Universidad Nacional del Centro del Per

Facultad de Ingeniera y Ciencias

Humanas
INGENIERA
AGROINDUSTRIA
CURSO : BIOTECNOLOGA
INTEGRANTE : Jaime, MARTINES GASPAR

SEMESTRE : VIII
JUNN PER
201
MANUAL !E BIOTECNOLOGA
CONCEPTO Y BREVE HISTORIA DE LA BIOTECNOLOGA
La biotecnologa, en un sentido amplio se puede definir como la aplicacin de
organismos, componentes o sistemas biolgicos para la obtencin de bienes y servicios.
Esto significa que desde hace miles de aos, la humanidad ha venido realizando
biotecnologa, si bien hasta la poca moderna, de un modo emprico, sin base cientfica
La domesticacin de plantas y animales ya comenz en el perodo !eoltico.
Las civilizaciones "umeria y #abilnica $%&&& aos a.'.( ya conocan cmo elaborar
cerveza.
Los egipcios ya saban fabricar pan a partir del trigo hacia el )&&& a.'.
*ntes de la escritura del libro del +nesis, se disfrutaba del vino en el 'ercano
,riente recurdese que, seg-n la #iblia, !o .sufri. $o disfrut( accidentalmente
los efectos de la fermentacin espont/nea del mosto de la uva $primera borrachera
con vino(.
,tros procesos biotecnolgicos conocidos de modo emprico desde la antig0edad
fabricacin de queso
cultivo de championes
alimentos y bebidas fermentadas salsa de so1a, yogur, etc.
tratamiento de aguas residuales
2or supuesto, hasta la llegada de la moderna biologa, y en muchos casos hasta el siglo
343, la base de muchos de estos procesos era desconocida. 5e hecho, solamente en el
siglo 36444 cobra cuerpo la idea de que la materia viva puede ser estudiada como la
materia inanimada, es decir, usando el mtodo e7perimental, con lo que se inicia el lento
declive de las ideas vitalistas $creencias errneas de que .la vida depende de
un principio vital irreducible a otras ramas de la ciencia.(, que a-n daran sus -ltimos
estertores casi al final del siglo 343. *lgunos hitos cientficos que sentaran la base de
la biotecnologa contempor/nea
Los primeros microscopistas, como van Leeu8enhoe9 y :oo9e $siglo 3644(
describen los .anim/lculos. que est/n fuera del alcance del o1o, si bien se tarda a-n
un par de siglos en captar la importancia de estas min-sculas criaturas.
El descubrimiento de que las fermentaciones se deban a microorganismos se debe a
la gigantesca figura de Louis 2asteur, en sus estudios realizados entre ;<=> y ;<>%.
En la -ltima parte del siglo 343 e7istan ya instalaciones industriales para obtener
etanol, /cido actico, butanol y acetona, aprovechando fermentaciones al aire libre en
condiciones no estriles
* finales del siglo 343, la .edad de oro de la bacteriologa. permite
me1oras importantes en las tcnicas microscpicas
el desarrollo de tcnicas aspticas, la esterilizacin y la pasteurizacin
la posibilidad de cultivar cada cepa microbiana sin mezclas con otras cultivos
puros en medios de cultivo de laboratorio.
* comienzos del siglo 33 la bioqumica y la microbiologa convergen, estableciendo
las bases enzim/ticas y metablicas de muchos procesos de fermentacin. "e
desarrollan procedimientos industriales para producir enzimas $invertasa, proteasas,
amilasas, etc.(.
5esde la dcada de ;?)&, las tcnicas de ingeniera qumica, aliadas a la
microbiologa y a la bioqumica, permiten la produccin de antibiticos, /cidos
org/nicos, esteroides, polisac/ridos y vacunas.
La penicilina comenz a fabricarse en plena 44 +uerra @undial, como resultado de
avances importantes en tcnicas de esterilizacin a gran escala, me1ora de las
instalaciones de fermentacin $incluyendo la cuestin de la aireacin(, cultivo del
hongo, etc. * partir de entonces se disearon estrategias para me1orar genticamente
las cepas microbianas industriales.
Las dcadas siguientes fueron de eclosin de produccin de antibiticos as como
de transformaciones de esteroides y de cultivo de clulas animales para la
produccin de vacunas antivirales.
Las dcadas de los %& y >& vieron la me1ora de procesos de obtencin de pequeos
metabolitos como nuclesidos, amino/cidos y vitaminas.
Los procesos de fermentacin e7perimentaron me1oras con las tcnicas de
inmovilizacin de clulas y enzimas en soportes, y con la fermentacin continua
para obtener protena de clulas sencillas $biomasa microbiana(.
2olmeros microbianos como 7antanos y de7tranos se obtuvieron industrialmente,
con apliaciones en el campo de la alimentacin $como aditivos(.
2ero incluso bien avanzado el siglo 33, cuando la +entica haba resuelto el misterio
de la naturaleza del material de la herencia, las posibilidades que haba para actuar sobre
dicho material eran limitadas cruces entre plantas y animales de la misma especie $o de
especies similares(, seleccin de los individuos con rasgos deseados, retrocruzamientos
$un proceso largo y lento(, mutaciones con agentes fsicos $rayos A6, rayos 3( o
qumicos, con ulterior b-squeda $seleccin o rastreo Bscreening( de alguna variante de
inters $algo tedioso y frecuentemente infructuoso(, etc.
5ebemos esperar a la dcada de los >& para que sur1a un con1unto de tcnicas de
laboratorio revolucionarias que por primera vez permiten .tocar. de modo racional
el sancta sanctorum de la vida. "on tcnicas y herramientas con las que se puede
modificar el *5! de acuerdo a diseos previos y ob1etivos concretos $de ah el nombre
popular de 4ngeniera +entica(.
La 4ngeniera +entica $4.+.(, me1or llamada tecnologa del *5! recombinante in vitro,
se caracteriza por su capacidad de cortar y empalmar genes o fragmentos de *5! de
organismos distintos, creando nuevas combinaciones no e7istentes en la !aturaleza,
combinaciones que ponemos a traba1ar en el interior de una variedad de organismos
hospederos, para nuestro provecho.
1.1. La biotecnologa e! int"n!eca#ente inte"$i!ci%lina"
La actual biotecnologa es una empresa intensamente interdisciplinar, caracterizada por
la reunin de conceptos y metodologas procedentes de numerosas ciencias para
aplicarlas tanto a la investigacin b/sica como a la resolucin de problemas pr/cticos y
la obtencin de bienes y servicios.
*lgunas de las ramas de conocimiento implicadas en la biotecnologa
@icrobiologa
#ioqumica
+entica
#iologa celular
Cumica
4ngeniera $bio(qumica
4ngeniera mec/nica
'iencia y Decnologa de alimentos
Electrnica
4nform/tica
El avance de la biotecnologa depender/ cada vez m/s de esta colaboracin entre
disciplinas, y en el uso de lengua1es y paradigmas comunes, as como en que cada tipo
de especialista comprenda los logros y limitaciones de las otras ramas biotecnolgicas.
1.&. La biotecnologa %"e!enta #'c(o! ca#%o! $e a%licaci)n
5e1ando aparte el hecho ya reseado de que las tcnicas biotecnolgicas
$principalmente las genticas( encuentran su primera utilidad en el avance de las propias
'iencias de la 6ida, desde el punto de vista de su aplicacin comercial e industrial,
podemos decir que el campo de utilidad es inmenso
*plicaciones teraputicas
productos farmacuticos
antibiticos
vacunas
hormonas
terapias gnicas
5iagnsticos
diagnsticos para salud humana
diagnsticos para agricultura y ganadera
ensayos para calidad de alimentos
ensayos para calidad ambiental
*limentacin
me1ora de procesos tradicionales de obtencin de alimentos y bebidas
nuevos alimentos y bebidas
nutracuticos alimentos con perfiles determinados de nutrientes, y para la me1ora
de la salud
aditivos alimentarios
@edio ambiente
tratamiento de residuos urbanos, agrcolas e industriales
biorremedio y biorreparacin
produccin de energa a partir de biomasa
!o podemos olvidar que muchas de las biotecnologas de las que nos beneficiamos son
muy antiguas, y que en ellas se est/ logrando una fase de madurez auspiciada por los
nuevos adelantos tcnicos $p. e1., la tecnologa de las fermentaciones(. 5e hecho,
muchas de las innovaciones que se est/n produciendo no son tanto de
nuevos productos cuanto de me1oras en los procesos. 5e cualquier manera, ya estamos
viendo la entrada de nuevos productos, en forma de nuevos f/rmacos y de plantas
transgnicas con caractersticas novedosas.
5e1ando aparte las tecnologas de fabricacin de vacunas, la mayor parte de las otras
/reas biotecnolgicas requieren producir grandes cantidades de sustancias, del orden de
9ilogramos a toneladas, por lo que uno de los principales aspectos es el del .escalado. a
esas grandes cantidades. Esto supone un gran reto a los ingenieros, ya que deben disear
fermentadores de gran tamao, donde hay que controlar diversos par/metros, como p:,
temperatura, o7geno y otros gases, etc. La tecnologa de fermentacin cobr mpetu a
partir de los aos )& del siglo 33, cuando se comenzaron a fabricar antibiticos y otras
molculas $/cidos org/nicos, hormonas, enzimas, polisac/ridos, etc( por medio de
microorganismos.
2or lo tanto, aunque la atencin p-blica se ha centrado en la moderna biotecnologa que
usa tcnicas de *5! recombinante, no podemos olvidar que ya antes e7ista otra
biotecnologa, que hoy sigue pu1ante, y que se puede beneficiar de los nuevos enfoques.
Las biotecnologas, al usar catalizadores biolgicos que funcionan a ba1as
temperaturas y materias primas renovables, pueden contribuir a una economa m/s
.verde. $ecolgicamente sustentable(. "e espera que puedan sustituir a procesos
qumicos contaminantes.
En los paises con condiciones clim/ticas apropiadas $p.e1., en los trpicos(, la
produccin y uso de biomasa puede presentar muchas venta1as. La obtencin de
energa de biomasa $p e1. residuos celulsicos( es una gran promesa para evitar la
dependencia de combustibles fsiles en ciertas partes del mundo.
Los altos costes $econmicos y ecolgicos( de las energas tradicionales pueden
suponer un incentivo para buscar en la biotecnologa procesos de produccin m/s
rentables. "i adem/s, se incluyen en los procesos industriales los costes ecolgicos
$hasta ahora tenidos como .e7ternalidades. por la teora econmica tradicional(, las
alternativas de base biolgica pueden ser m/s favorables que muchas contaminantes
que se est/n empleando.
Los incentivos son a-n mayores en el caso de la produccin de sustancias de alto
valor aadido, como diagnsticos y productos teraputicos, para las que las
biotecnologas permiten abrir nuevos mercados muy atractivos, con productos
destinados a me1orar la salud y calidad de vida de la poblacin.
1.* Lo! t"e! n+cleo! $e la biotecnologa
"eg-n Eohn "mith $;??%(, muchos procesos biotecnolgicos, especialmente los que se
realizan en entornos cerrados industriales, tienen un triple n-cleo
obtener el me1or catalizador biolgico para una funcin o proceso especfico
obtener el me1or ambiente para la funcin de ese catalizador biolgico, mediante una
serie de diseos tcnicos en los que es fundamental la ingeniera qumica
procesamiento del material, consistente en separar y eventualmente purificar el
material biolgico producido
6eamos cada uno de estos tres componentes
;. En la mayora de los casos, el catalizador biolgico son clulas vivas, sobre todo
microorganismos. 2or ello, uno de los pilares de la biotecnologa es
precisamente la microbiologa $entendiendo esta en sentido amplio de biologa
microbiana(. 2arte de lo que hemos aprendido sobre el mane1o de
microorganismos se puede aplicar, con modificaciones, al mane1o de clulas de
animales y plantas, que cada vez son m/s importantes en la biotecnologa. 6arias
son las caractersticas que hacen atractivos a los microorganismos
la biodiversidad microbiana es gigantescaF de hecho, solo hemos investigado una
pequea parte de ella. 'onforme los bilogos b/sicos aprendan a recuperar m/s
biodiversidad y a conocerla, habr/ m/s cepas disponibles con propiedades
potencialmente -tiles para los humanos
las capacidades metablicas de los microorganismos, como con1unto, son las m/s
amplias de todos los seres vivos. Los genomas microbianos esconden tesoros a-n
ocultos, pero que se van revelando poco a poco, y ahora de modo m/s r/pido, una vez
que se van complentando sus mapas y secuencias $actualmente e7isten varias decenas
de genomas secuenciados(. Las actividades biosintticas y degradativas de estos
microorganismos presentan oportunidades e7traordinarias para numerosas
aplicaciones.
los microorganismos crecen r/pidamente, y en muchos casos son f/ciles de manipular
desde el punto de vista gentico. Esto hace que sea relativamente f/cil usarlos como
factoras microscpicas para obtener productos -tiles en tiempos relativamente cortos.
Ana parte esencial del aprovechamiento de los microorganismos reposa en nuestra
capacidad para conservarlos viables durantes largos periodos de tiempo, y para que
sus caractersticas -tiles sean estables
en muchos casos, en lugar del microorganismo, se puede recurrir a aislar alguna o
algunas de sus enzimas, y se las pueden poner a traba1ar en condiciones venta1osas y
rentables.
G. El segundo componente o n-cleo de las biotecnologas estriba en el entorno
industrial en que ponemos a funcionar las clulas o las enzimas. Esto nos lleva al
concepto de biorreactor, un entorno cerrado y controlado para que nuestros
catalizadores biolgicos hagan lo que queremos con la m/7ima eficiencia. En
esta parte de la biotecnologa se requiere la colaboracin estrecha entre los
bilogos y los ingenieros de bioprocesos, incluyendo los ingenieros qumicos.
"e trata de disear biorreactores o fermentadores, especies de cubas cerradas
diseadas para controlar diversos par/metros que condicionan la buena
produccin temperatura, aireacin, p:, etc.
H. Iinalmente, queda el /rea quiz/ m/s desconocida y comple1a, el procesamiento
de la biomasa o de la sustancia producidas separacin de las clulas respecto del
medio acuoso en que han funcionado, recuperacin eficiente del producto
buscado, purificacin, etc.
* todo esto tenemos que aadir que un factor importantsimo en el desarrollo de la
biotecnologa es la evaluacin de la seguridad del producto, sometida a controles
rigurosos seg-n normativas nacionales e internacionales. 5e hecho este factor es tan
importante que se puede convertir en limitante, de modo que las regulaciones estrictas
desincentivan ciertos desarrollos biotecnolgicos. 2or todo ello, es importante que tales
regulaciones sean realistas, y no e7i1an m/s de lo que la evidencia cientfica sugiere,
manteniendo en todo momento la preservacin de la salud y el medio ambiente. * su
vez, las regulaciones refle1an la percepcin p-blica de los riesgos y promesas de la
biotecnologa. 2or e1emplo, hoy en Europa la percepcin p-blica ha logrado
pr/cticamente una parada en las plantas transgnicas, a pesar de los informes cientficos
que dicen que en la mayor parte de los casos, sus riesgos son similares a las plantas
convencionales. :abr/ que llegar a un di/logo racional entre los diversos actores
$cientficos, empresas, consumidores, ecologistas, etc(, para asegurar el correcto empleo
de estas tecnologas, que por un lado no impida aplicaciones benficas sin riesgos, y por
otro regule adecuadamente aquellos /mbitos donde las dudas razonables hagan
recomendables m/s restricciones. El ideal sera permitir todo aquello que aporte
beneficios sin aumentar riesgos, pero no caer en el error de prohibir usos positivos solo
ba1o vagas ideas de riesgos no sustanciados, en buena parte imaginaciones y
tergiversasiones de grupos de presin que pueden esconder agendas polticas ocultas.
2. ALGUNOS ASPECTOS CLAVE EN LAS BIOTECNOLOGAS
&.1 ,ate"ia! %"i#a!
Las materias primas para alimentar los procesos biotecnolgicos industriales pueden ser
muy variadas, pero el hecho de que en su mayora se trate de materias naturales
biodegradables las hace muy atractivas. Lo ideal sera emplear subproductos de otras
empresas, con lo que el proceso se abarata y se eliminan problemas ambientales
se usan mucho desechos ricos en carbohidratos de ciertas industrias
melazas procedentes del procesamiento de caa de az-car y remolacha azucarera.
En #rasil usan la caa de azucar para fabricar bioalcohol $+asohol( como
biocombustible
desechos ricos en almidn de granos como el maz, de tubrculos como la tapioca o
la patata. El problema aqu es que el almidn debe primero ser degradado a
monosac/ridos u oligosac/ridos antes de la fermentacin industrial, pero ciertos
procesos biotecnolgicos son ya competitivos, como la produccin de 1arabes ricos
en glucosa o fructosa, usados como endulzantes en alimentos y bebidas. En "uecia
eliminan los desechos contaminantes del procesamiento de la patata con un mtodo
a base de levaduras, que produce biomasa potencialmente valiosa.
E7iste un gran inters en usar como materia prima desechos agrcolas e industriales
ricos en celulosa. 5esgraciadamente, la celulosa es comple1a, y su asociacin con la
lignina hace que a-n no e7istan procesos industriales operativos. 2ero si en un futuro
logramos superar las barreras tcnicas, tendremos una materia prima abundante, y
podremos aprovecharla al tiempo que evitamos problemas ambientales. 5e hecho, la
lignocelulosa es la materia renovable m/s abundante de la biosfera, y la esperanza es
poder aprovecharla en un pr7imo futuro.
5e la misma manera, sera estupendo poder aprovechar otros desechos de las
actividades humanas como materias primas para los microorganismos industriales,
elimando as problemas de polucin ambiental. La idea sera acoplar una industria
que crea efluentes contaminantes con una bioindustria que pueda aprovechar los
residuos de la primera, creando productos -tiles y riqueza adicional, y sin que los
costes totales sean elevados $aunque ya el hecho de eliminar una fuente de
contaminacin de puede considerar como algo positivo(
ya se usan desechos procedentes de las industrias papeleras
igualmente se aprovechan los lactosueros $residuos ricos en lactosa( procedentes de
las queseras
El empleo de metanol puede ser -til en ciertos procesos, ya que el metanol es
.limpio. y se puede obtener f/cilmente a partir del abundante metano. En un futuro
podra ser rentable para fabricar alimentos para animales.
&.& ,e-o"a gen.tica/ Ingenie"a gen.tica
$2ara una ampliacin sobre ingeniera gentica, especialmente por lo que respecta a la
creacin y rastreo de genotecas.
Dradicionalmente, la manera de me1orar genticamente los organismos industriales
reposaba en
la induccin de mutaciones $con mut/genos(, seguida de seleccin o rastreo de los
me1ores mutantes. La b-squeda de me1oras en la produccin de protenas $incluyendo
enzimas( es m/s f/cil que la de la produccin de otras molculas $polisac/ridos,
antibiticos, amino/cidos, etc(, porque cada protena depende normalmente de un
solo gen, mientras que los metabolitos se sintetizan por rutas comple1as donde
intervienen varias enzimas, cada una sintetizada por un gen diferente, y con
regulaciones a menudo complicadas.
en los protocolos de seleccin, se suele aplicar una presin selectiva que favorece el
crecimiento del tipo de mutantes buscados, en detrimento del resto de
microorganismos
en los protocolos de rastreo $screening, en ingls( crecen todos los
microorganismos, pero se pueden identificar las variantes deseadas sobre la base de
que presentan ciertas caractersticas que las diferencian de las dem/s
la mezcla de genomas mediante fenmenos de se7ualidad, o parase7ualidad $las
bacterias no tienen se7o, pero algunas tienen fenmenos parase7uales como la
con1ugacin, que se pueden aprovechar para transferir material gentico de unas
cepas a otras(.
*lgunos inconvenientes de estas tcnicas tradicionales de me1ora
los programas de me1ora suelen ser muy largos y tediosos, y a menudo no dan los
resultados deseados
el efecto principal de la mutagnesis es originar mutaciones aleatorias en el
organismo, la mayor parte de las cuales son negativas para su supervivencia, o
empeoran algunas de sus caractersticas originales. Jaramente se dan mutaciones que
conducen a la aparicin de propiedades nuevas positivas, y en todo caso, el proceso
de su b-squeda es a menudo muy complicado. *dem/s, incluso cuando se selecciona
un tipo estimado adecuado, a menudo presenta otras mutaciones que son negativas $p.
e1., haciendo que crezca m/s lentamente, o que sea m/s sensible a factores
ambientales(
lo anterior obliga a trasladar la mutacin .positiva. a un fondo gentico distinto
$normalmente una cepa silvestre o que ya haba sido seleccionada como buena en un
programa anterior(. Esto complica y alarga la me1ora gentica, e incluso en algunos
organismos no se logra la adecuada introgresin de ese rasgo en la cepa deseada.
frecuentemente los organismos seleccionados para la produccin acumulan
mutaciones desconocidas que no se caracterizan
muchos microorganismos industriales carecen de ciclos se7uales, lo que dificulta e
incluso impide transferir rasgos -tiles de modo sencillo, de1ando como -nica
alternativa la mutagnesis y seleccin
en las especies dotadas de se7ualidad, la me1ora por recombinacin gentica est/
limitada al cruce entre razas de la misma especie, o de especies compatibles
2ero la llegada de la 4ngeniera gentica ha supuesto la superacin de muchos
problemas que tena la me1ora cl/sica, sobre todo en aquellos microorganismos que
carecen de se7ualidad. *dem/s, permite me1oras menos aleatorias y m/s precisas,
transfiriendo genes de cualquier origen al organismo donde queremos e7presarlos.
&.&.1 Antece$ente! 0 !'"gi#iento $e la Ingenie"a Gen.tica
*unque la +entica es la base de toda la #iologa, su desarrollo como ciencia es de los
m/s tardos. 6eamos esquem/ticamente algunos eventos esenciales para entender el
surgimiento de la tecnologa del *5! recombinante
* partir de ;<%=, @endel establece las bases de la gentica. En sus famosos
e7perimentos con el guisante, descubri el modo de transmisin de ciertos caracteres
desde una generacin a las siguientes, y su .mezcla. en el aporte materno y paterno.
Los hallazgos de @endel permanecieron en el olvido hasta ;?&&, cuando sus leyes
son redescubiertas por 'orrens, 5e 6ries y Dschermarc9.
En ;?&? se acua el trmino .gen. $o gene( para referirse a la entidad hipottica
responsable de los rasgos observables.
En ;?;H se obtiene el primer mapa gentico, con % genes.
En ;?G& @organ y @uller establecen su Deora cromosmica de la herencia los
genes, localizados en los cromosomas, son las autnticas unidades de la herencia,
tanto unidades de variacin como unidades de transmisin. Es decir, la herencia
presenta un doble aspecto el de la transmisin de los caracteres $estudiado por las
leyes de @endel( y el de la e7presin, es decir, el genotipo $con1unto de genes(
determina el fenotipo $rasgos observables(.
2ero la naturaleza del material gentico fue ob1eto de polmicas durante mucho
tiempo, hasta que entre los aos )& y primeros =& una serie de autores $*very y
colaboradores, :ershey y 'hase, etc.( establecen firmemente que el material de la
herencia reside en el /cido deso7irribonucleico $*5!F 5!*(.
2or esos mismos aos, #eadle y Datum proponen la teora conocida como .un genB
una enzima., que correlaciona cada unidad gentica con el producto de su e7presin,
es decir cada gen se e7presa como una determinada protena. 5esde entonces, se
produce la definitiva unin de la gentica con la bioqumica.
En ;?)=, "chrKdinger escribe su influyente libro Qu es la vida?, una visionaria
fusin de la Deora de la 4nformacin con la #iologa, que iba a contribuir
poderosamente a la naciente biologa molecular, inspirando a profesionales
procedentes del campo de las ciencias qumicoBfsicas.
En los )& y =& se produce, en efecto, un .desembarco. de fsicos y cristalgrafos en el
aborda1e de cuestiones biolgicas. Es la poca del florecimiento de tcnicas como la
difraccin de rayos 3, la ultracentrifugacin y la cromatografa.
En ;?=; un 1oven bilogo estadounidense, Eames Latson, llega al laboratorio
'avendish de la Aniversidad de 'ambridge, para pasar una estada postdoctoral. *ll
se une al ingls Irancis 'ric9, y ;< meses m/s tarde $primavera de ;?=H( publican
en Nature su modelo tridimensional de la doble hlice del *5!.
El modelo e7plicaba simult/neamente la herencia y la e7presin del material
gentico. Mste consiste en un lengua1e basado en cuatro .letras., las cuatro bases
nitrogenadas adenina $*(, guanina $+(, citosina $'( y timina $D(.
"e abra en principio una nueva manera de estudiar la base gentica de los seres
vivos de dentro $genotipo( a fuera $fenotipo(, al revs de lo que se vena haciendo
desde @endel $la observacin de la transmisin del genotipo permita inferencias
sobre el genotipo(.
* continuacin se abre un decenio llamado a menudo la .Edad de ,ro de la #iologa
@olecular., que pone las bases de la comprensin de los procesos b/sicos de la
herencia y de la e7presin gentica
replicacin del *5! papeles de la *5!Bpolimerasa, los cebadores $primers(, el
molde.
Dranscripcin una de las cadenas de *5! es copiada por la *J!Bpolimerasa hasta
un *J! mensa1ero
El *J! mensa1ero es ledo $traducido( por los ribosomas para dar una protena. 5e
este modo, el mensa1e lineal del *5! se convierte en el mensa1e tridimensional de
la configuracin de la protena
El .5ogma 'entral. de la #iologa @olecular la informacin fluye
unidireccionalmente en sentido *5! BN *J! BN protena.
El desciframiento del cdigo gentico el lengua1e del *5! consta de .palabras. de
tres letras $nucletidos(, llamadas codones. 'ada codn tiene un equivalente en el
lengua1e de la protena, significando uno de los G& amino/cidos. El cdigo gentico
est/ .degenerado., es decir, tiene cierto grado de redundancia algunos de los
amino/cidos pueden venir determinados por m/s de un codn. E7isten %) codones,
de los cuales tres carecen de sentido no tienen equivalente amino/cido, y en vez,
sirven como seales de parada de la traduccin del mensa1ero.
Eacob y @onod estudian en profundidad un sistema de e7presin y regulacin
gentica en la bacteria Escherichia coli desarrollan su concepto del opern, como
unidad de e7presin y regulacin a nivel de transcripcin.
Dras la .Edad de ,ro., empiezan a surgir algunas sorpresas que desafiaban ideas
fuertemente establecidas
Los genes eucariticos son .discontinuos. est/n compuestos por una alternancia de
segmentos que entrar/n a formar parte del *J!m maduro $e7ones( y segmentos que
se eliminan $intrones(. Este proceso de maduracin del *J! se denomina corteByB
empalme $splicing(.
*lgunos virus $retrovirus( poseen material gentico de *J!, que es convertido a
*5! por una enzima llamada reversotranscriptasa.
"e confirman los tempranos $y semiolvidados( estudios de #arbara @c'linctoc9 hay
segmentos del material gentico capaces de moverse de un lado a otro de los genomas
$elementos genticos transponibles(. El material gentico es m/s din/mico y
cambiante de lo que se haba sospechado.
2ero aparte de estos avances b/sicos, a finales de los aos %&, segua pendiente de
plasmacin una de las e7pectativas abiertas por el descubrimiento de la estructura del
*5! Ocmo llegar a .tocar. el *5!P, Ocmo estudiar cada gen por separado,
aisl/ndolo fsicamente de los dem/sP, Ocmo determinar su secuencia de basesP
5urante mucho tiempo, lo -nico que se poda secuenciar era *J!
desde ;?%) se secuencian algunos *J! transferentes, que constan de >= a <= bases.
Los mtodos se fueron perfeccionando, de modo que en ;?>= se pudo conocer la
secuencia de un min-sculo genoma el *J! del virus bacteriano IiB3B;>) $unos
)&&& nucletidos(.
"in embargo, para estudiar genes haba que ser capaces de aislarlos uno a uno a partir
del cromosoma, que es demasiado grande para su manipulacin inmediata. 2ero no se
haban descubierto nucleasas especficas capaces de cortar en puntos determinados del
*5! para generar fragmentos discretos y homogneos. *nte este estado de cosas,
algunos lderes de la Edad de ,ro, consideraron que los problemas b/sicos de la
biologa molecular estaban resueltos, y decidieron migrar a otras /reas de conocimiento
$biologa del desarrollo, neurobiologa, etc(.
'omo tantas veces ocurre en la ciencia, fue una humilde lnea de investigacin b/sica la
que abri definitivamente el camino a la manipulacin del *5!
En ;?=H se descubri el fenmeno llamado de restriccin ciertos fagos $virus
bacterianos( que parasitan a E. coli podan desarrollarse en ciertas cepas de esta
bacteria, pero no podan hacerlo en otras $se dice que est/n .restringidos. en
determinadas cepas(.
* finales de los %&, Lerner *rber, en #asilea, descubre las enzimas de restriccin
responsables de ese fenmeno la cepa de bacteria restrictiva produce unas
endonucleasas $.enzimas de restriccin, o restrictasas.( que escinden el *5! del fago
crecido en otra cepa diferente.
Esas primeras enzimas de restriccin eran inespecficas en cuanto al sitio del *5!
donde cortaban, pero en ;?>& :amilton "mith, en #altimore, descubre un nuevo tipo
de enzima de restriccin totalmente especfica capaz de reconocer una determinada
secuencia de *5!, de unos pocos pares de bases, y de cortar en ambas cadenas en
lugares concretos.
*lgunas restrictasas reconocen como secuencia diana un trecho de ) pares de bases
$pb(.
,tras restrictasas reconocen secuencias de % pares de bases.
"e han descubierto restrictasas que cortan tras reconocer secuencias m/s largas.
Las dianas de la mayora de las restrictasas de este tipo son secuencias
palindrmicas, es decir, .capic-as. $nota la Q seala el punto de corte(. E1
=RB+Q+**''BHR
HRB++DD+Q+B=R
@uchas de estas restrictasas cortan en cada cadena en lugares separados del centro
geomtrico de la diana $como en el e1emplo anterior(, de modo que generan e7tremos
protuberantes.
Los e7tremos protuberantes de distintos fragmentos de *5! generados con la misma
restrictasa $incluso de fragmentos de especies distintas(, tienen tendencia, al
mezclarlos, a empare1arse entre s por puentes de hidrgeno $siguiendo las reglas de
empare1amiento *BD y +B'(.
"i ahora aadimos la enzima *5!Bligasa a la mezcla de fragmentos de *5! de
orgenes diferentes, se reparar/n los enlaces fosfodisteres. Esto es lo que realizaron
por primera vez @ertz y 5avis en ;?>G, y enseguida se dan cuenta de que ello poda
constituir la base para la produccin de molculas recombinantes in vitro, con
material gentico de diferentes especies.
2ero este *5! recombinante, generado en el tubo de ensayo, es inerte, no es m/s que
una macromolcula hbrida que por s sola no hace nada.
"i queremos que el *5! recombinante haga algo, hay que introducirlo en clulas
vivas que sean capaces de e7presar su informacin gentica.
Esto nos lleva ya a la idea de lo que es la 4ngeniera +entica la formacin in vitro de
nuevas combinaciones de material gentico, por medio de la insercin de un *5! de
inters en un vehculo gentico $vector(, de modo que tras su introduccin en un
organismo hospedero el *5! hbrido $recombinante( se pueda multiplicar, propagar, y
eventualmente e7presarse.
&.&.& La "eceta b1!ica $e 'n e2%e"i#ento $e Ingenie"a Gen.tica
6amos a ilustrar el concepto de la ingeniera gentica con el caso bastante f/cil de lograr
bacterias que hospeden nuevas combinaciones de *5!
2artimos de *5! que queremos aislar y estudiar vamos a llamarlo *5! pasa1ero
2or otro lado, necesitamos un vehculo gentico para transportar y replicar ese *5!
lo llamamos vector. Los vectores son igualmente molculas de *5! con capacidad
de replicarse por s mismos o de insertarse una vez que se introducen en el organismo
adecuado. :e aqu una lista de lo que debe poseer idealmente un vector gentico
capacidad de replicacin autnoma $es decir, se trata de un replicn(, o de
integracin en el genoma del hospedero.
@arcadores seleccionables se trata de genes que confieren alg-n rasgo que se
puede rastrear o seleccionar f/cilmente en laboratorio. Anos de los m/s usados son
los genes que confieren resistencia a alg-n antibitico.
5ianas -nicas para al menos una enzima de restriccin. En los modernos vectores
se ha introducido un trecho de *5!, denominado polilinker, provisto de varias
dianas -nicas para diferentes enzimas de restriccin, de modo que en cada
e7perimento se pueda elegir la que m/s convenga.
Iinalmente, contamos con el organismo anfitrin o husped. En los primeros tiempos
de la 4.+. se manipulaban casi e7clusivamente bacterias, pero hoy es posible
modificar animales y plantas.
*s, pues, el .retrato robot. de un e7perimento de 4.+. podra ser como sigue
;. "e corta por separado el *5! del organismo a estudiar y el *5! del vector con
la misma restrictasa, de modo que se generan e7tremos compatibles entre s
$mutuamente cohesivos(.
G. "e 1untan ambos *5!s y se les aade *5!Bligasa de esta forma, las uniones
entre *5! pasa1ero y *5! del vector se sellan covalentemente, gener/ndose
molculas hbridas $quimricas o recombinantes(.
H. *hora hay que introducir las molculas generadas en el organismos husped. En
el caso de bacterias se recurre a una tcnica sencilla denominada transformacin,
que permite la entrada del *5! a travs de las envueltas del microorganismo.
). Iinalmente, hay que localizar las bacterias que han captado y han establecido
establemente las molculas hbridas. * menudo este es el paso m/s laborioso,
pero el hecho de que el vector posea uno o varios genes de resistencia favorece
al menos la eliminacin de las bacterias que no han recibido *5! del vector
basta aadir al medio de cultivo el antibitico para el que el vector confiere
resistencia. 2ara localizar los transformantes recombinantes, muchos vectores
incorporar un gen marcador que produce alguna sustancia coloreada. "i
insertamos el gen a aislar dentro de ese marcador, lo rompemos, por lo que las
colonias bacterianas no producir/n la sustancia coloreada, sino que permanecen
incoloras o blancas.
=. El resultado del e7perimento es la obtencin de al menos una colonia $clon( de
bacterias que portan la combinacin buscada de vector con el inserto de *5!
pasa1ero. "e dice entonces que hemos clonado $Saislado( dicho *5!.
El primer e7perimento de este tipo lo realizaron en ;?>H "tanley 'ohen y :erbert #oyer
en la Aniversidad de 'alifornia. "e vio que era factible hacer toda clase de
e7perimentos en los que se recombina *5! de organismos totalmente diferentes
$bacterias, plantas, animales(.
&.&.* Ca"acte"i3aci)n $el ADN clona$o
Ana vez que se ha clonado un gen o trozo de *5!, hay que caracterizarlo lo m/s
detalladamente posible
Lo primero que se suele hacer es realizar un .mapa fsico.. 2ara ello, muestras
independientes del *5! clonado son sometidas a distintas enzimas o combinaciones
de enzimas de restriccin, y los fragmentos resultantes se separan por tamaos usando
la electroforesis en gel de agarosa con la sustancia fluorescente bromuro de etidio,
revel/ndose en forma de bandas visibles ba1o luz A6. * partir de los tamaos de las
bandas generadas por las distintas enzimas y combinaciones de enzimas, es posible
ensamblar el rompecabezas del fragmento, determinando un mapa donde se van
colocando las localizaciones relativas de las distintas dianas de las restrictasas.
* partir de la subclonacin de fragmentos del trozo original, es posible, en algunos
casos, ir ad1udicando funciones a cada subfragmento, lo cual va generando en
paralelo un .mapa gentico..
El -ltimo nivel $el m/s detallado( de caracterizacin fsica es la misma secuenciacin
del *5!.
En los primeros tiempos se usaba sobre todo el .mtodo qumico. de @a7am y
+ilbert
2ero el m/s usado actualmente es el mtodo de terminacin de cadena mediante
dideso7inucletidos $mtodo enzim/tico de "anger(.
Ana modificacin del mtodo de "anger permite la secuenciacin autom/tica
mediante lectura fluorimtica computerizada.
&.&.4 Ot"o! #.to$o! b1!ico!
&.&.4.1 Snte!i! 5'#ica $e ADN
*ctualmente e7isten m/quinas programables para sintetizar r/pidamente secuencias
determinadas de m/s de ;&& nucletidos. "e usan a menudo para generar sondas
moleculares en la b-squeda y caracterizacin de determinados segmentos de *5!, y
sobre todo para producir los cebadores usados en la reaccin en cadena de la
polimerasa.
&.&.4.& Reacci)n en ca$ena $e la %oli#e"a!a 6PCR7
!o cabe ninguna duda de que la tcnica m/s revolucionaria de los -ltimos ;= aos ha
sido la reaccin en cadena de la polimerasa $2'J(, que ha dado nuevas alas a la propia
4ngeniera gentica y a toda la biologa molecular. Iue inventada por Tary @ullis a
mediados de los aos <&.
'omo ya sabemos, muchas de las tcnicas cl/sicas de la 4ngeniera gentica estaban
encaminadas a resolver el comple1o problema de cmo clonar o localizar un gen o un
segmento de *5! concreto .perdido. en la inmensidad del genoma. "in embargo, esas
tcnicas son a menudo largas y tediosas, y no es raro que no den resultados. La 2'J ha
venido a cambiar el panorama, ya que permite en principio producir in vitro grandes
cantidades de una secuencia de *5! concreta sin recurrir a la clonacin en un
organismo husped. Esencialmente la tcnica permite la amplificacin selectiva de
cualquier trecho de *5!, supuesto que se conocen las secuencias que lo flanquean.
'omo alguien ha dicho, .es una tcnica que consigue encontrar la agu1a en el pa1ar, al
tiempo que produce un pa1ar de agu1as por amplificacin selectiva..
El %"inci%io 5'e !'!tenta la PCR
El *5! de cadena doble que se quiere amplificar se calienta casi hasta ebullicin, de
modo que se separan las dos cadenas, las cuales van a servir de moldes m/s adelante.
"e aaden dos cebadores $normalmente fabricados por sntesis qumicaF ver apartado
G.G.).;(. 'ada cebador es un corto oligonucletido, correspondiente a una de las
secuencias que flanquean el trozo a amplificar. *l ba1ar la temperatura, cada cebador
se empare1a por puentes de hidrgeno con la secuencia complementaria de una de las
cadenas del molde, y obligar/ a la *5!Bpolimerasa a comenzar la copia de esa
cadena molde complementaria $por supuesto, en sentido =RBNHR(
*l aadir la *5!Bpolimerasa y los ) tipos de deso7inuclesidoBtrifosfato $d!D2s(, se
produce la sntesis de las respectivas cadenas complementarias de cada molde, a
partir de los respectivos cebadores. *l final de esta fase, tenemos el doble de cadenas
de *5! de doble cadena respecto a las de partida.
Luego la mezcla se vuelve a calentar hasta casi ebullicin, con lo que se vuelven a
separar la cadenas, que en su forma de cadenas sencillas sirven para iniciar otro ciclo
idntico al anterior, al final del cual tendremos el cu/druple de *5!.
"i repetimos el protocolo n ciclos, el resultado ser/ G
n
copias a partir de las originales.
La t.cnica b1!ica $e la PCR
El *5! a usar no precisa ser purificado.
La cantidad de partida puede ser min-scula $U; microgramo de *5! genmico(. 5e
hecho se puede amplificar a partir de una sola molcula de molde.
El empleo de *5!Bpolimerasas termorresistentes, como la Taq $procedente de la
bacteria Thermus aquaticus descubierta 1unto a los giseres de Vello8stone(, evita
tener que aadir polimerasa nueva en cada ciclo de amplificacin.
En resumidas cuentas, el e7perimento suele realizarse seg-n este orden
;. En un tubito se mezcla el *5! molde, los dos cebadores $oligonucletidos(, los
cuatro d!D2s y la *5!Bpolimerasa termorresistente.
G. "e calienta a ?)W' durante = min, con lo que se separan las cadenas del *5!
molde a amplificar, gener/ndose las correspondientes cadenas sencillas.
H. "e ba1a la temperatura en torno a los %&W', de modo que cada cebador se
empare1a con el e7tremo correspondiente de una de las cadenas del molde. "e
dice que ahora tenemos los moldes cebados.
). "e sube la temperatura hasta >GW' $la ptima de funcionamiento de la Taq(, y se
de1a durante = min, tiempo durante el que se est/ produciendo la sntesis in
vitro de las cadenas complementarias de cada hebra molde.
=. "e sube la temperatura a ?)W' durante G& segundos, suficientes para separar la
cadena recin sintetizada respecto del molde original.
%. Las cadenas sencillas generadas entran ahora en un nuevo ciclo $pasos ; al =(, y
as sucesivamente, de modo que tras H&B%& ciclos obtenemos una amplificacin
del *5! original de millones o miles de millones de veces.
Dodo este proceso se realiza en unos aparatos autom/ticos llamados termocicladores, en
los que se pueden fi1ar los par/metros de tiempos y temperaturas de cada paso del ciclo.
El mtodo de 2'J fue patentado en ;?<>, y en principio fue comercializado por la
empresa 'etus, si bien desde ;??; los derechos fueron adquiridos por :offmanBLa
Joche y 2er9in Elmer. Las ganancias de este mtodo tan universalmente empleado son
astronmicas.
Las aplicaciones de la 2'J y de sus numerosas variantes son pr/cticamente ilimitadas
simplifica sobremanera muchos e7perimentos de 4.+.
permite muchos estudios de e7presin gentica
secuenciacin directa de secuencias amplificadas
deteccin de mutaciones
seguimiento de la efectividad de tratamiento de enfermedades
diagnsticos de enfermedades genticas e infecciosas
en ciencia forense identificacin de restos biolgicos, determinacin de paternidad,
pruebas periciales en criminalstica
en arqueologa y paleontologa
TECNOLOGIA MICROBIANA EN LA BIOTECNOLOGIA
A"#i$a$i%& !e L'( P)i&$i"i'( !e Mi$)'*i'#'+ia I&,-(.)ia#, P)'$e('(
/e)me&.a.i0'(, Mi$)'')+a&i(m'( I&,-(.)ia#e(, Ce"a( I&,-(.)ia#e(1
2)ea( !e La Bi'.e$&'#'+3a
La utilizacin de los seres vivos, sus partes o los productos de su actividad
para su uso industrial constituye la base de la biotecnologa. Existen ejemplos
del uso biotecnolgico de microorganismos desde tiempos antiguos, como son
la fermentacin de bebidas alcohlicas y la fabricacin de pan. Desde este
prisma, incluso la seleccin y obtencin de diferentes variedades productivas
de plantas y animales de inters agrcola y ganadero a lo largo de la historia
podran considerarse aproximaciones biotecnolgicas. El descubrimiento y
caracterizacin de los procesos de mantenimiento y flujo de la informacin
biolgica ha provocado la expansin del n!mero de aplicaciones de la
biotecnologa.
Entornos cientficos e industriales cada vez m"s especializados y diversos,
hacen uso en mayor o menor medida de la biotecnologa como herramienta
para sus procesos. Esta diversidad ha determinado a su vez la necesidad de
un sistema de clasificacin de los usos de la biotecnologa #ue los agrupe en
funcin de sus caractersticas comunes o de su utilidad final. $omo resultado,
actualmente se consideran cinco agrupaciones fundamentales de los usos
biotecnolgicos, #ue han sido identificadas mediante un sistema de colores%

&iotecnologa 'oja

La biotecnologa roja agrupa todos a#uellos usos de la
biotecnologa relacionados con la medicina. La biotecnologa
roja incluye la obtencin de vacunas y antibiticos, el
desarrollo de nuevos f"rmacos, tcnicas moleculares de
diagnstico, las terapias regenerativas y el desarrollo de la
ingeniera gentica para curar enfermedades a travs de la
manipulacin gentica. (lgunos de los ejemplos m"s
relevantes de biotecnologa roja son, la terapia celular y la
medicina regenerativa, la terapia gnica y los medicamentos
basados en molculas biolgicas, como los anticuerpos
teraputicos

&iotecnologa &lanca

La biotecnologa blanca engloba a todos a#uellos usos de la
biotecnologa relacionados con los procesos industriales. )or
esta razn, la biotecnologa blanca es tambin conocida como
biotecnologa industrial. La biotecnologa blanca presta
especial atencin al dise*o de procesos y productos #ue
consuman menos recursos #ue los tradicionales, hacindolos
energticamente m"s eficientes o menos contaminantes.
Existen numerosos ejemplos de biotecnologa blanca, como
son la utilizacin de microorganismos para la produccin de
productos #umicos, el dise*o y produccin de nuevos
materiales de uso cotidiano +pl"sticos, textiles,- y el
desarrollo de nuevas fuentes de energa sostenibles, como los
biocombustibles.
&iotecnologa (zul

La biotecnologa azul se basa en la explotacin de los
recursos del mar para la generacin de productos y
aplicaciones de inters industrial. .i tenemos en cuenta #ue el
mar ofrece la mayor biodiversidad, potencialmente existe una
enorme variedad de sectores #ue se pueden beneficiar de los
usos de la biotecnologa azul. /uchos de los productos y
aplicaciones de la biotecnologa azul se encuentran en fase de
b!s#ueda o investigacin, si bien ya hay ejemplos de
utilizacin de algunos de ellos de forma cotidiana.
&iotecnologa 0erde

La biotecnologa verde se centra en la agricultura como campo
de explotacin. Las aproximaciones y usos biotecnolgicos
verdes incluyen la creacin de nuevas variedades de plantas
de inters agropecuario, la produccin de biofertilizantes y
biopesticidas, el cultivo in vitro y la clonacin de vegetales. La
primera de estas aproximaciones es la #ue ha experimentado
un mayor desarrollo y tambin la #ue ha suscitado mayor
inters y controversia en la sociedad. La creacin de
variedades modificadas de plantas se basa casi
exclusivamente en la transgnesis, o introduccin en la planta
de inters de genes procedentes de otra variedad u
organismo. /ediante la utilizacin de esta tecnologa se
persiguen tres objetivos fundamentales. En primer lugar, se
busca la obtencin de variedades resistentes a plagas y
enfermedades. ( modo de ejemplo, en la actualidad se utilizan
y comercializan variedades de maz resistentes a plagas como
el taladro. 1na segunda utilizacin de las plantas transgnicas
est" orientada al desarrollo de variedades con mejores
propiedades nutricionales +por ejemplo, mayores contenidos
en vitaminas-. )or !ltimo, la transgnesis en plantas tambin
se estudia como medio para obtener variedades de plantas
#ue act!en como biofactoras productoras de sustancias de
inters mdico, biosanitario o industrial en cantidades
f"cilmente aislables y purificables.
&iotecnologa 2ris

La biotecnologa gris est" constituida por todas a#uellas
aplicaciones directas de la biotecnologa al medio ambiente.
)odemos subdividir dichas aplicaciones en dos grandes ramas
de actividad% el mantenimiento de la biodiversidad y la
eliminacin de contaminantes. 'especto a la primera, cabe
destacar la aplicacin de la biologa molecular al an"lisis
gentico de poblaciones y especies integrantes de
ecosistemas, su comparacin y catalogacin. 3ambin pueden
incluirse las tcnicas de clonacin con el fin de preservar
especies y la utilizacin de tecnologas de almacenamiento de
genomas. En cuanto a la eliminacin de contaminantes o
biorremediacin, la biotecnologa gris hace uso de
microorganismos y especies vegetales para el aislamiento y la
eliminacin de diferentes sustancias, como metales pesados e
hidrocarburos, con la interesante posibilidad de aprovechar
posteriormente dichas sustancias o utilizar subproductos
derivados de esta actividad.
P)'$e(' !e /e)me&.a$i%&:
Es el proceso de catabolismo +ruptura- incompleto #ue es totalmente anablico
+se da en un ambiente sin oxgeno-. La sustancia #ue se va a romper
+catabolismo- es el nutrimento. El nutrimento es roto por la actividad enzim"tica
+complejo enzima sustrato-. El fin de la fermentacin es proporcionar energa al
organismo #ue la est" realizando.
La fermentacin la realizan m"s #ue todas las bacterias, hongos. Es el proceso
energtico m"s primitivo de los seres vivos. El primer ser vivo, #ue era
unicelular, microscpico y procarionte, utilizo ese mecanismo para obtener
energa de los nutrientes #ue haban en los mares primitivos.
A4 /e)me&.a$i%& L5$.i$a: En este tipo de fermentacin el microorganismo
oxida el nutrimento hasta convertirlo en un compuesto llamado 4cido l"ctico y
(3).
Este proceso lo realizan muchas bacterias +llamadas bacterias l"cticas-,
hongos, algunos protozoos y muchos tejidos animales5 en efecto, la
fermentacin l"ctica
B4 /e)me&.a$i%& A#$'6%#i$a: Es un proceso biolgico de fermentacin en
plena ausencia de aire +oxgeno 6 78-, originado por la actividad de algunos
microorganismos #ue procesan los hidratos de carbono +por regla general
az!cares% como pueden ser por ejemplo la glucosa, la fructosa, la sacarosa, el
almidn, etc.- para obtener como productos finales% un alcohol en forma de
etanol +cuya frmula #umica es% $9:6$98679-, dixido de carbono +$78- en
forma de gas y unas molculas de (3) #ue consumen los propios
microorganismos en su metabolismo celular energtico anaerbico.
C4 /e)me&.a$i%& a$7.i$a(:
Es un tipo de fermentacin (erbica usada por las bacterias del genero
(cetobacter. Estas bacterias usan compuestos de alcohol para romper sus
enlaces y obtener energa +(3)- el producto de desecho es el "cido acetico.
U('( ,e #a 8e)me&.a$i%&:
Los usos de la fermentacin se deben a #ue los productos de desechos son de
inters industrial. (#u nadie sale perjudicado. Los microorganismos usan los
nutrientes, especialmente los carbohidratos, y los descomponen o a "cido
l"ctico, o a "cido actico, o a (lcohol. ;osotros los seres humanos usamos
esos productos de la descomposicin de los nutrientes y los empleamos para
usos industriales. por ejemplo el m"s conocido es la produccin de cerveza.
Mi$)'')+a&i(m'( I&,-(.)ia#e(:
Los microorganismos #ue sintetizan productos !tiles para el hombre
representan, como m"ximo, unos pocos centenares de especies de entre las
m"s de <===== descritas en la ;aturaleza.
Le0a,-)a(
Las levaduras se vienen utilizando desde hace miles de a*os para la
fabricacin de pan y bebidas alcohlicas. La levadura #ue sin duda fu la
primera y a!n hoy en da sigue siendo la m"s utilizada por el hombre
es Saccharomyces cerevisiae de la #ue se emplean diferentes cepas para la
fabricacin de cerveza, vino, sa>e, pan y alcoholes industriales.
Kluyveromyces fragilis es una especie fermentadora de la lactosa #ue se
explota en pe#ue*a escala para la produccin de alcohol a partir del suero de
la leche.
Yarrowia lipolytica es una fuente industrial de "cido ctrico.
Trichosporum cutaneum desempe*a un importante papel en los sistemas de
digestin aerbica de aguas residuales debido a su enorme capacidad de
oxidacin de compuestos org"nicos, incluidos algunos #ue son txicos para
otras levaduras y hongos, como los derivados fenlicos.
9'&+'( 8i#ame&.'('(
Los hongos tienen una gran importancia econmica, no tan slo por su utilidad,
sino tambin por el da*o #ue pueden causar. Los hongos son responsables de
la degradacin de gran parte de la materia org"nica de la 3ierra, una actividad
enormemente beneficiosa ya #ue permite el reciclaje de la materia viva. )or
otro lado, los hongos causan gran cantidad de enfermedades en plantas y
animales y pueden destruir alimentos y materiales de los #ue depende el
hombre.
Ba$.e)ia(
Entre las especies bacterianas de inters industrial est"n las bacterias del
"cido actico, Gluconobacter y Acetobacter #ue pueden convertir el etanol en
"cido actico. El gnero Bacilluses productor de antibiticos +gramicidina,
bacitracina, polimixina-, proteasas e insecticidas. Del gnero Clostridium cabe
destacar Clostridium acetobutylicum #ue puede fermentar los az!cares
originando acetona y butanol. Las bacterias del "cido l"ctico incluyen, entre
otras, las especies de los gneros Streptococcus y Lactobacillus #ue producen
yogur.Corynebacterium glutamicum es una importante fuente industrial de
lisina. El olor caracterstico a tierra mojada se debe a compuestos vol"tiles
+geosmina- producidos por Streptomycesaun#ue su principal importancia radica
en la produccin de antibiticos como anfotericina &, >anamicina, neomicina,
estreptomicina, tetraciclina, etc.
Ce"a(:
Es, en microbiologa, una variante fenotpica de una especie o, incluso, de
un taxn inferior, usualmente propagada clonalmente, debido al inters en la
conservacin de sus cualidades definitorias. De una manera m"s b"sica puede
definirse como un conjunto de especies bacterianas #ue comparten, al menos,
una caracterstica.
Existen sociedades cientficas, las colecciones de cultivos tipo, #ue almacenan
una gran diversidad de microorganismos y #ue los difunden a peticin de
los investigadores5 en dichas colecciones, la atribucin taxonmica de cada
clon est" perfectamente asegurada hasta el nivel de cepa.
Las cepas se pueden agrupar seg!n sus caractersticas comunes%
biovar o biotipo, #ue son a#uellas cepas #ue tienen caractersticas
bio#umicas y fisiolgicas especiales.
morfovar o morfotipo, con morfologa especfica.
serovar o serotipo, con caractersticas antignicas especficas.
patovar o patotipo, con propiedades patgenas para ciertos
hospedadores.
fagovar o fagotipo, con especificidad para lisar ciertos bacterifagos
METABOLISMO /ERMENTATIVO : M;TO!OS !E /ERMENTACI<N
=CONTINUA : !ESCONTINUA4
Me.a*'#i(m' !e La /e)me&.a$i%&:
La fermentacin es un tipo especfico de metabolismo hetertrofo #ue utiliza
carbono org"nico en vez de oxgeno como receptor terminal de electrones.
Esto significa #ue estos organismos no utilizan una cadena de transporte de
electrones para oxidar ;(D9 a ;(D? y por lo tanto deben tener un mtodo
alternativo para usar esta energa reductora y mantener una fuente de ;(D?
para el funcionamiento apropiado de las rutas metablicas normales +por
ejemplo, la glicolisis-. )uesto #ue no re#uieren oxgeno, los organismos
fermentantes son anaerobios. /uchos organismos pueden utilizar fermentacin
bajo ciertas condiciones anaerobias y respiracin cuando el oxgeno est"
presente. Estos organismos son anaerobios facultativos. )ara evitar la
superproduccin de ;(D9, los organismos fermentantes obligados
generalmente no tienen un ciclo completo del "cido ctrico. El (3) en
organismos fermentantes es producido por la fosforilacin a nivel
de sustrato donde un grupo fosfato se transfiere de un compuesto org"nico de
gran energa al (D) para formar el (3).
/e)me&.a$i%& L5$.i$a
piruvato ? ;(D9 ? 9?6666666@ "cido l"ctico ? ;(D?
.e produce en muchas bacterias +bacterias l"cticas-, tambin en algunos
protozoos y en el m!sculo es#ueltico humano. Es responsable de la
produccin de productos l"cteos acidificados 666@ yoghurt, #uesos, cuajada,
crema "cida, etc. El "cido l"ctico tiene excelentes propiedades conservantes
de los alimentos.
/e)me&.a$i%& A#$'6%#i$a:
Dos reacciones sucesivas%
piruvato 66666666@ acetaldehido ? $78
acetaldehido ? ;(D9 ?9? 6666666@ etanol ? ;(D?
.e lo encuentra en levaduras, otros hongos y algunas bacterias. La
fermentacin alcohlica es la base de las siguientes aplicaciones en la
alimentacin humana% pan, cerveza, vino y otras.
/e)me&.a$i%& C'&.i&-a : !e($'&.i&-a:
/e)me&.a$i%& C'&.i&-a:
En la fermentacin continua establece un sistema abierto. La solucin nutritiva
estril se a*ade continuamente al biorreactor y una cantidad e#uivalente de
solucin utilizada de los nutrientes, con los microorganismos, se saca
simult"neamente del sistema.
El objetivo fundamental de la industria de las fermentaciones es incrementar los
rendimientos. Este objetivo puede alcanzarse si se desarrolla el tipo de
fermentacin m"s adecuado para cada paso en particular. .i bien los procesos
de fermentacin continua no se utilizan de forma general en la industria, debido
fundamentalmente al mayor nivel de experiencia #ue se tiene en el crecimiento
de clulas en fermentacin discontinua, el coste de produccin de biomasa
mediante cultivo continuo es potencialmente inferior al de cultivo discontinuo.
De este modo se han instalado plantas de produccin para la produccin
continua de protena de origen unicelular a partir de n6alcanos, compuestos $<
y almidones.
(un#ue muchas fermentaciones para la produccin de metabolitos funcionan
bien como procesos continuos, slo unos pocos procesos han resultado !tiles
para la aplicacin pr"ctica por varias razones%
a1> /uchos mtodos de laboratorio operan continuamente durante solamente
8= a 8== horas5 para #ue sea de utilidad industrial el sistema debe ser estable
durante al menos A== a <.=== horas.
*1> /antener las condiciones estriles a escala industrial a lo largo de un largo
perodo de tiempo es difcil.
$1> La composicin de los sustratos debe ser constante a fin de obtener una
produccin m"xima. La composicin de las soluciones de nutrientes
industriales son variables. Lo #ue puede originar cambios en la fisiologa de la
clula y disminuir la productividad.
,1> $uando se utilizan cepas de alto rendimiento se producen mutacin, los
cuales pueden crecer en cultivo continuo m"s deprisa #ue las cepas de
produccin por lo #ue el rendimiento disminuye con el tiempo ya #ue cada vez
son menos clulas las #ue sintetizan el producto de inters.
/e)me&.a$i%& !e($'&.i&-a:
1na fermentacin discontinua +en batch- puede ser considerada como un
Bsistema cerradoB. (l inicio de la operacin se a*ade la solucin esterilizada de
nutrientes y se inocula con el microorganismo, permitiendo #ue se lleve a cabo
la incubacin en condiciones ptimas de fermentacin. ( lo largo de toda la
fermentacin no se a*ade nada, excepto oxgeno +en forma de aire-, un agente
antiespumante y "cidos o bases para controlar el ph. La composicin del medio
de cultivo, la concentracin de la biomasa y la concentracin de metabolitos
cambia generalmente como resultado del metabolismo de las clulas
observ"ndose las cuatro fases tpicas de crecimiento% fase de latencia, fase
logartmica, fase estacionaria y fase de muerte.
En los procesos comerciales la fermentacin frecuentemente se interrumpe al
final de la fase logartmica +metabolitos primarios- o antes de #ue comience la
fase de muerte +metabolitos secundarios-.