qu ?
USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 56 PRCTICA N 10
CIDOS CARBOXLICOS Y FORMACIN DE STERES
1. INTRODUCCIN
Los steres derivan de los cidos carboxlicos por sustitucin del oxidrilo del carboxilo por un grupo alcoxi (R O). La frmula generadle los steres saturados es igual a la de los cidos saturados del mismo peso molecular, de los que son ismeros funcionales.
Los steres son muy abundantes en la naturaleza, particularmente son componentes principales de numerosos aromas florales y frutas, lo mismo que de sabores (acetato de etilo, aroma de manzana, butirato de etilo, aroma de pia:; acetato de isoamilo, aroma de pltano).
Los steres se preparan usualmente en el laboratorio por la interaccin entre un alcohol y un cido carboxlico (o su derivado, ejemplo Haluro de cido o anhdrido de cido) en presencia de un catalizador cido (H 2 SO 4 o HCl).
El cido acetil saliclico (aspirina) es un antipirtico y analgsico muy usado en la medicina, por calentamiento en presencia de agua se descompone (hidrolisa) para dar cido saliclico y cido actico.
Reaccin qumica:
+ (CH 2 CO) 2 + CH 3 COOH
Acido saliclico Aspirina
2. OBJETIVO Sintetizar el cido acetil saliclico (aspirina) mediante la reaccin de esterificacin.
3. FUNDAMENTO El cido acetil saliclico, conocido comnmente como aspirina, se prepara con un buen rendimiento por acetilacin del cido saliclico con anhdrido actico en presencia de cido sulfrico.
COOH OH COOH OCOCH 3 H 2 SO 4 USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 57
4. REACTIVOS Y MATERIALES Materiales Matraz erlenmeyer 100 mL Bagueta Matraz kitazato Embudo buchner Tubos de ensayo (4) Probeta 50 mL Pipeta 10 mL Trampa de vaco
Pesar 1 g de cido saliclico en un erlenmeyer de 100 mL, agregar 3 mL de anhdrido actico y 3 gotas de cido sulfrico concentrado.
Agitar la mezcla suavemente por unos 5 minutos. La reaccin es exotrmica, por lo que al elevarse la temperatura todo el cido saliclico se disolver.
Dejar enfriar la mezcla, agregar lentamente y gota a gota aproximadamente 1 mL de agua destilada para decomponer el exceso de anhdrido actico.
Agregar 156 mL de agua destilada a la solucin, calentar hasta que se aclare y luego dejar enfriar. Cuando la mezcla se haya enfriado a temperatura ambiente, poner un pao de hielo para ayudar la cristalizacin.
Filtrar los cristales obtenidos por succin al vaco.
Lavar los cristales con pequeas porciones de agua destilada fra.
Secar los cristales al aire.
USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 58 TEST DEL Fe 3 Cl
Disolver en un tubo de ensayo unos cuantos cristales de aspirina obtenida (cruda).
Agregar 3 5 gotas de Fe 2 Cl al 1%.
Hacer el mismo test con la aspirina comercial y el cido saliclico
Observar y comparar los resultados
6. RESULTADOS
Pesar el producto final y anotar
7. CUESTIONARIO
Efecte la reaccin qumica entre el cido acetil saliclico y el anhdrido actico. Describa alguna tcnica de cristalizacin Qu otros compuestos qumicos se podran utilizar para la sntesis de aspirina en lugar de anhdrido actico?. Calcular el porcentaje de rendimiento a partir del peso inicial del cido saliclico.
USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 59 PRCTICA N 11
CARBOHIDRATOS
RECONOCIMIENTO DE LOS CARBOHIDRATOS
1. INTRODUCCIN Los carbohidratos son compuestos terciarios en los cuales el hidrgeno y el oxgeno estn en igual proporcin que el agua. Los carbohidratos ms comunes son los sacridos, los que pueden presentarse como azcares simples o monosacridos, disacridos o polisacridos. Tambin reciben el nombre de glcidos (sabor dulce) o hidratos de carbono. Otros autores llaman carbohidratos a los derivados aldehdicos de o cetnicos de alcoholes polivalentes.
Los carbohidratos tienen algunas caractersticas de las funciones carbonilo y oxidrilo y todos son pticamente activos, cuando se les adiciona calor o cidos fuertes se deshidratan. Estn ampliamente distribuidos en la naturaleza y constituyen los alimentos para el hombre.
2. OBJETIVOS Identificar los principales de carbohidratos. Hidrolizar el enlace de un disacrido 3. FUNDAMENTO Reaccin de Fehling: Se basa en el carcter reductor de los monosacridos y de la mayora de los disacridos (excepto la sacarosa). Si el glcido que se investiga es reductor, se oxidar dando lugar a la reduccin del sulfato de cobre (II), de color azul, a xido de cobre (I), de color rojo-anaranjado. Reaccin del Lugol La coloracin producida por el Lugol se debe a que el yodo se introduce entre las espiras de la molcula de almidn. No es por tanto, una verdadera reaccin qumica, sino que se forma un compuesto de inclusin que modifica las propiedades fsicas de esta molcula, apareciendo la coloracin azul violeta.
USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 60 Reaccin de Molish Los di, oligo y polisacridos puede ser degradados o hidrolizados hasta transformarlos en las unidades de monosacridos que los constituyen. La hidrlisis qumica, requiere de catalizadores (cidos minerales) y de calor. La hidrlisis puede seguirse controlando algunas propiedades qumicas como el poder reductor. La hidrlisis del almidn produce azcares de peso molecular cada vez menor hasta convertirse ntegramente en monosacridos: almidn, dextrina, eritro dextrina, alfa y beta acrodextrina, maltosa y D-glucosa.
Reaccin de Bial Por accin deshidratante de los cidos 8HCl) las pentosas dan furfural que con el Orcinol y en presencia de iones frricos dan compuestos de color verde. Esta reaccin no la dan las hexosas, ya que stas al deshidratarse dan hidroximetilfurfural, el cual no da la reaccin con el Orcinol.
Reaccin de Seliwanoff El cido clorhdrico caliente del reactivo deshidrata a las cetohexosas para formar hidroximetilfurfural ms rpido que las aldohexosas correspondientes. Las cetohexosas reaccionan con el resorcinol del reactivo para dar compuestos de color rojo oscuro, las aldohexosas forman compuestos de color ligeramente rosados.
4. MATERIAL Y REACTIVOS Materiales: Tubos de ensayo, gradilla Pipetas Trpode Mechero Bunsen Beaker Rejilla con asbesto Bagueta Agua destilada Reactivos: Reactivo de Fehling A y B Reactivo De Lugol Reactivo de Bial Reactivo de Seliwanoff HCl concentrado y diludo Bicarbonato.
USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 61 Muestras de carbohidratos: Sacarosa (azcar comn) Fructosa (gaseosa) Lactosa (leche) Almidn (harina). Galactosa, xilosa, ribosa, maltosa. Solucin de almidn
5. PROCEDIMIENTO Reaccin de Fehling: o Tomar la muestra que se quiera analizar (normalmente una cantidad de 3 cc.) o Aadir 1 cc. de Fehling A y 1 cc. de Fehling B. El lquido del tubo de ensayo adquirir un fuerte color azul. o Calentar el tubo al bao Mara o directamente en un mechero de Laboratorio. o La reaccin ser positiva si la muestra se vuelve de color rojo- ladrillo. o La reaccin ser negativa si la muestra queda azul, o cambia a un tono azul-verdoso.
USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 62 Reaccin del Lugol Este mtodo se usa para identificar polisacridos. El almidn en contacto con unas gotas de Reactivo de Lugol (disolucin de yodo y yoduro potsico) toma un color azul-violeta caracterstico. o Poner en un tubo de ensayo unos 3 cc. del glcido a investigar. o Aadir unas gotas de lugol. o Si la disolucin del tubo de ensayo se torna de color azul-violeta, la reaccin es positiva.
Reaccin de Molish o En un tubo de ensayo, colocar 2 mL de cada una de las muestras indicadas, adicionar III gotas de reactivo de Molish y mezclar. Aadir en zona (dejar resbalar por las paredes del tubo, lentamente), 2 mL de cido sulfrico concentrado. o La formacin de un anillo de color prpura en la interfase indicar que la reaccin es positiva.
Figura 1 Figura 2
USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 63 Reaccin de Bial o En tubos de pruebas, colocar 2 mL de cada una de las muestras indicadas, adicionar 4 mL de reactivos de Bial, calentar en bao mara durante 10 a 15 minutos hasta ebullicin.
o La coloracin verde indica la presencia de pentosas.
Reaccin de Seliwanoff o Colocar en tubos de pruebas 5 mL de reactivo de Seliwanoff y 3 mL de las muestras indicadas, llevar a bao mara durante 4 a 5 minutos. La coloracin salmn 8rojo cereza) evidencia la presencia de cetohexosas.
Investigacin de azcares no reductores Como se vea en la experiencia 1 la sacarosa daba la reaccin de Fehling negativa, (Figura A)por no presentar grupos hemiacetlicos libres. Ahora bien, en presencia del cido clorhdrico (HCl) y en caliente, la sacarosa se hidroliza descomponindose en los dos monosacridos que la forman (glucosa y fructosa).
Tcnica: Tomar una muestra de sacarosa y aadir unas 10 gotas de cido clorhdrico al 10%. Calentar a la llama del mechero durante un par de minutos. Dejar enfriar y realizar la Prueba de Fehling. Observa el resultado (Figura B). La reaccin positiva nos dice que hemos conseguido romper el enlace O-glucosdico de la sacarosa. ( Se recomienda antes de aplicar la reaccin de Fehling, neutralizar con bicarbonato, Fehling sale mejor en un medio que no sea cido.) Figura A Figura B
USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 64
6. REGISTRO DE RESULTADOS
Muestra R. Fehling R. Lugol R. Molish R. Bial R. Seliwanoff
Investigacin de azcares no reductores
Sacarosa Positivo Negativo
7. CUESTIONARIO
1. Indicar, cules de los siguientes azcares son reductores: xilosa, manosa, alosa, saxarosa, glucgeno? 2. Cul es la principal utilidad de los siguientes ensayos: - Formacin de Osazonas. - Determinacin de la rotacin ptica. - Hidrlisis de polisacridos. 3. Determinar la rotacin especfica de los siguientes azcares: D-glucosa, D-arabinosa, D-ribosa, D-fructosa, lactosa, sacarosa, maltosa. 4. Cul es el contenido normal de azcar en la sangre humana? 5. Indicar la diferencia entre los siguientes trminos: glucemia, hipoglucemia e hiperglucemia. 6. Cules son las fuentes naturales de sacarosa, lactosa y maltosa? 7. Cul es la importancia de la Glucosa en el organismo humano?
USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 65
PRCTICA N 12
AMINOCIDOS Y PROTEINAS
RECONOCIMIENTO DE PROTEINAS
1. INTRODUCCIN
El nombre de las protenas deriva de una palabra griega que significa primero, por lo que podemos afirmar que las protenas son de vital importancia para el funcionamiento de las clulas.
Las protenas son sustancias compuestas por carbono, hidrgeno, oxgeno y nitrgeno, siendo el elemento caracterstico el nitrgeno. Frecuentemente contienen adems azufre y algunas protenas tienen otros elementos como fsforo, fierro, etc.
Son una de las molculas ms abundantes en las clulas. Son fundamentales para la estructura y funcin celular. Tambin cumple funcin de catlisis enzimtica, funciones contrctiles posibilitando as el movimiento; proteccin inmunitaria, etc. Puede decirse entonces que no existe vida sin protenas.
Las protenas se caracterizan por ser macromolculas formadas por unidades fundamentales que son los aminocidos, es por eso que son llamados polmeros de aminocidos. La cantidad de aminocidos puede variar de acuerdo a la protena. Desde el punto de vista estructural funcional, estn catalogadas como poliamidas por proceder de la unin del carboxilo (COOH-) con el grupo amino (NH 2 ) de dos alfa-aminocidos.
Las protenas son molculas anfteras, es decir, segn el nmero relativo de grupos carboxilo y amino libres, en solucin darn reaccin cido o alcalina. En otras palabras algunas molculas se cargarn positivamente y otras negativamente. El pH al cual una protena determinada es elctricamente neutra se conoce como punto isoelctrico. Todas las protenas son menos solubles cuando se encuentran en su punto isoeltrico.
2. OBJETIVOS Reconocer las protenas identificando sus caractersticas fsicas y qumicas.
USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 66 3. FUNDAMENTO 3.1 COAGULACIN DE PROTENAS Las protenas, debido al gran tamao de sus molculas, forman con el agua soluciones coloidales. Estas soluciones pueden precipitar con formacin de cogulos al ser calentadas a temperaturas superiores a los 70C o al ser tratadas con soluciones salinas, cidos, alcohol, etc. La coagulacin de las protenas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalizacin por los agentes indicados, que al actuar sobre la protena la desordenan por la destruccin de su estructura terciaria y cuaternaria.
3.2 REACCIONES COLOREADAS a. Reaccin xantoproteica Es debida a la formacin de un compuesto aromtico nitrado de color amarillo, cuando las protenas son tratadas con cido ntrico concentrado. La prueba da resultado positivo en aquellas protenas con aminocidos portadores de grupos bencnicos, especialmente en presencia de tirosina. Si una vez realizada la prueba se neutraliza con un lcali vira a un color anaranjado oscuro. b. Reaccin de Biuret La producen los pptidos y las protenas, pero no los aminocidos, ya que se debe a la presencia del enlace peptdico (- CO- NH -)que se destruye al liberarse los aminocidos. Cuando una protena se pone en contacto con un lcali concentrado, se forma una sustancia compleja denominada biuret, de frmula: USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 67
que en contacto con una solucin de sulfato cprico diluda, da una coloracin violeta caracterstica. c. Reaccin de los aminocidos azufrados Se pone de manifiesto por la formacin de un precipitado negruzco de sulfuro de plomo. Se basa esta reaccin en la separacin mediante un lcali, del azufre de los aminocidos, el cual al reaccionar con una solucin de acetato de plomo, forma el sulfuro de plomo
4. MATERIAL Y REACTIVOS Bao Mara Mechero Bunsen Beaker Rejilla con asbesto Trpode Bagueta Agua destilada Tubos de ensayo, gradilla, vaso para calentar, mechero. Acido actico HNO 3 concentrado NaOH 40% y 20% CuSO 4 1% Acetato de plomo 5% Clara de huevo
5. PROCEDIMIENTO 5.1 Coagulacin de protenas: Para ver la coagulacin de las protenas se puede utilizar clara de huevo, para conseguir ms volumen puede prepararse para toda la clase una dilucin de clara de huevo en agua, de forma que quede una mezcla an espesa. Colocar en un tubo de ensayo una pequea cantidad de clara de huevo. Aadir 5 gotas de cido actico y calentar el tubo a la llama del mechero.
USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 68
5.2 Reaccin Xantoprotica Poner en el tubo de ensayo de 2 a 3 cc. de solucin problema (clara de huevo ). Aadir 1 cc. de HNO 3 concentrado. Calentar al bao mara a 100: C.. Enfriar en agua fra Aadir gota a gota una disolucin de sosa al 40%.
5.3 Reaccin de Biuret Tomar un tubo de ensayo y poner unos 3 cc. de albmina de huevo. Aadir 2cc. de solucin de hidrxido sdico al 20%. A continuacin 4 5 gotas de solucin de sulfato cprico diluida al 1%. Debe aparecer una coloracin violeta-roscea caracterstica. USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 69
5.4 Reaccin de los aminocidos azufrados Poner en el tubo de ensayo de 2 a 3 cc. de albmina de huevo (clara de huevo). Aadir 2 cc. de solucin de hidrxido sdico al 20%. Aadir 10 gotas de solucin de acetato de plomo al 5%. Calentar el tubo hasta ebullicin. Si se forma un precipitado de color negruzco nos indica que se ha formado sulfuro de plomo, utilizndose el azufre de los aminocidos, lo que nos sirve para identificar protenas que tienen en su composicin aminocidos con azufre.
USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 70 6. REGISTRO DE RESULTADOS
Muestras Coagulacin R. Xantoproteica R. Biuret R. para aminocidos azufrados
7. CUESTIONARIO
1. Por qu el cido ntrico produce una coloracin amarilla cuando se pone en contacto con la piel?. 2. Haga una relacin de los aminocidos esenciales. 3. Cul es la importancia biolgica de las protenas?
USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 71 PRCTICA N 13
LIPIDOS
RECONOCIMIENTO DE LOS LPIDOS
1. INTRODUCCIN
Los lpidos son molculas orgnicas insolubles en agua, pero solubles en solventes orgnicos como benceno, ter, cloroformo, etc. Estos incluyen aceites (lquidos a temperatura ambiente), grasas (slidos) y ceras (slidos de ms alto punto de fusin que las grasas). Estn constituidos principalmente por carbono, hidrgeno y en menor proporcin oxgeno.
Se conoce que los lpidos son almacenados en diferentes partes del cuerpo humano y tienen gran cantidad de funciones. Algunas de ellas son: & Forman parte de la membrana celular, fundamentalmente los fosfolpidos y el colesterol. & Algunos constituyen hormonas como las hormonas sexuales. & Constituyen la reserva de energa de las clulas, principalmente los triglicridos, que al ser oxidados completamente liberan mayor cantidad de energa por unidad de peso que los carbohidratos. & Al ser oxidados liberan gran cantidad de agua. & Constituyen la grasa subcutnea en los mamferos que cumple las funciones de reserva de energa, aislamiento trmico y amortiguacin. & Algunos como las ceras cumplen la funcin de proteccin de la superficie del organismo tanto en animales como en plantas.
Todo alimento ingerido por los animales y humanos, en exceso, es transformado en grasas y se deposita en el tejido adiposo.
2. OBJETIVOS Poner de manifiesto ciertas propiedades de los lpidos, algunas de las cuales pueden servirnos para su identificacin. 3. FUNDAMENTO 3.1 SAPONIFICACIN DE LPIDOS: Las grasas reaccionan en caliente con el hidrxido sdico o potsico descomponindose en los dos elementos que la forman: glicerina y los cidos grasos. Estos se combinan con los iones sodio o potasio del hidrxido para dar jabones, que son en definitiva las sales sdicas o potsicas de los cidos grasos. USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 72 La reaccin es la siguiente:
3.2 TINCIN Las grasas se colorean en rojo anaranjado por el colorante denominado Sudan III. 3.3 SOLUBILIDAD Las grasas son insolubles en agua. Cuando se agitan fuertemente en ella se dividen en pequesimas gotitas formando una "emulsin" de aspecto lechoso, que es transitoria, pues desaparece en reposo, por reagrupacin de las gotitas de grasa en una capa que por su menor densidad se sita sobre la de agua. Por el contrario, las grasas son solubles en los llamados disolventes orgnicos como el ter, benceno, xilol, cloroformo, etc.
4. MATERIAL Y REACTIVOS Eter o cloroformo Tinta roja en cuentagotas Solucin de Sudan III Solucin de Hidrxido de sodio al 20% Aceite vegetal Bao Mara Mechero Bunsen Beaker Rejilla con asbesto Trpode Bagueta Agua destilada Tubos de ensayo, gradilla, vaso para calentar, mechero.
USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 73 5. PROCEDIMIENTO 5.1 Saponificacin: Colocar en un tubo de ensayo 2cc de aceite vegetal y 2cc de una solucin de hidrxido sdico al 20%. Agitar enrgicamente y colocar el tubo al bao Mara de 20 a 30 minutos. Transcurrido este tiempo, se puede observar en el tubo tres capas: la inferior clara, que contiene la solucin de sosa sobrante junto con la glicerina formada; la superior amarilla de aceite no utilizado, y la intermedia, de aspecto grumoso, que es el jabn formado.
Nota: Cuando ya se ha visto como se forma el jabn, se puede ir echando en un vaso de precipitado el contenido de los tubos de ensayo, se remueve bien y se deja calentar hasta que se haga un buen trozo de jabn.
USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 74 5.2 Tincin con Sudan III Proceder as: Disponer en una gradilla dos tubos de ensayo, colocando en ambos 2cc de aceite. Aadir a uno, 4 o 5 gotas de solucin alcohlica de Sudn III. Al otro tubo aadir 4-5 gotas de tinta roja. Agitar ambos tubos y dejar reposar. Se observar en el tubo al que se le aadi Sudn, que todo el aceite aparece teido. En cambio en el frasco al que se aadi tinta roja, la tinta se habr ido al fondo y el aceita aparecer sin teir.
5.3 Solubilidad de los lpidos Proceder de la siguiente manera: Tomar dos tubos de ensayo y poner en cada uno de ellos 2-3 cc de agua y en el otro 2-3cc de ter u otro disolvente orgnico. Aadir a cada tubo 1cc de aceite y agitar fuertemente. Observar la formacin de gotitas o micelas y dejar en reposo. Se ver como el aceite se ha disuelto en el ter y en cambio no lo hace en el agua, y el aceite subir debido a su menor densidad.
USMP FAC. MED. HUMANA. QUIMICA BIOLOGICA MANUAL DE LABORATORIO 75 6. REGISTRO DE RESULTADOS Y CONCLUSIONES
7. CUESTIONARIO 1. En qu consiste el proceso de enrranciamiento de una grasa?. 2. Defina ndice de saponificacin de grasa y aceites, Indice de yodo de grasa y aceites 3. Qu son los cidos poliinsaturados? Importancia.
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