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Avaliao histoqumica e fitoqumica de

Psidium guineense SW. (Myrtaceae)


Cntia Sorandra Oliveira Mendes1, Cnthia Gracielly Rodrigues2, Percio Rafael Bueno Ferreira 3, Sarah
Barbosa Reis4, Dario Alves de Oliveira5, Maria Olvia Mercadante Simes6

Introduo

A utilizao de plantas com fins medicinais,


para tratamento, cura e preveno de doenas, uma
das mais antigas formas de prtica medicinal da
humanidade [1].
A espcie estudada no presente trabalho, pertence
famlia Myrtaceae, de importncia nos ecossistemas
brasileiros, e que possui numerosos exemplos de
plantas
com
propriedades
farmacodinmicas.
Representantes dessas famlias so rvores ou
arbustos, com folhas simples, geralmente opostas, com
margens inteiras, de colorao sempre verde, e
caracteristicamente provida de glndulas produtoras
de leos essenciais [2].
Estudos demonstram a utilizao de extratos e
leos essenciais de espcies da famlia Myrtaceae
contra microorganismos de natureza patognica a
humanas, contra pragas agrcolas e na extrao de
frmacos [3].
Psidium guineense uma espcie arbrea de 2 a
2,5m de altura e com ampla disperso na Amrica
tropical. Possui tronco de colorao parda e
descamada.
O potencial medicinal das plantas se deve
principalmente aos seus princpios ativos denominados
metablitos secundrios, o que justifica a importncia
do estudo da biognese, regulao e atuao desses
compostos alm dos mtodos de extrao, purificao,
isolamento e identificao dos mesmos [4]. O estudo
de substncias ativas complexo e longo, por isso a
necessidade de estudos fitoqumicos preliminares,
onde as principais classes de compostos ativos so
qualificadas. Esses estudos servem de base para
trabalhos multidisciplinares e complexos visando
avaliao do principal componente responsvel por
determinada atividade. Isso possvel com tcnicas
cromatogrficas e de ressonncia sofisticadas [5].
O estudo histoqumico de plantas medicinais
auxilia na ecofisiolgica da espcie e no fornecimento
de elementos para a identificao macro e
microscpica de fitoterpicos produzidos a partir dos
rgos vegetais. Alm disso, os resultados desses testes
servem como elementos de comparao qualitativa

para identificao de drogas fitoterpicas e para a


prospeco de princpios ativos de vegetais [6].
Nesse contexto, o objetivo deste estudo foi
caracterizar fitoqumica e histoqumicamente folhas de
Psidium guineense.

Material e mtodos
A. Preparao do extrato vegetal
O material vegetal foi composto por folhas P.
guineense coletadas em abril de 2008. As amostras foram
secas em temperatura ambiente, em local seco e arejado,
por 72 horas. A pulverizao foi efetuada em moinho tipo
willey. O material foi acondicionado em sacos de papel e
conservado em freezer a temperatura de -20C. Foram
adotados os protocolos estabelecidos por Mouco,
Bernardino & Cornlio [7] e Barbosa et al. [8] visando
extrair e identificar os constituintes qumicos de interesse,
presente nos extratos da planta. As folhas para anlise
histoqumicas foram conservadas em cmara fria 5 C.
B. Anlises fitoqumicas e histoqumicas
As prospeces fitoqumicas dos extratos de folhas de
Psidium guineense foram desenvolvidas por avaliaes
qualitativas para taninos, flavonides, alcalides,
saponinas espumdicas, catequinas, depisdeos e
depsidonas, antraquinonas, glicosdeos cardiotnicos e
triterpenos e/ou esterides.
Foram feitos cortes histolgicos mo livre da nervura
central, do limbo e da margem da folha com auxlio de
lminas de barbear. Os cortes foram submetidos aos testes
hitoqumicos de Sudam IV para lipdios, Lugol para
amido, Floroglucinol para lignina, Cloreto frrico para
fenlicos em geral, Vanilina Clordrica para taninos,
Ellran e Wagner para alcalides. Foram montadas lminas
semi-permantes em gelatina glicerinada, exceto para os
testes de Floroglucinol e Vanilina Clordrica. As lminas
foram fotografadas com cmera digital Sony DSC-P52, em
microscpio ptico Nikon, modelo Eclipse E-200.

Resultados e Discusso
Os resultados das anlises fitoqumicas das folhas de P.
guineense encontram-se dispostos nas Tabelas 1.
O reativo de Cloreto Frrico demonstra colorao azul

_______________
1. Estudante de graduao em Cincias Biolgicas, Bolsista de Iniciao Cientfica PROBIC UNIMONTES, Centro de Cincias Biolgicas e da Sade,
Universidade Estadual de Montes Claros.E-mail: cintiasorandra@yahoo.com.br
2. Estudante de mestrado em Cincias Biolgicas, Centro de Cincias Biolgicas e da Sade, Universidade Estadual de Montes Claros. Email:cintiagracie@yahoo.com.br
3. Estudante de graduao em Cincias Biolgicas, UNIMONTES, Centro de Cincias Biolgicas e da Sade, Universidade Estadual de Montes Claros.
E-mail: peracio.bueno@gmail.com
4. Estudante de graduao em Cincias Biolgicas, Bolsista de Iniciao Cientfica PROBIC UNIMONTES, Centro de Cincias Biolgicas e da Sade,
Universidade Estadual de Montes Claros. E-mail
5. Professor do Departamento de Biologia Geral, Bolsista de Incentivo a Pesquisa e ao Desenvolvimento Tecnolgico_ BIPDT/ FAPEMIG_ Centro de
Cincias Biolgicas e da Sade, Universidade Estadual de Montes Claros. E-mail: dario.oliveira@unimontes.br
6. Professora Adjunta do Departamento de Biologia Geral, Centro de Cincias Biolgicas e da Sade, Universidade Estadual de Montes Claros. E-mail:
omercadante@hotmail.com

escuro. Os reativos de acetato de cobre e acetato de


chumbo adicionados de cido actico caracterizam um
precipitado castanho avermelhado. Em todos os testes
evidenciada a presena de taninos. Esse metablito
secundrio amplamente aplicado no curtume de
couros [9] e no que tange aplicao teraputica, os
taninos aceleram o processo de cicatrizao [10].
Nos testes realizados para identificao de
compostos flavonidicos em folhas de P. guineense
foram positivos, com o desenvolvimento das
coloraes rosa-avermelhada na presena do reativo de
Shinoda, da colorao amarela, de intensidade
varivel na presena de hidrxido de sdio 5% , da
colorao violeta, para o reativo de cloreto frrico e da
fluorescncia para a reao com cloreto de alumnio.
Inmeras atividades biolgicas esto associadas ao
grupo dos flavonides, como, por exemplo, funes
antioxidante, antiinflamatria e anticancergena [11].
Nas folhas de P. guineense as reaes de
Bouchardat, Mayer, Dragendorff e Bertrand para
alcalides foram todas negativas.
A formao de espuma estvel, porm em
quantidade reduzida, em tubo de ensaio, por
intermdio de agitao vigorosa dos extratos, revelou a
presena de saponina espumdica. As saponinas tm
sido associadas s atividades hemoltica, antiviral,
antiinflamatria [4].
Com o reativo de vanilina e cido clordrico foi
possvel identificar a presena de catequinas devido ao
surgimento de colorao laranja no extrato de folhas
de ara. Esta substncia possui atividade em
tratamentos do sistema gastrintestinal[12]
Depisdios e depsidonas foram identificadas nos
extratos de folha de ara quando submetidos ao
reativo de cloreto frrico; a reao pode ser observada
atravs do surgimento de colorao azul. Esses grupos
tm sido reconhecidos por apresentarem propriedades
antioxidantes [13], antivirais [14], antitumorais [15],
analgsicas e antipirticas [16]. Extrato de P. guineese
em contato com o reativo de hidrxido de sdio
apresentou colorao avermelhada, o que indica a
presena de antraquinonas do tipo oxidada. As
antraquinonas possuem propriedades laxativas e
estimulantes da movimentao peristltica [17].
Os glicosdeos cardiotnicos puderam ser
identificados em extrato de P. Guineense quando este
foi submetido ao reativo de Salkowski, devido ao
surgimento de colorao amarelo claro. Os glicosdios
cardiotnicos, so hoje armas obrigatrias no combate
de certas doenas do corao [18].
A colorao marrom revela a presena de
triterpenos na reao de Sakowski que identifica
triterpenos e/ou esterides. Sua utilizao
amplamente difundida, sendo usado na medicina
popular como analgsico cicatrizante e expectorante,
na indstria de verniz, na calafetagem de embarcaes
e na fabricao de incenso [19].
Os resultados das anlises histoqumicas
encontram-se na tabela 2.
O resultado do teste para lipdios positivo, para a
cutcula que se espessa na borda da folha, bem como
no contedo das cavidades secretoras, na regio da
nervura central. Plantas da famlia Myrtaceae possuem
numerosos canais oleferos, em toda a extenso do
mesofilo [20].

O teste com lugol para amido apresenta reao negativa.


O reagente floroglucinol demonstra a presena de
lignina na bainha do feixe vascular e no xilema, tanto da
nervura central como nas nervuras do limbo. As ligninas
enquadram-se entre as substncias naturais mais
abundantes da terra, ocupando cerca de 30% dos carbonos
da biosfera [21].
A reao com cloreto frrico para fenlicos positiva.
Nas clulas da epiderme, na bainha do feixe vascular, nos
tricomas tectores, no parnquima palidico e nas cavidades
secretoras. Neste teste, simplificadamente, para deteco de
fenis simples, os orto-dihidroxifenis complexam com o on
ferro, originando precipitados intensamente corados [22] . Os

taninos foram identificados atravs de reao com vanilina


clordrica, apresentando colorao avermelhada bastante
caracterstica, na epiderme e nos tricomas.
Pode-se observar a presena de alcalides na bainha do
feixe vascular, na epiderme e no parnquima palidico
atravs dos testes de Wagner e Ellram.
Na espcie Psidium guayava foram identificados
compostos qumicos da classe dos taninos e dos alcalides,
dentre outros [23].

Concluso
Os testes fitoqumicos e histoqumicos possibilitaram a
confirmao da presena de compostos secundrios.

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Tabela 1. Resultados das anlises fitoqumicas da folha de P. guineense. Presena (+) e ausncia (-) do constituinte qumico.
Grupo Qumico

Folha

Reativo

Taninos

Flavonides

Alcalides

Cloreto frrico

Soluo de acetato de cobre

Acetato de chumbo e cido actico glacial

Shinoda

Hidrxido de sdio

Cloreto Cloreto de Alumnio

Bourchardat

Bertrand

Mayer

Dragendorff

Saponinas
Catequinas

Saponina espumdica

Vanilina e cido clordrico

Depsdeos e depsidonas

Cloreto frrico

Antraquinonas

Borntrager

Glicosdeos Cardiotnicos

Salkowski

Triterpenos
Esterides

Salkowski

e/ou

Tabela 2. Resultados das anlises histoqumicas da folha P. guineense. O sinal (+) indica presena e (-) ausncia do constituinte
qumico.
Grupo
Qumico
Lipdios

Reativo
Sudan-IV

Amido
Lignina

Lugol
Floroglucinol

Colorao
vermelho
verde
rosa

Resultado

Epiderme

+
+

+
-

Parnquima

Feixes
Vasculares
-

Tricomas

Cavidades
secretoras
+

Fenlicos
Taninos
Alcalides

Cloreto frrico
Vanilina
clordrica
Ellram
Wagner

negro
vermelho

+
+

+
+

+
-

+
-

+
+

laranja
Castanho
avermelhado

+
+

+
+

+
-

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