Informe No. 3 Tema: Determinacin cualitativa de algunos componentes del protoplasma celular Integrantes: Luz Adriana Giraldo Anaya 0191320003 Jennifer Garcez Escobar 6621320033 Stefannia Rumie Cantillo 0191212001
Resumen En la prctica de laboratorio se determino cualitativamente algunos de los componentes del protoplasma celular identificando as la presencia de protenas, lpidos y carbohidratos con la ayuda de los diferentes reactivos que nos indicaban un cambio en la reaccin con la presencia de un color diferente al inicial y en el caso de los lpidos nos permiti identificar a travs de las fases que se observo con cada uno de los procedimientos.
Procedimiento 1-Determinacin de carbohidratos 1.1-Monosacridos: a. En un tubo de ensayo vertimos 5ml del reactivo de benedict, y se calent hasta ebullicin b. Se aadi al mismo tubo de ensayo 1ml de una solucin de glucosa y se calent hasta ebullicin c. Maceramos un trozo pequeo de guayaba madura y se adiciono a un tubo de ensayo que contena 5ml de reactivo de benedict, luego se calent hasta ebullicin. 1.2-Polisacrido:
a. se hizo una suspensin acuosa de almidn y vertimos en un tubo de ensayo 2 ml de ella.
b. a la anterior solucin se le agrego dos gotas de solucin de lugol
2-Determinacin de Protenas: a. Se diluyo la clara de un huevo en 50ml de suero fisiolgico. b. A 1ml de la solucin anterior se aadio dos gotas de sulfato de cobre al 0.5% y 1ml de hidrxido de sodio al 10%, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales Asignatura: Biologa General Docente: Faride Lamadrid Feris Biol. MSc.
c. . En un tubo de ensayo, se coloco 2ml de solucin de gelatina sin sabor, y se procedi como en el caso anterior.
3-Determinacin de lpidos 3.1-Lpidos: a. Se Coloco en un tubo de ensayo 3ml de agua. Agregandole una pizca del reactivo Sudan III . b. En el mismo tubo de ensayo se adiciono 1ml de aceite vegetal. agitamos y dejamos en raposo. c. En otro tubo de ensayo se coloco 2ml de grasa animal y agregamos una pizca de reactivo Sudan III. A los procedimientos anteriores de la determinacin de lpidos se agito cada solucin y luego se dejo en reposo.
3.2-Reaccin de Lieberman Burchard para colesterol: a. Se diluyo una parte de la yema de huevo en 10 ml de cloroformo.
b. Se tomo 1ml de la solucin clorofrmica en un tubo de ensayo limpio y seco
c. Se adiciono 1 ml de anhdrido actico y 3 gotas de acido sulfrico concentrado Al final se agito la solucin para observar la reaccin. Resultados Para cada uno de los procedimientos descritos con anterioridad se observo cambios con los cuales identificamos cualitativamente algunos de los componentes del protoplasma celular. En su respectivo orden: 1.1-monosacaridos: cuando se calent hasta ebullicin no cambio de color pero al adicionar 1ml de la solucin de glucosa y calentar nuevamente se observo una turbidez verde con una lnea amarilla finalmente quedo de color rojo naranja que indica que la concentracin de azcar supera el 1.5%. Cuando se calent la solucin que tenia la guayaba madura con el reactivo de benedict se observo de color verde y luego rojo ladrillo. 1.2-polisacaridos: se observo un cambio de color al calentar la suspensin de almidn de una tonalidad naranja y menor cantidad Facultad de Ciencias Exactas y Naturales Asignatura: Biologa General Docente: Faride Lamadrid Feris Biol. MSc.
de lquido. al adicionar las dos gotas de lugol esta se coloca de un color morado oscuro. 2-proteinas: cuando agregamos a la clara de huevo hidrxido de sodio y sulfato de cobre se observo un color purpura que nos indica la presencia de protena. En la solucin de gelatina sin sabor mas sulfato de cobre se observa un color azul en la solucin pero cuando se adiciono sulfato de sodio se coloco de color purpura identificndose as la presencia de una protena llamada colgeno. 3.1-lipidos: cuando se aade al agua el reactivo de sudan III se observo que no se mezclo con el agua luego al adicionar aceite vegetal se observan dos fases de la solucin. Con la grasa se observo que el reactivo de sudan III si se diluyo. 3.2-se formo un anillo de color caf al adicionar cada reactivo correspondiente luego de un tiempo se observo un color caf oscuro.
. Cuestionario Que es un azcar reductor?
son aquellos que, como la glucosa, fructosa, lactosa y maltosa presentan un carbono libre en su estructura y pueden reducir, en determinadas condiciones, a las sales cpricas.
Cuales son los componentes del reactivo de Benedict?
CuSO4 . 5H2O
Citrato sdico
Na2CO3 (anhidro)
Agua destilada
Cual es la composicin qumica del lugol?
1. Iodo-5 gramos
2. Ioduro de potasio-10 gramos.
3. agua destilada-85 gramos. o cantidad suficiente para 100 ml.
En que consiste la reaccin del biuret?
La reaccin o prueba de Biuret es un mtodo que detecta la presencia de compuestos con dos o ms enlaces peptdicos y, por tanto, sirve para todas las protenas y pptidos cortos
En que consiste la reaccin xantoproteica?
Facultad de Ciencias Exactas y Naturales Asignatura: Biologa General Docente: Faride Lamadrid Feris Biol. MSc.
Es un mtodo que se puede utilizar para determinar la cantidad de protena soluble en una solucin, empleando cido ntrico concentrado.
Que es el Sudan III?
Es un lysochromo (tintes solubles en grasa) tinte diazo utilizado para la tincin de triglicridos en secciones congeladas, y algunas protenas lpidos y lipoprotenas en cortes de parafina.
Bibliografa - Libro de Biologa molecular y celular robertis - www.esmateria.com