TECNOLGICO DE ESTUDIOS SUPERIORES DE ECATEPEC

BIORREACTORES
Mtodos de esterilizacin en procesos industriales.

De la cruz Diana Carolina

Gmez Palma Catalina
Islas Gmez Francisco Javier
Rodrguez Lpez Jazmn
Ruiz Tovar Emanuel

INTRODUCCIN
Dentro de los procesos de esterilizacin en autoclaves, el vapor es el agente ms
comnmente utilizado, aunque existen otros mtodos tales como cascada de
agua, espray de agua y mezcla de vapor-aire que tambin pueden ser utilizados.
El calor latente que se libera al condensar el vapor en los elementos que han de
ser esterilizados, hace que este proceso sea muy eficiente. Los rangos de
temperaturas que se alcanzar durante los procesos de esterilizacin varan entre
115 y 134C.
La variedad de productos que son sometidos a procesos de esterilizacin es muy
amplia, aunque se puede destacar los siguientes:
Bolsas / IV Bag
Botellas
Viales
Pouches
Jeringas
2. EQUIPOS DE PROCESO
Un autoclave es un recipiente sometido a presin que utiliza el vapor presurizado
para calentar el producto y conseguir la esterilizacin de los elementos que
previamente han sido introducidos. En base a esta definicin, se pueden disear
desde pequeos dispositivos de sobremesa, hasta soluciones de gran tamao
para producciones industriales. Los autoclaves de gran tamao pueden ser
utilizados para esterilizar grandes volmenes de parentales, como los que son
envasados en pouches o bolsas, mientras que las botellas o ampollas lo suelen
ser en autoclaves de tamao ms reducido.
Sea cual sea la naturaleza de la carga, el producto se ubica en bandejas o jaulas
para optimizar la distribucin de la carga. Un factor importante para el proceso de

validacin es que la carga sea estandarizada. Esta es la principal razn por la que
se suele trabajar con carga completa.
3. OBJETIVO
Una de las aplicaciones ms habituales de esterilizacin mediante autoclaves, son
las realizadas sobre lquidos y equipamiento mdico en diversos contenedores,
tales como botellas, viales, ampollas o bolsas.
En la mayora de casos es necesario monitorizar la temperatura del producto
durante la esterilizacin, ya sea en produccin por lotes, desarrollo de ciclos o
validacin. Por esta razn, Ella ofrece un amplio rango de accesorios y fijaciones.
Con ellos se obtiene una mayor repetitividad que hace la re-validacin mucho ms
fcil y confiable.
4. DIRECTRICES
Los requerimientos para los procesos de testeo o validacin de autoclaves
dependen del tipo de uso y del pas. Algunas de las normas aplicadas en dicho
procesos son: ISO EN 285, ISO EN 17665 y PDA
Dichas normas especifican entre otros factores la necesidad de 11 puntos de
temperatura, cuando se realiza un estudio de distribucin de calor en un autoclave
de entre 1,5 y 2,5 m3. La distribucin recomendada para todos estos puntos
consiste en ubicar un sensor en cada uno de las 8 esquinas del autoclave, uno en
el centro, uno prximo al drenaje y un ltimo junto al sensor de temperatura del
propio autoclave.

LOS BIORREACTORES USADOS ACTUALMENTE PARA PRODUCCION

INDUSTRIAL

no agitados sin aireacin

con elevacin de aire
agitados con aireacin
fluidificados
de membrana y fibra hueca

LA IMPORTANCIA DEL VAPOR EN LA INDUSTRIA

El vapor de planta es utilizado como el medio principal de calentamiento en miles
de industrias, y para la generacin de energa elctrica como uso secundario.
Adems el vapor limpio o puro se utiliza en el proceso de alimentos y medicina, en
la esterilizacin de productos y equipos, etc.
Su uso generalizado se debe a las siguientes razones:

la generacin de vapor en una de las formas ms econmicas de

generacin de energa
el vapor puede controlarse de manera relativamente sencilla debido a que
circula de una zona de alta presin a una de menor presin sin necesidad
de otro equipo.
el vapor es fcil de producir ya que se obtiene del agua que adems puede
ser reutilizable

ESTERILIZACION DE BIOREACTORES INDUSTRIALES

A escala industrial la esterilizacin de medios, recipientes etc. se logra
generalmente por vapor, mientras el aire suministrado se esteriliza por la
temperatura elevada alcanzada en el compresor, seguida por el paso a travs de
un medio filtrante fibroso.
Esta ltima operacin sobre el aire suministrado implica una filtracin, en contraste
con la eliminacin total de microorganismo que se alcanzara usando una
membrana.
Es normal utilizar un filtro adicional a la salida del aire para evitar la infeccin en el
caso de que parte de dicho aire fuera aspirado de nuevo a la instalacin.(Richards
1968).

fig. 1

Un biorreactor puede ser esterilizado, destruyendo los microorganismos, con algn

agente como calor, radiacin o un producto qumico o bien separando el
organismo viable mediante un procedimiento fsico como la filtracin.

ESTERILIZACION EN BATCH
Este es el mtodo ms comn para esterilizacin de medio de cultivo. un reactor
con su medio de cultivo puede calentar de dos formas distintas, por la inyeccin
directa de vapor o por calentamiento indirecto a travs de camisa o serpentn. En
todos los casos debe calcularse apropiadamente el tiempo de retencin a la
temperatura de trabajo.
Dado que los biorreactores de gran tamao pueden tardar tiempo considerable en
llegar a la temperatura de trabajo y a fin de minimizar el tiempo de retencin lo
cual ahorra energa y disminuye la destruccin de componentes de medio unos
121 grados centgrados.

TUBOS DE AGUA
en estos el agua circula al interior de una serie de tubos (serpentin), mientras que
el calor se transfiere de la cmara de combustin hacia el interior de los tubos, as
el agua contenida dentro de los tubos comienza a elevar su temperatura hasta
evaporarse

TUBOS DE HUMO

En forma totalmente opuesta, este tipo de generadores los gases de combustin

circulan por los tubos, mientras que el agua se encuentra almacenada en la
cmara exterior , as el calor se transfiere alrededor de los tubos.
LA ESTERILIZACION SE PUEDE DAR

inyeccin de vapor
calentamiento elctrico
calentamiento por vapor fuente isotrmica de calor
enfriamiento con refrigerante no isotrmico

ESTERILZACION EL CULTIVO POR LOTE

A escala industrial la esterilizacin de medios, recipientes etc., se logra
generalmente por vapor, mientras el aire suministrado se esteriliza por la
temperatura elevada alcanzada en el compresor, seguido por el paso a travs de
un medio filtrante fibroso. Esta ltima operacin sobre el aire suministrado implica
una filtracin, en contraste con la eliminacin total de microorganismos que se
alcanzara usando una membrana.
Es normal utilizar un filtro adicional a la salida del aire para evitar la infeccin en el
caso de que parte de dicho aire fuera aspirado de nuevo a la instalacin (Richards,
1968).
Control de la esterilidad

Mantener la pureza del inculo.

Esterilizar el medio de cultivo y los aditivos.
Esterilizar el material en contacto con el medio (recipiente, fermentador,
vlvulas y conductos).
Esterilizar los gases entrantes y salientes.
Mantener las condiciones aspticas durante la manipulacin.
Construccin apropiada del biorreactor para su esterilizacin y para la
prevencin durante la fermentacin.

Mantenimiento y esterilizacin de cultivo por lote.

Tipos de esterilizacin

Esterilizacin discontinua
T 121c
Tiempos de esterilizacin mayores (23h)
Calentamiento por inyeccin de vapor o
intercambiador de calor.
Alto consumo de energa
Alteracin y destruccin de nutrientes

Esterilizacin continua
20-30 segundos a 90-120C
30-120 segundos a 140C
Calentamiento por inyeccin de vapor o
intercambiador de calor.
Formacin de sales insolubles
Tamao de partcula restringidas a 12mm

Esterilizacin del fermentador y el medio conjuntamente

El calentamiento se consigue mediante:
Inyeccin de vapor en el medio, por lo que el medio se prepara ligeramente
ms concentrado para compensar la dilucin por el vapor condensado.
El medio se calienta por conduccin, haciendo pasar vapor por la camisa de
termostatizacin.
Esterilizacin por separado del fermentador y el medio.

Este sistema ofrece ventajas ya que reduce el tiempo en el que el

recipiente de fermentacin es improductivo: un fermentador vaco se
esteriliza con relativa rapidez.

Pasos a tener en cuenta

Cambio de escala
-Diseo de medios para procesos de fermentacin
-Fermentacin en sustratos slidos
-Tecnologa de cultivos de clulas de plantas y animales
-Procesamiento posterior de la muestra

MATERTIAL DE ESTERILIZACION EN REACTORES INDUSTRIALES

Existen diferentes tipos de equipos de esterilizacin utilizados para la esterilizacin

del medio de cultivo dependiendo del mtodo empleado para el calentamiento
INYECCION DE VAPOR
La corriente de vapor se inyecta a presin en la corriente de fluido a procesar. Son
dispositivos muy compactos y eficientes.
Vapor a ~150 C + Lquido precalentado ~75 C
Tiempo de contacto ~2.5 s
Enfriamiento por nebulizacin en cmara de vaco relativo
Ventajas
Calentamiento y enfriamiento rpidos
Apto para alimentos muy sensibles al calor
Prdida de voltiles para leche
Inconvenientes
Fluidos poco viscosos
Difcil de controlar
Difcil mantenimiento de esterilidad en las zonas de baja presin
Vapor caro (agua potable)
Baja recuperacin de la energa (~50% frente a ~90% calentamiento indirecto)
Instalaciones poco flexibles (1)

CALENTAMIENTO ELECTRICO
Resistencias Tubulares Blindadas para el calentamiento de lquidos, cidos,
aceites trmicos en reactores, y otras aplicaciones de calentamiento por
Conveccin.
Para el anlisis de la transferencia de calor en cada celda se hacen las siguientes
suposiciones:
1.- La celda est compuesta de dos partes separadas por una superficie
diatrmica comn A (i).
2.- Los fluidos se consideran perfectamente mezclados en cada celda, y por
consiguiente tienen una temperatura uniforme.
3.- Toda transferencia de calor entre los fluidos ocurren a travs del rea
comn A (i), cualquier otra superficie que limita la celda es adiabtica, o es
un rea de entrada / salida para los fluidos.
4.- Todas las propiedades fsicas son independientes de temperatura.
5.- Las partes metlicas del intercambiador de calor son incorporadas en el
modelo de celda bajo las siguientes consideraciones:

La masa metlica de los tubos est a la temperatura media entre

la temperatura del fluido que va por los tubos y la del fluido del
lado de la coraza.
La masa metlica de la coraza est a la temperatura del fluido del
lado de la coraza.
6.- La conduccin de calor a travs de las paredes de tubos y la divisin entre
celdas es despreciable. (2)

CAMBIADORES DE CALOR DE SERPENTINES

Son cambiadores de calor sencillos empleados para calentamiento o enfriamiento,

se usan mucho Como parte de los alambiques, los reactores y las ollas de
coccin. Los cambiadores de calor de serpentn y de chaqueta estn por lo
general provistos de equipo de agitacin para mejorar los coeficientes. Como en
los otros cambiadores ya vistos la ecuacin general de diseo es:
Q = Uo Ao Tln
Serpentines
Son tubos arrollados en espiral que se colocan en el interior de los tanques a los
que se desea calentar o enfriar. Por lo general por el interior del serpentn se
introduce el agua de enfriamiento o el vapor de calentamiento.

El coeficiente interno hi , depender del fenmeno que se produzca, que en

general est dado por : a) Conveccin forzada sin cambio de fase. b) Conveccin
con cambio de fase (Condensacin). Para los casos a y b se deber emplear lo
dicho en los cambiadores De doble tubo. Para obtener el coeficiente de
transferencia de calor para el lado del interior del tanque ho : -------(3)

ENFRIAMIENTO CON REFRIGERANTES

Mediante el uso del nitrgeno lquido (LIN) como refrigerante, las corrientes de
lquido pueden enfriarse hasta alcanzar temperaturas extremas.
Nuestros sistemas de enfriamiento de lquidos criognicos son fiables y enfran de
forma eficiente un lquido de proceso hasta menos 120C (-248F).
Ofrecemos unidades que se utilizan para la gestin de procesos controlados de

temperatura de un circuito de medio de transferencia de calor. Segn los

requisitos del proceso, se puede suministrar o eliminar calor.
Entre algunos de los beneficios de estas unidades se incluyen los siguientes:

Gran flexibilidad con perfiles de temperaturas fcilmente modificables

Registro exhaustivo de parmetros del proceso
El nitrgeno utilizado para enfriar puede volver a utilizarse en la red de
gas inerte y por consiguiente, los costes de funcionamiento son
mnimos

PROCEDIMIENTOS INDIRECTOS
El calentamiento y el enfriamiento se obtienen mediante un intercambiador de
calor, generalmente a base de placas, tubular o de superficie barrida (o raspada).
Funcionan en forma continua y se utilizan por lo comn para tratar productos
fluidos
INTERCAMBIADORES DE CALOR DE PLACAS
Los ms utilizados en la industria de los alimentos, constituidos por un conjunto de
placas acanaladas independientes.
Las placas estn encajadas y ajustadas en un bastidor, dispuestas de tal forma
que cada par de placas adyacentes forma una Los dos fluidos (lquido a tratar y
fluido intercambiador de calor) circulan alternativamente por las vas.
Las placas estn equipadas con juntas que evitan todo tipo de mezcla entre
fluidos.
La distancia entre placas vara entre 3 mm para productos poco viscosos hasta 7
mm para los ms viscosos va

INTERCAMBIADORES DE CALOR TUBULARES

Son el tipo ms sencillo de intercambiadores de calor, estn constituidos por un
tubo o por haces tubulares (pueden estar unidos en ambos extremos por codos,
aunque esto puede provocar prdidas de presin en el sistema y acumulacin del
producto en los codos).

El producto y el fluido trmico circulan por dos tubos concntricos: uno ocupa el
espacio central y otro el espacio anular
Funcionan en forma continua y se utilizan por lo comn para tratar productos
fluidos.
INTERCAMBIADOR DE CALOR DE SUPERFICIE BARRIDA
Se utilizan principalmente para productos muy viscosos como: purs, helados,
jugos concentrados, constituidos por elementos tubulares dispuestos en forma
vertical.
El fluido trmico circula en un tubo anular, mientras que el producto que circula en
un tubo central, es agitado por un rotor equipado por elementos rascadores que
eliminan los depsitos que se van incrustando en la superficie del intercambiador
En esta aplicacin el fluido de servicio es agua de refrigeracin. Aunque este
intercambiador es utilizado principalmente durante la fase de esterilizacin.

ESTERILIZACION DEL MEDIO DE CULTIVO

El medio nutritivo que se prepara inicialmente contiene una variedad de clulas
vegetativas diferentes y de esporas que proceden de los constituyentes del medio,
del agua y del recipiente. Estos microorganismos deben ser eliminados por un
procedimiento adecuado antes de la inoculacin. Existen un conjunto de
procedimientos para la esterilizacin, pero en la prctica, para instalaciones a gran
escala,
el
calor
es
el
principal
mecanismo
utilizado.
Un conjunto de factores influyen en el xito de la esterilizacin por calor: el nmero
y tipo de microorganismos presentes, la composicin del medio de cultivo, el valor
del pH y el tamao de las partculas en suspensin. Las clulas vegetativas son
eliminadas rpidamente a temperaturas relativamente bajas, pero para la
destruccin de las esporas se necesitan temperaturas de 121C.
La esterilizacin por filtracin se utiliza frecuentemente para todos los
componentes de la solucin de nutrientes que son sensibles al calor y que seran
por tanto desnaturalizados durante el proceso de esterilizacin por vapor utilizado
normalmente en fermentacin industrial.
Esterilizacin

discontinua

La mayor parte de los medios de cultivo se esterilizan en la actualidad en

volmenes discontinuos en el birreactor a 121C. Los tiempos de esterilizacin
aproximados pueden ser calculados a partir de la naturaleza del medio y del
tamao del fermentador. No solamente debe ser esterilizado el medio nutritivo,
sino tambin las uniones, vlvulas y electrodos del propio fermentador. Por
consiguiente, los tiempos de esterilizacin reales son significativamente ms
largos que los calculados y deben ser determinados empricamente para las
soluciones especficas de nutrientes presentes en el fermentador. Un mtodo de
esterilizacin es inyectar vapor en la camisa del fermentador o en los serpentines
interiores (esterilizacin indirecta). Otro mtodo es inyectar vapor en la propia
solucin de nutrientes (procedimiento directo), en cuyo caso un pre-requisito es
tener vapor puro (libre de aditivos qumicos). Muchos suministros de vapor
industrial contienen productos qumicos txicos derivados de aditivos
anticorrosivos utilizados en el proceso de produccin del vapor. Adems, con la
inyeccin directa de vapor el condensado se acumula dentro del fermentador y de
esta forma el volumen del lquido aumenta durante el proceso de esterilizacin.

Esterilizacin continua
Las dos desventajas principales de la esterilizacin discontinua, dao al medio de
cultivo y alto consumo de energa, pueden ser evitadas en gran parte mediante el
uso de un procedimiento de esterilizacin continua. Aunque la esterilizacin
continua es la etapa preliminar lgica en una fermentacin continua a escala
industrial, tambin se puede utilizar en la fermentacin discontinua obteniendo
posibles mayores rendimientos en el tiempo y el espacio asignados. La razn para
esto se debe a la relacin exponencial entre velocidad de muerte y temperatura,
que hace ms corto el tiempo necesario para la eliminacin completa de los
organismos vivos cuando se utiliza una temperatura ms alta. Mientras la
esterilizacin discontinua se lleva a cabo en 30-60 minutos a 121 C, la
esterilizacin continua se lleva a cabo normalmente en 30-120 segundos a 140 C.
El calentamiento del medio de cultivo para la esterilizacin continua puede ser
llevado a cabo mediante inyeccin de vapor o mediante intercambiadores de calor.
La esterilizacin con inyeccin de vapor se hace inyectando vapor en la solucin
de nutrientes. La temperatura se eleva rpidamente a 140 C y se mantiene
durante 30-120 segundos. Debido a la formacin de condensados la solucin
nutritiva se diluye; para corregir esto la solucin caliente se bombea a travs de
una vlvula de expansin a un vaporizador y el condensado se retira mediante
bombas de vaco de forma que la solucin esterilizada de nutrientes tiene la
misma concentracin despus del proceso de enfriamiento que antes. La
desventaja de este proceso es la sensibilidad que presenta a cambios en la
viscosidad
del
medio
y
a
variaciones
en
la
presin.

En el proceso continuo que utiliza intercambiadores de calor, la solucin de

nutrientes, en el primer intercambiador de calor, se precalienta a 90-120 C
durante 20-30 segundos por la solucin nutritiva previamente esterilizada que sale.
Luego, en el segundo intercambiador de calor, se calienta indirectamente con
vapor a 140 C. Esta temperatura se mantiene durante 30-120 segundos en una
tubera de mantenimiento antes de que sea colocada en el primer intercambiador
mediante enfriamiento preliminar y posteriormente en un tercer cambiador para
refrigeracin a la temperatura del fermentador.

Bibliografa
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