Licenciatura en Qumico Farmacutico Bilogo Laboratorio de Microbiologa II
Prctica 1. Microscopa
Antonio de Jess Muoz Escobar 100724 al100724@alumnos.uacj.mx Ciudad Jurez, Chih., 26 de agosto del 2014
Resumen El microscpio es una de las herramientas fundamentales en el estudio de las ciencias de la naturaleza, como lo es la microbiologa. En esta prctica se llev a cabo un ejercicio de enfoque de una lmina de coleccin para conocer el correcto manejo del microscopio ptico y sus cuidados. Se logr identificar un microorganismo (alga) en la preparacin, y se analizaron los procedimientos adecuados para que la visualizacin se pudiera llevar a cabo.
Introduccin El microscopio es un instrumento ptico que se emplea para el estudio de muestras que no pueden ser examinadas a simple vista. El principio en el que se basa la obtencin de imgenes de mayor tamao es la desviacin de la luz que se presenta cuando atraviesa una superficie curva transparente como el vidrio. El microscopio simple est formado por un sistema de lentes biconvexas o plano-convexas que suelen ir montadas en una armadura metlica. Por otro lado, el microscopio compuesto emplea 2 sistemas de lentes separados, consiguiendo mayores aumentos. El primer sistema produce una imagen amplificada del objeto con el objetivo, y el segundo aumenta la imagen formada por el primero, que es donde se encuentra el ocular. Existen distintos tipos de microscopios compuestos, como lo son el de campo claro, campo oscuro, contraste de fases y fluorescencia. Aunque son adaptaciones para fines especficos, todos se basan en los mismos principios fundamentales y con respecto a su funcionamiento son semejantes entre s. El microscopio compuesto consta de tres componentes: un sistema de iluminacin, un sistema ptico y un sistema mecnico. El primero se consigue mediante una lmpara y un condensador que aumenta la iluminacin mediante la concentracin de rayos luminosos. El diafragma sirve para regular el haz de luz. El sistema ptico se compone de 2 lentes, el objetivo y el ocular. El objetivo es un pequeo tubo con una combinacin de lentes que produce determinado aumento. El ocular es una lente que se situa en la parte superior del tubo del microscopio. La estructura mecnica consta del tubo, brazo, platina, tornillos de enfoque y pie. Objetivos Conocer las partes del microscopio con su manejo y sus cuidados, as como entender su fundamento. Materiales y mtodos Microscopio compuesto Portaobjetos (lamina de coleccin) Aceite de inmersin Papel seda Ejercicio de enfoque Despus de identificar las diferentes partes que constituyen el microscopio, se procedi a realizar un ejercicio de enfoque. Se coloc el portaobjetos en la platina y se ajust el carro, haciendo coincidir el haz de luz con el espcimen. Se movi cuidadosamente el revlver, colocando el objetivo de 5x sobre la preparacin. Se movi el tornillo macromtrico hasta acercar el objetivo a la platina. Sin dejar de observar por el ocular, se movi lentamente el tornillo macromtrico para ir alejando el objetivo hasta detectar una imagen en la preparacin. Al enfocar la preparacin, se movi el tornillo micromtrico para afinar el enfoque. Una vez logrado el enfoque, se ajust el diafragma para determinar la cantidad de luz ms efectiva. Se movi el revlver lentamente para cambiar de objetivo. Al emplear el objetivo de 100x, previamente se coloc una gota de aceite de inmersin sobre la preparacin, para con ello dejar que la lente del objetivo de 100x entre en contacto con el aceite. Al terminar, se limpi con papel seda los residuos de aceite en el lente. Se retir la preparacin de la platina y se procedi a limpiar el microscopio. Se apag el aparato, enrollando el cable. Se anotaron los resultados. Resultados Enseguida se muestran las imgenes obtenidas al enfocar el espcimen en los diferentes grados de aumento, comenzando por 5x hasta 100x.
Figura 1. Imgenes visualizadas de Chlorella empleando diferentes grados de aumento, 5x (arriba izquierda ), 10x (arriba derecha ), 40x (abajo izquierda ) y 100x (abajo derecha Discusin El llevar a cabo cada una de las precauciones en el manejo y correcto enfoque del microscopio, nos permiti visualizar el espcimen correctamente. Al emplear los objetivos de 5x y 10x para poder enfocar el portaobjetos, no eran muy apreciables las imgenes de lo que esperaramos encontrar, sino simples corpsculos diminutos que nos permitieron fijar el lente para su posterior anlisis a mayor grado de aumento. En el aumento de 40x fue posible apreciar con mayor claridad el microorganismo presente visualizando su morfologa y contorno. Finalmente en el aumento de 100x se pudo visualizar el espcimen, que en este caso es el alga Chlorella, con un mayor detalle, visualizando incluso su interior.
Conclusin Fue posible la visualizacin del preparado al seguir correctamente los pasos del manejo adecuado del microscopio. Cada uno de los objetivos nos permiti visualizar con mayor detalle las caractersticas morfolgicas del espcimen. Es necesario contar con un conocimiento previo de las muestras a analizar para conocer la mejor tcnica de visualizacin, as como el microscopio ms adecuado para una buena observacin, tomando en cuenta sus diferencias y utilidades. Referencias bibliogrficas 1. Gonzlez, M. Pilar, et al. Prcticas de laboratorio y de aula. Narcea Ediciones, Espaa, 2003, pp. 39-40 2. Olivas, E. Manual de prcticas de Microbiologa I y II y Parasitologa. UACJ, 2001, pp. 7-8. 3. Santamarina, P., Garca, F. Prcticas de biologa y botnica. Ed. Univ. Politc. Valencia, 2004, pg. 9.