PRCTICA NO.

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Extraccin y aislamiento de ADN
OBJETIVOS

Romper con detergentes la pared celular, la membrana plasmtica y la membrana

nuclear, para liberar el ADN.
Precipitar en alcohol el ADN, para su visualizacin.

INTRODUCCIN
ADN es la abreviacin del Acido Desoxirribonucleico, es el material gentico de todos los
organismos vivos y de casi todos los virus. Es el ADN quien lleva la informacin necesaria
para dirigir la sntesis de protenas y la duplicacin de la misma molcula, la cual es la
molcula de la vida, ya que constituye el material gentico de todos los organismos vivos y
se encuentra en el interior del ncleo de las clulas.
El ADN es el componente qumico primario de los cromosomas y el material que
constituye los genes, su funcin primordial es conservar la informacin durante la divisin
celular, trasmitirla de generacin en generacin y hacer efectiva la informacin gentica
que contiene.
Para estudiar el ADN es imprescindible aislarlo e identificarlo. Existen diferentes mtodos
de aislamiento, dependiendo del tipo de estudios o investigacin que se quiera realizar. Sin
embargo todos comparten el hecho de que, debido a que la molcula se encuentra al interior
de estructuras membranosas y est asociada con protenas, se requiere usar sustancias
adecuadas para obtener al ADN de la forma ms purificada posible.
PROCEDIMIENTO
Preparacin de la muestra
1. Colocar en un vaso de precipitados: 5 ml de detergente, 2 gr de sal comn y 3 ml de
jugo de pia.
2. Aadir posteriormente 30 ml de agua destilada, a esta mezcla se le conoce como
tampn de extraccin.
3. Mezclar los chicharos con el tampn de extraccin en una licuadora.
4. Licuar a velocidad mxima durante 30 s.
5. Filtrar la mezcla utilizando un colador y gasa en un vaso de precipitados. Trasferir a
la probeta no graduada aproximadamente 10 ml.

6. Adicionar 10 ml de alcohol fro, hacindolo resbalar por las paredes del tubo, para
que se forme una copa sobre el filtrado.
7. Reposar de 2 a 3 min y observar.
RESULTADOS

CUESTIONARIO
1. Para qu se utiliza el detergente y el NaCl en la extraccin?
SAL: La sal en disolucin acta disminuyendo la solubilidad de las protenas, lo
que hace que precipiten y se separen ms fcilmente del ADN.
DETERGENTE: El detergente utilizado, tiene como funcin destruir las membranas
celulares del tejido vivo; el detergente disuelve las grasas, que es el componente
principal de la membrana plasmtica y nuclear de las clulas (es el mismo principio
por el que el gel limpia la grasa de nuestra piel). Al romperse las membranas
celulares se permite la salida del ADN al exterior.

2. Qu componente aporta el jugo de pia o de papaya y cul es su utilidad?

Los zumos de pia y papaya contienen un enzima, la papana, que contribuye a
eliminar las protenas que puedan contaminar el ADN.
3. Por qu se incorpora finalmente el etanol muy fro en el medio?
El ADN es una molcula muy larga y tiende agruparse. De ah la facilidad para
retirarla. Para aislar el ADN hay que hacer que precipite en alcohol. El ADN es
soluble en agua, pero cuando se encuentra en alcohol precipita en la interfase entre
el alcohol y el agua. Adems de permitirnos ver el ADN, el alcohol separa el ADN
de otros componentes celulares, los cuales son dejados en la solucin acuosa.
FUENTES DE INFORMACIN
http://learn.genetics.utah.edu/es/extraction/ (consulta: 31 de octubre)
http://www.syngenta.com.mx/que-es-adn.aspx (consulta: 31 de octubre)