1. La eritropoyesis es la actividad proliferativa eritroide en la médula ósea que produce eritrocitos maduros en circulación. Los micronúcleos son fragmentos cromosómicos o cromosomas completos que se forman durante la división celular y reflejan daño genético. 2. La tinción de Giemsa es policromática y tiñe los componentes celulares en función de su pH, coloreando los eritrocitos maduros de rosa-anaranjado y los inmaduros y micronúcleos de azul.
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Previo de Toxicología laboratorio Facultad de Química UNAM
1. La eritropoyesis es la actividad proliferativa eritroide en la médula ósea que produce eritrocitos maduros en circulación. Los micronúcleos son fragmentos cromosómicos o cromosomas completos que se forman durante la división celular y reflejan daño genético. 2. La tinción de Giemsa es policromática y tiñe los componentes celulares en función de su pH, coloreando los eritrocitos maduros de rosa-anaranjado y los inmaduros y micronúcleos de azul.
1. La eritropoyesis es la actividad proliferativa eritroide en la médula ósea que produce eritrocitos maduros en circulación. Los micronúcleos son fragmentos cromosómicos o cromosomas completos que se forman durante la división celular y reflejan daño genético. 2. La tinción de Giemsa es policromática y tiñe los componentes celulares en función de su pH, coloreando los eritrocitos maduros de rosa-anaranjado y los inmaduros y micronúcleos de azul.
Eritropoyesis es el trmino usado para designar la actividad proliferativa eritroide de la
mdula sea. La eritropoyesis normal solo tiene lugar en la mdula sea, con formacin de un nmero total adecuado de eritrocitos. La eritropoyesis eficaz tiene como resultado la produccin de un 90% o ms de eritrocitos diferenciados maduros en circulacin. La insuficiente se asocia con una reduccin cuantitativa de precursores eritroides en la mdula sea. 2. Concepto de microncleo y proceso de formacin. Los microncleos (MNs) son cromosomas completos o fragmentos cromosmicos que se condensan y permanecen rezagados durante la anafase del ciclo celular. Se han propuesto cuatro mecanismos (fragmentos acntricos, cromosomas multicentricos, dao al cinetcoro y dao al huso) para la formacin de MNs que involucran clastogenicidad o aneuploidia. Los microncleos son formados durante la telofase de la mitosis o de la meiosis, cuando la cubierta nuclear es reconstituida alrededor de los cromosomas de las clulas hijas. Son resultado de fragmentos cromosmicos acntricos o de cromosomas enteros que no fueron incluidos en el ncleo principal. El microncleo representa la perdida de cromatina en consecuencia del cromosmico estructural o dao del aparato mittico.
3. Diferencia entre dao clastognico y aneuploidgeno, y cmo se pueden diferenciar con la tcnica de microncleos. Los microncleos son fragmentos de cromosomas o cromosomas completos que espontneamente o por causa de agentes que rompen cromosomas, como las radiaciones (agentes que se denominan clastgenos) o que daan el huso mittico, como la vincristina (aneuploidgenos), quedan fuera del ncleo durante la mitosis. En la tcnica de microncleos se diferencian si el compuesto estudiado es un clastgeno, se formarn microncleos pequeos, pero si es un aneuploidgeno, lo que observaremos ser la formacin de microncleos grandes.
4. Fundamento de la tincin de Giemsa. Para teir los extendidos de sangre perifrica o mdula sea se usa la tincin se puede usar la tincin de GIemsa. Se considera policromtica porque contiene eosina y azul de metileno. El metanol fijar y el buffer ayudar a que se tian las clulas. El azul de metileno oxidado y la eosina forman un complejo tiozina-eosinato, que tie os componentes celulares, Las reacciones de tincin depende del pH. El azul de metileno libre es bsico y tie los componentes celulares cidos (o basfilos), como el RNA. La eosina libre es cida y tie los componentes bsicos (o eosinfilos), como la hemoglobina o los grnulos eosinfilos. Los neutrfilos (pH neutro) toman algunas caractersticas de tincin de ambas coloraciones.
5. Coloracin que adquieren los eritrocitos maduros, inmaduros y micronucleados con el colorante de Giemsa. La presencia de cido ribonucleico (RNA) en el citoplasma de los eritrocitos recin formados hace que estos adopten una coloracin azul a ser teidos con colorante Giemsa, siendo denominados eritrocitos policromticos (EPC). La desaparicin gradual del RNA hace que los eritrocitos ms maduros adopten una coloracin rosa-anaranjada, siendo denominados eritrocitos normocromticos (ENC). Los microncleos se tieran de azul.
6. Mecanismo de accin genotxica de la ciclofosfamida. Su mecanismo de accin consiste en adicionar grupos alquilo a molculas electronegativas que se hallan en las clulas. As detiene el crecimiento tumoral al inducir la formacin de dmeros de guanina en el ADN de doble cadena, los cuales interfieren con los mecanismos de traduccin y transcripcin del material gentico. La ciclofosfamida acta a travs de un profrmaco no especfico, la fosforamida, ya que requiere de la activacin enzimtica por oxidasas celulares. Para alcanzar el efecto genotxico se requiere la activacin de medicamento en dos pasos; en el primero se induce la formacin de puentes anormales entre las cadenas del ADN, y en el segundo se efecta la alquilacin nucleoflica de dicho cido. El alto grado de mutagenicidad de estos agentes conlleva el riesgo de que se formen neoplasias secundarias.
7. Usos clnicos de la ciclofosfamida. Es un agente usado como antineoplsico, se usa en el tratamiento de tumores cerebrales se utilizan agentes con fines quimioteraputicos.
8. Propsito de adicionar EtOH y solucin amortiguadora de fosfatos pH=6.8. El etanol presente en las coloraciones fija las clulas al portaobjetos. El teido real de las clulas o de los componentes celulares no tiene lugar hasta que se agrega el buffer. Bibliografa Rodak F.B. Hematologa: Fundamentos y Aplicaciones Clnicas. Segunda edicin. Mdica Panamricana. Espaa, 2002. Pgs. 178 y 206. Botello A.V., Gold B.G. Golfo de Mxico: Contaminacin e impacto ambiental. Segunda edicin. UNAM, UAC. Mxico. Pg, 139 Sotelo M.S., Aguirre M.L,Tumores cerebrales. Primera edicin. Mdica Panamricana. Mxico, 200o. Pg. 245. Zuiga G.G., Gmez M.B. La prueba de microncleos. Revista de divulgacin cinetifica tecnolgica de la Universidad Veracruzana. Vol. XIX. Nmero I. Enero-Abril 2006. Disponible en: http://www.uv.mx/cienciahombre/revistae/vol19num1/articulos/micronucleos/index.htm
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