MANUAL DE VIGILANCIA E HIGIENE SANITARIA (PHS) DEL

LABORATORIO DE PRODUCCIN DE SEMILLA DE

CONCHA DE ABANICO
EMPRESA ARGOPER S.A.C.
EMPRESA ARGOPER S.A.C.

ANCASH, 2012
PRESENTACIN
Este documento, es una gua para la reduccin del riesgo de enfermedades en el
cultivo en laboratorio de A. purpuratus con el correspondiente incremento en su
produccin. As mismo, ofrece la oportunidad de mejorar la bioseguridad general de
los sistemas de laboratorio, que a su vez es fundamental para asegurar la sanidad en
el proceso de produccin.
Al examinar los patrones de propagacin de las enfermedades y patgenos de la
conca de abanico!, especialmente aquellos de origen vrico, existen evidencias
concluyentes de que la mayora de los brotes principales de enfermedades est"n
asociados al movimiento de animales vivos #reproductores y larvas$. Es importante
mantener suma prudencia sobre los movimientos nacionales o regionales de
poblaciones de conca de abanico! vivas destinadas a la produccin de semilla. %in
embargo, se deberan permitir dicos movimientos siempre que se ayan realizado
una correcta cuarentena y los pertinentes cequeos
&a solucin definitiva para combatir los problemas derivados de las enfermedades es a
trav's del cultivo de stoc(s domesticados certificados, que est'n libres de patgenos
especficos, alimentados con microalgas de alto valor nutritivo en tanques bio)seguros
y bajo condiciones que no sean estresantes para la conca de abanico!. *sta debe ser
la meta final de la industria del cultivo de moluscos.
En cuanto al estr's, mientras que es imposible controlar las condiciones clim"ticas, s
se pueden controlar mucas variables importantes, como la capacidad de carga de los
tanques, la entrada de alimento y el intercambio de agua. +oy en da, aunque los
alimentos parecen ser adecuados, existe obviamente la posibilidad de mejorar su
calidad. &os mayores problemas potencialmente controlables, con los que se
encuentran los cultivadores de moluscos son tanto la incertidumbre existente sobre la
calidad de la semilla que son utilizadas en el cultivo, como la falta de bioseguridad del
ambiente en los tanques frente a la entrada de patgenos y sus portadores.
&a forma m"s sencilla de resolver el problema relativo a la calidad de la semilla es
controlando su origen mediante la utilizacin de poblaciones de reproductores
domesticados en vez de salvajes. %in embargo, esta pr"ctica precisa de considerables
esfuerzos de investigacin y de ensayos de campo y se encuentran todava en un
estado muy inicial. ,or lo menos podemos intentar asegurar la bioseguridad de los
tanques mediante el adecuado cequeo de las larvas antes de su siembra. &os
procedimientos para la deteccin de patgenos importantes en las larvas est"n ya
establecidos. -o obstante, se precisa adem"s de la formacin de personal, desarrollo
de capacidades, y de un aumento en el n.mero de laboratorios de larvas y de centros
de diagnstico.
En la actualidad, se carece de est"ndares t'cnicos armonizados sobre la produccin en
laboratorio de larvas. Es imprescindible que tales est"ndares sean desarrollados,
/

estandarizados, validados, y acordados por parte de los productores, tanto nacional
como internacionalmente.
0n factor importante es el desarrollo de las capacidades de las instituciones
nacionales, el personal involucrado, y los productores de conca de abanico!. &os
maricultores deben ser informados de las opciones y medios disponibles para
controlar los brotes de enfermedades. %e considera as mismo apropiado y oportuno el
desarrollo de buenas pr"cticas para el manejo de los laboratorios y de los cultivos, as
como su documentacin a trav's de evidencias cientficas adecuadas y datos de
campo.
1eniendo en cuenta lo arriba mencionado, se ace evidente que el medio m"s efectivo
y oportuno de afrontar la situacin existente respecto a la igiene y saneamiento, sera
a trav's del desarrollo de intervenciones para2 i$ mejorar la calidad de las larvas, ii$
fomentar la capacitacin de los maricultores y de las agencias estatales, y iii$
desarrollar una extensa red de informacin dentro de la regin.
3

INDICE
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6. 58-14690567- :E &A ,48:05567- :E 58-5+A :E A9A-658! A &A
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/<
E

I. CONTRIBUCIN DE LA PRODUCCIN DE CONCHA DE ABANICO A LA PRODUCCIN
ACUICOLA GLOBAL
&a conca de abanico!, tambi'n conocida como ostin abanico u ostin del norte est"
referida a la especie Argopecten purpuratus, un molusco bivalvo presente en toda la
zona costera peruana, la semilla se obtiene por captacin directa del ambiente natural
) denominado acuicultura basada en la captura ) y en una menor proporcin a trav's
de /algunos laboratorios que cuentan con la tecnologa para producirlos en ambientes
controlados.
El cultivo se lleva a cabo principalmente en sistemas suspendido! o denominados
long ) line! y en menor medida en sistemas de fondo!. &as fases de cultivo incluyen2
captacin de semilla, cultivo intermedio #3 a ? meses$ y engorde #? meses, asta que
alcancen = a D cm.$, culminando en la coseca. %e considera que los principales
factores que contribuyen al desarrollo de este cultivo en el pas, son la existencia de
abundante semilla de la especie en el medio natural, clima apropiado para alcanzar
tallas comerciales en corto tiempoF dominio de la t'cnica de maduracin sexual
artificialmente, alta productividad del mar peruano que provee de alimento natural a
la especie y una alta demanda con precios atractivos en el mercado internacionalF sus
principales desventajas consisten en la dependencia de las condiciones ambientales
para la obtencin de semilla y la presencia frecuente de episodios de marea roja.
&os principales pases productores de ostiones o vieiras a nivel mundial son en primer
lugar 5ina con 3,=<3 millones de 1@ seguido por 5orea con /EG,/=H 1@, Iapn con
EA=,DEA 1@, EE00 de -orteam'rica con G3=,AHD 1@ y Crancia con G<E,?E< 1@, en la
4egin de Am'rica &atina y El 5aribe el principal productor es ,er. que incluyendo la
coseca de sus "reas de repoblamiento alcanz las =D,G<G 1@ seguido por 5ile con
G?,D?G 1@F el ,er. con sus =D,G<G 1@ de conca de abanico se encuentra en el ,uesto
n.mero seis a nivel mundial y en el ,uesto n.mero uno G a nivel de la 4egional de
produccin de ostiones y vieiras.
Cua!" 1 Escenario de la conca de abanico peruano en /<G<
Volumen Cosechado en 2010 58,101 TM
Valor de exportacin en 2010 96,427 millones de dlares
Principales destinos en 2010 Francia, EEUU, Pases Baos, B!l"ica, e#c$
Ranking mundial de ostiones y vieiras P%es#o &' 6 (1' )*ina, 2' )orea, +' ,a-n, 4'
Francia, 5' EEUU &or#eam!rica, 9' )*ile, e#c$.
Ranking en Amrica atina y el Cari!e P%es#o &' 1 (2' )*ile, 2' M!/ico, +' Brasil, e#c$.
"uente# "ishstat Plus $ "A%
=

II. CULTIVO DE CONCHA DE ABANICO# CUESTIONES SANITARIAS
&a industria del cultivo de conca de abanico! en el ,er. se a desarrollado y
emergido como una de las mayores fuentes de ingreso de divisas extranjeras del ,as.
6nicialmente, los productores de conca de abanico! dependan casi por entero de la
extraccin de semillas de los bancos naturales. %in embargo, las variaciones
estacionales y anuales de las capturas de semillas, originaron el desarrollo de
laboratorios de semillas #atcery$ de conca de abanico! donde la produccin de
larvas se poda llevar a cabo bajo condiciones controladas.
Estos laboratorios usan reproductores suministrados de los bancos naturales o por los
pescadores. &as fluctuaciones en las capturas de semillas y reproductores del medio
natural, debidas al fenmeno de El -iJo influyeron enormemente en el desarrollo de
los laboratorios. 1anto los bajos precios de las semillas en los aJos en los que la semilla
colectada era abundante, como la impresin de que 'stos eran m"s fuertes que los
domesticados, fueron los factores por los que mucos laboratorios se encontraron
con dificultades financieras. ,or otro lado, en los aJos en los que las semillas
colectadas escaseaban, los producidos en laboratorio podan ser vendidos a un precio
superior. A pesar de esto, mucos laboratorios de semillas experimentaban problemas
debido a la imprevisible situacin del mercado.
En los .ltimos tiempos, las enfermedades, o m"s concretamente, los problemas
sanitarios presentes en el cultivo, produjeron un renacimiento del inter's por las
semillas producidas en laboratorio. &a creencia ampliamente extendida de que la
conca de abanico! de ciertos zonas era menos sensible al ataque de patgenos que
aquellos procedentes de otras "reas, motivo el comercio lucrativo de semilla.
:esafortunadamente, la aparicin cada vez mas frecuente de conca de abanico!
infestada con Polydora sp., revel a los operarios de laboratorio locales la posibilidad
de que estas infecciones podran ser propagadas por transferencias de organismos de
una zona a otra si no eran sometidas a una regulacin y control apropiado.
Al mismo tiempo, varios productores an estado experimentando con la reproduccin,
en el intento de desarrollar larvas de conca de abanico! con mayor resistencia a
enfermedades. El riesgo de transmisin vertical, aceleraron este proceso despertando
un mayor inter's por estudios de gen'tica y reproduccin. &os operarios de laboratorio
sometieron a examen sus operaciones, centr"ndose en mejorar la bioseguridad y el
manejo sanitario de sus sistemas de produccin.
En la actualidad, la mayora de los pases latinoamericanos an empezado programas
de domesticacin y seleccin gen'tica, utilizando en los sistemas de maduracin,
reproductores criados en tanques, con el objetivo de estabilizar las previsiones y de
mejorar la resistencia a enfermedades y la tasa de crecimiento de sus poblaciones.
0tilizando reproductores procedentes de diferentes bancos naturales, con la intencin
de asegurar una amplia variabilidad gen'tica en los stoc(s.
?

III. LABORATORIO DE PRODUCCIN DE SEMILLA DE CONCHA DE ABANICO DE LA
EMPRESA ARGOPER S.A.C.
El distrito de %amanco donde se ubica el atcery, tiene una superficie de GE DAE,DA
+as., se encuentra ubicado en la parte central del departamento de Ancas, entre las
coordenadas <HK GAL % y ADK /HL 8.
El centro de produccin de semilla de Argopecten purpuratus conca de abanico! de
la empresa A4;8,E4 %.A.5. esta instalado a /Mm del distrito de %amanco, localizado en
la coordenadas <HK GAL 3/.33! % y ADK /HL 3H.3A! 8, en playa @ar 9rava, ,rovincia de
%anta, :epartamento Ancas, en el permetro del proyecto no se encuentran otras
concesiones terrestres, siendo el "rea donde se ubicar" el proyecto de ?,H/G= +a. #Cig.
/< y /G$.
$%&. 1 @apa de ubicacin del laboratorio de produccin de semilla conca de
abanico! en la baa de %amanco.
A

IV. RE'UISITOS PARA UNA PRODUCCIN DE LABORATORIO E$ECTIVA
5on la intencin de ofrecer un manual pr"ctico y adecuado para la gestin del
laboratorio de semilla de conca de abanico!, es necesario primeramente revisar
algunos requisitos b"sicos para un sistema efectivo de produccin semilla. Estos
requisitos incluyen2 la presencia de una infraestructura b"sica, el desarrollo de unos
9uenas ,racticas de @anejo #9,@$ #incluyendo el An"lisis de peligro y de puntos
crticos de control N+A55,O$, el mantenimiento de la bioseguridad, el
aprovisionamiento de las cantidades adecuadas de agua limpia, el uso responsable de
productos qumicos, y la garanta del estado sanitario de las poblaciones de conca de
abanico! a trav's de pruebas de laboratorio. @ucos de estos componentes son
examinados con mayor detalle en secciones posteriores de este documento.
(.1. I)*!a+,-!u.-u!a
L", /a0"!a-"!%", + ,+1%//a, -%+)+) 2u+ +,-a! 0%+) %,+3a", 4 -+)+! /a
%)*!a+,-!u.-u!a a+.uaa, 5u+,-" 2u+ 6,-", -%+)+) u) %15a.-" %15"!-a)-+ +) /a
.a)-%a 4 /a .a/%a + /a, ,+1%//a, 5!"u.%a,.
El laboratorio ser" modificado para asegurar una buena bioseguridad, eficiencia,
efectividad de costos e implementacin de 9uenas ,racticas de @anejo #9,@$ &os
requisitos de la infraestructura para una bioseguridad satisfactoria en el
funcionamiento del laboratorio ser"n discutidos bajo los encabezamientos
pertinentes a lo largo de esta seccin.
L", /a0"!a-"!%", + /a!7a, + .").8a + a0a)%." +0+) +,-a! ."),-%-u%", 5"!
7a!%a, u)%a+,, .aa u)a %,5")%+)" + /a %)*!a+,-!u.-u!a a5!"5%aa
El laboratorio constar" de unidades separadas de cuarentena, aclimatacin, desove y
fertilizacin, cra de larvas y fijacin, cultivo de algas. Adicionalmente, existe
infraestructura de soporte para el manejo del agua #instalaciones de toma de agua,
almacenaje, filtracin, aireacin, calefaccin, y distribucin$, y de alimentacin
#laboratorios de microalgas$, as como "reas de mantenimiento, oficinas, almacenes,
y "reas destinadas al personal.
U) 0u+) %,+3" + /a0"!a-"!%" +0+ %)./u%! /a ,+5a!a.%9) *:,%.a " a%,/a1%+)-" + /a,
%*+!+)-+, %),-a/a.%")+, + 5!"u..%9) 4 u) 5+!:1+-!" + ,+&u!%a +*+.-%7".
&a separacin fsica o aislamiento de las diferentes instalaciones de produccin es
significativo de un buen diseJo de laboratorio y ser" incorporado en las nuevas
construcciones. As como la implementacin de controles de los flujos de procesos y
D

de productos. &as instalaciones cuentan con una pared alrededor de la periferia de la
propiedad, con la altura suficiente para evitar la entrada de animales y personas no
autorizadas. Esto ayudar" a reducir el riesgo de introduccin de patgenos por esta
va, as como a mantener la seguridad general de las instalaciones.
D+0+ +;%,-%! u)a u)%a + .ua!+)-+)a 5a!a /a, )u+7a, %)-!"u..%")+, +
!+5!"u.-"!+, 5a!a 1%)%1%<a! /a, 5",%0%/%a+, + %)*+.-a! /", !+5!"u.-"!+,
+;%,-+)-+, a -!a76, + /", )u+7", a)%1a/+,.
&a cuarentena de todos los animales que van a ser introducidos por primera vez en el
laboratorio es una medida esencial de bioseguridad. Antes de pasar al sistema de
produccin, los reproductores tienen que ser cequeados en busca de infecciones.
&os reproductores con infecciones graves sin posible tratamiento ser"n destruidos
inmediatamente y slo los animales libres de patgenos ser"n introducidos en la
unidad de aclimatizacin.
(.2. Ca/%a +/ a&ua 4 -!a-a1%+)-"
L", ,%,-+1a, + -!a-a1%+)-" +/ a&ua +0+) ,+! %,+3a", 5a!a 5!"5"!.%")a! a&ua
".+=)%.a + a/-a .a/%a.
El agua para el laboratorio es filtrada y tratada para prevenir la entrada de vectores
y patgenos que puedan estar presentes en la fuente de agua. Esto se puede
conseguir mediante el filtrado inicial a trav's de filtro de arena. %eguidamente a la
desinfeccin primaria por cloracin, el agua es filtrada otra vez con un filtro m"s fino
y luego desinfectada mediante luz ultravioleta #0>$. El uso de filtros de carbn
activado y la regulacin de temperaturaPsalinidad ser"n tambi'n considerados
dentro del sistema de abastecimiento de agua.
E/ %,+3" +/ ,%,-+1a + %,-!%0u.%9) + a&ua +0+ -+)+! +) .u+)-a +/ )%7+/ +
0%",+&u!%a !+2u+!%" +) /a, =!+a, +) /a, 2u+ +/ a&ua +, %,-!%0u%a.
5ada unidad funcional del sistema del laboratorio tendr" un tratamiento de agua
apropiado y, cuando sea necesario, ser" aislada del agua suministrada para otras
"reas #por ejemplo, "reas de cuarentena$. %e utilizara sistemas de recirculacin
separados en parte o en todo el laboratorio para reducir el gasto de agua y aumentar
adem"s la bioseguridad, especialmente en "reas de alto riesgo.
T"a +/ a&ua 2u+ ,+ 7%+!-+ +,+ /a %),-a/a.%9) +0+ +,-a! /%0!+ + 5a-9&+)",.
H

1odo el agua vertida desde el laboratorio, particularmente aquella que se sabe o se
sospeca que puede estar contaminada #por ejemplo, las aguas procedentes de las
"reas de cuarentena$ ser" retenida temporalmente y tratada con una solucin de
ipoclorito #Q/< ppm de cloro activo durante al menos ?< min.$ o cualquier otro
desinfectante efectivo antes de ser vertida. Esto es particularmente crtico en los
casos donde el agua es vertida en el mismo lugar de la toma de agua. &os
procedimientos de tratamiento del agua m"s especficos usados en cada fase se
explican en detalle en las secciones correspondientes.
(.> B%",+&u!%a
E, %)%,5+),a0/+ ."),+&u%! u)a 0u+)a 0%",+&u!%a 5a!a /"&!a! /a 5!"u..%9) +
/a!7a, ,a)a,
&a bioseguridad a sido definida como RSel conjunto de pr"cticas que reducir"n la
probabilidad de introduccin de patgenos y la subsiguiente propagacin de un sitio
a otroST #&otz, GHHA$. &os elementos b"sicos de un programa de bioseguridad
comprenden los m'todos fsicos, qumicos y biolgicos necesarios para proteger el
laboratorio de las consecuencias de todas aquellas enfermedades que representan
un alto riesgo. 0na bioseguridad efectiva supone tener en cuenta un rango de
factores, tanto especficos como no especficos de enfermedades, desde los
puramente t'cnicos asta aspectos econmicos y de gestin. ,ueden ser empleados
distintos niveles y estrategias de bioseguridad dependiendo de las instalaciones de
laboratorio, del tipo de enfermedad y del grado de riesgo percibido. El nivel
apropiado de bioseguridad aplicado estar" en funcin generalmente de la facilidad y
costo de su implementacin, y relativo al impacto de la enfermedad en las
operaciones de produccin #Cegan y 5lifford, /<<G$. 0n funcionamiento responsable
del laboratorio tiene que considerar tambi'n el riesgo potencial de propagacin de
enfermedades al medio natural, y sus efectos en los cultivos acucolas colindantes y
de la fauna salvaje.
(.(. Bu+)a, P!=.-%.a, + Ma)+?" (BPM)
Caa /a0"!a-"!%" +0+ +,a!!"//a! ,u 5!"5%" 1a)ua/ + Bu+)a, P!=.-%.a, + Ma)+?"
(BPM)
&as 9uenas ,r"cticas de @anejo #9,@$ resumen el protocolo de control para el
laboratorio, ser"n descritos en un documento detallado que cubra cada etapa o
proceso del ciclo de produccin. El documento incluir" detalles de todos los puntos
crticos de control #55,$ y describir" como realizar cada tarea para controlar el riesgo
asociado. 0na vez que el manual esta elaborado, ser" repartido a todo el personal,
as como dejara una copia a disposicin de todos los trabajadores en un lugar
accesible #comedor, sala de reunin, etc.$. %e organizara una reunin para explicar la
necesidad y los contenidos del manual 9,@, siendo una buena oportunidad para
G<

identificar y explicar cualquier punto que genere dudas o que pueda generar
confusinF se puede aprovecar tambi'n para recoger ideas pr"cticas procedentes
del personal de laboratorio.
A medida que se dispone de nueva informacin, de ser necesario se actualizar o
modificar el 9,@, y estos cambios tienen que ser comunicados a todo el personal.
5ualquier versin actualizada de los 9,@ debe tener la feca de la modificacin y
una clara referencia de que la nueva versin suplanta a todas las anteriores.
T"", /", -!a0a?a"!+, +0+) *%!1a! u) ".u1+)-" 2u+ %)%2u+ 2u+ 8a) /+:" 4
+)-+)%" /a, BPM, 4 2u+ .u15/%!=) /", !+2u%,%-",
1odas las descripciones de los trabajos de la gestin de laboratorio y del personal
incluir"n una cl"usula relativa al seguimiento de las 9,@, as como las consecuencias
disciplinarias por su incumplimiento.
La *"!1a.%9) 5a!a +/ 1a)-+)%1%+)-" + /a 0%",+&u!%a +0+ ,+! u) ."15")+)-+
%15"!-a)-+ +/ 5!".+," + /a0"!a-"!%".
Es aconsejable tener un grupo de gente con una formacin o experiencia t'cnica m"s
elevada, que pueda supervisar y formar a los trabajadores en la ejecucin de cada
paso de las 9,@. Este punto es de una importancia fundamental, pues puede ser que
los trabajadores no comprendan la importancia ni de los est"ndares requeridos ni de
los riesgos por su incumplimiento para el 'xito del laboratorio. Este personal t'cnico
tiene que organizar reuniones con los trabajadores de cada departamento para
explicar y discutir la importancia de la ejecucin de las 9,@.
E/ !%+,&" + 0%",+&u!%a 2u+ !+5!+,+)-a .aa =!+a +/ /a0"!a-"!%" +0+ ,+!
+-+!1%)a".
:iferentes "reas del laboratorio pueden ser clasificadas de acuerdo con el nivel de
riesgo de introduccin o propagacin de enfermedades. Ueiric et al. #en prensa$
utilizaron este sistema para describir cuatro clasificaciones2
Vreas de cuarentena donde patgenos relevantes est"n potencialmente presentes
o se presume su presencia,
Vreas de alta sensibilidad que requieren una exposicin mnima para evitar la
introduccin o propagacin potencial de patgenos,
Vreas de sensibilidad media con un riesgo m"s bajo de introduccin o propagacin
de patgenos, y
GG

Vreas de baja sensibilidad donde el riesgo de introduccin o propagacin de
patgenos es poco probable.
Estas clasificaciones pueden ser modificadas si es necesario, y los cambios reflejados
en una versin actualizada de las 9,@. ,ara prevenir la introduccin o propagacin
de patgenos, se pueden adoptar protocolos especficos y restricciones en cada uno
de estos niveles de bioseguridad.
(.@. A)=/%,%, + 5+/%&!", 4 + 5u)-", .!:-%.", + .")-!"/ (HACCP)
E/ +,a!!"//" + %15/+1+)-a.%9) + 5!"-"."/", + 0%",+&u!%a ,+ 5u++ *a.%/%-a!
1+%a)-+ +/ ,%,-+1a +/ A)=/%,%, + 5+/%&!", 4 + 5u)-", .!:-%.", + .")-!"/ (HACCP)
El +A55, es un sistema preventivo de gestin de riesgos que a sido utilizado
ampliamente para identificar y controlar los peligros en los sistemas de procesado de
alimentos para la salud p.blica. %e fijan lmites crticos para cada uno de los puntos
crticos de control #55,$ del sistema donde se tienen que realizar controles para
prevenir, eliminar o reducir los riesgos.
,osteriormente se realiza un seguimiento y las acciones correctivas adecuadas son
implementadas. &os principios del +A55, an sido adoptados como erramientas de
gestin del riesgo para controlar infecciones en las instalaciones de investigacin y
de produccin de conca de abanico!.
E/ a)=/%,%, HACCP -a10%6) 5u++ ,+! u-%/%<a" +) /a 5!"u..%9) + .").8a +
a0a)%.", .") u) 6)*a,%, 5a!-%.u/a! +) /a !+u..%9) " 5!+7+).%9) +/ !%+,&" +
+)*+!1+a+,
El m"ximo de bioseguridad en las instalaciones de produccin de semilla se puede
alcanzar mediante la separacin de las fases de reproduccin, atcery y produccin.
0n buen diseJo de las instalaciones, con un alto grado de aislamiento, puede ayudar
a reducir el riesgo de transferencia de patgenos de los reproductores a su
descendencia. &os puntos crticos de control identificados el atcery son2 la conca
de abanico!, el alimento y el agua. 8tros riesgos potenciales que son tenidos en
cuenta durante la implementacin de los 9,@ y del +A55, son2 los vectores de
enfermedad #umanos y animales$, las instalaciones y el equipo.
S+ +0+!:a .!+a! u) %a&!a1a + */u?", 5a!a +-a//a! -"a, /a, "5+!a.%")+, + /a,
%),-a/a.%")+, +/ /a0"!a-"!%" 4 +/ 1"7%1%+)-" + !+5!"u.-"!+, 4 /a!7a,, a -!a76,
+/ ,%,-+1a + 5!"u..%9).
,ara cada operacin, desde la recepcin de los reproductores pasando por el desove,
la cra de larvas, y post larvas #donde sea oportuno$, se deben identificar2 todos los
G/

riesgos potenciales, los impactos en la salud y la calidad de las larvas, y los puntos de
entrada de patgenos. &os puntos crticos de control #55,$ deben ser identificados
mediante este an"lisis sistem"tico de los riesgos. ,ara cada 55,, se tienen que
establecer los lmites crticos y, donde estos lmites sean excedidos, determinarse las
acciones correctivas apropiadas. %e tiene que establecer un sistema de seguimiento
de los 55, junto con un buen sistema de documentacin y de registro.
L", 5u)-", .!:-%.", + .")-!"/ (CCP) -%+)+) 2u+ ,+! %+)-%*%.a", +) .aa =!+a
,ara "reas diferentes como la de cuarentena, desove, atcery, cultivo de
microalgas, etc. es necesario identificar los puntos crticos de control. &as siguientes
etapas pueden ser consideradas como 55,. Es necesario tener en cuenta que 'stas
pueden no ser las .nicas y que pueden variar de un sitio a otro.
Entrada a la instalacin2 5ontrolar la entrada de operarios, administrativos,
veculos y otros vectores de enfermedad, para prevenir la propagacin de
infecciones procedentes de otros laboratorios de semilla y del ambiente en
general.
1ratamiento del agua2 1odo el agua utilizada en las unidades de produccin tiene
que ser tratada #cloro, ozono, filtracin, etc.$ apropiadamente #en funcin de la
etapa$ para eliminar los patgenos y a sus portadores.
:esove2 &a cuarentena de los reproductores recibidosF la inspeccin y desinfeccin
del alimento vivoF la limpieza de los tanques y de las conducciones de agua y aireF
y la desinfeccin de los reproductores, larvas y el equipo.
&aboratorio2 ,erodos de secado regularesF limpieza y desinfeccin de edificios,
tanques, filtros, conducciones de agua y aire y equipoF control de calidad y
desinfeccin de los alimentos vivos #microalgas$F separacin de los materiales de
trabajo en cada sala y en cada tanque.
@icroalgas2 Entrada restringida de personal al laboratorio y a las instalaciones de
tanques de microalgasF desinfeccin de equipo, agua y aireF saneamiento y control
de la calidad de las microalgas y de los productos qumicos usados.
4estriccin de la entrada al laboratorio en general y a cada "rea en particular al
personal autorizado2 1odos los empleados y el personal administrativo que entre
en las "reas de produccin tienen que cumplir las 9,@.
L", -!a0a?a"!+, +/ /a0"!a-"!%" -%+)+) 2u+ 5+!1a)+.+! +) ,u =!+a + -!a0a?"
+,5+.:*%.a.
G3

&os trabajadores del laboratorio tienen que permanecer en sus "reas especficas de
trabajo y no deben estar autorizados a moverse libremente a otras "reas que no les
an sido asignadas. 0na forma pr"ctica de lograrlo es proporcionando uniformes de
colores diferentes para cada "rea. Esto permitir" la r"pida identificacin de la gente
que se encuentre en "reas que no le son permitidas.
La, BPM +0+) 5/a)-+a! /", !%+,&", +0%", a /", +15/+a", .u4a, *u).%")+,
!+2u%+!a) + ,u 5a," a -!a76, + =!+a, +/ /a0"!a-"!%" .") %,-%)-a, ./a,%*%.a.%")+,
+ 0%",+&u!%a
,or ejemplo, se puede mantener la comunicacin entre los empleados que trabajan
en diferentes "reas, mientras se limita el movimiento entre las diferentes "reas del
laboratorio, mediante la abilitacin de un "rea central donde los empleados puedan
reunirse para discutir y planear los programas de trabajo, y mediante la
comunicacin por sistemas de intercomunicacin, radios, mensajes de texto,
tel'fonos mviles, o una red de "rea local para el sistema de ordenadores.
T"", /", +15/+a", -%+)+) 2u+ -"1a! /a, 5!+.au.%")+, ,a)%-a!%a, a+.uaa, a/
+)-!a! 4 ,a/%! + /a u)%a + 5!"u..%9)
&os empleados llevan botas de goma para entrar en las "reas de produccin. &as
unidades de produccin #cultivo larvario, desove, cultivo de microalgas, etc.$ tienen
una sola entradaPsalida para evitar tr"fico innecesario a trav's de la sala. &a entrada
dispone de un lavapies con una solucin de ipoclorito de calcio #o sodio$ con una
concentracin final de ingrediente activo no inferior a =< ppm. Esta solucin
desinfectante tiene que ser remplazada cada vez que sea necesario. Al lado de la
puerta de entrada, cada abitacin tiene un recipiente con una solucin de yodo),>,
#yodo povidona$ de /< ppm yPo con un A<W de alcool, y el personal tiene que
lavarse las manos en la solucin#es$ al entrar o salir de la sala.
S+ -%+)+ 2u+ -+)+! +,5+.%a/ .u%a" .") /a +)-!aa + 7+8:.u/", (5+!,")a/+, " 5a!a
+/ -!a),5"!-+ + ,+1%//a) 4a 2u+ 5u++) 8a0+! 7%,%-a" "-!", 8a-.8+!4 4 .+)-!", +
.u/-%7" a)-+, + ,u //+&aa.
1odos los veculos pasan por una zona de lavado de ruedas con las dimensiones
suficientes como para asegurar su limpieza completa. Esta zona de lavado tiene que
ser rellenada regularmente con una solucin desinfectante efectiva #como
ipoclorito de sodio #o de calcio$ con QG<< ppm de ingrediente activo$.
La +)-!aa + 7+.-"!+, 5"-+).%a/+, + +)*+!1+a +)-!" + /a, %),-a/a.%")+, +/
/a0"!a-"!%" -%+)+ 2u+ ,+! .")-!"/aa.
GE

Algunos infecciones son encontradas en animales terrestres, tales como perros,
insectos y aves #&igtner, GHH?F &igtner et al., GHHAF ;arza et al., GHHA$. Aunque no
es posible controlar todos los vectores potenciales de origen animal, su entrada
puede ser minimizada mediante el uso de barreras fsicas como cercados. As mismo,
se usan redes o mallas para impedir la entrada de aves e insectos. ,or otro lado, se
evita el paso de animales acu"ticos asegurando la no)existencia de vas directas con
las aguas abiertas, especialmente a trav's de conductos de entrada y canales de
drenaje. 1odo el agua que entre en las instalaciones es filtrada y desinfectada, y
todos los canales de drenaje son revisados yPo cubiertos, donde sea posible, para
prevenir la entrada y el alojamiento de animales acu"ticos salvajes.
(.A U," + 5!"u.-", 2u:1%.", u!a)-+ +/ 5!".+," + 5!"u..%9) +) /a0"!a-"!%"
L", 5!"u.-", 2u:1%.", -%+)+) 2u+ ,+! u,a", + *"!1a !+,5"),a0/+ u!a)-+ +/
5!".+," + 5!"u..%9) +) +/ /a0"!a-"!%".
&os productos qumicos #por ejemplo desinfectantes, drogas, antibiticos, ormonas,
etc.$ son utilizados de varias formas en el proceso de produccin en el laboratorio,
donde aumentan la eficiencia y reducen los residuos de otros recursos. %on con
frecuencia, componentes esenciales en actividades rutinarias como la construccin
de tanquesF el manejo de la calidad del aguaF el transporte de reproductores, larvasF
cultivo de microalgasF la manipulacin y mejora de la reproduccinF el desarrollo del
crecimientoF el tratamiento de enfermedades, y el manejo sanitario general.
%in embargo, los productos qumicos tienen que ser usados de una manera
responsable, ya que representan determinados riesgos para la salud umana, otros
sistemas de produccin acu"ticos y terrestres, y el medio natural2
4iesgos para el medio ambiente, como los efectos potenciales de los productos
qumicos de la acuicultura en la calidad del agua y los sedimentos #enriquecimiento
de nutrientes, carga de materia org"nica, etc.$, las comunidades acu"ticas
naturales #toxicidad, cambios en la estructura de la comunidad y los
correspondientes impactos en la biodiversidad$, y los efectos en los
microorganismos #alteracin de las comunidades microbianas$
4iesgos para la salud umana, como los peligros a los que se ven sometidos los
trabajadores de la acuicultura al manejar los aditivos de las dietas, terap'uticos,
ormonas, desinfectantes y vacunasF el riesgo de desarrollar cepas de patgenos
resistentes a los antibiticos utilizados en medicina umanaF y los peligros para los
consumidores por la ingestin de productos acucolas que contengan niveles altos
de residuos qumicos que sean inaceptables.
4iesgos para los sistemas de produccin de otras especies dom'sticas, como a
trav's del desarrollo de bacterias resistentes a drogas que puedan causar la
enfermedad en aves de corral o ganado.
G=

,or estas razones, se considera esencial lo siguiente2 que slo al personal de
laboratorio calificado y adecuadamente formado se le permita el manejo de estos
productos qumicosF que los productos qumicos usados para una situacin particular
sean los m"s adecuadosF y que se usen de la manera correcta #Ej. cantidad, duracin
y condiciones del tratamiento$.
Antes de usar los productos qumicos, se considera si otras intervenciones m"s
respetuosas con el medio ambiente pudieran ser igualmente efectivas. El uso y
almacenaje seguro y efectivo de los productos qumicos debe ser un componente
integral de las 9uenas ,r"cticas de @anejo #9,@$ de los laboratorios de larvas. 0na
revisin detallada del uso de productos qumicos en sistemas acucolas, se puede
encontrar en Artur et al. #/<<<$.
El 5uadro G presenta un resumen de los nombres de los productos qumicos
mencionados en este documento y de cmo son usados en la produccin en
laboratorio en Am'rica &atina.
G?

Cua!" 1 4esumen de productos qumicos y usos mencionados en este
documento
USO EN LABORATORIOS PRODUCTOS
'UBMICOS
CONCENTRACIN RECOMENDADA
(PARTES DE INGREDIENTE ACTIVO)
:esinfeccin del flujo entrante de
agua de mar
+ipoclorito de sodio
/
:esinfeccin del flujo entrante de agua de
mar /< ppm durante mnimo 3< min #o G<
ppm durante mnimo 3< min$
Buelacin de metales pesados en el
flujo entrante de agua de mar
E:1A :epende de las concentraciones de metales
pesados en el agua
:esinfeccin del agua residual +ipoclorito de sodio Q/< ppm durante mnimo ?< min.
:eterminacin de la presencia de
cloro en el agua
8rto)toluidina 3 gotas en = mlde muestra de agua
3
-eutralizacin del cloro en el agua
residual
1iosulfato de sodio G ppm por cada Gppm de cloro residual
Buelacin de metales pesados en2
agua de los tanques de reproductores
y agua del tanque de desove
E:1A %e determina en funcin de la carga de
metales pesados en cada lugar, asta /<ppm
o ambos /<)E< ppm
:esinfeccin de los reproductores a la
entrada de la cuarentena
Xodo),>,
Cormalina
/< ppm
=<)G<< ppm
:esinfeccin de reproductores
siguiendo al desove
Xodo),>, /< ppm durante G= sg #baJo$
&avado y desinfeccin de los uevos Xodo),>, o
Cormalina, y
1reflan
=<)G<< ppm x G)3 min, #o durante G<)?< sg$
G<< ppm durante 3< sg
<.<=)<.G ppm #para reducir las infecciones por
ongos$
Eliminacin de las larvas desecadas +ipoclorito de sodio /< ppm
4etirada del fouling epibionte de las
postlarvas
Cormalina +asta /<)3< ppm durante G ora con fuerte
aireacin
1est de estr's de las postlarvas
E
Cormalina 3< min.
1ratamiento de agua en los tanques
de desove y eclosin
1reflan <.<=)<.G ppm
&avapies %olucin ipoclorito
de sodio #5alcio$
Q=< ppm #o QG<< ppm$
:esinfeccin del equipo
#contenedores, mangueras, redes,
etc.$
+ipoclorito de sodio
Vcido muri"tico
/< ppm #o 3< ppm$
G<W solucin
:esinfeccin de las manos Xodo),>,
Alcool
/< ppm
A<W
&impieza y desinfeccin de los tanques
de desove, y larvas
+ipoclorito de sodio
yPo Vcido muri"tico
?
3< ppm # o /<)3< ppm$
G<W solucin #p+ /)3$
:esinfeccin de los tanques
previamente limpiados y
desinfectados antes de empezar un
nuevo ciclo
Vcido muri"tico G<W solucin
:esinfeccin de los tanques de cultivo
de algas
+ipoclorito de sodio
Y Vcido muri"tico
G< ppm
G<W solucin
:esinfeccin de los filtros de arena +ipoclorito de sodio
o Vcido muri"tico
/< ppm
G<W solucin #p+ /)3$
:esinfeccin de los filtros de cartuco +ipoclorito de sodio
o Vcido muri"tico
G< ppm
G<W solucin #p+ /)3$ durante G ora
&avado del equipo de preparacin de
alimento
Xodo),>, /< ppm
2# " 8%5"./"!%-" + .a/.%"
># La 5!+,+).%a + ./"!" ,+ %)%.a 5"! u) ."/"! a1a!%//"
(# E/ .a10%" + ,a/%)%a -a10%6) 5u++ ,+! u,a"
A# E) +/ 5a,a", +/ =.%" 1u!%=-%." ,+ !+*+!:a a >#1 HC/ 4 HNO
>
, 5+!" a.-ua/1+)-+ ,+ !+*%+!+ a >(C>DE HC/
GA

(.D E7a/ua.%9) ,a)%-a!%a
La, +7a/ua.%")+, ,a)%-a!%a, !u-%)a!%a, +0+) ,+! u) ."15")+)-+ + u) 0u+)
1a)+?" +/ /a0"!a-"!%"
&as t'cnicas de evaluacin sanitaria para laboratorios de larvas descritas abajo, est"n
divididas en tres categoras #niveles$ basadas en la experiencia adquirida durante las
actividades de manejo sanitario de animales acu"ticos en Asia. El sistema fue
desarrollado para medir la capacidad de diagnostico necesaria para identificar
enfermedades de los animales acu"ticos. :e esta manera, las t'cnicas com.nmente
empleadas en laboratorios de larvas semilla de conca de abanico! se encuentran
dentro de estas tres mismas categoras b"sicas. &os detalles de los diferentes niveles
de t'cnicas de evaluacin son mostrados en CA8P-A5A, #/<<<, /<<Ga, /<<Gb$, que
ofrecen una simple y conveniente clasificacin basada en la complejidad de las
t'cnicas utilizadas #5uadro /$.
Cua!" 2 :escripciones del nivel de diagnstico adaptadas para su uso en los
sistemas de laboratorio de camarn.
N%7+/ 1 8bservacin del animal y su entorno. Examen basado en caractersticas
observables a simple vista
N%7+/ 2 Examen m"s detallado usando microscopio de luz, montajes en fresco con o sin
tincin y bacteriologa b"sica
N%7+/ > 0so de m'todos m"s complejos como t'cnicas moleculares y de
inmunodiagnstico #Ej. ,54, dot blots etc.$
T6.)%.a, + +7a/ua.%9) ,a)%-a!%a + N%7+/ 1
&as t'cnicas de -ivel G se emplean abitualmente en la mayora de los laboratorios
de post larvas. El examen detallado de grandes cantidades de larvas no es pr"ctico y
los operadores y t'cnicos de laboratorio usan frecuentemente la t'cnica de -ivel G
para adquirir una idea preliminar del estado de salud de las larvas y ordenar el
examen m"s detallado atendiendo a las prioridades definidas. &as observaciones de
-ivel G tambi'n son con frecuencia, suficientes para tomar una decisin sobre el
destino de un estanque o lote de larvas de laboratorio. &a seleccin de larvas, por
ejemplo, incluye generalmente una decisin basada en la respuesta foto t"ctica sin la
necesidad de un examen microscpico m"s detallado.
T6.)%.a, + +7a/ua.%9) ,a)%-a!%a + N%7+/ 2
&as t'cnicas de -ivel / tambi'n son utilizadas con frecuencia en el proceso de toma
de decisiones para la gestin de laboratorios de larvas. 1odos o la mayora de los
laboratorios de larvas dispondr"n de un microscopio utilizado para realizar ex"menes
m"s detallados de la condicin de las larvas, y observar directamente distintos
aspectos relacionados con el estado de salud #limpieza, comportamiento alimenticio,
digestin, etc.$. @ucos laboratorios de larvas tambi'n emplean bacteriologa b"sica
GD

de forma rutinaria, para adquirir conocimiento sobre la flora bacteriana de los
tanques y para identificar posibles patgenos cuando las larvas se debilitan o
enferman. Esta informacin puede ser luego usada para decidir si el tanque debe ser
recazado o tratado.
T6.)%.a, + +7a/ua.%9) ,a)%-a!%a + N%7+/ >
&as t'cnicas de -ivel 3 est"n empezando a ser utilizadas m"s com.nmente en los
laboratorios de larvas. &os m'todos de 4eaccin en 5adena de ,olimerasa #,54$, dot
blot y otros tests de inmunodiagnstico son usados para el cequeo de
enfermedades virales en larvas y reproductores. &os distintos usos de estas
diferentes t'cnicas de diagnstico en los laboratorios de larvas son presentados en la
5uadro 3.
Cua!" > 0so de -iveles G, / y 3 de diagnstico en laboratorios de postlarvas.
N%7+/ 1
Examen del estado de salud general de los reproductores, determinacin del sexo,
estadio de desarrollo gonadal, retirada de ejemplares enfermosPmoribundos.
%eleccin de cepas de microalgas, observacin de la alimentacin en el estadio larvario a
trav's de las ebras fecales, actividad larval, actividad y comportamiento de postlarvas,
tests de estr's
N%7+/ 2
Examen de la calidad de los uevos a trav's del microscopio. 5equeo de la flora
bacteriana de los animales normales o moribundos.
Examen microscpico de la calidad de las larvas. Examen microscpico rutinario de la
condicin de las larvas y de la calidad de las postlarvas. 5equeo de la flora bacteriana o
del agua de cra y larvas.
N%7+/ > 5equeo de los reproductores mediante dot blot o ,54
5equeo de las postlarvas mediante dot blot o ,54.
GH

V. PROCESO DE PRODUCCIN DE SEMILLA
,ara facilitar la consulta del manual sobre manejo sanitario y mantenimiento de la
bioseguridad en el laboratorio de produccin de semilla de conca de abanico! de la
empresa A4;8,E4 %.A.5., este a sido organizado de acuerdo con el proceso b"sico de
produccin en el laboratorio, desde la seleccin de los reproductores asta el
transporte de las postlarvas fuera de las instalaciones. El proceso a sido dividido en
dos categoras generales2 el proceso de predesove y proceso de postdesove.
$%&. 2 Clujograma de produccin de semilla artificial de Argopecten purpuratus
conca de abanico!.
/<

@.1 P!".+," P!++,"7+
El proceso de predesove incluye los procedimientos de obtencin y seleccin de los
reproductores, cuarentena, aclimatizacin de reproductores, acondicionamiento y
depuracin de reproductores, induccin al desove y fertilizacin artificial, cultivo
larval, y asentamiento larval y metamorfosis.
5.1.1. Obtencin y seleccin de reproductores
S+ 8a) + ,+/+..%")a! !+5!"u.-"!+, ,a/ua0/+, 2u+ )" ,+a) 5"!-a"!+, +
5a-9&+)", %15"!-a)-+, 5a!a ."),+&u%! u)a 5!"u..%9) + /a0"!a-"!%"
,a-%,*a.-"!%a.
%e cree que algunas enfermedades son transmitidas verticalmente desde los
progenitores a su descendencia #@otte et al., /<<3$. :icas enfermedades
transmitidas verticalmente pueden ser eliminadas del sistema de produccin de
laboratorio mediante el uso de reproductores mantenidos en laboratorio
#domesticados$ que est"n libres de estos patgenos.
:onde sea posible, los animales seleccionados como reproductores proceder"n de
un ciclo cerrado, de forma que su istorial y su estado sanitario puedan ser
conocidos. As mismos que 'stos procedan de "reas libres de contaminantes y con
caractersticas fsico)qumicas #salinidad, temperatura, etc.$ similares a aquellas
donde las postlarvas ser"n sembradas. &os criterios utilizados para la seleccin de
los reproductores depender"n de la fuente de los reproductores del medio natural
o del atcery.
&as caractersticas deseables de un reproductor es m"s difcil de explicar porque
dependen de varios aspectos, generalmente son caractersticas que tienen relacin
con caractersticas morfolgicas como2 apariencia externa general, forma, tamaJo
#entre A y Dcm$, color #gnada turgente anaranjado intenso$ y peso. ,ero ay otras
tanto o mas importantes como2 4"pido crecimiento, alta tasa de filtracin,
resistencia a enfermedades, tolerancia a cambios ambientales #1emperatura,
salinidad, 8xigeno, etc.$ y capacidad reproductiva.
R+5!"u.-"!+, +/ 1+%" )a-u!a/# Anteriormente se preferan los reproductores
de origen natural debido a la creencia de que engendraban larvas mejores y m"s
fuertes. %in embargo, en los .ltimos tiempos, la cra de reproductores en
cautividad se a visto potenciada por las siguientes razones2 por un lado, no se
disponen de registros del rendimiento y crecimiento de los stoc(s naturales por lo
que no es posible mejorarlos, y se a demostrado que su utilizacin conlleva un
alto riesgo de introduccin de infeccionesF y por el otro, existe un creciente
reconocimiento del necesario papel que los stoc(s del atcery desempeJan en la
mejora de la maduracin, la cra larvaria y el rendimiento en los cultivos. %in
embargo resultados de diversas investigaciones muestran que concas de abanico
de diferentes poblaciones presentan diferencias en las tasas de crecimiento y
filJtracin. Existen varios factores ambientales como la temperatura y
disponibilidad de alimento #@endo Z Iurado, GHH3F @endo Z Uolff, /<<3F
1arazona et al., /<<A$ que pueden determinar diferencias en el crecimiento y
/G

rendimiento en peso. %in embargo 5isneros et al. #/<<D$, sometieron a las mismas
condiciones de temperatura y oxgeno a diferentes poblaciones, observando que
las diferencias de crecimiento observadas, est"n dadas no por factores
ambientales, sino por factores gen'ticos. En este sentido, dado que en bivalvos es
usual encontrar una alta variabilidad gen'tica en t'rminos de polimorfismo #de
alelos$ y eterocigosidad #9eaumont Z 9everidge, GHDE$, las diferencias en el
crecimiento y rendimiento entre poblaciones, pueden ser atribuidas a variables
gen'ticas.
S% ,+ u,a) !+5!"u.-"!+, + /a0"!a-"!%" ,+ "0-+)!= /a %)*"!1a.%9) a+.uaa
,"0!+ /a 5!".++).%a 4 +/ !+)%1%+)-" 5a,a" + /", ,-".F,
R+5!"u.-"!+, + 8a-.8+!4# &os stoc(s de laboratorio pueden proceder de una o
varias fuentes y pueden ser mejorados mediante un programa especfico de
mejora gen'tica para seleccionar los rasgos deseables o bien simplemente ser
seleccionados de stoc(s que est'n libres o sean resistentes o tolerantes a
patgenos especficos. %e tendr" detalles de las diferentes poblaciones o de los
orgenes de los stoc(s, ya sean locales o procedentes de otra zona, para evitar los
problemas gen'ticos potenciales y el bajo crecimiento y grado de supervivencia
asociados a la consanguinidad. %e dispondr" de un registro con datos sobre el
rendimiento y el desarrollo de las poblaciones, bajo un rango de condiciones
ambientales. El protocolo de seleccin utilizado es tambi'n importante, como por
ejemplo, que los stoc(s sean seleccionados bien de las lneas de cultivo con mejor
rendimiento, o bien que ayan sobrevivido a un brote infeccioso. Al mismo tiempo
es preciso tener en cuenta el momento escogido para el proceso de seleccin.
5.1.2 Procedimientos de cuarentena de los reproductores
A /a //+&aa a/ /a0"!a-"!%", /", !+5!"u.-"!+, 5"-+).%a/+, ,+!=) 1a)-+)%", +)
a%,/a1%+)-" 8a,-a 2u+ ,u +,-a" + ,a/u ,+a +-+!1%)a"
&as instalaciones de cuarentena son esencialmente "reas de mantenimiento
cerradas, donde los reproductores son depositados en tanques individuales asta
que se conozcan los resultados del cequeo para la deteccin de infestaciones #y
de bacterias, cuando sea oportuno$. &a unidad de cuarentena de reproductores
esta aislada fsicamente del resto de las instalaciones del laboratorio. 1eniendo
especial cuidado de la eliminacin de residuos y el tratamiento de efluentes. A los
empleados que trabajan en esta "rea no se les permite entrar en otras secciones
de produccin y deben seguir los protocolos sanitarios en todo momento.
&a unidad de cuarentena tiene las siguientes caractersticas2
Esta aislada adecuadamente de todas las "reas de cra y produccin para evitar
cualquier tipo de contaminacin cruzada.
Esta en un edificio cerrado y cubierto con acceso no directo al exterior.
//

5uenta con medios de desinfeccin para los pies #lavapies con solucin de
ipoclorito a Q=< ppm de ingrediente activo$ y las manos #botellas con yodo),>,
de /< ppm yPo A<W de alcool$ para su uso a la entrada y salida de la unidad.
&a entrada al "rea de cuarentena se restringe exclusivamente al personal
asignado. &os empleados de la unidad de cuarentena ingresan a trav's de un
vestuario, donde deben quitarse las ropas de calle y ducarse antes de entrar en
otro vestuario, donde ya se vistan con la ropa de trabajo y las botas. Al terminar
el turno de trabajo, se invierte la secuencia.
0n n.mero adecuado de baldes pl"stico yPo contenedores similares est"n
disponibles en la sala de cuarentena para facilitar el movimiento rutinario de
reproductores dentro y fuera del "rea.
&as instalaciones de cuarentena disponen de un suministro independiente de
agua y aire con sistemas de tratamiento y desinfeccin separados y un sistema
para el tratamiento de efluentes, para prevenir cualquier escape potencial de
patgenos al medio.
El agua de mar usada en las instalaciones entra a un tanque de almacenamiento
donde ser" tratada con una solucin de ipoclorito #/< ppm de ingrediente activo
durante un mnimo de 3< minutos$ antes de ser inactivada mediante tiosulfato
sdico #G ppm por cada ppm de cloro residual$ y una fuerte aireacin.
1odo el agua residual es recogida en otro tanque para su cloracin #/< ppm
durante un mnimo de ?< minutos$ y decloracin antes de ser vertida al medio.
1odos los animales muertos o infectados son enterrados en un "rea determinada
para tal fin.
&os contenedores de pl"stico y las mangueras son lavadas y desinfectadas con
una solucin de ipoclorito #/< ppm$ antes de volver a ser utilizadas.
1odos los utensilios empleados en la unidad de cuarentena son claramente
marcados y permanecen siempre en esta "rea.
La u)%a + .ua!+)-+)a +,-a +,-!u.-u!aa + 1a)+!a 2u+ /", !+5!"u.-"!+,
5u+a) ,+! -!a,/aa", + =!+a, G,u.%a, a G/%15%a, +) 0a,+ a ,u +,-a" +
,a/u
%i los reproductores son mantenidos de forma colectiva, se toman muestras
aleatorias de cada recipiente para evaluar la condicin general de la poblacin
contenida en cada uno de ellos. 5ualquier grupo con un resultado positivo en la
evaluacin puede ser desecado. En el caso de una muestra conjunta de animales
mantenidos individualmente, estos son cequeados individualmente para
identificar y desecar slo los animales que no ayan pasado la evaluacin.
L", !+5!"u.-"!+, )" -%+)+) 2u+ ,+! /%0+!a", + /a .ua!+)-+)a 8a,-a 2u+ ,u
+,-a" + ,a/u ,+a ./a!a1+)-+ .")".%"
/3

&os animales infectados son eliminados enterrandolos en profundidad para
prevenir la propagacin potencial de la infeccin. El perodo de cuarentena variar"
en funcin del tiempo necesitado para completar el procedimiento de cequeo
sanitario. En todos los casos, los animales son mantenidos bajo observacin en las
instalaciones de cuarentena asta que la evaluacin sea completada, y por lo
menos un mnimo de <= das antes de ser transferidos al "rea de
acondicionamiento. El equipo utilizado para la transferencia de reproductores se
mantiene separado de aquel usado en la sala de cuarentena y desinfectado antes y
despu's del transporte. 1odo el equipo utilizado en el "rea de cuarentena
permanece en dica "rea y al final de cada da, es desinfectado en tanques
especiales designados para este propsito.
La, %),-a/a.%")+, +/ /a0"!a-"!%" + %a&)9,-%." 4 +/ 5+!,")a/ a,".%a" ,")
+,-a0/+.%a, +) 0a,+ a /a, )+.+,%a+, +,5+.:*%.a, +/ /a0"!a-"!%"
&a instrumentacin b"sica del laboratorio consta de un microscopio, equipo de
microbiologa, etc. -ecesaria para llevar a cabo las inspecciones sanitarias
rutinarias. El diseJo y funcionamiento de estas instalaciones no se encuentra
dentro del alcance de los objetivos de este documento.
5.1.3 Acondicionamiento y depuracin de reproductores
L", !+5!"u.-"!+, 2u+ 5a,a) /a %),5+..%9) %)%.%a/ + .ua!+)-+)a ,")
a.")%.%")a", a /a, )u+7a, .")%.%")+, + /a, %),-a/a.%")+, + +,"7+
,ara acondicionar a los reproductores se emplean pr"cticamente los mismos
m'todos que para todos los bivalvos, una vez que se sacan los adultos de la
cuarentena se les traslada al "rea de acondicionamiento donde se les restriega y
lava la conca meticulosamente para retirar los organismos de la epifauna
#incrustaciones$ y sedimentos aderidos. &uego se colocan en tanques, en bandejas
que est"n separadas del fondo del tanque de acondicionamiento. &os sedimentos y
los residuos obtenidos de la limpieza de los reproductores son recogidos en baldes
y enterrados despu's de la operacin de limpieza. Al final del da de trabajo, la
implementos utilizados en la limpieza de los reproductores son inmersos en un
tanque con una solucin de ipoclorito sdico #/< ppm$.
&a velocidad del caudal de agua a trav's de los tanques de acondicionamiento es
de aproximadamente /= ml por minuto por adulto. El agua no se reutilizara cuando
la densidad de carga es muy alta, se tratara con un desinfectante #ipoclorito
sdico$ durante un perodo mnimo de /E oras #preferiblemente ED oras$ y se
neutralizara con tiosulfato de sodio antes de devolverlo al mar.
5on respecto a la alimentacin, durante el acondicionamiento se emplea el
fitoplancton natural que prolifera de forma extensiva en los sistemas de cultivo,
entre las qu' tememos2 Tetraselmis. chuii, T. suecica, Isochrysis galbana, Pavlova
/E

lutherii, Chaetoceros muelleri, entre otras. Empleando una mezcla proporcional de
estas especies.
5.1.4. Aclimatacin de reproductores
L", !+5!"u.-"!+, +15/+a!a) u) 5+!:"" 1:)%1" + u)" a ,%+-+ :a, +)
a./%1a-a!,+ a)-+, + ,+! a/1a.+)a", +) -a)2u+, + +,"7+
Este periodo dura de uno a siete das, los reproductores son acostumbrados a las
condiciones ambientales de las instalaciones de desove y al tipo de alimentacin
que les ser"n proporcionados. 1ales instalaciones tambi'n permitir"n la
optimizacin de la produccin en el sistema de desove.
La, %),-a/a.%")+, + a./%1a-a.%9) -%+)+) 2u+ -+)+! ,u*%.%+)-+ +,5a.%" +) +/
-a)2u+ 5a!a 1a)-+)+! a /", !+5!"u.-"!+, 2u+ ,+!=) %)-!"u.%", +) /a,
%),-a/a.%")+, + +,"7+
&os reproductores bien aclimatados estar"n preparados para empezar pronto a
producir gametos justo despu's de su introduccin en el sistema de desove.
:urante este perodo cualquier diferencia de temperatura, oxigeno y salinidad
entre el "rea de cuarentena y la de desove es reducida gradualmente.
5.1.5. Induccin al desove y fertilizacin artificial
Argopecten purpuratus es un bivalvo ermafrodita funcional, tanto la gnada
femenina como la masculina maduran de forma simult"nea &os gametos se
expulsan de forma secuencial, normalmente el esperma primero seguido de los
vulos, para luego cambiar a esperma otra vez dentro del mismo ciclo de desove.
El atcery emplea reproductores que provienen directamente del mar al criadero
por tener m"s reservas de lpidos, y sus uevos son de mayor calidad. ,or este
motivo, para conseguir madurar sus gametos no necesitan normalmente m"s de /
A das a temperatura de acondicionamiento con una racin alimenticia.
El procedimiento para el desove de las especies ermafroditas es m"s complejo, el
objetivo es minimizar las posibilidades de que los vulos sean fecundados por el
esperma del mismo individuo #autofecundacin$. Es raro que un adulto expulse
vulos y esperma de forma simult"nea. Es m"s frecuente que el esperma se libere
al principio, seguido de la expulsin de los vulos. &os individuos mucas veces
vuelven a expulsar esperma despu's de aber expulsado vulos.
%e realiza la fecundacin cruzada, para lo cual cada reproductor se transfiere a un
pequeJo recipiente de agua de mar filtrada a la temperatura necesaria en cuanto
empiece a desovar. %e marca el recipiente indicando la ora y un n.mero de
referencia para facilitar el seguimiento de este adulto en particular a lo largo de sus
actividades de desove. A medida que los adultos desovan y nublan el agua con los
/=

gametos, se les traslada a un recipiente nuevo y limpio, previo aclarado con agua
filtrada. %e marca el recipiente nuevo indicando la ora de transferencia y el mismo
n.mero de referencia del adulto. %e observa con atencin cada vaso que contiene
un adulto que est' expulsando esperma para detectar enseguida el comienzo de la
liberacin de vulos, que suele ocurrir de forma repentina. 5uando un adulto
cambia a la produccin de uevos se le retira inmediatamente y se le transfiere a
otro recipiente despu's del aclarado, marcando con el mismo n.mero de
referencia y la ora de la transferencia. 5uando se a expulsado un n.mero
suficiente de uevos, se retiran los adultos de los vasos antes de que vuelvan a
producir esperma. :e esta manera, los uevos y el esperma de cada adulto se
acumulan por separado, y se identifican por su n.mero especfico de referencia y
tiempo de produccin.
Antes de la fecundacin, se tamizan suavemente las suspensiones de vulos
utilizando un cedazo de tamaJo apropiado #luz de malla de H< [m o mayor$
sostenido de tal manera que el cedazo se encuentre debajo del nivel del agua en
un cubo o recipiente de mayor volumen, para eliminar restos fecales
contaminantes de los adultos antes de aJadir el esperma, reduciendo as el riesgo
de una proliferacin posterior de bacterias y de otros microorganismos durante la
fase siguiente del proceso del cultivo.
En la fertilizacin de los uevos se debe tomar especial precaucin para asegurar la
fecundacin cruzada de los vulos con esperma de adultos distintos del lote en
cuestin. ,or este motivo, los lotes de vulos de los distintos adultos se guardan
por separado y se fecundan por separado con esperma reci'n liberado de 3 E
macos a un cociente de / ml de esperma por litro de suspensin de vulos.
:espu's de aJadir el esperma, se dejan reposar durante ?< a H< minutos antes de
agregarse a los uevos fecundados de otros adultos.
:entro del mismo perodo de tiempo, a la temperatura adecuada para la especie,
los uevos fecundados empezar"n a dividirse, al principio casi en dos c'lulas
iguales y luego de manera desigual en E c'lulas cuando se observa una c'lula
grande, recubierta de 3 c'lulas muco m"s pequeJas. %in embargo, el primer signo
de una fecundacin exitosa, antes de que comience la divisin celular, es la
extrusin del vulo del primer cuerpo polar, que tiene una estructura pequeJa en
forma de bveda. %e evalua el porcentaje de vulos con desarrollo normal con la
ayuda de un microscopio de baja potencia #aumento de x/<)E<$. &as tasas de
fecundacin invariablemente superan el H<W, suponiendo que los vulos est'n
completamente maduros.
El primer paso en la produccin de larvas es el desove y fecundacin, los
protocolos que adopta el atcery, depende en cierta medida si el procedimiento
es parte de un programa controlado de cruce, o de si su intencin prioritaria es la
de producir postlarvas para su cultivo comercial. :ependiendo de esta distincin,
el sistema de maduracin es diseJado bien para maximizar la produccin de larvas
para la produccin comercial de postlarvas o bien para permitir un control m"ximo
sobre los cruces gen'ticos.
/?

E/ =!+a + +,"7+ +, /" ,u*%.%+)-+1+)-+ &!a)+ 5a!a .")-+)+! /", -a)2u+, +
+,"7+ )+.+,a!%", 4 /a %)*!a+,-!u.-u!a + ,"5"!-+ ,+&H) /", !+2u%,%-", +/
/a0"!a-"!%"
&a infraestructura apropiada para el manejo de los reproductores consiste en
instalaciones de cuarentena, de aclimatacin y las principales de produccin
#desove y fertilizacin$, con sus correspondientes sistemas de soporte.
&os factores que an sido considerados en el diseJo de las instalaciones son2 el
nivel requerido de produccin de larvas, la densidad de siembra y la proporcin de
reproductores usados, la tasa estimada de desove, la tasa estimada de fertilizacin,
el n.mero estimado de vulos y larvas por organismo, y el sistema de produccin
empleado #lotes o continuo$.
La, .")%.%")+, + /a ,a/a + +,"7+ ,") .")-!"/aa, a-+)-a1+)-+
&a sala de desove es mantenida en oscuridad, el acceso a la sala de maduracin es
restringido, y el ruido #particularmente alto o intermitente$, los movimientos y
otras molestias reducidos al mnimo.
&a sala de desove consta de tanques rectangulares, de color blanco, de paredes
lisas. &os reproductores son mantenidos con una tasa de renovacin de agua de
=<< m
3
por da y un suministro de aire continuo aunque no demasiado vigoroso. &a
profundidad del agua es generalmente de <,3)<,= metros. &os reproductores son
sembrados a una tasa de unos ?)D por metro cuadrado de superficie de fondo. &a
temperatura del agua es controlada normalmente para que se mantengan en un
rango de GD)/3\5, con una salinidad de 3=)3A ] y un p+ de A,<)D,<.
L", ,%,-+1a, + +,"7+ -%+)+) a&ua + /a 1+?"! .a/%a 5",%0/+
%e realiza la purificacin del agua para los tanques de desove y fertilizacin. Este
proceso incluye normalmente el tratamiento con luz 0>, y la filtracin de cartuco
a ^G _m. &a calidad del agua es mantenida a la temperatura de GD)/=
o
5 y una
salinidad de 3A)3D], como en los tanques de fertilizacin.
S+ 1")%-"!+a /a *+.u)%a, /a -a,a + +,"7+ 4 +/ 5+!:"" + -%+15" 2u+ /",
!+5!"u.-"!+, ,") 1a)-+)%a, +) +/ =!+a + +,"7+
,ara evitar el deterioro en la calidad de las larvas, los reproductores son retirados
de la unidad de desove y regresados al mar, estos se pueden usar asta para 3
campaJas de desove. Esto requiere normalmente, que los reproductores
empleados en cada campaJa sean identificadas individualmente mediante
etiquetado o con alg.n otro m'todo.
E/ !+.u+)-" + 8u+7", 4 + +,5+!1a ,+ 8a.+ 5a!a +-+!1%)a! /a 0u+)a
5!"u..%9) + 8u+7", 4 /a *+!-%/%<a.%9)
/A

En cada campaJa se ace el recuento de uevos y observa el esperma mediante un
microscopio de luz de alta resolucin, estos datos permitir"n determinan los
mejores lotes de reproductores y la realizacin de cruces de reproductores de
diferentes poblaciones.
S+ 1")%-"!+a) /a, -a,a, + *+!-%/%<a.%9) 4 + ,u5+!7%7+).%a
%eguidamente a la recoleccin de los uevos estos son transferidos a los tanques
de fertilizacin. 0na muestra de uevos cosecados es examinada para determinar
la tasa de fertilizacin y se realiza un recuento para permitir una estimacin de la
tasa de supervivencia. &a tasa de fertilizacin no es menos de un =<W y es
normalmente QA=W. 5uando las tasas de fertilizacin est"n por debajo del =<W, se
considera la posibilidad de descartar el lote completo de reproductores y empezar
una investigacin para determinar la causa del problema.
L", -a)2u+, + +,"7+ ,") ,%*")+a", %a!%a1+)-+ 4 /%15%a", !+&u/a!1+)-+
:ebido a las altas tasas de filtracin de la conca de abanico! y por consiguiente
de eliminacin de seudoeces, los tanques de maduracin precisan de un
sifoneado diario de eces. El sifn consiste de dos partes, un tubo de ,>5 y una
manguera. 5ada tanque de desove tiene su propio tubo de ,>5, pero la misma
manguera puede ser usada para todos los tanques. &a manguera es enjuagada con
agua limpia tratada antes de que cada tanque sea sifoneado. &os sedimentos y los
residuos sifoneados de los tanques son recogidos en una balde y enterrado
despu's de la operacin de limpieza. Al final del da de trabajo, la manguera se lava
y permanecer inmersa en un tanque con una solucin de ipoclorito sdico #/<
ppm$.
As mismo, se tiene que realizar un frotado peridico de las paredes y los fondos de
los tanques si existe una excesiva acumulacin de microalgas y otros organismos
del fouling, incluyendo protozoos. Este proceso de limpieza se efect.a a menudo
mediante el descenso de los niveles del agua del tanque sin sacar a los
reproductores, aunque en ocasiones, es necesario transferirlos a nuevos tanques.
:ejando por lo menos un tanque vaco para este tipo de procedimiento, lo cual es
programado para llevarse a cabo de forma regular. :urante esta operacion de
limpieza se tiene que intentar que los reproductores sean manipulados lo menos
posible, ya que una alteracin excesiva de los individuos maduros interferir" en los
ritmos de desove.
&os utensilios empleados son mantenidos en recipientes con soluciones de yodo)
,>, yPo ipoclorito #/< ppm de ingrediente activo$. &a densidad de poblacin
preferida para el desove de los reproductores es de G<< por tanque y G< animales
por metro cuadrado.
/D

U)a 0u+)a a/%1+)-a.%9) 4 u) 5!"-"."/" + a/%1+)-a.%9) ,") ."15")+)-+,
+,+).%a/+, + u) 5!"&!a1a + a./%1a-%<a.%9), +,"7+ 4 *+!-%/%<a.%9)
0na buena alimentacin y un protocolo de alimentacin de los reproductores son
factores claves en la produccin de larvas de buena calidad. %e tiene que
determinar la cantidad apropiada de alimento en relacin a la biomasa del tanque.
&a cantidad exacta de alimento se ajusta frecuentemente, en base a la tasa de
filtracin de cada tanque. &os reproductores son alimentados de forma continua
asta que completen su desove. &a dieta suministrada es equilibrada, centrada en
el uso de microalgas con alto valor nutricional, lo cual es esencial para la
produccin de uevos.
S+ +7%-a /a .")-a1%)a.%9) .!u<aa +) +/ =!+a + 5!"u..%9) + 1%.!"a/&a,
&a produccin de microalgas es llevada a cabo mediante el uso de buenos
est"ndares de igiene. &os materiales empleados #baldes, mangueras, material de
vidrio, etc.$ se mantienen limpios, y antes de su uso, son lavados con una solucin
de yodo),>, #/< ppm$ y aclarados con agua limpia.
5.1.. !ultivo larval
&os uevos fecundados siguen desarroll"ndose en tanques asta que llegan a la
fase de larva veliger : de conca completa, llamada as por la caracterstica forma
en : de las valvas de la conca. &as larvas : que an completado su desarrollo se
recuperan unas /E a ED oras m"s tarde, en funcin a la temperatura del agua.
-ormalmente se recupera entre el 3<W y el D=W de larvas : perfectamente
formadas respecto de la densidad de carga inicial de embriones. &as larvas : de
conca completa tienen una longitud media de conca entre H< y G<< [m.
;ran parte del equipo utilizado para calcular el n.mero de larvas es fabricado
especialmente para este fin. %on una serie de tamices con aberturas de malla E<,
?<, D<, G/< y G=< [m. &as larvas m"s grandes y mejores son separadas de las
malformadas y anormales. 0na vez vaciado el tanque, se lava con agua de mar
filtrada las larvas retenidas en el tamiz superior y as cualquier animal m"s pequeJo
pasa a la malla m"s pequeJa.
&as larvas se cultivan en tanques de fondo cnico de fibra de vidrio equipados con
desag`e de fondo. &os tanques de larvas se oxigenan con rangos de velocidad de
caudal variable desde un burbujeo lento para larvas : asta una velocidad de /<<
litros por ora para las larvas en fases posteriores. El aire se filtra en origen, a un
tamaJo de partcula de <,// <,E= [m, mediante una serie de filtros de cartuco
de porosidad decreciente. :e esta forma se reduce el aporte de contaminantes
transportado por el aire que incluyan microorganismos nocivos.
&os tanques de cultivo larvario y todo el material que se utiliza es lavado con
ipoclorito #/< ppm de ingrediente activo$ y luego aclarado con agua de mar
filtrada. El proceso de inicio de un nuevo cultivo se efect.a de la manera siguiente2
- %e tamizan las larvas retenidas en el tanque.
/H

- %e limpia el tanque con esponja y una solucin de ipoclorito, y se aclara bien.
- &uego se llena el tanque con agua de mar debidamente tratada a la temperatura
y salinidad necesarias.
- %e calibra las larvas tamiz"ndolas por tamaJo de malla decrecientes con agua de
mar filtrada.
- %e toman pequeJas muestras de cada tamiz donde se ayan retenido las larvas y
observe el aspecto y actividad de las larvas con la ayuda de un microscopio.
:escartando las fracciones del tamiz que contengan larvas predominantemente
muertas o de crecimiento lento.
- %e lava las fracciones que contienen larvas sanas pas"ndolas a un cilindro
graduado.
- ,osteriormente se toma una submuestras siguiendo el procedimiento detallado
anteriormente y se determina el n.mero total de supervivientes. %e mide una
muestra entre =< y G<<, calculando la longitud media de la conca.
- %e devuelven las larvas al tanque de cultivo y reinicia la aireacin.
- 4epita el procedimiento a intervalos de ED oras.
&a supervivencia de las larvas desde la fase : asta la metamorfosis vara, puede
alcanzar entre /< y 3<W como promedio. ;ran parte de las p'rdidas de larvas
durante el perodo de cultivo se deben al descarte y eliminacin de los individuos
de crecimiento m"s lento que a la muerte de las larvas. &a proporcin de larvas que
llegan a sufrir la metamorfosis tambi'n est" relacionada con las condiciones de
cultivo, entre ellas la alimentacin y racin, la temperatura y salinidad y a factores
relativamente incontrolables como la calidad del agua de mar y las enfermedades.
La .!:a + /a!7a, 5!"u.+ 5",-/a!7a, + /a 1=, a/-a .a/%a 4 +) +/ 1+?"! +,-a"
,a)%-a!%" 5",%0/+
El laboratorio de postlarvas y el "rea de cultivo forman diferentes unidades
econmicas en la empresa A4;8,E4 %.A.5, la calidad de la larva es frecuentemente
sacrificada por economizar. Aunque en realidad, la estrategia m"s econmica es
producir postlarvas que crezcan r"pidamente, que est'n libres de enfermedades y
que tengan una alta tasa de supervivencia y produccin en las instalaciones de
engorde. ,ara alcanzar dicos objetivos, todas las "reas involucradas en la cra de
larvas est"n diseJadas para una ptima eficiencia, igiene y productividad.
La +)-!aa a /a <")a(,) + .!:a + /a!7a, +0+ +, !+,-!%)&%a
&a entrada a las instalaciones de cra de larvas, esta restringida al personal que
trabaja en dicas "reas. %e an colocado lavapies con solucin de ipoclorito de
calcio o sodio con Q=< ppm de ingrediente activo a la entrada de cada sala del
laboratorio. &a solucin desinfectante es reemplazada cuando es necesario. En
cada entrada a la sala de cra de larvas esta disponible un recipiente con iodo),>,
3<

#/< ppm$ yPo A<W alcool para que todo el personal tenga que lavarse las manos
con la solucin desinfectante cada vez que entre o salga de las salas.
Caa ,a/a -%+)+ u) ?u+&" ."15/+-" + 1a-+!%a/+, 5a!a /a, "5+!a.%")+, !u-%)a!%a,
5ada sala tiene un juego completo de materiales para operaciones rutinarias
#filtros, mallas, cubos, etc.$. %e cuenta con un tanque #=<<)?<< litros$ con
desinfectante #solucin de ipoclorito /< ppm de ingrediente activo$ para sumergir
las mangueras, cubos, etc. &os equipos de uso com.n se dejan en el tanque de
desinfeccin al final de cada da y se aclaran antes de volver a ser usados al da
siguiente. El desinfectante de este tanque es sustituido diariamente o cuando se
requiera.
T"", /", 1a-+!%a/+, 4 +2u%5", ,") + u," +;./u,%7" 5a!a .aa ,a/a, 4 )" ,a/+) +
+//a " ,") u,a", +) "-!" /u&a!
Adicionalmente, los vasos de precipitado, las redes, etc., usados en cada tanque se
mantienen en un cubo lleno de una solucin de ipoclorito de sodio #/< ppm de
ingrediente activo$, y se dedican exclusivamente a cada tanque para prevenir
contaminaciones cruzadas dentro de la misma unidad.
La .a/%a + /a, /a!7a, 4 5",-/a!7a, ,") ."15!"0aa, !u-%)a!%a1+)-+
%e toman muestras de larvas y postlarvas para realizar comprobaciones rutinarias
en recipientes de pl"stico desecable #vasos de papel o vasos de precipitado de
pl"stico de 3<< ml$ que ser"n eliminados tras un solo uso. :espu's de que el
cequeo diario a sido completado, las larvas y postlarvas son desecadas a un
recipiente de pl"stico con ipoclorito de sodio #/< ppm de ingrediente activo$ u
otro desinfectante apropiado. &as larvas y postlarvas usadas en estos cequeos
diarios nunca se retornan a los tanques o salas de cra de las larvas.
S+ 1a)-%+)+ a/-", +,-=)a!+, +) /a 5!+5a!a.%9) +/ a/%1+)-"
El "rea de cultivo de microalgas, es un punto crtico de control #55,$, debido a que
puede ser contaminado por un manejo inapropiado, siendo considerada como un
riesgo de patgenos. &as cepas, medios de cultivo, tratamiento, almacenaje y uso
de los elementos para la produccin de microalgas, son revisados y se toman
medidas para asegurar que 'stas son manejadas de forma apropiada y segura.
La +)-!aa a /a ,a/a + .u/-%7" + 1%.!"a/&a, +,-a !+,-!%)&%a H)%.a1+)-+ a
5+!,")a/ au-"!%<a"
3G

&os empleados de estas "reas no entran en ninguna otra zona de produccin. En la
entrada de cada sala se coloca un lavapies con una solucin desinfectante
#ipoclorito de calcio o sodio con Q=< ppm de ingrediente activo$. Esta solucin se
reemplaza tan frecuentemente como sea necesario. 5omo en otras "reas, el
recipiente#s$ de solucin desinfectante #/< ppm de iodo),>, yPo A<W alcool$ esta
situado en las puertas, para que todos los empleados se laven sus manos cada vez
que entren o salgan de la sala.
Cu/-%7" + 1%.!"a/&a,
Est" fuera del objetivo de este manual, detallar los protocolos exactos de
alimentacin para la cra de larvas. &as dietas est"n basadas en los requerimientos
especficos de los distintos estadios larvarios, y refrendadas en el examen
frecuente y detallado de la actividad alimenticia de las larvas en cada tanque. En
esta seccin se ofrecen indicaciones sobre los puntos significativos que se deben
tener en cuenta.
S") 1a)-+)%", +,-=)a!+, + 8%&%+)+ +;-!+1aa1+)-+ a/-", +) +/ .u/-%7" +
1%.!"a/&a,
El cultivo de microalgas requiere de una igiene extrema en las fases de
laboratorio, incluyendo una minuciosa desinfeccin y filtracin #a ^<.= _m$ de
todos los suministros de agua y aire, desde el uso de esterilizadores para todo el
equipo y el agua, asta el uso de fertilizantes qumicos puros de grado de
laboratorio, as como aire acondicionado para mantener temperaturas de entre GD)
/EK5.
L", .u/-%7", 5u!", + 1%.!"a/&a, ,") 1a)-+)%", u,a)" /", 5!".+%1%+)-",
,a)%-a!%", 4 1%.!"0%"/9&%.", a5!"5%a",
&as algas unicelulares tales como Tetraselmis. chuii, T. suecica, Isochrysis galbana,
Pavlova lutherii, Chaetoceros muelleri, entre otras, son las m"s com.nmente
utilizadas. :e cada especie de alga usada en el laboratorio, se mantienen, cultivan
y subcultivan cepas puras, en todos los estados #desde placas de agar y
tubosPbotellas en el laboratorio para la produccin masiva en el exterior$. %e usan
procedimientos sanitarios y microbiolgicos apropiados para asegurar la calidad
del cultivo. %e evitan las contaminaciones por protozoos que se alimentan de algas,
otras especies de algas y bacterias.
T"", /", !+.%5%+)-+, + .u/-%7", + 1%.!"a/&a, ,") /a7a", 4 +,%)*+.-a",
+,5u6, + .aa .",+.8a
3/

,ara la desinfeccin de los recipientes de vidrio se usa una solucin de ipoclorito
de calcio #sodio$. ,osteriormente, 'stos son aclarados con agua limpia y tratada, y
finalmente lavados con "cido muri"tico al G<W antes de dejarlos secar y esterilizar.
5.1.". Asentamiento larval y metamorfosis.
:urante la mayor parte de la fase larvaria las larvas nadan con libertad en la
columna de agua. 5onforme van creciendo y se acercan al final de la fase larvaria,
la actividad de alimentacin se ralentiza, consumen menos alimento, y las larvas
pasan cada vez m"s tiempo en el fondo y en la parte inferior del tanque. Esto
marca el comienzo de la metamorfosis, una etapa crtica de su desarrollo durante
la que se pueden dar grandes mortalidades, y durante la que se producen
considerables cambios anatmicos. El 'xito de la transformacin acia la forma
juvenil y de la supervivencia en esta etapa depende de una serie de factores, entre
ellos, la disponibilidad de reservas energ'ticas acumuladas durante la fase larvaria.
+ay que recalcar pues la importancia de producir larvas sanas con abundantes
reservas energ'ticas.
%e pueden distinguir dos etapas en la metamorfosis2 la fijacin, que es un
fenmeno reversible, y la metamorfosis, que es irreversible. &a metamorfosis
puede producirse de forma r"pida, pero puede retrasarse si no se cumplen las
condiciones idneas. El material empleado sobre el que se fijan las larvas se
denomina material de fijacin que consiste en colectores de nailon. &as larvas
pediveliger con ojo se fijan en tanques iguales a los larvarios en condiciones de
agua est"tica. 5omo las larvas, las pediveliger y los juveniles son especialmente
fr"giles y delicados la tendencia es retirarlos de los tanques larvarios cuando tienen
ojo y transferirlas a los tanques de fijacin.
S+ 1a)-%+)+ u)a 0u+)a .a/%a + a&ua
&a calidad del agua tiene un impacto fundamental en la salud y rendimiento de los
lotes de larvas. 0na baja calidad del agua acarrea una baja supervivencia y
crecimiento, retraso en el desove, incremento del fouling epibionte y
deformidades.
El agua para la cra de larvas es filtrada a unos = _m y desinfectada con cloro y 0>.
&as temperaturas deben son mantenidas entre GD y /= K5 y la salinidad por encima
de 3? ], por lo menos asta que se alcanza la etapa de postlarvas. &os niveles de
oxgeno disuelto se mantienen lo m"s cercanos a la saturacin #?,/ ppm$ o al
menos por encima de = ppm. %e mantiene un p+ en tono a D. &a sobrealimentacin
es una de las causas m"s comunes del deterioro de la calidad del agua y es evitada
en lo posible.
&a calidad del agua se mantiene si existe una aireacin suficiente que impida que la
las microalgas sobrantes y las eces se asienten en el fondo del tanque. El
sifoneado regular del tanque previene la formacin de un sedimento anaerobio en
el fondo. %e asegura que el agua usada para completar el volumen de los tanques y
33

para la renovacin, tengan una temperatura, salinidad y p+ similar a la del tanque,
y que adem"s, est' libre de cloro para evitar un estr's innecesario a las larvas.
5.1.#. !ultivo de post larvas$ presemilla y semilla.
&uego que la larva se a fijado en los colectores se le denomina semilla, se emplea
el t'rmino RsemillaT para referirse tanto a RspatT como a RseedT, palabras que
vienen del ingl's antiguo y se aplica a las primeras etapas juveniles del desarrollo
de los bivalvos y se usa para describir a los productos juveniles que suministran los
criaderos a los productores de moluscos. &as semillas se trasladaran en los
colectores a los centro de engorde en la baa de %amanco.
S+ 5!a.-%.a u) 0u+) 1a)+?" +) +/ /a0"!a-"!%" 5a!a a,+&u!a! /a a/-a .a/%a + /a,
5",-/a!7a,
@ucos factores afectan a la calidad de las ,&. ,ueden tener un impacto en la
calidad de las postlarvas producidas por el laboratorio2 la calidad y cantidad de
alimento, calidad de agua #temperatura, salinidad, slidos en suspensin, eces$, el
uso de antibiticos, enfermedades y pr"cticas de manejo deficientes. Estos
factores son regulados mediante buenas pr"cticas de manejo en el laboratorio,
teniendo un importante impacto en la calidad de las postlarvas producidas.
@.2. P!".+," + P",-+,"7+
El proceso de postdesove incluyen2 mantenimiento de las instalaciones, manejo de
la calidad del aguaF manejo sanitario de las larvas, evaluacin general de las
condiciones de las larvas, seleccin de las post larvas para la siembra, y
documentacin y registro de datos.
5.2.1. %antenimiento de las instalaciones
Pa!a /"&!a! u)a 5!"u..%9) ."),-a)-+ + ,+1%//a, + a/-a .a/%a, /a,
%),-a/a.%")+, + 5!"u..%9) +,-=) 1a)-+)%a, +) 95-%1a, .")%.%")+,
&as instalaciones son mantenidas de forma que se optimicen las condiciones para
el crecimiento, supervivencia y salud de los reproductores, larvas y postlarvas,
minimizando el riesgo de brotes de enfermedad. ,ara facilitar esto, son redactados
por la direccin del laboratorio, una serie de protocolos seguidos estrictamente por
todos los empleados en todo momento. En el cual se incluye el procedimiento de
secado sanitario que sigue a cada ciclo de produccin de semilla, cada tres o cuatro
meses, con un perodo mnimo de secado de siete das. Esto ayudar" a prevenir la
transmisin de agentes infecciosos de un ciclo a otro.
T"", /", -a)2u+, 4 +2u%5", ,") 1%)u.%",a1+)-+ /%15%a", !+&u/a!1+)-+,
/a7a", 4 +,%)*+.-a", +,5u6, + .aa u,", a,: ."1" a)-+, + +15+<a! u)
)u+7" .%./" + 5!"u..%9)
3E

&os tanques usados para el desove de los reproductores, desove, y desarrollo larval
son minuciosamente limpiados despu's de cada uso. &os procedimientos usados
para la limpieza y desinfeccin son b"sicamente los mismos para todos los tanques
y equipos. Estos incluir"n un frotado con agua limpia y detergente org"nico asta
retirar toda la suciedad y sedimentos, la desinfeccin se realiza con una solucin de
ipoclorito #/<)3< ppm de ingrediente activo$, aclarando con abundante agua
limpia para eliminar cualquier traza de cloro, y despu's se dejan secar.
&os siguientes puntos son considerados2
&os tanques son lavados y desinfectados al final de cada ciclo de produccin.
1odo el equipo de laboratorio es regularmente limpiado y desinfectado.
:espu's de cosecar las larvas, 'ste y todo el equipo es desinfectado. :e igual
forma, una vez que todos los tanques de una sala ayan sido cosecados, la
propia sala y todos los equipos son desinfectados.
&as tuberas de agua, conducciones de aire y sus piedras etc., son lavados cada
mes #o durante el secado$ con la misma concentracin de cloro mediante el
bombeo desde un tanque central.
1odos los edificios del laboratorio #suelos y paredes$ se desinfectan
peridicamente #una vez por ciclo$. 1odo el resto del equipo es minuciosamente
limpiado entre ciclos.
Antes de sembrar los tanques para un nuevo ciclo, estos son de nuevo, lavados
con detergente, aclarados con agua, limpiados con ipoclorito y otra vez
aclarados con agua tratada antes del llenado.
&os procedimientos de desinfeccin pueden requerir ajustes de acuerdo con las
necesidades especiales del laboratorio.
%e toman medidas de seguridad apropiadas cuando se manejen productos
qumicos para la desinfeccin. &os procedimientos acerca del uso y
almacenamiento de productos qumicos, tales como llevar equipos de
proteccin, etc. son incluidos en el @anual de 9uenas ,r"cticas de @anejo.
5.2.2 %ane&o de la calidad del a'ua
La %)*!a+,-!u.-u!a +/ /a0"!a-"!%" 5+!1%-+ u)a a5!"5%aa /%15%+<a 4 +,%)*+..%9)
+/ a&ua +)-!a)-+
El agua entrante es limpiada y desinfectada mediante cloracin y filtracin antes de
ser distribuida a las diferentes "reas de trabajo #laboratorio, cultivo de microalgas,
etc.$. &a distribucin es diseJada para evitar el riesgo de contaminacin cruzada.
&os sistemas de distribucin de agua y aire a su vez, est"n instalados de manera
que permitan el bombeo de soluciones desinfectantes a trav's del sistema as
como permitir un completo secado al final del ciclo.
3=

I+a/1+)-+, /a, %),-a/a.%")+, + +,"7+ 4 .!:a + /a!7a, ,") ."),-!u%a, +
1a)+!a 2u+ ,+ a5!"7+.8+) /", a5"!-+, + a&ua ".+=)%.a
Es posible el uso de agua de mar trada a las instalaciones desde otro lugar, as
como de agua de mar subptima sometida a las t'cnicas apropiadas de filtracin y
desinfeccin.
E/ a&ua +)-!a)-+ +, +,%)*+.-aa 5a!a +,-!u%! .ua/2u%+! 5a-9&+)" !+1a)+)-+
%e usa ipoclorito de sodio #con G< ppm de ingrediente activo durante por lo
menos 3< min$, y luz 0>, para desinfectar el agua entrante despu's de la filtracin
inicial. :espu's del tratamiento con cloro, se tiene que examinar el agua del
reservorio con 8rto)toluidina #3 gotas en = m& de agua de muestra$ para asegurar
que no existe cloro residual #indicado por un color amarillo$ antes de usar el agua.
&a feca y duracin de los tratamientos as como, los resultados de dicos tests,
son registrados en un cuadro y firmados por el responsable del tratamiento del
agua. 0na vez que el cloro se a disipado es neutralizado con tiosulfato de sodio #G
ppm por cada G ppm$.
L", *%/-!", + a!+)a ,") 1a)-+)%", a+.uaa1+)-+
El sistema de filtracin de agua que sigue a los reservorios, esta constituido por
filtros de arena, y otros elementos como filtros de cartuco o de membrana, en el
caso de que el agua requiera una filtracin m"s fina.
&os filtros de arena son lavados en sentido contrario por lo menos dos veces al da
#o seg.n se requiera en funcin de la carga de slidos en suspensin del agua
entrante$ por un perodo suficiente de tiempo que asegure el limpiado del filtro. Es
una ventaja poder abrir los filtros para cequear la canalizacin y realizar un
retrolavado minucioso. Al principio de cada ciclo de produccin, la arena es
sustituida por otra limpia que a sido previamente lavada con una solucin de
ipoclorito sdico a /<ppm de ingrediente activo.
L", *%/-!", + .a!-u.8" ,") .a10%a", %a!%a1+)-+
En el caso de los filtros de cartuco, se dispone de dos juegos de elementos
filtradores, que se recambian diariamente. &os filtros usados son lavados y
desinfectados en una solucin de ipoclorito de calcio #sodio$ con G<ppm de
ingrediente activo durante una ora. &os filtros son posteriormente aclarados con
abundante agua tratada y sumergidos en un recipiente con una solucin G<ppm de
tiosulfato de sodio para neutralizar el cloro. En cada ciclo del laboratorio, se usan
dos o m"s juegos de filtros, en funcin de la carga de slidos en suspensin del
agua de mar.
3?

E/ a&ua 2u+ ,+ u,a +) /", -a)2u+, + +,"7+ 4 *+!-%/%<a.%9) 4 +) /a, %),-a/a.%")+,
+ .u/-%7" + 1%.!"a/&a, ,") + /a 1%,1a .a/%a
&os tanques de desove y fertilizacin y las instalaciones de cultivo puro de
microalgas reciben agua de la misma calidad y tratada de la misma forma que la
usada en las unidades de desove y cra de larvas #Ej. esterilizacin por luz 0> y
filtracin al <,= o G _m$. 1ambi'n se usa 1reflan al <,<=) ppm para combatir los
ongos.
La %,-!%0u.%9) +/ a&ua +, %,+3aa + -a/ *"!1a 2u+ .aa =!+a +/ /a0"!a-"!%"
5u+a ,+! +,%)*+.-aa + 1a)+!a %)+5+)%+)-+
&a distribucin del agua desde el reservorio asta las distintas "reas del laboratorio
est"n diseJadas de tal forma que cada zona es desinfectada sin comprometer otras
"reas. :e esta forma, se pueden programar desinfecciones regularmente, seg.n
convenga en cada zona y se evita el riesgo de contaminacin cruzada. &a regulacin
de temperatura y salinidad puede variar entre diferentes sectores y ser" facilitada
por un sistema de distribucin bien diseJado. Adem"s, cada "rea tiene sus
requerimientos especficos de filtracin. &as bombas, tuberas y equipos de
filtracin son dimensionados para asegurar que la tasa m"xima de intercambio de
agua esperada, pueda ser mantenida en ptimas condiciones en todo momento.
5.2.3. %ane&o sanitario de las larvas
Pa!a /a 5!"u..%9) + u) 0u+) )H1+!" + /a!7a, + a/-a .a/%a, ,+ 1a)-%+)+ u)
+,-!%.-" .")-!"/ +) /", 1u.8", *a.-"!+, %)7"/u.!a", +) +/ 1a)+?" ,a)%-a!%" + /a
/a!7a +) +/ /a0"!a-"!%"
+ay mucos factores involucrados en el manejo sanitario de las larvas en el
laboratorio. ,ara producir una elevada cantidad de larvas de alta calidad, es
preciso mantener un estricto control de todos 'stos, a lo largo de todo el ciclo de
cra de la larva. En la 5uadro E son expresados algunos de los factores m"s
comunes que afectan al estado sanitario de la larva durante el ciclo de cultivo.
3A

Cua!" ( Algunos factores que afectan al estado sanitario de las larvas y sus posibles
medidas de control.
$ACTOR E$ECTOS MEDIDAS DE CONTROL ESTINDAR
:ensidad de siembra
excesiva
Estr's
9aja calidad del agua
4educir la densidad G<< reproductores por
tanque
9aja calidad del agua2
Agua de mar
Agua de tanques
@ortalidades
:eformidades
@ejorar la calidad de agua
por filtracin., cloracin yPo
esterilizacin #A$.
6ncrementar la tasa de
renovacin de agua #9$
Ciltro ^ = _m. 5loracin
#G<ppm$ seguida de
neutralizacin con 0>. /<)
G<<W renovacin de agua
por da
,eriodos largos de
desove
6ncremento de la tasa
de infeccin
&imitar el n.mero de das
en la sala de desove
3 a E das por campaJa
Alimentacin pobre
#calidad yPo frecuencia$
:esnutricin
,resencia fouling
9aja calidad de agua
@ortalidad
Cuente de bacterias
,rograma de alimentacin
apropiado.
5equeos frecuentes de la
tasa de filtracin y calidad
del agua.
4ecuentos rutinarios y
control de calidad de
microalgas.
:esinfeccin
Alimentar con microalgas de
alta calidad.
:esinfectar con ipoclorito
/<ppm de ingrediente activo
5.2.5. (valuacin 'eneral de las condiciones de las larvas
La +7a/ua.%9) + /a, .")%.%")+, + /a, /a!7a, +, u)a + /a, 5!%).%5a/+,
a.-%7%a+, //+7aa, a.a0" +) +/ /a0"!a-"!%"
&a evaluacin de las condiciones de las larvas es abitualmente realizada por la
maJana, tom"ndose decisiones sobre la renovacin de agua, alimentacin y otras
actividades, de tal forma que por la tarde puedan llevarse a la pr"ctica.
&as larvas de cada tanque son inspeccionadas de dos a cuatro veces cada da.
6nicialmente se ace una inspeccin visual de la larva, de las condiciones del agua y
del alimento. %e toma una muestra de larvas con un vaso de precipitado e
inspecciona a simple vista. %e acen observaciones sobre el estado de la larva,
salud, actividad, comportamiento y abundancia de alimento y eces en el agua.
1ambi'n se guardar registros de los par"metros de calidad del agua y de la
cantidad de alimento proporcionado al tanque. &a misma muestra de larva, es
tambi'n llevada al laboratorio para un examen m"s detallado al microscopio. Esto
proporcionar" la informacin sobre el estado, condicin, alimentacin y digestin,
as como de la presencia de cualquier enfermedad o deformidad fsica.
El tipo de observaciones que se realizan, pueden ser clasificadas en dos niveles,
basados en los grados de evaluacin del estado sanitario descritos anteriormente.
3D

O0,+!7a.%")+, + N%7+/ 1
&as observaciones de -ivel G est"n basadas en aspectos visuales de la larva y las
condiciones del agua que pueden ser apreciadas f"cilmente a simple vista,
tomando animales del tanque en un vaso de precipitado de cristal. %e prestar
especial atencin primeramente al comportamiento o actividad de las larvas,
comportamiento natatorio #de acuerdo con su desarrollo larval$, calidad del agua,
presencia de alimento y ecesF y posteriormente, en la disparidad y omogeneidad
de tamaJo.
&a actividad natatoria de las larvas cambia a lo largo de su desarrollo larval aunque
de forma caracterstica. :entro de cada uno de estos distintos modos de nadar, si
observamos que el QH=W de las larvas nadan activamente, entonces son puntuadas
con un G<F si est"n activas del A<)H=W, se punt.a =F y si son ^A<W las activas
entonces se punt.a <.
&a omogeneidad del estadio indica la uniformidad del desarrollo larvario en el
tanque. %i el D<W o m"s de la poblacin est" en el mismo tamaJo, se les punt.a
con G<, si est"n entre un A<)D<W, la puntuacin es =F y para situaciones de menos
del A<W, la puntuacin es <.
5uando se alimentan, se pueden observar largos ilos fecales colg"ndoles y
suspendidos en la columna agua. 5uando el H<)G<<W de las larvas tienen esos ilos
largos y continuos a lo largo de todo su tubo digestivo, y continuando fuera de su
cuerpo, se les considera bien alimentados y se punt.a G<. 5uando entre el A<)H<W
tienen esos ilos, o son cortos o discontinuos, se anota =F y cuando son ^A<W de
laslarvas las que carecen de este ilo, significa que no est"n comiendo y se
considera <.
O0,+!7a.%")+, + N%7+/ 2
&as observaciones de nivel / est"n basadas en el examen microscpico y de
montaje en fresco, si es necesario, se toma una muestra aleatoria de al menos /<
larvas por tanque #m"s para tanques mayores$. %e debe prestar especial atencin a
los contenidos intestinales, necrosis, deformidades y organismos del fouling.
&a necrosis del cuerpo es una indicacin de posible infeccin bacteriana, se puede
observar a la luz de un microscopio de baja potencia. %i no presentan necrosis se
punt.a G<F donde ^G=W de los animales presenten alguna necrosis se anota =F y
donde QG=W muestren necrosis, lo que indica que existe una infeccin severa, se
punt.a <
&as deformidades pueden indicar una baja calidad de las larvas, si aparecen en los
primeros das, e infecciones bacterianas o manejo inapropiado y estr's si lo acen
en das posteriores. 1picamente las valvas tienen forma definida. -ormalmente no
existen remedios para estos problemas #salvo para el manejo descuidado$, y las
larvas deformes se eliminan o morir"n. En determinados casos severos, puede ser
preferible desecar todo el tanque lo m"s pronto posible y prevenir la aparicin en
otros tanques. 5uando no existan deformidades se punt.a G<, para ^G<W de casos
se anota =F y si son QG<W entonces se punt.a <.
3H

&as larvas pueden ospedar un amplio rango de organismos que pueden ser desde
bacterias y ongos asta protozoos de mucas especies. Estos atacar"n
normalmente el interior del cuerpo, especialmente alrededor de las branquias de
las larvas. 5uando las infecciones son ligeras, pueden desacerse del fouling sin
mayores problemas, pero en casos severos el fouling persistir" o reaparecer"
durante el desarrollo larval, siendo indicativo de una baja calidad del agua,
debiendo tomar medidas. 5uando el fouling est" ausente se punt.a G<F si ^G=W
tienen temporal o permanente fouling, se anota =F y si son QG=W de los organismos
que est"n colonizados permanentemente, se punt.a <. Estas observaciones y el
sistema de puntuacin usado se recogen en la 5uadro =.
La %15"!-a).%a + /a, 5u)-ua.%")+, + N%7+/ 1 4 2
5uando se realizan todas estas observaciones de -ivel G y / y son recogidas para
cada etapa del desarrollo larval, cada tanque de larvas se punt.a apropiadamente
en cada caso, podemos describir una visin general del estado sanitario de las
larvas, con las puntuaciones m"s altas para aquellas larvas m"s sanas y viceversa.
5on la experiencia, se ace m"s f"cil juzgar la salud general de cada tanque y as
poder recomendar el curso de las acciones para combatir los problemas
encontrados, dependiendo de las puntuaciones obtenidas.
Cua!" @ 4esumen de las evaluaciones de -ivel G y / del estado sanitario de la
larva.
CRITERIO PUNTUACIN OBSERVACIONES
OBSERVACIONES DEL NIVEL 1
Actividad natatoria:
Activa (> 95%)
Intermedia (70-95%)
Dbil (en el fondo) (< 70%)
10
5
0
Obervacione diaria (!-"#)
Hilos fecales:
$reente (90-100%)
Intermedio (70-90%)
A%ente (<70%)
10
5
0
Obervacione diaria (!-"#)
Homogeneidad de tamao:
Alto (&0-100%)
Intermedio (70-&0%)
'a(o (< 70%)
10
5
0
Obervacione diaria (!-"#)
OBSERVACIONES DEL NIVEL !
Necrosis:
A%encia (0%)
)oderado (<15%)
*evero (>15%)
10
5
0
Obervacione diaria (!-"#)
Deformidades:
A%encia (0%)
)oderado (<10%)
*evero (>10%)
10
5
0
Obervacione diaria (!-"#)
"o#ling:
A%encia (0%)
)oderado (<15%)
*evero (>15%)
10
5
0
Obervacione diaria (!-"#)
E<

5.2.. )eleccin de las postlarvas para la siembra
5omo se a mencionado anteriormente, el plan de produccin de larvas esta
enfocado en la produccin de animales de la m"xima calidad posible, lo cual est"
directamente relacionado con el posterior rendimiento en la fase de engorde. Es
por tanto, en esta fase donde la calidad de la semilla es de la mayor importancia.
+ay mucos indicadores sanitarios y de calidad que pueden ser usados para
determinar la seleccin de la postlarva. Estos indicadores se pueden clasificar en
tres categoras #anteriormente mencionadas, ver 5uadro /$ o niveles, de las cuales
dos se aplican, y son detallados en las 5uadro ?.
E7a/ua.%9) + /a .a/%a + /a, 5",-/a!7a, u,a)" 5!".+%1%+)-", +/ N%7+/ 1
El vigor de la actividad natatoria es evaluado como una gua de la salud de la
postlarva, usando las t'cnicas descritas anteriormente en la %eccin =./.=.
&a tasa de supervivencia de las postlarvas de cada tanque son estimada como un
indicador del estado sanitario general, istorial clnico y la ausencia de problemas
durante el ciclo. 5ada evaluacin de la calidad postlarval del -ivel G es llevada a
cabo visualmente sobre unas muestras aleatorias de m"s de /< larvas #donde
convenga$ y puntuando seg.n el sistema detallado en la 5uadro ?.
O0,+!7a.%")+, u,a)" 5!".+%1%+)-", +/ N%7+/ 2
&as evaluaciones de -ivel / son llevadas a cabo sobre muestras aleatorias de Q/<
postlarvas por tanque, siendo examinadas usando un microscopio de luz de baja y
alta potencia. ,ara estimar el estado sanitario general de las postlarvas, 'stas son
examinadas en b.squeda de varias deformidades en las valvas. Algunas
deformidades son letales.
,ara determinar la dispersin de tamaJos se mide individualmente la longitud de
por lo menos =< postlarvas y se calcula la longitud media y la desviacin est"ndar.
El coeficiente de desviacin #5>$ es obtenido de dividir la desviacin est"ndar entre
la media. %i el 5> es igual o menor al G=W la dispersin se considera baja #punt.a
G<$F si el 5> est" entre el G=W y el /=W, la dispersin es moderada #punt.a =$F y si
es mayor del /=W la dispersin es alta #punt.a <$. 5uando pasan de una etapa a
otra, es normal que el 5> aumente, de manera que se debe de tener en cuenta el
momento en que 'ste es determinado. %i un 5> es considerado elevado, el test
debe ser repetido al da siguiente para dar tiempo a toda la poblacin se
desarrolle.
&os ex"menes de la apariencia del tubo digestivo #no slo el color$ y contenido son
ecos para evaluar el nivel de alimentacin de las ,&, de acuerdo con los criterios
mostrados en la 5uadro ?. &a presencia de intestinos vacos puede ser los primeros
signos de una enfermedad, o simplemente de una alimentacin inadecuada. En
ambos casos, esto debera ser investigado con celeridad. Es muy importante
examinar las postlarvas inmediatamente despu's de la recogida de muestras.
EG

&as postlarvas tambi'n son examinadas en busca de cualquier fouling de materia
org"nica o epibionte en las valvas o las branquias #que normalmente consisten en
protozoos, bacterias filamentosas, o suciedad y materia org"nica$. El fouling puede
ser normalmente desprendido.
El sistema de puntuacin est" detallado en la 5uadro ? y es usado para calificar la
calidad de cada de cada lote de postlarvas producido.
Cua!" A 4esumen de las evaluaciones de -ivel G y / del estado sanitario de las
postlarvas.
CRITERIO PUNTUACIN OBSERVACIONES
OBSERVACIONES DEL NIVEL 1
Actividad natatoria:
Activa (> 95%)
Intermedia (70-95%)
Dbil (en el fondo) (< 70%)
10
5
0
Obervacione diaria (!-"#)
Hilos fecales:
$reente (90-100%)
Intermedio (70-90%)
A%ente (<70%)
10
5
0
Obervacione diaria (!-"#)
Homogeneidad de tamao:
Alto (&0-100%)
Intermedio (70-&0%)
'a(o (< 70%)
10
5
0
Obervacione diaria (!-"#)
C")-+)%" %)-+,-%)a/#
&leno #G<<W$
@edio lleno #=<W$
>aco #^/<W$
10
5
0
Obervacione diaria (!-"#)
OBSERVACIONES DEL NIVEL !
C")-+)%" %)-+,-%)a/#
&leno #QH=W$
@oderado #A<)H=W$
>aco #^ A<W$
10
5
0
Obervacione diaria (!-"#)
Necrosis:
A%encia (0%)
)oderado (<10%)
*evero (>10%)
10
5
0
Obervacione diaria (!-"#)
Deformidades:
A%encia (0%)
)oderado (<10%)
*evero (>10%)
10
5
0
Obervacione diaria (!-"#)
"o#ling:
A%encia (0%)
)oderado (<15%)
*evero (>15%)
10
5
0
Obervacione diaria (!-"#)
E/

@.2.D. S+/+..%9) + /a, 5",-/a!7a, 5a!a /a ,%+10!a
S+ u,a u) .ua!" 2u+ !+,u1a /", ", )%7+/+, + .a/%a + /a, 5",-/a!7a, 4 /a
5u)-ua.%9) "0-+)%a, 5a!a +-+!1%)a! +/ +,-%)" + /a, PL
Al igual que en la evaluacin de la calidad de las larvas, se realiza un cuadro
resumen de los dos niveles de calidad de las postlarvas y de los puntos del sistema
empleado #usando algunos o todos los indicadores anteriores, dependiendo de las
circunstancias$. Esta tabla es usada para determinar que tanques de postlarvas
ser"n seleccionados para la siembra, los que pueden precisar de tratamiento antes
de la seleccin, y los que ser"n recazados. 5omo antes, el responsable
seleccionar" seg.n su propia experiencia, los indicadores y el lmite de puntuacin
por debajo del cual, el lote de postlarvas puede ser tratado o recazado.
Cua!" D 4esumen de la calidad de postlarvas usando procedimientos del nivel G y /.
CRITERIO OBSERVACIONES EVALUACIN DE LA
CALIDAD
PUNTUACIN
NIVEL 1
Actividad natatoria -ivel de actividad del
comportamiento natatorio de la
larva
Activo G<
6ntermedio =
9ajo <
1asa de supervivencia e
istorial clnico del
tanque
Estimacin de la tasa de
supervivencia en cada tanque
QA<W G<
E<)A<W =
^E<W <
NIVEL 2
:eformidades :eformidades en valvas ^=W G<
=)G<W =
QG<W <
:ispersin de tamaJos
#52>$
5alculo del 5.>. del tamaJo de las
postlarvas
^G=W G<
G=)/=W =
Q/=W <
5ontenido intestinal ;rado del contenido del intestino &leno G<
@oderado =
>aco <
Couling ;rado de fouling ^=W G<
=)G<W =
QG<W <
E3

E/ !%+,&" + ,+10!a! u) +-+!1%)a" /"-+ + 5",-/a!7a, +, +7a/ua"
.u%a",a1+)-+
&a decisin de sembrar o no un lote de postlarvas, es en .ltima instancia, una
evaluacin de riesgo. -o se pueden ofrecer directrices o est"ndares fijos, puesto
que esto generalmente viene determinado por la experiencia, aunque se puede
usar la siguiente gua para reducir el riesgo de mortalidad o de bajo crecimiento del
cultivo En este an"lisis de riesgo, el orden de importancia de la evaluacin es -ivel
/ Q -ivel G. %e pueden usar los siguientes criterios2
*as postlarvas tienen +ue pasar la evaluacin de ,ivel 2-
En el supuesto de que las postlarvas pasen la evaluacin de -ivel /, se puede usar
la siguiente gua2
0na puntuacin superior a G<< representa un bajo riesgo de problemas severos
de enfermedad, y por tanto, se recomienda.
0na puntuacin de ?=)G<< representa un riesgo moderado de problemas severos
de enfermedad
0na puntuacin menor de ?= representa un alto riesgo de problemas severos de
enfermedad, y por tanto, no se recomienda
(n el supuesto de +ue los animales pasen la evaluacin de ,ivel 2$ se puede usar
la si'uiente 'u.a para el ,ivel 1-
0na puntuacin mayor de 3< representa un bajo riesgo de problemas severos de
enfermedad, y por tanto, se recomienda.
0na puntuacin de /<)3< representa un riesgo moderado de problemas severos
de enfermedad.
0na puntuacin menor de /< representa un alto riesgo de problemas severos de
enfermedad, y por tanto, no se recomienda.
@.2.J. T!a),5"!-+ 4 -!a),*+!+).%a + ,+1%//a
La ,+1%//a *%?aa +) /", ."/+.-"!+, +, -!a,/aaa .u%a",a1+)-+ a /a,
%),-a/a.%")+, + +)&"!+
&a semilla es transportada en tanques grandes, en densidades que pueden variar,
dependiendo de la duracin y del m'todo de transporte. %e utilizan normalmente
camiones para trasladar la semilla. &a temperatura usada y las densidades de
siembra empleadas durante el transporte variar"n de acuerdo con la distancia y
duracin del traslado. -ormalmente, no se necesita descender la temperatura ya
que el laboratorio est" cerca de "rea de engorde, se reducir"n a G<
o
5 para
transportes de mas de 3 oras de duracin. :ica reduccin de temperatura es
usada para descender la tasa metablica de la semilla, de manera que 'stas
EE

consuman menos oxgeno, excreten menos residuos y permanezcan en calma
durante el transporte.
S+ ,%&u+) +,-!%.-a, 1+%a, + 0%",+&u!%a
&os recipientes y el equipo de transporte #mallas, tubos de aireacin, etc.$ son
desinfectados antes y despu's de su uso #ver las secciones apropiadas para los
procedimientos en este documento$.
&os veculos de transporte de semilla son una fuente potencial de contaminacin,
puesto que pueden visitar varios laboratorios y "reas de cultivo en su recorrido
para realizar la entrega de semilla. &os camiones de transporte #por lo menos las
ruedas y neum"ticos$ son desinfectados antes de entrar en el laboratorio.
@.2.K. D".u1+)-a.%9) 4 !+&%,-!" + a-",
0na buena documentacin y registro de datos es fundamental para cualquier
sistema de buena pr"ctica de manejo. Es importante que un conjunto detallado de
procedimientos y operaciones sean desarrollados y que se establezcan programas
regulares de formacin de los empleados. Es importante as mismo, que sean
revisados y actualizados regularmente.
E=