LA ESTRUCTURA DE VASOS DEL XILEMA EN GRAPEVINE (VITACEAE) Y UN POSIBLE MECANISMO PASIVO PARA LA

PROPAGACIN SISTMICA DE ENFERMEDADES BACTERIANAS.

Xylem patgenos que habitan se convierten sistmica, lo que sugiere que los microorganismos se mueven de manera
eficiente en el xilema. Para comprender mejor las vas xilema y cmo las bacterias se mueven dentro del xilema, vasos
conectividad entre tallos y hojas de Vitis vinifera cv. Chardonnay y Muscadinia rotundifolia cv. Cowart se estudi. Se
utilizaron tres mtodos:
(1) la luz que produce bacteria, Yersinia enterocolitica, (Ye) cepa GY5232 se carg en pecolos y sigui usando una pelcula
de rayos X,
(2) fluorescente perlas se cargan y se siguieron por microscopa, y
(3) de aire de baja presin se bombea en las hojas y las burbujas extruidos a partir de cortes en hojas sumergidas fueron
seguidos. Las bacterias, las perlas , y el aire se movieron a travs de largas y ramificadas de los vasos del xilema en el pecolo
las venas de las hojas de ambas variedades. Desde el tallo, las bacterias y el aire en las venas viaj primarios y secundarios
de las hojas de uno, dos, y tres nodos por encima del punto de las bacterias o de aire de carga. Las partculas y el aire poda
moverse sin obstculos a travs de un solo vaso del xilema o mltiples vasos (conductos) conectados posiblemente a travs
de las membranas con perforaciones desde el interior del eje del tallo a la lmina de la hoja. Las bacterias tambin son
capaces de desplazarse largas distancias en cuestin de minutos a partir del tallo de la hoja pasiva sin tener que cruzar
perforaciones de membranas. Dichos conductos del xilema, abiertas complejos no han sido bien documentados antes, estos
hallazgos ayudarn a dilucidar mecanismos implicados en la propagacin sistmica de los agentes patgenos.

INTRODUCCIN
Durante la formacin de haces vasculares en hojas, xilema desarrollo es discontinuo, con una bidireccional auxina-regulado
diferenciacin de tal manera que se produce la maduracin de xilema tanto basipetalmente y acropetalmente hasta la
vecina longitudinal segmentos se conectan para formar la red de xilema (Esa, 1965a, b; Sachs, 1969, 1981; Aloni, 2005).
Como miembros de vaso del xilema, las paredes celulares secundarias maduras se espesan acuerdo con algn patrn. Los
miembros de vaso que componen un vaso que tiene finas paredes perforadas, pero los miembros de vaso en los extremos
de un vaso tienen una imperforado pared final (Esa, 1965a). Por lo tanto, los vasos del xilema tienen una longitud y forma
de unidades discretas finitas hidrulicamente ligados a vasos adyacentes por membranas perforadas a travs de la cual el
agua y solutos de bajo peso molecular pueden pasar, pero los microorganismos (a excepcin de muy pequeos virus) y las
burbujas de gas no puede (Tarbah y Goodman, 1987; Fosket, 1994; Bove 'y Garnier, 2002; Tyree y Zimmermann, 2002;
Zwieniecki et al, 2002;. Choat et al., 2005). Placas de perforacin tambin se pueden formar en la secciones reforzadas de
las paredes laterales cuando los vasos se encuentran en contacto fsico (Fosket, 1994).
En consecuencia, un cierto nmero de miembros de vaso del xilema vecinos pueden estar conectados por placas de
perforacin para formar vasos del xilema ramificados.
Muchas bacterias patgenas utilizan el xilema para moverse a lo largo de la planta a ser sistmica (Bove 'y Garnier, 2002).
Los investigadores examinaron la interrelacin vascular rganos (por ejemplo, detener a hoja) han descrito la hidrulica
conexiones dentro de una planta (Howard, 1974; Ewers y Fisher, 1989a, b) y se concentr casi exclusivamente en el
movimiento del agua (Rouschal de 1940, Zimmermann, 1983; Tyree y Zimmermann, 2002; Zwieniecki et al, 2002;. Choat et
al,. 2005).
Sin embargo, la presencia de membranas perforadas crea una clara diferencia entre el lugar donde el agua fluye y donde
partculas o microorganismos son capaces de llegar a travs de la corriente de transpiracin. En las pocas investigaciones
sobre el potencial xilema y vas disponibles para partculas o bacterias entre tallos y hojas, slo se observ un insignificante
movimiento de un rgano a otro (Canny, 1997; Suhayda y Goodman, 1981; Wiebe et al, 1984).. Dentro de las hojas, la
mayora de los vasos del xilema termin cerca de las uniones, especialmente el pecolo-lmina (Wiebe et al, 1984;. Canny,
1997) y la unin pecolo-tallo (Wiebe et al, 1984;. Tyree y Zimmermann, 2002). En esta organizacin, los microorganismos
tendran que pasar a travs de las membranas perforadas para salir del tallo y pasar a una lmina de la hoja.
Para obtener una mejor comprensin de cmo en el xilema viven patgenos que viajan por toda la planta, nuestro
principal objetivo era determinar las vas a travs del xilema que tales patgenos pueden pasar sin obstculos. El
movimiento de la bacteria Yersinia enterocolitica (cepa GY5232, diseado para emitir luz), perlas fluorescentes y aire de
baja presin fue seguido para determinar las vas de xilema. Vamos a mostrar los conductos del xilema largos, ramificados
que facilitan el rpido y pasivo movimiento de partculas de tallos en brotes de las hojas de la vid.
MATERIALES Y MTODOS

. figura 1. Diagramas de hojas de vid. (A) Introduccin de bacterias, perlas o de aire (flecha grande en la base del peciolo o
tallo). Hojas de vid tienen cinco venas primarias (18) y numerosas venas secundaria (28) y terciaria (38). Cada 18 vena y
asociados 28 y 38 venas se agrupan en sectores I, II, y III. No hay diferencias entre los sectores de izquierda y derecha de la
Segunda y III. (B) Tallo explantes con tres hojas y cuatro entrenudos. Hojas se numeran en orden ascendente a partir del
extremo cortado del tallo donde se introdujeron bacterias o aire (flecha grande). Para bacteriana experimentos, las hojas se
eliminaron en la base del pecolo (doble lneas) y expuestos a la pelcula fotosensible para evaluar las bacterias distancia
movido desde el tallo.
Bien regada 3 aos Vitis vinifera cv. Chardonnay y Muscadinia cv rotundifolia. Vides Cowart se cultivaron en invernaderos
en 7,9 litros macetas de plstico, las hojas y tallos analizadas en este estudio fueron de los actuales. El crecimiento del ao.
Segmentos de la hoja y el tallo se toman generalmente entre la sexta y las hojas basales de la 14a sesin de meristemos y
lminas foliares variaron del 6 al 12 cm de anchura y la altura. Chardonnay deja de 8 aos de edad, viedo cultivado vias
en Napa, California se cosechan en mayo de 2004. La hoja y tallo de muestreo producido en la misma hora del da (1000-
1100 horas). Durante este tiempo, la humedad relativa en el viedo oscil entre 40-70%, y fotosintticamente radiacin
activa (PAR) vari 1300 a 1800 mol. m
_2

.
s
_1
.
Los brotes se llevaron a cabo bajo el agua, y tres o cuatro hojas se cortaron a partir las vides en el extremo basal del pecolo
(Fig. 1A). Del mismo modo, disparar segmentos habiendo tres hojas adjuntas se rompieron bajo el agua por bacterias y aire
experimentos de movimiento (Fig. 1B). En la transferencia de hojas o tallos del agua a suspensiones bacterianas o perla, una
gota de agua se queda en el extremo del corte. Corte Las hojas y tallos bajo el agua y la retencin de una gota de agua sobre
la superficie de corte minimizado la cavitacin y la introduccin de los mbolos de aire. En las bacterias y los experimentos
de perlas, los extremos cortados no se expusieron al aire en cualquier punto durante el experimentos. En los experimentos
con aire movimiento, extremos cortados se expusieron a aire slo como se introdujo aire en el tallo o pecolo.
Hojas de vid tienen cinco venas principales (1): una vena central y dos vetas simtricas en ambos lados de la izquierda y
derecha (fig. 1A). Cada vena principal tiene numerosas venas secundarias (2) y las venas terciarias (3). Para evaluar las
longitudes de los vasos abiertos, cada una vena principal y las venas secundarias y terciarias asociadas en hojas se agrupan
en sectores I, II o III, como se muestra en la figura. 1A. vasos secundarios en cada sector se asigna una letra'' A'' o'' B'' que
comienza con el basal venas secundarias y ascender en la vena principal hacia los mrgenes de la hoja (Fig. 1A).
Bacteriana movimiento-La bacteria psicrotropica Yersinia enterocolitica (Ye) cepa GY5232 ingeniera gentica para expresar
el operon lux se introdujo en hojas por inmersin o bien el extremo del corte del peciolo o el extremo cortado del tallo en
un tubo de ensayo de vosotros GY5232 suspensin bacteriana. Hojas o tallos con hojas se les permita comenzar suspensin
bacteriana en condiciones transpiracin de 0.5, 1, 2, 3, o 5 h. Se obtuvieron los mismos resultados para todos los tiempos,
as que se usan 2 h por conveniencia.
Al final del perodo de tiempo, el movimiento bacteriana se evalu en hojas que contiene YE GY5232 ya sea por la
eliminacin de las hojas de la suspensin o el corte de las hojas de los tallos en la suspensin en la base de los pecolos
(como indicado por las lneas dobles en la figura. 1B), a continuacin, la exposicin de las hojas (pecolo y lmina de la hoja )
a pelcula de rayos x fotosensible. Las bacterias fueron detectadas por la luz que producida debido a la expresin del operon
lux. El luxCDBAE operon contiene los genes que codifican las protenas necesarias para la enzima luciferasa, la sntesis de la
sustrato de luciferasa, y otros elementos pertinentes necesarios para la bacteria a emitir luz de novo (Winson et al., 1998).
El tejido de la hoja era suficientemente transparente que la luz emitida por las bacterias se detect fcilmente por la
pelcula de rayos x fotosensible. Esto dio lugar a imgenes de los lugares de YE GY5232 dentro de los vasos del xilema de las
hojas (fig. 3). Variando tiempos de exposicin (0,25 a 24 h) a la pelcula fotosensible de las mismas hojas mostraron que
ninguna movimiento bacteriano se produjo despus de la eliminacin de las hojas de suspensin bacteriana; por lo tanto un
tiempo de exposicin de 16 h se usa por conveniencia y para obtener las vas bacterianas ms fcilmente visualizadas.
Construccin de lux
+
cepa de Yersinia enterocolitica GY5232-Ye fue diseado para emitir luz mediante la introduccin de un
plsmido codificada FlhB-operon lux de fusin (pGY377). El gen FlhB se amplific por PCR usando cebadores que los
recocido de aproximadamente 500 pb corriente arriba del codn de iniciacin y 80 pb corriente abajo del codn de
iniciacin. Los cebadores utilizados fueron flhB1 (50 GCT CTA GAG CAT AAC AAG GGT ATG AGC 30) y flhB2 (50 TCC CCC GGG
GGA TAT CTG GCC TTT CTC 30). (Un enlazador XbaI se incluy en el cebador flhB1 y un enlazador pequeo se incluy en el
cebador flhB2 para otro proyecto que no se detalla aqu.) Despus de la amplificacin, el fragmento de 580 pb se clon en
el vector pTOPO (gen Invitro) para obtener pGY330. Este plsmido fue entonces digerido con EcoRI para liberar un
fragmento de ADN que contiene FlhB y fue se subclon en el sitio EcoRI de pSB401 (Winson y col., 1998). esto form una
fusin transcripcional de FlhB con el operon luxCDBAE. El resultado plsmido, designado pGY377, fue trasladado por
electroporacin (BioRad Gene Generador de impulsos) en Yersinia enterocolitica. Esta cepa fue designado GY5232. YE fue
cultivado de forma rutinaria en triptona (1%) de extracto de levadura (0,5%) (TYE) a 26C.Antes del comienzo de cada
experimento, Ye GY5232 cepa se cultiv durante la noche en TYE a 26C y luego se subcultivaron en un 1: 30 de dilucin y
se incub otras 2 h a 26C para asegurar una alta expresin de FlhB-lux CDBAE.
Perlas de movimiento-Las hojas se retiran de los tallos como se indica, a continuacin, transferidos a viales de perlas de
poliestireno fluorescentes suspendidos en TYE en una concentracin de 1,0 3 108 microesferas / ml (FluoSpheres
poliestireno microesferas, 1.0 lm, azul-verde fluorescente [430/465 nm], Molecular Probes, Eugene, Oregon, EE.UU.). Las
hojas se pueden transpirar bajo encendido condiciones de varias horas a toda la noche. Pecolos y nervaduras de las hojas
fueron entonces freehand seccionada en vista transversal y se observa bajo la luz violeta longitudes de onda con un
microscopio compuesto Vanox-AHBT Olympus (Olympus America, Melville, Nueva York, EE.UU.), y las imgenes digitales
fueron capturados con a (Los Gatos, California, EE.UU.) cmara digital 600ES Pixera .
Aire movimiento-hojas o tallos con tres hojas fueron retirados como se indica anteriormente. Filtrado (con lana de vidrio),
aire presurizado en un mximo de 80 kPa, que era lo suficientemente baja como para evitar inducir cavitacin en los vasos
del xilema (Skene y Balodis, 1968;. Cohen et al, 2003), se aplic a los extremos cortados de los peciolos o tallos. Las hojas se
colocaron bajo el agua y, a partir de los mrgenes de las hojas, incisiones se realizaron a intervalos de 1 a 2 mm en la lmina
de la hoja. Con cada incisin, recin cortadas terminaciones vena se examinaron con un microscopio de diseccin para
detectar signo de las burbujas que salen de las venas. La primera aparicin de una corriente de burbujas era evidencia de
un vaso xilema abierto, comenzando en el extremo cortado de una o pecolo detener y terminando en el lugar del corte.
Cuando el aire de baja presin es forzado travs de los vasos del xilema de tejido fresco, el aire slo pasar a travs de los
vasos abiertos porque las membranas pit hmedo se bloquee el flujo de aire (Skene y Balodis, 1968; Tyree y Zimmermann,
2002; Cohen et al, 2003).. Si los vasos son ya embolizacin, el aire tambin ser capaz de fluir a travs de los vasos, lo que
podra comprometer la exactitud de las mediciones de la eslora del buque continuas. Sin embargo, bacterias y perlas no
pueden fluir a travs de los vasos embolizados. Dado que los
resultados a partir de los tres mtodos eran uniformes y todos los
partes de la planta se separaron bajo agua, embolias en los vasos
fueron muy poco probable que contribuyan o restar las longitudes de
los vasos abiertos, continuos determinaron en este estudio.
Hojas de intercambio. Las hojas se apagan con NaOH y mtodo un
hidrato de cloro (Ruzin, 1999). Tejido de la hoja disecado se empap
en 70% de etanol a eliminar pigmento, luego se coloca en agua, se
trat con NaOH al 5% durante varios das para eliminar todos los
contenidos de las celdas, y, finalmente, tratada con un hidrato de
cloral saturada solucin durante la noche. Las hojas se enjuagaron a
continuacin varias veces en agua, se tieron con 0,1% safranina O, y
deshidratadas y montadas de forma permanente en el microscopio
diapositivas con Permount y una cubierta de vidrio. Todo el material
se examin con un Microscopio de luz compuesto Vanox-AHBT
Olympus (Olympus America, Melville, Nueva York, EE.UU.) con ptica
de campo claro, y se fotografiaron con a (Los Gatos, EE.UU.) cmara
digital de 600 Pixeles.
-Anlisis estadstico El anlisis de la varianza (ANOVA) se utiliz para
probar la importancia de los principales efectos e interacciones
correspondientes (SAS, SAS Institute, Cary, Carolina del Norte, EE.UU.).
Tres repeticiones de 15 plantas fueron utilizado para cada
tratamiento. En todos los casos, no hubo diferencia estadstica entre
los mtodos o entre cultivares. En su caso, los medios se compararon
mediante LSD de Fisher (mnima diferencia significativa) en el nivel de
= 0,05.






figura 2. Claros de la hoja de los vasos del xilema ramificacin 28-38 venas en (A) Muscadinia rotundifolia cv. Deja
Cowart. Como indica el flecha, elementos traqueales irregulares ramifican desde las venas terciarias para formar venas
cuaternario en Vitis vinifera cv. Chardonnay (B). Barra de escala 50 lm (A), barra de escala 25 lm (B).




. figura 3. Pelcula de rayos x fotosensible y deja que muestra el movimiento de Yersinia enterocolitica cepa GY5232 de
pecolo de la hoja de la cuchilla en Vitis vinfera cv. Chardonnay (A, B) y Muscadinia rotundifolia cv. Cowart (C, D) se va.
Los crculos muestran 38 venas en el que las bacterias se han movido.


RESULTADOS
Anlisis de los claros de las hojas de Chardonnay y Cowart mostr ramas del haz vasculares entre las venas de orden inferior
(1, 2, 3;. Roth-Nebelsick et al, 2001) que consisten en simples divergencia de los vasos (Fig. 2). Uniones entre las venas de
orden superior (38 y cuaternaria) parecan estar mediada por elementos traqueales irregulares, posiblemente traqueidas
(Fig. 2B) (Esa, 1977). Chardonnay y Cowart mostraron patrones de ramificacin equivalentes y la estructura vascular. La
ramificacin de menor a venas de mayor orden sugiri la posibilidad de que los vasos continuos existen dentro de la lmina
de la hoja. Sin embargo, simple examen anatmico de la hoja de la vasculatura no muestra que las venas tienen recipientes
abiertos que podran permitir que las partculas, tales como bacterias, se muevan libremente de menor a venas de orden
superior o de un rgano a otro. Por lo tanto, se identificaron las posibles vas de xilema para el movimiento de partculas
pasiva utilizando grano, bacteriana, y experimentos de movimiento de flujo de aire.
Pecolo de la lmina de la hoja produciendo luz YE GY5232 viaj sin obstculos a travs de la corriente de transpiracin de
la corte basal final de pecolos, a travs de la unin hoja pecolo foliar, en (38) venas primaria (18), secundarias (28) y
terciario, como se muestra por los exponer las hojas a la pelcula fotosensible (Fig. 3). La pelcula estaba en blanco si no
estaba produciendo luz YE GY5232 estaban presentes. Bacteria fue consistente en todos los cinco, 18 venas y eran bastante
uniformemente distribuida. Movimiento en 28 venas pareca ser aleatoria y Ye GY5232 tambin ingres en 38 venas, a
menudo en el sector I (Fig. 3A y C; referirse a la Fig. 1A.). Particularmente oscuro puntos a lo largo de los rastros de vena en
la pelcula fotosensible pueden indicar posible agregacin de bacterias en las terminaciones vaso, produciendo a (ms
oscuro) seal luminosa colectiva ms fuerte (Fig. 3 A y C). Las bacterias se movieron rpidamente por toda la lmina de la
hoja, alcanzando una distancia mxima de 0.5 h, el intervalo de tiempo ms corto evaluado. Despus de 5 h, ms bacterias
se haban trasladado a la hoja (a juzgar por una seal ms fuerte en la pelcula fotosensible expuesta para la misma longitud
de tiempo), pero las distancias de las bacterias viaj dentro de la hoja de la 0.5 a la hora h 5 h Tiempo hizo no difieren. Se
obtuvieron resultados idnticos en estas pruebas con Escherichia coli que producen luz (E.coli) (datos no presentados).
Adems, no hubo diferencias globales entre Chardonnay y hojas Cowart en la distribucin de las bacterias o en el distancias
de las bacterias se movieron.
Aire de baja presin se movi a travs de los vasos del xilema abiertas la base del pecolo de hasta 38 venas, tanto en
Chardonnay y Cowart se deja tal como se determina por la primera aparicin de una corriente de burbujas. Aire traslad a
todas las cinco, 18 hojas venas de la hoja, ms 28 venas, y en general sigui el mismo patrn que el de Ye GY5232 bacterias.
Adems, las hojas de Chardonnay cultivadas en el campo eran equivalentes a las hojas Chardonnay de efecto invernadero
vias (Fig. 4 y Tabla 1).
Marcado con fluorescencia perlas 1-LM se cargaron en extremos pecolos cortados. Similares en Ye GY5232 y el movimiento
del aire, perlas fluorescentes se movieron desde el pecolo, a travs de la unin cuchilla pecolo-hoja, en los 1 y 2 venas de
la lmina de la hoja (Fig. 4). Perlas no se encontraron en 38 venas, pero esto era ms probable debido a la dificultad de
alzada seccionar estos trozos de hojas delgadas y para la intensidad de seal baja de slo unos pocos perlas en venas
pequeas.
Continuuo, vasos abiertos existan desde la base del pecolo a todos los cinco venas primarias basadas en el aire, el
movimiento bacteriano y de perlas. Las distancias promedio que las bacterias, perlas, y el aire viajaban a travs de los vasos
abiertos, continuos fueron similares, y vari de 60 a 80% de la longitud total de la ruta de acceso vascular potencial de base
del pecolo a la hoja terminaciones vena hoja individuales (Tabla 1). Las distancias mximas alcanzadas por Ye GY5232, las
perlas fluorescentes, y el aire eran idnticos, como se indica por la lnea de trazos . blanca. en la Fig4.

Figura 4. Una representacin esquemtica de las longitudes de los vasos abiertos, continuos como un porcentaje de la
longitud total de la ruta de acceso vascular de la base del pecolo de la hoja hoja terminaciones vena en Vitis vinifera cv.
Chardonnay (A) y Muscadinia rotundifolia cv. Cowart (B). Los puntos verdes representan las distancias medias recorridas
por las bacterias, Yersinia enterocolitica GY5232, puntos azules representan las distancias de flujo de aire a travs de las
vides cultivadas en invernadero, puntos amarillos, las distancias de flujo de aire en las vides Chardonnay de viedos
cultivados, y los puntos rosados, 1 - perlas de poliestireno lm. La lnea blanca discontinua muestra las distancias mximas se
observaron las bacterias, los granos y el aire. Los datos son medias 6 SE, sobre la base de tres repeticiones de 15 plantas por
tratamiento.
Tallo a lmina de la hoja. Baja presin de aire y Ye GY5232 se cargaron en el extremo del corte de un segmento de tallo con
tres hojas todava conectados. Al igual que en los experimentos de carga pecolo de la hoja de hoja, haba depsitos
abiertos continuos desde el punto de carga en los tallos, que se tradujo en un rpido movimiento de las partculas del tallo
en las tres hojas, al parecer, sin cruzar ningn hoyo den las membranas. Las bacterias y el aire viajaron desde el tallo
cortado en 1 y 2 lminas foliares venas de al menos tres hojas por encima de las bacterias o de fuente de aire (consulte.
Fig. 1B), moviendo pasivamente entre varios rganos. Cowart diferan poco en que no se observaron bacterias en las 2
venas de las terceras hojas, y slo una vena 2 en la tercera hoja no tuvo ningn movimiento de aire (Tabla 2); aparte de
esto, Chardonnay y Cowart eran indistinguibles. No se observ YE GY5232 o flujo de aire en 3 venas de cualquiera de las
hojas (primera, segunda, o tercera) cuando el aire o bacterias se introdujeron a travs del vstago. Como era de esperar, La
longitud de los vasos abiertos que va desde el vstago en 2 venas era ms larga en las hojas por encima de la tercera corte
del tallo. Aunque el nmero de bacterias han llegado a la tercera hoja de la primera o segunda, el movimiento dentro de
lminas de las hojas fue sorprendentemente similar en los tres hojas. Los patrones de distribucin eran comparables a los
observados cuando el aire, bacterias, o perlas se administraron a partir de la base del pecolo (Fig. 3).
El nmero de hojas por tallo (que tena 3 aos) en segmentos que tienen recipientes abiertos fue dictado en gran medida
por el tamao de la planta y no representaban la distancia mxima de la bacteria o el aire pueden ser capaces de pasar de
un rgano abierto, a travs de los vasos del xilema continuo. En efecto, en segmentos de tallo ms grandes tomadas entre
la 6 y 14a hojas basales al meristemo rodaje, se observ flujo de aire en 1 y 2 de las venas de la quinta hoja por encima
de un tallo cortado, que tienen longitudes medio de los buques de 37,8 cm con una desviacin estndar de 1,5 18 cm para
las venas, y 36,7 cm, con una desviacin estndar de 6 1,6 cm para las venas 2. Por lo tanto, se espera que la longitud
mxima de los vasos abiertos, continuos para ser mayor que los segmentos de tallo de tres hojas utilizadas en este estudio.
TABLA 1. Longitudes de vaso del xilema se midieron como la distancia total posible (en mm) de la base del pecolo al margen
de la hoja dividido por el movido por Yersinia entericolita, perlas fluorescentes, o aire a baja presin y se expresa como un
porcentaje de primaria y secundaria (28 venas) laminar, en Vitis vinifera cv. Chardonnay y Muscadinia rotundifolia cv.
Cowart. Los datos son medias 6 SE. Los valores seguidos por un asterisco son significativamente diferentes de los otros
valores de la columna en p = 0.05. Ver Materiales y Mtodos, seccin de anlisis estadstico para obtener ms detalles.

a
Para evaluar la longitud de los vasos abiertos, cada una vena principal y las venas secundarias y terciarias asociadas en las
hojas se agruparon en los sectores I, II o III, como se muestra en la figura. 1A. Vasos secundarios en cada sector se les asign
una letra'' A'' o'' B'' a partir de las venas secundarias basales y ascender en la vena principal hacia los mrgenes de las hojas
(Fig. 1A).
DISCUSIN
En este estudio, se muestra por primera vez, usando tres mtodos complementarios, que los conductos del xilema estn
presentes que facilitan el movimiento de las partculas del tamao de bacterias largas distancias sin obstculos y
pasivamente a travs de los vasos del xilema de tallos y pecolos a las venas de orden superior en la lmina, en algunos
casos cubren una distancia de ms de 30 cm. Las largas vas y su incorporacin de los tallos, peciolos, y la lmina sugieren
que estos conductos pueden estar compuestos de los vasos ramificados individuales, pero tambin pueden incluir ms de
un vaso unido a travs de las membranas perforadas daadas.
Movimiento bacteriana de larga distancia dentro de los tallos de vid se ha informado antes, pero ningn estudio previo
investigar patgeno o movimiento de las partculas dentro del sistema de xilema ha reportado evidencia de los conductos
abiertos mostrados en este estudio. En Jonathan manzanos (Malus pumila), Erwinia amylovora marcada con
32
P movido un
total de 35 mm a lo largo del tallo, pero no en las hojas (Suhayda y Goodman, 1981). Despus de un segundo tratamiento
con marcado con
32
P E. amylovora, se detectaron algunas bacterias en el primer pecolo desde el punto de inoculacin (de
un total de 9 mm), pero la mayora de las bacterias marcadas se mantuvo en el tallo (Suhayda y Goodman, 1981). Tarbah y
Goodman (1987) informaron que la bacteria Agrobacterium tumefaciens se trasladaron hasta 30 cm en 24 h en la vid (Vitis
vinifera) tallo, pero no siguieron las bacterias en las hojas. Wiebe et al. (1984) mostraron que la tinta de la India se movi
tanto como 3 mm en el peciolo del tallo en la alfalfa (Medicago sativa), pero no en la lmina de la hoja. Del mismo modo,
Canny (1997) introdujeron partculas de ltex a pecolos y encontr ltex en slo tres de ms de 600 vasos en lmina de la
hoja de girasol (Helianthus annuus) y sin partculas de ltex fueron encontrados ms all de unos pocos milmetros en la
lmina foliar. Estos estudios del movimiento de partculas han llevado a la conclusin de que los vasos del xilema finales en
agrupaciones en los cruces, por ejemplo, la unin pecolo-lmina (Canny, 1997; Wiebe et al, 1984.).

Compant et al (2005) de agar inoculado con Burkholderia spp.vstrain PsJN y luego plant pequeas plntulas de vid en
cultivo de tejido (; 6 cm de altura) en el agar. Uso de GFP-o GUS-etiquetados bacterias, siguieron el movimiento de las
bacterias sobre la superficie de la raz, en los tejidos de la raz a travs de pequeas grietas en la superficie de la raz, y luego
en los vasos del xilema. Ellos observaron que Burkholderia spp. fue capaz de secretar la pared celular enzimas que digieren,
lo que sugiere que esto puede ayudar a las bacterias en su paso hacia el xilema de la raz.
Compant et al. (2005) a continuacin, observaron que las bacterias estaban presentes dentro de los vasos del xilema de la
quinta hoja dentro de 96 h de la inoculacin. Esta observacin es consistente con la de el estudio actual, mostrando el
rpido movimiento de una bacteria a travs de los vasos del xilema en una lmina de la hoja. Compant et al. (2005) utiliza
pequeas plntulas en lugar de plantas de uva estn bien desarrollados, por lo que se esperara de la red xilema en una
plntula a ser considerablemente ms pequeo, el xilema ser xilema principalmente primaria, y, obviamente, los vasos
parecan estar interconectados.
Los conductos del xilema continuos abiertos observados en el presente estudio son poco probable que sea un artefacto.
Ruptura de membranas perforadas debido al flujo de aire puede ser descartada, debido a que utiliza presiones muy bajas, y
Choat et al. (2004) demostraron que en Fraxinus americana L., membranas perforadas estirados pero no arrancan a
presiones de hasta 6 MPa. La degradacin enzimtica de las membranas perforadas tambin se puede descartar. De los tres
mtodos utilizados en este estudio (bacterias, perlas, y el flujo de aire), slo de Ye GY5232 tena el potencial de sintetizar
enzimas que degradan las paredes (no hay evidencia de que lo hace), sin embargo, las distancias recorridas del tallo al
pecolo a la lmina de la hoja fueron equivalentes para los tres mtodos. Micrografas electrnicas de barrido sugieren que,
membranas degradadas hoyo de origen natural estn presentes en varias especies (Carlquist y Schneider, 2004). Rotura de
membranas perforadas se han observado en los vasos del xilema vid (J. Stevenson, T. Rost, M. Matthews, y Q. Sun, datos no
publicados). Sin embargo, hay que ms trabajos para demostrar que las membranas perforadas observadas existan antes
de la preparacin de la muestra.
Las bacterias, las perlas, y el aire se trasladaron a la misma distancia desde el peciolo en la lmina de la hoja, delineado por
la lnea blanca en la figura. 4, lo que sugiere que ms all de este punto de limitaciones anatmicas del xilema impide el
movimiento adicional. Una explicacin para esto es que vasos cada vez ms estrechas con la proximidad a los mrgenes de
la hoja de cuentas y prevenir el movimiento de Ye GY5232. Sin embargo, el movimiento del aire no se habra inhibido
porque el aire habra sido capaz de moverse a travs de vasos ms estrechos que las bacterias o perlas a menos membranas
perforadas estaban presentes para impedir el paso de aire al imponer mayores requisitos de presin. Por lo tanto, el
movimiento de YE GY5232, perlas, y el aire fue ms probable es detenido por vaso termina con membranas perforadas
intactas.
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investigaciones actuales
Organizacin conductos del xilema y la funcin de red derivado de RMN y TAC de
imgenes; Relaciones hdricas de desarrollo del fruto; Genmica del inicio de la
maduracin; Hidrulica; El papel de la turgencia de la clula en la maduracin y la
expresin gnica, aportan nuevos datos sobre fisuracin fruto, Riego de la uva;
calidad Winegrape




La pelcula de lapso de tiempo de cabernet sauvignon baya de la uva de maduracin se lleva a
cabo desde el cuajado hasta las 11 semanas despus de la pinta, un marco de tiempo que
abarca 150 das. Las plantas fueron cultivadas bajo un fotoperodo de 16 horas y lo que ves
son las fotografas tomadas durante las horas de luz en intervalos de una hora. Reducido a
menos de un minuto de vdeo de la pelcula de lapso de tiempo se mueve a travs del
desarrollo de varios das cada segundo. Como ves el video que tome nota de lo siguiente:
el ciclo diurno se refleja en el movimiento de las hojas
la torsin de zarcillos en busca de encontrar algo para tomar y su posterior senescencia
la heterogeneidad de la fecha de envero en el clster
Por ltimo, explorar determinadas partes del video mediante el cursor de tiempo en que el
jugador mueva la pelcula hacia adelante y hacia atrs. Una gran resolucin de vdeo completo
est disponible ponindose en contacto con Gregory Gambetta en gagambetta@ucdavis.edu .

Producido y Creado por Gregory Gambetta y Jon Schadt, de la Universidad de California en

Davis, Departamento de Viticultura y Enologa
Por favor tenga paciencia ya que la pelcula tarda en cargar (unos 1-2 min.)

Berry se arrugan


Berry se arrugan y palo negro son dos trastornos que afectan a la vid en las zonas vitivincolas
de Napa / Sonoma y fruta sintomtica suele caer en el viedo antes de la cosecha. Ambos
trastornos implican el marchitamiento visible de las bayas durante la maduracin. Haga clic
aqu para ms informacin ...


Workgroup GWSS


Haga clic aqu para descargar la presentacin reciente de Greg Gambetta en la reunin del
grupo de trabajo GWSS como parte de la Conferencia de Coordinacin de Gestin de Plagas
(PMCC) en Sacramento


Fruto de maduracin
-
Sonda de presin
Haga clic aqu para descargar y explorar un archivo PDF de ASEV presentacin del cartel de
Hiroshi Wada titulado: maduracin del fruto en Vitis vinifera:. Cuentas de acumulacin de
solutos apoplstica para Pre-envero Turgencia Prdida de Berries envero se ha caracterizado
por la baya ablandamiento, la acumulacin de azcar y una renovacin de la clula ampliacin
y crecimiento del fruto. Envero tambin implica la prdida de mesocarpio presin de turgencia
celular. La hiptesis de que esta prdida se asocia con una acumulacin de solutos en el tejido
apoplsticas mesocarpio antes de la pinta. Leer ms!