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Universidad Industrial de Santander

Facultad de Salud
Escuela de Bacteriologa y Laboratorio Clnico
Programa de Microbiologa y Bioanlisis
Hematologa II
ua de Laboratorio
!ocentes
Sandra Liliana Salazar
Martha Lucia Snchez
"#$I#%&E !U
El antgeno antiguamente llamado D
u
en realidad es un alelo dbil del D, que puede ponerse de
manifiesto mediante anticuerpos anti-D ms potentes que los habitualmente utilizados o por medio de
pruebas que facilitan la aglutinacin de los eritrocitos pre!iamente sensibilizados "prueba de #oombs$%
#on la utilizacin de anticuerpos monoclonales se detectan la ma&ora de alelos dbiles del antgeno D%
la importancia prctica del D dbil radica en que puede sensibilizar a un receptor D negati!o% 'or
consiguiente es necesaria la realizacin de pruebas apropiadas para la deteccin de estos D dbil con el
fin de e!itar las transfusiones de sangre errneamente clasificada como (h negati!a
)
%
#ausas de la e*presin de un antgeno D dbil+
La represin del gen D por un gen # en posicin trans "cromosoma opuesto$%
La e*istencia de un alelo Du%
La formacin de un antgeno D incompleto%
,na persona puede ser (h negati!o Du positi!o% Es un antgeno dbil que no se manifiesta, dando como
resultado (h negati!o, pero puesto que su e*istencia puede ser demostrada genticamente se puede
hablar de (h negati!o Du positi!o%
HEM'CL#SIFIC#CI(% !I$EC&# "#$I#%&E !U
Fundamento)
Los eritrocitos (h "D$ positi!os poseen el antgeno D, pero en ocasiones este no es lo suficientemente
intenso como para producir aglutinacin en presencia de cualquier suero anti-D% 'or eso se debe someter
a los antgenos a etapas de estimulacin para lograr su !isualizacin%
Materiales)
-res tubos de ensa&o largos Solucin salina
EL#B'$#!' P'$)
Katherin Lizeth Bonilla
Carvajal
$E"IS#!' P'$)
Sandra L. Salazar M., Esp.
Hematologa
#P$'B#!' P'$)
Marta Lucia Snchez, Esp.
Calidad
FECH#+ ).-/.-)0 FECH#) FECH#)
Universidad Industrial de Santander
Facultad de Salud
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Programa de Microbiologa y Bioanlisis
Hematologa II
ua de Laboratorio
!ocentes
Sandra Liliana Salazar
Martha Lucia Snchez
1lbulos ro2os la!ados del 0-34
Serfuga o centrifuga a
5%6//('M70minutos
Suero anti-D
8lbumina al 5/4
9a:o mara a 5; #
Suero de #oombs policlonal
Lmpara
Procedimiento)
$eactivos y #nalitos Paciente
Muestra Sangre con ED-8 8dicionar al tubo 5 a 3 gotas
Solucin salina fisiolgica /%<4 8dicionar solucionar hasta las = partes del tubo
centrifugar 5%3// rpm durante 0 minutos%
descartar el sobrenadante sobre compresa
8gregar nue!amente solucin salina al /%<4 hasta las = partes del tubo > centrifugar > descartar & repetir el
proceso anterior tres !eces
En el ultimo la!ado descartar el sobrenadante & adicionar nue!amente solucin salina al /%<4 hasta obtener un
color salmn "concentracin de 5-34$%
$eactivos y #nalitos &ubo del Control*%o+ Paciente &ubo del Paciente* %o+
lobulos ro,os lavados del -*./ ,na gota ,na gota
$eactivo de anti *! --------- ,na gota
#lbumina al -0/ ,na gota ----------
EL#B'$#!' P'$)
Katherin Lizeth Bonilla
Carvajal
$E"IS#!' P'$)
Sandra L. Salazar M., Esp.
Hematologa
#P$'B#!' P'$)
Marta Lucia Snchez, Esp.
Calidad
FECH#+ ).-/.-)0 FECH#) FECH#)
#entrifugar a 5%3// rpm por 5/ segundos, para facilitar la reaccin antgeno-anticuerpo%
?ncubar los tubos en el ba:o mara a 5;
o
# por 5/ minutos%
#entrifugar las muestras a 53// rpm por 5/ segundos, para realizar la lectura por aglutinacin%
(ealizar tres la!ados de la muestra empleando solucin salina al /%<4 & descartando bien el sobrenadante del
@ltimo la!ado "descarte sobre compresa$%
8gregar dos gotas de suero de #oombs "fase coombs$
Lavar los glbulos rojos del paciente
Abser!ar la reaccin colocando el tubo sobre la lmpara encendida
#entrifugar las muestras a 53// rpm por 5/ segundos, para realizar la lectura por aglutinacin%
Si no se obser!a aglutinacin a:adir una gota del control de #oombs
#entrifugar a 53// rpm75/ segundos & e*aminar para e!aluar la presencia de aglutinacin%
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Hematologa II
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Sandra Liliana Salazar
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Inter1retaci2n de resultados) Abser!ar la presencia de aglutinacin
Inter1retaci2n de la 1rueba de "ariante !u
3#glutinaci2n4
Fase &ubo Paciente &ubo #utocontrol Inter1retaci2n 'bservaciones
Salina
'ositi!a Begati!o (h positi!o Siempre se debe procesar el
autocontrol utilizando la albumina &
los glbulos ro2os la!ados del
paciente%
Begati!o Begati!o (h Begati!o #ontinuar con la tcnica de la !ariante
Du%
'ositi!o 'ositi!o 8utoaglutinacin
Calla en la tcnica
(epetir la tcnica
Case a 5;
o
#
'ositi!a Begati!o (h positi!o Siempre se debe procesar el
autocontrol utilizando la albumina &
los glbulos ro2os la!ados del
paciente%
Begati!o Begati!o (h Begati!o #ontinuar con la tcnica de la !ariante
Du%
'ositi!o 'ositi!o 8utoaglutinacin
Calla en la tcnica
(epetir la tcnica
#oombs
Begati!o Begati!o (h Begati!o > Dariante
Du Begati!a
#ontinuar la tcnica con la adicin de
clulas control de #oombsEE
'ositi!a Begati!o (h negati!o !ariante
Du positi!o
8nticuerpos irregulares
o autoanticuerpos%
(ealizar #oombs Directo para
descartar la presencia de anticuerpos
irregulares o autoanticuerpos%
'ositi!o 'ositi!o 8utoaglutinacin (epetir la tcnica, realizar #oombs
EL#B'$#!' P'$)
Katherin Lizeth Bonilla
Carvajal
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Hematologa
#P$'B#!' P'$)
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Calidad
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Hematologa II
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!ocentes
Sandra Liliana Salazar
Martha Lucia Snchez
Calla en la tcnica directo
#lulas
control de
#oombsEE
'ositi!o 'ositi!o Dalida la tcnica ?ndica que e*isten anticuerpos libres
que se unen a los glbulos ro2os A
(h positi!os sensibilizados
Begati!o Begati!o ?n!alida la tcnica (epetir la tcnica con material &
reacti!os nue!os
%'&#) 8 toda persona clasificada como (h negati!a debe realizrsele prueba de Du
para descartar antgenos D dbiles%
BIBLI'$#FI#
5+ Foan l% Di!es #orrons, Fosep L% 8guilar 9ascompte% M8B,8L DE -E#B?#8S DE
L89A(8-A(?A EB GEM8-ALA1?8% -ercera Edicin% Editorial ELSED?E(
M8SSAB% 9arcelona - Espa:a% 0//.
6+ ?nstructi!o !ariante D, "9MS-?-/5$% Gospital ,ni!ersitario de Santander% 0/)/
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