PRCTICA N0 3

DIFERENCIACIN CELULAR Y EL ESTUDIO DE LOS GRANDES

COMPARTIMIENTOS CELULARES: MEMBRANA, CITOPLASMA Y
NCLEO CON EL USO DE DIFERENTES COLORANTES

I.

OBJETIVOS

II.

Diferenciar el sistema de endomembranas celulares y el papel que

cumplen.
Desarrollar habilidades de tincin para el reconocimiento de estas
estructuras.

GENERALIDADES
La clula con sus dos elementos fundamentales, membrana plasmtica,
citoplasma y ncleo, constituye la unidad biolgica y bsica de los seres
vivos. Como elemento general de las construcciones biolgicas
representa el mnimo de estructura necesaria para que se pueda
observarla totalidad de las manifestaciones caractersticas de la vida
incluyendo la reproduccin. Por lo tanto la clula representa el primer
nivel en el que puede llevarse a cabo la unidad de un sistema vivo
completo.
De diversa morfologa externa, su anatoma y su modo de vida, los
organismos tienen una uniformidad notable, tanto en el plano morfolgico
como en el fisiolgico, cuando se llega al nivel celular. Examinando una
clula al microscopio esta se observa como llena de un medio
transparente en el cual se identifican diversas organelas.
Una de las caractersticas distintivas de las clulas eucariotas respecto de
las procariotas es su alto grado de compartimentalizacin. La presencia de
un ncleo bien diferenciado, con una envoltura nuclear que confina el
material gentico al interior del ncleo, es slo un aspecto de la separacin
espacial de funciones dentro de la organizacin celular.

El citoplasma, a su vez, se encuentra recorrido en todas direcciones por un

sistema de sacos y tbulos, cuyas paredes de membrana ofician de lmite
entre la matriz citoplasmtica y la luz o cavidad del sistema. Este conjunto
de estructuras membranosas, incluida la envoltura nuclear, se conoce como
sistema de endomembranas (SE) o sistema vacuolar citoplasmtico (SVC).

Dentro del sistema de endomembranas se distinguen los siguientes

elementos:
a)
Retculo endoplasmtico granular o rugoso (REG o RER). Es un
grupo de cisternas aplanadas que se conectan entre s mediante tbulos.
Presente en todos los tipos celulares, se halla especialmente desarrollado
en las clulas secretoras de protenas.
b)
Retculo endoplasmtico agranular o liso (REA o REL). Su
aspecto es ms tubular y carece de ribosomas. Es poco conspicuo en la
mayora de las clulas, pero alcanza un notable desarrollo en las clulas
secretoras de hormonas esteroides.
c)
Aparato o complejo de Golgi. Constituido por sacos discoidales
apilados, como mnimo en nmero de tres, rodeados por pequeas
vesculas.
d)
Envoltura nuclear. Doble membrana que encierra una cavidad, la
cisterna perinuclear, en directa continuidad con la luz del RER, del cual se
considera una dependencia.

III.

MATERIAL Y MTODO
3.1. MATERIAL:
3.1.1. Material biolgico: El alumno debe traer
- Bulbo de cebolla ( A l l i u m c e p a ).
- Hojas de Elodea.
- Papa, hojas de lechuga, geranio.
- Raz, hojas y tallo de diferentes plantas.
- Agua estancada que contenga protozoarios.
3.1.2. Material de laboratorio:
- Porta objetos
- Cubre objetos
- Papel filtro
- Pinzas
- Estiletes
- Goteros

- Azul de metileno
-Nitrato de plata.
- Verde Jano
- Orceina actica.
- Papel lente
- Hoja de afeitar
- Lugol
- Eosina y Hematoxilina.(solo para clula animal
- Acido pcrico.
- Microscopio compuesto

3.2. MTODOS:
3.2.1. Protocolos de muestras para observar:
1. OBSERVACION
DE
COMPARTIMENTALIZACIN DE
ANIMAL:

LA
ESTRUCTURA
UNA CELULA VEGETAL Y

PROCEDIMIENTO:
OBSERVACION DE LA ESTRUCTURA DE LA CELULA
VEGETAL:
Experiencia 1:
A) Elodea sp
PROCEDIMIENTO
Experiencia 1:
- Coloque una gota de agua en el centro de la lmina.
- Seleccione una hoja joven de elodea, que se ubica cerca del extremo
de una rama y colquela con la ayuda de una pinza en la gota de
agua.
- Cubra la muestra con una laminilla.
- Observe la clula y describa la pared celular, membrana plasmtica y
NUCLEO Y CLOROPLASTO.
- Observe la ciclosis o movimiento citoplasmtico.
Experiencia 2:
B) En epidermis de Allium cepa 'Cebolla'
PROCEDIMIENTO
- Coloque una gota de agua en el centro de la lmina.
- Realice un pequeo corle a la cebolla y con una pinza desprenda la
epidermis de la cara interne o la superficie cncava de un catafilo de
cebolla, la capa epidmica deber ser transparente.
- Coloque en la lmina el trozo de epidermis de cebolla, no mayor que el
dimetro de la gota de agua.

- Extienda cualquier doblez de la epidermis y cubra con una laminilla, sin

aplicar presin alguna.
- Con papel filtro seque cualquier exceso de agua que aparezca fuera de
la laminilla.
-Examine la preparacin con el objetivo de menor aumento y
posteriormente con el de mayor aumento. Observe si se distinguen
claramente los compartimentos.
Experiencia 3:
C) En Epidermis de cebolla (utilizando colorante)
PROCEDIMIENTO
- Haga otra preparacin de epidermis de cebolla, sale vez utilice una gota
de lugol, en lugar de la gota de agua. Observe los compartimentos.
- Haga otra preparacin y coloree con cido pcrico y observe los
compartimentos.
- Haga otra preparacin colore con orceina actica. Observe.
- Haga otra preparacin y coloree con verde jano. Observe.
-Otra preparacin y coloree con nitrato de plata. Observe
indique en los resultados las diferencias que existen entre todo lo
observado?
OBSERVACION
DE
LOS
COMPARTIMENTOS
ESTRUCTURALES DE LA CELULA VEGETAL EN
RAIZ, TALLO Y HOJAS.
Experiencia 3.
a. Hacer el corte membranoso de la raz de un vegetal y observe los
compartimentos.
b. Hacer corte del tallo delgado membranoso y observe los
compartimentos y compare con la raz.
c. Hace corte membranoso de la hoja y observe los compartimentos y
compare con la raz y el tallo, exponga su interpretacin en los
resultados.
OBSERVACIN DE EPITELIO
ANIMAL Y EN PROTOZOARIOS.

BUCAL:

CLULA

Experiencia 4.
Obtener la muestra con la ayuda de un extremo de una lmina, mediante
un raspado suave del epitelio bucal.

Sostenga por un extremo una segunda lmina entre los dedos pulgar e
ndice y forme un ngulo de 45 con la lmina que contiene la muestra.
Luego mueva esta ltima lmina en una sola direccin para que las
clulas queden esparcidas sobre la otra lmina (frotis).

Secar al medio ambiente o utilizando un mechero y que seque bien para

que la muestra quede bien fijada a la lmina.
Cubrir la muestra con azul de metileno durante 5 minutos. Y observe los
compartimentos.

Elimine el exceso de colorante y lave la muestra con agua corriente.

Nuevamente secar la lmina. Y observe los compartimentos.

Experiencia 5.
Haga lo mismo para colorear con diferentes colorantes:
Haga una muestra de frotis de mucosa bucal y realice los mismos pasos
anteriores y aplique el colorante cido pcrico. Observe los
compartimentos celulares.
En otra muestra utilice verde jano. Observe los conpartimentos celulares.
En otra muestra orceina actica y observe los compartimentos.
En otra muestra utilice nitrato de plato y observe los compartimentos
celulares,

indique en los resultados las diferencias que existen entre todo lo

observado?

IV.

RESULTADOS

V.

CUESTIONARIO

1. Por qu la pared celular es ms fcil de observar que las estructuras de

las reas internas de las clula?
2. Qu diferencias estructurales existen entre lea clulas del epitelio bucal y
las clulas vegetales?
3. Qu caractersticas importantes tienen en comn las clulas animales y
vegetales?
4. Por qu la pared celular es ms fcil de observar que las estructuras de
las reas internas de las clula?
5. En el ncleo de estas clulas que estructuras puedes distinguir?

6. Qu caractersticas importantes tienen en comn las clulas animales y

vegetales?

7. Qu diferencias estructurales existen entre lea clulas del epitelio bucal y

las clulas vegetales?
8. Por qu es posible obtener algunas clulas, por simple frotamiento del
interior de las mejillas?

VI.

DISCUSIN

VII.

CONCLUSIN

VIII.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

IX.

ANEXOS