Laboratrio Morfofuncional

4 Perodo Mdulo XI
Natalia Martin

RGOS GENITAIS

Gnadas
Glndulas
produtoras de
gametas
Ovrio

Gametas
Carregam o material
gentico dos pais
Ovcito

Espermatozide

Testculo
Fecundao

Produzem e transportam as clulas germinativas desde as gnadas

(testculos e ovrios) at o local da fecundao na tuba uterina.

A formao dos gmetas implica

a ocorrncia de meiose e
designa-se por gametognese.
Os gmetas so as clulas
reprodutoras, contendo
cromossomos n (23) haplides.
Os gmetas so produzidos nas
gnadas, e so as nicas
clulas com n cromossomos.

Da unio dos gmetas resulta o

zigoto, contendo 2n
cromossomos (46) diplide.
O ciclo de vida do Homem
diploide, em que a fase haploide
se resume formao dos
gametas.

clulas sexuais altamente especializadas.

Espermatognese: maturao dos espermatozoides;

Ovognese: maturao dos ovcitos.

GAMETOGNESE
Processo de formao dos gametas
2)Fases:
Multiplicao:
Aumento do no. de clulas germinativas por mitose

3) Meiose
Reduo do material cromossmico
4) Maturao
Diferenciao estrutural e funcional dos gametas

entre
sexos

Como constitudo o sistema reprodutor masculino?

O sistema reprodutor masculino composto
pelas gonadas, as vias genitais, os rgos
anexos e o rgo copulador.
Os vasos deferentes so vias genitais que
transportam os espermatozides do escroto
at uretra.
As vesculas seminais produzem o lquido
seminal, importante no fornecimento de
nutrientes para os espermatozides,
compondo grande parte do esperma.
A prstata produz o lquido prosttico,
essencial na manuteno das condies de
pH do esperma.
No escroto ocorre a maturao final dos
espermatozides e a sua acumulao at
serem ejaculados.
Os testculos produzem os espermatozides
e a testosterona.

So compostos por
tbulos seminferos

Produzem
espermatozides
e testosterona.

Estes tbulos alojam as

espermatogonias (em
diversos estgios de
diferenciao)
e as clulas de Sertoli
(nutrem, protegem e
fornecem suporte).

Clula de
Leydig

Nos espaos intersticiais dos tbulos

localizam-se as clulas de Leydig,
responsveis pela produo de
testosterona.

sequncia

espermatognias

de

eventos

so

espermatozoides maduros.

pelos

quais

transformadas

as
em

Espermatognia

Tbulos seminferos
Espermatcito primrio

Espermatcito secundrio

Espermtides
Espermiognese

Todo
o
processo
de
espermatognese, que inclui a
espermiognese, demora cerca de
2 meses.

Completada a espermiognese
os sptz entram na luz do
tbulo seminifero

Espermatognias permanecem em repouso nos tbulos

seminferos dos testculos durante o perodo fetal e psnatal, aumentando em nmero durante a puberdade.
Clulas de Sertoli
Sustentam, protegem e nutrem as clulas da
linhagem espermatognica.

So transportados passivamente dos tbulos seminferos para o epiddimo. O ducto

deferente transporta os sptz para a uretra

Espermiognese
Processo
de
diferenciao
das
espermtides que as transformam em
clulas altamente especializadas, os
espermatozides

 So clulas ativamente
mveis, formadas por
uma cabea e uma
cauda.
Cabea a maior parte e
contm
o
ncleo
haploide.
Espermatozides com
cromossomo Y: Possuem a
cabea (acrossomo) menor,
apesar de serem os mais rpidos,
so menos resistentes.

Espermatozides com
cromossomo X: Possuem a
cabea maior, so mais lentos e
mais resistentes que os
masculinos.

O ncleo tornase compacto.

Formao de um capuz sobre o ncleo, por agregao

de vesculas do complexo de Golgi, formando o
acrossoma.

As mitocndrias acumulamse na pea intermdia.

Colo a juno
entre a cabea
e a cauda.

O flagelo permite a deslocao

dos espermatozides pela
ao dos batimentos no
sistema reprodutor feminino.

Ocorre uma reduo do volume

do citoplasma e modificao da
forma do espermatozide.

Contm as
mitocondrias as
quais fornecem
ATP necessria
a atividade.

Espermiognese

Principais processos
1) Formao do acrossomo:
a partir do complexo de
Golgi
estrutura rica em enzimas
hidrolticas
importncia na fertilizao
2) Desenvolvimento do
flagelo:
a partir do centrolo distal
associao com
mitocndrias
motilidade celular
3) Compactao cromatnica:
proteo ao material
gentico
facilidade de transporte
4) Eliminao do excesso de
citoplasma
eliminao das organelas
desnecessrias
facilidade de transporte
importncia na espermiao

Maturao
Espermatozides testiculares so incapazes de fertilizar devido
sua imotilidade
Durante sua passagem pelo epiddimo maturao bioqumica e
funcional (durao 4-12 dias em humanos):
- remodelamento da membrana plasmtica, aumentando sua habilidade
de se ligar zona pelcida e a tornando mais resistente e apta para
penetrar os envoltrios do vcito II.
Armazenamento na cauda do epiddimo
Na ejaculao os espermatozides, em associao com a secreo
das glndulas acessrias (prstata, vescula seminal e glndulas bulbouretrais), so movimentados ao longo do vaso deferente e uretra
2-6ml de smem so ejaculados, contendo 40-250 milhes de
espermatozides (at 25 milhes fertilidade normal)

Cabea

Acrossomo
Ncleo
Pea intermediria

Espermatozide

Mitocndria
Membrana plasmtica
Cauda

Flagelo

Infertilidade
Ausncia de concepo por prejuzos
na produo, transporte e fuso dos
gametas.
50% das causas de infertilidade so
devidas a fatores masculinos.

Fatores masculinos:

alteraes do nmero de
espermatozides
morfologia e motilidade espermticas
ausncia da produo de
espermatozides
obstruo dos ductos deferentes e
ejaculadores
anticorpos antiespermatozides (AcAE)

Processamento do smen:
Conjunto de tcnicas laboratoriais
com fins de preparo prvio a
criopreservao ou para seleo e
separao dos espermatozides em
tcnicas de reproduo humana
assistida.

Espermograma
(anlise seminal)
Mais importante fonte de
informaes para a avaliao do
homem infrtil.

Espermograma fornece as
informaes sobre a funo testicular
e da funo secretora de algumas
glndulas acessrias.

No um teste de fertilidade do
homem, ele um indicador do status
funcional dos testculos.

Smen:
Fluido composto por clulas
germinativas, no germinativas e
secrees produzidas pela prstata,
ducto deferente distal e vesculas
seminais, adicionadas
sequencialmente, e eliminado pela
uretra durante a ejaculao.

Uso teraputico:
Utilizao de clulas ou tecidos
germinativos de um doador, para
propiciar a capacidade reprodutiva
e/ou endcrina prpria ou capacidade
reprodutiva de terceiros.

Espermograma:

Coleta
Anlise macroscpica
Exame citolgico
Morfologia
Testes de funo espermtica

Coleta do smen:
Abstinncia sexual de 48 a 72 horas;
Orientaes sobre a coleta;
Frasco coletor de plstico estril;
Frasco etiquetado com nome do
paciente,esposa,data e hora da coleta;
Lavar as mos e o pnis com gua e
sabo,enxugando com gaze estril;
Nmero de coletas
Local adequado

Evitar perda de material (85% poro

inicial);
Coletar o smen por masturbao;
Aps anlise pode-se pedir uma
segunda coleta;
Coleta no domiclio ( entregar at 60
min) e manter frasco a 37C.
Mais de uma amostra de smen para
exame.

Anlise macroscpica:

Aspecto
Tempo de liquefao
Cor
Volume
pH
Viscosidade ou filncia

Aspecto:

Heterognio
Presena de grumos ou cogulos
de protenas

Liquefao:
(Tempo que o smen leva para
adquirir consistncia lquida por
ao enzimtica).
Valor esperado - 5 a 30 minutos.
Liquefao anormal: desequilbrio
das substncias da prstata e das
vesculas seminais.

Cor
Normal - branco opalescente ou
branco acinzentado.
Alterado - amarelado - infeco ou
perodo de abstinncia maior.
amarelo claro - pouco
espermatozide
avermelhado ou marrom
(presena de sangue)

Volume:
60% vesculas seminais.
30% prstata.
5% espermatozides.
5% epiddimo e glndulas bulbo uretrais

Volume:
normal - 1,5 a 5,0 ml
< 1,5 ml hipoespermia - obstruo
ou agenesia das vias eferentes.
>5,0 ml hiperespermia - infeco
prstata e/ou vesculas seminais.
- Aspermia: ausncia de
ejaculado(disfuno neurolgica dos
mecanismos de emisso ou
ejaculao retrgrada)

pH
(feito com fita de pH)
Valor normal - 7,2 a 8,0
pH> 8,0 - pode indicar prostatite
aguda,vesiculites, epididimites.
pH< 7,2 - infeces crnicas ou
obstruo nos ductos
ejaculatrios (baixo volume)

Viscosidade ou filncia:
(Avaliada a formao de um fio
resultante da queda de uma gota de
uma pipeta)

Normal < 2,0 cm.

Viscosidade aumentada - fio > 2,0
cm processo inflamatrio infeccioso das glndulas anexas.

Exame citolgico:

concentrao espermtica
motilidade e grau de motilidade
concentrao de clulas redondas
aglutinao espermtica
vitalidade
morfologia

Concentrao
(quantidade de espermatozides no ejaculado).

Valor normal: 20 milhes /ml

Valores anormais

< 20 milhes /ml - oligozoospermia.

< 5 milhes /ml oligozoospermia severa
Ausncia de espermatozides - azoospermia.

Valor no ejaculado: 40 milhes.

Motilidade

(contagem de sptz mveis e imveis).

Grau a ou 3 progresso linear rpida.

Grau b ou 2 progresso linear lenta ou no linear.

Grau c ou 1 no progressivo.

Grau d ou zero imveis.

Valor normal: > 50% grau a+b (3+2) ou
> 25 % grau a ou 3

Valor anormal: < 50% grau a+b (3+2) :astenozoospermia

Vitalidade
(contagem de espermatozides vivos e
mortos).
Corante eosina-nigrosina;
Espermatozides vivos: no se coram;
Espermatozides mortos: corados.

Normal: > 75% espermatozides vivos.

< 75% espermatozides vivos necrozoospermia.

Clulas redondas
(presena de Leuccitos PMN).
Podem representar leuccitos,clulas
epiteliais e prostticas e clulas
germinativas.
Diferenciar leuccitos de espermtide e
espermatcito;
Teste de Endtz cora clulas com
peroxidase (enzima presente nos granulcitos)

Valor normal: at 1 milho /ml.

Aglutinao espermtica

Morfologia
(contagem de sptz de formas normais
e alteradas).
Contar de 100 a 200 espermatozides.

O.M.S Valor normal: 30%

espermatozides cabea oval, pea
intermediria e cauda bem definida.

Presena de
vacolos

Outros exames:
Espermocultura
(presena de microrganismos patognicos).
Casos sintomticos das glndulas
Acessrias.
Bacilos gram negativos E.coli,
enterococos agem na prstata e
epiddimo causando imobilizao dos
espermatozides.

Anlise bioqumica

Marcadores bioqumicos.

Vescula seminal: Frutose, prostaglandinas

Prstata: cido ctrico, Zinco, Fosfatase cida

Epiddimo: L-carnitina, glicerofosfocolina

Importncia clnica limitada (funo biolgica)

Testes de funo espermtica:

Teste de Hiposmolaridade
Teste de capacitao ou
processamento seminal prognstico

Teste Hiposmtico
(capacidade funcional da membrana).
Meio hiposmtico (gua destilada e soluo
fisiolgica (NaCl a 0,9 %) 30 minutos a
37C normais ficam inchados.
O equilbrio osmtico indica a
funcionabilidade da membrana.
Valores normais: 60% espermatozides
apresentam cauda inchada.

Teste de Capacitao ou
Prcessamento Seminal Prognstico:
O objetivo pode ser para selecionar
os melhores gametas, remover toxinas e
contaminantes, ou melhorar o potencial
frtil dos espermatozides.
Determina qual o nmero de
espermatozides considerados de boa
qualidade, que foram recuperados aps o
processamento.

Processo reversvel que prepara o

espermatozide para a reao
acrossmica. Processamento Seminal.

Tcnica de Swim-up.
Baseia-se na velocidade de
progresso direcional dos espermatozides
Elimina o plasma seminal, material
amorfo, clulas esfoliativas,
espermatozides mortos, imveis e
aqueles sem velocidade de progresso
direcional.
Amostra limpa com espermatozides
de excelente motilidade.

A tcnica de "swim-up"
recupera cerca de 20% dos
espermatozides mveis
presentes no ejaculado inicial,
com alta qualidade, mesmo
quando a motilidade inicial da
amostra baixa.

Deus! Estou
exausto. Quanto
falta pra chegar na
trompa de Falpio?

Um longo caminho.
Pois ns acabamos
de passar pelas
tonsilas!

Reproduo Humana
Em que consiste a gametognese e a fecundao?
Qual o papel dos hormnios no controle do
sistema reprodutor?
Como ocorre o desenvolvimento embrionrio?

Manipulao da fertilidade
Como
atuam
as
diferentes
mtodos
contraceptivos?
Quais as principais tcnicas de reproduo
medicamente assistida?
Que
implicaes
bioticas
envolvem
a
manipulao de fertilidade humana?

REPRODUO E MANIPULAO DA FERTILIDADE

Qual a importncia de possuirmos tcnicas de controle da fertilidade?

Atualmente possumos conhecimentos e tcnicas capazes de controlar a fertilidade, de modo a:

Diminuir a
fertilidade
humana

Contracepo e
mtodos
contraceptivos

Aumentar a
fertilidade
humana

Tcnicas de
reproduo
assistida

REPRODUO E MANIPULAO DA FERTILIDADE

A infertilidade pode
dever-se a causas
associadas ao homem,
mulher ou at de
ambos. Algumas so
desconhecidas,
necessitam de estudo.

A infertilidade feminina devese essencialmente a

disfunes ovrianas e a
problemas para prosseguir
uma gravidez.

Para os vrios fatores

de infertilidade
masculina existem
tratamentos
especficos que visam
essencialmente a
produo de
espermatozides.

REPRODUO E MANIPULAO DA FERTILIDADE

Quais so as principais causas da infertilidade masculina?
O desenvolvimento de
formas anomalas de
espermatozides uma
das causas de infertilidade
masculina.
O nmero de
espermatozides tem
diminudos
significativamente ao longo
das ltimas dcadas
O sucesso de uma
gravidez depende da
existncia de um elevado
nmero de
espermatozides no
esperma.

REPRODUO E MANIPULAO DA FERTILIDADE

REPRODUO E MANIPULAO DA FERTILIDADE

REPRODUO E MANIPULAO DA FERTILIDADE

Qual a importncia das tcnicas de reproduo assistida?
Estas tcnicas visam ultrapassar os
problemas de infertilidade do casal,
aplicando-se em funo da histria
clnica dos pacientes e dos problemas
que apresentam.

Inseminao artificial
intra-uterino
deposio de
espermatozides na
cavidade uterina, no
se expondo s
condies adversas do
muco cervical e
auxiliando o seu
transporte.

Fecundao in vitro
o encontro entre os
gmetas ocorre fora
do organismo
feminino, sendo o
embrio
posteriormente
transferido.

Injeco
intracitoplasm-tica
de espermatozides
associada FIV,
em que o ncleo do
espermatozide
injectado diretamente
no vulo.

Estas tcnicas so frequentemente associadas induo da ovulao. Com

tratamentos hormonais, estimula-se a produo de ovcitos, que podem ser
recuperados e utilizados nas diferentes tcnicas.

REPRODUO E MANIPULAO DA FERTILIDADE

Tcnicas de reproduo assistida Inseminao artificial
Um nmero reduzido
de espermatozides,
que tambm podem
ser incompatveis
com o muco cervical,
ou mesmo
impotncia, obrigam
deposio do
esperma
directamente na
cavidade uterina.

Se esta tcnica for

complementada com
a induo da
ovulao pode
originar o
aparecimento de
gravidezes mltiplas.

Inseminao Artificial

Tcnicas de Reproduo assistida Fertilizao in vitro

um processo em que as clulas ovarianas so

fertilizadas pelo espermatozoide fora do corpo.
A fertilizao in vitro, tambm conhecida como beb
de proveta, a unio do espermatozide com o vulo
no laboratrio, formando o embrio que posteriormente
ser transferido para a cavidade uterina.

REPRODUO E MANIPULAO DA FERTILIDADE

Tcnicas de Reproduo assistida fertilizao in vitro

Esta tcnica aplica-se na maioria

das situaes de infertilidade
(masculina e feminina).

Aps a aspirao dos folculos

maduros, estes so avaliados ao
microscpio.

Os gmetas so colocados num

meio de cultura prprio, onde
ocorrer a fecundao.

FIV

Tcnicas de Reproduo assistida injeco introcitoplasmtica de espermatozides

ICSI significa Intra Citoplasmatic Sperm Inject Micro

Manipulao de Gametas. A tcnica faz uso de microscpio
e micromanipuladores, introduzindo o sptz dentro do vulo
com uma agulha sete ou mais vezes mais fina que o
dimetro de um fio de cabelo humano. Isso tudo uma
complementao da prpria tcnica de FIV.

FIV - ICSI

Diagnstico pr implantacional

O DGPI (Diagnstico Gentico Pr-Implantao) ou PGD um

mtodo de diagnstico pr-natal utilizado em tcnicas de
reproduo medicamente assistida e que visa prevenir a
transferncia de embries portadores de graves doenas gnicas.
O PGD consiste em abertura da zona pelcida do embrio em seu 3
dia de desenvolvimento (estgio de 6 a 10 clulas) ou ento no 5
dia ( BLASTOCISTO) e retirada de uma ou mais clulas para anlise
gentica.
Utiliza-se um aparelho de LASER para realizar o procedimento e
assim
diminuir
muito
os
possveis
danos
causados
ao embrio durante o procedimento da bipsia.

PGD