CENTRO UNIVERSITRIO DO NORTE

Laureate International Universities

CURSO DE FARMCIA

I RELATRIO DE AULA PRTICA:

MICROSCOPIA DE BACTRIAS

MANAUS
2014

CENTRO UNIVERSITRIO DO NORTE

Laureate International Universities
CURSO DE FARMCIA

GLEIDE MARTINS
RODRIGO QUEIROZ
FAN08S1

I RELATRIO DE AULA PRTICA:

MICROSCOPIA DE BACTRIAS

Relatrio apresentado ao Centro Universitrio do

Norte como instrumento parcial de avaliao da
disciplina de Microbiologia Clnica ministrado
pelo Prof. Francisco Geraldo Mello da Rocha C.
Neto.

MANAUS
2014

SUMRIO

1. INTRODUO ................................................................................................................................. 4
2. MICROSCPICO PTICO ............................................................................................................ 5
2.1 Componentes mecnicos ............................................................................................................. 6
2.2 Componentes pticos................................................................................................................... 6
3. MORFOLOGIA BACTERIANA .................................................................................................... 7
4. OBJETIVO GERAL ......................................................................................................................... 7
5. METODOLOGIA ............................................................................................................................. 7
5.1 Materiais ...................................................................................................................................... 7
5.2 Procedimento ............................................................................................................................... 7
6. RESULTADOS .................................................................................................................................. 8
7. CONSIDERAES FINAIS .............................................................. Error! Bookmark not defined.
8. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS ............................................... Error! Bookmark not defined.

1. INTRODUO
Os microrganismos tm grande importncia e impacto na nossa vida, pois esto
relacionados a alteraes nos alimentos, na agricultura, produo de substncias e doenas
(FRANCO; LANDGRAF, 2005). Os microrganismos envolvem um vasto e diverso grupo de
organismos unicelulares de dimenses reduzidas, que podem ser encontrados como clulas
isoladas ou agrupados em diferentes arranjos (TRABULSI, 2004).
O estudo desses organismos teve incio com os experimentos de Robert Hooke e
Antony Van Leeuwenhoek, que desenvolveram microscpios que possibilitaram as primeiras
observaes de bactrias e outros microrganismos, alm de diversos espcimes biolgicos
(TRABULSI, 2004).
Bactrias so microrganismos que em geral, esto associada as doenas de origem
alimentar (FRANCO; LANDGRAF, 2005). As bactrias so extremamente variveis quanto
ao tamanho, formas e arranjos que apresentam, mas de maneira geral, as bactrias podem ser
agrupadas em trs tipos morfolgicos gerais: cocos, bacilos e espiralados (PELCZAR; REID;
CHAN, 1980).
As tcnicas microscpicas por serem eficientes e rpidas, tm emprego garantido em
laboratrios de microbiologia para identificao de microrganismos atravs da observao da
forma, entretanto necessria uma tcnica de colorao das estruturas, sendo principalmente
utilizada a Colorao de Gram.
A colorao de Gram o mtodo de colorao diferencial mais utilizado em exames
diretos ao microscpio de amostras clnicas e de colnias bacterianas devido ao seu largo
espectro de colorao (TRABULSI, 2004). Pela colorao de Gram, dividem-se as bactrias
em dois grandes grupos, Gram-positivas aquelas que se coram de roxo e Gram-negativas que
ficam de colorao vermelha (TRABULSI, 2004).
Portanto, conhecer as prticas de observao microscpica de bactrias de grande
importncia na Microbiologia, pois, por meio visualizao de vrias caractersticas permitem
a diferenciao dos diversos grupos de microrganismos de importncia.

2. MICROSCPICO PTICO
O microscpio um aparelho ptico utilizado para a observao e estudo de objetos de
pequenas dimenses (FERREIRA, 2001). Entre esses objetos temos as clulas de organismos
eucariotos, as bactrias, os ovos de parasitas e muitas estruturas (DESSEN; OYAKAWA,
2011).
Um microscpio ptico (MO) moderno possui uma srie de lentes e utiliza a luz
visvel como fonte de iluminao. Essa srie de lentes forma uma imagem claramente focada,
que muitas vezes maior que a amostra em si. A ampliao ocorre porque os raios de luz de
um iluminador, fonte de luz, passam atravs de um condensador, que possui lentes que
direcionam os raios de luz atravs da amostra. A seguir, os raios de luz passam para as lentes
objetivas e por fim a imagem da amostra e novamente ampliada pela lente ocular
(TORTORA; FUNKE; CASE, 2012).

Figura 1. Esquema dos componentes principais de microscpio ptico. Fonte: Tortora, Funke e Case (2012).

A maior parte dos microscpios utilizados em microbiologia possui lentes objetivas de

10 (baixo alcance), 40 (alto alcance) e 100 (imerso em leo) (TORTORA; FUNKE;
CASE, 2012).
Importante que para alcanar uma alta resoluo na lente objetiva de 100x necessrio
utilizar o leo de imerso que apresenta o mesmo ndice de refrao que o vidro assim o feixe
de luz no to desviado para fora da objetiva (figura e). Se o leo no for usado com uma
lente objetiva de imerso, a imagem torna-se borrada, com baixa resoluo (TORTORA;
FUNKE; CASE, 2012).

Figura 2. Refrao no microscpio composto, utilizando uma lente objetiva em leo de imerso.

Como foi observado h vrios componentes que constituem o microscpio ptico

sendo divididos em componentes mecnicos e pticos.
2.1 Componentes mecnicos
a) p ou base: apoio a todos os componentes do microscpio;
b)

brao: est fixo base, serve de suporte s lentes e platina;

c)

platina: base de suporte e fixao da preparao, tem uma abertura central, na qual
colocada a amostra e tambm onde se passar a luz. A platina pode ser deslocada em
alguns microscpios;

d)

pinas: ajudam fixao da amostra;

e)

revlver: suporte das lentes objetivas, permite trocar a lente objetiva;

f)

tubo ou canho: suporta a ocular na extremidade superior;

g)

parafuso macromtrico: permite movimentos verticais da grande amplitude da

platina;

h)

parafuso micromtrico: permite movimentos verticais lentos de pequena amplitude

da platina para focagem precisa da imagem.

2.2 Componentes pticos

a) condensador: sistema de duas ou mais lentes convergentes que orientam e distribuem
a luz emitida de forma igual pelo campo de viso do microscpio;
b)

diafragma: regula a quantidade de luz que atinge o campo de viso do microscpio,

atravs de uma abertura que abre ou fecha em dimetro;

c)

iluminador: a fonte luminosa;

d)

lente ocular: cilindro com duas ou mais lentes que permitem ampliar a imagem real
fornecida pela objetiva, formando uma imagem virtual mais prxima dos olhos do
observador. A imagem criada pela ocular ampliada, direita e virtual;

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e)

lente objetiva conjunto de lentes fixas no revolver, a lente que fica mais prxima
do objeto a observar, projetando uma imagem real, ampliada e invertida do mesmo. A
lente pode ser objetivas secas ou objetivas de imerso.

3. MORFOLOGIA BACTERIANA

As bactrias podem ser classificas de trs maneiras pela cor, forma e arranjo. A cor
depende de tcnicas de colorao sendo um mtodo muito utilizado a colorao de Gram que
consiste na combinao de corantes que permite dividir as bactrias em dois grandes grupos
as Gram positivas e Gram negativas (BROOKS et al., 2012). As formas podem ser agrupadas
em cocos, bacilos e espiralados e estas formas podem estar disposta em diversos arranjos
(PELCZAR; REID; CHAN, 1980).
Os cocos so as clulas arredondadas, que podem estar dispostas em diplococos,
tetracocos, sarcinas (cubos contendo 8 clulas), estreptococos (cocos em cadeia) e
estafilococos (cocos formando massas irregulares). Os bacilos tm forma de bastonetes,
exemplos mais comum so Bacillus anthracis, Salmonella sp. e Escherichia coli. Espiralados
podem ser os espiroquetas (espiral flexvel) e espirilos (espiral incompleta e rgida),
geralmente de difcil observao (PELCZAR; REID; CHAN, 1980).

4. OBJETIVO GERAL

Observar as caractersticas microscpicas de bactrias.

5. METODOLOGIA
5.1 Materiais:
3 Lminas;

Laminrio Padro de Microbiologia;

Microscpio ptico;

leo de imerso.

5.2 Procedimento:
Escolher trs lminas padres;

Colocar no microscpio e observar nas lentes objetivas de 4x, 10x e 40x;

Aplicar uma gota de leo de imerso na lmina;

Observar a lmina no microscpio na lente objetiva de 100x;

Anotar todas as observaes do campo como a colorao, as formas e estruturas dos

microrganismos.

6. RESULTADOS

Aps observao das lminas padres foram encontrados variedades de formas

bacterianas e bactrias Gram positivas. A lmina 01 (Figura 3) foi observado sob a lente
objetivas de 40x e 100x muitos bacilos isolados de colorao roxa (Gram-positivo). Esses
bacilos tem forma caracterstica de bastonetes exemplo Bacillus anthracis e B. cereus que
tambm so Gram positivos, mas, para diagnstico deste h necessidade de testes mais
especficos (PELCZAR; REID; CHAN, 1980).

Figura 3. Lmina 01 observada na lente objetiva de 40x e 100x, presena de bacilos Gram positivos isolados.

Na lmina 02 (Figura 4) foi observado a sarcina que uma forma que oito cocos so
agrupados em cubos. Segundo Madigan et

al. (2010) o gnero Sarcina so bacterias

anaerbico obrigatrias e extremamente cido tolerante, e estas bactrias podem ser isoladas
do solo, lama, fezes e do contedo estomacal, uma dela a Sarcina venticuli.

Figura 4. Lmina 02 e a microscopia ptica revelando presena de cocos Gram positivo em arranjo de sarcina
(cubos contendo 8 cocos).

A lmina 03 (Figura 5) foram visualizadas bacilos Gram positivos em cadeia

(estreptobacilos). Os bacilos ao contrrio dos cocos, apresentam pouco arranjos que podem
ser diplobacilos ou estreptobacilos (PELCZAR; REID; CHAN, 1980), como foi observado
neste trabalho.

Figura 5. Lmina 03 e visualizao de bacilos Gram positivos em cadeia (estreptobacilos).

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7. CONSIDERAES FINAIS
A prtica de microscopia realizada neste relatrio permitiu conhecimento a respeito da
morfologia das bactrias presentes nas lminas analisadas, tal experimento auxilia na prtica
da identificao de microrganismos dentro do contexto da disciplina de Microbiologia
Clnica.

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8. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

BROOKS, G. F.; et al. Microbiologia Mdica. 25. ed. Rio de Janeiro: Mcgraw-hill
Interamericana. 2012. 830 p.
DESSEN, E. M. B.; OYAKAWA, J. Microscopia. Centro de Estudos do Genoma Humano,
2011.
FERREIRA, A. B. H. Miniaurlio Sculo XXVI: O minidicionrio da lngua portuguesa. 4.
ed. rev. Rio de Janeiro: Nova Fronteira, 2001. 790p.
FRANCO, B. D. G. M.; LANDGRAF, M. Microbiologia dos Alimentos. Atheneu Rio, 2005.
MADIGAN, M.T.; et al. Microbiologia de Brock. 12. ed. Porto Alegre: Artmed, 2010. 1128
pg.
PELCZAR, M.; REID, R.; CHAN, E.C.S. Microbiologia. 2. Ed. So Paulo: McGraw-Hill,
1980.
TORTORA, G. J.; FUNKE, B. R.; CASE, C. L. Microbiologia. 10.Ed. Porto Alegre: Artmed,
2012. 934 p.
TRABULSI, L. R. Microbiologia. 4. ed. So Paulo: Atheneu, 2004.