MANUAL DE BIOSSEGURANA

VERSO PRELIMINAR
FUNDAO PARA DESENVOLVIMENTO DAS CINCIAS
ESCOLA BAHIANA DE MEDICINA E SADE PBLICA
1999
INTRODUO
As atividades a serem desenvolvidas no PROGRAMA DE BIOSSEGURANA devem permitir o
aprendizado e o crescimento do estudante na sua rea profissional.
Os lquidos biolgicos e os slidos os quais manuseamos nos laboratrios, so, quase sempre, fonte de
contaminao. Os cuidados que devemos ter para no haver contaminao cruzada dos materiais, no
contaminar o pessoal do laboratrio, da limpeza, os equipamentos, o meio ambiente atravs de aerossis e
os cuidados com o descarte destes materiais fazem parte das Boas Prticas em Laboratrio Clnico (BPLC),
seguindo as regras da Biossegurana. Para cada procedimento h uma regra j definida em Manuais,
Resolues, Normas ou Instrues Normativas.
1.

O local de trabalho deve ser mantido sempre em ordem.

2. Aos chefes de grupo cabe a responsabilidade de orientar seu pessoal e exigir o cumprimento das
regras, sendo os mesmos responsveis direto por abusos e falta de capacitao profissional para utilizar os
equipamentos, reagentes e infra-estrutura.
3. Antes de utilizar qualquer dependncia que no seja a do laboratrio em que se encontra trabalhando, o
estagirio dever pedir permisso ao responsvel direto pelo mesmo.
4. Para sua segurana, procure conhecer os perigos oferecidos pelos produtos qumicos utilizados no seu
trabalho.
5. Procure inteirar-se das tcnicas que voc utiliza. Cincia no mgica. O conhecimento dos porqus
pode ser muito til na soluo de problemas tcnicos.
6.

Na dvida, pergunte.

7. Ao perceber que um aparelho est quebrado, comunique imediatamente ao chefe do setor para que o
reparo possa ser providenciado.
8. Ao perceber algo fora do lugar, coloque-o no devido lugar. A inicitaiva prpria para manter a ordem
muito bem-vinda e antecipadamente agradecida.
9. Planeje bem os seus protocolos e realize os procedimentos operacionais dos mesmos. Idealmente, antes
de comear um experimento, voc deve saber exatamente o que ser consumido, sobretudo no tocante ao uso
de material importado.
10. Trabalho com patgenos no deve ser realizado em local movimentado. O acesso ao laboratrio, biotrio
e insetrio deve ser restrito a pessoas que, realmente, manuseiem o microorganismo.
11. O trnsito pelos corredores com material patognico deve ser evitado ao mximo. Quando necessrio,
utilize bandejas.

12. Aquele que nunca trabalhou com patgenos, antes de comear a manuse-los, deve:
q

Estar familiarizado com estas normas;

q
Ter recebido informaes e um treinamento adequado em tcnicas e conduta geral de trabalho em
laboratrio (pipetagem, necessidade de manter-se a rea de trabalho sempre limpa, etc.)
13. Ao iniciar o trabalho com patgenos, o estagirio dever ficar sob a superviso de um pesquisador
experimentado, antes de estar completamente capacitado para o trabalho em questo.
14. Sada da rea de trabalho, mesmo que temporariamente, usando luvas (mesmo que o pesquisador tenha
certeza de que no esto contaminadas), mscara ou avental, estritamente proibida. No se deve tocar as
luvas em maanetas, interruptores, telefone, etc. (S se deve tocar com as luvas o material estritamente
necessrio ao trabalho).
15. Seja particularmente cuidadoso para no contaminar aparelhos dentro ou fora da sala (use aparelhos
extras, apenas em caso de extrema necessidade).
16. Em caso de acidente:
q

A rea afetada deve ser lavada com gua corrente em abundncia;

q
lcool iodado deve ser passado na rea afetada (com exceo dos olhos, que devem ser lavados
exaustivamente com gua destilada);
q
Em caso de ferida, deve ser lavada com gua corrente e comprimida de forma a sair sangue (cuidado
para no aumentar as dimenses da ferida deve ser tomado);
q
O acidente deve ser comunicado, imediatamente, ao responsvel pelo setor e a direo do Instituto para
discusso das medidas a serem adotadas;
17. As normas de trabalho com material radioativo e com material patognico devem ser lidas com ateno
antes de se comear a trabalhar com os mesmos.
18. Recomendao final para minimizar o risco de acidentes: no trabalhe sob tenso.

BIOSSEGURANA
DEFINIO
Biossegurana um conjunto de procedimentos, aes, tcnicas, metodologias, equipamentos e dispositivos
capaz de eliminar ou minimizar riscos inerentes as atividades de pesquisa, produo, ensino, desenvolvimento
tecnolgico e prestao de servios, que podem comprometer a sade do homem, dos animais, do meio
ambiente ou a qualidade dos trabalhos desenvolvidos.
TIPOS DE RISCO
(Portaria do Ministrio do Trabalho, MT no. 3214, de 08/06/78)
1.

Riscos de Acidentes

2.

Riscos Ergonmicos

3.

Riscos Fsicos

4.

Riscos Qumicos

5.

Riscos Biolgicos

1. RISCOS DE ACIDENTES
Considera-se risco de acidente qualquer fator que coloque o trabalhador em situao de perigo e possa
afetar sua integridade, bem estar fsico e moral. So exemplos de risco de acidente: as mquinas e
equipamentos sem proteo, probabilidade de incndio e exploso, arranjo fsico inadequado, armazenamento
inadequado, etc.

2. RISCOS ERGONMICOS

Considera-se risco ergonmico qualquer fator que possa interferir nas caractersticas psicofisiolgicas do
trabalhador causando desconforto ou afetando sua sade. So exemplos de risco ergonmico: o
levantamento e transporte manual de peso, o rtmo excessivo de trabalho, a monotonia, a repetitividade, a
responsabilidade excessiva, a postura inadequada de trabalho, o trabalho em turnos, etc.

3. RISCOS FSICOS

Consideram-se agentes de risco fsico as diversas formas de energia a que possam estar expostos os
trabalhadores, tais como: rudo, vibraes, presses anormais, temperaturas extremas, radiaes ionizantes,
radiaes no ionizantes, ultra-som, materiais cortantes e ponteagudos, etc.

4. RISCOS QUMICOS

Consideram-se agentes de risco qumico as substncias, compostas ou produtos que possam penetrar no
organismo pela via respiratria, nas formas de poeiras, fumos, nvoas, neblinas, gases ou vapores, ou que,
pela natureza da atividade de exposio, possam ter contato ou ser absorvido pelo organismo atravs da
pele ou por ingesto.

5. RISCOS BIOLGICOS

Consideram-se agentes de risco biolgico as bactrias, fungos, parasitos, vrus, entre outros.

Classificao de risco biolgico:

Os agentes de risco biolgico podem ser distribudos em quatro classes de 1 a 4 por ordem crescente de
risco, classificados segundo os seguintes critrios:

Patogenicidade para o homem.

Virulncia.

Modos de transmisso

Disponibilidade de medidas profilticas eficazes.

Disponibilidade de tratamento eficaz.

Endemicidade.

Classes de risco biolgico:

Classe de Risco I - Escasso risco individual e comunitrio.

O Microrganismo tem pouca probabilidade de provocar enfermidades humanas ou enfermidades de

importncia veterinria.
Ex.: Bacillus subtilis

Classe de Risco II - Risco individual moderado, risco comunitrio limitado.

A exposio ao agente patognico pode provocar infeco, porm, se dispe de medidas eficazes de
tratamento e preveno, sendo o risco de propagao limitado.
Ex.: Schistosoma mansoni

Classe de Risco III - Risco individual elevado, baixo risco comunitrio.

O agente patognico pode provocar enfermidades humanas graves, podendo propagar-se de uma pessoa
infectada para outra, entretanto, existe profilaxia e/ou tratamento.
Ex.: Mycobacterium tuberculosis

Classe de Risco IV - Elevado risco individual e comunitrio.

Os agentes patognicos representam grande ameaa para as pessoas e animais, com fcil propagao de um
indivduo ao outro, direta ou indiretamente, no existindo profilaxia nem tratamento.
Ex.: Virus Ebola

Nveis de conteno fsica para riscos biolgicos:

Para manipulao dos microrganismos pertencentes a cada um das quatro classes de risco devem ser
atendidos alguns requisitos de segurana, conforme o nvel de conteno necessrio.

O nvel 1 de conteno se aplica aos laboratrios de ensino bsico, onde so manipulados os

microrganismos pertencentes a classe de risco I. No requerida nenhuma caracterstica de desenho, alm
de um bom planejamento espacial e funcional e a adoo de boas prticas laboratoriais.

O nvel 2 de conteno destinado ao trabalho com microrganismos da classe de risco II, se aplica aos
laboratrios clnicos ou hospitalares de nveis primrios de diagnstico, sendo necessrio, alm da adoo
das boas prticas, o uso de barreiras fsicas primrias (cabine de segurana biolgica e equipamentos de
proteo individual) e secundrias (desenho e organizao do laboratrio).

O nvel 3 de conteno destinado ao trabalho com microrganismos da classe de risco III ou para
manipulao de grandes volumes e altas concentraes de microrganismos da classe de risco II. Para este
nvel de conteno so requeridos alm dos itens referidos no nvel 2, desenho e construo laboratoriais
especiais. Deve ser mantido controle rgido quanto a operao , inspeo e manuteno das instalaes e
equipamentos e o pessoal tcnico deve receber treinamento especfico sobre procedimentos de segurana
para a manipulao destes microrganismos.

O nvel 4 ou conteno mxima destina-se a manipulao de microrganismos da classe de risco IV, o

laboratrio de mais alto nvel de conteno e representa uma unidade geogrfica e funcionalmente
independente de outras reas. Esses laboratrios requerem, alm dos requisitos fsicos e operacionais dos
nveis de conteno 1, 2 e 3, barreiras de conteno (instalaes, desenho equipamentos de proteo) e
procedimentos especiais de segurana.

MTODOS DE CONTROLE DE AGENTE DE RISCO

Os elementos bsicos para conteno de agentes de risco:

A. - BOAS PRTICAS DE LABORATRIO - GLP

Observncia de prticas e tcnicas microbiolgicas padronizadas.

Conhecimento prvio dos riscos.

Treinamento de segurana apropriado.

q
Manual de biossegurana (identificao dos riscos, especificao das prticas, procedimentos para
eliminao de riscos).

A.1. - RECOMENDAES GERAIS

Nunca pipete com a boca, nem mesmo gua destilada. Use dispositivos de pipetagem mecnica.

No coma, beba, fume, masque chiclete ou utilize cosmticos no laboratrio.

Evite o hbito de levar as mos boca, nariz, olhos, rosto ou cabelo, no laboratrio.

q
Lave as mos antes de iniciar o trabalho e aps a manipulao de agentes qumicos, material
infeccioso e animais, mesmo que tenha usado luvas de proteo, bem como antes de deixar o laboratrio.

Objetos de uso pessoal no devem ser guardados no laboratrio.

q
Utilize jalecos ou outro tipo de uniforme protetor, de algodo, apenas dentro do laboratrio. No utilize
essa roupa fora do laboratrio.

No devem ser utilizadas sandlias ou sapatos abertos no laboratrio.

Utilize luvas quando manusear material infeccioso e animais.

q
No devem ser usadas jias ou outros adornos nas mos, porque podem impedir uma boa limpeza
das mesmas.

Mantenha a porta do laboratrio fechada. Restrinja e controle o acesso do mesmo.

q
No mantenha plantas, bolsas, roupas ou qualquer outro objeto no relacionado com o trabalho dentro
do laboratrio.

q
Use cabine de segurana biolgica para manusear material infeccioso ou materiais que necessitem de
proteo contra contaminao.

q
Utilize dispositivos de conteno ou minimize as atividades produtoras de aerossis, tais como
operaes com grandes volumes de culturas ou solues concentradas. Essas atividades incluem:
centrifugao (utilize sempre copos de segurana), misturadores tipo Vortex (use tubos com tampa),
homogeneizadores (use homogeneizadores de segurana com copo metlico), sonicagem, triturao,
recipientes abertos de material infeccioso, frascos contendo culturas, inoculao de animais, culturas de
material infeccioso e manejo de animais.

q
Qualquer pessoa com corte recente, com leso na pele ou com ferida aberta (mesmo uma extrao de
dente), deve abster-se de trabalhar com patgenos humanos.

q
Coloque as cabines de segurana biolgica em reas de pouco trnsito no laboratrio, minimize as
atividades que provoquem turbulncia de ar dentro ou nas proximidades da cabine.

q
As cabines de segurana biolgica no devem ser usadas em experimentos que envolvam produtos
txicos ou compostos carcinognicos. Neste caso utilizam-se capelas qumicas.

q
Descontamine todas as superfcies de trabalho diariamente e quando houver respingos ou
derramamentos. Observe o processo de desinfeco especfico para escolha e utilizao do agente
desinfetante adequado.

q
Coloque todo o material com contaminao biolgica em recipientes com tampa e a prova de
vazamento, antes de remov-los do laboratrio para autoclavao.

q
Descontamine por autoclavao ou por desinfeco qumica, todo o material com contaminao
biolgica, como: vidraria, caixas de animais, equipamentos de laboratrio, etc..., seguindo as recomendaes
para descarte desses materiais.

Descontamine todo equipamento antes de qualquer servio de manuteno.

q
Cuidados especiais devem ser tomados com agulhas e seringas. Use-as somente quando no houverem
mtodos alternativos.

q
Seringas com agulhas ao serem descartadas devem ser depositadas em recipientes rgidos, a prova de
vazamento e embalados como lixo patolgico.

q
Vidraria quebrada e pipetas descartveis, aps descontaminao, devem ser colocadas em caixa com
paredes rgidas rotulada vidro quebrado e descartada como lixo geral.

q
Saiba a localizao do mais
como us-los.

prximo lava olhos, chuveiro de segurana e extintor de incndio. Saiba

Mantenha preso em local seguro todos os cilindros de gs, fora da rea do laboratrio e longe do fogo.

q
Zele pela limpeza e manuteno de seu laboratrio, cumprindo o programa de limpeza e manuteno
estabelecido para cada rea, equipamento e superfcie.

q
Todo novo funcionrio ou estagirio deve ter treinamento e orientao especfica sobre BOAS
PRTICAS LABORATORIAIS e PRINCPIOS DE BIOSSEGURANA aplicados ao trabalho que ir
desenvolver.

q
Qualquer acidente deve ser imediatamente comunicado chefia do laboratrio, registrado em
formulrio especfico e encaminhado para acompanhamento junto a Comisso de Biossegurana da
Instituio.

q
Fique atento qualquer alterao no seu quadro de sade e dos funcionrios sob sua responsabilidade,
tais como: gripes, alergias, diarrias, dores de cabea, enxaquecas, tonturas, mal estar em geral, etc... e
notifique imediatamente chefia do laboratrio.

B. - BARREIRAS

B.1. - BARREIRAS PRIMRIAS

B.1.1. EQUIPAMENTO DE PROTEO INDIVIDUAL EPI

So empregados para proteger o pessoal da rea de sade do contato com agentes infecciosos, txicos ou
corrosivos, calor excessivo, fogo e outros perigos. A roupa e o equipamento servem tambm para evitar a
contaminao do material em experimento ou em produo. So exemplos:

LUVAS

As luvas so usadas como barreira de proteo prevenindo contra contaminao das mos ao manipular
material contaminado, reduzindo a probabilidade de que microrganismos presentes nas mos sejam
transmitidos durante procedimentos.

O uso de luvas no substitui a necessidade da LAVAGEM DAS MOS porque elas podem ter pequenos
orifcios inaparentes ou danificar-se durante o uso, podendo contaminar as mos quando removidas.

q
Usar luvas de ltex SEMPRE que houver CHANCE DE CONTATO com sangue, fludos do corpo,
dejetos, trabalho com microrganismos e animais de laboratrio.

Usar luvas de PVC para manuseio de citostticos (mais resistentes, porm menos sensibilidade).

Lavar instrumentos, roupas, superfcies de trabalho SEMPRE usando luvas.

NO usar luvas fora da rea de trabalho, NO abrir portas, NO atender telefone.

q
Luvas (de borracha) usadas para limpeza devem permanecer 12 horas em soluo de Hipoclorito de
Sdio a 0,1% (1g/l de cloro livre = 1000 ppm). Verificar a integridade das luvas aps a desinfeco.

NUNCA reutilizar as luvas, DESCART-LAS de forma segura.

JALECO

Os vrios tipos de jalecos so usados para fornecer uma barreira de proteo e reduzir a oportunidade de
transmisso de microrganismos. Previnem a contaminao das roupas do pessoal, protegendo a pele da
exposio sangue e fluidos corpreos, salpicos e derramamentos de material infectado.

So de uso constante nos laboratrios e constituem uma proteo para o profissional.

Devem sempre ser de mangas longas, confeccionados em algodo ou fibra sinttica (no inflamvel).

Os descartveis devem ser resistentes e impermeveis.

q
O uso de jaleco PERMITIDO somente nas REAS DE TRABALHO. NUNCA EM REFEITRIOS,
ESCRITRIOS, BIBLIOTECAS, NIBUS, ETC.

Jalecos NUNCA devem ser colocados no armrio onde so guardados objetos pessoais.

Devem ser descontaminados antes de serem lavados.

q
Jalecos utilizados em biotrios NO devem ser utilizados em trabalhos nas Cabines de Segurana
Biolgica.

OUTROS EQUIPAMENTOS

culos de Proteo e Protetor Facial (protege contra salpicos, borrifos, gotas, impacto).

Mscara (tecido, fibra sinttica descartvel, com filtro HEPA, filtros para gases, p, etc.).

Avental cirrgico.

Avental impermevel.

Sapatilha descartvel (pr-p).

Macaces, macaces impermeveis.

Uniforme de algodo, composto de cala e blusa.

Gorros descartveis.

Luvas de borracha, amianto, couro, algodo e descartveis.

Dispositivos de pipetagem (borracha peras, pipetadores automticos, etc.).

Dosmetro para radiao ionizante.

B.1.2. - EQUIPAMENTOS DE PROTEO COLETIVA (EPC)

So equipamentos que possibilitam a proteo do pessoal do laboratrio, do meio ambiente e da pesquisa

desenvolvida. So exemplos:

CABINES DE SEGURANA

As Cabines de Segurana Biolgica constituem o principal meio de contenso e so usadas como barreiras
primrias para evitar a fuga de aerossis para o ambiente. H trs tipos de cabines de segurana biolgica:

Classe I

Classe II A, B1, B2, B3.

Classe III

Procedimento correto para uso da Cabine de Segurana Biolgico:

Fechar as portas do laboratrio.

Evitar circulao de pessoas no laboratrio durante o uso da cabine.

Ligar a cabine e a luz UV de 15 a 20 minutos antes de seu uso.

q
Descontaminar a superfcie interior com gaze estril embebida em lcool etlico ou isoproplico a
70%.

Lavar as mos e antebraos com gua e sabo e secar com toalha ou papel toalha descartvel.

Passar lcool etlico ou isoproplico a 70% nas mos e antebraos.

Usar jaleco de manga longa, luvas, mscara, gorro e pr-p quando necessrio.

Colocar os equipamentos, meios, vidraria, etc. no plano de atividade da rea de trabalho.

Limpar todos os objetos antes de introduz-los na cabine.

Organizar os materiais de modo que os tens limpos e contaminados no se misturem.

Minimizar os movimentos dentro da cabine.

q
Colocar os recipientes para descarte de material no fundo da rea de trabalho ou lateralmente (cmaras
laterais, tambm, so usadas).

q
Usar incinerador eltrico ou microqueimador automtico (o uso de chama do bico de Bunhsen pode
acarretar danos no filtro HEPA e interromper o fluxo de ar causando turbulncia.

Usar pipetador automtico.

Conduzir as manipulaes no centro da rea de trabalho.

q
Interromper as atividades dentro da cabine enquanto equipamentos como centrfugas, misturadores ou
outros equipamentos estiverem sendo operados.

q
Limpar a cabine, ao trmino do trabalho, com gaze estril embebida com lcool etlico ou isoproplico
70%.

q
Descontaminar a cabine (a descontaminao poder ser feita com formalina fervente; aquecimento de
paraformaldedo (10,5g/m3) ou mistura de formalina paraformaldedo e gua com permanganato de
potssio. (35 ml de formalina e 7,5 g de permanganato de potssio).

Deixar a cabine ligada de 15 a 20 minutos antes de deslig-la.

No introduzir na cabine objetos que causem turbulncia.

No colocar na cabine materiais poluentes como madeira, papelo, papel, lpis, borracha.

Evitar espirrar ou tossir na direo da zona estril (usar mscara).

q
A cabine no um depsito, evite guardar equipamentos ou quaisquer outras coisas no seu interior,
mantendo as grelhas anteriores e posteriores desobstrudas.

No efetue movimentos rpidos ou gestos bruscos na rea de trabalho.

q
Evite fontes de calor no interior da cabine, utilize microqueimadores eltricos. O emprego de chama s
quando absolutamente necessrio.

Jamais introduzir a cabea na zona estril.

A projeo de lquidos e slidos contra o filtro deve ser evitada.

q
As lmpadas UV no devem ser usadas enquanto a cabine de segurana estiver sendo utilizada. Seu uso
prolongado no necerssrio para uma boa esterilizao e provoca deteriorao do material e da estrutura
da cabine. As lmpadas UV devem ter controle de contagem de tempo de uso.

q
Os recipientes para descarte de material devem estar sobre o cho, carrinhos ou mesas ao lado da
cabine de segurana.

q
Papis presos no painel de vidro ou acrlico da cabine limitar o campo de viso do usurio e
diminuir a intensidade de luz podendo causar acidentes.

FILTRO HEPA

Os filtros HEPA High Efficiency Particulate Air so feitos de papel de fibra de vidro com 60 mm de
espessura e sustentadas por lminas de alumnio. As fibras do filtro feitas de uma trama tridimensional
remove partculas do ar que flui atravs dele, por inrcia, interceptao e difuso. Tem capacidade para filtrar
partculas com eficincia igual ou maior que 99,99%. Cuidados especiais com o ambiente e a troca do prfiltro aumentam a expectativa de vida do filtro HEPA.

FLUXO LAMINAR DE AR

Massa de ar dentro de uma rea confinada movendo-se com velocidade uniforme ao longo de linhas
paralelas.

CABINE PARA RADIOISTOPOS

Construda em ao inox impede absoro de material radioativo, circulao de ar com mnimo de

turbulncia, superfcie de trabalho impermevel, painel frontal com dispositivo de segurana de controle de
abertura.

CABINE PARA HISTOLOGIA

Cabine construda em ao inox com exausto por duto , especfica para trabalhos histolgicos.

CAPELA QUMICA NB

Cabine construda de forma aerodinmica cujo fluxo de ar ambiental no causa turbulncias e correntes,
assim reduzindo o perigo de inalao e contaminao do operador e ambiente.

CHUVEIRO DE EMERGNCIA

Chuveiro de aproximadamente 30 cm de dimetro, acionado por alavancas de mo, cotovelos ou joelhos.

Deve estar localizado em local de fcil acesso.

LAVA OLHOS

Dispositivo formado por dois pequenos chuveiros de mdia presso acoplados a uma bacia metlica, cujo
ngulo permite direcionamento correto do jato de gua. Pode fazer parte do chuveiro de emergncia ou ser do
tipo frasco de lavagem ocular.

MANTA OU COBERTOR

Confeccionado em l ou algodo grosso, no podendo ter fibras sintticas, utilizado para abafar ou envolver
vtima de incndio.

VASO DE AREIA

Ou balde de areia utilizado sobre derramamento de lcalis para neutraliz-lo.

EXTINTOR DE INCNDIO A BASE DE GUA

Utiliza o CO2 como propulsor. usado em papel, tecido e madeira. No usar em eletricidade, lquidos
inflamveis, metais em ignio.

EXTINTOR DE INCNDIO DE CO2 EM P

Utiliza o CO2 em p como base. A fora de seu jato capaz de disseminar os materiais incendiados.
usado em lquidos e gases inflamveis, fogo de origem eltrica. No usar em metais alcalinos e papel.

EXTINTOR DE INCNDIO DE P SECO

Usado em lquidos e gases inflamveis, metais do grupo dos lcalis, fogo de origem eltrica.

EXTINTOR DE INCNDIO DE ESPUMA

Usado para lquidos inflamveis. No usar para fogo causado por eletricidade.

EXTINTOR DE INCNDIO DE BCF

Utiliza o bromoclorodifluorometano. usado em lquidos inflamveis, incndio de origem eltrica. O

ambiente precisa ser cuidadosamente ventilado aps seu uso.

MANGUEIRA DE INCNDIO

Modelo padro, comprimento e localizao so fornecidos pelo Corpo de Bombeiros.

SPRINKLE

Sistema de segurana que atravs da elevao de temperatura, produz fortes borrifos de gua no ambiente
(borrifador de teto).

B.2. - BARREIRAS SECUNDRIAS DESENHO E ORGANIZAO DO LABORATRIO

O desenho e instalaes so importantes no provimento de uma barreira para proteger o pessoal que trabalha
internamente, a comunidade e o meio ambiente, contra agentes de risco infecciosos, qumicos e radioativos
que podem ser liberados acidentalmente pelo laboratrio.

O desenho da planta fsica de um Laboratrio dever atender aos requisitos tcnicos adequados ao
desenvolvimento das atividades a serem realizadas, de forma a garantir a segurana do fluxo de
equipamentos, pessoal, insumos, amostras e outros elementos necessrios ao trabalho.

A localizao dos equipamentos nos locais de trabalho dever ser realizada levando-se em conta os
deslocamentos necessrios para um trabalho analtico efetivo e a separao daquelas atividades que no
podem ser realizadas uma com as outras. O espao deve ser suficiente para que as equipes possam realizar
seu trabalho conforme normas de segurana.

A planta fsica dever considerar os fluxos, a distribuio de portas, iluminao e ventilao adequadas,
mobilirio especfico para cada atividade, em conformidade com as exigncias de segurana, de forma a
permitir o manejo de substncias perigosas, materiais patognicos e o uso apropriado de animais de
laboratrio, bem como prever a evacuao do pessoal, quando necessrio.

As diversas unidades laboratoriais devem possuir sinalizao de risco que permita identificar a natureza do
perigo, o responsvel pelo laboratrio em caso de emergncia, bem como as condies de permissibilidade de
acesso quelas reas. Ao planejarmos desenvolver atividades laboratoriais devemos atentar para os tens
abaixo, a fim de possibilitar o estabelecimento seguro do trabalho, so eles:

q
Dimencionamento da rea de trabalho X atividade(laboratrio, administrao, recepo de amostras,
almoxarifado, biotrio, apoio, etc.)

Volume e qualidade do trabalho

Quantidade de equipamento

Nmero de funcionrios por m2.

Otimizao da localizao de equipamentos, em funo do fluxo de trabalho.

Compatibilidade das tarefas desenvolvidas em reas vizinhas.

Facilidade de acesso.

PROCEDIMENTOS PARA DESCARTE DOS RESDUOS GERADOS EM LABORATRIO

1 - RESDUOS INFECTANTES

Estes resduos podem ser divididos em quatro grupos a saber:

MATERIAL PROVENIENTE DE REAS DE ISOLAMENTO

So resduos provenientes de enfermarias ou quartos de pacientes em isolamento ou que tenham entrado

com estes. Incluem-se aqui, sangue e secrees de pacientes que apresentam doenas transmissveis.

MATERIAL BIOLGICO

Composto por culturas ou estoques de microrganismos provenientes de laboratrios clnicos ou de

pesquisa, meios de cultura, placas de Petri, instrumentos usados para manipular, misturar ou inocular
microrganismos, vacinas vencidas ou inutilizadas, filtros e gases aspiradas de reas contaminadas.

SANGUE HUMANO E HEMODERIVADOS

Composto por bolsas de sangue com prazo de utilizao vencido, inutilizados ou com sorologia positiva,
amostras de sangue para anlise, soro, plasma, e outros subprodutos.

RESDUOS CIRRGICOS E ANTOMO-PATOLGICOS

Composto por tecidos, rgos, peas de anatomia, sangue e outros lquidos resultantes de cirurgias,
drenagens, autpsias e bipsias.

PROCEDIMENTOS RECOMENDADOS PARA O DESCARTE

A disposio inadequada dos resduos gerados em laboratrio podero constituir focos de doenas infectocontagiosas se, no forem observados os procedimentos para seu tratamento.

q
O lixo contaminado deve ser embalado em sacos plsticos para o lixo tipo 1, de capacidade mxima de
100 litros, indicados pela NBR 9190 da ABNT.

q
Os sacos devem ser totalmente fechados, de forma a no permitir o derramamento de seu contedo,
mesmo se virados para baixo. Uma vez fechados, precisam ser mantidos ntegros at o processamento ou
destinao final do resduo. Caso ocorram rompimentos freqentes dos sacos, devero ser verificados, a
qualidade do produto ou os mtodos de transporte utilizados. No se admite abertura ou rompimento de saco
contendo resduo infectante sem prvio tratamento.

q
Havendo derramamento do contedo, cobrir o material derramado com uma soluo desinfetante (por
exemplo, hipoclorito de sdio a 10.000 ppm), recolhendo-se em seguida. Proceder, depois, a lavagem do
local. Usar os equipamentos de proteo necessrios.

q
Todos os utenslios que entrarem em contato direto com o material devero passar por desinfeco
posterior.

q
Os sacos plsticos devero ser identificados com o nome do laboratrio de origem, sala, tcnico
responsvel e data do descarte.

q
Autoclavar 121 C (125F), presso de 1 atmosfera (101kPa, 151 lb/in acima da presso atmosfrica)
durante pelo menos 20 minutos.

As lixeiras para resduos deste tipo devem ser providas de tampas.

q
Estas lixeiras devem ser lavadas, pelo menos uma vez por semana, ou sempre que houver vazamento do
saco.

2 - RESDUOS PERFUROCORTANTES

Os resduos perfurocortantes constituem a principal fonte potencial de riscos, tanto de acidentes fsicos
como de doenas infecciosas. So compostos por agulhas, ampolas, pipetas, lminas de bisturi, lminas de
barbear e qualquer vidraria quebrada ou que se quebre facilmente.

PROCEDIMENTOS RECOMENDADOS PARA O DESCARTE

q
Os resduos perfurocortantes devem ser descartados em recipientes de paredes rgidas, com tampa e
resistentes autoclavao. Estes recipientes devem estar localizados to prximo quanto possvel da rea
de uso dos materiais.

q
Os recipientes devem ser identificados com etiquetas autocolantes, contendo informaes sobre o
laboratrio de origem, tcnico responsvel pelo descarte e data do descarte.

q
Embalar os recipientes, aps tratamento para descontaminao, em sacos adequados para descarte
identificados como material perfurocortantes e descartar como lixo comum, caso no sejam incinerados.

A agulha no deve ser retirada da seringa aps o uso.

q
No caso de seringa de vidro, lev-la juntamente com a agulha para efetuar o processo de
descontaminao.

No quebrar, entortar ou recapear as agulhas.

3 - RESDUOS RADIOATIVOS

Compostos por materiais radioativos ou contaminados com radionucldeos com baixa atividade provenientes
de laboratrios de pesquisa em qumica e biologia, laboratrios de anlises clnicas e servios de Medicina
Nuclear. So normalmente, slidos ou lquidos (seringas, papel absorvente, frascos, lquidos derramados,
urina, fezes, etc.). Resduos radioativos, com atividade superior s recomendadas pela Comisso Nacional
de Energia Nuclear (CNEN), devero ser acondicionados em depsitos de decaimento (at que suas
atividades se encontrem dentro do limite permitido para sua eliminao).

PROCEDIMENTOS ESPECFICOS PARA O DESCARTE

No misturar rejeitos radioativos lquidos com slidos.

q
Preveja o uso de recipientes especiais, etiquetados e apropriados natureza do produto radioativo em
questo.

q
Coletar materiais como agulhas, ponteiras de pipetas e outros objetos afiados, contaminados por
radiao, em recipientes especficos, com sinalizao de radioatividade.

q
Os containers devem ser identificados com: Istopo presente, tipo de produto qumico e concentrao,
volume do contedo, laboratrio de origem, tcnico responsvel pelo descarte e a data do descarte.

q
Os rejeitos no devem ser armazenados no laboratrio, mas sim em um local previamente adaptado para
isto, aguardando o recolhimento.

q
Animais e seus rejeitos contaminados por radiao devem ser colocados em freezers, em sacos
plsticos, vedados e identificados com: nome do laboratrio de origem, tcnico responsvel, data de descarte,
istopo presente e quantidade.

q
Considerar como de dez meias vidas o tempo necessrio para obter um decrscimo quase total para a
atividade dos materiais (fontes no seladas) empregadas na rea biomdica.

q
O pessoal responsvel pela coleta de resduos radioativos devem utilizar vestimentas protetoras e luvas
descartveis. Estas sero eliminadas aps o uso, tambm, como resduo radioativo.

q
Em caso de derramamento de lquidos radioativos, podero ser usados papis absorventes ou areia,
dependendo da quantidade derramada. Isto impedir seu espalhamento. Estes devero ser eliminados
juntos com outros resduos radioativos.

OBSERVAES IMPORTANTES:

Os Procedimentos estabelecidos para a eliminao de rejeitos radioativos foram padronizados pela Norma
CNEN-NE-6.05 (CNEN, 1985).

O pessoal envolvido na manipulao desses rejeitos devem receber treinamento especfico para realizao
dessa atividade, alm de uma regular vigilncia mdico sanitria.

4 - RESDUOS QUMICOS

Os resduos qumicos apresentam riscos potenciais de acidentes inerentes s suas propriedades especficas.
Devem ser consideradas todas as etapas de seu descarte com a finalidade, de minimizar, no s acidentes
decorrentes dos efeitos agressivos imediatos (corrosivos e toxicolgicos), como os riscos cujos efeitos
venham a se manifestar a mais longo prazo, tais como os teratognicos, carcinognicos e mutagnicos. So
compostos por resduos orgnicos ou inorgnicos txicos, corrosivos, inflamveis, explosivos,
teratognicos, etc.

Para a realizao dos procedimentos adequados de descarte, importante a observncia do grau de

toxicidade e, do procedimento de no mistura de resduos de diferentes naturezas e composies. Com
isto, evitado o risco de combinao qumica e combusto, alm de, danos ao ambiente de trabalho e ao
meio ambiente. Para tanto, necessrio que a coleta destes tipos de resduos seja peridica.

Os resduos qumicos devem ser tratados antes de descartados. Os que no puderem ser recuperados, devem
ser armazenados em recipientes prprios para posterior descarte.

No armazenamento de resduos qumicos devem ser considerados a compatibilidade dos produtos

envolvidos, a natureza do mesmo e o volume.

PROCEDIMENTOS GERAIS DE DESCARTE

q
Cada uma das categorias de resduos orgnicos ou inorgnicos relacionados deve ser separada,
acondicionada, de acordo com procedimentos e formas especficas e adequadas a cada categoria. Na fonte
produtora do rejeito e em sua embalagem devero existir os smbolos internacionais estabelecidos pela
Organizao Internacional de Normalizao (ISO) e pelo Comit de Especialistas em Transporte de
Produtos Perigosos, ambos da Organizao das Naes Unidas, adequados a cada caso.

q
Alm do smbolo identificador da substncia, na embalagem contendo esses resduos deve ser afixada
uma etiqueta autoadesiva, preenchida em grafite contendo as seguintes informaes: Laboratrio de origem,
contedo qualitativo, classificao quanto natureza e advertncias.

q
Os rejeitos orgnicos ou inorgnicos sem possibilidade de descarte imediato devem ser armazenados
em condies adequadas especficas.

q
Os resduos orgnicos ou inorgnicos devero ser desativados com o intuito de transformar pequenas
quantidades de produtos qumicos reativos em produtos derivados incuos, permitindo sua eliminao sem
riscos. Este trabalho deve ser executado com cuidado, por pessoas especializadas.

q
Os resduos que sero armazenados para posterior recolhimento e descarte/incinerao, devem ser
recolhidos separadamente em recipientes coletores impermeveis a lquidos, resistentes, com tampas
rosqueadas para evitar derramamentos e fechados para evitar evaporao de gases.

PROCEDIMENTOS ESPECFICOS DE DESCARTE

q
Resduos inorgnicos txicos e suas solues aquosas Sais inorgnicos de metais txicos e suas
solues aquosas devem ser previamente diludos a nveis de concentrao que permitam o descarte direto na
pia em gua corrente.

Concentraes mximas permitidas ao descarte direto na pia para cada metal:

Cdmo
no mximo
1 mg/l

Chumbo
no mximo
10 mg/l
Zinco
no mximo
5 mg/l
Cobre
no mximo
5 mg/l
Cromo
no mximo
10 mg/l
Prata
no mximo
1 mg/l

q
Resduos inorgnicos cidos e suas solues aquosas Diluir com gua, neutralizar com bases diludas
e, descartar na pia em gua corrente.

q
Resduos inorgnicos bsicos e suas solues aquosas Diluir com gua, neutralizar com cidos
diludos e, descartar na pia em gua corrente.

q
Resduos inorgnicos neutros e suas solues aquosas Diluir com gua e, descartar na pia em gua
corrente.

Resduos inorgnicos insolveis em gua:

o
Com risco de contaminao ao meio ambiente armazenar em frascos etiquetados e de contedo
similar, para posterior recolhimento.

Sem risco de contaminao ao meio ambiente coletar em saco plstico e descartar como lixo comum.

q Resduos orgnicos e suas solues aquosas txicas coletar em frascos etiquetados e de contedo
similar para posterior recolhimento.

q Resduos orgnicos cidos e suas solues aquosas diluir com gua, neutralizar com cidos diludos e,
descartar na pia em gua corrente.

q Resduos orgnicos bsicos e suas solues aquosas diluir com gua, neutralizar com cidos diludos e,
descartar na pia em gua corrente.

q Resduos orgnicos neutros e suas solues aquosas diluir com gua e, descartar na pia em gua
corrente.

Resduos orgnicos slidos insolveis em gua:

o
Com risco de contaminao ao meio ambiente armazenar em frascos etiquetados e de contedo similar
para posterior recolhimento.

Sem risco de contaminao ao meio ambiente coletar em sacos plsticos e, descartar em lixo comum.

Resduos de solventes orgnicos:

o
Solventes halogenados puros ou em mistura armazenar em frascos etiquetados e de contedo similar
para posterior recolhimento.

o
Solventes isentos de halogenados, puros ou em mistura coletar em frascos etiquetados e de contedo
similar, para posterior incinerao.

o
Solventes isentos de toxicidade, puros ou em soluo aquosa utilizados em grande volume coletar em
frascos etiquetados e de contedo similar para posterior recuperao.

o
Solventes que formam perxidos e suas misturas coletar em frascos, adicionar substncias que
impeam a formao de perxidos, etiquetar, para posterior incinerao.

5 - RESDUOS COMUNS

Composto por todos os resduos que no se enquadram em nenhuma das categorias anteriores e que, por sua
semelhana com os resduos domsticos comuns, podem ser considerados como tais.

ROTINAS DE ESTERILIZAO

Vidraria a ser autoclavada de rotina:

A vidraria deve ser autoclavada a 120 C por 20 minutos e postas para secar em estufa. A vidraria com tampa
de poliestireno no deve ser submetida a temperatura acima de 50 C no forno. Os demais materiais a serem
esterilizados devem ser solicitados, diretamente, ao pessoal da esterilizao, pelos prprios usurios.

1.

Tubos de ensaio, frascos e pipetas

a)

Contaminados ou sujos com material proteico:

Aps o uso imerg-los em soluo de hipoclorito de sdio a 1% em vasilhames apropriados (pipetas

Pasteur e demais separadamente) por, no mnimo, 12 horas.

b) Vidraria suja com material aderente (Nujol, Percoll, Adjuvantes oleosos, etc.):

Lavar em gua de torneira e coloc-los em soluo de Extran a 2% prximos a pia das salas dos
laboratrios por um perodo mnimo de 04 horas (Pipetas Pasteur e demais separadamente).
Observao: A vidraria maior que no couber dentro dos vasilhames deve ser tratada colocando-se a soluo
desinfetante ou detergente dentro da mesma.

c) Vidrarias utilizadas com gua ou solues tampes sem protenas:

Os frascos devero ser lavados pelo prprio usurio, em gua corrente e, em seguida, trs vezes em gua
destilada, colocados para secar deixando-os emborcados sobre papel toalha no laboratrio, prximo a pia.

Aps secarem, devero ser tampados com papel alumnio e guardados nos armrios. Tubos e pipetas devero
ser processados como se estivessem contaminados.

d) Pipetas sujas com gel:

Colocar em vasilhames separados e ferver antes de juntar as demais pipetas.

2.

Lminas e Lamnulas

Colocar nos vasilhames apropriados e rotulados para as mesmas com soluo de hipoclorito a 1%. Aps o
trabalho, colocar as lminas e lamnulas em vasilhames separados.

Lavar as lamnulas no laboratrio e colocar em vasilhames contendo lcool, na mesa de apoio do fluxo.

3 - Cmara e Lamnula de Neubauer e Homogeneizadores de Vidro:

Aps uso, colocar em vasilhame imergindo em hipoclorito a 1%. Aps 1 hora, lavar em gua corrente,
secar e guardar.

MATERIAL PLSTICO

1) Frasco, tubos de ensaio, seringas, ponteiras e tampas

a)

Contaminados:

Imergir em hipoclorito de sdio a 1% no mesmo vasilhame utilizado para as vidrarias, com exceo das
ponteiras, que devero ser colocadas em recipientes menor, separado.

Observao: Encher as ponteiras com a soluo de hipoclorito ao desprez-las.

b) No contaminados, porm sujos com material aderente (adjuvante oleoso, Nujol, Percoll,etc):

Lavar em gua corrente e imergir em Extran a 2% por tempo mnimo de 04 horas em vasilhame apropriado.

2) Pipetas Descartveis

a)

Contaminadas:

Colocar no vasilhame para pipeta de vidro.

b) Sujas com material aderente:

Lavar em gua corrente e colocar no vasilhame para pipeta de vidro.

3) Tampas pretas de poliestireno:

Imergir em formol a 10% ou glutaraldedo a 2% por um mnimo de 24 horas ou 02 horas respectivamente.

OUTROS MATERIAIS:

1) Agulhas descartveis

a) Contaminadas:

Aps o uso imergir no vasilhame de paredes duras contendo formol a 10%, para isso destinado, pelo menos
24 horas.

Observao: DESPREZ-LAS SEM USAR O PROTETOR a fim de se evitar o risco de acidentes (puno
acidental do dedo).

b) Sujas com material aderente:

Desprez-las com o respectivo protetor bem preso. Aps a descontaminao dever ser incinerado

2) Material Cirrgico

a)

Contaminado:

Imergir em soluo de glutaraldeido a 2% por 02 horas para desinfectar. Aps lavar em gua corrente e
destilada, secar com gase e guardar.

Se desejar esterilizar o material, submeter a glutaraldeido a 2% durante 10 horas, lavar e secar com gua e
gaze estreis dentro do fluxo laminar. Alternativamente.

3) Tampes de Gaze

a) Molhados com cultura

Colocar no vasilhame com hipoclorito de sdio a 1% para ser desprezado aps desinfeco.

b) Secos

Deixar em vasilhame reservado por, no mnimo, 48 horas e em seguida

reutiliz-los.

4) Filtros Millipore Pequenos

Devem ser desmontados pelo operador, colocados dentro de um frasco com hipoclorito e entregues
esterilizao (at s 16 horas).

5) Culturas de parasitos no utilizados

Colocar um volume duas vezes maior de hipoclorito dentro dos frascos e em seguida desprezar dentro do
vasilhame para vidrarias ou plsticos.

6) Ims para agitadores magnticos

Aps uso, lavar com gua corrente e destilada, secar e guardar.

7) Placas de gel de poliacrilamida

Aps o uso, lavar em gua corrente, gua destilada e lcool, secar e guardar.

EQUIPAMENTOS, BANCADAS E PIAS

1)

Cada usurio dever limpar e arrumar as bancadas e equipamentos aps o uso.

2) No final do expediente as bancadas devero ser limpas com hipoclorito a 0,5% e, na sexta-feira, tarde,
na caso, na sala de cultura, fazer a mesma limpeza com fenol semi-sinttico (Germipol 50 ml/1lt),
utilizando mscara.

3) As pias devero ser limpas no incio do expediente, quando forem removidos os materiais a serem
lavados.

4) Verificar se os refrigeradores e freezeres precisam ser descongelados e limpos, semanalmente, e

executar a limpeza, se necessrio.

ALGUMAS NORMAS DA SALA DE ESTERILIZAO

A) - LAVAGEM:

1)

Retirar, os vasilhames com materiais a serem lavados, da sala, no incio do expediente.

2)

Lavar o material que estava com hipoclorito de sdio, fenol ou glutaraldedo em gua corrente.

3) Mergulhar o material em Extran em vasilhames especficos para cada tipo de material, pelo perodo
mnimo de 04 horas.

4) Retirar o Extran do material aps escov-los (quando necessrio), rinsando-os , repetidas vezes, com
gua de torneira seguido por gua destilada.

5)

Fazer a rinsagem das pipetas graduadas dentro do lavador de pipetas.

6) Secar o material em estufa. Colocar papel alumnio para cobrir a vidraria no autoclavvel e devolver
ao laboratrio.

B) ESTERILIZAO:

1) PIPETAS

Colocar chumao de algodo, empacotar em papel pardo ou porta-pipetas e esterilizar em forno (170 180
C) por 01 hora.