Biologia molecular

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A Biologia Molecular o estudo da Biologia em nvel molecular, com especial foco no
estudo da estrutura e funo do material gentico e seus produtos de expresso, as
protenas. Mais concretamente, a Biologia Molecular investiga as interaces entre os
diversos sistemas celulares, incluindo a relao entre DNA, RNA e sntese proteica.
um campo de estudo alargado, que abrange outras reas
da Qumica, em especial Gentica e Bioqumica.
ndice
1 Relao com outras cincias biolgicas de nvel molecular
2 Tcnicas em Biologia Molecular
o 2.1 Reaco em cadeia da polimerase
o 2.2 Electroforese em gel
o 2.3 Southern blot
o 2.4 Northern blot
o 2.5 Western blot
3 Ligaes Externas
Relao com outras cincias biolgicas de nvel
molecular
Na Biologia Molecular so frequentemente combinadas tcnicas e ideias provindas da
Microbiologia, Gentica, Bioqumica e Biofsica (veja a seco Tcnicas em Biologia
Molecular, mais abaixo). Historicamente, a Microbiologia exerceu um papel
fundamental no desenvolvimento da Biologia Molecular, pois a maioria dos conceitos-
chave e das tcnicas de Biologia Molecular se originou a partir de estudos e
experimentos realizados principalmente com bactrias, fungos e vrus (especialmente
bacterifagos, que so vrus que infectam bactrias). No existindo distines muito
definidas entre as disciplinas mencionadas, pode-se considerar a Biologia Molecular na
interface entre a Bioquimica e a Gentica, como mostra o esquema abaixo.

Esquema correlacionando a Biologia Molecular como uma disciplina na interface da
Bioqumica e da Gentica
A Bioqumica define-se, de uma forma geral, como o estudo das reaces qumicas em
organismos vivos; a Gentica ocupa-se especificamente do estudo das consequncias de
diferenas no material gentico nos organismos. A Biologia Molecular ocupa ento um
espao prprio, mas relacionando conhecimentos dos dois campos, ao investigar os
mecanismos de replicao, transcrio e traduo do material gentico.
Muito da investigao em Biologia Molecular relativamente recente, e muitos
trabalhos tm sido feitos recorrendo-se Bioinformtica e Biologia Computacional.
Estes recursos tornaram o estudo da estrutura e funo de genes, ou Gentica Molecular,
num dos campos mais proeminentes em Biologia Molecular.

Tcnicas em Biologia Molecular
Muito do trabalho feito no mbito da Biologia Molecular relaciona-se com a obteno,
identificao e caracterizao de genes. Assim sendo, diversas tcnicas tm sido
desenvolvidas no meio da biologia aqui vao sendo citadas algumas
Reaco em cadeia da polimerase
Ver artigo principal: PCR
A reaco em cadeia de polimerase, ou PCR, uma tcnica de grande versatilidade que
permite obter mltiplas cpias de um segmento de DNA. O PCR tambm usado para
introduzir locais de restrio e mutaes pontuais ou para identificar um fragmento
particular de DNA numa biblioteca de cDNA.
Electroforese em gel
Ver artigo principal: electroforese em gel
A electroforese em gel uma das principais ferramentas de trabalho em Biologia
Molecular. Em geral, DNA, RNA e protenas podem ser separados segundo o seu
tamanho numa matriz usando um campo elctrico aplicado. Na electroforese em gel de
agarose, o DNA ou o RNA separado fazendo a amostra migrar atravs de um gel de
agarose. As protenas so normalmente separadas segundo o seu tamanho usando
electroforese em gel de acrilamida; tambm podem ser separadas segundo a sua carga
elctrica usando focagem isoelctrica.
Southern blot
Ver artigo principal: Southern blot
O Southern blot uma tcnica que permite obter informao sobre a massa molecular e
a quantidade relativa de uma determinada sequncia de DNA. A tcnica, desenvolvida
por Edwin Southern, uma combinao de electroforese em gel do DNA (este
frequentemente fragmentado por enzimas de restrio antes de fazer o Southern),
transferncia deste para uma membrana e hibridizao com uma sonda marcada
(radioactiva ou fluorescente). Aps a hibridizao, a membrana lavada para remover
sonda no ligada a DNA e obtm-se uma imagem atravs de autoradiografia ou
autofluorescncia. A imagem obtida d a(s) localizao(es) do DNA que liga a sonda,
com a intensidade do sinal dando uma medida relativa da quantidade de DNA que
hibridiza.
Northern blot
Ver artigo principal: Northern blot
O Northern blot estuda o perfil de expresso de RNA mensageiro, onde, quando e
quanto de determinado RNA mensageiro (correspondente expresso de um
determinado gene) est presente numa dada amostra. uma das formas mais simples de
determinar em que momento certos genes esto a ser expressos em sistemas vivos.
Neste processo, o RNA separado numa electroforese em gel, transferido para uma
membrana e detectado de forma similar ao DNA no Southern blot.
Western blot
Ver artigo principal: Western blot
O Western blot usa o mesmo princpio do Southern blot e do Northern blot mas
aplicado a protenas. Estas so separadas usando electroforese em gel de poliacrilamida,
na presena do detergente dodecilo sulfato de sdio (SDS).