LAPORAN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI KELOMPOK 4

LAPORAN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI

STERILISASI, PEMBUATAN MEDIA DAN
PENGENALAN ALAT
Disusun oleh:
Kelompok 4
Afdilah Irawati Wahyono (1306413454)
Herra Williany Monalissa (1306403516)
Whinanda halista (13064!0"10)
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS INDONESIA
2014
LAPORAN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI KELOMPOK 4
A. PENDAULUAN
Mi#roor$anis%e adalah %a#hlu# hidu& dan untu# %e%eliharanya di&erlu#an
%ediu% yan$ harus %en$andun$ se%ua 'at yan$ di&erlu#an untu# &ertu%(uhannya
antara lain senyawa or$ani#) &rotein) #ar(ohidrat) le%a#) %ineral) dan *ita%in+
,ada saat %ela#u#an &e%(uatan %ediu%) hal yan$ harus di&erhati#an ialah
(e#er-a se.ara ase&ti#+ /e#er-a se.ara ase&ti# (isa %eli&uti sterilisasi) -adi saat
&e%(uatan %ediu% dila#u#an alat0alat yan$ a#an di$una#an harus disterilisasi se(elu%
ino#ulasi+ 1terilisasi yaitu suatu &roses untu# %e%ati#an se%ua or$anis%e yan$ da&at
%en-adi #onta%inan+ ara terse(ut di$una#an untu# %en$han.ur#an) %en$ha%(at
&ertu%(uhan %i#roor$anis%e dan %enyin$#ir#an %i#roor$anis%e+ Metode yan$
u%u%nya ditera&#an untu# %ensterilisasi#an %ediu% dan alat0alat ialah den$an
&e%anasan+ 2i#a &anas di$una#an (ersa%a0sa%a den$an ua& air dise(ut sterilisasi (asah
(%en$$una#an auto#laf)) sedan$#an -i#a tan&a ua& air dise(ut sterilisasi #erin$
(%en$$una#an o*en)+
B. PRINSIP
1. 1terilisasi den$an %en$$una#an auto#laf ya#ni untu# %en$hilan$#an se%ua %i#ro(a
yan$ terda&at di dala% %ediu%) .awan &etri) ta(un$ rea#si) &i&et dan se(a$ainya yan$
a#an di$una#an untu# &er.o(aan nantinya+ 1terilisasi ini dila#u#an dala% #eadaan
te#anan tin$$i ua& air -enuh+
2. ,e%(uatan %edia yan$ %en$andun$ nutrisi untu# &ertu%(uhan %i#ro(a+
!. TU"UAN
1. Men$etahui &eralatan yan$ di$una#an dala% &en$u-ian %i#ro(iolo$i+
2. Men$etahui &roses dan te#ni# sterilisasi den$an %en$$una#an auto#laf
#. Men$etahui .ara &e%(uatan %edia a$ar (ai# &adat %au&un .air yan$ di&erlu#an untu#
%e%(ia##an %i#ro(a+
LAPORAN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI KELOMPOK 4
D. ALAT DAN BAAN
A+ 1terilisasi
,e%(a#ar s&iritus
3untin$
4ertas .o#elat
4aret $elan$ tahan &anas
4a&as
awan ,etri
,i&et u#ur
5a(un$ rea#si
/+ ,e%(uatan Media
6a(u u#ur
5i%(an$an
,er#a%en
1&atel7s&atula
,e%anas (Hot plate)
8utrient a$ar
Air sulin$
E. PROSEDUR KER"A
A+ 1terilisasi den$ana auto#laf
1+ Alat yan$ ter(uat dari $elas di(alut %en$$una#an #ertas .o#lat+
9+ ,i&et u#ur disu%(at #edua u-un$nya dne$an #a&as) #e%udian di(alut den$an
#ertas .o#elat yan$ telah di$untin$ %e%an-an$+
3+ 5a(un$ rea#si disu%(at %ulutnya den$an #a&as) tu%&u# 10 (uah lalu di(un$#us
den$an #ertas .o#elat+ 4e%udian dii#at den$an #aret $elan$+
4+ awan &etri di tu%&u# 5 (uah) #e%udian di(un$#us den$an #ertas .o#elat dan
dii#at den$an #aret $elan$+
5+ 1eluruh alat yan$ sudah di (un$#us den$an #ertas .o#elat di%asu##an #e dala%
auto#laf sela%a 15 %enit dala% suhu 191:+
i+ /u#a tutu& auto#laf) %asu##an %edia 8utrient A$ar yan$ sudah di(uat
terle(ih dahulu #e%udian alat alat yan$ telah di(un$#us #ertas .o#elat+
ii+ 5utu& #e%(ali auto#laf lalu &asan$ se%ua #un.i)#e%udian te$a##an antena
dan la%&u %erah dinyala#an+
iii+ 1etelah ua& #eluar) auto#laf a#an (er(unyi+ 6alu tutu& s#ru& dan anterna
di%irin$#an
i*+ 1etelah suhu %en.a&ai 191: la%&u hi-au a#an %enyala) atur wa#tu 15 %enit
untu# sterilisasi atau 30 %enit untu# %e%(unuh (a#teri+
*+ 1etelah wa#tu ter.a&ai) &enun-u# wa#tu a#an #e%(ali #e 0 dan sterilisasi
selesai+
*i+ /u#a tutu& auto#laf dari sa%&in$ a$ar tida# #ena ua& &anas+
*ii+ Din$in#an di le%ari &endin$in se%ua alat yan$ sudah di#eluar#an dari alat
auto#laf) #e%udian alat sia& di$una#an+
/+ ,e%(uatan Media
1+ 6eta##an #ertas &er#a%en di atas ti%(an$an) te#an to%(ol tara a$ar (erat #ertas
&er#a%en tida# i#ut dala% &eni%(an$an+
9+ 5i%(an$ (u(u# 8utrient a$ar se(anya# 3)5 $ra%+
3+ 1ia&#an air didala% $elas u#ur se(anya# 15 0%l
LAPORAN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI KELOMPOK 4
4+ 6eta##an #ertas &er#a%en %en-adi se&erti .oron$ &ada %ulut la(u (ulat+
5+ Masu##an (u(u# 8utrient a$ar #e dala% la(u (ulat+
6+ 5uan$#an air sedi#it de%i sedi#it sehin$$a seluruh (u(u# nutrient a$ar &ada
&er#a%en turun+
"+ 5uan$#an air sehin$$a %en.a&ai ; dari *olu%e total %edia) su%(at %ulut la(u
(ulat dan #o.o# hin$$a se%ua (u(u# nutrient larut+
!+ 5a%(ah#an *olu%e air hin$$a *olu%e larutan %en.a&ai yan$ diin$in#an+
<+ /un$#us %ulut la(u den$an #ertas .o#lat dan i#at den$an #aret $elan$+
10+ ,anas#an di le%&en$ &e%anas sa%(il di#o.o#0#o.o# sa%&ai se%ua (u(u# larut
se%&urna dan larutan %en-adi -ernih+
11+ Masu##an #e auto#laf sela%a 15 %enit den$an suhu &e%anasan 191+
19+ Din$in#an di le%ari &endin$in) %edia sia& di$una#an+ 1i%&an di le%ari
&endin$in (suhu !010)yan$ steril a&a(ila tida# lan$sun$ a#an di$una#an+
F. ASIL PENGAMATAN

G. PEMBAASAN
1terilisasi wa-i( dila#u#an se(elu% %ela#u#an &er.o(aan %en$$una#an %i#ro(a+
1terilisasi ter(a$i atas sterilisasi (asah dan #erin$+ 1terilasi #erin$ da&at %en$$una#an
a&i dan o*en atau sterilisator udara &anas sedan$#an sterilisasi (asah salah satunya adalah
%en$$una#an auto#laf+ 1terilisasi den$an auto#laf ini %en$$una#an &rinsi& te#anan
tin$$i ua& air -enuh) sehin$$a harus hati0hati dala% &en$$unaannya+ 1elain
sterilisasi)se(elu% %ela#u#an &ra#ti#u% %i#ro(iolo$i yan$ harus #ita #etahui adalah
.ara &e%(uatan %edia &er(enihan untu# (a#teri yan$ a#an di$una#an nanti+ Media
&er(enihan ini yan$ nantinya a#an di-adi#an te%&at &ertu%(uhan (a$i (a#teri terse(ut
sehin$$a %edia ini harus %en$andun$ se%ua senyawa yan$ di&erlu#an (a#teri untu#
tu%(uh se&erti senyawa or$ani#)&rotein)#ar(ohidrat)le%a#)*ita%in)%ineral)dll+
Media &er(enihan yan$ da&at di$una#an (er%a.a%0%a.a%)antara lain Nutrient Broth
(NB), Nutrient Agar (NA), Plate Count Agar (PCA), Sabouraud Dextrose Agar (SDA))
dan se(a$ainya+
1e.ara u%u%) %ediu% di(a$i %en-adi ti$a:
1+ Mediu% Ala%iah atau 1u(strat
Mediu% ini terdiri dari (ahan0(ahan ala% se&erti: sari (uah) wortel)
nasi) -a$un$) dan (ahan ala%iah lain+
9+ Mediu% 1e%i Ala%iah
Mediu% ini terdiri dari (ahan ala%iah dita%(ah den$an senyawa
#i%ia) %isalnya Potato Dekstrose Agar (,DA) dan Agar Ekstrak Tauge (5=A)
3+ Mediu% /uatan atau 1inteti#
LAPORAN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI KELOMPOK 4
Mediu% ini terdiri dari senyawa0senyawa #i%ia yan$ #o%&osisi dan
-u%lahnya sudah ditetntu#an) %isalnya Capeks Dox Agar (CDA) dan
Sabouraud Dextrose Agar (1DA)
Menurut #e$unaannya %ediu% di$olon$#an %en-adi:
1+ Mediu% >%u%
Mediu% ini da&at ditu%(uhi %i#roor$anis%e se.ara u%u%+ Misalnya:
8utrient A$ar (8A) dan 5au$e =#stra# A$ar (5=A)
9+ Mediu% 1ele#tif
Mediu% ini #o%&osisinya sede%i#ian ru&a sehin$$a hanya -enis -enis
%i#roor$anis%e tertentu yan$ da&at hidu&) %isalnya 1al%onella 1hi$ella A$ar
(11A) dan /rilliant 3reen 6a.tose /roth (/36/)
3+ Mediu% Diferensial
Mediu% ini di$una#an untu# %e%(eda#an -enis -enis %i#roor$anis%e
satu den$an yan$ lain den$an rea#si atau .iri yan$ #has) %isalnya =osin
Methylen /lue A$ar (=M/A) dan /lood A$ar (/A)
4+ Mediu% ,er#ayaan
Mediu% ini di&a#ai untu# %enu%(uh#an %i#roor$anis%e tertentu)
se(elu% %i#roor$anis%e di(ia##an dala% %ediu% lain+ 5u-uannya adalah
untu# %en$a#tif#an %i#roor$anis%e tertentu+
. KESIMPULAN
1terilisasi den$an %en$$una#an auto#laf da&at dila#u#an untu# %e%asti#an
alat0alat yan$ a#an di$una#an dala% &ra#ti#u% %i#ro(iolo$i tida# ter#onta%inasi
oleh (a#teri &en$$an$$u lain+ 1edan$#an %edia &er(enihan se&erti 8utrient A$ar dan
8utrient /roth yan$ telah di(uat da&at di$una#an se(a$ai %edia &ertu%(uhan (a#teri
yan$ a#an diteliti nantinya di dala% &ra#ti#u% %i#ro(iolo$i+
I. DAFTAR PUSTAKA
?ad-i) Ma#su%+ 9019+ Penuntun Praktiku! "ikrobiologi #ar!asi+ De&o#: @a#ultas
@ar%asi >I+
1taf ,en$a-ar @a#ultas 4edo#teran >ni*ersitas Indonesia+ 1<<4+ "ikrobiologi
$edokteran+ 2a#arta: /inaru&a A#sara+
LAPORAN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI KELOMPOK 4
LAMPIRAN
Al$%&$l$% '( L$)o*$%o*(+m
1+ 1&e#trofoto%eter
Alat ini (erfun$si untu# %en$hitun$ a(sor(an (a#teri yan$ ada dala% #u*et+
1&e#trofoto%eter -u$a di$una#an untu# &en$u#uran #e#eruhan) #e#eruhan ini
%en$$a%(ar#an -u%lah (a#teri &ada suatu #ultur .air+
9+ Alat ti%(an$
5erda&at 9 -enis alat ti%(an$ yan$ terda&at di 6a(oratoriu% @ar%asi >I) salah satunya
adalah ti%(an$an analiti#+ 5i%(an$an analiti# ini ditutu& den$an $elas #a.a a$ar
%en$uran$i fa#tor &en$$an$$u dari lin$#un$an #arena ti%(an$an ini san$at sensitif+
5i%(an$an analiti# (erfun$si untu# %eni%(an$ (ahan yan$ a#an di$una#an dala%
&ra#ti#u% den$an tin$#at #etelitian yan$ tin$$i+

3+ Water (ath
Alat ini (erfun$si untu# %enyi%&an %edia a$ar (yan$ di$una#an untu# analisa den$an
te#ni# tuan$ 7 &ure &late ) su&aya %edia teta& dala% #ondisi leleh7.air) (isanya suhu
diatur &ada #isaran 40045
o
+ >ntu# %en-a$a air &ada &enan$as air tida# ter#onta%inasi
%i#ro or$anis%e %a#a &erlu dita%(ah#an .itri. a.id 0+3A dan &otassiu% sor(at 0+1A+
LAPORAN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI KELOMPOK 4

4+ 1entrifu$ator
1entrifu$ator adalah alat yan$ (erfun$si untu# %e%utar sa%&el den$an #e.e&atan tin$$i+
/iasanya di$una#an untu# %e%isah#an #o%&onen seluler dala% darah (seru% dan
&las%a)) sehin$$a sia& di$una#an untu# #e&erluan &enelitian+
5+ 6e%ari ,endin$in)
Alat ini (erfun$si se(a$ai te%&at &enyi%&anan (ai# %edia) (a#teri) atau&un -a%ur yan$
diatur &ada suhu tertentu a$ar %edia) (a#teri atau -a%ur terse(ut da&at teta& (ertahan
la%a+
6+ B*en
Alat ini (erfun$si untu# sterilisasi #erin$+ alat0alat yan$ disteril#an %en$$una#an o*en
antara lain &eralatan $elas se&erti .awan &etri) ta(un$ rea#si) dll+ 1terilisasi #erin$
den$an o*en dila#u#an den$an .ara %e%anas#an den$an suhu 1!0C sela%a 1 -a%+
LAPORAN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI KELOMPOK 4
"+ Hot&late
Alat ini terda&at 9 -enis dala% la(oratoriu% yaitu Hot&late den$an stirrer dan Hot&late
tan&a stirrer+ Hot&late (erfun$si untu# %en$ho%o$en#an suatu larutan den$an
&en$adu#an) adanya &elat (&late) yan$ terda&at dala% alat ini da&at di&anas#an sehin$$a
%a%&u %e%&er.e&at &roses ho%o$enisasi+

!+ Da#u%
<+ Desi#ator
Desi#ator ter(uat dari #a.a (er(entu# &an.i (ersusun dua yan$ (a$ian (awahnya diisi
(ahan &en$erin$ se&erti sili#a $el sehin$$a &en$aruh ua& air sela%a &en$erin$an da&at
disera& oleh sili#a $el terse(ut+
LAPORAN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI KELOMPOK 4
10+ &H %eter
Alat ini (erfun$si untu# %en.e# dera-at #easa%an 7 ,H %edia) #arena dera-at #easa%an
san$an (er&en$aruh terhada& &ertu%(uhan %i#ro(a+
11+ In#u(ator
In#u(ator adalah alat untu# %en$in#u(asi atau %e%era% %i#ro(a &ada suhu yan$
ter#ontrol+ Alat ini dilen$#a&i den$an &en$atur suhu dan &en$atur wa#tu+
19+ Alat &en$u#ur #oloni
Alat ini (er$una untu# %e%&er%udah &erhitun$an #oloni yan$ tu%(uh setelah
diin#u(asi di dala% .awan#arena adanya #a.a &e%(esar+ 1elain itu alat terse(ut
dilen$#a&i den$an s#ala7#uadran yan$ san$at (er$una untu# &en$a%atan &ertu%(uhan
LAPORAN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI KELOMPOK 4
#oloni san$at (anya#+ 2u%lah #oloni &ada .awan ,etri da&at ditandai dan dihitun$
oto%atis yan$ da&at direset+