Sebenta de Imunologia

SEBENTA
BERNARDO SOUSA PINTO CLUDIA CORREIA

FILIPE CABRAL GUSTAVO COSTA LDIA
GOMES MARIA JOO CUNHA MARIA JOO
DOMINGUES SARA GIL MATA

FACULDADE DE MEDICINA DA UNIVERSIDADE DO PORTO

2012/2013
Faculdade de Medicina da Universidade do Porto Sebenta de Imunologia Bsica
Bernardo Sousa Pinto Cludia Correia Filipe Cabral Gustavo Costa Ldia Gomes Maria Joo Cunha Maria Joo Domingues Sara Gil Mata
1

ndice
Antignios 2
MHC e apresentao de antignios..... 9
Linfcito B... 23
Imunoglobulinas. 36
Organizao e expresso dos genes das imunoglobulinas. 45
Linfcito T... 59
Receptor das clulas T. 74
Subpopulaes de clulas T. 83
Clulas Natural Killer e NKT.. 91
Tolerncia antignica.. 95
Citocinas.. 99
Quimiocinas.
Imunidade inata
110
116
Sistema complemento. 121
Tabelas-sntese de imunodeficincias. 132
Glossrio de Clusters of Differentiation (CD). 136

Esto includos nesta sebenta, resumos de Imunologia Bsica da Faculdade de Medicina da Universidade
do Porto acompanhados por ilustraes e esquemas. Esperamos, pois, que esta sebenta se revele til para
o estudo de Imunologia.
Bom trabalho e votos de sucesso nos exames,
Bernardo Sousa Pinto, Cludia Correia, Filipe Cabral, Gustavo Costa, Ldia Gomes, Maria Joo Cunha,
Maria Joo Domingues, Sara Gil Mata
2

Antignios

Enquanto os componentes da imunidade inata esto programados para fazer reconhecimento de
padres, reconhecendo caractersticas partilhadas por grupos de molculas estranhas, os anticorpos e
os receptores de clulas T (molculas distintivas do sistema imunitrio adaptativo) tm um maior grau
de especificidade, reconhecendo estruturas moleculares especficas, as quais se designam por
determinantes antignicos ou eptopos.
Assim, os eptopos definem-se como sendo
regies imunologicamente activas de um
imunognio, que se ligam a anticorpos
circulantes ou de receptores membranares
especficos expressos em linfcitos. Por seu
turno, os anticorpos definem-se como sendo
protenas de ligao a eptopos, podendo ser
encontrados sob duas formas (1) como
constituintes das membranas das clulas B; (2) como produtos de secreo de plasmcitos. Note-se que
a regio de um anticorpo capaz de se ligar a um eptopo designa-se por paratopo.
A capacidade de induzir uma resposta imunitria humoral e/ou mediada por clulas designa-se por
imunogenicidade. Assim, apesar de as substncias que induzem uma resposta imune especfica serem
geralmente chamadas de antignios, a denominao imunognios mais correcta.
De facto, o conceito de antigenicidade diz respeito capacidade de uma molcula se combinar
especificamente com os produtos finais de respostas imunitrias (tais como anticorpos ou TCR). Apesar
de todas as molculas que tm imunogenicidade terem tambm antigenicidade, o contrrio no se
verifica. De facto, algumas molculas de pequenas dimenses, designadas por haptenos, so antignicas
mas carecem de imunogenicidade.
A ligao qumica de um hapteno a
uma grande protena imunognica,
designada por transportador, gera
um conjugado hapteno-
transportador com propriedades
imunognicas. Ora, a imunizao
com este tipo de conjugado leva
gnese de anticorpos especficos
para trs tipos de determinantes
antignicos: o determinante do
hapteno, os eptopos inalterados na
protena transportadora, e os novos
eptopos formados pela combinao
de regies quer do hapteno, quer
da protena transportadora.
Deste modo, um hapteno no
consegue funcionar como um
eptopo imunognico per se.
Todavia, quando vrias protenas de
um nico hapteno esto ligadas a
3

uma protena transportadora (ou at a um homopolmero no imunognico), o hapteno torna-se
acessvel ao sistema imunitrio e passa a poder actuar como um imunognio.
Muitas substncias biologicamente importantes, tais como frmacos e hormonas peptdicas e
esterides, podem funcionar como haptenos, de tal modo que os conjugados destes haptenos com
grandes protenas transportadoras podem ser usados para produzir anticorpos especficos para
haptenos. Esses anticorpos so teis para avaliar a presena de vrias substncias no corpo, sendo, por
exemplo, usados nos testes de gravidez.
A imunogenicidade no depende apenas de propriedades intrnsecas de um antignio, mas tambm de
um vasto nmero de propriedades do sistema biolgico particular encontrado pelo antignio, bem
como da maneira como o imunognio apresentado.
Propriedades que contribuem para a imunogenicidade:
No-pertena ao self
Para despoletar uma resposta imune, uma molcula deve ser reconhecida como "non-self" pelo sistema
imunolgico. Caso isso no acontea, verifica-se um fenmeno de tolerncia, ou seja, falta de resposta
imunolgica aps contacto com um antignio (algo que se verifica na presena de antignios do self). De
referir que os antignios que induzem tolerncia designam-se por tolerognios.
Os linfcitos adquirem tolerncia a antignios do self, aquando do seu desenvolvimento (de facto, os
linfcitos imaturos so expostos a componentes do self para aprenderem a reconhec-los como tal).
Os antignios que no forem apresentados aos linfcitos neste perodo crtico podem vir mais tarde a
ser reconhecidos como "non-self" (estranhos) pelo sistema imune, o que pode causar graves patologias.
No que concerne sua provenincia, os antignios reconhecidos como non-self podem ser classificados
como:
Xenoantignios: Os xenoantignios dizem respeito a imunognios no pertencentes a
indivduos da mesma espcie. Assim, os xenoantignios incluem os patogneos, as exotoxinas
(substncias com forte antigenicidade e patogenicidade) e os toxoides (exotoxinas que perdem
a toxicidade, mas mantm a sua antigenicidade).
Quando um xenoantignio introduzido num organismo, o grau da sua imunogenicidade
dependente de quo diferente este dos antignios do self. De facto, quanto mais afastadas na
escala filogentica, maior ser a disparidade estrutural entre as molculas. Existem, contudo,
algumas excepes a esta regra - algumas macromolculas (tais como colagnio e citocromo c)
tm sido muito conservadas ao longo da escala filogentica, pelo que geram muito poucas
reaces de imunogenicidade em diversas linhagens de espcies.
Aloantignios: Os aloantignios so imunognios provenientes de diferentes indivduos da
mesma espcie. Assim, os aloantignios incluem os antignios dos sistemas ABO, Rh e MHC,
que so alvo de variaes entre indivduos distintos da mesma espcie.
Auto-antignios: Alguns componentes do "self" (tais como os espermatozides e o tecido da
crnea) so separados do sistema imune de modo muito eficaz (sequestro de antignios), pelo
que se pores destes tecidos forem injectadas numa outra localizao do mesmo organismo,
estas funcionaro como imunognios, nomeadamente, como auto-antignios. Para alm dos
antignios sequestrados, os auto-antignios incluem molculas alteradas de tecidos do self, tais
como antignios de clulas tumorais.
4

Peso Molecular
Existe uma correlao entre o tamanho da macromolcula e a sua imunogenicidade. De facto, os
imunognios mais activos tendem a ter uma massa molecular superior a 100.000Da. Geralmente, as
substncias com massa molecular inferior a 5000-10.000Da so imunognios fracos, apesar de se ter
verificado que algumas molculas com massa molecular inferior a 1000 Da tm propriedades
imunognicas.
Composio qumica e heterogeneidade
O tamanho e a estranheza no so suficientes per se para tornar uma molcula imunognica, pelo que
so necessrias outras caractersticas. A ttulo de exemplo, independentemente do seu tamanho, os
homopolmeros sintticos no so, geralmente, imunognicos. Por oposio, os heteropolmeros so,
normalmente, mais imunognicos que os homopolmeros.
Assim, a complexidade qumica tambm contribui para a imunogenicidade. Sabe-se, por exemplo, que
as protenas, os lipopolissacardeos e os polissacardeos tm forte aco imunognica. Por contraponto,
os cidos nucleicos (excepto se em cadeia simples ou complexados com protenas) e os lipdeos so
fracos imunognios. Contudo, se apresentados convenientemente (conjugados com protenas
transportadoras), os antignios lipdicos tambm podem induzir respostas nas clulas B de facto, a
imunizao de organismos com estes conjugados lpideo-protena permite obter anticorpos altamente
especficos para os lpideos em questo. Este conhecimento apresenta importncia prtica significativa,
sendo, por exemplo, utilizado no doseamento de leucotrienos em asmticos, ou para a deteco de
prednisona em transplantados.
Susceptibilidade ao processamento e apresentao de antignios
O desenvolvimento das respostas humorais e celulares requer a interaco das clulas T com o
antignio previamente processado e apresentado em conjunto com molculas MHC. As macromolculas
maiores, insolveis e agregadas so mais imunognicas que as molculas pequenas e solveis, dado
serem mais prontamente fagocitadas e processadas. Contudo, as macromolculas que no podem ser
degradadas ou apresentadas ligadas ao MHC so consideradas imunognios fracos.
Dosagem de imunognios e via de administrao
A aco dos imunognios dependente da dose em que so administrados. Uma dose insuficiente de
antignio incapaz de estimular uma resposta imune, quer pelo facto de falhar a activao de um
nmero suficiente de linfcitos, quer por, em certos casos, baixas doses de antignios poderem induzir
anergia (ausncia de resposta) ou tolerncia imunolgica. Contudo, doses muito elevadas e persistentes
de antignios tambm podem acabar por tolerncia
Em termos experimentais, sabe-se que, na maior parte dos casos, a administrao de uma dose nica de
imunognios no suficiente para induzir uma resposta imunolgica forte. De facto, a induo de uma
resposta forte requer, frequentemente, a administrao de doses baixas e repetidas ao longo de
algumas semanas. Estas administraes repetidas ("boosters") aumentam a proliferao clonal de
clulas B e T especficas para o antignio, aumentando a populao de linfcitos especficos para o
mesmo.
A via de administrao do antignio tambm influencia fortemente que rgos imunolgicos e que
populaes celulares estaro envolvidas na resposta. A administrao por via sub-cutnea ou intra-
5

drmica aumenta a imunogenicidade de um antignio, enquanto a administrao por via oral, inalatria
ou intra-venosa promove a sua tolerncia.
Adjuvantes
Os adjuvantes so substncias que,
quando combinadas com um antignio e
injectadas num organismo, aumentam a
imunogenicidade desse antignio. Os
adjuvantes so frequentemente usados
(nomeadamente na rea da investigao e
na vacinao) para aumentar a resposta
imune de um antignio com
imunogenicidade baixa ou que exista em
baixa quantidade.
Sabe-se que alguns importantes
adjuvantes naturais (tais como os
polirribonucletidos e lipopolisacardeos
bacterianos, por exemplo) so ligandos dos
Toll-like receptors das clulas dendrticas e
dos macrfagos, estimulando assim as
respostas imunes, por via da activao da imunidade inata.
Apesar disso, a contribuio quantitativa de cada adjuvante para o desenvolvimento de uma resposta
imune ainda no est completamente clarificada. De qualquer modo, pode-se dizer que, no cmputo
geral, os adjuvantes parecem exercer pelo menos um dos seguintes efeitos:
Prolongamento da persistncia do antignio;
Aumento da intensidade de sinais co-estimulatrios;
Aumento da inflamao local;
Estimulao da proliferao linfocitria no-especfica.
O nico adjuvante aprovado para uso humano o sulfato de alumnio-potssio (alum), que prolonga a
persistncia do antignio provavelmente, por interaco com os Nod-like receptors (NLR). Quando o
alum misturado com o antignio, este precipita. Ora, a injeco deste precipitado de alum leva a que o
antignio seja libertado mais lentamente a partir do local de injeco, o que aumenta a exposio ao
antignio de alguns dias para vrias semanas. O precipitado de alum tambm aumenta o tamanho do
antignio, aumentando a probabilidade de fagocitose.
Existem ainda adjuvantes gua-leo, no aprovados para uso humano, tais como o adjuvante
incompleto de Freund, que composto por uma soluo aquosa contendo o antignio, leo mineral e
um agente emulsionante (como o mono-oleato de sorbitano). Este agente dispersa o leo em pequenas
gotculas em torno do antignio, que ento libertado de modo muito lento a partir do local de
injeco.
Tanto o alum como os adjuvantes de Freund estimulam uma reaco inflamatria crnica localizada,
que atrai tanto fagcitos como linfcitos. Esta infiltrao celular no local da injeco do adjuvante
resulta frequentemente na formao de um granuloma (massa de clulas densa e rica em macrfagos).
6

Gentipo do indivduo imunizado
Mesmo que uma molcula apresente propriedades que contribuem para a imunogenicidade, a sua
capacidade para induzir uma resposta imune vai depender de certas propriedades do sistema biolgico
com o qual contacta.
De facto, a constituio gentica de um indivduo imunizado influencia a resposta imune que este
manifesta, assim como o seu grau de resposta. Ora, de acordo com vrios estudos experimentais, sabe-
se que o controlo gentico da resposta imune encontra-se amplamente dependente dos genes que
codificam para o MHC. Isto significa que os produtos genmicos do MHC, que participam na
apresentao do antignio processado s clulas T, desempenham um papel fundamental na
determinao do grau de resposta aos imunognios. Esta resposta ainda influenciada pelos genes que
codificam para os receptores de clulas B e clulas T, bem como por genes que codificam diversas
protenas envolvidas nos mecanismos de regulao imunitria.
O gentipo do indivduo particularmente importante para definir a sua susceptibilidade a alergnios.
Os alergnios so antignios que despoletam reaces imediatas de hipersensibilidade, as quais se
caracterizam pela produo exacerbada do anticorpo IgE, que se liga aos mastcitos e promove a
libertao de mediadores.
Eptopos
Como anteriormente mencionado, as clulas imunes no interagem nem reconhecem uma molcula
imunognica por inteiro. Em vez disso, os linfcitos reconhecem locais discretos nessa macromolcula,
os quais so designados por eptopos, ou determinantes antignicos. De referir que, j foi demonstrado
que as clulas B e T reconhecem diferentes eptopos na mesma molcula antignica.
Os linfcitos podem interagir com um antignio complexo em vrios nveis da estrutura antignica, ou
seja, um eptopo de uma protena antignica pode envolver elementos da sua estrutura primria,
secundria, terciria ou mesmo quaternria. No caso dos polissacardeos, estes contm normalmente
ramificaes, sendo que os pontos de ramificao contribuem frequentemente para a conformao dos
eptopos.
Normalmente, os eptopos reconhecidos pelas clulas B encontram-se expostos superfcie dos
imunognios (isto porque as clulas B interagem com antignios presentes em soluo). Por oposio,
os eptopos reconhecidos pelas clulas T so geralmente peptdeos derivados da digesto enzimtica de
protenas patognicas, sendo apenas reconhecidos pelo T-cell receptor quando complexados com uma
molcula MHC assim, os eptopos das clulas T podem se encontrar em qualquer local da protena.
Eptopos das clulas B
Os eptopos das clulas B so normalmente constitudos por aminocidos hidroflicos localizados na
superfcie de um imunognio. Assim, estes eptopos so topograficamente acessveis a anticorpos livres
ou ligados membrana das clulas B.
Isto , os eptopos das clulas B devem encontrar-se superfcie das respectivas protenas, de modo a
permitir a ligao dos respectivos anticorpos. Assim, normalmente, os eptopos correspondem a regies
mais salientes da superfcie das protenas, sendo que estas regies so predominantemente
constitudas por aminocidos hidroflicos. Por oposio, as sequncias aminoacdicas "escondidas" no
interior das protenas so predominantemente hidrofbicas, e no podem funcionar como eptopos das
clulas B, a no ser que as respectivas protenas sofram desnaturao.
7

Os eptopos das clulas B podem ser de natureza linear ou, mais frequentemente, conformacional. Os
eptopos lineares so constitudos por resduos contguos sequenciais localizados ao longo de uma
cadeia polipeptdica, enquanto os eptopos conformacionais so constitudos por resduos no
sequenciais de segmentos, que se tornam mais prximos quando o antignio adquire uma determinada
conformao estrutural. Note-se que, contrariamente aos eptopos B que so maioritariamente
conformacionais, os eptopos T so de natureza linear.
Os eptopos sequenciais e no sequenciais geralmente comportam-se de maneira diferente quando a
protena desnaturada, fragmentada ou reduzida. A ttulo de exemplo, a fragmentao adequada de
uma protena pode reter eptopos sequenciais sem os alterar, pelo que os anticorpos mantm a
capacidade de se ligar ao seu eptopo. Por oposio, os eptopos no sequenciais so geralmente
eliminados quando uma protena fragmentada, ou quando as suas ligaes dissulfito so reduzidas.

Na sua maioria, os anticorpos gerados aps ligao a protenas globulares ligam-se a essas protenas
apenas quando estas se encontram na sua conformao nativa. Como a desnaturao destes antignios
normalmente muda a estrutura dos seus eptopos, os anticorpos para estas protenas no se ligam a
protenas desnaturadas.
Os eptopos das clulas B tendem a estar localizados em regies flexveis de um imunognio e tm,
frequentemente, mobilidade local. Considera-se que a mobilidade local dos eptopos maximiza a
complementaridade com o local de ligao ao anticorpo, de tal modo que os eptopos mais rgidos
parecem ligar-se menos eficazmente aos respectivos anticorpos. Apesar disso, a ligao de um anticorpo
a um eptopo mais rgido revela maior afinidade que a ligao de um anticorpo a um eptopo mais
flexvel.
A superfcie de uma protena , na sua maioria, potencialmente imunognica, apresentando um grande
nmero de locais antignicos potenciais. Contudo, o nmero de locais antignicos de uma protena
reconhecidos pelo sistema imune inferior ao seu repertrio potencial antignico (ou seja, nem todos
os potenciais locais antignicos de uma protena so reconhecidos pelo sistema imunitrio), sendo que o
reconhecimento de locais antignicos varia entre indivduos da mesma espcie ou diferentes espcies.
8

Isto , para alguns indivduos, certos eptopos de um antignio so considerados imunognicos,
enquanto para outros no.
A intensidade da resposta imune despoletada por diferentes imunognios tambm no idntica
alguns imunognios so capazes de induzir uma resposta imune mais pronunciada, sendo designados
por imunognios imunodominantes. A imunodominncia dos eptopos varivel de indivduo para
indivduo e, de facto, pensa-se que a imunodominncia dos eptopos influenciada, no s pelas
propriedades topogrficas intrnsecas do eptopo, mas tambm pelos mecanismos regulatrios do
indivduo.

9

MHC e apresentao de antignios
Contrariamente aos anticorpos e aos receptores das clulas B (que so capazes, per se, de reconhecer
um antignio), os receptores das clulas T apenas reconhecem antignios que tenham sido processados
e que sejam apresentados por molculas do complexo major de histocompatibilidade (MHC).
As molculas de MHC so essenciais num contexto de imunidade adaptativa, sendo que o conjunto
particular de MHC expressas por um indivduo influencia o repertrio de antignios para os quais as
clulas T
C
e T
H
respondem.
Consideraes genticas
O complexo MHC (complexo HLA) um conjunto de genes dispostos ao longo de um segmento de DNA
sito no brao curto do cromossoma 6. Nesse complexo, existem 121 genes funcionais, os quais se
encontram organizados em regies que codificam trs classes de molculas:
Genes MHC classe I: Codificam glicoprotenas expressas superfcie de quase todas as clulas
nucleadas. As molculas MHC classe I tm como funo a apresentao de antignios
peptdicos s clulas T
C
.
Existem molculas MHC I clssicas e no clssicas. As molculas clssicas so codificadas pelos
loci A, B e C, sendo expressas na maior parte das clulas. Por oposio, as molculas no-
clssicas so codificadas por outros loci, desempenhando papis mais especficos a ttulo de
exemplo, o HLA-G expresso no citotrofoblasto, impedindo que o feto seja reconhecido como
estranho e que seja rejeitado pelas clulas T
C
maternas (de qualquer modo, ainda no so
conhecidas as funes de todas as molculas). J o HLA-E expresso em conjunto com as
molculas de MHC I clssicas, desempenhando importantes funes na sinalizao das clulas
Natural Killer.

Genes MHC classe II: Codificam para glicoprotenas expressas, sobretudo, superfcie de
clulas apresentadoras de antignios (macrfagos, clulas B e clulas dendrticas). As molculas
MHC classe II apresentam peptdeos antignicos processados s clulas T
H
. De referir que, em
termos genticos, as molculas MHC II so codificadas pelos loci DP, DQ e DR.
Existem ainda molculas no-clssicas codificadas pelo MHC II de entre essas molculas
destaque para as protenas TAP, LMP, HLA-DM e HLA-DO (vide infra).

Genes MHC classe III: Codificam para protenas com funo imune, que so secretadas. Essas
protenas incluem elementos do sistema de complemento e molculas envolvidas na
inflamao.
A regio dos genes do MHC classe III encontra-se flanqueada pelas regies dos genes da classe I
e da classe II. Essa regio codifica molculas fundamentais para a funo imunitria, mas que
apresentam poucas coisas em comum (quer em termos funcionais, quer em termos estruturais)
com as molculas MHC classe I/II. De facto, os produtos codificados pela regio MHC classe III
incluem:
Protenas do complemento C4, C2 e factor B;
TNF e outras citocinas inflamatrias;
Enzima 21-hidroxlase e outras molculas que no participam na funo imunitria

10

Os loci que constituem os MHC so altamente polimrficos. Todavia, os genes MHC encontram-se muito
perto uns dos outros, de tal modo que a frequncia de recombinao (ou seja, a frequncia de
ocorrncia de crossing-over durante a meiose) muito reduzida. Deste modo, a maior parte dos
indivduos herda um hapltipo (conjunto de alelos) de cada progenitor, sem que o hapltipo (na maior
parte dos casos) tenha sofrido recombinao.

Os alelos do MHC so co-dominantemente expressos. Isto , em cada clula, so simultaneamente
expressas molculas de origem paterna e as molculas de origem materna. Assim, um indivduo pode
partilhar dois hapltipos de MHC com um seu irmo, sendo que a probabilidade de tal acontecer
prxima de . Ora, indivduos que partilhem dois hapltipos do MHC designam-se por HLA-idnticos.

Todavia, nenhum indivduo ser compatvel com os seus progenitores. De facto, cada descendente
apenas pode partilhar um hapltipo de MHC com os seus progenitores nessas situaes, os indivduos
so referidos como haplo-indnticos.

Apesar de a taxa de recombinao por crossing-over ser baixa para os genes MHC, este fenmeno
contribui significativamente para a diversidade de loci nas populaes humanas. Assim, como resultado
da recombinao e de outros mecanismos que permitem gerar mutaes, muito difcil que dois
indivduos no-relacionados apresentem conjuntos idnticos de genes MHC.

Molculas MHC classe I

Em termos estruturais, as molculas de MHC classe I so constitudas por duas cadeias:

Cadeia de 45 kDa: Glicoprotena transmembranar codificada pelos genes polimrficos das
regies A, B e C do complexo MHC.
o Trs domnios externos (
1
,
2
e
3
), cada um com cerca de 90 aminocidos.
o Domnio transmembranar (cerca de 25 aminocidos)
o Segmento citoplasmtico (cerca de 30 aminocidos)
11

Cadeia 2-microglobulina de 12 kDa: Protena altamente conservada, codificada por um gene
expresso num cromossoma distinto. Esta cadeia similar em tamanho e organizao ao
domnio 3, com o qual interage de forma no-covalente. Para alm disso, a 2-microglobulina
no contm uma regio transmembranar.

Por outro lado, podemos considerar que as molculas de MHC apresentam dois pares de domnios
interactuantes:
Um par distal constitudo pelos domnios
1
e
2
;
Um par proximal constitudo pelo domnio
3
e pela
2
microglobulina.

Os domnios
1
e
2
interagem
entre si, formando uma
plataforma de oito folhas
anti-paralelas entre duas
regies em -hlice. Esta
estrutura forma uma fenda
profunda, cujas paredes so
as -hlices e cujo pavimento
a folha . Esta fenda encontra-
se superfcie das molculas
MHC classe I, sendo
responsvel pela ligao aos
peptdeos antignicos de
facto, esta fenda suficiente
grande para permitir a ligao
de um peptdeo com 8-10
aminocidos.
Por seu turno, os domnios
3
e
2
-microglobulina apresentam,
cada um, duas folhas pregueadas , sendo que cada uma destas folhas formada por conjuntos de
aminocidos dispostos anti-paralelamente. Ora, conhecendo esta estrutura, torna-se fcil de
compreender porque que as cadeias e a
2
-microglobulina integram a superfamlia das
imunoglobulinas.
O domnio
3
encontra-se altamente conservado entre as molculas de MHC, contendo uma sequncia
que interage com a molcula membranar CD
8
, a qual expressa nas clulas T
C
. Por seu turno, a
2
-
microglobulina interage amplamente com o domnio
3
(embora tambm interaja com os domnios
1
e
2
). Ora, essas interaces so essenciais para que se forme uma protena MHC I - de facto, as clulas do
tumor de Dandi so incapazes de produzir
2
-microglobulina. Essas clulas tumorais produzem as
cadeias do MHC I, mas no as expressem sua superfcie.
Interaco MHC classe I-peptdeo
As molculas MHC I ligam-se a peptdeos, apresentando-os a clulas T CD8
+
. Normalmente, esses
peptdeos so derivados de protenas intracelulares endgenas digeridas no citosol. Subsequentemente,
esses peptdeos so transportados desde o citosol at as cisternas do retculo endoplasmtico rugoso,
onde interagem com as molculas do MHC I - este processo constitui a via citoslica (vide infra).
12

Cada tipo de molcula MHC I (A, B e C) liga-se a um conjunto nico de peptdeos. Para alm disso, cada
variante allica de MHC I liga-se a um conjunto distinto de peptdeos. Como cada clula nucleada
expressa 10
5
cpias de cada molcula MHC I, vrios peptdeos distintos so simultaneamente
apresentados pelos MHC I expressos superfcie celular.
A capacidade de uma dada molcula MHC I se ligar a um amplo espectro de peptdeos depende da
presena de sequncias especficas de aminocidos expressas ao longo de posies definidas desses
peptdeos. Esses resduos de aminocidos ancoram o peptdeo antignico fenda do MHC I, sendo por
isso designados por resduos de ancoragem.
No admira, portanto, que as cadeias laterais dos resduos de ancoragem de um peptdeo sejam
complementares s estruturas de superfcie da fenda da molcula MHC I. Para alm disso, fcil
compreender porque que todos os peptdeos que se ligam a MHC I apresentam aminocidos de
ancoragem sitos no terminal carboxilo (de referir que estes aminocidos so, normalmente, de natureza
hidrofbica). Contudo, perto do terminal amina tambm possvel encontrar aminocidos de
ancoragem.
Em termos quantitativos, basta um nico complexo MHC-peptdeo para marcar uma clula para
reconhecimento e lise (processos esses que so operados por um linfcito T
C
com um receptor
especfico para esse complexo).
Molculas MHC classe II
As molculas MHC classe II so constitudas por
uma cadeia (33kDa) e por uma cadeia (28kDa),
as quais se encontram associadas por interaces
no covalentes. Note-se que cada cadeia apenas
emparelha com a cadeia codificada na mesma
regio a ttulo de exemplo, a cadeia codificada
pela regio HLA-DR apenas emparelha com a
cadeia codificada por essa mesma regio.
Contudo, se forem da mesma regio, duas cadeias
codificadas por cromossomas distintos podem,
eventualmente, emparelhar
(transcomplementao), embora isso no seja
deveras frequente.
Cada uma destas cadeias apresenta dois domnios
externos, uma poro transmembranar e uma
poro intracelular, de tal modo que as molculas
MHC classe II so glicoprotenas ancoradas
membrana citoplasmtica.
Em termos estruturais, a cadeia contm os
domnios
1
e
2
, enquanto a cadeia contm os domnios
1
e
2
. Os domnios
1
e
1
constituem os
domnios distais do MHC II, formando a fenda de ligao para o antignio. J os domnios
2
e
2

constituem os domnios proximais do MHC II, apresentando uma estrutura similar Ig fold. Isto
explica porque que as molculas MHC II pertencem superfamlia das imunoglobulinas.
13

O pavimento da fenda de ligao para o antignio das molculas MHC II constitudo por oito folhas
anti-paralelas , enquanto as paredes so formadas pelas -hlices. Apesar disso, existem diferenas
entre as fendas do MHC I e do MHC II:
A fenda do MHC I apresenta alguns resduos conservados, os quais se ligam aos resduos
terminais dos pequenos peptdeos antignicos. Assim, a fenda do MHC I apresenta uma forma
de cavidade do tipo socket (comparvel s cavidades das articulaes esferoidais).
A fenda do MHC II no apresenta resduos conservados e tem uma forma de sulco aberto
(como se fosse as duas metades de po num cachorro quente).

Interaco peptdeo-MHC II
As molculas MHC II ligam-se a peptdeos antignicos, apresentando-os s clulas T CD4
+
. A maior parte
destes peptdeos antignicos deriva de protenas exgenas (quer do self ou do non-self), as quais so
degradadas pela via endoctica. Assim, a maior parte dos peptdeos associados com o MHC II so
derivados de protenas do self ligadas a protenas, ou de protenas estranhas internalizadas por
fagocitose ou por endocitose mediada por receptores.
Os peptdeos que formam complexos com o MHC II normalmente contm 13-25 resduos aminoacdicos.
Todavia, a capacidade de um peptdeo se ligar ao MHC II depende do seu ncleo central de 13
aminocidos.
Por vezes, os peptdeos antignicos que se ligam ao MHC II apresentam regies conservadas. Porm,
estes peptdeos no apresentam resduos de ancoragem. Assim, as pontes de hidrognio estabelecidas
entre o esqueleto do peptdeo e o MHC II encontram-se distribudos ao longo do local de ligao, em
vez de se agregarem predominantemente nas extremidades (como acontece com os peptdeos de
ligao ao MHC I).

14

Polimorfismos das molculas MHC
Existem inmeras variedades allicas de molculas MHC. Todavia, cada indivduo apenas expressa uma
pequena quantidade de molculas diferentes (at seis molculas MHC I diferentes e at doze molculas
MHC II diferentes). Contudo, este nmero limitado de molculas MHC deve ser capaz de apresentar
uma grande quantidade de peptdeos antignicos diferentes s clulas T. Ora, isto possvel, porque a
ligao de peptdeos s molculas MHC no requer uma especificidade to grande, como a ligao de
um antignio a um anticorpo ou a um receptor de clula T.
Em suma, uma molcula MHC consegue ligar a muitos peptdeos diferentes e alguns peptdeos so
capazes de ligar a vrios MHC. Como j foi referido, a fenda do MHC I fechada em ambos os lados,
enquanto a fenda do MHC II aberta em ambas as extremidades. Como resultado, a fenda do MHC I
liga-se a peptdeos contendo 8-10 aminocidos, enquanto a fenda do MHC II liga-se a peptdeos
contendo 13 a 18 aminocidos.
As molculas MHC expressas por um indivduo so sempre as mesmas ao longo de toda a vida, sendo
que os genes que codificam para estas molculas no se alteram ao longo do tempo (contrariamente ao
que ocorre com os genes que codificam para as imunoglobulinas, que sofrem recombinao gentica).
Assim, a diversidade de molculas MHC gerada por dois processos distintos:
Dentro da mesma espcie, a variedade de molculas MHC resulta da presena de vrios
polimorfismos (existncia de vrios alelos para os loci que codificam para o MHC)
Dentro do mesmo indivduo, a diversidade de molculas MHC depende da existncia de vrios
alelos para cada gene, mas tambm da presena de genes duplicados com funes similares ou
sobreponveis (diz-se que os genes MHC so polignicos).

Os genes MHC I e II so altamente polimrficos, a tal ponto que existem indivduos que apresentam
diferente nmero de genes DRB (genes de codificao para cadeia do MHC II). Curiosamente, a cadeia
DRA (cadeia do MHC II) mais conservada, sendo aquela que apresenta menor variedade allica de
facto, existem apenas trs alelos desta cadeia, sendo que mais de 99% dos indivduos partilham um
mesmo alelo. De referir que a variabilidade de cada cadeia do MHC avaliada pelos grficos de Wu-
Kabot.
A enorme quantidade de polimorfismos leva a que existam quase 4x10
19
possveis combinaes de
alelos de MHC I e MHC II. Todavia, na prtica, a diversidade de combinaes um pouco menor, uma
vez que se verifica algum desequilbrio de ligao no modo como so transmitidos os alelos MHC. Ou
seja, certas combinaes allicas ocorrem com maior frequncia nos hapltipos de MHC, que o que
seria expectvel caso as recombinaes ocorressem todas meramente ao acaso.
Existem trs hipteses que procuram explicar o porqu da existncia deste desequilbrio de ligao,
nomeadamente:
a) As combinaes mais comuns so mais vantajosas;
b) O crossing-over ocorre mais frequentemente em determinadas regies de DNA;
c) Ainda passaram poucas geraes humanas, de tal modo que ainda no ocorreram os
crossing-over necessrios para o estabelecimento de equilbrio de ligao;

De qualquer modo, sabe-se que existem regies das molculas de MHC mais susceptveis a
apresentarem diversidade essas regies concentram-se nos domnios e
2
do MHC I e
1
e
1
do
MHC II.
15

Sabe-se ainda que diferentes hapltipos de MHC podem induzir diferente intensidade de resposta
imunitria. Actualmente, existem dois modelos que procuram explicar este fenmeno, ponderando-se,
inclusive, se ambos estaro correctos:
Modelo de seleco dos determinantes: De acordo com esta hiptese, diferentes molculas
MHC II diferem na sua capacidade de se ligarem a antignios processados;
Modelo de lacunas no repertrio: De acordo com este modelo, as clulas T circulantes nem
sempre expressam receptores capazes de reconhecer um dado complexo peptdeo-MHC
(porque muitas foram eliminados no timo).

Regulao da expresso do MHC
Tanto os genes MHC de classe I com os de classe II so flanqueados por sequncias promotoras, s
quais se ligam factores de transcrio especficos (que tanto podem estimular como inibir a transcrio).
Por exemplo, o CIITA e o RFX so dois factores de transcrio que promovem a transcrio MHC II -
defeitos nesses factores esto associados ao desenvolvimento da sndrome dos linfcitos nus (nesta
doena, os linfcitos esto desprovidos de molculas MHC II e, por isso, os pacientes apresentam uma
grave imunodeficincia.
A expresso de molculas MHC ainda regulada por vrias citocinas. De facto, os interferes e o TNF
aumentam a expresso celular de MHC I. Por outro lado, o interfero promove a expresso celular de
MHC II (por aumento da expresso de CIITA), incluindo em clulas no-apresentadoras de antignios
(como os queratincitos).
No que concerne aos factores responsveis pela diminuio da expresso do MHC, destaque para os
corticosterides, prostaglandinas e (em situaes muito particulares) o interfero-. A expresso de
MHC tambm diminui na sequncia de uma infeco por certos vrus, nomeadamente:
Citomegalovrus: Impede a juno entre a cadeia do MHC I e a
2
-microglobulina;
Adenovrus 12: Induz menor transcrio dos genes TAP (vide infra);
Outros vrus: Induzem menor transcrio dos genes MHC

Por vezes, a menor expresso de MHC I deve-se a menor transcrio dos genes necessrios para o
transporte dos peptdeos antignicos (genes TAP). O bloqueio da expresso dos genes TAP inibe o
transporte dos componentes da molcula MHC I e, como resultado, as molculas MHC I deixam de ser
capazes de se juntar
2
-microglobulina, no podendo ser transportadas para a membrana celular.
Como bvio, a menor expresso de MHC I resulta numa menor resposta imunitria.
Expresso celular de MHC
As molculas MHC I clssicas so expressas na maior parte das clulas nucleadas, embora o seu nvel de
expresso varie entre diferentes tipos de clulas:
Os linfcitos so as clulas que expressam maiores nveis de MHC I;
Os fibroblastos, as clulas musculares e os hepatcitos expressam baixos nveis de MHC I;
Os neurnios e algumas clulas da espermatognese no expressam MHC I.

Em clulas saudveis normais, as molculas MHC I encontram-se ligadas a peptdeos do self resultantes
do turn-over de protenas endgenas. J as clulas infectadas por vrus, expressam vrias MHC I na sua
membrana, cada uma ligada a diferentes peptdeos vricos. Como existem diferenas allicas inter-
16

individuais nas fendas do MHC I, diferentes indivduos apresentam capacidade de se ligarem a
diferentes conjuntos peptdicos vricos.
Contrariamente s molculas MHC I, as molculas MHC II so apenas constitutivamente expressas por
clulas apresentadoras de antignios (sobretudo macrfagos, clulas dendrticas e clulas B). Contudo,
algumas clulas no-apresentadoras de antignios (tais como as clulas tmicas ou as clulas T) podem
ser induzidas a expressar MHC II, sob certas condies e sob estimulao de diversas citocinas.
Para alm disso, em alguns casos, a expresso de MHC II depende do estado de diferenciao celular. A
ttulo de exemplo, estas molculas no so detectadas nas clulas pr-B, mas so constitutivamente
expressas na membrana das clulas B maduras. Paralelamente, os moncitos e os macrfagos
expressam baixos nveis de MHC II at serem activados por um antignio - a partir da, passam a
expressar grande quantidade de MHC II.
Clulas apresentadoras de antignios
Para que os antignios possam ser apresentados, estes devero primeiro de ser processados. Ou seja, o
processamento (que ocorre no interior das clulas) converte os antignios em peptdeos antignicos, os
quais podem depois ser apresentados complexados com uma molcula MHC I ou II.
Todas as clulas que expressem MHC I ou II so capazes de apresentar peptdeos s clulas T. Deste
modo, todas essas clulas poderiam ser classificadas como clulas apresentadoras de antignios.
Todavia, por conveno, apenas as clulas que expressam MHC II so designadas por clulas
apresentadoras de antignios (APC). Todas as restantes so simplesmente designadas por clulas-alvo.
As clulas apresentadoras de antignios podem ser classificadas como profissionais ou no-
profissionais. De facto clulas profissionais expressam MHC de forma praticamente constitutiva (com
excepo dos macrfagos no-activados). Por seu turno, as clulas no-profissionais apenas actuam
como APC durante curtos perodos de tempo e durante uma resposta inflamatria sustentada de
facto, estas clulas devero ser induzidas a expressar MHC II ou um sinal co-estimulatrio.
As clulas apresentadoras de antignios profissionais incluem as clulas dendrticas, os macrfagos e as
clulas B:
Clulas dendrticas: So as APC mais eficazes, na medida em que expressam nveis
constitutivamente elevados de MHC II, bem como de molculas co-estimulatrias. Assim, estas
clulas so capazes per se de activar as clulas T naf;
Macrfagos: Devem ser activados por fagocitose de antignios particulados, antes de
expressarem molculas MHC II ou molculas membranares co-estimulatrias (como B7);
Clulas B: expressam constitutivamente MHCII, mas devem ser activados antes de expressarem
molculas co-estimulatrias.

Como quase todas as clulas nucleadas expressam MHC I, quase todas as clulas podem actuar como
clulas-alvo, apresentando antignios s clulas T
C
. Normalmente, as clulas actuam como clulas-alvo
aps terem sido infectadas por um vrus (ou outros microrganismos), ou caso se tratem de clulas
tumorais, envelhecidas ou transplantadas.
MHC e susceptibilidade a patologias
Alguns alelos do MHC so expressos em muito maior frequncia em indivduos que padecem de certas
doenas. Essas patologias incluem doenas auto-imunes, certas doenas vricas, doenas do sistema de
17

complemento, doenas endcrinas (como a doena de Graves e a doena de Addison), doenas
inflamatrias (como a artrite reumatide), doenas malignas (como a doena de Hodgkin), alergias e
perturbaes neurolgicas. De facto, de entre os alelos do MHC mais fortemente associados com o
desenvolvimento de patologia, destaque para os seguintes:
HLA-B27 espondilite arquilosa;
HLA-DR2 narcolepsia;
Hapltipo A3/B14 hemocromatose.

Isto no quer dizer que estes alelos causem as respectivas doenas, at porque estas tm, na maior
parte das vezes, etiologia multifactorial. De facto, os MHC apenas podem condicionar maior
susceptibilidade ao desenvolvimento de doena (por exemplo, codificando molculas que sejam
reconhecidas como receptores vricos ou toxinas bacterianas; ou codificando molculas menos capazes
de activar os linfcitos T).
Vias de apresentao de antignios
O sistema imunitrio recorre
a diferentes vias para
apresentar antignios.
Normalmente, os antignios
endgenos (sintetizados no
interior das clulas) so
processados por via
citoslica e apresentados
superfcie celular
complexados com molculas
MHC I. Por seu turno, os
antignios exgenos (ou seja, aqueles que so captados por endocitose) so processados pela via
endoctica e apresentados superfcie celular complexados com molculas MHC II. Deste modo:
A administrao de um inibidor de sntese proteica inibe a apresentao de MHC I, mas no de
MHC II;
A administrao de um bloqueador da endocitose inibe a apresentao de MHC II, mas no de
MHC I.

De referir que, quando um vrus infecta uma clula e ocorre produo vrica no meio intracelular, as
protenas vricas sintetizadas so consideradas antignios endgenos (por serem produzidas no meio
intracelular) e seguem a via citoslica.
Via citoslica
A via citoslica verifica-se para os peptdeos endgenos conjugados com o MHC I. Esses peptdeos
derivam de protenas endgenas, as quais sofreram poli-ubiquitinao, tendo sido seguidamente
degradadas em peptdeos pelo complexo proteossmico (que envolve o proteossoma e um peptdeo
regulador). Contudo, no se sabe ainda como que o sistema imunitrio selecciona peptdeos
particulares para serem expressos com o MHC.
Nas clulas com actividade imune, existe um tipo adicional de proteossoma o imunoproteossoma, o
qual constitudo pelas protenas LMP2, LMP7 e LMP10 trs molculas no-clssicas do MHC II. Note-
se, ainda que a expresso do imunoproteossoma pode ser induzida pelo interfero ou pelo TNF-. O
18

imunoproteossoma actua mais rapidamente que o
proteossoma clssico, pensando-se que algumas doenas
auto-imunes resultem de um maior processamento
proteico, em clulas com maiores nveis de
imunoproteossoma. Sabe-se ainda que o
imunoproteossoma encontra-se presente em clulas
infectadas por vrus, o que sugere que este complexo
participa no processamento de protenas vricas para
posterior apresentao.
Os peptdeos gerados no citosol pelo
proteossoma/imunoproteossoma so translocados para o
retculo endoplasmtico rugoso pelas protenas TAP. A
TAP um heterodmero transmembranar (ou seja, atravessa a membrana do retculo endoplasmtico),
sendo constituda pelas subunidades TAP1 e TAP2. Note-se que, para a TAP actuar, esta dever
hidrolisar ATP.
A TAP tem afinidade para peptdeos contendo entre 8 e 16 aminocidos - ora, o MHC I tem afinidade
mxima para peptdeos de 9 aminocidos. Para alm disso, a TAP privilegia o transporte de peptdeos
com aminocidos hidrofbicos no terminal carboxilo, os quais constituem os resduos de ancoragem
preferenciais para as molculas MHC I. Assim, a TAP est optimizada para transportar peptdeos que
interagem com o MHC I. No admira, portanto, que as deficincias de TAP levem ao desenvolvimento
de uma sndrome que apresenta caractersticas de imunodeficincia e auto-imunidade.
Os peptdeos captados pela TAP que no se associam
logo com o MHC, sofrem aco das ERAPs, duas
protenas do retculo endoplasmtico. A ERAP-1
remove o terminal amina dos peptdeos muito
longos, para que estes tenham tamanho ptimo de
ligao. J a ERAP-2 degrada peptdeos muito
pequenos para se associarem com MHC I.
De entre as protenas reticulares, destaque ainda
para a Sec61, que catalisa o transporte de protenas
demasiado grandes para fora do retculo
endoplasmtico. No citosol, essas protenas so
degradadas pelo proteossoma, originando peptdeos
que entram no retculo e so conjugados com o MHC I.
Uma vez compreendido o processo de captao de peptdeos endgenos para o retculo
endoplasmtico, atentemos no modo como se processa a ligao entre estes e as molculas de MHC.
A cadeia do MHC I e a
2
-microglobulina so sintetizadas separadamente nos ribossomas, sendo que a
juno desses componentes num complexo MHC I estvel requer a presena de um peptdeo no sulco
de ligao de MHC I. Assim, a formao de um complexo MHC I segue vrias etapas, nomeadamente:
19

Via endoctica
As APC podem internalizar os antignios por fagocitose, endocitose ou ambos os processos. Os
macrfagos e as clulas dendrticas internalizam os antignios por ambos os processos, enquanto as
restantes APC (como as clulas B) internalizam os antignios exclusivamente por endocitose exclusiva.
Aps um antignio ser internalizado, este passa, sequencialmente, para um endossoma precoce, para
um endossoma tardio e para um lisossoma nestas estruturas, o antignio contacta com proteases e
com um pH progressivamente inferior. Deste modo, o processamento antignico pode ser inibido por
agentes qumicos que aumentem o pH dos compartimentos, ou por inibidores das proteases.
Ao sofrer a via endoctica, o antignio degradado em peptdeos de 13-18 aminocidos, os quais se
ligam a molculas MHC II, ficando protegidos de ulterior protelise. Contudo, as APC expressam
simultaneamente MHC I e MHC II, sendo que dever existir um mecanismo para prevenir as MHC II de
se ligarem ao mesmo conjunto de peptdeos que as MHC I.
Aps ocorrer sntese de MHC no retculo endoplasmtico rugoso, trs pares de cadeias II associam-se
com a cadeia invariante (CD74). Esta cadeia invariante liga-se fenda das molculas MHC II, impedindo
que esta seja ocupada por peptdeos endgenos do retculo. Para alm disso, a cadeia invariante medeia
o folding das cadeias e , induz a sua sada do retculo e encaminha as MHC II para os compartimentos
endocticos (via complexo de Golgi).
Os complexos MHC II/cadeia invariante so transportados ao longo da via endoctica. Todavia, medida
que a actividade proteoltica aumenta ao longo da via, a cadeia invariante progressivamente

A calnexina associa-se com a cadeia , promovendo o seu folding

A
2
-microglobulina liga-se cadeia , promovendo a libertao da calnexina

Forma-se uma molcula MHC I, qual se ligam a calreticulina e a tapasina
A tapasina aproxima o transportador TAP da molcula MHC I, fazendo com que esta adquira
um peptdeo antignico (a captura do antignio promovida pela TAP)
A ERp57 interage com tapasina e com a calreticulina, permitindo a libertao do complexo
MHC I/peptdeo antignico para fora do retculo endoplasmtico rugoso
O complexo MHC I/peptdeo antignico inserido na membrana
20

degradada. A clivagem final da
cadeia invariante ocorre ao nvel
dos endossomas, mas um
fragmento desta (o CLIP) mantm-
se ligado ao MHC II, o que previne
a ligao de qualquer peptdeo
prematuro.
Uma molcula MHC II no-clssica
designada por HLA-DM
necessria para catalisar a troca do CLIP por peptdeos antignicos. A HLA-DM no polimrfica nem
expressa superfcie membranar (s no interior do compartimento lisossomal), contrariamente s
restantes molculas MHC II.
A HLA-DO impede a troca entre o CLIP e o peptdeo antignico. De facto, a HLA-DO liga-se HLA-DM,
diminuindo a eficcia da sua reaco. A HLA-DO tambm uma MHC II no-clssica e no-polimrfica,
que s expressa nas clulas B e no timo. Para alm disso, a expresso de HLA-DO no induzida pela
HLA-DM. Em suma, sabe-se que a HLA-DO modula o papel de HLA-DM, mas desconhece-se a relevncia
exacta deste mecanismo.
Tal como acontece com MHC I, a ligao a um peptdeo essencial para manter a estabilidade e
estrutura das MHC II. Aps se formar um complexo MHC II/peptdeo antignico, este complexo
transportado para membrana citoplasmtica onde contacta com pH neutro e assume uma forma
estvel.
Cross-presentation de antignios exgenos
Em alguns casos, as APC podem apresentar antignios exgenos complexados com molculas MHC I
(cross-presentation). Assim, o processo de cross-presentation requer que os antignios internalizados
(que em circunstncias habituais seguiriam a via endoctica) se cruzem com a via citoslica, ligando-se
a MHC I. Desconhece-se o processo
atravs do qual isto ocorre e desconhece-
se se esta uma via alternativa de
apresentao antignica, ou se a nica
via para apresentao de MHC I nas APC.
De qualquer forma, existem muitas
vantagens no processo de cross-
presentation. Este processo permite que
as clulas dendrticas capturem vrus e
processem antignios virais (as clulas
dendrticas s conseguem capturar vrus
por endocitose, pois no apresentam
receptores vricos), o que resulta numa
rpida activao de uma resposta
antivrica, que preceda a ocorrncia de
infeco vrica generalizada.

21

Apresentao de antignios no-peptdicos
As clulas T tambm reconhecem antignios no-peptdicos
(lipdicos e glicolpidos). Todavia, esses antignios so apresentados
complexados com membros da famlia CD1 das molculas MHC I
no-clssicas. De facto, as molculas CD1 associam-se com a
2
-
microglobulina, formando uma estrutura similar ao MHC I (mas com
uma fenda mais profunda).
As molculas CD1 so codificadas por 5 genes (de A a E):
Os genes CD1A, CD1B e CD1C so expressos em timcitos
imaturos e APC profissionais (sobretudo do tipo dendrtico);
O gene CD1D1 expresso maioritariamente em APC no-
profissionais e clulas B.

As clulas apresentadoras de CD1 so reconhecidas por uma vasta
gama de clulas T (incluindo clulas que expressam TCR ) e por
clulas NKT. Sabe-se ainda, os organelos onde cada uma destas molculas CD1 se expressa so distintos
(por exemplo, o CD1A encontra-se sobretudo expresso em endossomas precoces ou na superfcie
celular).

22

23

Linfcito B
A ontogenia do linfcito B pressupe a ocorrncia
de trs etapas (a primeira das quais independente
da presena de antignios, enquanto as restantes
so dependentes da presena de antignios):
1) Maturao: Gnese de clulas B
imunocompetentes maduras. Este
processo ocorre na medula ssea.
2) Activao: As clulas B ficam activas aps
contactarem com o antignio.
3) Diferenciao: As clulas B activas
diferenciam-se em plasmcitos e clulas B
de memria.
Assim, em termos gerais, antes de abandonarem a
medula ssea, as clulas B imaturas com IgM
membranar sofrem maturao, passando a
expressar simultaneamente IgM e IgD
membranares. Geram-se, assim, clulas B nave que
so enviadas para o sangue e na linfa, sendo
transportadas para os rgos linfides secundrios
(nomeadamente, bao e gnglios linfticos). A,
caso uma clula B seja activada por interaco com
um antignio, esta clula prolifera e diferencia-se,
gerando plasmcitos e clulas B de memria.
Durante a activao e a diferenciao, algumas clulas B sofrem maturao por afinidade (aumento
progressivo da afinidade dos anticorpos para os antignios) e comutao isotpica (alterao do istipo
do anticorpo produzido pela clula B de para , e ).
Maturao da clula B
As primeiras clulas B so geradas no perodo embrionrio, no fgado e medula ssea. Todavia, aps o
nascimento, as clulas B maduras passam a ser produzidas na medula ssea. Estas clulas tm origem
em clulas precursoras linfides, que se
comeam por diferenciar em clulas B
progenitoras (clulas pr-B), as quais
expressam fosfatse membranar CD45R.
Subsequentemente, as clulas pr-B
proliferam e diferenciam-se em clulas B
precursoras (clulas pr-B) todavia, este
processo requer a presena das clulas do
estroma da medula ssea. De facto, as
clulas do estroma da medula interagem
directamente com as clulas pr-B e pr-B
e libertam citocinas (IL-7), promovendo
assim a diferenciao celular.
24

Nas fases mais precoces, as clulas pr-B tm de contactar directamente com as clulas do estroma. Em
termos moleculares, isto traduz-se pela ligao estabelecida entre as VLA-4 da clula pr-B com o
VCAM-1 da clula do estroma. Simultaneamente, o c-Kit da clula pr-B liga-se ao SCF das clulas
estromais.
A interaco c-Kit/SCF promove a actividade da cnase de tirosina do c-Kit, o que leva a que a clula pr-
B comece a dividir-se e a diferenciar-se em pr-B. Subsequentemente, a IL-7 secretada pelas clulas do
estroma liga-se ao receptor da IL-7 da clula pr-B, estimulando a maturao desta ltima. Para alm
disso, a IL-7 induz down-regulation das molculas de adeso, de tal modo que as clulas em proliferao
se passam a destacar das clulas do estroma. Assim, as clulas pr-B deixam de contactar com as clulas
do estroma, embora continuem a precisar de IL-7.
A maturao das clulas B depende da ocorrncia de rearranjos no DNA das Ig:
1- Na clula pr-B comea por haver um rearranjo gnico da cadeia pesada D
h
-J
h
. Este rearranjo
seguido por outro (tambm nas cadeias pesadas) de V
h
-D
h
-J
h
. Quando esse rearranjo est
completo, estamos perante uma clula pr-B.
2- Na clula pr-B ocorre rearranjo gnico das cadeias leves. Esse rearranjo destina a clula B para
uma especificidade antignica. Quando este rearranjo est completo, estamos perante uma
clula B imatura, a qual expressa um BCR capaz de responder a um antignio. Ora, este BCR
constitudo por IgM membranar e por Ig/Ig.
De referir que estes rearranjos dependem da actividade das enzimas RAG-1, RAG-2 e TdT. As enzimas
RAG-1 e RAG-2 so necessrias para os rearranjos dos genes que codificam para as cadeias leves e
pesadas. Deste modo, estas enzimas so expressas nas fases pr-B e pr-B. Por seu turno, a TdT insere
N-nucleotdeos nas recombinaes D
h
-J
h
e V
h
-D
h
-J
h
. Assim, esta enzima s est expressa na fase pr-B.
As clulas B imaturas no se encontram totalmente funcionais. De facto, quando estas clulas
contactam com um antignio, estas entram em apoptose ou em anergia (deixam de responder). Assim,
para se tornarem maduras, as clulas B devem co-expressar IgD e IgM nas sua membranas, o que
envolve a ocorrncia de processamento do RNA, de tal modo que passa a ser produzido um mRNA para
a cadeia e outro para a cadeia .
Enquanto as clulas B expressam BCR, as clulas pr-B expressam pr-BCR, que inclui:
1- Uma cadeia membranar associada pseudo-cadeia leve (uma cadeia homloga s cadeias
leves contendo uma regio do tipo varivel, designada por sequncia V
pr-B
, e uma sequncia
do tipo constante, designada por 5).
2- Heterodmero Ig/Ig.

Aps gnese do pr-BCR,
cada clula pr-B sofre
mltiplas divises celulares,
sendo que, nessas divises,
ocorre rearranjo dos
diferentes segmentos dos
genes da cadeia leve. Ora,
isto resulta num aumento da
diversidade de anticorpos
produzidos.
25

A maturao das clulas B no ocorre sem a presena de vrios factores de transcrio, de entre os
quais se destacam o Sox-4, o BSAP, o EBF e o E2A. Para alm disso, existem alguns marcadores de
superfcie, que permitem identificar cada fase do desenvolvimento celular:
1) Clulas pr-B: Expressam a fosftase CD45R, o heterodimero Ig/Ig, CD19, CD43
(leucosialina), CD24 (HSA) e c-Kit.
2) Clulas pr-B: Expressam todos os marcadores da clula pr-B, com excepo do CD43 e c-
Kit. Passam a expressar CD25 (cadeia do receptor IL-21) e pr-BCR.
3) Clulas B imaturas: Deixam de expressar pr-BCR e CD25. Passam a expressar BCR.

Eliminao clonal de clulas B
As clulas B produzidas na medula ssea sofrem um processo de seleco negativa. Isto , apenas as
clulas cujos anticorpos no reajam contra antignios do self completam a sua maturao. Por oposio,
as clulas que reagem com molculas do self multivalentes sofrem eliminao clonal (por apoptose) ou
atrasam a sua maturao. Neste ltimo caso, a clula B volta a rearranjar (editar) o gene da cadeia
leve do seu receptor, com ajuda da RAG-1 e RAG-2. Se o novo BCR continuar a ser auto-reactivo, ocorre
eliminao clonal ou nova edio. Contudo, caso se forme um BCR com mIgM editada que no seja
auto-reactiva, as clulas escapam seleco negativa e abandonam a medula ssea.
Por outro lado, caso as clulas B apresentem imunoglobulinas que reajam com molculas solveis do
self, estas migram para a periferia sem completarem a sua maturao tornam-se anrgicas. Algo
26

semelhante ocorre quando estas clulas reagem com molculas do self, estabelecendo ligaes de baixa
afinidade nessas situaes, as clulas tornam-se ignorantes, ou seja, completam a sua maturao, mas
revelam-se incapazes de ser activadas.

Clulas B1 e clulas B2
As clulas B1 so um subtipo de clulas B, constituindo cerca de 5% da populao de clulas B. Estas
clulas tm origem na medula ssea, sendo que a maior parte no expressa IgD. Para alm disso,
contrariamente s clulas B normais (clulas B2), as clulas B1 so capazes de se auto-renovar,
originando clulas B1 nave.
As clulas B1 revestem-se ainda de outras particularidades, nomeadamente:
As clulas B1 expressam CD-5, um marcador associado s clulas T.
Nos tecidos linfides secundrios, existem poucas clulas B1. Todavia, as clulas B1 constituem
a maior parte das clulas B das cavidades pleural e peritoneal.
O repertrio de regies variveis das clulas B1 muito mais restrito que o das clulas B2.
Os anticorpos produzidos pelas clulas B1 ligam-se aos antignios com menor afinidade que os
anticorpos produzidos pelas clulas B2. De facto, considera-se que as clulas B1 produzem IgM
de baixa afinidade.
As clulas B1 respondem melhor a antignios glicdicos que a antignios proteicos.
27

A activao das clulas B1 no requer a presena de clulas T.
Nas clulas B1 no comum haver formao de clulas B de memria, comutao isotpica ou
maturao por afinidade (o que explica a baixa afinidade das clulas B1 para os seus
antignios). Em vez disso, as clulas B1 produzem anticorpos multi-especificos (capazes de se
ligar a mltiplos antignios diferentes). Estes dados levantam a hiptese de que as clulas B1
podero contribuir para a imunidade inata.

Antignios timo-dependentes e timo-independentes:

Quando uma clula B encontra um antignio timo-dependente, esta apenas se torna activa se, para
alm de contactar com o antignio, contactar com uma clula T
H
(e com as citocinas produzidas pelas
clulas T
H
). Por oposio, os antignios timo-independentes conseguem activar as clulas B, sem que
estas precisem de contactar directamente com clulas T
H
.
Existem dois tipos de antignios timo-independentes:
a) Antignios timo-independentes tipo 1 (TI-1): Estes antignios so mitognios que activam
vrios clones de clulas B, independentemente da sua especificidade antignica. Em termos
estruturais, estes antignios consistem em molculas altamente repetitivas, tais como a
flagelina, unidades polisacardicas repetidas bacterianas e o lipopolissacardeo (LPS). De facto, o
LPS um componente bacteriano que actua como antignio TI-1, na medida em que activa
simultaneamente os BCR especficos para o LPS e para o Toll-like receptor 4 (TLR 4). Ora, todas
as clulas B expressam TLR, de tal modo que o LPS induz activao das clulas B com BCR
especifico para LPS e sem BCR especifico para LPS (atravs da activao TLR). Assim, passa a
ocorrer produo de um grande conjunto de anticorpos, alguns dos quais podem neutralizar as
bactrias contendo LPS.
b) Antignios timo-independentes tipo 2 (TI-2). Estes antignios diferem dos TI-1 em trs
aspectos:
1) No so mitognios (no so activadores policlonais)
2) Activam clulas B maduras e inactivam clulas B imaturas
3) A proliferao das clulas B e a ocorrncia de comutao isotpica necessita da presena de
citocinas produzidas pelas clulas T
H
.
28

De referir que a resposta humoral aos antignios TI mais fraca que a resposta aos antignios timo-
dependentes. Para alm disso, os antignios TI no induzem a formao de clulas de memria e
induzem pouca comutao isotpica (a IgM a principal Ig secretada nestas situaes).

Activao das clulas B
As clulas B nave so clulas em repouso que esto na fase G
0
do ciclo celular. Ora, a activao de uma
clula B faz com que ela reentre no ciclo celular. Todavia, para isso, a clula B precisa de dois sinais:
a) Se o antignio for TI, ambos os
sinais provm da ligao do
antignio imunoglobulina
membranar (mIg);
b) Se o antignio for timo-
dependente, o sinal 1 provm da
ligao do anticorpo ao antignio,
enquanto o sinal 2 provm da
interaco entre o CD40 da clula
B e o CD40L da clula T
H
.
Receptor das clulas B
O BCR (receptor das clulas B) constitudo por dois componentes:
a) mIg: Corresponde poro de ligao ao antignio
b) Ig/Ig: Corresponde ao heterodmero de transduo de sinal. As suas caudas contm um
motivo de 18 resduos designado por ITAM (imunoreceptor tyrosine based activating motif).
Assim, os estmulos so recebidos pela mIg, sendo convertidos pela Ig/Ig em sinais intracelulares
efectivos. De facto, quando um antignio se liga mIg, a ITAM do Ig/Ig fosforilada por algumas
cnases. Ora, os resduos fosforilados de ITAM servem de ncora s cnases SyK, que, por sua vez,
fosforilam o BLNK (activando-o). Por seu turno, o BLNK activo serve de ncora BTK e PLC-2 (que
ficam fosforilados). Ora, isto leva activao de cascatas de sinalizao (que podem envolver a PKC, o
Ca
2+
, as protenas G), que conduzem a alteraes na expresso gnica, que podem passar pela
estimulao/inibio da transcrio de vrios genes, de entre os quais se destaca o factor NF-B.
O BCR actua em conjunto com um co-receptor, que permite amplificar a resposta celular B. Este co-
receptor constitudo por trs componentes, nomeadamente:
CD19 Envolvida na transduo de sinal.
CR2 (CD21) Receptor do C3d (fragmento do sistema de complemento)
29

TAPA-1 (CD81) Protena transmembranar
Assim, na presena de um antignio
envolvido por C3d, a Ig liga-se ao antignio
e o CR2 liga-se ao C3d. Ora, isto activa a
CD19, que fosforilada por cnases de
tirosina, e serve de ancoragem a vrias
molculas de sinalizao, amplificando
assim o sinal gerado por activao do BCR.
Note-se que este mecanismo de
amplificao permite explicar porque
que clulas B nave com baixa afinidade
para o antignio so capazes de responder
mesmo perante baixas concentraes de
antignio.
O receptor da clula B tambm expresso
em conjunto com o CD22, que inibe a
activao das clulas B. De facto, ao ocorrer activao das clulas B, ocorre fosforilao do motivo
inibitrio da tirosina do imunoreceptor (ITIM) da cauda citoplasmtica do CD22. Subsequentemente,
uma fosfatse de tirosina passa se a ligar aos resduos fosforilados de ITIM, activando outras fosfatses,
que desfosforilam (e inactivam) as molculas envolvidas na transduo de sinal. Assim, o CD22 inactiva
as clulas B, regulando-as negativamente.
Interaco entre clulas T e clulas B
Na presena de antignios timo-dependentes, as clulas B apenas proliferam se, para alm da ligao
antignio/Ig, tiver ocorrido interaco entre a clula B e uma clula T
H
.

A formao do conjugado B-T permite que as clulas B proliferem. Para alm disso, as citocinas
produzidas pelas clulas T so essenciais para que as clulas B se diferenciem. Assim, quando se forma o
30

conjugado B-T, o complexo de Golgi e o centro organizador de microtbulos da clula T
H
migram em
direco clula B, o que facilita a libertao de citocinas de actuao na clula B. Subsequentemente,
as citocinas actuam nos receptores da IL-2, IL-4 e IL-5, os quais so expressos pela clula B, desde que
esta sofre activao. Assim, este processo resulta na proliferao e diferenciao das clulas B, bem
como na maturao por afinidade e comutao isotpica.
Alguns auto-antignios tm acesso medula ssea. As clulas B com mIgM contra esses antignios no
podem ser eliminadas pelo processo de seleco negativa da medula ssea. Assim, essas clulas
devero ser eliminadas ou inactivadas nos tecidos linfides perifricos.
Resposta humoral primria e secundria
O primeiro contacto de um indivduo com
um antignio exgeno gera uma resposta
humoral primria. Neste tipo de resposta,
a IgM constitui a principal Ig secretada,
embora mais tardiamente possa ocorrer
um aumento proporcional da sntese de
IgG.
Quer na resposta humoral primria, quer
na resposta humoral secundria, existe
uma lag phase, durante a qual as clulas
B sofrem seleco clonal, expanso clonal e
diferenciao em plasmcitos ou clulas de
memria (ou seja, esta fase corresponde ao
tempo que vai desde o contacto com o
antignio at produo macia de anticorpo). A lag phase tem durao varivel, dependendo da
natureza do antignio - todavia, esta fase mais longa na resposta primria, do que na resposta
secundria.
A resposta humoral secundria depende da existncia de clulas B de memria (as quais apresentam
um perodo de semi-vida varivel, podendo existir durante todo o perodo de vida do individuo) e de
clulas T de memria. De facto, a activao das clulas de memria por um antignio induz uma
resposta secundria.
Como referido anteriormente, a resposta humoral secundria tem menor lag phase, atinge maior
magnitude e dura mais tempo que a resposta humoral primria. Para alm disso, na resposta humoral
secundria, h secreo de anticorpos com maior afinidade para o antignio e predominam outros
istipos para alm do IgM (o que leva a que sejam sintetizados anticorpos mais adequados para aquele
antignio em concreto).
Ora, em parte, isto deve-se ao facto de a populao de clulas de memria para um dado antignio ser
maior que a populao de clulas B nave especficas para esse mesmo antignio. Para alm disso, as
clulas B de memria so mais facilmente activadas que as clulas B nave, sendo que nelas existe mais
maturao por afinidade e comutao isotpica.
Note-se que a existncia de clulas B de memria de longa durao responsvel por um efeito
chamado pecado antignico original. Ou seja, quando contactamos com um antignio com eptopos
similares aos de um antignio com o qual contactamos h muito tempo (por exemplo na infncia),
passam a ser produzidos anticorpos com maior afinidade para o antignio com o qual tnhamos
contactado h muito tempo (por reaco cruzada).
31

Resposta humoral secundria contra um conjugado
Quando ocorre contacto com um conjugado (conjunto de um hapteno e de um transportador), este
induz uma resposta imuno-humoral caracterizada pela produo de anticorpos contra os eptopos do
hapteno e do transportador. Assim, de modo a que seja induzida uma resposta humoral contra o
hapteno, este dever estar quimicamente acoplado a uma molcula transportadora.
Ora, de modo a gerar uma resposta secundria para o mesmo hapteno, dever ocorrer contacto com o
mesmo conjugado hapteno-transportador, com o qual houve contacto prvio. Caso o hapteno seja o
mesmo mas a protena transportadora seja diferente, no ocorre resposta secundria anti-hapteno
(efeito do transportador). Assim, a resposta das clulas B imunizadas contra o hapteno requer a
presena de clulas T
H
CD
4
+
imunizadas contra a protena transportadora, de modo a que seja induzida
uma resposta contra o conjugado. De referir que as clulas imunizadas contra o hapteno e as clulas
imunizadas contra a protena transportadora, pertencem a populaes diferentes. Note-se ainda que,
por vezes, algumas clulas B reagem a eptopos da protena transportadora.
Esta explicao permite ainda concluir que as clulas B e T
H
devem reconhecer determinantes
antignicos na mesma molcula, para que ocorra activao das clulas B.
Induo in vivo de respostas humorais
Quando um antignio introduzido no
organismo, este passa se a concentrar em
vrios rgos linfides perifricos. De
facto, os antignios presentes na
circulao sangunea so filtrados pelo
bao, enquanto os antignios presentes
nos tecidos so drenados pelo sistema
linftico at aos gnglios linfticos.
Os gnglios linfticos actuam como
filtros, sendo capazes de concentrar mais
de 90% dos antignios transportados pelos
linfticos aferentes. Note-se que os
antignios ou os complexos antignio-
anticorpos entram nos gnglios linfticos sozinhos, ou associados a clulas transportadoras de
antignios.
Ora, medida que os antignios se deslocam ao longo dos gnglios, estes vo encontrar clulas
dendrticas (no paracortex), macrfagos (ao longo do gnglio) e clulas foliculares dendrticas (nos
folculos e centros germinativos). Estas clulas actuam como clulas apresentadoras de antignios e so
32

essenciais para os processos de seleco das clulas B (vide infra). De facto, as clulas foliculares
dendrticas apresentam grandes extenses, onde esto expostos receptores Fc e receptores do
complemento. Esses receptores permitem que as clulas foliculares dendrticas retenham e apresentem
complexos antignio-anticorpos por largos perodos de tempo sua superfcie.
Formao dos centros germinativos
Ao nvel dos gnglios linfticos, as clulas B concentram-se preferencialmente no crtex, enquanto as
clulas T
H
se concentram, sobretudo, no paracortex. Ora, na presena de um antignio, as clulas B e as
clulas T
H
especficas para esse antignio migram para a zona de fronteira entre o crtex e o paracortex,
onde interagem entre si, formando conjugados B-T.
Assim, aps as clulas B serem activadas por um antignio, formam-se focos de clulas B em
proliferao, nas proximidades das zonas ricas em clulas T. Subsequentemente, essas clulas B
diferenciam-se em plasmcitos secretores de IgM e IgG. No admira, portanto, que a maior parte dos
anticorpos produzidos durante uma resposta primria provenham desses focos de clulas B.
De referir que, embora estes processos tenham sido descritos para os gnglios linfticos, no bao
ocorrem processos similares.
Alguns dias aps formao dos focos dos gnglios linfticos, algumas clulas B activadas e algumas
clulas T
H
migram para os folculos primrios. Estes evoluem depois para folculos secundrios, os quais
fornecem um micro-ambiente favorvel para a ocorrncia de interaces entre as clulas B, as clulas T
H

e as clulas foliculares dendrticas. Subsequentemente, as clulas B activas e as clulas T
H
migram para o
centro do folculo secundrio, onde formam um centro germinativo.
Ao nvel dos centros germinativos, ocorre maturao de afinidade, comutao isotpica e formao de
plasmcitos e clulas B de memria. Contudo, apenas os processos de maturao por afinidade e
formao de clulas B de memria requerem a presena de centros germinativos, sendo que a
comutao isotpica e a gnese de plasmcitos podem ocorrer fora desses centros.
Processos ocorridos nos centros germinativos
Durante a primeira etapa de formao dos centros germinativos, as clulas B activadas sofrem intensa
proliferao essas clulas B em proliferao designam-se por centroblastos, concentrando-se na zona
escura dos centros germinativos. Em termos morfolgicos, os centroblastos caracterizam-se pelas suas
grandes dimenses, citoplasma expandido, cromatina difusa, e ausncia (ou quase ausncia) de Ig
membranar.
Posteriormente, os centroblastos originam centrcitos clulas pequenas que no se dividem e que
expressam Ig membranar. Os centrcitos deslocam-se desde a zona escura para uma regio contendo
clulas foliculares dendrticas, a qual se designa por zona clara. A, alguns centrcitos contactam com os
antignios apresentados pelas clulas foliculares dendrticas.
O processo de maturao por afinidade ocorre na zona escura, caracterizando-se, e sendo responsvel,
pelo aumento da afinidade dos anticorpos produzidos ao longo de uma resposta humoral. Este processo
resulta da existncia de hipermutao somtica, ou seja, da existncia de muitas mutaes nos genes
das Ig que respondem ao antignio em questo.
Estas mutaes ocorrem a uma elevada velocidade em cada duas divises celulares, um centroblasto
adquire uma mutao na regio varivel leve ou pesada. Para alm de ocorrerem a elevada velocidade,
33

estas mutaes actuam com grande preciso nos genes das Ig, tendo como alvo principal os segmentos
CDR (hipervariveis) dos genes das Ig.
Como as mutaes somticas ocorrem aleatoriamente, estas geram algumas clulas com receptores de
maior afinidade e muitas clulas com receptores de igual ou menor afinidade. Assim, as clulas B com
receptores de elevada afinidade para o antignio tm maior probabilidade de serem positivamente
selecionadas e abandonarem o centro germinativo. J as clulas com receptores de baixa afinidade so
mais susceptveis de sofrerem seleco negativa e, por conseguinte, apoptose.
Este processo de seleco ocorre j na zona clara, entre os centrcitos. De facto, o processo de seleco
depende da capacidade das Ig membranares dos centrcitos reconhecerem e ligarem-se aos antignios
expressos pelas clulas foliculares dendrticas (estes antignios esto ligados a receptores Fc ou do
complemento). Assim, um centrcito cuja Ig membranar se ligue aos antignios expressos nas clulas
foliculares dendrticas, recebe um sinal que essencial para a sua sobrevivncia. Por oposio, os
centrcitos que no recebem esses sinais so eliminados.
Como a quantidade de antignio ligada s clulas foliculares dendrticas limitada, os centrcitos com
receptores de elevada afinidade tm maior probabilidade de se ligarem com sucesso a um antignio e,
como tal, de serem seleccionados positivamente.
Para sobreviver, um centrcito dever ainda receber sinais resultantes da sua interao com uma clula
T
H
CD4
+
. Para isso, dever ocorrer interao entre CD40 do centrcito e o CD40L da clula T
H
, bem como
interao entre o receptor das clulas T (TCR) e o complexo MHC II/antignio (expresso na clula B).
Mais uma vez, os centrcitos que no recebam sinais provenientes das clulas T
H
so eliminados.
Resta apenas abordar o
processo de comutao
isotpica, to importante para
a gnese de uma resposta
imunitria humoral. Ora, este
fenmeno permite que um
dado domnio V
H
se associe
com a regio constante de
qualquer istipo. Assim,
continua a ocorrer
especificidade para o antignio
em questo, mas a actividade
efectora biolgica altera-se.
De referir que, a escolha de
qual a classe de Ig a ser
escolhida no processo de comutao isotpica depende muito da aco de vrias citocinas.
Como referido anteriormente, os antignios timo-independentes induzem uma resposta humoral
caracterizada por baixos nveis de comutao isotpica, de tal modo que a maior parte das Ig produzidas
so do tipo IgM. Por oposio, os antignios timo-dependentes induzem uma resposta humoral
caracterizada por elevada taxa de comutao isotpica, sendo libertadas muitas outras Ig para alm da
IgM. Assim, a interao entre o CD40 e o CD40L (ou seja, entre as clulas B e as clulas T
H
) revela-se
essencial para a ocorrncia de comutao isotpica. No admira, portanto, que dfices nas clulas T
H
se
possam traduzir por defeitos na comutao isotpica.
34

A ttulo de exemplo, a sndrome de hiper-IgM caracteriza-se pela ausncia de expresso de CD40L por
parte das clulas T
H
. Assim, os pacientes com esta doena ligada ao X no produzem outros istipos,
para alm da IgM. Para alm disso, nesta doena, no ocorre formao de clulas B de memria nos
centros germinativos, nem hipermutao somtica.

35

Gnese de plasmcitos e clulas de memria
Apesar de os centros germinativos constiturem importantes locais de produo de plasmcitos, estas
clulas tambm podem ser produzidas noutros locais. Os plasmcitos normalmente no expressam
nveis detectveis de Ig membranares, mas sintetizam uma grande quantidade de Ig secretadas.
Assim, a diferenciao das clulas B maduras em plasmcitos implica uma alterao no processamento
do RNA, de modo a que passe a ser produzida a forma secretada da cadeia pesada (em vez da forma
membranar). Para alm disso, a taxa de transcrio das cadeias leves e pesadas significativamente
maior nos plasmcitos, comparativamente s clulas B.
As clulas B tambm se podem diferenciar em clulas de memria. Existem poucas molculas
membranares que distingam as clulas B nave das clulas B de memria. Isto com excepo das Ig as
clulas B nave expressam apenas IgM e IgD, enquanto as clulas B de memria expressam istipos
adicionais, nomeadamente IgG, IgA, IgE.

Regulao da resposta imune efectora
A resposta imune efectora passvel de ser regulada de vrias formas, sendo que as mais importantes
incluem:
Competio antignica - Os anticorpos competem com clulas B pela ligao ao antignio, o
que inibe a expanso clonal das clulas B. Este mecanismo explica porque que algumas
vacinas no so administradas a bebs com menos de um ano - caso o beb seja imunizado
ainda na presena de anticorpos maternos, a resposta humoral fraca e a produo de clulas
de memria inadequada para conferir
imunidade de longa durao.
Um anticorpo inibe a sua prpria
produo Os complexos antignio-
anticorpo contendo IgG ligam-se aos
receptores Fc das clulas B, reduzindo
a sinalizao pelo receptor das clulas B
(a activao dos receptores das clulas
B induz desfosforilao de alguns locais
de BCR, o que est associado a menor
actividade de sinalizao intracelular).
Contudo, os complexos antignio-
anticorpo contendo IgM podem actuar
de modo oposto, promovendo a
activao das clulas B.
36

Imunoglobulinas
As imunoglobulinas (anticorpos; Ig) so
constitudas por quatro cadeias peptdicas:
duas cadeias leves (L) e duas cadeias
pesadas (H). Cada cadeia pesada encontra-
se unida a uma cadeia leve por pontes
dissulfureto e por interaes no-
covalentes (pontes de hidrognio e
interaes hidrofbicas), formando um
heterodmero H-L.
Os primeiros 110 aminocidos das regies
terminal amina das cadeias leves e pesadas
variam muito entre Ig de diferente
especificidade antignica. Esses
aminocidos constituem as regies
variveis (V), as quais so responsveis
pela especificidade da Ig note-se que
cada cadeia contm uma regio varivel
(V
H
ou V
L
). As regies no-variveis
designam-se por regies constantes (C),
constituindo os locais de ligao aos
glicdeos, tais como os receptores.
Os fragmentos de uma Ig envolvidos na
ligao ao antignio designam-se por Fab,
sendo constitudos pela cadeia leve e pela
poro adjacente da cadeia pesada (brao
da Ig). As restantes pores da cadeia
pesada constituem os fragmentos Fc. A
separao das Ig em fragmentos Fab e Fc
conseguida com recurso digesto com
papana.
As cadeias leves podem ser do tipo ou do
tipo (existem quatro subtipos de cadeias
leves , os quais so determinados por diferenas na regio constante). De referir que nunca co-existem
os dois tipos de cadeia leve na mesma imunoglobulina.
Por oposio, existem cinco subtipos diferentes de cadeias pesadas (os quais constituem os istipos de
uma Ig), os quais determinam a classe qual pertence a Ig em questo. Assim, existem cinco classes de
Ig:
IgA: expressa cadeia pesada (existem dois subistipos)
IgD: expressa cadeia pesada
IgE: expressa cadeia pesada
IgG: expressa cadeia pesada (existem quatro subistipos)
IgM: expressa cadeia pesada

37

Estrutura molecular das imunoglobulinas
Os aminocidos das Ig dispem-se em
folhas beta-pragueadas anti-paralelas,
que se dobram em domnios
globulares compactos unidos entre si
por peptdeos das folhas (estrutura
terciria das Ig). A estrutura
quaternria das Ig envolve a
interaco entre os domnios
globulares das cadeias leves e
pesadas, algo que essencial para
conferir funcionalidade s Ig.
Tanto as cadeias pesadas como as
leves contm unidades homlogas de
cerca de 110 aminocidos, as quais se
designam por domnios. As cadeias leves contm um domnio constante (C
L
) e um domnio varivel
(V
L
), enquanto as cadeias pesadas contm trs ou quatro domnios constantes (C
H
) e um domnio
varivel (V
H
).
Dentro de cada domnio, uma ligao dissulfido intra-cadeia forma uma ansa de cerca de 60
aminocidos. Para alm disso, os domnios formam estruturas compactas - os Ig fold. Cada fold contm
duas folhas unidas por ansas e estabilizadas por pontes de hidrognio. A sequncia do domnio V
mais longa que a do domnio C e contm um par extra de folhas unidas por uma ansa extra.
As Ig medeiam funes efectoras atravs dos seus terminais carboxilo, e ligam-se aos antignios atravs
dos seus terminais amina. As regies determinantes de complementaridade (CDRs) constituem as
regies mais variveis dentro dos domnios variveis (regies de hipervariabilidade), constituindo os
locais de ligao aos antignios. Em termos moleculares, as CDRs correspondem a ansas que unem as
folhas , apresentado estruturas complementares estrutura dos eptopos. De referir que, a restante
poro dos domnios variveis constitui as framework regions (FR).
Na maior parte das vezes, o domnio V
H
contribui mais para a ligao aos antignios (tem mais resduos
envolvidos) que o domnio V
L
. Porm, em algumas reaces, a cadeia leve responsvel por interaes
mais importantes.
A ligao de um antignio a um anticorpo induz alteraes conformacionais no antignio, no anticorpo,
ou em ambos. De facto, as ansas CDR so capazes de mudar a sua conformao, o que permite que o
anticorpo assuma a forma complementar mais eficiente para o seu eptopo.
Domnios das regies constantes
Os domnios C
H1
e C
L
servem para estender os braos Fab da Ig, facilitando assim a interaco com o
antignio, e maximizando a rotao dos braos Fab. Para alm disso, essas regies constantes contm
uma ligao dissulfureto, a qual ajuda a manter os domnios V
H
e V
L
juntos. Assim, os domnios C
H
e C
L

parecem aumentar o nmero de interaes V
H
e V
L
estveis possveis, contribuindo para a diversidade
geral das molculas de anticorpos.

38

Regio de charneira
As cadeias pesadas , , e contm uma regio peptdica entre os domnios C
H1
e C
H2
, a qual no tem
homologia com quaisquer outros domnios. Esta regio de charneira rica em prolina e permite uma
maior flexibilidade das IgA, IgD e IgG, respectivamente - assim, a regio de charneira permite que os
braos Fab possam assumir vrios ngulos entre si. Para alm disso, esta regio tem tambm muitos
resduos de cistena, o que lhe permite estabelecer pontes dissulfureto.
As cadeias e no possuem regio de charneira, mas tm um domnio adicional de 110 aminocidos,
com caractersticas semelhantes.
Assim, a IgA, a IgD e a IgG tm trs pares de domnios nas cadeias pesadas (C
H
1/C
H
1, C
H
2/C
H
2 e C
H
3/C
H
3),
bem como uma regio de charneira. Nessas Ig, o terminal carboxilo encontra-se em C
H
3. Por oposio, a
IgE e a IgM tm quatro pares de domnios nas cadeias pesadas (C
H
1/C
H
1, C
H
2/C
H
2, C
H
3/C
H
3 e C
H
4/C
H
4).
Nessas Ig, o terminal carboxilo encontra-se em C
H
4.

O domnio carboxilo nas Ig secretadas (sIg) difere do das Ig ligadas membrana (mIg). Nas sIg, o
terminal carboxilo apresenta uma sequncia aminoacdica hidroflica, enquanto nas mIg, o terminal
carboxilo apresenta trs regies:
Sequncia hidroflica extracelular (26 aminocidos)
Sequncia transmembranar de tamanho constante em todos os istipos
Sequncia citoplasmtica (curta)
No incio da sua maturao, as clulas B imaturas expressam somente mIgM. Numa fase mais tardia da
maturao, estas clulas passam a expressar co-expressar mIgD. Por seu turno, as clulas B de memria
podem expressar mIgG, A ou E.
Funes efectoras mediadas por imunoglobulinas
As funes efectoras das imunoglobulinas so da responsabilidade da regio C
H
, que interage com
outras protenas, clulas e tecidos, exercendo respostas efectoras humorais.

39

Opsonizao
A opsonizao caracteriza-se pela ligao das regies variveis das
Ig aos antignios dos microorganismos. Subsequentemente, os
receptores Fc (expressos superfcie de macrfagos e neutrfilos)
ligam-se regio constante das Ig - isto prende o agente
patognico membrana dos fagcitos, desencadeando uma via de
transduo promotora da fagocitose, e posterior destruio dos
microrganismos.
Activao do sistema de complemento
A IgM e a maioria das subclasses de IgG (IgG1, IgG2 e IgG3)
apresentam a capacidade de activar o sistema de complemento,
que essencial para a neutralizao de microorganismos,
apresentado aco sinrgica das Ig. De facto, nas proximidades do
local de activao do sistema de complemento, a C3b liga-se a
complexos anticorpo-antignio. Subsequentemente, os macrfagos
ligam-se C3b (por via de receptores especficos), sendo que esta
ligao estimula a fagocitose.
Os eritrcitos tambm so capazes de se ligar C3b (na medida em
que possuem receptores similares aos dos macrfagos) aps se
ligarem C3b, os eritrcitos migram para o fgado ou bao,
transportando consigo os complexos antignio-anticorpo nesses
rgos, os complexos so destrudos pelos macrfagos, enquanto os eritrcitos so poupados.
Citotoxicidade mediada por imunoglobulinas
As imunoglobulinas ligadas a clulas-alvo (tais como clulas infectadas por vrus) podem se ligar a
receptores de clulas do sistema imunolgico (tais como os receptores das clulas NK). Isto leva a que
essas clulas do sistema imunolgico passem a actuar contra a clula-alvo das Ig. Este processo designa-
se por citotoxicidade mediada por clulas dependente de anticorpo (ADCC).

Travessia das camadas epiteliais (transcitose)
As Ig so capazes de sofrer transcitose, o que permite que estas sejam libertadas para a superfcie de
mucosas e, subsequentemente, exportadas para o leite materno.
40

A IgA a principal classe de Ig que sofre transcitose, embora a IgM tambm seja transportada para as
mucosas. De referir que, a partir do terceiro semestre de gestao, a IgG materna passa a atravessar a
placenta, conferindo imunidade passiva ao feto.
Classes de imunoglobulinas
IgG
Imunoglobulina mais abundante (80%).
Constituda por duas cadeias leves e duas cadeias pesadas
De acordo com o subtipo de cadeia , existem quatro subclasses de IgG (IgG1-IgG4), as quais se
encontram numeradas por ordem decrescente de concentrao srica. Estas cadeias
apresentam diferenas no tamanho da regio de charneira e no nmero e posio das ligaes
dissulfureto entre as cadeias pesadas.
A IgG2 no passa a placenta.
Quanto eficcia em activar o sistema de complemento, IgG3>IgG1>IgG2. A IgG4 no activa o
sistema de complemento.
A IgG1 e a IgG3 tm muita afinidade para os receptores Fc. A IgG4 tem afinidade intermdia,
enquanto a IgG2 tem afinidade muito baixa.
IgM
A IgM secretada pelos plasmcitos como um pentmero (constitudo por cinco unidades monomricas
unidas por pontes dissulfureto nos domnios C3 e C4), no centro do qual se encontra a regio para o
receptor Fc. Existe ainda uma cadeia J, que une o terminal carboxilo de duas cadeias pesadas, por via de
pontes S-S.
Por ser pentamrica, a IgM contm dez locais de ligao a antignios, sendo a mais eficiente a ligar
antignios com muitos eptopos repetidos (tais como partculas vricas ou eritrcitos). Devido s suas
grandes dimenses, a IgM no difunde bem e, por isso, encontra-se presente em baixas concentraes
nos fluidos intersticiais.
No que concerne ao papel da IgM na imunidade:
A IgM a primeira a Ig ser produzida na resposta primria, sendo a primeira a ser sintetizada
pelo recm-nascido.
A IgM mais eficiente que a IgG a activar o sistema de complemento.
A IgM pode existir nas secrees mucosas para isso, fundamental o papel da cadeia J.
IgA
Predominante nas secrees externas tais como saliva, leite materno e lgrimas. Dado existir
no leite materno, a IgA fundamental para conferir proteco ao recm-nascido nos primeiros
meses de vida.
No plasma, encontra-se maioritariamente sob a forma monomrica.
Nas secrees, a IgA encontra-se sob a forma de dmero ou tetrmero (sIgA), encontrando-se
junto a uma cadeia J e a uma pea secretora. A pea secretora consiste em cinco domnios do
tipo Ig que se ligam aos domnios Fc do dmero IgA.
A produo diria de sIgA superior de qualquer outra imunoglobulina.
As clulas B produtoras de IgA migram preferencialmente para o tecido subepitelial, onde se
diferenciam em plasmcitos secretores de IgA. Por sua vez, a IgA secretada liga-se ao receptor poli-Ig
41

expresso na face basolateral da
maior parte dos epitlios
mucosos e glandulares. O
complexo IgA-poli-Ig ento
transportado ao longo da clula
epitelial, at ao lmen. Ao nvel
da membrana, o poli-Ig sofre
uma clivagem, originando a pea
secretora, que libertada em
conjunto com a IgA.
A pea secretora mascara locais
de charneira da IgA, que seriam
susceptveis a protelise. Ora,
isto permite que a IgA se
mantenha activa em secrees
ricas em proteases, durante um
maior perodo de tempo.
Nas secrees externas, a IgA torna-se polimrica, o que lhe permite interagir com grandes antignios
com muitos eptopos. Ora, isto revela-se particularmente benfico para prevenir a entrada de agentes
patognicos para as clulas mucosas.
IgE
Atinge baixas concentraes sricas.
Medeia reaces de hipersensibilidade, as quais so responsveis por sintomas de asma,
alergias e choque anafiltico.
Liga-se a receptores Fc sitos nas membranas dos basfilos plasmticos e dos mastcitos
tecidulares, favorecendo a desgranulao destas clulas (de entre esses receptores, destaque
para o CD23, tambm designado por FcRII). Subsequentemente, passa a ocorrer libertao de
mediadores activos, os quais so responsveis pelas reaces de hipersensibilidade. A
desgranulao dos mastcitos pode ainda resultar na libertao de mediadores que facilitam a
defesa anti-parasitria (por via de reaces do tipo ADCC).
IgD
Juntamente com a IgM, a IgD a principal Ig membranar expressa pelas clulas B maduras. Ainda no se
conhece a sua funo.

42

Determinantes antignicos
Istipos
Cada istipo corresponde a um tipo de cadeia constante.
Numa mesma espcie, cada indivduo expressa todos os istipos no plasma.
Cada istipo codificado por um gene separado de regio constante.
43

Altipo
Existem mltiplos alelos para cada gene isotpico - esses alelos codificam para diferenas
aminoacdicas subtis, que se designam por determinantes alotpicos.
A soma de todos os determinantes alotpicos constitui o altipo de cada indivduo.
Existem 25 altipos para as quatro classes de IgG, dois altipos para a IgA2 e trs altipos para
a cadeia leve .
Iditipo
O iditipo diz respeito s diferenas registadas nas sequncias V
H
e V
L
(que se verificam entre
todos os anticorpos).
Cada determinante antignico de uma regio varivel designa-se por iditopo. Ora, o iditipo
consiste na soma de todos os iditopos.
Os anticorpos monoclonais produzidos por um mesmo clone so idnticos entre si, motivo pelo
qual apresentam o mesmo iditopo.
Receptor das clulas B
Todos os istipos das Ig membranares tm caudas citoplasmticas muito curtas, as quais so incapazes
de se associar a molculas de sinalizao intracelular (cnases e protena G). Esta interaco mediada
por um heterodmero Ig/Ig, que se encontra acoplado s Ig. Assim, o complexo constitudo por uma
Ig membranar e por um heterodmero Ig/Ig designa-se por receptor das clulas B (BCR) as Ig
recebem os sinais provenientes do exterior, enquanto as caudas citoplasmaticas Ig/Ig so j
suficientemente longas para interagir com molculas sinalizao intracelular.
Receptores Fc
Muitas clulas expressam receptores Fc, os quais se ligam s regies Fc das Ig secretadas. Estes
receptores permitem o movimento da IgG da me para o feto. Para alm disso, estes receptores
permitem que o sistema imunitrio adaptativo recrute elementos da imunidade inata, tais como os
macrfagos e as clulas NK.
De referir que existem vrios tipos diferentes de receptores Fc, nomeadamente os receptores poli-Ig, o
receptor Fc neonatal (responsvel pelo movimento placentrio da IgG) e receptores especficos de cada
Ig (FCR, FCR, FCR).
Superfamlia de imunoglobulinas
A superfamlia das Ig inclui, para alm das Ig, muitas outras protenas com um domnio tpico Ig-fold.
Todos os membros desta famlia derivam de um gene primordial comum, e contm, pelo menos, um ou
mais conjuntos de 110 aminocidos dispostos em folhas anti-paralelas (normalmente, com uma ponte
dissulfureto que fecha uma ansa de 50 a 70 resduos).
Assim, para alm das Ig, pertencem superfamlia das Ig, as seguintes molculas:
Heterodmero Ig/Ig
Receptor poli-Ig
Receptor das clulas T
MHC I e II

2
-microglobulina
Molculas de adeso VCAM e ICAM
44

Factor crescimento derivado das plaquetas
Protenas acessrias das clulas T (nomeadamente CD4 e CD8)
A maioria destes membros no capaz de se ligar a antignios. Provavelmente, nestas molculas, a Ig-
fold actua num sentido de facilitar a interaco entre protenas membranares.
Anticorpos monoclonais
A maior parte dos antignios apresenta mltiplos eptopos, induzindo assim diferenciao de vrios
clones de clulas B (cada derivado de uma clula B reconhece um eptopo especfico). Gera-se, assim,
um conjunto de vrios anticorpos no soro (anticorpos policlonais), o que facilita a fagocitose e a aco
do sistema de complemento.
Contudo, na prtica clnica e em investigao, frequente recorrer a anticorpos monoclonais, ou seja,
anticorpos derivados de um nico clone de clulas B e, como tal, especficos para um nico eptopo.
Estes anticorpos tm vrias aplicaes, nomeadamente:
Testes de gravidez
Diagnstico de microrganismos patognicos
Deteno de antignios tumorais
Avaliao da histocompatibilidade de antignios
Avaliao de nveis sanguneos de frmacos
Terapia do cancro e doenas reumticas.
As abzimas so anticorpos com actividade cataltica (sendo, por isso, semelhantes a enzimas). Contudo,
a sua actividade deveras especfica, de tal modo que as abzimas apenas hidrolisam steres cuja
estrutura do estado de transio se assemelha fortemente ao anlogo do estado de transio usado
como hapteno.

45

Organizao e expresso dos genes das imunoglobulinas
As imunoglobulinas (Ig) so constitudas por uma sequncia aminoacdica nica na regio varivel e por
uma sequncia na regio constante proveniente de um conjunto limitado se sequncias invariantes.
Ora, esta combinao deve-se organizao dos genes da imunoglobulina.
Durante a maturao das clulas B, segmentos de genes codificantes de pores de uma nica cadeia
pesada ou leve de Ig (da linhagem germinativa) sofrem rearranjos e modificaes, de modo a criar um
grande nmero de combinaes. De facto, os segmentos de genes de origem germinativa no so
transcritos e traduzidos em cadeias completas antes de sofrerem um rearranjo e subsequente
converso em genes funcionais.
No final deste processo, gera-se uma clula madura imunocompetente contendo sequncias que
codificam para uma regio varvel funcional da cadeia pesada e para uma regio varivel de cadeia leve
este processo determina a especificidade da clula B.
Contudo, quando uma clula B sofre um estmulo antignico nos rgos linfoides perifricos, os
segmentos dos genes da regio constante da respectiva Ig sofrem um rearranjo adicional. Ora, isto
altera o istipo expresso, levando ocorrncia de mudanas nas funes biolgicas efectoras da
molcula de Ig sem alterao da sua especificidade.
Assim, as clulas B de linhagem germinativa no apresentam uma cpia exacta do DNA expresso nas
restantes clulas, devido ao rearranjo genmico ocorrido na diferenciao. Parece que este arranjo
genmico no ocorre em nenhum outro tipo celular dos vertebrados.
Modelos explicativos da diversidade de estrutura dos anticorpos
Vrios modelos procuram explicar a diversidade de anticorpos existentes, nomeadamente:
Teoria da linhagem germinativa De acordo com este modelo, o genoma das clulas
germinativas (ocito e espermatozide) contm um grande repertrio de genes de Ig. De
acordo com os defensores deste modelo, o sistema imune de tal modo importante, que
justifica o imenso tamanho de genoma codificante de Ig.
Teoria da variao somtica De acordo com este modelo, o genoma contm um nmero
relativamente pequeno de genes que codificam para Ig, de tal modo que um grande nmero de
especificidades dos anticorpos gerado nas clulas somticas por mutao ou recombinao.
De qualquer modo, ambos os modelos partilham de uma mesma limitao, que se prende com o facto
de ser difcil encontrar um mecanismo capaz de diversificar a regio varivel dos genes das cadeias
pesada e leve, mantendo a regio constante imutvel.
Sabe-se, contudo, que para a gnese de Ig to diversas, necessria a ocorrncia de mecanismos
envolvendo alteraes genticas. Esta informao consistente com vrias evidncias, nomeadamente:
As sequncias de regies variveis idnticas esto associadas com as vrias regies constantes
da cadeia pesada;
Uma nica sequncia da regio varivel (definindo uma especificidade antignica em particular)
pode estar associada com mltiplas sequncias de regio constante da cadeia pesada. Isto ,
diferentes classes (istipos) de anticorpos (IgM, IgG) podem ser expressas com sequncias
idnticas da regio varivel.
46

De acordo com o modelo de Dreyer e Bennett, a codificao de cada cadeia de Ig (leve ou pesada)
assegurada por dois genes distintos, mas localizados na proximidade um do outro um dos genes
codifica para a regio V (varivel), enquanto outro codifica para a regio C (constante). A existncia
desses genes distintos foi posteriormente confirmada com recurso a estudos de hibridizao. Assim,
est demonstrado cientificamente que o modelo de dois genes de Dreyer e Bennett (um gene codifica a
regio varivel e outro a regio constante) aplica-se tanto para a cadeia pesada, como para a cadeia
leve.
Organizao multignica dos genes das imunoglobulinas
As cadeias leves e e as cadeias pesadas so codificadas por famlias multignicas distintas situadas
em diferentes cromossomas. No DNA, as sequncias codificantes (segmentos de genes) para estas
cadeias esto separadas por regies no codificantes. Ora, durante a maturao das clulas B, os
segmentos de genes so rearranjados e unidos para formar genes de Ig funcionais.
As famlias da cadeia leve e contm segmentos de genes V, J e C:
Os genes VJ rearranjados codificam a regio varivel das cadeias leves;
Os genes C codificam para a regio constante
A famlia da cadeia pesada contm os segmentos de genes V, D, J e C:
Os genes VDJ rearranjados codificam a regio varivel da cadeia pesada;
Os genes C codificam para a regio constante
Casa segmento V precedido, na extremidade 5, por um exo que codifica para um peptdeo
sinal/lder (L) que conduz a respectiva cadeia pesada/leve atravs do reticulo endoplasmtico. Este
peptdeo clivado antes da estruturao da molcula de Ig (vide infra).
Famlia multignica da cadeia
Um gene da regio varivel
funcional contm 2 segmentos
codificantes um segmento V
5 e
um segmento J
3, os quais so
separados por uma sequncia de
DNA no-codificante (isto, num
contexto de DNA de linhagem
germinativa no rearranjado).
Existem 31 segmentos funcionais do
gene V
, quatro segmentos
funcionais do gene J
e sete
segmentos funcionais do gene C

isto assegura a existncia de vrios
subtipos de cadeia . O complexo
humano contm ainda muitos
pseudogenes.

47

Famlia multignica da cadeia
Os segmentos de genes V e J codificam para a regio varivel da cadeia leve , enquanto o segmento do
gene C codifica para a regio constante. Como existe apenas um segmento C, no h subtipos de cadeia
leve .
Famlia multignica da cadeia pesada
Esta organizao mais complexa do que a anterior, na medida em que existe um segmento adicional
que codifica parte da regio varivel da cadeia pesada. Este terceiro segmento gnico, que liga os
segmentos V e J da cadeia pesada, responsvel pela terceira regio determinante da
complementaridade (CDR3), tendo sido designado de gene D (diversidade).
Nas cadeias pesadas, existe uma srie de segmentos C, sendo que cada um codifica para a regio
constante de um istipo de Ig. De referir que, para alm de exes codificantes, estes segmentos contm
intres no-codificantes.
A conservao de funes biolgicas efectoras do anticorpo mantida pelo limitado nmero de genes
na regio constante da cadeia pesada. Os segmentos C esto sequencialmente arranjados numa
determinada ordem, a qual est relacionada com a expresso sequencial das classes de Ig no
desenvolvimento das clulas B, e com a resposta inicial IgM de uma clula B no seu primeiro encontro
com um antignio.

Rearranjo dos genes da regio varivel
Os rearranjos dos genes da regio varivel ocorrem de modo ordenado, durante a maturao das
clulas B na medula ssea. Primeiro, ocorre o rearranjo dos genes da regio varivel da cadeia pesada e
48

depois os da regio varivel da cadeia leve. Obtm-se, assim, uma nica sequncia de DNA de regio
varivel funcional para a cadeia pesada e uma outra sequncia para a cadeia leve.
Consequentemente, geram-se clulas B maduras imunocompetentes, as quais esto determinadas a
produzir anticorpos com um local de ligao codificado por uma sequncia particular dos seus genes V
rearranjados.
Apesar de o rearranjo gnico ocorrer de modo ordenado, este processo pode ser entendido como um
conjunto de eventos aleatrios resultantes da determinao aleatria da especificidade da clula B.
Rearranjos V-J do DNA das cadeias leves
A expresso de ambas as cadeias leves k e requer a ocorrncia de rearranjos dos segmentos de genes
da regio varivel V e J. Qualquer um dos genes V
funcionais pode combinar com qualquer das

combinaes J
-C
funcionais. De modo similar, no DNA da cadeia leve , qualquer um dos segmentos de

genes V
k
pode ser combinado com qualquer segmento J
k
funcional.
Nas cadeias leves, os genes rearranjados contm as seguintes regies (expressas por ordem 5'-3'):
Exo lder (L) a montante deste exo encontra-se a sequncia promotora.
Um intro
Segmento de gene VJ unido
Outro intro
Um segmento que codifica para a regio constante (genes C)
Rearranjos V-D-J do DNA das cadeias pesadas
Na cadeia pesada, existem dois eventos separados de rearranjo Inicialmente, um segmento de gene
D
H
une-se a um segmento J
H
, gerando-se um segmento D
H
J
H
. Este segmento une-se, de seguida, a um
segmento V
H
, gerando-se uma unidade V
H
D
H
J
H
que codifica toda a regio varivel.
Nas cadeias pesadas, os genes rearranjados contm as seguintes regies (expressas por ordem 5'-3'):
Exo lder (L) a montante deste exo encontra-se a sequncia promotora.
Um intro
Segmento de gene VDJ unido
Outro intro
Uma srie de segmentos de genes C
Ambos os segmentos de genes C
e C
so transcritos. A poliadenilao diferencial e o splicing de RNA

removem os intres e processam o transcrito primrio, criando um mRNA que inclui apenas o C
ou o C

(vide infra). A produo de dois mRNA diferentes de cadeia pesada permite que a clula B madura
imunocompetente expresse IgM e IgD com idntica especificidade antignica.
Mecanismo de rearranjo do DNA das regies variveis
Cada segmento de gene V, D e J flanqueado por sequncias de sinal de recombinao (RSS), de tal
modo que uma RSS est no lado 5' do gene J, outra no lado 3' do gene V, e outras duas flanqueiam o
gene D. Cada RSS contm uma sequncia heptamrica palindrmica e uma sequncia nonamrica rica
em A-T conservadas e separadas por uma sequncia interveniente (sequncia de DNA intrnico ou no-
importante para a gnese de Ig) de 12 ou 23 bp (contendo uma e duas voltas, respectivamente).
49

A sequncia do V
k
possui um espaador de uma volta, enquanto a sequncia do J
k
possui um espaador
de duas. No DNA da cadeia leve , essa ordem est invertida. Por oposio, no DNA de cadeia pesada as
sequncias sinais dos segmentos V
H
e J
H
possuem um espaador de 2 voltas, enquanto o segmento D
possui um espaador de uma volta.
Posto isto, existe uma importante regra de juno - As sequncias de sinal que possuem um espaador
de uma volta s se unem com as que possuem um espaador de duas voltas, assegurando que, por
exemplo, dois segmentos V no se unem entre si, e que os segmentos V, D e J se unem pela ordem
apropriada, e no uns aos outros.
Aco das recombinases
A recombinao VDJ catalisada por enzimas
colectivamente designadas por recombinases
V(D)J. As protenas RAG-1 e RAG-2
constituem os nicos produtos genticos
linfides-especfico que se demonstrou
estarem envolvidos no dito rearranjo. Assim,
a recombinao dos segmentos dos genes das
regies variveis obedece s seguintes etapas
1- Reconhecimento das RSSs por
enzimas recombinase, seguido de uma
sinapse (processo no qual as duas
sequncias de sinal e as sequncias
codificantes adjacentes so
aproximadas).
2 - Clivagem de uma cadeia de DNA
pelas RAG-1 e RAG-2, nas junes entre
a sequncia sinal e a sequncia
codificante.
3 - Numa reaco catalisada pelas
mesmas enzimas, o grupo -OH livre na
cadeia de DNA clivada ataca a ligao
fosfodiester, ligando a cadeia oposta
sequncia sinal, e produzindo
simultaneamente uma estrutura em
hairpin na extremidade clivada da
sequncia codificante e uma potente
quebra na cadeia dupla na sequencia
sinal.
4 - Clivagem do hairpin este
processo permite gerar locais para a
adio de nucleotideos de regio P.
Subsequentemente, uma endonuclease
de cadeia simples catalisa o corte de
alguns nucleotdeos da sequncia
codificante.
50

5 - Adio de 15 nucleotideos de regio N nas extremidades clivadas das sequncias codificantes
V, D e J da cadeia pesada pela enzima deoxinucleotidil-transfrase terminal (TdT).
6 - Reparo e ligao para unir as sequncias codificantes e para unir as sequncias sinal estes
processos so catalisados por enzimas de reparo de quebra de cadeia dupla (DSBR), tais como a
DNA ligase IV e a XRCC4.
A recombinao resulta na formao de uma juno codificante e de uma juno sinal. A orientao
transcripcional dos segmentos gnicos determina o destino da juno sinal e do DNA interveniente.
Quando os dois segmentos esto na mesma orientao, a juno resulta na deleo da juno sinal e
do DNA interveniente, como produto de exciso celular. Menos frequentemente, os dois segmentos de
genes apresentam orientaes opostas. Neste caso, a juno ocorre por meio de uma inverso de DNA,
resultando na reteno das junes codificante e sinal (bem como do DNA interveniente) no
cromossoma. De referir que, nos loci , cerca de metade dos segmentos de genes V
k
encontra-se
invertida em relao aos J
k
.
Produtividade dos rearranjos gnicos
Apesar de a quebra do DNA que inicia os rearranjos ser introduzida, de modo preciso, entre as
sequncias sinal e codificantes, a subsequente juno das sequncias codificantes imprecisa. Isto
constitui um mecanismo de aumento da diversidade juncional. De facto, a diversidade juncional deve-se
a variaes:
Na clivagem do hairpin
No corte das sequncias
Na adio de N-nucleotdeos
Na flexibilidade de juno das sequncias codificantes.
Esta aleatoriedade contribui para a diversidade de anticorpos, a qual constatvel pela
hipervariabilidade do stio de ligao ao antignio.
Para alm disso, podem ser gerados rearranjos
improdutivos nestes rearranjos, os segmentos de
genes podem ser unidos fora de fase, ou seja, a
terceira fase de leitura no preservada. Isto pode
se dever ao facto de a unidade VJ ou VDJ resultante
conter demasiados codes de terminao, os quais
interrompem a traduo. Por oposio, quando os
segmentos de genes so unidos em fase, a fase de
leitura mantida e da resulta um rearranjo
produtivo, e um anticorpo completo.
Se um alelo rearranja de forma improdutiva, uma
clula B ainda pode ser capaz de rearranjar
produtivamente o outro alelo. Caso a clula B seja
incapaz de gerar rearranjos produtivos de ambos os
alelos, esta morre por apoptose. De facto, estima-
se que somente uma em cada trs tentativas seja
produtiva, de tal modo que menos de 11% das
clulas pr-B em estadio inicial progridem para a
maturidade e deixam a medula.
51

Excluso allica
As clulas B so diplides, embora sejam apenas
expressos os genes para as Ig de um nico
cromossoma. Assim, o processo de excluso allica
assegura que as clulas B funcionantes nunca tero
mais do que uma unidade V
H
D
H
J
H
e uma unidade
V
L
J
L
, o que essencial para a especificidade
antignica. Assim, pressupe-se que, aps ter
ocorrido um rearranjo produtivo, a maquinaria de
recombinao desligada e os genes dos
cromossomas homlogos no so expressos.
Actualmente, postula-se que a presena de cadeias
pesadas sinaliza a clula B para desactivar o
rearranjo de outros alelos de cadeia pesada e
activar o rearranjo de genes de cadeia leve .
Aquando da ocorrncia de um rearranjo produtivo,
as cadeias leves emparelham com as pesadas, e
forma-se uma Ig. A presena desta Ig inactiva a ocorrncia de rearranjos adicionais na cadeia leve.
Contudo, se o rearranjo for improdutivo para ambos os alelos , o rearranjo da cadeia comea. Ora,
caso nenhum alelo se rearranje produtivamente a clula B morre. De referir que este modelo j foi
verificado experimentalmente em animais de laboratrio.

Diversidade de imunoglobulinas
Duas teorias procuram explicar a origem da diversidade de anticorpos a teoria da linha germinativa e
a teoria da variao somtica. Segundo a primeira, todo o repertrio referente regio varivel
codificado na linha germinativa do organismo. Por oposio, a segunda teoria defende que na linha
52

germinativa existe um nmero limitado de genes variveis, os quais, nas clulas somticas, e atravs de
fenmenos de recombinao ou de mutao, sofrem um aumento dessa variabilidade durante o
desenvolvimento do sistema imune.
Graas clonagem e sequenciao dos genes das imunoglobulinas, ambos os modelos foram, em parte,
confirmados. At data, foram identificados sete modos de gerar a referida diversidade de Ig, embora a
importncia de cada um deles seja ainda desconhecida:
1. Existncia de mltiplos segmentos V, D e J de genes da linha germinativa;
2. Rearranjo dos segmentos V, D e J;
3. Flexibilidade juncional;
4. Adio de nucletidos regio P;
5. Adio de nucletidos regio N;
6. Hipermutao somtica;
7. Associao combinatria de cadeias leves e pesadas.
Variedade de segmentos de genes da linha germinativa
Um inventrio dos segmentos V, D e J dos genes da linha germinativa revelou a existncia de 48 V
H,
23
D, 6 J
H
, 41 V
K
, 5 J
K
, 34 V
e 5 J
. Note-se, contudo, que este inventrio resultou da sequenciao do DNA

de um nico indivduo, pelo que os loci das imunoglobulinas de outros indivduos podero apresentar
ligeiras variaes naqueles nmeros.

Rearranjo dos segmentos V, D e J
Rearranjos aleatrios dos segmentos V, D e J aumentam a variabilidade com origem na linha
germinativa. possvel estimar, em termos quantitativos, a diversidade gerada por estes rearranjos,
que, em conjunto com os fenmenos infracitados (nomeadamente, a hipermutao somtica), originam
cerca de 10
10
locais distintos de ligao a antignios. Este nmero corresponde, obviamente, ao total de
variaes possveis, sendo que cada indivduo apresenta apenas um subconjunto dessas variaes.
Flexibilidade juncional
Como mencionado anteriormente, a juno das sequncias codificantes muitas vezes imprecisa, por
contraposio juno das sequncias sinal. Esta flexibilidade juncional origina no s rearranjos no-
produtivos, mas tambm combinaes produtivas que codificam para aminocidos alternativos em cada
juno codificante, aumentando assim a diversidade de anticorpos. A variao da sequncia de
aminocidos gerada pela flexibilidade juncional nas junes codificantes ocorre na terceira regio
53

hipervarivel (CDR3) do DNA das cadeias leve e pesada das imunoglobulinas, regio essa que contribui
de forma relevante para a ligao do antignio ao anticorpo.
Adio de nucletidos regio P
Aps clivagem inicial da cadeia simples de DNA na juno de um segmento de um gene da regio
varivel e sequncia sinal, os nucletidos localizados no final da sequncia codificante voltam-se para
formar uma estrutura semelhante a um gancho, que posteriormente clivada por uma endonuclease.
Esta segunda clivagem ocorre muitas vezes numa posio que deixa uma curta cadeia simples no final
da sequncia codificante. A subsequente adio de nucleotdeos complementares a esta sequncia
(adio P) por enzimas de reparao gera uma sequncia palindrmica na juno codificante, de tal
modo que estes nucleotdeos so designados por nucletidos P.
Adio de nucletidos regio N
As junes codificantes da regio varivel em genes da cadeia pesada que sofreram rearranjos contm
pequenas sequncias de aminocidos que no so codificadas pelos segmentos V, D ou J da linha
germinativa. Estes aminocidos so codificados por nucletidos adicionados durante o processo de
juno D-J e V para D-J, sendo essa reaco catalisada pela TdT. A variabilidade gerada por este processo
ampla, uma vez que as regies N parecem consistir em sequncias totalmente aleatrias. Uma vez que
a diversidade tem lugar nas junes codificantes V-D-J, esta associa-se regio CDR3 dos genes da
cadeia pesada.

Hipermutao somtica
A hipermutao somtica permite a substituio de nucletidos individuais nas unidades VJ e VDJ por
outros nucletidos alternativos, modificando assim a especificidade das imunoglobulinas codificadas.
Contudo, geralmente, a hipermutao somtica ocorre apenas nos centros germinativos (estruturas que
se formam nos rgos linfides secundrios, cerca de uma semana aps imunizao com um antignio
que ativa uma resposta de clulas B dependente dos linfcitos T).
A hipermutao somtica ocorre numa frequncia da ordem dos 10
-3
mutaes por par de bases por
gerao. Esta taxa , pelo menos, 100.000 vezes superior taxa de mutao espontnea dos outros
genes (que ronda as 10
-8
/pb/gerao). Uma vez que o comprimento combinado dos genes das regies
variveis das cadeias leve e pesada de cerca de 600 bp, espera-se que a hipermutao somtica
54

introduza, pelo menos, uma mutao por cada duas divises celulares no par de genes V
H
e V
L
que
codifica para um anticorpo.
Na sua maioria, as mutaes consistem em substituies de nucletidos, sendo estas mais frequentes
do que as delees ou inseres. A forma como estas substituies so introduzidas altamente, mas
no completamente, aleatria. De facto, determinadas sequncias dentro dos genes V
H
e V
L
so
particularmente suscetveis a hipermutaes somticas, sendo, por esse motivo, designadas por hot
spots.
Nas clulas B maduras, estas hipermutaes esto particularmente associadas s CDRs (regies
hipervariveis) das sequncias V
H
e V
L
, onde tm maior probabilidade de influenciar a afinidade para o
antignio. Aps exposio ao antignio, os linfcitos B que apresentam receptores com maior afinidade
para esse antignio so preferencialmente seleccionados, designando-se este processo por maturao
da afinidade.
Associao combinatria de cadeias leves e pesadas
Como resultado do rearranjo gentico da regio varivel, podem ser gerados 6624 genes da cadeia
pesada e 375 genes da cadeia leve. Se assumirmos que qualquer um dos genes de ambas as cadeias
pode ocorrer aleatoriamente na mesma clula, o nmero potencial de combinaes das cadeias leve e
pesada iguala as 2.484.000. Este valor , provavelmente, superior ao efectivamente gerado in vivo,
porque no provvel que todos os V
H
e V
L
emparelhem uns com os outros. Para alm disso, o processo
de recombinao no totalmente aleatrio, uma vez que os segmentos V
H
, D ou V
L
no so todos
usados com a mesma frequncia.
Comutao isotpica entre genes da regio constante
Aps estimulao antignica da clula B, o DNA da cadeia pesada pode ser alvo de um rearranjo
adicional, no qual a unidade V
H
D
H
J
H
pode combinar-se com qualquer segmento C
H
. O mecanismo exacto
deste processo, designado por troca de classe ou comutao isotpica, ainda no claro, mas envolve
regies do DNA (chamadas regies de troca) localizadas 2 a 3 kb a montante de cada segmento C
H
. Estas
regies, apesar de longas (2 a 10kb), so compostas por mltiplas cpias de curtas repeties (GAGCT
ou TGGGG).
Segundo uma hiptese recente, uma recombinase poder reconhecer estas repeties e, ao ligar-se,
proceder recombinao do DNA, da qual resulta a comutao isotpica. As citocinas desempenham um
papel central na determinao da classe de imunoglobulinas que ir ser expressa como consequncia da
troca. A ttulo de exemplo, a IL-4 induz a troca de classe da C

para a C
1 ou C
,
em alguns casos de forma
sucessiva.
A troca de classe depende, assim, da interao de quatro elementos: as regies de troca, uma
recombinase, a sinalizao pelas citocinas (que determinam o istipo para o qual clula B muda) e ainda
uma enzima a desamnase da citidina induzida por activao (AID).
Papel da AID
Como referido anteriormente, h trs tipos de modificao dos genes das imunoglobulinas: a
recombinao V-(D)-J, a hipermutao somtica e a comutao isotpica. A recombinao forma um
gene funcional; a hipermutao introduz alteraes na regio varivel do gene das Ig, que podem afetar
as propriedades de ligao ao antignio dos anticorpos que codificam; e a comutao permite que uma
dada unidade V-(D)-J possa ser associada a diferentes regies constantes, o que determina a funo
efectora da Ig.
55

Dados recentes sugerem que a AID uma mediadora central na hipermutao somtica, na converso
de genes e na recombinao conducente comutao isotpica. A AID pertence a uma famlia de
enzimas designada por enzimas editoras de RNA e procede desaminao de certas citosinas em certos
mRNAs, trocando-as por uracilos - este processo altera as instrues codificadas pelo mRNA-alvo (de
referir que foi igualmente descrita a modificao direta do DNA pela AID, atravs da desaminao da
citosina, da qual resulta, uma vez mais, a formao de uracilo). O local que sofreu a desaminao pode,
ento, ser reparado para formar um par A-T no lugar do par G-C, ou, alternativamente, o uracilo pode
ser excisado e substitudo por qualquer uma das quatro bases de DNA.
Expresso diferencial dos genes das imunoglobulinas
Nos transcritos primrios de RNA produzidos a partir dos genes rearranjados das cadeias pesadas e
cadeias leves, existem intres e segmentos resultantes da transcrio de genes J que no foram
perdidas durante o rearranjo V-(D)-J. Para alm disso, como referido anteriormente, os segmentos dos
genes C das cadeias pesadas encontram-se organizados sob a forma de um conjunto de exes
codificantes e intres no-codificantes. Assim, os transcritos primrios de RNA devero sofrer
processamento (por RNA splicing), de modo a que ocorra remoo das sequncias de DNA no-
codificantes, e para que possa ocorrer unio dos exes. Isto permite gerar um mRNA final, que
subsequentemente exportado para o citosol, onde traduzido em cadeias H ou L completas.
Mecanismos de splicing alternativo permitem que o transcrito primrio das cadeias pesadas origine
diferentes mRNA, o que explica como que uma nica clula B consegue produzir formas membranares
ou secretadas de uma determinada Ig. Para alm disso, o processamento explica como que uma nica
clula B capaz de expressar simultaneamente IgM e IgD.
Expresso de imunoglobulinas membranares ou secretadas
As Ig podem existir na sua
forma membranar (ou seja,
ancoradas membrana
citoplasmtica) ou
secretada. As duas formas
diferem na sequncia
aminoacdica dos domnios
do terminal carboxilo das
cadeias pesadas (ou seja,
na sequncia aminoacdica
dos domnios C
H
3/C
H
3 no
caso da IgA, IgD e IgG; e
dos domnios C
H
4/C
H
4 no
caso da IgE e IgM).
De facto, as formas
secretadas das Ig contm
uma sequncia hidroflica de cerca de 20 aminocidos no seu domnio do terminal carboxilo, enquanto
as formas membranares contm uma sequncia de 40 aminocidos, na qual esto presentes trs
segmentos:
1. Um segmento hidroflico que se estende para o meio extracelular
2. Um segmento transmembranar hidrofbico
3. Um segmento hidroflico que se estende para o citosol e contm o terminal carboxilo
56

O processamento alternativo de RNA permite que uma mesma clula B seja capaz de secretar Ig na sua
forma membranar e secretada. De facto, no segmento C
(que codifica para a cadeia pesada das IgM)

existem quatro exes, correspondentes aos quatro domnios da molcula de IgM o exo C
4 contm
um conjunto de nucleotdeos (sequncia S) que codifica para a sequncia hidroflica do domnio C
H
4 da
IgM secretada. Distalmente sequncia S existem dois exes o exo M1 codifica para o segmento
transmembranar, enquanto o segmento M2 codifica para o segmento citoplasmtico do domnio C
H
4 da
IgM membranar.
Se ocorrer clivagem do transcrito primrio e poli-adenilao entre a sequncia S e o exo M1 (no local
1), ocorre perda dos exes M1 e M2. Dessa forma, produz-se mRNA codificante da forma secretada da
cadeia pesada.
Por oposio, caso a clivagem e a poli-adenilao do transcrito primrio ocorram distalmente ao exo
M2 (no local 2), passa a ocorrer remoo da sequncia S, mas conservao dos exes M1 e M2. Dessa
forma, produz-se mRNA codificante da forma membranar da cadeia pesada.
Contudo, permanece ainda por esclarecer como que, nas clulas B nave, o processamento de RNA
leva sempre gnese de Ig membranares. De modo similar, permanece ainda por esclarecer como que
o processamento plasmocitrio de RNA leva a que sejam preferencialmente produzidas Ig secretadas.

Expresso simultnea de IgM e IgD
O processamento diferencial do RNA tambm explica como que cada clula B madura capaz de
produzir simultaneamente IgM e IgD membranares. De facto, a transcrio dos genes das cadeias
pesadas nas clulas B maduras produz transcritos primrios contendo simultaneamente os segmentos
C

e C. Nos genes rearranjados, os segmentos dos genes C e C encontram-se muito prximos, de tal
modo que ocorre transcrio de toda a regio VDJCC. Assim, ser ao nvel do processamento que ser
estabelecida a produo de uma cadeia pesada de uma IgM ou de uma IgD.
57

No segmento do gene C
existem dois locais (o local 3 e o local 4) homlogos aos locais 1 e 2

existentes no gene C
(vide supra). Assim, caso o transcrito primrio seja clivado e poli-adenilado no

local 2 (isto , entre C
e C
), forma-se um mRNA codificante para a forma membranar da cadeia

pesada . Por oposio, caso ocorra poli-adenilao no local 4 (a jusante de C) e splicing dos exes de
C
, forma-se um mRNA codificante para a forma membranar da cadeia pesada .

Ora, as clulas B maduras expressam simultaneamente IgM e IgD nas suas membranas, de tal modo que
ambas as formas de processamento devero coexistir simultaneamente. Para alm disso, ao nvel dos
plasmcitos, a clivagem no local 1 e no local 3 permite gerar as formas secretadas das cadeias
pesadas e , respectivamente.

Sntese, estruturao e secreo das imunoglobulinas
Os polipeptdeos das Ig so sintetizados nos ribossomas do retculo endoplasmtico rugoso, sendo que
os mRNA das cadeias leves e pesadas so traduzidos em polirribossomas reticulares separados. As
cadeias de mRNA recm-sintetizadas contm uma sequncia leader amino-terminal esta sequncia
guia as cadeias para o lmen do retculo endoplasmtico rugoso, onde ocorre clivagem da sequncia de
sinalizao.
A ordem de estruturao das cadeias leves (L) e pesadas (H) varia de acordo com as classes de Ig. No
caso da IgM, cada cadeia L junta-se com uma cadeia H, formando uma semi-molcula no interior do
58

retculo endoplasmtico. Subsequentemente, ocorre juno de duas semi-molculas, para formar uma
molcula de Ig completa. Por oposio, no caso da Ig, ocorre juno inicial de duas cadeias H.
Subsequentemente, forma-se uma molcula intermediria H
2
L, a partir da qual se gera uma molcula
completa H
2
L
2
.
Ao nvel do retculo endoplasmtico, existem ainda enzimas responsveis por catalisar o
estabelecimento de ligaes dissulfito inter-cadeias e intra-cadeias essas ligaes so essenciais para
assegurar a juno dos polipeptdeos das Ig, bem como um correcto folding dos domnios das Ig.
O retculo endoplasmtico dispe de mecanismos de controlo de qualidade, que se asseguram que
apenas so exportadas molculas de Ig correctamente estruturadas. De entre os mediadores dessas
funes, destaque para a BiP, que se liga s molculas de Ig incompletamente estruturadas, mas
desliga-se das molculas completamente estruturadas. Assim, a presena da BiP impede a exportao
das Ig para a membrana ou para exocitose. De referir que as Ig misfolded, ou que ficam retidas no
retculo endoplasmtico, acabam por ser degradadas por poli-ubiquitinao.
Regulao da transcrio dos genes das imunoglobulinas
Os genes das Ig so apenas expressos nas linhagens de clulas B e, mesmo nestas clulas, estes genes
so expressos de modo diferencial durante diferentes etapas. Isto evidencia a existncia de mecanismos
de regulao da transcrio dos genes das Ig. De facto, a transcrio destes genes regulada pelas
sequncias promotoras e enhancer (que activam a transcrio promovida pelos promotores). Cada
segmento dos genes V
H
e V
L
dispe de uma sequncia promotora, localizada imediatamente a montante
da sequncia leader. Para alm disso, o agregado J
K
e cada um dos genes D
H
do locus da cadeia pesada
so precedidos por promotores.
O rearranjo dos genes V das Ig acelera a transcrio destes genes. De facto, a taxa de transcrio das
regies codificantes V
H
e V
L
negligencivel no DNA no-rearranjado. Ora, os rearranjos dos genes da
regio varivel aproximam o promotor do enhancer, de tal modo que o enhancer passa a influenciar o
promotor de modo muito mais determinante, aumentando a taxa de transcrio dos genes das Ig.
Assim, a taxa de transcrio de uma unidade rearranjada V
L
J
L
ou de uma unidade V
H
D
H
J
H
cerca de 10
4

vezes superior taxa de transcrio dos segmentos V
L
e V
H
no-rearranjados.
Para alm disso, de entre os factores que promovem a transcrio dos genes que codificam para as Ig,
destaque para o E2A existem duas formas deste factor, ambas capazes de se ligarem aos enhancers
e .
Por vezes, os genes que regulam a proliferao celular ou inibem a apoptose sofrem translocaes para
os loci das cadeias pesadas ou leves das Ig. A, sob a influncia dos enhancers das Ig, a expresso desses
genes sofre um aumento significativo, o que resulta em nveis superiores de sntese de protenas
promotoras do crescimento ou inibidoras da apoptose esta a base molecular para o
desenvolvimento de vrios linfomas.
Inibio da expresso dos genes das imunoglobulinas nas clulas T
O completo rearranjo dos genes das Ig restringe-se s clulas B, enquanto o rearranjo do TCR ocorre
apenas nas clulas T. Pensa-se que isto se deva ao facto de uma protena expressa pelas clulas T (mas
no pelas clulas B) se ligar ao enhancer da cadeia no-mutada, prevenindo a ligao V
-J
nas clulas T
contudo, a identidade dessa protena permanece desconhecida. Processos similares parecem prevenir
o rearranjo dos genes das cadeias pesadas e cadeias leves do DNA nas clulas T.

59

Linfcito T
Resumo geral
As clulas T so as principais intervenientes do processo de imunidade mediada por clulas, embora
tambm participem na activao das respostas humorais. Tendo em conta o papel crucial
desempenhado pelas clulas T na funo imunitria, a sua actividade dever ser meticulosamente
regulada. De facto, contrariamente s clulas B, as clulas T apenas reconhecem antignios ligados ao
MHC assim, tanto a maturao tmica como a activao perifrica das clulas T requer a presena de
molculas do MHC.
No que concerne ao desenvolvimento das clulas T, este inicia-se com a chegada ao timo de uma
pequena quantidade de clulas progenitoras (as primeiras clulas progenitoras chegam ao timo por
volta da oitava ou nona semana de gestao). No timo, as clulas T em desenvolvimento (timcitos)
completam o seu processo de maturao, proliferando, diferenciando-se e originando subpopulaes
funcionalmente distintas de clulas T.
Durante o processo de maturao tmica, gerada uma grande diversidade de clulas T, as quais
expressam distintos receptores da clula T (TCR). Alguns desses receptores so incapazes de reconhecer
o MHC, enquanto outros so inclusive capazes de reagir contra antignios do self. Assim, torna-se
necessrio seleccionar apenas as clulas cujos TCR reconhecem o MHC e so, simultaneamente,
tolerantes ao self. Essa seleco ocorre ao nvel do timo e compreende dois processos distintos:
1. Seleco positiva: Permite apenas a sobrevivncia das clulas T cujos TCR so capazes de
reconhecer molculas do prprio MHC. Assim, a seleco positiva responsvel por criar um
repertrio de clulas T restritas ao MHC.
2. Seleco negativa: Elimina todas as clulas T que reagem muito avidamente com o MHC, bem
como as clulas que reagem com o antignios do self. Assim, a seleco negativa responsvel
por gerar um repertrio de clulas T tolerantes ao self.
Aps ocorrer seleco positiva e seleco negativa, as clulas T sofrem uma especializao em clulas T
CD4
+
ou CD8
+
. As clulas T CD4
+
(tambm designadas por linfcitos T helper) apenas se ligam a
antignios apresentados pelo MHC II, enquanto as clulas T CD8
+
(tambm designadas por linfcitos T
citotxicos) apenas se ligam a antignios apresentados pelo MHC I.
A interaco entre um complexo peptdeo antignico-MHC e as clulas T perifricas apresenta reduzida
afinidade, de tal modo que, apesar de necessria, esta interaco insuficiente para que as clulas T
sofram activao. Assim, para que ocorra activao das clulas T, a fora desta interaco dever ser
fortalecida por sinais induzidos por co-receptores e outras molculas membranares acessrias. De
qualquer modo, uma vez activadas, as clulas T comeam a proliferar e a diferenciar-se em clulas
efectoras e clulas T de memria.
Maturao das clulas T
O desenvolvimento das clulas T inicia-se com a chegada ao timo de uma pequena quantidade de
percursores linfides provenientes do sangue. No timo, essas clulas progenitoras proliferam,
diferenciam-se e sofrem processos de seleco que resultam no desenvolvimento de clulas T.
O desenvolvimento das clulas T requer uma via de sinalizao mediada pelo Notch. De facto, o Notch
essencial para induzir a diferenciao das clulas tronco hematopoiticas em clulas T. Para alm disso,
o Notch pode levar a que uma potencial clula B se diferencie numa clula T.
60

As clulas progenitoras que chegam ao timo no expressam qualquer marcador de superfcie
caracterstico das clulas T, sendo por isso, TCR
-
, CD3
-
, CD4
-
e CD8
-
. Para alm desses marcadores, estas
clulas progenitoras ainda no expressam as protenas RAG-1 e RAG-2, que so essenciais para o
rearranjo gentico do TCR.
Como no expressam CD4 nem CD8, essas clulas progenitoras so
designadas por clulas duplamente negativas (DN). As clulas
duplamente negativas atravessam quatro estadios sequenciais, os
quais so definidos de acordo com a expresso de outras molculas de
superfcie (c-Kit, CD44 e CD25):
1. Clulas DN1 (clulas c-kit
+
CD44
+
CD25
-
): As clulas que
entram no timo encontram-se no estadio DN1, sendo capazes de originar todos os subtipos de
clulas T. Ao contactarem com o ambiente tmico, as clulas DN1 comeam a proliferar,
passando a expressar CD25. Essa expresso determina a transio para o estadio de clulas
DN2.
+
CD44
+
CD25
+
): Durante o estadio DN2, inicia-se o rearranjo dos
genes que codificam para as cadeias , e do TCR. Por oposio, nesta fase, o gene que
codifica para a cadeia do TCR no sofre um concomitante rearranjo.
-
, CD44
-
e CD25
+
): A passagem das clulas para o estadio DN3 requer a
perda da sua expresso de c-kit e CD44. Durante a transio do estadio DN2 para o estadio
DN3, uma pequena percentagem de timcitos completa a sua maturao, originando clulas T
. Todavia, a maior parte dos timcitos est destinada a originar clulas T e, como tal,
continua a sofrer maturao.
No estadio DN3, as clulas deixam de proliferar. Concomitantemente, as recm-sintetizadas
cadeias dos TCR combinam-se com uma cadeia pr-T (uma glicoprotena de 33 kDa) e com
uma molcula CD3, formando assim um complexo pr-TCR. A sinalizao Notch essencial
nesta etapa do desenvolvimento as clulas que no expressam Notch no ultrapassam este
estadio.
-
, CD44
-
e CD25
-
): Aps concluso do rearranjo das cadeias , as
clulas DN3 progridem rapidamente para o estadio DN4 nessa fase, os nveis de CD25 caem e
comea a ocorrer expresso simultnea dos receptores CD4 e CD8. A clula entra, ento, num
estadio duplo-positivo.
Em suma, a formao do TCR activa uma via de transduo de sinal, da qual resultam vrias
consequncias:
1. Induo da proliferao e maturao celular
2. Supresso de rearranjos ulteriores da cadeia do TCR (o que resulta em excluso allica).
3. Ocorrncia de rearranjos na cadeia do TCR.
4. Progresso para o estado duplo-positivo (CD4
+
/CD8
+
).
Assim, aps passar o estadio DN4, a clula entra num estadio duplo positivo (DP), que, numa fase
inicial, se caracteriza por uma intensa proliferao. Quando os timcitos deixam de proliferar, passa a
ocorrer um aumento da expresso de RAG-2 e, por conseguinte, um rearranjo das cadeias .
A fase proliferativa que caracteriza a primeira etapa do estadio DP permite um aumento da diversidade
do repertrio de clulas T. De facto, esta proliferao permite a gnese de um conjunto de clulas
(clone) com cadeias idnticas (pois a partir de uma mesma clula com uma dada cadeia so
originadas muitas clulas iguais). Subsequentemente, essas clulas sofrem um rearranjo das cadeias
entre clulas de um mesmo clone (e, por isso, com cadeias idnticas) ocorre conjugao com
diferentes cadeias , o que constitui uma grande fonte de diversidade. Gera-se assim uma populao
c-kit CD44 CD25
DN1 + + -
DN2 + + +
DN3 - - +
DN4 - - -
61

muito mais diversa que aquela que seria originada caso a clula original sofresse inicialmente um
rearranjo nos loci e antes de proliferar.
A conjugao de uma cadeia com uma cadeia permite a formao de um TCR completo. Aps
ocorrer formao do TCR, os timcitos DP sofrem seleco positiva e negativa. Esses processos de
seleco eliminam uma fraco substancial dos timcitos DP de facto, cerca de 98% dos timcitos no
completa a sua maturao e morre por apoptose ao nvel do timo, quer porque no conseguem gerar
um rearranjo produtivo no gene do TCR, quer porque no conseguem sobreviver aos processos de
seleco tmica. Assim, o desenvolvimento das clulas T um processo dispendioso sob o ponto de vista
energtico.
Os timcitos DP que expressam o complexo TCR-CD3 e sobrevivem seleco tmica originam
timcitos CD4
+
single-positive ou timcitos CD8
+
single-positive. Essas clulas single-positive sofrem
ulterior seleco negativa para depois abandonarem o timo (aps sofrerem seleco negativa, as clulas
T passam do crtex para a medula tmica, a partir de onde passam para o sistema circulatrio).

Seleco tmica do repertrio de clulas T
Os processos de rearranjo aleatrio dos genes do TCR e de diversidade juncional conseguem gerar um
vasto repertrio de TCR so gerados mais de 10
15
TCR e mais de 10
18
TCR . Contudo, nem todos
estes TCR so capazes de reconhecer o MHC, assim como nem todos estes TCR so tolerantes ao self.
Deste modo, ao nvel do timo, os timcitos devem sofrer dois processos de seleco:
1. Seleco positiva dos timcitos que expressam receptores capazes de ligar a molculas do
MHC. Este fenmeno assegura que todas as clulas T maduras so capazes de ligar ao MHC
(fenmeno de restrio ao MHC).
2. Seleco negativa que elimina os timcitos que apresentam receptores de elevada afinidade
para as molculas do MHC ou para antignios do self apresentados pelo MHC. Este processo
assegura que apenas so geradas clulas T tolerantes ao self.
62

Ambos os processos so necessrios para gerar clulas T maturas simultaneamente restritas ao MHC e
tolerantes ao self. Como referido anteriormente, a maior parte dos timcitos falha os processos de
seleco e morre por apoptose, ao nvel do timo. A maior parte destes linfcitos morre por falhar o
processo de seleco positiva, uma vez que os seus receptores no reconhecem especificamente as
molculas do MHC. Assim, essas clulas no recebem estmulos de crescimento e morrem por
negligncia.
Ao nvel do timo, o hapltipo do MHC determina a restrio ao MHC das clulas T. As molculas de MHC
(tanto do tipo MHC I, como do tipo MHC II) so expressas pelas clulas estromais tmicas (incluindo
clulas epiteliais), pelos macrfagos e pelas clulas dendrticas. Assim, a interaco destas clulas com
os timcitos imaturos essencial para determinar a seleco positiva e negativa dos timcitos.
Seleco positiva
A seleco positiva ocorre ao nvel
da regio cortical do timo e requer
a interaco entre os timcitos
imaturos e as clulas epiteliais
corticais. Pensa-se que essas
interaces permitem que os
timcitos imaturos recebam um
sinal protector, que impede que
estes sofram apoptose. Assim, as
clulas cujos TCR no interagem
com molculas do MHC, no
recebem um sinal protector e, por
conseguinte, morrem por
apoptose.
Como referido anteriormente,
apenas as clulas cujo
heterodmero TCR reconhece o
self-MHC so selecionadas e
sobrevivem. Consequentemente, a
presena de mais do que uma
combinao de cadeias TCR
entre membros de um dado clone
(conjunto de clulas que expressa
uma mesma cadeia )
importante, na medida em que
aumenta a probabilidade de que
alguns desses membros passem o
teste da seleco positiva.
Durante o processo de seleco
positiva, as protenas RAG-1, RAG-
2 e TdT (que so necessrias para o rearranjo e modificao gnicas) continuam a ser expressas. Deste
modo, caso um timcito expresse um TCR que no reconhece o MHC, este pode rearranjar os genes da
sua cadeia . Assim, os timcitos que falham no teste de seleco positiva tem como que uma segunda
oportunidade de gerar um TCR capaz de se ligar ao MHC. Assim, ser poupada qualquer clula que seja
capaz de rearranjar a sua cadeia , de tal modo que o TCR resultante seja capaz de reconhecer o
63

MHC. Por oposio, todos os membros de um dado clone que sejam incapazes de proceder a tal
rearranjo, morrem num perodo de 3-4 dias
(Por analogia, o rearranjo das cadeias como o exame de recurso para os alunos que chumbaram ao exame na
fase normal. Os alunos que passam no exame de recurso ficam com a cadeira feita, enquanto os que chumbam
deixam de poder fazer aquela cadeira).
Seleco negativa
Entre os timcitos que sobrevivem ao processo de seleco positiva, alguns apresentam elevada
afinidade para o MHC (sendo, inclusive reactivos contra antignios do self), enquanto outros
apresentam menor afinidade. Ora, o processo de seleco negativa permite eliminar os timcitos com
receptores de elevada afinidade para o MHC/antignios do self,
De facto, durante o processo de seleco negativa, as clulas estromais tmicas (clulas dendrticas e
macrfagos que expressam MHC I e MHC II) interagem com os timcitos com receptores de elevada
afinidade para os antignios do self ou para os complexos MHC-antignios do self, promovendo a sua
eliminao. Embora se saiba que as clulas que sofrem seleco negativa morrem por apoptose, ainda
no se conhecem as vias moleculares precisas deste processo.
Questes por resolver nos processos de seleco tmica
Existem ainda vrias questes por esclarecer no que concerne aos processos de seleco tmica. De
facto, se a seleco positiva apenas permite a sobrevivncia dos timcitos que reconhecem as molculas
do MHC, e se a seleco negativa elimina os timcitos reactivos contra o MHC, ento porque que o
conjunto destes dois processos no resulta na eliminao de todas as clulas T?
Duas hipteses foram j postuladas com o objectivo de responder a esta questo:
1. A hiptese da avidez postula que, aps os seus TCR se ligarem ao MHC, os timcitos recebem
um sinal com uma determinada fora. Os timcitos que recebem um sinal fraco so
seleccionados positivamente, enquanto os timcitos que recebem um sinal muito forte so
seleccionados negativamente. Ora, a fora desses sinais determinada pela avidez da
interaco TCR-peptdeo MHC, de tal modo que os timcitos que se ligam mais avidamente ao
MHC so eliminados por seleco negativa.
2. A hiptese da sinalizao diferencial teoriza que o destino dos timcitos determinado por
diferentes sinais, e no por diferentes foras do mesmo sinal. Assim, este modelo tem uma
base qualitativa (e no quantitativa), enfatizando a natureza do sinal. Esta hiptese reforada
pelo facto de alguns complexos MHC-peptdeo serem capazes de gerar apenas um sinal fraco
ou parcialmente activador, enquanto outros so capazes de gerar um sinal completo. Assim,
ocorre seleco positiva quando os TCRs contactam com complexos MHC-peptdeo geradores
de sinais fracos ou parciais. Por oposio, quando os TCRs contactam com complexos geradores
de sinais completos, ocorre seleco negativa.
De referir que ambas as hipteses apresentam validao experimental, sendo inclusive possvel que
ambos os processos actuem de modo significativo.
A expresso diferencial do co-receptor CD8 tambm parece afectar a seleco tmica. De facto, a
interaco das clulas T com as molculas MHC I reforada pela participao do CD8, de tal modo que
o aumento da expresso de CD8 pode aumentar a avidez dos timcitos pelas molculas do MHC I, o que
favorece a sua eliminao por seleco negativa.
64

Para alm disso, ainda no foram determinados quais os factores que determinam que um dado
timcito DP origine uma clula T CD4
+
ou uma clula CD8
+
. Tambm para responder a esta questo,
foram postuladas duas hipteses:
1. O modelo instructivo defende que as mltiplas interaces entre o TCR, os co-receptores, e as
molculas de MHC determinam a diferenciao em clulas single-positive CD8
+
ou CD4
+
. Assim,
de acordo com este modelo, as clulas que expressam um TCR especfico para o MHC I
originam clulas single-positive CD8
+
, enquanto as clulas que expressam um TCR especfico
para o MHC II originam clulas single-positive CD4
+
. Ora, isto deve-se a diferenas nos sinais
gerados pelas interaces entre o TCR e as diferentes classes de MHC.
2. O modelo estocstico sugere que a converso em single-positive CD4
+
ou CD8
+
ocorre
meramente ao acaso, no havendo qualquer relao com a especificidade do TCR. Deste modo,
apenas os timcitos cujo TCR e co-receptor remanescente reconhecesse a mesma classe de
MHC sofreria maturao.

Activao das clulas T
A activao e expanso clonal das clulas T constituem dois eventos cruciais para a gnese das respostas
humoral e mediada por clulas. A activao das clulas T iniciada pela interaco que se estabelece
entre o complexo TCR-CD3 e o complexo peptdeo antignico-MHC (que expresso superfcie das
clulas apresentadoras de antignios). Note-se que as clulas T CD8
+
ligam-se a molculas MHC I,
enquanto as clulas T CD4
+
ligam-se a molculas MHC II.
A interaco de uma clula T com um complexo MHC-peptdeo activa vias de transduo de sinal que
resultam na activao da transcrio de vrios genes. Por conseguinte, os produtos de transcrio
desses genes actuam num sentido de promover a entrada em ciclo, proliferao e diferenciao (em
clulas T de memria ou efectoras) das clulas T em repouso.
65

De referir que, os genes transcritos no decurso destas vias de sinalizao podem ser classificados em:
1. Genes imediatos: So expressos num perodo de meia hora aps reconhecimento antignico,
codificando para vrios factores de transcrio, incluindo c-Fos, c-Myc, c-Jun, NFAT e NF-B.
2. Genes precoces: So expressos num perodo de 1-2 horas aps reconhecimento antignico,
codificando para a IL-2, IL-2R (receptor da IL-2), IL-3, IL-6, IFN- e vrias outras protenas.
3. Genes tardios: So expressos num perodo superior a dois dias apos reconhecimento
antignico, codificando para vrias molculas de adeso.
Sinais co-estimulatrios necessrios para a activao total das clulas T
Apesar de ser necessria para a activao das clulas T, a interaco entre o TCR e o complexo MHC-
peptdeo antignico no suficiente para activar completamente as clulas T nave. De facto, so
necessrios, pelo menos dois sinais, para que ocorra activao e proliferao das clulas T nave:
1. Sinal 1: O sinal inicial gerado pela interaco de um peptdeo antignico com o complexo
TCR-CD3.
2. Sinal 2: O segundo sinal um sinal no-especfico para os antignios, sendo gerado, sobretudo,
conta de interaces entre o CD28 (expresso nas clulas T) e membros da famlia B7
(expressos nas clulas apresentadoras de antignios).
Tanto o B7 como os seus ligandos pertencem superfamlia das imunoglobulinas. Existem duas formas
de B7 B7-1 (CD80) e B7-2 (CD86) as quais apresentam uma organizao similar dos seus domnios
extracelulares, mas diferentes domnios citoslicos. As molculas B7 so apenas constitutivamente
expressas nas clulas dendrticas. Assim, nos macrfagos e nas clulas B activas, a sua expresso dever
ser induzida.
O CD28 e o CTLA-4 (CD152) constituem os ligandos para as molculas B7. Estas duas molculas
encontram-se ambas expressas nas clulas T como homodmeros ligados a dissulfidos. Apesar de o CD28
e o CTLA-4 constiturem duas glicoprotenas estruturalmente similares, estes factores actuam de modo
oposto:
1. O CD28 expresso tanto pelas clulas T em repouso como pelas clulas T activas a sua
activao gera um sinal co-estimulador positivo que resulta na activao das clulas T.
2. O CTLA-4 apenas expresso nas clulas T activas (sendo praticamente indetectvel nas clulas
em repouso) a sua activao gera um sinal co-estimulador negativo, que inibe a activao das
clulas T.
Tipicamente, a activao do TCR induz expresso do CTLA-4. Para alm disso, a expresso de CTLA-4
aumentada por sinais co-estimulatrios gerados pelo CD28. Assim, o CTLA-4 actua como um regulador,
cuja activao proporcional activao do CD28. De referir que, apesar de os nveis mximos de CTLA-
4 nunca superarem os nveis de CD28, o CTLA-4 apresenta maior afinidade para as molculas B7.

66

Anergia clonal
Existem situaes em que, aps proceder ao reconhecimento de um complexo MHC-peptdeo
antignico, a clula T no gera qualquer resposta (ou seja, no prolifera), manifestando anergia clonal.
Dois factores podem levar a que, em vez de gerar uma resposta, uma clula T entre em anergia clonal:
1. Ausncia de sinais co-estimulatrios: Se uma clula T em repouso recebe o primeiro sinal, mas
no recebe qualquer sinal co-estimulatrio, ento essa clula torna-se anrgica, produzindo
apenas uma quantidade mnima de citocinas.
2. Aumento da expresso de CTLA-4: O aparecimento do CTLA-4 numa clula T que tenha
recebido ambos os sinais estimulatrios pode bloquear a co-estimulao, o que leva ao
desenvolvimento de anergia.
Ainda no so conhecidas as vias moleculares que regulam o estado de anergia. Apesar disso, j foram
identificados vrios componentes moleculares participantes nestas vias entre esses componentes,
destaque para vrias lgases de ubiquitina, que parecem encaminhar componentes essenciais da via de
sinalizao do TCR para degradao proteossmica. De referir que, tanto as clulas T CD4
+
como as
clulas T CD8
+
podem sofrer anergia.
Clulas apresentadoras de antignios
As clulas apresentadoras de antignios (APC) profissionais compreendem as clulas dendrticas, os
macrfagos e as clulas B. Estas clulas so as nicas que expressam MHC II e as molculas co-
estimulatrias B7-1 e B7-2, sendo por isso capazes de induzir activao completa das clulas T,
promovendo a sua proliferao e diferenciao. Todavia, as APC profissionais diferem tanto na sua
capacidade de apresentar antignios como de gerar um sinal co-estimulador.

As clulas dendrticas expressam nveis constitutivamente elevados de molculas MHC II, B7-1 e B7-2.
Deste modo, as clulas dendrticas constituem activadoras muito potentes de todas as classes de clulas
T (nave, de memria e efectoras). As clulas dendrticas so constitudas por duas populaes distintas:
67

Clulas mielides: Estas clulas expressam CD11c e induzem preferencialmente uma resposta
T
H
1, o que se pode dever ao facto de expressarem maior quantidade de B7-1 (CD80), em
detrimento de B7-2. As clulas de Langerhans constituem um exemplo de clulas mielides,
encontrando-se ao nvel da pele.
Clulas plasmacitides: Estas clulas no expressam CD11c, desempenhando um importante
papel na resposta anti-viral inata, na medida em que secretam IFN- e IFN-. Para alm disso,
estas clulas activam as clulas T reguladoras, induzindo tolerncia e suprimindo o
desenvolvimento de respostas T
H
1. Contudo, as clulas plasmacitides tambm parecem estar
envolvidas na patogenia de algumas doenas auto-imunes, o que se pode dever ao facto de
expressar TLR7, TLR8 e TLR9 trs receptores envolvidos no reconhecimento de cidos
nucleicos virais. De referir que as clulas plasmacitides expressam preferencialmente B7-2
(CD86) e induzem uma resposta T
H
2.
Por oposio, todas as outras APC profissionais necessitam de ser activadas para que passem a
expressar molculas B7 co-estimulatrias.
De facto, os macrfagos em repouso so incapazes de activar as clulas T nave e so fracos activadores
das clulas T efectoras e de memria. Quando activados, os macrfagos sobre-regulam a sua expresso
de MHC II e de molculas co-estimulatrias. Assim, os macrfagos activados passam a ser importantes
activadores das clulas T efectoras e de memria, embora a sua capacidade de activao das clulas T
nave permanea desprezvel.
As clulas B tambm actuam como clulas apresentadoras de antignios. As clulas B em repouso
expressam molculas MHC II, mas no expressam molculas B7 co-estimulatrias. Consequentemente,
as clulas B em repouso so incapazes de activar as clulas T nave, embora sejam capazes de activar as
clulas T de memria e efectoras. Quando activadas, as clulas B sobre-regulam a sua expresso de
molculas MHC II e comeam a expressar B7. Assim, para alm de activarem clulas T de memria e
efectoras, as clulas B activadas passam a ser capazes de activar as clulas T nave.
Superantignios
Os superantignios so
protenas virais ou bacterianas
que se ligam
simultaneamente ao domnio
V
de um TCR e cadeia de
uma molcula MHC II. Esses
cross-links estabelecidos pelos
superantignios produzem um
sinal de activao que induz a
activao e proliferao das
clulas T.
J foram identificados superantignios endgenos e exgenos. Os superantignios exgenos so
protenas solveis secretadas pelas bactrias e incluem, por isso, um vasto conjunto de exotoxinas. Por
seu turno, os superantignios endgenos so protenas membranares (determinantes minor
estimuladores dos linfcitos) codificadas por determinados vrus que infectam as clulas humanas.
Tendo em conta que os superantignios ligam-se fora da fenda de ligao ao antignio, qualquer clula
T que expresse uma sequncia V
particular ser activada pelo correspondente superantignio

(independentemente da sua especificidade antignica). Gera-se, assim, uma activao policlonal, que
68

pode envolver uma percentagem significativa da populao total de linfcitos T
Helper
. Ora, estas
activaes macias resultam na sobreproduo de citocinas por parte das clulas T, o que induz
toxicidade sistmica.
Os superantignios so tambm capazes de influenciar a maturao tmica das clulas T. Um
superantignio presente no timo durante o processo de maturao induzir seleco negativa de todos
os timcitos que apresentem um domnio V
reconhecido por aquele superantignio. De referir que,

esta deleco macia pode ser causada por superantignios endgenos e exgenos.
Vias de sinalizao despoletadas aps activao do TCR
O processo de induo de respostas por parte das clulas T compreende duas etapas:
1. Iniciao Aps activao do TCR, despoletada uma via
de sinalizao, em cuja iniciao a cnase de tirosina p56
Lck

desempenha um papel fundamental. Numa clula T em
repouso, a p56
Lck
est associada s caudas citoplasmticas
dos co-receptores CD4 e CD8, encontrando-se
maioritariamente em lipid rafts (microdomnios
membranares ricos em esfingomielina, glicoesfingolipdeos
e colesterol). Ora, nas clulas em repouso, o TCR encontra-
se fora das lipid rafts e, por isso, desligado da p56
Lck
.
Contudo, a ligao de um complexo MHC-peptdeo ao TCR
induz alteraes profundas a este cenrio de facto, aps
essa ligao, o TCR fica associado a lipid rafts e passa a
estar agregado a co-receptores CD4 e CD8, que se ligam s
regies invariantes da molcula MHC. Deste modo, a cnase p56
Lck
aproxima-se das caudas
citoplasmticas do complexo TCR e fosforila os motivos ITAM dos polipeptdeos do componente
CD3 (cadeia ).
Os resduos fosforilados desses ITAMs constituem locais de ancoragem aos quais se liga a ZAP-70,
outra protena cnase de tirosina. Ao ligar-se a esses resduos fosforilados, a ZAP-70 fica activa,
passando a fosforilar vrias molculas ancoradas membrana, nas quais se incluem o Vav-1, o Shc,
o LAT e o SLP-76. Essas molculas actuam como estruturas de ancoragem, permitindo o
recrutamento de molculas mediadoras associadas a vrias vias intracelulares de transduo de
sinal.

2. Gnese de mltiplos sinais intracelulares Vrias vias de sinalizao so activadas em
consequncia de uma srie de etapas que ocorrem na fase de iniciao. Entre essas vias, destaque
para a via da fosfolipase C e para a via da Ras (vide infra).
A fase de iniciao caracteriza-se pela formao de uma sinapse imunolgica, uma estrutura supra-
molecular dinmica e altamente organizada, que se forma quando as clulas T contactam com as clulas
apresentadoras de antignios (provavelmente, a formao das sinapses imunolgicas favorecida pela
entrada do TCR nas lipid rafts). A regio central da sinapse imunolgica rica em complexos TCR/CD3,
enquanto a regio externa rica em molculas de adeso (tais como a LFA-1). Apesar de a formao de
uma sinapse imunolgica no ser necessria para a iniciao da sinalizao pelo TCR, a activao
sustentada das clulas T mais eficaz na presena desta sinapse.

69

Via da fosfolipase C (PLC)
A PLC activada por
fosforilao, aps se ligar ao
complexo LAT-ItK.
Subsequentemente, a PLC
hidrolisa o fosfolipdeo
membranar bifosfato de
fosfoinositol (PIP
2
), originando
inositol 1,4,5-trifosfato (IP
3
) e
diacilglicerol (DAG).
Ora, o IP
3
induz uma rpida
passagem de clcio para o
citosol, na medida em que
promove a abertura de canais
de clcio do retculo
endoplasmtico e da
membrana celular. Por seu
turno, o clcio induz
fosforilao do NFAT, um
importante factor de
transcrio.
Subsequentemente, o NFAT
desloca-se do citoplasma para
o ncleo, onde promove a
transcrio de genes
necessrios para a expresso
de citocinas promotoras do
crescimento das clulas T (tais como a IL-2 e a IL-4).
Por seu turno, o DAG activa a PKC, que se desloca para as lipid rafts, onde inicia uma cascata de eventos
que culmina com a activao do factor de transcrio NF-B. De facto, a activao da PKC leva
formao de um complexo proteico (no qual participam a CARMA1, o BCL-10 e a MALT1), que promove
a activao de uma enzima multiproteica designada por IKK (cnase do inibidor do B). Por seu turno, a
IKK fosforila o IB (inibidor do B) essa fosforilao permite que o NF-B, que normalmente se
encontra ligado ao IB e retido no citosol, se liberte do IB e possa migrar para o ncleo. No ncleo, o
NF-B activa a transcrio de vrios genes, tais como da IL-2.
De referir que um nico peptdeo capaz de promover a libertao de clcio. Ao nvel das clulas T CD4
+

(e, provavelmente, das clulas T CD8
+
), a libertao mxima de clcio atingida, quando pelo menos 10
complexos TCR se encontram ligados.
Via da Ras/MAPK
A Ras uma pequena protena G, cuja activao pelo GTP inicia uma cascata de cnases proteicas que
culmina com a fosforilao da MAPK (tambm designada por ERK). A MAPK fosforilada activa a Elk, um
factor de transcrio necessrio para a expresso do Fos. Subsequentemente, o Fos tambm
fosforilado pela MAPK, passando a associar-se Jun assim, estabelece-se o complexo AP-1 (Fos/Jun),
que constitui um factor de transcrio essencial para a activao das clulas T. Para alm disso, o AP-1
tambm regula a transcrio da IL-2.
70

Diferenciao das clulas T
Quando abandonam o timo, as
clulas T CD4
+
e CD8
+
encontram-se
na fase G
0
do ciclo celular, ou seja,
encontram-se em repouso. Uma vez
que ainda no estabeleceram
contacto com nenhum antignio,
estas clulas designam-se por clulas
T nave e caracterizam-se
histologicamente pela presena de
cromatina condensada, de um
escasso citoplasma e reduzida
actividade transcripcional.
Estas clulas sofrem recirculao
constante ente o sangue e os
sistemas linfticos durante este
processo, ocorre passagem pelos
tecidos linfoides secundrios, tais
como os gnglios linfticos. Caso uma
clula naf no reconhea nenhum
antignio num gnglio linftico, esta
abandona-o pelos vasos linfticos
eferentes, acabando por drenar para
o canal torcico e voltar circulao.
Uma vez que apenas cerca de uma em cada 10
5
clulas T especfica para um dado antignio, este
processo de recirculao aumenta a probabilidade de uma clula T naf encontrar um antignio
apropriado.
Quando uma clula T naf reconhece um complexo MHC-antignio especfico, esta sofre uma activao,
originando uma resposta primria. De facto, cerca de 48 horas aps activao, a clula T naf aumenta
as suas dimenses, originando uma clula blstica, que sofre repetidas divises celulares.
Em termos moleculares, o primeiro e o segundo sinais activadores induzem a entrada da clula T na fase
G
1
do ciclo celular, bem como um aumento significativo dos nveis de IL-2. Esse fundamental para a
activao das clulas T, na medida em que, ao ligar-se ao seu receptor, a IL-2 induz proliferao e
diferenciao da clula T naf activada. De referir que, existem trs formas atravs das quais os sinais
activadores induzem um aumento dos nveis de IL-2:
1. Aumento da transcrio do gene que codifica para a IL-2.
2. Aumento da transcrio do gene que codifica para a cadeia do CD25 (receptor da IL-2 de
elevada afinidade).
3. Aumento do perodo de semi-vida do mRNA da IL-2.
Aps proliferarem, as clulas T diferenciam-se em clulas T efectoras ou clulas T de memria, sendo
que as clulas T efectoras incluem as clulas T
Helper
(T
H
) e T
Citotxicas
(T
c
). Para alm disso, existem vrias
subpopulaes de clulas T reguladoras. Essas clulas sero descritas no texto referente a
subpopulaes de clulas T.

71

Apoptose das clulas T
A apoptose o processo atravs do qual ocorre a deleco de timcitos potencialmente auto-reactivos,
durante o processo de seleco negativa. Para alm disso, a apoptose permite a remoo das clulas T
incapazes de reconhecer as molculas do MHC, durante o processo de seleco positiva.
A apoptose das clulas T pode ser despoletada na sequncia de vrios eventos, tais como:
1. Remoo de factores de crescimento
2. Tratamento com glicocorticides
3. Ligao de factores apoptticos ao TCR (sinalizao mediada pelo TCR).
Estes diferentes eventos activam vias de sinalizao distintas, mas que culminam todas com a activao
de caspases (proteases de cistinas). Praticamente todas as clulas do organismo produzem caspases, o
que sugere que todas as clulas so potencialmente capazes de induzir a sua prpria morte.
Em circunstncias normais, as clulas mantm as caspases na sua forma inactiva, protegendo-se assim
da morte celular. Ao receber um sinal pr-apopttico, certas caspases so activadas por clivagem
proteoltica, activando outras caspases que, por sua vez, levam activao de caspases efectoras. Ora,
esta cascata cataltica culmina na morte celular.
Ao nvel das clulas T, a activao das caspases ocorre por duas vias distintas uma predomina nas
clulas T perifricas, enquanto a outra predomina nas clulas T tmicas.
Via do Fas
Quando as clulas T perifricas so activadas, estas aumentam a expresso do Fas e do ligando do Fas
(FasL) - duas protenas da superfcie celular envolvidas na apoptose. O Fas comea por se ligar ao FasL, o
que promove o recrutamento do FADD (protena associada ao Fas com domnio apopttico). Por
conseguinte, o FADD liga-se ao Fas, o que resulta no recrutamento da pr-caspase 8. Por sua vez, a pr-
caspase 8 liga-se ao FADD essa associao resulta na clivagem proteoltica da pr-caspase 8 e
consequente gnese de caspase 8, uma caspase activa que inicia uma cascata proteoltica que leva
morte celular.
Ao nvel dos tecidos extra-tmicos, a maior parte dos processos de apoptose envolvendo as clulas T so
mediados pela via do Fas. A expresso repetida ou persistente das clulas T perifricas promove a co-
expresso simultnea do Fas e do ligando do Fas, induzindo a apoptose celular este processo designa-
se por morte celular induzida pela activao, constituindo um mecanismo homeosttico essencial para
regular o tamanho do pool de clulas T e para remover as clulas T reactivas contra os antignios do
self.
A activao da caspase 8 no apenas induzida pela interaco entre o Fas e o FasL. De facto, a
interaco entre o TNFR (receptor do TNF) e o TNF tambm resulta na activao da caspase 8 e, por
conseguinte, na morte celular. De referir que, o TNFR/TNF pertencem mesma famlia de
receptores/ligandos do Fas/FasL.
De referir que j foram encontrados indivduos com defeitos no Fas, os quais apresentam caractersticas
de doentes auto-imunes.

72

Via mitocondrial
Os timcitos que sofrem seleco
negativa no timo so
preferencialmente eliminados por
uma via de sinalizao pr-
apopttica originada no TCR. Esta
via, que no requer a activao da
pr-caspase 8, designa-se por via
mitocondrial da apoptose, devido
ao papel fundamental da
mitocndria.
Assim, um sinal negativo forte
induz uma via apopttica, que se
inicia com a passagem do
citocromo c (que normalmente se
encontra na membrana
mitocondrial interna) para o
citosol. A, o citocromo c liga-se a
uma protena designada por Apaf-
1 (factor 1 de activao das
proteases apoptticas), sofrendo
uma alterao conformacional e
uma oligomerizao.
Subsequentemente, a forma
oligomrica do Apaf-1 liga-se
pr-caspase 9, convertendo-a em
caspase 9 activa. Forma-se, assim,
um complexo citocromo c/Apaf-
1/caspase 9 (apoptossoma), que
responsvel pela clivagem
proteoltica da pr-caspase 3 e subsequente converso em caspase 3 activa. Por sua vez, a caspase 3
inicia uma cascata de reaces que resulta na morte da clula.
Para alm de libertarem citocromo c, as mitocndrias tambm libertam AIF (factor indutor da
apoptose), que desempenha um importante papel na induo da morte celular.
A morte celular induzida pelo Fas/FasL rpida, resultando na morte celular em 2-4 horas. Por oposio,
a seleco negativa induzida pelo TCR parece ser mais demorada, resultando na morte celular em 8-10
horas. De facto, esta ltima via mais demorada, uma vez que, antes de ocorrer activao das caspases,
geram-se vrios processos, incluindo destabilizao da membrana mitocondrial, libertao do citocromo
c e formao do apoptossoma.
Regulao da via mitocondrial
Uma caracterstica importante da via mitocondrial prende-se com o papel regulador desempenhado
pelos membros da famlia do Bcl-2. Esta famlia contm membros pr-apoptticos e anti-apoptticos,
os quais esto divididos em trs grupos:

73

1. Grupo I: Os membros do grupo I so anti-apoptticos e incluem o Bcl-2 e o Bcl-XL.
2. Grupo II: Os membros do grupo II so pr-apoptticos e incluem o Bax e o Bak.
3. Grupo III: Os membros do grupo III so pr-apoptticos e incluem o Bid e o Bim.
Os membros anti-apoptticos da famlia do Bcl-2 desempenham um papel importante na regulao da
apoptose das clulas T. Em termos moleculares, estes factores dimerizam com os membros pr-
apoptticos, bloqueando a sua actividade.
Apesar de a via do Fas e a via mitocondrial da apoptose terem sido abordadas em separado, existe
alguma interaco entre essas vias. De facto, a clivagem do Bid, que promove a via mitocondrial da
apoptose catalisada pela caspase 8 gerada na via do Fas. Deste modo, os sinais gerados pelo Fas
tambm activam a via mitocondrial.

74

Receptor de Clulas T
O receptor de clula T (TCR) encontra-se expresso nas clulas T, sendo responsvel pela ligao a
antignios ligados ao complexo MHC. O TCR difere do receptor de ligao aos antignios da clula B,
dado que:
1 O TCR encontra-se ligado membrana e no aparece na forma solvel.
2 A interaco da ligao mais fraca.
3 A maioria dos TCRs no especfica para o antignio isoladamente, mas sim para o
respectivo complexo MHC-antignio (restrio ao MHC do self)
4 Os TCR no tm elementos de reconhecimento comuns
5 Os TCRs so codificados por famlias de genes inteiramente separadas
Estrutura dos TCR
Os TCR so constitudos por duas cadeias distintas (ou seja, so
heterodmeros), sendo que estes receptores podem se encontrar
sob a forma de heterodmeros (constitudos por uma cadeia
e uma cadeia ) ou heterodmeros (constitudos por uma
cadeia e uma cadeia ). Cada heterodmero contm dois
domnios, nomeadamente um domnio varivel (V) e um
domnio constante (C).
As estruturas dos domnios dos heterodmeros dos TCR so
estritamente similares s das imunoglobulinas, de tal modo que
estes pertencem superfamlia das imunoglobulinas. Cada
cadeia de um TCR contm dois domnios, no interior dos quais
existem pontes dissulfureto. O domnio amino-terminal de cada
cadeia exibe variabilidade, enquanto a restante poro da cadeia
encontra-se conservada. Assim, os domnios do TCR domnio varivel e domnio constante - so
estruturalmente homlogos aos domnios V e C das imunoglobulinas, de tal modo que a molcula TCR
assemelha-se a um fragmento Fab.
Os domnios variveis do TCR apresentam trs regies hipervariveis, as quais parecem ser
equivalentes aos CDRs do BCR. Existe ainda uma rea adicional de hipervariabilidade (HV4), ao nvel da
cadeia , a qual no contacta normalmente com um antignio, de tal modo que no considerada um
CDR. J os domnios constantes no so alvo de variao.
Distalmente ao domnio constante, cada cadeia do TCR contm uma pequena zona de conexo, na qual
um resduo de cistena estabelece uma ponte de dissulfureto, que une as duas cadeias. Para alm disso,
cada cadeia contm uma regio transmembranar (que invulgar, na medida em que contm resduos
aminoacdicos carregados positivamente) esta regio interage com o complexo CD3. Por fim, cada
cadeia TCR contm uma curta cauda citoplasmtica (5 a 12 aminocidos), que inclui a extremidade
carboxilo.

75

Distino entre o TCR e o TCR
Como referido anteriormente, os TCR podem formar heterodmeros ou heterodmeros , os quais
apresentam diferentes caractersticas:
O TCR , tal como os anticorpos, caracteriza-se pelo seu elevado grau de especificidade,
motivo pelo qual encontra-se mais associado a funes do sistema imunitrio adaptativo. Este
o tipo de TCR com maior expresso nas clulas humanas.
O TCR parece reconhecer classes de antignios presentes em determinados grupos de
patognios, actuando preferencialmente num contexto imunidade inata. Para alm disso, este
tipo de TCR parece ser capaz de reconhecer os antignios na sua forma nativa.
Estes dois heterodmeros apresentam diferenas estruturais relevantes, nomeadamente no que
concerne ao ngulo da flexura desenhado entre o eixo longo das regies V e C do TCR (este ngulo
menor nos TCR ). Isto parece motivar diferentes funes entre os TCR, mas ainda se desconhece
quais.
De qualquer modo, os dados actuais
sugerem que, comparativamente aos
receptores T , os receptores T so
mais parecidos com pattern recognition
receptors (PRRs). De facto, os receptores
TCR so capazes de reconhecer
antignios comuns a determinadas classes
de microorganismos, de se ligar a molculas
de MHC no-clssicas, e de fazer o
reconhecimento de antignios que no
tenham sido previamente processados ou
apresentados por molculas de MHC.
Assim, as clulas T parecem
desempenhar um papel de resposta rpida.
A maioria destas celulas no expressa CD4
ou CD8, mas reconhece um antignio
fosfolipidco caracterstico de alguns
microorganismos (tais como o Mycobacterium tuberculosis). Assim, a percentagem destas clulas pode
aumentar rapidamente, aquando de infeces por M. tuberculosis, H. influenzae, parasitas da malria
ou leishamiose. Para alm disso, de acordo com dados recentes, as clulas :
So capazes de destruir clulas infectadas ou microorganismos, usando mecanismos
semelhantes s clulas T
C
;
Podem secretar um espectro de quimiocinas e citocinas, regulando o recrutamento de clulas
para o stio de invaso;
Parecem desempenhar um papel de clulas apresentadoras de antignios (isto ainda no est
comprovado).
Organizao e rearranjo dos genes do TCR
Os quatro loci do TCR esto organizados na linhagem germinativa, de modo bastante similar
organizao multignica dos genes das imunoglobulinas. De facto, tal como se verifica para as
76

imunoglobulinas, os genes dos TCR
funcionais so produzidos a partir dos
rearranjos dos segmentos V e J das
famlias das cadeias e , e de rearranjos
dos segmentos V, D e J nas cadeias e .
De acordo com dados recentes, o
rearranjo produtivo dos segmentos dos
genes da cadeia elimina os genes que
codificam para a cadeia . Deste modo,
ao nvel das clulas T, o receptor TCR
no pode ser co-expresso com o receptor .
A cadeia , tal como as cadeias L das imunoglobulinas, codificada por segmentos dos genes V, J e C.
Por seu turno, a cadeia , tal como as cadeias H, codificada por segmentos dos genes V, D, J e C. O
rearranjo dos segmentos destes genes resulta na unio dos genes VJ para a cadeia , e VDJ para a cadeia
. Ao contrario das imunoglobulinas (que contm mltiplos segmentos do gene C, os quais codificam
para istipos distintos com funes efectoras diferentes), o DNA da cadeia tem apenas um nico
segmento de gene C, enquanto a cadeia tem segmentos de genes J e C duplicados.
De referir que o heterodmero expresso apenas na forma ligada membrana, de tal modo que no
h processamento diferencial de RNA para produzir duas formas deste dmero. Cada regio constante
do TCR inclui um domnio constante, uma sequncia conectora, uma sequncia transmembranar e uma
cauda citoplasmtica.
Mecanismos gerais de rearranjo gnico
Cada segmento de gene V, D, e J no DNA do TCR da linhagem germinativa encontra-se flanqueado por
sequncias sinal de recombinao (RSSs) de heptmero e nonmero conservadas, as quais contm
sequncias espaadoras de 12 pares de bases (1 volta) ou 23 pb (2voltas).
O mecanismo de rearranjo dos genes do TCR similar ao das imunoglobulinas. De facto, todos os
rearranjos dos genes do TCR seguem a regra de unio de uma/duas voltas observada para os genes das
imunoglobulinas, de tal modo que a recombinao apenas pode ocorrer entre os dois diferentes tipos
de RSSs.
Tal como as clulas pr-B, as clulas pr-T expressam os genes activadores de recombinao (RAG1 e
RAG2). A enzima recombinase RAG1/2 reconhece os sinais de reconhecimento dos heptmeros e
nonmeros e catalisa a unio VJ e VDJ este processo ocorre durante o rearranjo do TCR e rege-se pelos
mesmos mecanismos de deleo e insero que ocorrem nos genes das imunoglobulinas. De facto, a
RAG1/2 comea por quebrar a fita de DNA entre as sequncias codificantes e de sinalizao,
procedendo subsequentemente exciso das ansas de DNA formadas no processo. Actualmente, pensa-
se que as enzimas de reparao de quebra do DNA esto tambm envolvidas nos rearranjos V-D-J, quer
nas clulas B, quer nas clulas T.
Todavia, existem diferenas entre os rearranjos dos genes nas clulas B e nas clulas T de facto, os
genes das imunoglobulinas no so rearranjados nas clulas T, enquanto os genes do TCR no so
rearranjados nas clulas B. Pensa-se que a reconfigurao da cromatina ocorra de modo distinto nas
clulas B e nas clulas T, o que regula a recombinase de tal modo, que s passa a ocorrer rearranjo do
DNA do receptor correto. Esse rearranjo cria uma sequncia de DNA nica para aquela clula e sua
descendncia. O elevado nmero de combinaes possveis de genes rearranjados leva a que essa
sequncia constitua um marcador especfico para aquele clone celular.
77

Excluso allica
Os genes esto localizados dentro do complexo gnico , sendo eliminados por rearranjos da cadeia .
Por outro lado, a organizao dos segmentos dos genes J e C da cadeia em dois grupos duplicados
permite que, aquando da ocorrncia de um rearranjo no-produtivo, o timcito possa tentar um
segundo rearranjo gnico, o que aumenta a possibilidade de gnese de um rearranjo produtivo.
Por norma, quando ocorre um arranjo produtivo para cada um dos alelos ou , o outro alelo inibido.
Contudo, existem excepes a este processo de excluso allica, as quais ocorrem mais
frequentemente na cadeia - j foram encontrados clones T funcionais com rearranjo produtivo dos
dois alelos da cadeia .

Rearranjo dos genes do TCR
As regies variveis dos TCR so codificadas por sequncias VDJ e VJ rearranjadas. Nos genes do TCR, a
unio combinatria dos segmentos dos genes V
e V
parece gerar CDR1 e CDR2, enquanto a

flexibilidade juncional e a adio de nucleotdeos na regio N geram CDR3.
Por oposio, a regio constante de cada cadeia codificada por um segmento de gene C que tem
mltiplos exes: o primeiro codifica a maioria do domnio C, enquanto o segundo, curto, codifica a
regio conectora. Por fim, os exes seguintes codificam para a regio transmembranar e para a cauda
citoplasmtica.
Embora o DNA da linhagem germinativa do TCR contenha muito menos segmentos de gene V que o
DNA da linhagem das imunoglobulinas, vrios mecanismos contribuem para aumentar a diversidade de
TCRs:
Unio combinatria: A unio combinatria dos segmentos dos genes da regio varivel gera
um grande nmero de combinaes gnicas aleatrias para todas as cadeias de TCR. Embora
existam menos segmentos de genes V
e V
do TCR do que segmentos V

H
e V
L
das
78

imunoglobulinas, essa diferena compensada pelo maior nmero de segmentos J no DNA da
linhagem germinativa do TCR. Se for considerado que a especificidade de um dado receptor
depende das regies variveis de ambas as cadeias, a associao aleatria de 3 x 10
3

combinaes de V
com 4,6 x 10
2
combinaes de V
pode gerar 1,4 x 10

6
combinaes
possveis para o TCR .
Juno alternativa: A localizao das RSSs de uma volta e de duas voltas das cadeias e do
TCR difere daquela no DNA das cadeias pesadas das imunoglobulinas. A juno alternativa de
segmentos de genes D pode ocorrer se a regra de juno uma volta/duas voltas for observada.
possvel, portanto, que um segmento de gene V
se ligue directamente a um segmento de

gene J
ou D
, gerando uma unidade VJ
ou VDJ
. A juno alternativa dos segmentos dos genes

da cadeia gera unidades similares. Para alm disso, um D
pode se ligar a outro, produzindo

VDDDJ
. Este mecanismo, que no se pode dar na cadeia pesada das imunoglobulinas, confere
diversidade adicional aos TCRs.
Flexibilidade de juno: A juno dos segmentos de genes durante o rearranjo por flexibilidade
de juno pode gerar muitos rearranjos no produtivos. Todavia, este processo tambm
contribui para aumentar a diversidade gnica, ao codificar para vrios aminocidos alternativos
em cada juno.
Adio de nucleotdeos: Tal como nos genes das imunoglobulinas, durante o rearranjo gnico,
pode haver adio de nucleotdeos nas zonas de juno. A variao na localizao da clivagem
operada pela endonuclease leva a adio de mais nucleotdeos, os quais so palindrmicos.
Essa adio de nucleotdeos da regio P pode ocorrer nos genes que codificam todas as cadeias
dos TCRs e imunoglobulinas. Para alm disso, ocorre adio de nucleotdeos da regio N em
todas as cadeias de TCR (note-se, que nas imunoglobulinas esta adio apenas ocorre nas
cadeias pesadas, o que confere variabilidade adicional ao TCR). No entanto, algumas destas
combinaes levam a rearranjos no-produtivos, por meio da insero de codes STOP, ou pela
substituio de aminocidos que tornam o produto no-funcional. Embora cada regio de
juno de um gene do TCR codifique apenas 10 a 20 aminocidos, os efeitos combinados da
flexibilidade e da adio de nucleotdeos podem gerar uma enorme diversidade, originando at
10
13
possveis sequncias de aminocidos.
A diversidade do TCR leva a que estes receptores (no seu todo) sejam capazes de reconhecer um
nmero muito grande de diferentes antignios processados. O DNA do TCR contm menos segmentos
de genes V, por comparao com o DNA das imunoglobulinas. Colocou-se a hiptese de que esse
pequeno nmero de genes V tinha sido selecionado para que fossem codificadas apenas regies CDR1 e
2 com afinidade para as regies do MHC. Porm, isso revela-se pouco provvel, na medida em que os
dados mais recentes mostram que existe contacto entre o CDR1 e o CDR3. Ao contrrio da diversidade
limitada do CDR1 e 2, o CDR3 exibe diversidade ainda maior que a observada nas imunoglobulinas. Esta
diversidade gerada pela diversidade de junes na ligao de segmentos V, D e J, bem como pela
ligao de mltiplos segmentos de genes D e pela introduo de N e P nucleotdeos nas junes VDJ e
VJ.
Contrariamente, ao que se verifica nos genes das imunoglobulinas, os genes dos TCR no parecem
sofrer mutaes somticas (excepto, talvez, no centro germinativo). Isto , os genes funcionais do TCR
gerados por maturao tmica possuem as mesmas sequncias dos genes encontrados nas clulas T
perifricas maduras. Isto assegura que a especificidade da clula T no muda aps seleco tmica,
reduzindo assim a possibilidade de se gerar uma clula T reactiva.
79

Complexo TCR-CD3
Ao nvel da membrana citoplasmtica, o TCR encontra-se associado ao CD3, um complexo de transduo
de sinal, cuja funo anloga do complexo Ig/Ig do BCR. Tal como o Ig/Ig, o CD3 participa na
transduo do sinal gerado aps interao da clula T com o antignio, no a influenciando. De facto,
tanto o TCR como o CD3 so essenciais para o funcionamento destes mecanismos.
O CD3 constitudo por cinco cadeias polipeptdicas invariveis, que se juntam para formar trs
dmeros: o heterodmero , o heterodmero , e o homodmero ou heterodmero . As cadeias e
so codificadas pelo mesmo gene, mas, devido a diferenas no processamento do transcrito primrio,
diferem nas extremidades carboxilo. De referir que a maior parte dos CD3 expressam o homodmero ,
80

em vez do heterodmero . Deste, modo o complexo do TCR pode
ser entendido como sendo constitudo por quatro dmeros,
nomeadamente o dmero do TCR ( ou ), que determina a
especificidade de ligao, e os trs dmeros do CD3 (, e /),
que so necessrios para a transduo.
As cadeias do CD3 tambm pertencem superfamlia das
imunoglobulinas - cada uma contm um domnio extracelular
semelhante a imunoglobulina, seguido de uma regio
transmembranar e de um domnio citoplasmtico de 40 aa. A
cadeia caracteristicamente diferente, na medida em que
apresenta uma regio externa muito curta (9 aa), uma regio
transmembranar e uma cauda maior (113 aa).
Em termos moleculares, as regies transmembranares de todas as
cadeias polipeptdicas do CD3 contm um resduo de um
aminocido negativamente carregado (cido asprtico ou cido
glutmico), o qual interage com um ou dois aminocidos
carregados positivamente na regio transmembranar de cada
cadeia do TCR. Por seu turno, as caudas citoplasmticas possuem um immuno receptor tyrosine-based
activation motif (ITAM), tambm presente no Ig/Ig e nos receptores Fc da IgE e IgG. Estes ITAM
interagem com cnases de tirosina e desempenham um papel importante na transduo. Cada cadeia ,
e contm um nico ITAM, enquanto as cadeias e tm 3 cpias cada.
Molculas de membrana acessrias da clula T
Embora o reconhecimento dos complexos antignio-MHC seja
mediado pelo complexo TCR-CD3, vrias outras molculas
desempenham importantes papis neste processo, sendo que
algumas reforam a interaco entre a clula T e a clula
apresentadora de antignios. Entre estas molculas, destaque
para o CD4 e para o CD8:
O CD4 uma glicoprotena monomrica de membrana (55 kDa)
com quatro domnios extracelulares semelhantes a
imunoglobulinas (D1D4), uma regio transmembranar
hidrofbica, e uma longa cauda citoplasmtica contendo trs
resduos de serina que podem sofrer fosforilao. Em termos
moleculares, o CD4 liga-se a uma bolsa hidrofbica formada por
resduos dos domnios
2
e
2
do MHC. De referir que as clulas T
CD4
+
reconhecem os antignios ligados a MHC classe II,
designando-se por clulas T auxiliares (T
H
).
O CD8 assume, em geral, a forma de um homodmero ou de um heterodmero ligado por pontes
dissulfureto. As cadeias e so pequenas glicoprotenas (30 a 38 kDa), sendo que cada uma contm:
Um nico dominio extracelular semelhante a imunogolublinas
Uma regio de tronco
Uma regio transmembranar
Uma cauda citoplasmatica (25 a 27 aa passveis de sofrer fosforilao).
81

Assim, estas cadeias ligam-se ao domnios
2
,
3
(cuja orientao se modifica ligeiramente aquando da
ligao) e
2
, do MHC I. Deste modo, as clulas T CD8
+
reconhecem os complexos antignio-MHC classe
I, sendo designadas por clulas T citotxicas (T
C
).
O CD4 e o CD8 so ambos co-receptores, sendo que os seus dominios extracelulares ligam-se a regies
conservadas das molculas de MHC nas clulas apresentadoras de antignios. Estas molculas so
fundamentais para aumentar a afinidade entre os receptores T e os complexos MHC-peptdeo, na
medida em que esta deveras reduzida quando comparada afinidade registada na interao
antignio-anticorpo.
Assim, aquando da activao das clulas T, passa a ocorrer um aumento da concentrao do CD4 e CD8,
o que permite que se estabelea um contacto mais prximo entre as clulas T e as clulas
apresentadoras de antignios. Ora, isto permite que permite que citocinas e susbtncias citotxicas
possam ser transferidas de forma mais eficiente. De referir que, logo aps a activao, o grau de adeso
diminui, e as clulas afastam-se.
De acordo com dados recentes, a afinidade entre os CD4 e os complexos peptdeo-MHC II
relativamente fraca. Assim, tm sido propostas vrias teorias com o objectivo de explicar o
estabelecimento de proximidade entre estas duas molculas, em detrimento da sua baixa afinidade. De
acordo com uma dessas hipteses, a interao entre o TCR e a molcula CD4 estabilizada por uma
dupla interaco entre a molecula de transduao de sinal p56, o CD4, e o homodmero . O CD4 pode,
ento, estar envolvido no recrutamento de moleculas de transduo.

Estrutura tri-dimensional dos complexos TCR-peptdeo-MHC
A interaco entre o TCR e o complexo MHC-peptdeo fundamental tanto para a resposta humoral,
como para a resposta mediada por clulas. Assim, o complexo TCR -MHC-peptideo constitudo por
uma nica molcula de TCR ligada a uma nica molcula de MHC e ao seu peptdeo, sendo esse
contacto assegurado pelo domnios variveis do TCR. Neste complexo, ansas CDR3 das cadeias e
contactam com o centro do peptdeo, enquanto a ansa CDR1 da cadeia do TCR contacta com a
extremidade N-terminal do peptdeo. Por seu turno, a ansa CDR1 da cadeia contacta com a
82

extremidade C-terminal do peptdeo. As ansas do CDR2 ficam em contacto com a molcula do MHC;
sendo que o CDR2 fica sobre a hlice do domnio 2 e o CDR2 sobre a hlice do domnio
1
.
Os TCRs interagem de forma diferente com molculas de classe I e II: h diferenas no ngulo em que a
molcula de TCR se posiciona nos complexos MHC e h mais residuos do TCR em contacto no MHC
classe II.
Aloreactividade
A rejeio de transplantes resulta da interaco directa entre as clulas T e as molculas do MHC, que
actuam como antignios de histocompatibilidade. Devido ao exuberante polimorfismo dos MHC, a
maior parte dos indivduos da mesma espcie expressam conjuntos nicos de molculas do MHC,
sendo, por isso, considerados alognicos (este termo usado para descrever indivduos da mesma
espcie, geneticamente distintos). Deste modo, as clulas T so capazes de responder a alotransplantes
(transplantes provenientes de membros da mesma espcie), sendo as molculas do MHC consideradas
aloantignios. Em termos gerais, as clulas T CD4
+
so consideradas aloreactivas para os aloantignios
do MHC II, enquanto as clulas T CD8
+
respondem a aloantignios do MHC I.
A aloreactividade das clulas T um fenmeno enigmtico, na medida em que:
1. A capacidade de as clulas T responderem aos aloantignios do MHC isolados parece contrariar
a evidncia tradicional, segundo a qual as clulas T apenas respondem a um antignio estranho
ligado a molculas do MHC do self. De facto, ao reagir contra os transplantes alognicos, as
clulas T reconhecem directamente uma molcula de MHC do non-self.
2. A frequncia das clulas T aloreactivas deveras elevada pensa-se que entre 1-5% de todas
as clulas T sejam reactivas para um dado aloantignio. Ora, essa frequncia superior
normal frequncia de clulas T reactivas contra qualquer peptdeo antignico estranho
especfico.
Esta elevada frequncia de clulas T aloreactivas parece contradizer o princpio bsico da seleco
clonal. Uma explicao possvel para a elevada frequncia das clulas T aloreactivas que um dado TCR
especfico para um complexo self-MHC-peptdeo pode estabelecer uma reaco cruzada com certas
molculas alognicas de MHC. Isto , se o complexo formado por uma molcula de MHC alognica em
conjunto com um peptdeo alognico se assemelhar estruturalmente a um peptdeo antignico
processado ligado a uma molcula do self-MHC, esse primeiro complexo tambm pode ser reconhecido
por um TCR que normalmente reconhea o segundo complexo. Ora, cada clula alognica expressa
cerca de 10
5
molculas MHC I, de tal modo que mesmo as clulas T com TCR reactivos de baixa
afinidade podem reconhecer os MHC alognicos.
A ausncia de seleco negativa para os peptdeos contidos nas molculas do MHC non-self pode
contribuir para a elevada frequncia de clulas T aloreactivas. Esta condio, acoplada com as
diferenas na estrutura das pores expostas da molcula do MHC alognicas, pode contribuir para o
fenmeno de aloreactividade.

83

Subpopulaes de clulas T
Clulas T efectoras
As clulas T efectoras no resultam apenas da diferenciao das clulas nave ao sofrerem activao
antignica, as clulas T de memria tambm originam clulas efectoras.
Relativamente s clulas T efectoras:
Desempenham funes especializadas as clulas T
H
CD4
+
activas encarregam-se da secreo
de citocinas e da activao das clulas B, enquanto as clulas T citotxicas CD8
+
actuam num
sentido de destruir as suas clulas-alvo.
So clulas com um perodo de semi-vida curto, na ordem dos dias ou semanas.
Por comparao com as clulas nave, expressam diferentes molculas membranares, o que
contribui para a existncia de diferentes padres de recirculao.
Diferenas entre as clulas T efectoras e as clulas nave
A activao das clulas T nave requer a ocorrncia de sinais co-estimulatrios (resultantes da
interaco CD28-B7). As clulas T efectoras e as clulas T de memria so capazes de responder
aos sinais mediados pelo TCR sem necessitarem, praticamente, de sofrer co-estimulao.
As clulas T nave expressam a isoforma CD45RA do CD45, enquanto as clulas T efectoras
expressam a forma CD45RO. Ambas as formas medeiam a transduo dos sinais recebidos pelo
TCR, embora a isoforma CD45RO se associe muito melhor com o complexo TCR e com os seus
co-receptores. Assim, as clulas T efectoras e as clulas T de memria (onde predomina a
forma CD45RO) so mais sensveis activao (mediada pelo TCR) induzida pelos complexos
MHC-peptdeo.
As clulas T expressam as molculas de adeso celular CD2 (LFA-2) e LFA-1 que se ligam,
respectivamente, LFA-3 e s ICAMs das clulas-alvo. Os nveis de CD2 e LFA-1 so muito
superiores nas clulas T efectoras, por comparao com as clulas T nave, de tal modo que as
clulas T efectoras ligam-se mais eficazmente s clulas apresentadoras de antignios e s
clulas-alvo (mesmo que estas ltimas expressem baixos nveis de ICAMs ou LFA-3).
As clulas T efectoras expressam certas molculas efectoras (membranares e solveis) que no
so expressas pelas clulas T nave.
o As molculas membranares pertencem famlia do TNF e incluem:
FasL (nos linfcitos T citotxicos)
TNF- (nas clulas T
H
1)
CD40L (nas clulas T
H
2)
o As molculas solveis incluem:
Perforinas (nos linfcitos T citotxicos)
Granzimas (nos linfcitos T citotxicos)
IFN- e TNF- (nas clulas T
H
1)
Vrias citocinas (pelas clulas T
H
)
o No que concerne funo destas molculas, importante saber que:
O ligando do Fas, as perforinas e as granzimas so expressos pelos linfcitos T
citotxicos (CTL) e induzem destruio celular.
O TNF- membranar, o IFN- e a GM-CSF promovem a activao macrofgica,
sendo produzidos pelas clulas T
H
1.
O CD40L, a IL-4, a IL-5 e a IL-6 participam na activao das clulas B, sendo
produzidos pelas clulas T
H
2.
84

Clulas T
H
As clulas T efectoras CD4
+
formam trs subpopulaes que diferem nos padres de citocinas que
secretam:
Clulas T CD4
+
T
H
1: Estas clulas secretam IL-2, IFN- e TNF-, sendo responsveis pelas
funes clssicas de imunidade mediada por clulas, tais como a hipersensibilidade do tipo
retardado e a activao de linfcitos T citotxicos.
Clulas T CD4
+
T
H
2: Estas clulas secretam IL-4, IL-5, IL-6 e IL-10, actuando maioritariamente
como adjuvantes da activao das clulas B.
Clulas T CD4
+
T
17
: Estas clulas secretam IL-17 e IL-22, desempenhando um importante papel
no recrutamento de neutrfilos e outros leuccitos.

Clulas T
H
1

A diferenciao de uma clula T
H
em T
H
1 requer a presena de IL-12 e IFN-, sendo estas duas citocinas
produzidas pelas clulas apresentadoras de antignios. De facto, ao contactarem com essas citocinas, as
clulas T
H
nave activam a transcrio dos factores Stat1, Stat4 e T-bet, que induzem a sua diferenciao
em clulas T
H
1.
Por seu turno, as clulas T
H
1 produzem algumas citocinas prprias, nomeadamente:
IL-2: Participa na activao das CTL e promove a diferenciao de outras clulas T
H
em T
H
1.
IFN-: Participa na activao de macrfagos e induz proliferao das clulas B.
TNF-: Participa na activao de macrfagos e neutrfilos, e induz crescimento das clulas B e
produo de anticorpos.
Clulas T
H
2

A diferenciao de uma clula T
H
em T
H
2 requer a presena de IL-4, a qual secretada clulas
apresentadoras de antignios. Assim, aps contactar com a IL-4, as clulas T
H
nave activam a
transcrio dos factores Stat6 e GATA-3, que induzem a sua diferenciao em clulas T
H
2.
85

H
2 produzem algumas citocinas prprias, nomeadamente:
IL-4: Induz quimiotaxia de linfcitos, mastcitos e eosinfilos, promovendo ainda o
desenvolvimento de mastcitos e eosinfilos. Para alm disso, a IL-4 induz proliferao das
clulas B e produo de IgE, IgG1 e IgG4. Por fim, esta citocina revela-se essencial para
amplificar a resposta T
H
2 e inibir o desenvolvimento de uma resposta T
H
2.
IL-5: Estimula o crescimento e desenvolvimento dos eosinfilos, algo que se revela essencial
para o desenvolvimento de uma reaco anti-parasitria.
IL-9: Promove o crescimento e produo de imunoglobulinas por parte dos linfcitos B.
IL-10: Inibe o desenvolvimento de uma resposta T
H
1 e promove o crescimento e produo de
imunoglobulinas por parte dos linfcitos B.
IL-13: Desempenha funes similares s descritas para a IL-4.
Clulas T
H
17

A diferenciao e sobrevivncia de
uma clula T
H
em T
H
1 requer a
presena de IL-6, TGF-, IL-21 e IL-
23. Por oposio, o IFN- e a IL-4
inibem a diferenciao das clulas
T
H
17. Assim, ao contactarem com
a IL-6, TGF- e IL-21, as clulas T
H

nave activam a transcrio dos
factores Stat3, ROR e ROR t,
que induzem a sua diferenciao
em clulas T
H
17. Note-se ainda
que a IL-23 essencial para a
sobrevivncia destas clulas.
H
17
produzem algumas citocinas
prprias, nomeadamente IL-17 e
IL-22. Estas citocinas participam no
recrutamento de neutrfilos e
outros leuccitos, auxiliando na
resposta contra infeces
bacterianas e fngicas
extracelulares. Todavia, a aco
exacerbada destas citocinas est
tambm associada ao
desenvolvimento de doenas auto-
imunes, bem como formao de
cancro.
Linfcitos T citotxicos
Activao dos linfcitos T citotxicos
As clulas T
C
nave so incapazes de destruir as clulas-alvo, sendo, por isso, designadas por precursoras
das CTL (CTL-P). Assim, as CTL-P devero ser activadas, para que se diferenciem em clulas CTL
funcionais com actividade citotxica. Contudo, essa activao requer a ocorrncia de trs sinais (note-se
86

que os requerimentos para activao das CTL so mais elevados, por comparao com os de outras
clulas T efectoras):
1. Um sinal especfico resultante da interaco entre o TCR e um dado complexo MHC I-peptdeo
antignico expresso por uma clula apresentadora de antignios autorizada.
2. Um sinal co-estimulatrio resultante da interaco entre o CD28 e o B7, que se estabelece
entre a CTL-P e a clula apresentadora de antignios autorizada.
3. Um sinal induzido pela interaco da IL-2 com o seu receptor (expresso nas clulas CTL-P).

Assim, para ser activada, uma CTL-P dever
contactar com uma clula apresentadora de
antignios autorizada. Por sua vez, uma clula
apresentadora de antignios torna-se autorizada
aps contactar com uma clula T
H
1 ou aps ocorrer
activao dos seus Toll-like receptors (por contacto
com um produto microbiano).

Note-se que, a autorizao por interaco entre a
clula apresentadora de antignios e a clula T
H
1
requer a ocorrncia de duas ligaes:

1. Ligao entre o TCR da clula T
H
1

e o
complexo MHC-peptdeo da clula
apresentadora de antignios.
2. Interaco entre o CD40 expresso pelas
clulas apresentadoras de antignios e o
CD40L expresso pelas clulas T
H
1.
Assim, o processo de autorizao assegura que as
CTL-P apenas so activadas, caso tambm tenha
ocorrido activao de clulas T
H
1 contra o mesmo
antignio isto constitui um mecanismo de
segurana contra possveis reaces inapropriadas
mediadas pelas CTL.
Por sua vez, as clulas T
H
1 secretam IL-2, que
promove a converso das CTL-P

em CTL. De facto, as
CTL-P inactivas no expressam IL-2 nem receptores
da IL-2 e, por isso, no proliferam. Apenas a
activao induz a expresso de receptor da IL-2 (e,
em menor extenso, IL-2) por parte das CTL-P, o
que se revela crucial para a diferenciao em CTL. De referir que as clulas CTL-P de memria
apresentam menores requisitos de activao que as clulas nave e, por conseguinte, requerem
menores nveis de IL-2 para serem activadas.
Aps remoo do antignio, os nveis de IL-2 diminuem, o que induz apoptose das clulas T
H
1 e CTL. Isto
constitui um mecanismo de supresso rpida da resposta imune, diminuindo a probabilidade de gnese
de danos tecidulares no-especficos resultantes da resposta inflamatria.

87

Mecanismos de destruio celular mediada pelas CTL
Na maior parte das CTL, o processo de destruio celular ocorre de acordo com as seguintes etapas:
1. O complexo membranar TCR-CD3 de uma CTL reconhece antignios em associao com
molculas MHC I de uma dada clula-alvo.
2. O receptor das integrinas LFA-1, expresso na membrana das CTL, liga-se s ICAMs
membranares da clula-alvo, o que resulta na formao de um conjugado.
Note-se que a activao das CTL mediada por antignios converte o LFA-1 de um estado de
baixa afinidade para um estado de alta afinidade isto permite que as CTL adiram e formem
conjugados apenas com as clulas-alvo apropriadas, ou seja, com as clulas que apresentam os
peptdeos antignicos apropriados conjugados com as respectivas molculas do MHC I. O LFA-1
mantm-se num estado de elevada afinidade por pouco tempo aps ocorrer activao mediada
pelos antignios, voltando depois para o estado de baixa afinidade - isto facilita a subsequente
dissociao da CTL da clula-alvo.
3. AS CTL sofrem uma reorganizao citosqueltica das CTL, que passa pela migrao dos seus
grnulos para a proximidade do local de conjugao. Esses grnulos, que no existem nas CTL-
P, contm monmeros de perforina e vrias proteases de serina designadas por granzimas
(fragmentinas).
4. Ocorre exocitose do contedo dos grnulos para o espao entre as duas clulas.
5. Os monmeros de perforina contactam com a membrana da clula-alvo e sofrem uma
alterao conformacional, passando a exibir um domnio anfiptico que se insere na membrana
da clula alvo.
6. Os monmeros de perforina polimerizam, formando poros cilndricos, os quais apresentam
homologia estrutural e funcional com o C9 do sistema de complemento.
88

7. As perfuraes em epgrafe
permitem a entrada de
granzima para o interior das
clulas-alvo.
Alternativamente, a
granzima B pode entrar por
endocitose, ligando-se ao
receptor da manose 6-P e
libertando-se das vesculas
endocticas com ajuda das
perforinas.
8. As granzimas iniciam um
conjunto de reaces que resultam na fragmentao do DNA da clula-alvo, por activao da
via apopttica (note-se que a granzima uma protease, de tal modo que no degrada DNA -
apenas activa vias apoptticas). Este processo assegura ainda a destruio do DNA viral, o que
previne a ocorrncia de replicao viral continuada no perodo que precede a destruio
celular.
Existem CTL que no expressam perforina nem granzimas. Nesses casos, a citotoxicidade mediada pelo
FasL (CD95L), que se liga ao Fas (CD95) expresso nas clulas-alvo, induzindo a sua apoptose. De
qualquer modo, a activao de qualquer uma das vias requer a activao da via das caspases.

Subpopulaes de CTL
As CTL tambm produzem algumas citocinas, de tal modo que, atravs do padro de citocinas que
produzem, possvel diferenciar estas clulas em duas subpopulaes:
CTL1: Expressam IFN- e IL-12, sendo que a sua diferenciao estimulada por estas mesmas
citocinas.
CTL2: Expressam IL-4, sendo que a sua diferenciao estimulada por esta citocina.

89

Clulas T de memria
As clulas T de memria derivam das clulas T nave que sofreram activao antignica, bem como das
clulas efectoras que sofreram activao antignica e diferenciao.
Relativamente s clulas T de memria:
Apresentam geralmente um perodo de semi-vida maior, podendo se manter por longos
perodos de tempo, aps o declnio das clulas T efectoras.
Expressam marcadores de superfcie celular similares aos das clulas T efectoras. De facto,
ainda no foram identificados marcadores de superfcie especficos apenas para as clulas T de
memria.
Tal como as clulas T nave, a maior parte das clulas T de memria encontra-se na fase G
0
do
ciclo celular (em repouso). Assim, estas clulas entram em ciclo e ficam activas, quando
contactam com um antignio.
So mais facilmente activadas que as clulas T nave. De facto, as clulas T
H
nave so activadas
quase exclusivamente pelas clulas dendrticas, enquanto as clulas T
H
de memria podem ser
activadas por macrfagos, clulas dendrticas e clulas B. Pensa-se que a expresso de elevados
nveis de vrias molculas de adeso por parte das clulas T
H
de memria permite que estas
clulas sofram adeso a um vasto espectro de clulas apresentadoras de antignios.
Geram respostas secundrias. Isto , originam clulas efectoras que respondem com maior
reactividade aos antignios, por comparao com as clulas efectoras originadas a partir das
clulas T nave.
Os seus padres de circulao diferem dos apresentados pelas clulas T efectoras ou nave.
Clulas T reguladoras
As clulas T reguladoras (clulas T
reg
) constituem uma subpopulao de clulas T, sendo responsveis
pela supresso da resposta imunitria. Para serem activadas, as clulas T
reg
devero contactar com um
antignio especfico, ou seja, a supresso mediada pelas clulas T
reg
especfica para cada antignio,
uma vez que depende da activao do seu TCR.
As clulas T
reg
podem ser divididas em clulas T
reg
naturais (clulas CD4
+
CD25
+
) e clulas T perifricas
(Tr1/T
H
3). Embora estas clulas manifestem vrias diferenas no que concerne ao local onde so
geradas e aos marcadores expressados, todas elas geram uma resposta supressora mediada pela IL-10 e
TGF- (sendo que as clulas Tr1 secretam preferencialmente IL-10, enquanto as clulas T
H
3 secretam
preferencialmente TGF-). Adicionalmente, as clulas T
H
3 produzem IL-4.
Clulas T
reg
naturais Clulas Tr1/T
H
3
CD4
+
, CD25
+
, CTLA-4
+
e baixa expresso de
CD45R e receptor da IL-7
CD4
+
, expresso varivel de CD25
+
, elevada expresso
de CD45RO e baixa expresso de CD45RB
Expresso de Foxp3 As clulas T
r
1 apresentam expresso varivel de Foxp3,
enquanto as clulas T
H
3 no expressam este factor
Gnese no timo, a partir de clulas
percursoras com afinidade intermdia para
antignios do self
Origem perifrica
Aco dependente de contacto celular Aco independente de contacto celular
Requerem IL-2 para supresso No requerem IL-2 para supresso
Anrgicas in vitro

90

A descoberta de clulas T
reg
, responsveis pela supresso especfica das respostas imunes, apresenta
implicaes clnicas:
1. A induo de depleo ou inibio das clulas T
reg
, antes de um processo de imunizao,
poder aumentar as respostas imunitrias s vacinas convencionais.
2. A eliminao das clulas T que suprimem respostas aos antignios tumorais pode facilitar o
desenvolvimento de imunidade anti-tumoral.
3. O aumento da actividade supressora das clulas T
reg
pode ser til no tratamento de doenas
auto-imunes ou alrgicas. De facto, dfices no factor de transcrio Foxp3, essencial para a
diferenciao das clulas T
reg
naturais, resultam no desenvolvimento da sndrome auto-imune
IPEX.
4. A capacidade de aumentar a actividade das clulas T
reg
poder-se- revelar til para prevenir a
rejeio de tecidos e rgos transplantados.

91

Clulas Natural Killer e NKT
Clulas Natural Killer
As clulas Natural Killer (NK) constituem 5-10% da populao linfocitria total, participando na
imunidade inata contra tumores, vrus e outros agentes patognicos intracelulares. Para alm disso, as
clulas NK participam na imunidade adaptativa, na medida em que produzem vrias citocinas
responsveis pela regulao imunolgica. A ttulo de exemplo, estas clulas produzem IFN-, que activa
as aces fagoctica e microbicida dos macrfagos. Para alm disso, o IFN- produzido pelas clulas NK
inibe a gnese de uma resposta T
H
2, mas estimula o desenvolvimento de uma resposta T
H
1, por induo
da sntese de IL-12 por parte de macrfagos e clulas dendrticas.

A actividade destas clulas promovida pelo IFN-, IFN- e IL-12. Ora, no decurso de uma infeco
vrica, ocorre um aumento dos nveis dessas citocinas, o que resulta num aumento da actividade das
clulas NK. Assim, as clulas NK esto envolvidas na primeira linha de defesa contra infeces vricas,
controlando a replicao vrica durante o tempo necessrio para activao, proliferao e diferenciao
das clulas CTL-P em clulas CTL funcionais (so, por isso, as clulas mais importantes nos primeiros sete
dias aps uma infeco vrica).
No que concerne sua ontogenia, as clulas NK tm origem na medula ssea e partilham de um
progenitor comum com as clulas T. Contudo, contrariamente s clulas T, as clulas NK no se
desenvolvem exclusivamente no timo nem sofrem rearranjo dos seus genes dos receptores.
Em termos fenotpicos, as clulas NK expressam alguns marcadores membranares presentes nos
moncitos e granulcitos, bem como marcadores tpicos das clulas T. Contudo, diferentes clulas NK
expressam diferentes conjuntos de molculas membranares, no se sabendo se isto resulta do facto de
serem subpopulaes distintas ou de serem clulas em diferentes estadios de activao ou maturao.
De qualquer modo, sabe-se que, em termos gerais, as clulas NK expressam CD2, CD16 (FCRIII
receptor para a regio Fc da IgG) e a subunidade do receptor da IL-2.
No que diz respeito sua funo, as clulas NK utilizam os mesmos processos das clulas T para destruir
as clulas tumorais e as clulas infectadas por vrus. De facto, as clulas NK expressam FasL sua
superfcie, induzindo a morte de clulas que expressam o receptor Fas. Por outro lado, o citoplasma das
clulas NK contm nmeros grnulos contendo perforina e granzimas note-se, contudo, que as clulas
NK so constitutivamente citotxicas, expressando esses grnulos constitutivamente.

92

Contudo, apesar das suas semelhanas, as clulas NK diferem das CTL em vrios aspectos:
As clulas NK no expressam TCR nem CD3.
O reconhecimento das clulas-alvo pelas clulas NK no se restringe ao MHC.
A resposta das clulas NK no gera memria imunolgica (a actividade das clulas NK no
aumenta aps um segundo contacto com o mesmo agressor).
Modelo dos sinais opostos
Actualmente, pensa-se que a aco das clulas NK passvel de ser explicada pelo modelo dos sinais
opostos, segundo o qual existem vrios receptores diferentes expressos superfcie das clulas NK
alguns deles transmitem sinais estimulatrios, enquanto outros transmitem sinais inibitrios, de tal
modo que o balano da actividade destes receptores determina a actividade das clulas NK.
Os receptores das clulas NK podem ser classificados em receptores tipo lectina (os quais apresentam
maior afinidade para peptdeos) e receptores do tipo imunoglobulina, os quais incluem os receptores
KIR e os receptores ILT/LIR (estas duas classes de receptores ligam-se ao MHC I).
Todas as classes de receptores das clulas NK contm membros inibitrios e activadores, de tal modo
que, atendendo unicamente estrutura extracelular, no possvel determinar se um receptor das
clulas NK desempenha uma funo activadora ou inibidora. Para alm disso, alguns receptores podem
ser simultaneamente excitatrios e inibitrios o receptor da lectina CD94:NKG2 apresenta duas
formas - CD94:NKG2A e CD94:NKG2C. Ambas as formas ligam-se aos mesmos ligandos (os seus
domnios extracelulares so idnticos), mas a forma NKG2A recruta fosfatases e gera sinais inibitrios,
enquanto a forma NKG2C associa-se com uma molcula adaptadora e gera sinais activadores. De
qualquer modo, sabe-se que os receptores activadores das clulas NK contm ITAMs, enquanto os
inibidores contm ITIMs.
Receptores activadores
De entre os principais receptores activadores das clulas NK, destaque para os seguintes:
Receptores das lectinas tipo C (tais como o NKG2D):
o A sua activao gera uma cascata similar gerada pelo CD28, nas clulas T.
o Os seus ligandos incluem o MIC-A, o MIC-B e o ULPB. O MIC-A e o MIC-B pertencem
classe das molculas do MHC I no-clssicas e no-polimrficas, sendo
frequentemente expressos em clulas sujeitas a stress (tais como danos no DNA ou
infeco por exemplo). Assim, aps ligao do NKG2D a estes ligandos, as clulas NK
induzem morte das clulas que os expressam.
o Estes receptores parecem estar adaptados para participar numa resposta imune
rpida contra vrias condies patolgicas. Para alm disso, estes receptores parecem
estar envolvidos na patogenia de algumas doenas auto-imunes.
CD2
CD244 (2B4; receptor para o CD48)
CD16 (receptor FCIII): Desempenha um importante papel de citotoxicidade mediada por
anticorpos.
NKp30, NKp44 NKp46: Esto envolvidas na destruio das clulas tumorais.
As clulas NK assinalam as clulas com expresso aberrante do MHC como sendo clulas para
destruir vrias clulas infectadas por vrus e vrias clulas tumorais expressam menor
expresso do MHC.

93

Receptores inibidores
A maior parte dos receptores inibidores so molculas do tipo-imunoglobulina, estando envolvidos na
deteco de molculas normais do MHC assim, aquando da deteco destas molculas, estes
receptores impedem a aco citotxica das clulas NK.
O receptor CD94/NKG2A constitui uma excepo, na medida em que pertence classe dos receptores
das lectinas. Estes receptores reconhecem o HLA-E expresso superfcie das clulas e, quando o fazem,
passam a enviar sinais inibitrios para a clula NK, na medida em que a expresso de HLA-E
correlaciona-se com a presena de HLA normais.
Numa mesma clula NK podem coexistir vrios receptores inibitrios KIR, sendo que cada um
especfico para uma molcula de MHC diferente ou para um conjunto de molculas de MHC prximas.
Estes receptores reconhecem os MHC normais e enviam sinais inibitrios para as clulas NK.
Normalmente, os sinais inibitrios sobrepem-se aos activadores. Isto impede a morte da clula-alvo, a
proliferao das clulas NK e a secreo de citocinas (tais como o IFN- e o TNF-).
Clulas NKT
As clulas NKT so consideradas clulas hbridas entre as clulas T e as clulas NK, na medida em que
expressam complexos TCR, mas desempenham funes relacionadas com a imunidade inata. No
admira, por isso, que estas clulas expressem simultaneamente vrios marcadores caractersticos das
clulas NK e das clulas T. Para alm disso, estas clulas expressam CD56.
94

As clulas NKT expressam um TCR invariante, de tal modo que as suas cadeias e so codificadas
sempre pelos mesmos segmentos de DNA da linha germinativa. Para alm disso, o TCR das clulas NKT
no reconhece os peptdeos ligados ao MHC apenas glicopeptdeos apresentados pela molcula de
MHC I no-polimrfica CD1d. De referir que as clulas NKT no formam clulas de memria.
O seu papel destas clulas na imunidade permanece desconhecido pensa-se que estas clulas
participam na imunidade anti-bacteriana, respondendo aos antignios bacterianos com um aumento da
expresso de citocinas de facto, o desenvolvimento tmico das clulas NKT requer a presena do
glicoesfingolipdeo iGb3, que similar a muitas molculas presentes em vrias espcies bacterianas. As
clulas NKT podero ainda estar envolvidas na imunidade contra tumores, nomeadamente no
reconhecimento de antignios lipdicos especficos das clulas tumorais).

95

Tolerncia antignica
um facto adquirido que o sistema imunolgico um sistema muito bem regulado. Contudo, algumas
situaes clnicas, tais como a artrite reumatide, a esclerose mltipla, o lpus eritematoso sistmico
(LES) e certos tipos de diabetes, resultam de falhas decorrentes deste sistema. Isto acontece em
situaes em que, em vez de reagir apenas contra antignios estranhos ao nosso organismo, o sistema
imunolgico reage tambm contra antignios do self, sendo esse designado fenmeno por auto-
imunidade. Em alguns casos, a leso das clulas ou rgos do self causada por anticorpos; enquanto,
em outros casos, esta leso depende das clulas T.
Para evitar que tal acontea, existem vrios mecanismos capazes de proteger um indivduo da agresso
pelos linfcitos potencialmente auto-reactivos. O conjunto desses mecanismos designado por
tolerncia.
A tolerncia central (assim designada, porque ocorre nos rgos linfides primrios) constitui um
mecanismo primrio, ocorrendo antes das clulas B e T completarem a sua maturao. De facto, este
processo permite eliminar os clones de clulas B e T imaturas cujos receptores reconhecem antignios
do self com elevada afinidade. Como este mecanismo apresenta tambm algumas lacunas,
nomeadamente o facto de alguns linfcitos auto-reactivos migrarem para os tecidos linfides
secundrios, existem mecanismos adicionais de proteco tolerncia perifrica cujo objectivo
principal tornar estes mesmos linfcitos inactivos ou anrgicos.

Estabelecimento e manuteno da tolerncia
Como descrito anteriormente, entende-se por tolerncia o conjunto de mecanismos que previnem as
reaces contra os componentes do self e consequente desenvolvimento de doenas auto-imunes. Por
sua vez, designam-se por tolerognios, os antignios que apresentam capacidade de induzir tolerncia.
O mesmo composto pode se comportar como um imunognio ou um tolerognio, dependendo do
modo de como apresentado ao sistema imune. A ttulo de exemplo, um antignio apresentado s
clulas T, sem concomitante co-estimulao adequada, resulta no desenvolvimento de uma forma de
96

tolerncia designada por anergia. Todavia, esse mesmo antignio, quando apresentado em conjunto
com molculas co-estimuladoras, pode se revelar um potente imunognio.
De entre os vrios factores responsveis por induzir tolerncia, destaque para os seguintes:
Elevadas doses de antignios;
Persistncia do antignio no hospedeiro;
Administrao por via oral ou intravenosa;
Ausncia de administrao concomitante de adjuvantes;
Baixos nveis de co-estimuladores.
Salienta-se ainda que a tolerncia antignio-especfica, isto , a inactivao de uma resposta imune,
por tolerncia, especfica para o tolerognio em questo, no resultando numa supresso geral do
sistema imune.
Tolerncia central
O mecanismo principal na manuteno da tolerncia prende-se com a deleo de clones de linfcitos
imaturos reactivos contra os componentes do self. No caso das clulas B auto-reactivas, essa eliminao
ocorre na medula ssea. Por oposio, no que diz respeito s clulas T auto-reactivas, essa eliminao
tem lugar no timo. Quer num caso quer noutro, tal acontece por um processo designado por seleco
negativa.

No que diz respeito tolerncia B central, para alm do mecanismo de deleo clonal, algumas clulas B
em desenvolvimento podem sofrer edio de receptor, nomeadamente por rearranjo gentico das
cadeias leves. De facto, quando temos uma clula B capaz de reconhecer uma molcula multivalente do
self, ocorre paragem no desenvolvimento da clula B, ocorre um rearranjo da cadeia leve, e passa a ser
expresso um novo receptor. Caso este receptor continue a reconhecer aquele auto-antignio, este
eliminado. Por oposio, caso o novo receptor deixe de ser auto-reactivo, a clula migra para a periferia.
Um mecanismo similar leva a que as clulas T que apresentem alta afinidade a antignios do self sejam
eliminadas, sobretudo por induo de apoptose.

97

Tolerncia perifrica
Como anteriormente referido, a tolerncia central no um processo totalmente seguro, na medida em
que no elimina completamente todos os linfcitos auto-reactivos. Isto ocorre porque:
Nem todos os antignios do self so expressos nos rgos linfides centrais, onde ocorre o
processo de seleco negativa;
A eliminao clonal de uma dada clula apenas despoletada, quando a afinidade com que
esta se liga a antignios do self superior a um determinado valor. Ora, isto permite que alguns
clones que reajam de forma fraca com antignios do self possam sobreviver ao processo de
eliminao;

Assim, torna-se perceptvel a importncia da tolerncia perifrica na inactivao dos linfcitos
perifricos auto-reactivos e na induo de um estado de anergia clonal (falta de resposta a um estmulo
antignico). Note-se que, a induo de anergia no sempre irreversvel em certas condies (tal
como na lupus, ou aquando da administrao de certos frmacos), algumas clulas anrgicas podem
voltar a sofrer activao.

Estes mecanismos de tolerncia perifrica so, em parte conseguidos, pelo facto de a activao das
clulas B e T requerer sinais co-estimulatrios, de entre os quais se destacam o CD28/B7 e o
CD40/CD40L. Assim, para que ocorra activao das clulas B, estas devero interagir com as clulas T e,
para isso, os antignios devero ser reconhecidos simultaneamente pelas clulas T e pelas clulas B.

Para alm disso, verifica-se a presena de receptores inibitrios, tais como o CD22 (nas clulas B) e o
CTLA-4 (nas clulas T). O CTLA-4, tal como o CD28, liga-se ao B7, mas em vez de o activar, inibe-o. Deste
modo, uma vez que a expresso de CTLA-4 induzida aps activao das clulas T, torna-se fcil de
compreender porque que esta molcula desempenha um papel regulador.

As clulas T
reg
constituem outro importante
componente da tolerncia perifrica, sendo essenciais
para suprimir a resposta das clulas T. Estas clulas
expressam CD3, CD4 e CD25; tendo origem num
subconjunto de clulas T cujos receptores expressam
afinidade intermdia para antignios do self. Estas
clulas caracterizam-se ainda pela expresso do factor
de transcrio Foxp3 (mutaes neste factor esto
associadas ao desenvolvimento da sndrome auto-imune
IPEX), desconhecendo-se os mecanismos pelos quais
suprimem a as respostas imunes. Pensa-se, contudo,
que as clulas T
reg
actuem atravs da produo de IL-10
e TGF-.

As clulas T reactivas podem ainda ser eliminadas por
apoptose induzida pelas clulas apresentadoras de
antignios, por activao da via extracelular da apoptose (interaco entre o ligando do Fas expresso
nas clulas apresentadoras de antignios, com o Fas expresso nas clulas T). Por fim, as clulas T podem
ver a sua funo modificada, atravs de um processo designado por desvio imunolgico assim, as
clulas T com um perfil T
H
1 podem passar a manifestar um perfil T
H
2, sendo essa converso promovida
pela IL-10 e TGF-.

98

Correlaes clnicas

Como expectvel, a falha em qualquer um destes mecanismos de tolerncia (central ou perifrica) leva
ao desenvolvimento de quadros auto-imunes, como tem sido comprovado atravs de experincias
laboratoriais (por exemplo, em ratos knock-out para o CTLA-4) ou em vrias patologias.

A poliendocrinopatia auto-imune com
candidase e distrofia ectodrmica
(sndrome autossmica recessiva
caracterizada por uma constelao de
doenas auto-imunes) constitui um
exemplo de uma patologia resultante de
falhas nos mecanismos de tolerncia.
Indivduos com esta doena expressam
mutaes no gene AIRE, o qual
expresso no timo (embora tambm o
seja no pncreas e crtex da medula
supra-renal). O gene AIRE regula a
apresentao de antignios de tecidos
perifricos do self por parte das clulas
epiteliais medulares tmicas, sendo
essencial para o processo de seleco
negativa e para o desenvolvimento de tolerncia central.

A doena referida em epgrafe constitui uma doena auto-imune sistmica. Todavia, vrias outras
doenas auto-imunes podem ser especficas em relao a cada rgo.

99

Citocinas
O desenvolvimento de uma resposta imune eficaz requer a participao de clulas linfides,
inflamatrias e hematopoiticas. As complexas interaces entre estas clulas so medidas por um
grupo de protenas colectivamente designadas por citocinas.
As citocinas so protenas ou glicoprotenas reguladoras de baixo peso molecular (geralmente inferior a
30 kDa

), sendo segregadas por leuccitos e vrias outras clulas, em resposta a variados estmulos. De
facto, enquanto algumas citocinas intervm na activao das clulas imunitrias efectoras, outras tm,
elas prprias, funes efectoras.
Existem autores que designam as citocinas segregadas por linfcitos e moncitos por linfocinas e
monocinas, respectivamente. Todavia, estas citocinas podem ser igualmente segregadas por outras
clulas, pelo que essas designaes devem ser evitadas.
Vrias citocinas so designadas por interleucinas, colocando-se, dessa forma, em destaque o facto de
serem segregadas por leuccitos e actuarem sobre outros leuccitos. Algumas citocinas so ainda
conhecidas por nomes comuns, dos quais exemplo o interfero. Por fim, algumas citocinas
constituem o subgrupo das quimiocinas, que apresentam baixo peso molecular e intervm na
quimiotaxia e em outros aspectos do comportamento dos leuccitos.
Propriedades das citocinas
As citocinas ligam-se a receptores especficos localizados na
membrana das clulas-alvo, activando vias de transduo do
sinal que, em ltima instncia, resultam na alterao da
expresso gnica. A susceptibilidade de dada clula a uma
determinada citocina determinada pela presena de
receptores membranares especficos. As citocinas ligam-se
aos seus receptores com elevada afinidade, de tal modo que
podem exercer os seus efeitos biolgicos em concentraes
da ordem dos picomolares. De referir que as citocinas
podem actuar por via autcrina, parcrina ou endcrina.
As citocinas regulam a intensidade e a durao da resposta
imune, atravs da estimulao ou da inibio da activao,
proliferao e/ou diferenciao de diferentes clulas, e
atravs da regulao da secreo de anticorpos ou de outras
citocinas. Como ir ser descrito infra, a ligao de uma dada
citocina a uma clula-alvo geralmente aumenta a expresso
dos receptores das citocinas e, simultaneamente, estimula a
secreo de outras citocinas que, por sua vez, afectam outras
clulas-alvo.
Assim, basta um reduzido nmero de linfcitos activados por um antignio, para que as citocinas por
eles segregadas passem a influenciar a actividade de numerosas clulas envolvidas na resposta imune.
As citocinas dispem dos seguintes atributos:
Pleiotropia Uma dada citocina tem diferentes efeitos biolgicos em diferentes clulas-alvo;
Redundncia Duas ou mais citocinas podem mediar a mesma funo;
100

Sinergismo O efeito combinado de duas citocinas na actividade celular maior que o que
resultaria da adio dos efeitos individuais de cada uma delas;
Antagonismo O efeito de uma citocina inibe ou contrape os efeitos de outras;
Efeito em cascata A aco de uma citocina numa clula-alvo induz, nessa clula, a produo
de outras citocinas que, por sua vez, induzem outras a fazer o mesmo.
As citocinas partilham vrias caractersticas com os factores de crescimento e com as hormonas so,
todos eles, factores solveis que exercem a sua aco biolgica em concentraes da ordem dos
picomolares e ligando-se a receptores nas clulas-alvo. No entanto, vrios aspectos permitem distinguir
estas trs classes de mediadores:
Os factores de crescimento so expressos de forma constitutiva, enquanto as citocinas e as
hormonas so segregadas em resposta a estmulos, e durante curtos perodos de tempo.
Contrariamente s hormonas, a maioria das citocinas actua a curta distncia, sobretudo pelas
vias autcrina e parcrina.
A maior parte das hormonas produzida por glndulas especializadas e tende a ter uma aco
nica sobre um nmero limitado de tipos celulares. Com as citocinas, verifica-se o fenmeno
oposto.
Famlias de citocinas
As citocinas caracterizadas pertencem a quatro grupos:
Famlia da Hematopoietina;
Famlia do Interfero;
Famlia das Quimiocinas;
Famlia do Factor de Necrose Tumoral (TNF);
Os membros de cada uma destas famlias apresentam semelhanas estruturais, que podem ser
ilustradas pela IL-2 e IL-4. Apesar de as suas sequncias de aminocidos diferirem consideravelmente,
ambas apresentam um marcado predomnio de -hlices, em detrimento de folhas . Estas molculas
partilham um fold com uma estrutura polipeptdica semelhante, envolvendo quatro regies
helicoidais (A-D), nas quais a primeira e a segunda hlices e a terceira e quarta hlices se apresentam
aproximadamente paralelas e esto ligadas por ansas.
Funes biolgicas
As principais clulas secretoras de citocinas so as clulas T
H
, as clulas dendrticas e os macrfagos.
Entre as numerosas respostas fisiolgicas em que intervm as citocinas, constam o desenvolvimento de
respostas celulares e humorais, a induo da resposta inflamatria, a regulao da hematopoiese e o
controlo da proliferao celular, da diferenciao e da cicatrizao.
importante salientar que as citocinas actuam de forma inespecfica, isto , afectam quaisquer clulas
que disponham dos receptores apropriados e que se encontrem num estado fisiolgico que lhes permita
responder a estas molculas.
No seu conjunto, o nmero total de protenas com actividade de citocina identificadas excede,
provavelmente, as 200. De notar que, apesar da individualizao das suas funes, as citocinas, in vivo,
no actuam sozinhas de facto, as clulas-alvo encontram-se expostas a uma variedade de citocinas,
cujos efeitos sinergistas ou antagonistas podem resultar em diferentes consequncias.
Apesar de as citocinas actuarem de forma inespecfica, a especificidade da resposta imune mantida:
101

Atravs da regulao da expresso dos seus receptores nas clulas, os quais, muitas vezes,
apenas so expressos numa clula depois de esta ter interagido com um antignio;
Atravs da limitao da secreo de citocinas pela clula secretora ocorrncia da interaco
desta com a clula-alvo, assegurando-se, dessa forma, que as concentraes de citocinas
necessrias para desencadear a resposta apenas se verificam na vizinhana do alvo ( o caso da
ligao dos linfcitos T
H
ao complexo antignio-MHC numa clula apresentadora de
antignios).
A semi-vida das citocinas lanadas na corrente sangunea e noutros fludos intercelulares ,
geralmente, muita curta, o que limita o perodo da sua actuao, mas tambm a distncia a que
conseguem actuar.

Receptores das Citocinas
Os receptores das citocinas pertencem, quase na sua totalidade, a uma de cinco famlias:
1. Receptores da superfamlia das imunoglobulinas;
2. Famlia dos receptores das citocinas classe I;
3. Famlia dos receptores das citocinas classe II;
4. Famlia dos receptores da TNF;
5. Famlia dos receptores das quimiocinas
Receptores da famlia das imunoglobulinas
A superfamlia das imunoglobulinas inclui os receptores da IL1. Duas formas de IL-1 foram
caracterizadas: IL-1 e IL-1. Estas duas protenas so idnticas apenas em cerca de 30% da sequncia,
embora aparentem ter a mesma funo, uma vez que se ligam aos mesmos receptores e desencadeiam
as mesmas respostas.
102

So conhecidos dois receptores diferentes para a IL-1 - o IL-1R tipo 1, expresso em vrios tipos
celulares, e o IL-1R tipo 2, apenas expresso nos linfcitos B. O receptor tipo 2 parece ter como objectivo
a remoo da IL-1, uma vez que a sua ligao a este receptor no desencadeia uma resposta tpica desta
citocina (a resposta tpica da IL-1 apenas ocorre aquando da ligao ao receptor de tipo 1). A IL-1 tem
um papel central na resposta inflamatria, sendo, por isso, designada por citocina pr-inflamatria. A
IL-18 est relacionada com a IL-1, ligando-se mesma famlia dos receptores e desempenhando uma
funo semelhante.
Receptores da famlia das citosinas classe I
A famlia dos receptores das citocinas classe I (famlia dos receptores da hematopoietina) apresenta
sequncias de aminocidos conservadas no domnio extracelular, que consistem em quatro resduos
cistena em posio conservada (CCCC) e uma sequncia triptofano-serina-aa-triptofano-serina (WSxWS,
sendo x um aminocido varivel) , igualmente conservada. A IL-2 e cerca de treze outras interleucinas,
bem como vrios factores e hormonas do crescimento ligam-se a receptores desta famlia.
Vrias subfamlias de receptores das citocinas classe I foram identificadas, sendo que todos os
receptores de uma determinada subfamlia apresentam idntica subunidade de transduo de sinal. A
partilha de tais subunidades entre receptores explica a redundncia e o antagonismo de algumas
citocinas.

Subfamlia do receptor GM-CSF

A subfamlia do receptor do GM-CSF inclui os
receptores para a IL-3, IL-5 e para o GM-CSF.
Cada uma destas citocinas liga-se com baixa
afinidade subunidade do receptor
dimrico, para o qual apresenta
especificidade. Cada uma das trs
subunidades tem a capacidade de se
associar no-covalentemente com uma
subunidade comum responsvel pela
transduo do sinal. O receptor dimrico
resultante tem grande afinidade para a
respectiva citocina, passando a ter
capacidade de transmitir os sinais resultantes
da ligao da citocina.
As IL-3, a IL-5 e o GM-CSF tm actividade
redundante. Tanto a IL-3 como o GM-CSF actuam em clulas progenitoras hemotopoiticas, activam
moncitos e induzem a diferenciao dos megacaricitos. Por outro lado, estas trs citocinas induzem a
proliferao de eosinfilos e a desgranulao de basfilos, com a consequente libertao de histamina.

Uma vez que os receptores da IL-3, IL-5 e GM-CSF partilham a mesma subunidade , estas trs citocinas
induzem uma fosforilao nos mesmos moldes. No entanto, note-se que, quando secretadas em
simultneo, a IL-3 e o GM-CSF actuam como antagonistas, devido competio por um nmero limitado
de subunidades .

Subfamlia do receptor da IL-6

Os receptores da subfamlia do receptor para a IL-6 expressam uma subunidade comum transdutora de
sinal, designada por gp130, que se associa a uma ou duas subunidades . Esta famlia inclui os
receptores para:
103

IL-6 e a IL-11;
Factor inibidor da leucemia (LIF);
Oncostatina M (OSM);
Factor neurotrfico ciliar (CNTF);

Como seria de esperar, as citocinas que se ligam
a receptores desta subfamlia tm actividade
biolgica sobreponvel:

A IL-6, a OSM e o LIF induzem a sntese
hepatocitria de protenas da fase
aguda, bem como a diferenciao de
clulas mielides em macrfagos;
A IL-6, o LIF e o CNTF afectam o
desenvolvimento neuronal;
A IL-6, a IL-11 e a OSM estimulam a
maturao dos megacaricitos e a
produo de plaquetas.

De referir que a presena da gp130 em todos os receptores desta subfamlia explica a semelhana das
suas vias de sinalizao, bem como a competio pelas molculas gp130 entre estas citocinas.

Subfamlia do receptor da IL-2

A subfamlia do receptor da IL-2
inclui os receptores para as IL-2, IL-4,
IL-7, IL-9, IL-15 e IL-21. Os receptores
da IL-2 e da IL-15 so heterotrmeros,
consistindo numa cadeia especfica
e em duas cadeias - e y
responsveis pela transduo do
sinal. A cadeia y desempenha esta
funo nos restantes receptores desta
subfamlia, todos eles dmeros.

A imunodeficincia combinada
severa ligada ao cromossoma X
resulta de um defeito no gene da cadeia e determina a perda de actividade dos linfcitos T e NK. Tal
sucede porque h perda de funo de todas as citocinas que interagem com os receptores desta
subfamlia.

O receptor da IL-2 o receptor mais estudado, dado o seu papel central na proliferao clonal dos
linfcitos T. As suas cadeias e y pertencem famlia de receptores das citocinas classe I, contendo as
caractersticas CCCC e WSXWS, enquanto a sua cadeia tem uma estrutura diferente, no pertencendo
a esta famlia. De referir que o receptor da IL-2 apresenta trs formas, cada uma delas com diferentes
afinidades.

Em termos estruturais, a IL-2 liga-se a uma bolsa formada pelas cadeias e , sendo que a sua afinidade
para estas cadeias aumenta na presena da cadeia . Ainda assim, a ligao da IL-2 forma do receptor
com afinidade intermdia (receptor apenas composto pelas cadeias e ) suficientemente forte para
104

que se d a transduo de sinal. A cadeia do receptor da IL-2 apenas expressa nas clulas T
activadas, de tal modo que esta cadeia tambm conhecida por antignio TAC (antignio de activao
das clulas T) ou CD25 (marcador caracterstico da maturao das clulas T). Assim, a presena de
elevados nveis de CD25 em linfcitos T maduros indica que estes se encontram num estado de
activao, podendo igualmente indicar a presena de clulas T
reg
.

A expresso das trs cadeias no IL-2R varia em funo do tipo de clula, sendo que a cadeia expressa
de forma constitutiva na maioria das clulas linfides, enquanto as cadeias e so expressas de forma
mais restrita. De facto, estas cadeias so apenas expressas de forma mais acentuada aps activao dos
linfcitos por um antignio. Este padro de expresso restrita permite que apenas as clulas T CD4
+
e
CD8
+
activadas expressem o receptor na sua forma de elevada afinidade, e proliferem em resposta a
nveis fisiolgicos de IL-2. As clulas NK, contudo, expressam as cadeias e de forma constitutiva.
Receptores da famlia das citocinas classe II
A famlia dos receptores das citocinas classe II (famlia dos receptores do interfero) possui tambm o
motivo CCCC conservado, embora no apresente o motivo WSXWS da famlia anterior. Esta famlia
consiste em 12 cadeias que, nas suas vrias combinaes, se ligam a pelo menos 27 citocinas diferentes,
incluindo seis membros da famlia das IL-10, dezassete interferes do tipo I, um interfero do tipo II e
trs membros da famlia do interfero (incluindo a IL-28b e a IL-29).
Uma caracterstica comum maioria dos receptores das citocinas classe I e II a presena de mltiplas
subunidades, incluindo, frequentemente, uma subunidade que se liga a citocinas especficas e a uma
que medeia a transduo do sinal. Essas duas funes, no entanto, nem sempre esto alocadas a uma
ou a outra subunidade. Em todos os casos estudados at agora, porm, a activao destas duas famlias
de receptores implica a actividade de cnase de tirosina associada ao domnio citoslico do receptor,
que resulta na fosforilao do receptor.
Transduo do sinal

Actualmente, considera-se que a sinalizao
induzida pelas citocinas processa-se de
acordo com um nico modelo, o qual
comporta uma srie de caractersticas e de
passos:

1. O receptor das citocinas composto
por subunidades separadas, tal
como anteriormente descrito.
2. Diferentes cnases da tirosina
inactivas esto associadas a distintas
subunidades do receptor - a cadeia
est associada a cnases da tirosina
da famlia JAK, independentemente
da ligao da citocina ao receptor,
embora na ausncia desta ligao as
JAKs no apresentem actividade de
cnase.
3. A ligao da citocina ao receptor
induz a associao das suas
subunidades e consequente
105

activao das JAKs.
4. As JAKs activadas fosforilam tirosinas especficas do receptor, o que permite a ligao das STAT
(membros de uma famlia de factores de transcrio) a esses resduos fosforilados.
5. Aps sofrerem fosforilao, as STAT dissociam-se do receptor e dimerizam, migrando para o
ncleo, onde exercem a sua funo, induzindo a expresso de certos genes.
A especificidade dos efeitos das citocinas , assim, atribuvel a trs factores:
1. Receptores de citocinas especficos iniciam vias JAK-STAT igualmente especficas;
2. A actividade transcricional das STATs activadas especfica, uma vez que dado homodmero ou
heterodmero STAT apenas reconhecer determinados sequncias e, desse modo, apenas
poder interagir com os promotores de certos genes;
3. Apenas os genes-alvo num dado tipo celular sero ser activados, ou seja, a IL-4, por exemplo,
induzir a expresso de um conjunto de genes nos linfcitos T, de outro conjunto nos linfcitos
B e de outro ainda nos eosinfilos.
De referir que, contrariamente, s restantes citocinas, a IL-1 no desencadeia a via JAK-STAT. Em vez
disso, a IL-1 activa uma cnase designada por IRAK (cnase associada ao receptor da IL-1). Esta protena
tambm utilizada pelas TLRs para a transduo do sinal.
Antagonistas das citocinas
Algumas protenas inibem a actividade biolgica das citocinas, fazendo-o atravs de uma de duas
formas:
Ligando-se ao receptor da citocina sem o activar;
Ligando-se directamente citocina, inibindo a sua actividade;
O inibidor mais bem caracterizado o antagonista do receptor da IL-1 (IL-1Ra). A sua ligao ao
receptor da IL-1 impede a ligao tanto da IL-1 como da IL-1, pensando-se que este antagonista
poder ter um papel na regulao da intensidade da resposta inflamatria.
Os inibidores das citocinas encontram-se na corrente sangunea e no fluido extracelular. Estes
antagonistas solveis resultam da clivagem enzimtica do domnio extracelular dos receptores das
citocinas. O sIL-2R (receptor solvel da IL-2) constitui o inibidor mais bem caracterizado este
antagonista libertado na activao crnica das clulas T e apresenta um segmento contendo 192
aminocidos na subunidade , que libertada por clivagem proteoltca. A presena deste sIL-2R tem
sido usada como marcador da activao crnica das clulas T e observada em vrios distrbios,
incluindo auto-imunidade, rejeio de transplantes e SIDA.
Tambm alguns vrus desenvolveram estratgias para inibir a actividade das citocinas, nomeadamente:
Produo de homlogos das citocinas;
Perturbao da sinalizao intracelular;
Perturbao da secreo de citocinas;
Induo de inibidores das citocinas na clula hospedeira;
A ttulo de exemplo, o vrus Epstein-Barr produz uma molcula homloga IL-10 que, ao ligar-se ao
receptor desta, suprime, tal como a prpria IL-10, as respostas anti-vricas mediadas pelas clulas T
H
1.
Para alm disso, este vrus produz um indutor do IL-1Ra.

106

Secreo de citocinas pelas clulas T
H
1 e T
H
2
As clulas T
H
CD4
+
exercem a maioria das suas funes atravs das citocinas segregadas. Apesar de as
clulas TCD8
+
tambm segregarem citocinas, a sua panplia , geralmente, mais limitada. De facto, as
subpopulaes T
H
1 e T
H
2 podem ser distinguidas pelas citocinas que segregam, com excepo da IL-3 e
do GM-CSF, que so comuns.
As clulas T
H
1 intervm nas reaces de hipersensibilidade do tipo IV e na activao de clulas T
C
,
promovendo ainda a opsonizao, atravs da produo de IgG. Por fim, estas clulas encontram-se
associadas a inflamao excessiva e a leso tecidular.
As clulas T
H
2 estimulam a activao e diferenciao dos eosinfilos, assistem os linfcitos B na sua
funo, e promovem a produo de IgM, IgE e de istipos IgG no-activadores do complemento. Estas
clulas tambm intervm nas reaces alrgicas.
As diferenas nas citocinas segregadas pelas clulas T
H
1 e T
H
2 determinam as suas diferentes funes
biolgicas:

Como referido anteriormente, as clulas T
H
1 inibem o desenvolvimento de uma resposta T
H
2, enquanto
as clulas T
H
2 inibem a gnese de uma resposta T
H
1. Assim, em situaes normais, a quantidade de
clulas T
H
1 similar quantidade de T
H
2 (balano de clulas T
H
). Deste modo, o aumento da quantidade
de clulas de uma dada subpopulao est associado presena de uma condio patolgica o
aumento de T
H
1 condiciona o desenvolvimento de uma doena auto-imune, enquanto o aumento de
T
H
2 condiciona o desenvolvimento de uma reaco de hipersensibilidade.
De notar que, in vivo, a polarizao T
H
1 ou T
H
2 assinala,
muitas vezes, a presena de uma infeco crnica ou de
uma reaco de hipersensibilidade, pelo que difcil
identificar estas subpopulaes em indivduos saudveis.
igualmente importante salientar que vrios linfcitos T
H

no apresentam caractersticas de clulas T
H
1 nem de
T
H
2, exibindo grande heterogeneidade.
Papel das citocinas no desenvolvimento das
subpopulaes T
H
1 e T
H
2
As citocinas presentes aquando da diferenciao das
clulas T
H
determinam qual a subpopulao que se ir
desenvolver. De facto, o IFN- determina a diferenciao
das clulas T
H
em clulas T
H
1, na medida em que aumenta
107

a produo de IL-12 pelos macrfagos e pelas clulas dendrticas. Para alm disso, o IFN- activa o
receptor da IL-12 nas clulas activadas, ao aumentar a expresso da cadeia desse receptor.
A IL-18, a IL-23 e a IL-27 actuam tambm num sentido de promover a diferenciao em clulas T
H
1, na
medida em que estas interleucinas promovem a produo de IFN- pelas clulas T
H
1 (em
desenvolvimento ou j diferenciadas) e pelas clulas NK.
Por oposio, a IL-4 favorece a diferenciao em clulas T
H
2, ainda que o IFN- e a IL-12 estejam
presentes;
Regulao cruzada das citocinas
As principais citocinas produzidas pelas subpopulaes T
H
1 e T
H
2 tm dois efeitos caractersticos no
desenvolvimento dessas mesmas subpopulaes:
Promovem o crescimento da subpopulao que as produz;
Inibem o desenvolvimento e actividade da outra subpopulao (o IFN-, por exemplo, inibe a
proliferao das clulas TH2. Por seu turno, a IL-4 e a IL-10 diminuem a secreo de IL-12 pelos
macrfagos e clulas dendrticas, sendo que a IL-12 desempenha um papel central na
diferenciao das clulas T
H
1).
Do mesmo modo, como de prever, estas citocinas tm efeitos opostos nas outras clulas onde
actuam. Tal o caso dos linfcitos B que produzem diferentes anticorpos como resultado da actuao
das diferentes citocinas produzidas pelas clulas T
H
1 ou pelas clulas T
H
2. Este fenmeno de regulao
cruzada explica a relao inversa frequentemente observada entre as respostas imunitrias humoral e
celular quando uma das respostas aumenta, a outra diminui.
A nvel intracelular, este fenmeno de regulao cruzada encontra-se intrinsecamente dependente da
aco dos factores de transcrio T-Bet e GATA-3, que induzem a diferenciao em clulas T
H
1 e T
H
2,
respectivamente. Por sua vez, a expresso de T-Bet ou GATA-3 determinada pelas citocinas IFN- e IL-
4, respectivamente.

108

A regulao cruzada das clulas T
H
2 no se traduz numa inibio directa; em vez disso, a IL-10 atua nos
moncitos e macrfagos, interferindo com a sua capacidade para activar a subpopulao T
H
1 . Pensa-se
que esta interferncia resulta da capacidade de a IL-10 diminuir a expresso de molculas MHC II
naquelas clulas apresentadoras de antignios. A IL-10 tem ainda o efeito de suprimir a produo de
xido ntrico e de outros metabolitos bactericidas envolvidos na destruio de agentes patognicos,
bem como de suprimir a produo de diversos mediadores da inflamao (tais como IL-1, IL-6, IL-8, GM-
CSF, G-CSF e IFN-). Estes efeitos supressores exercidos sobre os macrfagos diminuem, ainda com
maior eficcia, as consequncias biolgicas da activao das clulas T
H
1.
O equilbrio T
H
1 / T
H
2 e o seu papel na evoluo de certas doenas
A forma como certas doenas progridem pode depender do equilbrio entre as populaes T
H
1 e T
H
2. A
lepra constitui um exemplo deste fenmeno. Esta doena, causada pelo Mycobacterium leprae
(microrganismo intracelular que sobrevive dentro dos fagossomas dos macrfagos), apresenta duas
formas fundamentais:
Lepra tuberculide: Neste padro, desencadeada uma resposta imune celular que cursa com
a formao de granulomas e com a destruio da maioria das bactrias. Estabelece-se, pois
uma resposta imunitria mediada por clulas T
H
1 (hipersensibilidade do tipo IV), que se
caracteriza por nveis elevados de IL-2, IFN- e TNF-. Neste caso, a doena desenvolve-se
lentamente e os indivduos afectados geralmente sobrevivem.
Lepra lepromatosa: Neste padro, a resposta celular encontra-se deprimida e h uma resposta
humoral, muitas vezes acentuada, com a formao de elevados nveis de imunoglobulinas
(hiper-gama-globulinemia). As micobactrias encontram-se altamente disseminadas nos
macrfagos, de tal modo que a doena progride para uma infeco generalizada do osso e
cartilagem, com leso dos nervos. Regista-se, assim, uma resposta do tipo T
H
2, com elevados
nveis de IL-4, IL-5, e IL-10 que explicam a acentuada resposta humoral.
Tambm na SIDA, registam-se diferenas na actividade das duas subpopulaes de clulas T
H
.
Inicialmente, a actividade das clulas T
H
1 elevada, mas, medida que a doena progride, poder
ocorrer uma mudana para uma resposta do tipo T
H
2. Por outro lado, o vrus Epstein-Barr produz um
homlogo da IL-10 (vIL-10) que mimetiza a aco desta citocina, tendendo a suprimir a actividade das
clulas T
H
1, o que confere vantagem ao vrus.
Doenas resultantes da alterao da expresso das citocinas e dos seus receptores
Choque sptico
O choque sptico pode desenvolver-se algumas horas aps infeco por certas bactrias Gram-
negativas, incluindo a Escherichia coli, a Klebsiella pneumoniae, a Pseudomonas aeruginosa, a
Enterobacter aerogenes e a Neisseria meningitidis. Os sintomas do choque sptico, muitas vezes fatal,
incluem hipotenso, febre, diarreia e coagulao intravascular disseminada.
A spsis, seja ela causada por infeco bacteriana, traumatismo ou isquemia, caracteriza-se por um
aumento muito marcado da produo de citocinas pr-inflamatrias, tais como o TNF- e a IL-1. O
desequilbrio de citocinas da resultante responsvel pela temperatura corporal e frequncia
respiratria anmalas, prprias desta condio, acompanhadas pelo aumento da permeabilidade
vascular e pela leso tecidular, com a consequente falncia de mltiplos rgos.
O aumento do TNF- e da IL-1 verifica-se numa fase ainda inicial da spsis, pelo que a neutralizao
destas citocinas se revela eficaz quando efectuada precocemente. Decorridas cerca de 24 horas aps o
109

seu incio, os nveis desses mediadores sofrem uma queda acentuada, assumindo outros factores maior
importncia, entre os quais podero constar a IL-6, o MIF e a IL-8.
A spsis constitui uma rea sob intensa investigao, sendo ainda necessrio clarificar os mecanismos
nela envolvidos, de modo a desenvolver terapias eficazes.
Choque txico bacteriano
Vrios microrganismos produzem toxinas que actuam como superantignios. Estes ligam-se
simultaneamente a uma molcula MHC II e ao domnio V do receptor das clulas T, activando todas as
clulas T que contenham um domnio V particular. Assim, um elevado nmero destas clulas sofre
activao, independentemente da sua especificidade antignica.
Enquanto menos de 0,01% de clulas T respondem a um dado antignio, 5% ou mais respondero a um
superantignio, o que se torna compreensvel se atentarmos no facto de haver um nmero limitado de
genes que codificam o domnio V do TCR na linha germinativa.
So exemplos de superantignios:
Enterotoxinas;
Toxinas exfoliativas;
Toxina da sndrome do choque txico (TSST1) produzida pelo Staphylococcus aureus;
Exotoxinas pirognicas produzidas pelo Streptococcus pyogenes;
Sobrenadante do Mycoplasma arthritidis (MAS).
O elevado nmero de clulas T activadas por estes superantignios resulta numa produo excessiva de
citocinas, como o caso da TSST1, o que condiciona a presena de nveis extremamente elevados de
TNF- e de IL-1.
Neoplasias mielides e linfides
Anomalias na produo de citocinas e seus receptores tm sido associadas a alguns tipos de neoplasias.
A ttulo de exemplo, nveis elevados de IL-6 so segregados pelas clulas constituintes dos mixomas
cardacos e das neoplasias do colo do tero e da bexiga, bem como pelos mielomas e plasmocitomas.
Nos dois ltimos, a IL-6 parece actuar de forma autcrina, estimulando a proliferao celular.
Doena de Chagas
O protozorio Trypanosoma cruzi o agente responsvel pela doena de Chagas, a qual se caracteriza
por uma imunossupresso severa. Antignios, mitognios ou anticorpos monoclonais anti-CD3 activam,
em circunstncias normais, as clulas T. Na presena do T. cruzi, contudo, essa activao no tem lugar,
j que este agente tem a capacidade de diminuir a expresso da subunidade do receptor da IL-2
(CD25).
Apesar de o mecanismo que conduz inibio da expresso do CD25 ser ainda desconhecido, sabe-se
que a supresso induzida quando o contacto do protozorio com os linfcitos impedido por um
filtro, o que sugere que um factor solvel estar implicado na gnese da imunossupresso.

110

Quimiocinas
As quimiocinas constituem uma superfamlia de polipeptdeos contendo entre 90 a 130 resduos
aminoacdicos. Estas protenas controlam selectivamente a adeso, quimiotaxia, e a activao de vrios
tipos de leuccitos. De referir que, em muitas clulas, a secreo de quimiocinas induzida pelas vias de
sinalizao dos Toll-like receptors e das citocinas inflamatrias (IL-1 e TNF).
Algumas quimiocinas desempenham um
importante papel na resposta
inflamatria, enquanto outras so
constitutivamente expressas, sendo
essenciais para assegurar a homeostasia
(quimiocinas house-keeping). Estas
ltimas quimiocinas so produzidas, no
apenas nos rgos linfides, mas
tambm em tecidos no-linfides, tais
como a pele, sendo essenciais para
regular o normal transporte de
leuccitos (por exemplo, so
responsveis pela migrao diferencial
dos leuccitos B e T nave produzidos na
hematopoiese). No admira, portanto
que o timo e a medula ssea expressem
constitutivamente quimiocinas.
As quimiocinas no actuam somente no
sistema imune, sendo tambm essenciais
para o desenvolvimento embrionrio,
para a angiognese e para a cicatrizao de feridas.
As quimiocinas inflamatrias so tipicamente produzidas em resposta a uma infeco, induzindo o
movimento dos leuccitos em direco aos focos de infeco. Para alm disso, estas quimiocinas
promovem a adeso leucocitria ao endotlio.
A famlia das quimiocinas constituda por mais de 50 membros (alguns com aco redundante), que
apresentam variao adicional conferida por processos alternativos de splicing e processamento. As
quimiocinas contm quatro resduos de cistena conservados, sendo que, de acordo com a posio dos
primeiros dois resduos, possvel dividir estas molculas em quatro famlias:
CC: As duas primeiras cistenas conservadas encontram-se juntas.
CXC: As duas primeiras cistenas encontram-se separadas por um aminocido qualquer (X).
Existem duas subfamlias:
o ELR
+
: Prximo do seu terminal amina contm um grupo de aminocidos glutamina-
arginina-leucina. Esta subfamlia est envolvida no recrutamento de neutrfilos,
participando na fase inicial da resposta inflamatria aguda. Os membros desta
subfamlia incluem:
CXCL1
CXCL2
CXCL3 (tal como a CXCL1 e a CXCL2, a CXCL3 uma GRO)
CXCL5
CXCL6
111

CXCL7 (NAP-2)
CXCL8 (IL-8)
o ELR
-
: No expressam um grupo aminoacdico em epgrafe. Esto envolvidas no
recrutamento de clulas mononucleadas, nomeadamente linfcitos T
H
1. Os membros
desta subfamlia incluem:
CXC9 (Mig)
CXC10 (IP-10)
CXC11 (I-TAC)
CX3C: As duas primeiras cistenas encontram-se separadas por trs aminocidos
XC: Apresenta apenas dois resduos de cistena

A aco das quimiocinas mediada por receptores acoplados protena G, ou seja, receptores
transmembranares que atravessam a membrana sete vezes (tal como os receptores do C5a e MFLP). Os
receptores CC (CCR) reconhecem as quimiocinas CC, enquanto os receptores CXC (CXCR) reconhecem as
quimiocinas CXC. De resto, tal como se verifica com as citocinas, a interaco entre as quimiocinas e os
seus receptores forte e altamente especfica (embora a maior parte dos receptores sejam capazes de
se ligar a mais que uma quimiocina, enquanto vrias quimiocinas so capazes de se ligar ao mesmo
receptor). De referir que, enquanto as quimiocinas so definidas de acordo com a sua estrutura, os
receptores das quimiocinas so definidos de acordo com a sua funo.
A activao dos receptores das quimiocinas induz rpidas alteraes estruturais e funcionais:
Os leuccitos alteram a sua forma
Os leuccitos passam a manifestar maior adeso ao endotlio, pois passam a expressar maior
quantidade de integrinas
Os fagcitos passam a produzir maior quantidade de radicais microbicidas de oxignio
Ocorre estimulao das reaces de desgranulao dos neutrfilos, macrfagos, basfilos e
eosinfilos.

112

Receptores mais abundantes em cada tipo de clula
Sistema gastro-intestinal:
CCR9
Pele:
CCR10
Neutrfilos:
CXCR1
CXCR2
CXCR4
Eosinfilos:
CCR1
CCR3
Clulas B nave:
CXCR5
Clulas T nave:
CCR7
Macrfagos:
CCR2
Clulas dendrticas maduras:
CCR7
Clulas T
H
1:
CCR1
CCR5
CXCR3
Clulas T
H
2:
CCR3
CCR4
CCR8
Funo de cada quimiocina
CXCL1-3 e CXCL5-8:
Envolvidos no recrutamento neutroflico
Ligam-se aos receptores CXCR1 e CXCR2
113

CXCL4:
Envolvido na agregao plaquetria
CXCL9-11:
Envolvidos no recrutamento de clulas T efectoras
Ligam-se ao receptor CXCR3
CXC12:
Ligando do receptor CXCR4, que co-receptor do HIV (desempenha um importante papel na
patogenia do HIV). Este receptor expresso em clulas do sistema macrofgico e leucocitrio.
Envolvido a mielopoiese e diferenciao dos linfcitos B.
CXC13:
Ligando do receptor CXCR5
Envolvido na migrao das clulas B para os folculos linfides (homing das clulas B).
XCL1 (linfolactina):
Produzida pelas clulas T, clulas NK e clulas dendrticas. Desempenha um importante papel
na quimiotaxia.
CX3CL (fractalcina)
Liga-se ao receptor CX3R1, que se encontra expresso nas clulas T, clulas NK, moncitos e
clulas endoteliais activadas.
CCL11, CCL24, CCL26:
Constituem os ligandos do CCR3.
So eotaxinas actuam promovendo a quimiotaxia dos eosinfilos, embora tambm sejam
quimiocinas dos basfilos e clulas T
H
2
Na asma brnquica existe, por isso, participao do CCR3, de tal modo que o bloqueio da aco
deste receptor poder impedir a progresso de reaces alrgicas crnicas dependentes de
eosinfilos. Note-se que as citocinas produzidas pelas clulas T
H
2 induzem a produo de
quimiocinas especficas atravs de vias activadas pelo STAT6.
CCL19 (MIP-3) e CCL21 (SLC):
Constituem os ligandos do CCR7, estando envolvidos na migrao das clulas dendrticas e
clulas T para as zonas timo-dependentes dos rgos linfides secundrios (onde ocorre
apresentao de antignios).
As clulas endoteliais e as clulas estromais secretam CCL21, que atrai as clulas dendrticas
para o rgo linfide em desenvolvimento. Subsequentemente, as clulas dendrticas secretam
CCL21 e CCL19, que atraem as clulas T para os gnglios linfticos em desenvolvimento. Assim,
quando as clulas dendrticas so expostas a antignios e a PAMP, estas passam a sobre-regular
os seus receptores CCR7.
114

Correlaes imunolgicas e clnicas
As clulas T
H
1 produzem
IFN-, que induz a
produo de IP-10
(CXCL10) e Mig (CXCL9)
por parte das clulas
endoteliais.
Subsequentemente,
estes factores actuam no
receptor CXCR3 das
clulas TH1. Para alm
disso, o IFN- induz a
produo de MCP-1
(CCL2) por parte das
clulas endoteliais o
MCP-1 liga-se ao CCR2 e
ao CCR10 dos moncitos, recrutando-os.
As clulas T
H
2 produzem IL-4 e IL-13, que induz a produo de eotaxinas por parte das clulas
endoteliais. Subsequentemente, estes factores actuam nos receptores CXCR3 das clulas T
H
2 e
eosinfilos.
Os vrus podem escapar defesa
do hospedeiro, modificando os
receptores das quimiocinas. De
facto, o CCXR4 e o CCR5 so co-
receptores para o HIV. Numa fase
inicial, ocorre ligao ao CCR5 e
subsequente infeco dos
macrfagos e clulas T de
memria. Ao longo do tempo, as
estirpes passam a entrar nos
linfcitos T
H
por via do CXCR4, o que lhe confere maior sobrevivncia. No admira, portanto, que
mutaes no CCR5 possam conferir resistncia ao HIV.

115

116

Imunidade inata
A imunidade inata diz respeito aos processos despoletados aquando do primeiro contacto com um
determinado microorganismo (antignio). A imunidade inata no-especfica e inclui vrios elementos,
nomeadamente:
Barreiras naturais do organismo contra agentes infecciosos, tais como a pele e as membranas
mucosas. De facto, quando intacta, a pele impermevel maioria dos agentes infecciosos.
Para alm disso, o suor e as secrees sebceas contm cido lctico e cidos gordos, que
comprometem a sobrevivncia da maioria das bactrias. Por seu turno, as secrees mucosas e
os fluidos corporais contm vrios componentes bactericidas, tais como o cido no suco
gstrico, a espermina e o zinco no esperma, a lactoperoxdase no leite, e a lisozima nas
lgrimas, secrees nasais e saliva.
Algumas clulas, tais como as clulas Natural Killer, os macrfagos e os neutrfilos.
Algumas protenas, tais como os elementos do sistema de complemento e os interferes.

Contrariamente imunidade adquirida, a eficcia da imunidade inata no aumenta aps exposio a um
determinado microorganismo. Para alm disso, a imunidade inata no gera memria, contrariamente
imunidade adquirida, que se caracteriza pela gnese de memria de longo prazo.
Os processos de imunidade inata actuam, sobretudo, num sentido de destruir os microorganismos e
activar o sistema imune adquirido - para isso, so activados vrios processos, tais como a fagocitose e a
resposta inflamatria. Alguns componentes do sistema imune inato (tais como os neutrfilos) apenas
destroem os microorganismos, enquanto outros (tais como os macrfagos e as clulas dendrticas)
revelam-se simultaneamente capazes de destruir os microorganismos e activar o sistema imune
adquirido (atravs da apresentao de antignios s clulas T).
Embora a imunidade inata possa ser capaz de eliminar alguns microorganismos e prevenir a ocorrncia
de algumas infeces, esta no suficiente para assegurar a sobrevivncia humana. De facto, as
crianas com imunodeficincias graves combinadas (SCID), que no apresentam imunidade adquirida,
sofrem infeces potencialmente fatais de repetio.
117

Vrios componentes da imunidade inata reconhecem os elementos do non-self atravs da deteco de
certos padres expressos apenas superfcie dos microorganismos patognicos (pathogen-associated
molecular patterns - PAMPs) estes PAMPs consistem em glicdeos ou lipdeos, no sendo expressos na
superfcie das clulas humanas. Ora, os componentes da imunidade inata expressam receptores capazes
de reconhecer esses PAMPs, sendo esses receptores designados por pattern-recognition receptors
(PRR). Assim, os componentes da imunidade inata no expressam receptores especficos para cada
microorganismo em particular, mas so capazes de distinguir o self do non-self.
Como sabido, o tipo de resposta imune montada pelo organismo depende do tipo de microorganismo
infeccioso a ttulo de exemplo, alguns tipos de bactrias potenciam o desenvolvimento de uma
resposta humoral, enquanto outros potenciam a gnese de uma resposta mediada por clulas. Ora, o
processo que determina o tipo de resposta gerada depende das citocinas produzidas pelos macrfagos,
o que, por sua vez, depende dos PRRs especficos activados pelo organismo. Assim, proceder-se-
descrio de trs exemplos ilustrativos destes processos de reconhecimento de padres:
1. A endotoxina um lipopolissacardeo (LPS) expresso superfcie da maioria das bactrias
Gram negativas (mas no nas clulas humanas). O LPS constitudo por vrias pores, de
entre as quais se destaca o lpideo A, que constitui a causa mais importante de choque sptico
e morte em pacientes hospitalizados. Ora, quando libertado a partir da superfcie bacteriana, o
LPS combina-se com a LPS-binding protein, um componente normal do plasma. Por sua vez,
esta protena de ligao transfere o LPS para ligao ao receptor CD14, que se encontra
expresso superfcie dos macrfagos. Subsequentemente, ocorre estimulao do Toll-like
receptor 4 (TLR4), o que conduz produo de vrias citocinas, tais como a IL-1, IL-6, IL-8 e
TNF. Para alm disso, a activao do TLR4 promove a expresso da protena B7, uma molcula
co-estimulatria necessria para activao das clulas T
H,
e subsequente produo de
anticorpos.
O TLR4 um dos onze Toll-like receptors existentes, cada um dos quais desempenha funes
distintas. A ttulo de exemplo, o TLR2 reconhece PAMPs distintos, sinalizando maioritariamente
para a presena de bactrias Gram positivas e leveduras. Por seu turno, o TLR5 apresenta
grande capacidade de ligao flagelina. De qualquer modo, a maioria das vias de transduo
de sinal activadas pelos TLR dependem da activao do gene MyD88 (myeloid differentiation
primary response gene 88).
118

2. Os NOD-like receptors (NLR) constituem uma classe de PRR citoslicos (contrariamente aos
TLRs, que so transmembranares), sendo capazes de reconhecer vrios sinais de perigo
(danger-associated molecular patterns DAMPs) que interajam com ligandos intracelulares
solveis. Para alm disso, os NLR so capazes de reconhecer sinais endgenos de danos
celulares, tais como os cristais de cido rico. Note-se que so conhecidos, pelo menos, 23
tipos diferentes de NLR, os quais so divididos em quatro subfamlias distintas, de acordo com
os seus domnios efectores N-terminal. Ora, esses domnios possibilitam o recrutamento de
caspases intracelulares, as quais activam vias apoptticas ou pr-inflamatrias (atravs da
activao do factor de transcrio NF-B). De facto, essas caspases promovem a formao do
inflamossoma, um grande complexo citoplasmtico capaz de activar caspases inflamatrias e
potenciar a gnese de IL-1 e IL-18.
O conhecimento acerca dos NLR permitiu compreender porque que o alum actua como
adjuvante vacinal. De facto, o alum captado pelas clulas fagocticas, onde activa o NALP3
um NLR. Por sua vez, o NALP3 activa a caspase 3, o que culmina na activao do inflamossoma
subsequente activao de interleucinas pr-inflamatrias.

3. Vrias bactrias e leveduras expressam manano na sua superfcie o manano um
polissacardeo (nomeadamente, um polmero de manose) que no expresso pelas clulas
humanas. Ora, o manano capaz de se ligar a um PRR designado por lectina de ligao ao
manano (MBL; protena de ligao ao manano), o que subsequentemente activa o
complemento, potenciando na morte dos microorganismos. O MBL tambm actua como uma
opsonina, pois liga-se a receptores expressos superfcie dos fagcitos, promovendo a
ocorrncia de fagocitose. Note-se que o MBL uma protena srica normal, cuja concentrao
plasmtica encontra-se amplamente aumentada durante a resposta de fase aguda.
A resposta de fase aguda, que consiste num aumento dos nveis de vrias protenas plasmticas (tais
como a protena C reactiva e a protena de ligao manose), tambm constitui um elemento da
imunidade inata. As protenas de fase aguda so sintetizadas no fgado, mediando respostas no-
especficas contra os microorganismos ou outras formas de leso tecidular. De entre os factores
potenciadores da sntese de protenas de fase aguda, destaque para a IL-1, IL-6 e TNF estas citocinas
so produzidas pelos macrfagos aps exposio aos microorganismos.
119

Algumas protenas de fase aguda ligam-se superfcie
das bactrias e activam o sistema de complemento, o
qual actua num sentido de destruir as bactrias. A ttulo
de exemplo, a protena C reactiva liga-se a um glicdeo
expresso na parede celular do Streptococcus
pneumoniae. Por seu turno, como mencionado
anteriormente, o MBL liga-se ao manano expresso
superfcie de vrias bactrias.
As defensinas constituem outro importante
componente da imunidade inata. As defensinas so
peptdeos altamente catinicos que criam poros nas
membranas das bactrias, promovendo a sua
destruio. Desconhece-se, contudo, como que as
defensinas distinguem entre os microorganismos e as clulas do self.
As defensinas so maioritariamente expressas nos tractos gastro-intestinal e respiratrio inferior.
Contudo, enquanto os neutrfilos e as clulas de Paneth (presentes nas criptas intestinais) expressam -
defensinas, o tracto respiratrio produz -defensinas. As -defensinas tambm exercem aces anti-
vricas de facto, estas defensinas interferem com a ligao do HIV ao receptor CXCR4, bloqueando a
entrada deste vrus nos linfcitos. A produo de -defensinas pode, assim, explicar porque que
alguns indivduos infectados pelo HIV constituem no-progressores a longo prazo.
A APOBEC3G (enzima de edio do RNA da apolipoprotena B) constitui tambm um importante
membro das defesas inatas do hospedeiro contra as infeces por retrovrus. De facto, a APOBEC3G
actua num sentido de desaminar citosinas no DNA e mRNA retrovrico, causando hipermutaes no
material gentico dos retrovrus e, por conseguinte, reduzindo a sua infectividade. Por seu turno, o HIV
defende-se da aco da APOBEC3G, atravs da expresso de Vif (protena de infectividade vrica), que
impede a ocorrncia das hipermutaes.
Imunidade inata e consideraes clnicas
Patologias associadas a dfices da imunidade inata
Vrias patologias esto associadas a dfices da imunidade inata, nomeadamente:
O dfice de MyD88 uma imunodeficincia primria que afecta especificamente a funo dos
TLR. O MyD88 encontra-se envolvido na sinalizao da maioria dos TLRs, de tal modo que os
pacientes com dfice de MyD88 encontram-se particularmente susceptveis a infeces
causadas por bactrias piognicas Gram positivas (tais como o Streptococcus pneumoniae).
Alguns polimorfismos do TLR5 impedem a activao deste receptor por parte da flagelina.
Assim, estes polimorfismos resultam num aumento da susceptibilidade legionelose (doena
do Legionrio).
As criopirinopatias so doenas auto-inflamatrias causadas por mutaes activadoras do NLR-
P3 (o que resulta num aumento da produo de IL-1). As criopirinopatias incluem a sndrome
auto-inflamatria familiar associada ao frio, a sndrome de Muckle-Wells e a doena
inflamatria multissistmica de incio neonatal.

120

Activao dos TLRs e modulao da resposta imune alrgica
Em pacientes alrgicos e asmticos, tm sido investigadas terapias baseadas no TLR, as quais tm por
alvo a interaco entre as clulas dendrticas e as clulas T de facto, esta interaco constitui um
componente crtico da modulao da resposta imune T
H
2 associada a inflamao alrgica. Ora, como os
TLRs encontram-se amplamente expressos nas clulas dendrticas (mas no nas clulas T), as terapias
baseadas no TLR tm por objectivo a activao das clulas dendrticas, levando-as a produzir um padro
de citocinas que favorea a inibio das respostas T
H
2. Na maioria dos estudos, procedeu-se avaliao
dos agonistas TLR9, embora tambm tenham sido conduzidos estudos centrados na aco dos agonistas
TLR4 e TLR7/8 de qualquer modo, os resultados em humanos desses estudos ainda no sejam
conclusivos.
De acordo com estudos recentes, a administrao de vacinas anti-alrgicas contendo um agonista TLR9
conjugado com um alergnio adjuvante poder-se- revelar benfica, na medida em que o agonista TLR9
pode aumentar a imunogenicidade do alergnio, potenciando a eficcia da vacina. Contudo, so ainda
contraditrios, de tal modo que so necessrios mais estudos em humanos.

121

Sistema complemento
O sistema complemento o maior efector do ramo humoral do sistema imune. Em 1890, Jules Bodet
percebeu que no sangue existiam duas substncias com actividade bacterioltica: anticorpos especficos
antibacterianos e um conjunto complexo de protenas termo-lbeis, as quais, sabe-se actualmente,
pertencem ao sistema complemento.
Funes do sistema complemento
As actividades biolgicas do sistema complemento afectam tanto o ramo da imunidade inata como da
adquirida. Aps activao inicial, os diversos componentes do sistema complemento interactuam entre
si, atravs de uma cascata altamente regulada, levando a cabo determinadas funes:
Lise de clulas, bactrias e vrus.
Opsonizao (este processo promove a fagocitose de antignios particulados)
Ligao a receptores especficos expressos nas clulas do sistema imunitrio, com subsequente
induo da libertao de mediadores inflamatrios e molculas imunorreguladoras.
Immune clearance: Este processo que consiste na remoo da circulao de complexos imunes,
e subsequente deposio destes complexos no bao e no fgado.

Componentes do sistema complemento
As protenas e glicoprotenas que compem o sistema complemento so sintetizadas, na sua maioria,
nos hepatcitos, embora tambm haja sntese destes componentes nos moncitos circulantes,
macrfagos tecidulares e clulas epiteliais do tracto gastrointestinal e genito-urinrio. A maior parte
destes componentes circula na forma de pro-enzimas (zimognios). Ou seja, estes componentes
circulam funcionalmente inactivos, sendo que, para serem activados, devero sofrer clivagem
proteoltica.
Os componentes do sistema complemento so designados por nmeros e letras (C1-C9) ou por
designaes simples. Na maioria dos casos, o fragmento mais pequeno resultante de uma clivagem
proteoltica designado por a, enquanto o fragmento maior designado por b (a ttulo de exemplo,
a clivagem de C3 origina C3a e C3b, sendo que o fragmento C3a apresenta menores dimenses). Note-
se que o C2 constitui uma excepo, na medida em que o fragmento C2a maior que o fragmento C2b.
122

Os fragmentos maiores tm tendncia a aglomerar-se perto do local de activao, enquanto os
fragmentos mais pequenos tm tendncia a difundirem-se e a iniciar respostas inflamatrias, ligando-se
a determinados receptores. Para alm disso, estes componentes podem interactuar entre si, formando
complexos com actividade enzimtica (e.g. C4b2a, C3bBb).
Activao do complemento
As etapas iniciais de activao do complemento culminam com a formao do factor C5b, que pode ser
gerado por intermdio de trs vias: via clssica, via alternativa e via das lectinas. Todas estas vias
conduzem, subsequentemente, formao do complexo de ataque membrana.
Via clssica
A via clssica inicia-se com a
formao de complexos solveis
antignio-anticorpo ou com a
ligao de anticorpos a alvos como
as paredes bacterianas. De facto, a
IgM e determinadas classes de IgG
(IgG1, IgG2 e IgG3) so capazes de
activar a via clssica do
complemento, embora a IgM active
o sistema de complemento de
forma mais potente ( necessria
apenas uma molcula de IgM contra
1000 molculas de IgG para que
ocorra activao desta via).
A formao do complexo imune
induz alteraes conformacionais na
poro Fc da IgM, expondo o local
de ligao do componente C1. Por
seu turno, o complexo C1 inclui numa molcula C1q, duas molculas C1r e duas C1s, sendo este
complexo estabilizado pelo clcio. De referir que cada um dos monmeros C1r e C1s possui um domnio
cataltico e outro de interaco, o qual lhes permite interagir entre si e com o C1q.
A ligao do C1q ao Fc induz uma alterao conformacional em C1r, o qual convertido numa protease.
Por sua vez, o C1r cliva o C1s, convertendo-a, igualmente, numa enzima activa. Por sua vez, C1s
responsvel pela clivagem de C4 e C2, formando C4a, C4b, C2a e C2b. Subsequentemente, os
componentes C4b e C2a juntam-se, formando o complexo C4b2a, tambm designado por C3 convertase
como o seu nome indica, este complexo converte o C3 na sua forma activa. Por oposio, os
fragmentos pequenos C2b e C4a difundem-se na circulao, sendo que o C4a uma anafilotoxina, ou
seja, um mediador da inflamao.
Uma nica molcula de C3 convertase pode gerar mais de 200 molculas de C3b, de tal modo que a
aco desta enzima essencial para amplificar a activao do sistema de complemento. Algum do C3b
junta-se ao C4b2a previamente formado, originando o complexo C4b2a3b. Este complexo tambm
designado por C5 convertase, na medida em que cliva o componente C5 em C5a (que difunde para a
circulao) e C5b (que se liga ao C6 e inicia a formao do complexo de ataque membrana). De referir
que, parte do C3b formado difunde-se para a circulao, funcionando como uma opsonina.
123

Via alternativa
Embora esta via tambm culmine com a formao de C5b, a sua iniciao independente de complexos
imunes. De facto, na maioria dos casos, esta via activada por constituintes da superfcie de clulas
estranhas ao organismo, tais como constituintes das paredes bacterianas.
Nesta via, o C3 sujeito a uma lenta e espontnea hidrlise, formando C3a e C3b. Por sua vez, o C3b
capaz de se ligar a antignios estranhos ou s clulas do self. Contudo, a presena de elevados nveis de
cido silico presentes na maioria das clulas do self inactiva rapidamente o C3b ligado a estas ltimas,
de tal modo que no se estabelecem reaces contra as clulas do self.
O C3b ligado superfcie das clulas exgenas capaz de se ligar ao factor B, que serve de substrato
uma protena chamada factor D. Assim, o factor D cliva o C3b-factorB, libertando o pequeno fragmento
Ba e originando C3bBb (constitudo pelo C3b associado com a poro maior do factor B). O C3bBb tem
funo de C3 convertase, sendo estabilizado pela properdina, que aumenta a sua semivida.
124

Dado actuar como C3 convertase, o C3bBb consegue gerar ainda mais C3a e C3b este passo auto-
catalisado e permite uma grande amplificao. De facto, o C3b formado neste ltimo passo, pode-se
juntar C3 convertase, originando o complexo C3bBb3b, que exibe funo de C5 convertase.

Via das lectinas
Esta via, tal como a alternativa, no depende da formao de complexos auto-imunes. De facto, a sua
activao depende da ligao da lectina a resduos de manose constituintes de glicoprotenas ou
hidratos de carbono localizados na superfcie de micoorganismos.
Esta lectina pode se encontrar sob a forma de MBL (manose-binding lecitin), uma protena de fase
aguda, produzida em resposta inflamao. Aps a MBL se ligar superfcie dos microorganismos,
ocorre recrutamento das proteases MASP-1 e MASP-2, cujas funes se assemelham s da C1r e C1s. De
facto, a MASP-1 e 2 so capazes de clivar a C4 e C2, originado C3 convertase e, posteriormente, C5
convertase. Mais uma vez, este processo culmina na formao de C5b, o qual necessrio para a sntese
do complexo de ataque membrana.
125

Formao do complexo ataque membrana
Como referido anteriormente, o fragmento C5b pode ser formado a partir de trs vias distintas. De
qualquer forma, qualquer que tenha sido a via seguida, o C5b liga-se membrana celular.
Subsequentemente, o fragmento C6 liga-se ao C5b, impedindo que este seja degradado (note-se que o
C5b apresenta um reduzido tempo de semi-vida). Gera-se, assim, o complexo C5b6.
At este ponto, todas as reaces descritas envolvendo o sistema de complemento ocorriam ao nvel da
superfcie hidroflica das membranas ou do fluido plasmtico. Contudo, quando o C5b6 se liga ao C7,
forma-se um complexo que sofre uma alterao estrutural, passando a expor as suas regies
hidrofbicas.
Se esta reaco ocorrer na membrana de uma clula-alvo, a exposio dos locais hidrofbicos permite
que o complexo C5b67 seja inserido na bicamada fosfolipdica. Por oposio, se esta reaco ocorrer
num complexo imune (ou em outra superfcie activadora no-celular), os locais hidrofbicos expostos
so incapazes de ancorar o complexo C5b67 subsequentemente, este complexo libertado, inserindo-
se na membrana das clulas mais prximas e mediando a lise destas (lise innocent-bystander).
Normalmente, as protenas reguladoras previnem a ocorrncia deste fenmeno, todavia, em alguns
126

estados patolgicos, ocorre leso celular e tecidular secundria a este fenmeno de lise innocent-
bystander.
A ligao do C8 ao C5b67 membranar induz uma alterao conformacional no C8, de tal modo que este
fragmento tambm sofre uma alterao estrutural anfiflica, passando a expor a sua regio hidrofbica,
que interage com a membrana plasmtica. Subsequentemente, o complexo C5b678 formado cria um
pequeno poro (com um dimetro de 10), o qual pode induzir lise dos eritrcitos, mas no das clulas
nucleadas.
Assim, a formao do complexo de ataque da membrana requer uma etapa adicional, a qual consiste na
ligao e polimerizao de C9 ao complexo C5b678. O C9 uma molcula similar a uma perforina, sendo
que entre 10-17 molculas de C9 so capazes de se ligar a um nico complexo C5b678.
Durante a sua polimerizao, as molculas C9 sofrem mais uma transio hidroflica-anfiflica, de tal
modo que estas tambm passam a ser capazes de se inserir na membrana. Gera-se, assim, um
complexo de ataque membrana (MAC) completo, o qual apresenta uma forma tubular e um poro
funcional de 70-100. Em termos estruturais, o MAC constitudo por um complexo C5b678, rodeado
por um complexo de vrios C9. Uma vez que os ies e pequenas molculas so capazes de se difundir
livremente pelo canal central do MAC, a clula deixa de ser capaz de manter a sua estabilidade osmtica
e, por conseguinte, morre.

Regulao do sistema complemento
Vrios elementos do sistema de complemento so capazes de atacar clulas do hospedeiro, bem como
antignios estranhos e microorganismos, de tal modo que so necessrios mecanismos reguladores que
consigam restringir a actividade do sistema de complemento aos seus alvos desejados.
Um dos mecanismos reguladores comuns a todas as vias do complemento prende-se com o facto de
todos os componentes deste sistema sofrerem rpida e espontnea inactivao, caso no reajam e
sejam estabilizados por outros componentes.
Para alm disso, existem vrias protenas reguladoras capazes de inactivar vrios componentes do
complemento. A ttulo de exemplo, o inibidor da glicoprotena C1 (C1Inh) capaz de formar um
complexo com o C1r2s2, promovendo a sua dissociao do C1q e, por conseguinte, prevenindo ulterior
activao do C4 e C2.
127

As reaces catalisadas pelas convertase do C3 constituem a principal etapa de amplificao do
processo de activao do sistema de complemento, na medida em que permitem gerar centenas de
molculas C3b. Ora, o C3b gerado por essas enzimas capaz de se lesar as clulas saudveis mais
prximas, quer opsonizando-as, quer induzindo a formao do MAC. Contudo, estes fenmenos
deletrios so minimizados pelo facto de o C3b sofrer hidrlise espontnea a partir do momento em
que se afasta 40nm das convertases C4b2a ou C3bBb.
Para alm disso, a destruio tecidular mediada pelo C3b limitada por parte de um conjunto de
protenas que regulam a actividade da C3 convertase. Essas protenas reguladoras contm sequncias
aminoacdicas repetitivas designadas por pequenas repeties de consenso (SCR), sendo codificadas a
partir do gene RCA sito no cromossoma 1.
Na via clssica e das lectinas, trs protenas RCA estruturalmente distintas actuam de modo similar para
prevenir a formao da convertase C3. Essas protenas reguladoras incluem a protena de ligao ao
C4b (C4bBP), o CR1 (receptor do complemento tipo 1) e a MCP. Cada uma dessas protenas liga-se ao
C4b prevenindo a sua ligao ao C2a. Aps ter ocorrido ligao do C4bBP, CR1 ou MCP ao C4b, este
factor sofre uma clivagem, a qual operada pelo factor I gera-se, assim, o fragmento membranar C4d
e o fragmento solvel C4c.
Uma sequncia reguladora similar actua num sentido de prevenir a formao da convertase do C3 da via
alternativa (C3bBb). Neste caso, o CR1, o MCP ou o factor H ligam-se ao C3b, impedindo a sua
associao com o factor B. Aps ter ocorrido ligao do CR1, MCP, ou factor H ao C3b, o factor I cliva o
C3b em dois fragmentos o fragmento membranar iC3b e o fragmento solvel C3f. A ulterior clivagem
do iC3b pelo factor I gera C3c (um factor solvel) e C3dg (um factor membranar).
Vrias protenas RCA tambm actuam na convertase C3, causando a sua dissociao. Entre essas
protenas, destaque para a C4bBP, CR1 e para o factor H. Para alm disso, o factor DAF (CD55), que se
encontra ancorado covalentemente a um glicofosfolipdeo membranar, tambm capaz de dissociar a
convertase C3.
Cada uma dessas protenas RCA acelera a dissociao da convertase C3, por induo da libertao do
seu componente com actividade cataltica (nomeadamente o C2a ou o Bb). Aps ter ocorrido
dissociao da convertase do C3, o factor I cliva o componente C4b ou C3b (que permanece ligado
membrana), inactivando irreversivelmente a convertase C3.
As protenas reguladoras tambm actuam ao nvel do MAC. De facto, vrias protenas plasmticas so
capazes de se ligar ao C5b67, impedindo que este complexo se insira na membrana das clulas mais
prximas. Para alm disso, a protena S (presente no plasma) capaz de se ligar ao C5b67, induzindo
uma transio hidroflica deste componente e, por conseguinte, impedindo a sua insero na membrana
das clulas mais prximas.
A lise mediada pelo complemento mais eficaz caso as clulas-alvo do sistema complemento
pertenam a uma espcie diferente. Este fenmeno depende de duas protenas membranares que
bloqueiam a formao do MAC estas duas protenas, que se encontram presentes na membrana de
vrios tipos celulares, designam-se por HRF (homologous restriction factor) e MIRL (CD59 - membrane
inhibitor of reactive lysis). Tanto o HRF como o MIRL protegem as clulas do self da lise no-especfica
mediada pelo sistema de complemento de facto, estes dois factores so capazes de se ligar ao C8,
prevenindo a formao do complexo poli-C9 e, por conseguinte, a sua insero na membrana
plasmtica. Todavia, como anteriormente referido, o MIRL e o HRF apresentam restrio homloga, ou
seja, apenas inibem elementos do complemento da mesma espcie.
128

Consequncias biolgicas da activao do sistema complemento
O sistema de complemento actua como um importante mediador da resposta humoral, amplificando-a
e convertendo-a num mecanismo de defesa eficaz na destruio dos microorganismos patognicos.
Enquanto o MAC medeia a lise celular, outros componentes do sistema de complemento participam na
resposta inflamatria, opsonizao de antignios, neutralizao vrica e remoo dos complexos imunes.
Muitas das actividades biolgicas do sistema de complemento dependem da ligao de fragmentos do
complemento a receptores expressos por vrias clulas. Para alm disso, alguns receptores do
complemento desempenham um importante papel na regulao da actividade deste sistema, na medida
129

em que se ligam aos componentes activos do sistema de complemento e os degradam em produtos
inactivos.
Aces do MAC
O MAC capaz de lisar bactrias gram-negativas, parasitas, vrus, eritrcitos e clulas nucleadas. Uma
vez que as vias alternativas e da lectina normalmente ocorrem sem que se verifique uma interaco
antignio-anticorpo prvia, estas vias actuam como importantes defesas imunes inatas contra
microorganismos patognicos. Por outro lado, a necessidade de uma reaco antignio-anticorpo inicial
para que ocorra activao da via clssica complementa as defesas inatas no-especficas com um
mecanismo de defesa mais especfico.
A aco do sistema de complemento deveras importante na defesa contra vrus, sendo crucial para a
conteno de uma infeco viral aguda, bem como para a proteco contra as reinfeces. De facto, a
maior parte (se no todos) os vrus com invlucro so susceptveis lise mediada pelo complemento.
O sistema de complemento ainda relativamente eficaz contra a maioria das bactrias gram-negativas.
Todavia, algumas bactrias gram-negativas e a maior parte das bactrias gram-positivas dispem de
mecanismos que lhes permitem evitar os danos mediados pelo sistema de complemento. A ttulo de
exemplo, as estirpes bacterianas com expresso de lipopolissacardeos mais longos e em maior
quantidade manifestam maior resistncia aco do MAC (que deixa de ser to facilmente inserido na
membrana bacteriana).
As bactrias gram-positivas so, normalmente, resistentes lise mediada pelo sistema de complemento,
pois a espessa camada de peptidoglicano expressa na sua parede celular impede a insero do MAC na
membrana interna. Para alm disso, algumas bactrias gram-positivas expressam elastase, sendo que
esta enzima inactiva o C3a e o C5a, impedindo que esses produtos induzam uma resposta inflamatria.
Para alm desses mecanismos de evaso, vrios microorganismos contm protenas capazes de
interromper as cascatas do sistema de complemento sua superfcie, mimetizando o efeito das
protenas C4bBP, CR1 e DAF.
A lise das clulas nucleadas requer a formao de mltiplos MAC (por oposio, a lise de clulas
anucleadas requer a presena de um nico MAC). De facto, algumas clulas nucleadas, tais como a
maioria das clulas tumorais, so capazes de endocitar o MAC e de restabelecer os danos membranares
causados por este complexo. Desta forma, as clulas conseguem restaurar a sua estabilidade osmtica e
sobreviver isso explica porque que a lise mediada pelo sistema de complemento pouco eficaz
contra clulas tumorais.
Inflamao
Vrios peptdeos gerados aquando da formao do MAC desempenham um importante papel no
desenvolvimento de uma resposta inflamatria eficaz. De facto, os peptdeos C3a, C4a e C5a
(conhecidos colectivamente como anafilatoxinas) ligam-se a receptores dos mastcitos e basfilos
sanguneos, induzindo desgranulao com subsequente libertao de histamina e outros mediadores
activos. Para alm disso, as anafilatoxinas induzem contraco do msculo liso e aumento da
permeabilidade vascular. Dessa forma, a activao do sistema complemento resulta no influxo de
anticorpos e clulas fagocticas para o local de contacto com o antignio.
As actividades destas anafilatoxinas so reguladas pela carboxipeptidase N, uma protease srica que
remove um resduo terminal de arginina destes peptdeos. Assim, a carboxipeptidase N actua no C3a e
130

no C4a, gerando peptdeos completamente inactivos; e actua no C5a, gerando um metabolito com
menor actividade.
O C3a, o C5a e o C5b67 so ainda capazes de promover a adeso neutroflica e monocitria ao endotlio
vascular, bem como o processo de diapedese. Para alm disso estes factores, sobretudo o C5a,
apresentam importantes propriedades quimiotticas.
Opsonizao
O C3b constitui a principal opsonina do sistema de complemento, embora o C4b e o iC3b tambm
apresentem aco opsonizante. Assim, a amplificao que ocorre na sequncia da activao de C3 leva a
que os complexos imunes e os antignios particulados passem a ser cobertos por C3b.
As clulas fagocticas (tal como outras clulas) expressam receptores do complemento (CR1, CR3 e CR4),
os quais so capazes de se ligar ao C3b, C4b ou iC3b. Assim, um antignio opsonizado com C3b passa a
ser capaz de se ligar a clulas que expressem o receptor CR1 caso essa clula seja um fagcito, ocorre
induo da fagocitose.
Para alm disso, sabe-se que a activao das clulas fagocticas por parte de vrios agentes (tais como a
anafilatoxina C5a) resulta num aumento substancial do nmero de CR1 expressos nos fagcitos, o que
facilita a fagocitose dos antignios envoltos por C3b.
Neutralizao de infeces virais
Para a maior parte dos vrus, a ligao de anticorpos plasmticos s subunidades repetidas das protenas
estruturais virais cria complexos imunes particulados, os quais permitem a activao do sistema de
complemento pela via clssica. Para alm disso, alguns vrus (tais como o retrovrus, o vrus de Epstein-
Barr, o vrus da doena de Newcastle, e o vrus da rubola) so capazes de activar a via alternativa, a via
das lectinas ou, mesmo, a via clssica na ausncia de anticorpos.
O sistema complemento medeia a neutralizao viral atravs de vrios mecanismos. A neutralizao ,
em parte, conseguida atravs da formao de agregados virais de maiores dimenses, uma vez que
esses agregados reduzem o nmero total de partculas vricas infecciosas. De facto, a ligao do sistema
complemento superfcie das partculas vricas cria um espesso invlucro proteico que bloqueia a
adeso vrica s clulas do hospedeiro.
131

Para alm disso, a formao destes depsitos tambm facilita a ligao das partculas virais aos
receptores de complemento CR1, promovendo a sua fagocitose e destruio intracelular. Por fim, como
j foi referido, o complemento eficaz a lisar a maior parte dos vrus com invlucro.
Remoo dos complexos imunes de circulao
O sistema complemento essencial para remover os
complexos imunes de circulao. Pensa-se que os dfices
do sistema complemento interfiram com a solubilizao e
eliminao dos complexos imunes. Como resultado, esses
complexos acumulam-se, induzindo danos tecidulares
pelo prprio sistema de complemento. A lpus
eritematosa sistmica constitui um exemplo deste
paradoxo nos pacientes com lpus, ocorre produo de
grandes quantidades de complexos imunes, bem como
importantes fenmenos de lise mediada pelo sistema de
complemento (o que resulta em danos tecidulares).
Todavia, paradoxalmente, os dfices do sistema de
complemento (nomeadamente, de C1, C2, C4 e CR1)
predispem os indivduos para o desenvolvimento de
lpus.
Em termos moleculares, sabe-se que o C3b ligado aos
complexos imunes passa a ser capaz de se ligar ao CR1
expresso nos eritrcitos. Deste modo, os eritrcitos
transportam os complexos imunes envolvidos pelo C3b,
transportando-os para o fgado e bao. Nesses rgos, os
complexos imunes so separados dos eritrcitos, sofrendo
ulterior fagocitose, o que previne a sua deposio
tecidular. Ora, nos pacientes com lpus, os dfices de C1,
C2 e C4 levam a que menos C3b seja capaz de se ligar aos
complexos imunes. Consequentemente, ocorre
acumulao destes complexos e subsequente leso
tecidular.

132

Tabelas-sntese de imunodeficincias
133

134

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136

Glossrio de Clusters of Differentiation (CD)
CD1 Liga-se 2-microglobulina, participando na apresentao de antignios no peptdicos. O CD1d
responsvel pela activao das clulas NKT.
CD2 Molcula de adeso celular expressa nas clulas T e NK (tambm chamada de LFA-2). Liga-se ao
CD58 (LFA-3).
CD3 Marcador das clulas T, que participa na constituio do complexo TCR. Expresso nas clulas NKT.
CD4 Co-receptor das clulas TH (das quais marcador), ligando-se s subunidades 2 e 2 do MHC II.
Expresso nas clulas T reguladoras.
CD5 Marcador das clulas T, tambm expresso nas clulas B1.
CD8 Co-receptor das clulas Tc (das quais marcador), ligando-se s subunidades 2, 3 e 2-
microglobulina do MHC I.
CD11a Molcula de adeso que corresponde ao LFA-1 (expresso nas clulas T). Interage com os ICAMs.
CD11b Integrina que interage com o ICAM-1. Constitui ainda o receptor CR3 do sistema de
complemento, ligando-se ao iC3b.
CD11c Expresso nas clulas dendrticas mielides. Permite distingui-las das clulas dendrticas
plasmacitides, que no possuem este marcador. Constitui ainda o receptor CR4 do sistema de
complemento, ligando-se ao iC3b.
CD14 Molcula de ligao aos polissacardeos, envolvida na activao dos Toll-like receptors.
CD15a - Corresponde ao Sialil-Lewis X, que se encontra expresso pelos neutrfilos e moncitos,
interagindo com as selectinas endoteliais.
CD16 Marcador das clulas NK, tambm expresso nas clulas NKT. Corresponde ao receptor FcRIII,
estando, por isso, envolvido em fenmenos de citotoxicidade mediada por anticorpos.
CD18 Corresponde protena 2 das integrinas e que, por conseguinte, interage com os ICAMs. As
suas subunidades so designadas por CD11a-d. Mutado na doena de adeso leucocitria tipo I.
CD19 Poro do co-receptor da clula B envolvida na transduo de sinal. Expresso desde a fase de
clulas pr-B. Mutado em alguns pacientes com imunodeficincia comum varivel.
CD20 Marcador das clulas B avaliado no diagnstico da agamaglobulinemia ligada ao X. Participa na
proliferao e diferenciao das clulas B.
CD21 Corresponde ao receptor do C3d (CR2). Participa na formao do co-receptor das clulas B,
tendo por funo, a ligao ao sistema de complemento.
CD22 Inibidor da activao das clulas B. Encontra-se expresso a par com o BCR.
CD24 Marcador expresso desde a fase de clulas pr-B. Corresponde a uma molcula de adeso do
tipo mucin-like.
CD25 Corresponde cadeia do receptor da IL-2. expresso pelas clulas T duplamente negativas
(DN2 e DN3), bem como pelas clulas T activadas. Para alm disso, expresso pelas clulas T
reguladoras e pelas clulas pr-B.
137

CD28 Molcula da clula T, que se liga ao B7 (CD80/CD86) Dessa interaco, resulta o segundo sinal
de activao das clulas T.
CD34 Corresponde protena WASP, responsvel pela modulao do citosqueleto de actina. Mutaes
nesta protena resultam na gnese de sndrome de Wiskott-Aldrich (imunodeficincia ligada ao X), que
afecta as clulas B e as clulas T.
CD35 Corresponde ao receptor CR1 do sistema de complemento, que se liga ao C3b e ao C4b, sendo
essencial como regulador da funo do sistema de complemento e para a clearance de complexos
imunes.
CD40 Expresso nas clulas B, que se liga ao CD40L (expresso nas clulas T) Dessa interaco resulta o
segundo sinal de activao das clulas B.
CD43 Marcador das clulas pr-B.
CD44 Marcador das clulas T duplamente negativas (expresso nas fases DN1 e DN2).
CD45 Expresso em todas as clulas hematopoiticas com excepo dos eritrcitos. Participa na
regulao de vrios processos celulares, tais como o crescimento, diferenciao e proliferao.
Desempenha um papel essencial na activao mediada por antignio das clulas B e T. As clulas T nave
expressam a isoforma CD45RA, enquanto as clulas T efectoras e a generalidade das clulas T de
memria expressam CD45RO, que apresenta maior eficcia.
CD46 Corresponde ao MCP, um factor envolvido na regulao do sistema de complemento
(impedimento da formao da convertase do C3), por ligao ao C3b e ao C4b. Existe em muitas clulas
e constitui o local de ligao do vrus do sarampo e herpes.
CD54 Corresponde ICAM-1, que interage com as integrinas CD18. Corresponde ao receptor do
rinovrus nas clulas do hospedeiro.
CD55 Corresponde ao factor DAF. Encontra-se expresso na maior parte das clulas, estando ancorado
covalentemente a um glicofosfolipdeo membranar (embora tambm se possa ligar ao plasma). Revela-
se capaz de dissociar a convertase C3.
CD58 Molcula de adeso tambm designada por LFA-3. Encontra-se expressa em clulas
apresentadoras de antignios, ligando-se ao CD2 (LFA-2).
CD59 Corresponde ao MIRL, um factor que protege as clulas do self da lise no-especfica mediada
pelo sistema de complemento de facto, este factor capaz de se ligar ao C8, prevenindo a formao
do complexo poli-C9. Dispe de restrio homloga.
CD74 Corresponde cadeia invariante. Liga-se fenda do MHC II intracelular, impedindo a ligao
precoce e indevida de outros peptdeos.
CD80 Corresponde ao B7-1, sendo expresso pelas clulas apresentadoras de antignios. Da sua
interaco com o C28, advm o segundo sinal de activao das clulas T.
CD81 Corresponde ao TAPA1, ou seja, uma protena transmembranar participante na constituio do
co-receptor do BCR.
CD86 Corresponde ao B7-2, sendo expresso pelas clulas apresentadoras de antignios. Da sua
interaco com o C28, advm o segundo sinal de activao das clulas T.
138

CD94 Corresponde ao NKG2, um conjunto de receptores das clulas NK com membros inibidores
(NKG2A) e activadores (NKG2C e NKG2D).
CD95 Corresponde ao Fas Este receptor encontra-se expresso nas clulas T e a sua activao pelo
ligando do Fas (CD95L) induz apoptose da clula T em questo (mecanismo importante para clulas T
auto-reactivas). Por outro lado, os linfcitos T citotxicos expressam CD95L, infligindo apoptose de
clulas tumorais e infectadas.
CD132 Corresponde cadeia do receptor da IL-2. A sua mutao origina uma SCID, caracterizada por
ausncia de funcionalidade das clulas B, T e NK.
CD152 Corresponde ao CTLA-4. Interage com o CD28, inibindo a activao das clulas T.
CD154 Corresponde ao CD40L. Expresso nas clulas T.

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BERNARDO SOUSA PINTO CLUDIA CORREIA

funcionais pode combinar com qualquer das

funcionais. De modo similar, no DNA da cadeia leve , qualquer um dos segmentos de

so transcritos. A poliadenilao diferencial e o splicing de RNA

. Note-se, contudo, que este inventrio resultou da sequenciao do DNA

(que codifica para a cadeia pesada das IgM)

existem dois locais (o local 3 e o local 4) homlogos aos locais 1 e 2

(vide supra). Assim, caso o transcrito primrio seja clivado e poli-adenilado no

), forma-se um mRNA codificante para a forma membranar da cadeia

, forma-se um mRNA codificante para a forma membranar da cadeia pesada .

particular ser activada pelo correspondente superantignio

reconhecido por aquele superantignio. De referir que,

parece gerar CDR1 e CDR2, enquanto a

do TCR do que segmentos V

pode gerar 1,4 x 10

se ligue directamente a um segmento de

, gerando uma unidade VJ

. A juno alternativa dos segmentos dos genes

pode se ligar a outro, produzindo

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