FACULTAD DE INGENIERIA

PROGRAMA DE INGENERIA
AMBIENTAL Y SANITARIA
Cdigo: (espacio en blanco.
Diligenciado por el Jefe de
Laboratorios)
MICROBIOLOGIA Intensidad horaria: 2 horas
Preparacin y envase de los medios
de cultivo
Pgina 1 de 3

Docente. ARNOL ARIAS HOYOS




PREPARACION Y ENVASE DE LOS MEDIOS DE CULTIVO

INTRODUCCIN

Por su tamao, el estudio de las bacterias debe realizarse promoviendo su crecimiento
masivo. La reproduccin de una bacteria o grupo de bacterias da lugar a estructuras
macroscpicas que se denominan colonias o unidades formadoras de colonias. Para
obtenerlas, se utilizan medios de cultivos, materiales que constan de varias y diferentes
sustancias nutritivas que permiten el desarrollo de los microorganismos. Existen
numerosos medios de cultivo que el bacterilogo emplea segn el objetivo buscado. De
acuerdo con su funcin y aplicacin los medios se pueden clasificar en: 1) Medios para
contar bacterias, 2) Medios enriquecidos, 3) Medios selectivos, 4) Medios diferenciales y
muchos son combinaciones de estas cuatro categoras. En relacin con su estado fsico
los hay slidos, semislidos y lquidos; de importancia vital para los medios slidos es la
presencia de agar-agar que es un extracto seco de polisacridos de algas rojas.

Generalmente la siembra de material clnico conlleva la obtencin de cultivos mixtos, es
decir, que contienen ms de una clase de bacterias; para el estudio de una clase de ellas
deben obtenerse cultivos puros que solo contengan la bacteria a estudiar.


OBJETIVOS

Familiarizar al estudiante con diferentes clases de medios de cultivos
bacterianos.
Observar las distintas morfologas de las colonias bacterianas
MATERIALES

Cultivos puros de Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Escherichia coli,
Salmonellla sp., Streptococcus sp., Sarcina sp., en diferentes medios de cultivo.
Medios de cultivo: Agar nutritivo, Agar PDA, agar Endo, agar EMBy caldo nutritivo
Cristalera e implementos adecuados
Portaobjetos, lminas, mecheros y asas bacteriolgicas
Soluciones de Cristal Violeta, Lugol, Alcohol, Acetona, Fuschina o Safranina.






FACULTAD DE INGENIERIA
PROGRAMA DE INGENERIA
AMBIENTAL Y SANITARIA
Cdigo: (espacio en blanco.
Diligenciado por el Jefe de
Laboratorios)
MICROBIOLOGIA Intensidad horaria: 2 horas
Preparacin y envase de los medios
de cultivo
Pgina 1 de 3

Docente. ARNOL ARIAS HOYOS




PROCEDIMIENTO

1. Preparacin de las diversas clases de medios de cultivo
La forma de preparar los diferentes tipos de agar es muy similar, se debe seguir
las indicaciones segn la casa fabricante del producto y siempre utilizar agua
destilada, los medios de cultivo que se preparen deben esterilizarse.
En cuanto a el medio de cultivo Agar Nutritivo empleado para la multiplicacin de
grmenes poco exigentes, no posee ninguna clase de inhibidores o indicadores y
por lo tanto no brinda ninguna informacin acerca de las caractersticas
bioqumicas o morfolgicas de la bacteria que crece en l. Y en el caso de los
cultivos selectivos como el EMB permiten identificar un grupo especifico de
microorganismos.

2. Envase: Los medios de cultivo deben ser envasados en recipientes adecuados
(cajas de petri, o tubos de ensayo, etc) de acuerdo a su finalidad o a la posibilidad
de ser almacenados o usados inmediatamente. Los recipientes utilizados y el
proceso de envase deben permitir que persista la condicin de esterilidad,
caracterstica necesaria en los medios.

Como envasar:

a) En cajas de petri:
Destape el recipiente que contiene el medio fundido y esterilizado y pase la
boca de este recipiente por la llama de un mechero de alcohol.
Levante la tapa de la caja de petri por un lado, lo suficiente para insertar la
boca del recipiente y vierta de 10 a 20 cc del medio por caja.
Tape la caja
Tape el recipiente que contienen el medio
Distribuya el medio uniformemente dentro de la caja con un movimiento de
rotacin
Deje solidificar antes de usar o almacenar

b) En tubos de ensayo:

En tubos de ensayo esterilizados de tapa rosca (preferiblemente) y con ayuda de
un embudo, vierta de 5 a 10 c.c del medio de cultivo. Realice este proceso en un
sitio esterilizado y ubique cerca mecheros encendidos.
Cuando termine de verter el medio de cultivo en el tubo de ensayo tpelo
inmediatamente (si es un tubo de ensayo sin tapa, pngale como tapn algodn).
Si el medio de cultivo es liquido djelos en posicin vertical en una gradilla, si el
medio de cultivo es slido incline los tubos de modo que el nivel quede a unos 3
cms del tapn (tubos con agar inclinado).
FACULTAD DE INGENIERIA
PROGRAMA DE INGENERIA
AMBIENTAL Y SANITARIA
Cdigo: (espacio en blanco.
Diligenciado por el Jefe de
Laboratorios)
MICROBIOLOGIA Intensidad horaria: 2 horas
Preparacin y envase de los medios
de cultivo
Pgina 1 de 3

Docente. ARNOL ARIAS HOYOS



Acomode los tubos de ensayo en una gradilla y llvelos a esterilizar en el
autoclave.

De esta forma ya se dispone de una superficie de medio adecuada para el cultivo de
microorganismos especialmente de aquellos aerobios o anaerobios facultativos.
Cuando el medio (en cajas de petri o tubos de ensayo) no se van a usar inmediatamente
es conveniente protegerlos del polvo y contaminacin, se pueden guardar en nevera.


RECOMENDACIONES

Lea la gua y aclare todas las dudas que tenga con el profesor antes de iniciar con la
prctica. Recuerde siempre mantener un sitio de trabajo estril y desinfectado. Trabaje
estrictamente con toda la precaucin y normas sanitarias establecidas en el laboratorio,
esto debido a que est manipulando microorganismos que pueden ser peligrosos para la
salud. Al finalizar cada prctica lvese las manos con agua y jabn.


BIBLIOGRAFA
ATLAS, R.M. Microbiologa. Fundamentos y Aplicaciones. 1990. Traducido por
Jorge Tay Zavala. Mxico, Ed. Continental. 887p
BLACK, Jacquelyn. Microbiology. Editorial. Prentice-Hall, Inc. New Jersey. 1996.
COLLINS, C. Mtodos microbiolgicos. Editorial Acribia.1999. Zaragoza, Espaa.
CURTIS, H. y BARNES N. Biologa. Editorial Mdica Panamericana. Quinta
Edicin. 1997. Cali, Colombia.
GRANADOS, P. RAQUEL. Microbiologa. Bacteriologa. Editorial Paraninfo.1996.
Espaa.
MADIGAN, M.; MARTINKO, J. y PARKER, J. Biologa de los microorganismos.
Edit. Prentice Hall. Octava revisin revisada. 2001. Madrid.
PELCAZAR, REID y CHAN. Microbiologa. 4 Edicin. Editorial Mc Graw Hill, 1993





CONTROL DE EMISIN
Elabor Revis Autoriz
Nombre del docente que
elabor la gua


Firma
ARNOL ARIAS HOYOS


Firma


Firma
Fecha: 18 08 - 2011 Fecha: Fecha: