Menolasina, S., Olarte, M, Daz, L.

Construccin y
caracterizacin de un sensor electroqumico de
inters mdico y farmacolgico.

REVISTA DE

LA

FACULTAD DE FARMACIA Vol. 45 (2) 2003

Construccin y caracterizacin de un sensor

electroqumico de inters mdico y farmacolgico
S. MENOLASINA, M. OLARTE, S. BARRETO, L. DAZ
Laboratorio de Anlisis Instrumental, Departamento de Anlisis y Control
Facultad de Farmacia, Universidad de los Andes, Mrida, Venezuela
RESUMEN

INTRODUCCIN

La necesidad en la deteccin de elementos trazas

en los fluidos biolgicos y en determinados
medicamentos ha incrementado la demanda de tcnicas
cada vez ms sensibles y selectivas para tal fin. En la
actualidad, se requiere de tcnicas de anlisis que
adems de ser sensibles y selectivas abaraten el costo
del anlisis clnico. La tcnica electroqumica de
Voltametra de Redisolucin Andica (VRA) ha
mostrado ser una tcnica bastante adecuada para este
propsito, si se utilizan sensores electroqumicos
especficos. Iones metlicos como Pb 2+, Cu 2+ y Zn2+
presentes en muestras de orina y semen previamente
pretratadas, as como, iones Pb 2+ y Cu 2+ e n
preparaciones farmacuticas fueron detectados
simultneamente utilizando la tcnica VRA con un
sensor electroqumico construido de carbn vtreo y
modificado electroqumicamente con una pelcula
delgada de mercurio en el laboratorio.

La tcnica de Voltametra de Redisolucin Andica

(VRA) es una de las tcnicas electroqumicas que
permite un alto grado de sensibilidad en la deteccin
de elementos trazas en fluidos biolgicos y
preparaciones farmacuticas. El uso de VRA permite
determinar concentraciones muy bajas, del orden de
partes por billn (ppb) [1,2]. Esta tcnica se basa
prcticamente en dos etapas, una de preconcentracin
del material que se desea analizar sobre la superficie
del electrodo de trabajo y otra de redisolucin del
material preconcentrado por la aplicacin de un barrido
inverso de potencial. El grado de sensibilidad que se
obtiene por VRA, depende de la seal de excitacin
que se le aplique al electrodo de trabajo y del tipo de
electrodo que se utilice como electrodo de trabajo [3,4].
La alta sensibilidad que se observa cuando se emplea
la VRA es atribuida a la etapa de preconcentracin
(etapa de electrodeposicin a potencial constante) que
se realiza en la superficie del electrodo de trabajo. Es
por ello que el tipo de electrodo de trabajo que se
utilice con la tcnica VRA influir en la sensibilidad
del anlisis.
Para que la etapa de preconcentracin sea efectiva,
el material depositado debe adherirse muy bien a la
superficie del electrodo. El electrodo de trabajo ideal a
ser utilizado en la deteccin de trazas de elementos en
fluidos biolgicos y preparados farmacuticos debe
ser uno que tenga una superficie reproducible y una
corriente residual baja. El electrodo de goteo de
mercurio es considerado el ms apropiado para la etapa
de reduccin de iones metlicos, como etapa de
preconcentracin, por ofrecer una mejor ventana de
potencial para trabajar en medio acuoso. Sin embargo
de acuerdo a una gran variedad de estudios realizados
con diferentes tipos de electrodos [5-8], los electrodos
de oro, platino, carbn vtreo y de pasta de carbn han
demostrado poseer dichas cualidades y han sido
usados exitosamente. A pesar de su buena
sensibilidad, estos electrodos pueden ser utilizados

PALABRAS CLAVE
Sensor electroqumico, Voltametra de Redisolucin
Andica.
ABSTRACT
The need for monitoring trace elements in biological
materials has led to an increasing demand for suitably
sensitive and selective analytical techniques. For this
purpose analytical techniques that require relatively
inexpensive instrumentation are needed. The anodic
stripping voltammetric technique has shown to be
suitable when specific electrochemical sensors are
used. Metallic ions such as Pb 2+, Cu 2+ and Zn2+ present
in urine and semen samples, as well as Pb 2+and Cu 2+
ions from pharmaceutical preparations were detected
simultaneously by anodic stripping voltammetry (ASV)
and using a glassy carbon electrode built and modified
with a fine mercury film as electrochemical sensor.

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Menolasina, S., Olarte, M, Daz, L. Construccin y

caracterizacin de un sensor electroqumico de
inters mdico y farmacolgico.

REVISTA DE

exitosamente para el anlisis de una sola especie

electroactiva. Cuando estos electrodos se utilizan para
el anlisis simultneo de varias especies electroactivas
presentes en una misma muestra es imposible obtener
la homogeneidad requerida de los materiales
depositados, antes de llevarse acabo la etapa de
redisolucin de la superficie del electrodo. Para
solventar este problema se suele utilizar electrodos
slidos modificados con una delgada pelcula de
mercurio.
En los ltimos aos, muchos esfuerzos se han
dedicado a la construccin de sensores
electroqumicos utilizando como material de base el
carbn por ser este un material muy verstil, barato, de
estructura superficial reproducible, amplio intervalo de
potencial nodico de trabajo, de baja resistencia
elctrica y baja corriente residual, as como, por su
diversa morfologa, lo que lo hace til para diferentes
aplicaciones electroqumicas, como por ejemplo: fibra
de carbn [5], carbn vtreo [9], pasta de grafito [1012], compositos [13] y pelculas de carbn [14].
El carbn vtreo ha mostrado ser uno de los
materiales ms utilizados en la preparacin de
electrodos modificados con pelculas delgadas de
mercurio en estudios por VRA [9], debido a que este
tipo de sensor electroqumico exhibe un alto grado de
sensibilidad ya que solamente una cantidad
extremadamente pequea de mercurio es incorporada
dentro de la pelcula que se adsorbe sobre la superficie
de carbn vtreo, resultando en la formacin de una
amalgama muy concentrada durante la etapa de
deposicin. Este comportamiento fisicoqumico
permite su uso en la deteccin simultnea de varias
especies electroactivas presentes en una misma
muestra. Los picos de corriente que son obtenidos en
los voltamogramas por VRA utilizando electrodos de
carbn vtreo modificados con delgadas pelculas de
mercurio tienden a ser agudos y bien definidos. En los
fluidos biolgicos existe una variedad de sustancias
esenciales y txicas cuyos niveles de concentracin
son de gran inters para el mdico en el diagnstico y
tratamientos de enfermedades. Entre estas sustancias
se encuentran iones tales como Pb 2+ y Cd 2+ cuyos
niveles de concentracin pueden ser txicos en el
organismo afectando la qumica de ciertos fluidos
fisiolgicos [15] y otros como Cu 2+ y Zn2+ cuyos niveles
de concentracin pueden ser esenciales en ciertos
procesos metablicos, entre ellos el metabolismo seo
[16]. Se considera que el Cobre y el Zinc estn
involucrados en la produccin y estabilizacin de las
molculas de colgeno, el cual es la protena que
mayoritariamente constituye la estructura sea, as
como de los cartlagos, piel y tendones. Por otro lado
se ha encontrado altas concentraciones de Zinc en el

LA

FACULTAD DE FARMACIA Vol. 45 (2) 2003

sistema reproductor masculino, observndose que este

metal desempea un papel importante en la fisiologa
reproductiva del hombre, lo que ha conducido a que
muchos investigadores [17,18] hayan sugerido la
existencia de una relacin entre los niveles de Zinc en
el semen humano y la infertilidad masculina.
Se conoce que la deficiencia de cierto tipo de
vitaminas en el organismo aumenta la absorcin en el
hueso de ciertos metales pesados como el Plomo, el
cual en concentraciones elevadas es perjudicial para
la salud. Todos estos iones son oxidados en un
intervalo de potencial donde el medio electroltico
(sangre, orina o semen) no es descompuesto. Adems,
tienen la habilidad de formar complejos insolubles con
mercurio.
La determinacin simultnea de la concentracin
de estos metales, Zn2+, Cu 2+ y Pb 2+ presentes en fluidos
biolgicos como la sangre y la orina es de suma
importancia en el estudio del proceso de remodelacin
sea, cuyas alteraciones pueden conllevar a
enfermedades tales como la Osteoporosis.
La determinacin de Pb 2+ en suplementos
dietticos ricos en calcio permitira conocer si la
poblacin que consume estos preparados
farmacuticos esta en riesgo de contaminacin por
plomo.
La determinacin de Zn2+ en plasma seminal en
pacientes con y sin infertilidad pudiera aportar ms
informacin acerca del papel que juega la
concentracin de este metal en la fisiologa
reproductiva del hombre.
En el presente trabajo se fabric y caracteriz
electroqumicamente un electrodo de carbn vtreo y
se modific electroqumicamente con mercurio para ser
utilizado como un sensor electroqumico de iones Zn2+,
Cu 2+ y Pb 2+ en fluidos biolgicos y preparados
farmacuticos con la finalidad de investigar si dicho
sensor electroqumico responde a la presencia de
elementos trazas.
MATERIALES Y MTODOS
Todo el material de vidrio fue lavado inicialmente
con detergente y abundante agua desionizada,
posteriormente fueron dejados en remojo con HNO3
concentrado durante 24 horas y finalmente vueltos a
lavar con abundante agua desionizada (18 M).
Reactivos y muestras
Todos los reactivos utilizados fueron de marca
comercial RDH, de grado analtico y sin ningn
tratamiento adicional de purificacin. Soluciones stock
de iones metlicos de Zn 2+ , Cu 2+ y Pb 2+ fueron
preparadas a partir de sus sales de nitrato, las cuales

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caracterizacin de un sensor electroqumico de
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REVISTA DE

LA

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fueron secadas a 100oC por dos horas y enfriadas antes

de su utilizacin en la preparacin de las mismas. Estas
soluciones fueron preparadas y estabilizadas con
pequeas cantidades de HNO3 14M y diluidas con
agua desionizada hasta un volumen de 50 ml
La recoleccin de las muestras de semen se realiz
siguiendo una serie de normas y pasos necesarios para
una buena toma de la muestra. El plasma seminal se
separo de los espermatozoides y de los otros elementos
que estn presentes en el lquido espermtico.

espesor y homogeneidad.
Antes de comenzar a realizar cualquier experimento,
se hizo pasar gas Nitrgeno a travs de la solucin
electroltica durante 10 min con la finalidad de mantener
a la solucin libre de oxigeno, ya que la presencia de
ste puede afectar la calidad de la pelcula de mercurio
electrodepositada por la formacin de xidos,
hacindola menos sensible e inestable en la etapa de
preconcentracin de los iones metlicos durante el
proceso de reduccin electroqumica.

Electrodos
El sensor electroqumico se construy utilizando
un disco de carbn vtreo, el cual fue insertado en el
extremo de un tubo de vidrio, de tal manera de quedar
bien ajustado. El disco de carbn vtreo fue luego pulido
hasta superficie espejo utilizando una suspensin de
polvo de almina 0,3 y 0,005 mm (LECO
CORPORATION) en agua desionizada.
Por el extremo opuesto del tubo donde se haba
insertado el disco de carbn vtreo se adicion
mercurio lquido y se le introdujo un alambre niquelado
(LEYBOLD-HERAESUS, 0,2 mm2 , 0,5f), de
aproximadamente 30 cm de longitud, sumergindolo
dentro del depsito de mercurio de tal manera que
hiciera contacto con este. La funcin del alambre de
nquel es la de conducir la corriente originada en la
celda electroqumica hacia el potenciostato. Una vez
asegurado el contacto elctrico entre el alambre de
nquel y el deposito de mercurio se procedi a sellar el
extremo por donde se introdujo el alambre de nquel
con un pegamento plstico (Epoxi 5-Minutos
DEVCON), dejando secar dicho pegamento por 24
horas.
La caracterizacin del sensor electroqumico fue
hecha por Voltametra Cclica utilizando una celda de
vidrio de un compartimento y tres electrodos, el sensor
electroqumico, un electrodo de calomel (electrodo de
referencia) y un alambre de platino (electrodo
secundario o contraelectrodo). La celda electroqumica
fue acoplada al analizador electroqumicoAUTOLAB.
La electrodeposicin de la pelcula de mercurio
sobre la superficie del disco de carbn vtreo fue
llevada a cabo in situ en la celda electroqumica, al
mismo tiempo que se preconcentraba el Zinc, plomo y
cobre por reduccin de sus iones presentes en la
solucin de la muestra previamente tratada. Se utiliz
un electrodo de calomel saturado como electrodo de
referencia (ECS).
Una serie de experimentos fue realizada variando
el potencial de electrodeposicin, el tiempo de
electrodeposicin, el pH de la solucin, con la finalidad
de obtener las condiciones ptimas para la formacin
de una pelcula estable y reproducible en cuanto a

Discusin de Resultados
Las figuras 1 y 2 muestran las familias de
voltamogramas obtenidos realizando barridos de
potencial ctodico y nodico respectivamente en un
medio electrolito determinado, utilizando el sensor
electroqumico que se construy en el laboratorio.
Estos voltamogramas representan la respuesta
electroqumica del sensor y permiten la caracterizacin
del mismo. El comportamiento electroqumico
observado y la forma de dichos voltamogramas al variar
el potencial tanto en la direccin ctodica como en la
nodica es caracterstico de la respuesta electroqumica
que se debe observar al utilizar un electrodo de disco
de carbn vtreo que esta bien construido y presenta
buena conductividad elctrica.
Las figuras 3 y 4 muestran los voltagramas
obtenidos por la tcnica de VRA de la oxidacin
electroqumica de varios metales preconcentrados por
reduccin en la superficie de un electrodo de carbn
de construccin propia, modificado previamente con
una pelcula de mercurio al aplicar -1,25V durante 180
s. En ellos se aprecia la aparicin de varios picos en el
intervalo de potencial estudiado (-1,2 a 0V vs. SCE).

-5

5,0x10

0,0

-5

-5,0x10

i/A

4
-4

-1,0x10

5
-4

-1,5x10

-4

0 a -0.6v

0 a -0.7v

0 a -0.8v

0 a -0.9v

0 a -1.0v

0 a -

-2,0x10

-4

-2,5x10

-1,2

-1,0

-0,8 -0,6 -0,4

E vs. ECS/V

-0,2

0,0

Figuras 1. Respuesta del electrodo de carbn vtreo durante barridos

Figura 1. Respuesta del electrodo de carbn vtreo durante

barridos voltamtricos en la direccin catdica a diferentes
ventanas de potencial en una solucin 0,1 M en HNO3 a 100
mVs-1.

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inters mdico y farmacolgico.

-4

2,5x10

1
2
3
4
5
6
7

-4

1,5x10

-4

-4

i/A

1,0x10

-0.4 a 0v
-0.4 a
-0.4 a
0.4v
-0.4 a
-0.4 a
-0.4 a
-0.4 a

-5,0x10
4

0,0

-5

5,0x10

REVISTA DE

-1,0x10-0,4

-0,2

0,0

0,2
0,4
0,6
E vs. ECS/V

0,8

1,0

1,2

Figura 2. Respuesta del electrodo de carbn vtreo durante

barridos voltamtricos en la direccin andica a diferentes
ventanas de potencial en una solucin 0,1 M en HNO3 a 100
mVs-1.

Figura 3. Voltamogramas obtenidos utilizando la tcnica

VRA: 1. Solucin blanco HCl 5x10-3 mol dm-3; 2. Muestra de
orina (5 ml) pretratada en medio cido.

Figura 4. Representacin simultnea de varios

voltamogramas obtenidos utilizando la tcnica VRA despus
de adicionar a una muestra de orina pretratada en medio
cido soluciones patrones de Zn2+ , Pb2+ y Cu 2+ .

LA

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Estos picos son los picos de corriente de despojo

nodico de los metales depositados previamente y que
estn siendo oxidados a sus formas M 2+.
La curva 1 de la figura 3, representa el
comportamiento de una solucin electroltica utilizada
como blanco, la cual consiste de la misma solucin que
se utiliza para disolver el residuo que se obtiene una vez
digerida la muestra de orina en HNO3 conc. hasta
sequedad completa. En esta curva se ve claramente el
pico de redisolucin andica del Zn a 1,1V, el pico de
redisolucin andica del Pb a 0,5V, ms no el pico
correspondiente a la redisolucin andica del Cu el cual
debe ser observado en 0,3V vs. SCE. La curva 2 de la
figura 3 representa el comportamiento electroqumico
de una muestra de orina digerida en medio cido, en ella
no se observa claramente el pico de redisolucin andica
del Zn a -1,1V observado en la curva 1, mientras que s
se observa claramente los picos de redisolucin andica
de una especie no identificada todava a -0,8V, la del Pb
a - 0,5V y la del Cu a - 0,3V. En esta curva se observa
adems unas pequeas ondas no muy bien definidas
entre - 0,3 y -0,2V vs. SC. Al analizar diversas muestras
de orina se obtuvo el mismo comportamiento. En la
figura 4 se muestra una familia de curvas obtenidas por
adiciones sucesivas de una solucin patrn de Zn2+,
Pb 2+ y el Cu 2+ a una muestra de orina previamente
pretratada en medio cido. Se observ que el pico de
redisolucin andica del Cu 2+ comienza a desplazarse
hacia potenciales ms positivos a medida que la
concentracin de Zn 2+ y Cu 2+ es aumentada. Este
comportamiento, junto con el hecho de que el pico de
redisolucin andica del Zn2+ a 1,1V no se observa en
presencia de iones Cu 2+ tiene su explicacin si se
considera la formacin de un compuesto intermetlico
entre el Cu y el Zn en la pelcula de mercurio, el cual no
tiene una composicin definida, y est siendo redisuelto
de la pelcula de mercurio entre -0,3 y -0,1V.
En la figura 5 se muestra la familia de
voltamogramas obtenidos por VRA al adicionar
sucesivamente una solucin patrn de Zn +2 a una
muestra de lquido seminal previamente pretratada en
medio cido. Se observ que el pico de corriente de
redisolucin andica a 1,7V vs. ECS correspondiente
a la oxidacin de Zn a Zn2+ est bien definido y que a
medida que se aade una cantidad determinada de
solucin patrn de Zn2+, la altura del pico de corriente
de redisolucin andica se incrementa, siendo
proporcional al aumento en concentracin de Zn+2 en
la celda electroqumica debido a la adicin sucesiva de
una solucin patrn en este ion. Este comportamiento
muestra que el sensor electroqumico construido en
nuestro laboratorio una vez modificado con una
delgada capa de mercurio bajo ciertas condiciones
experimentales es bastante sensible a cambios de

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caracterizacin de un sensor electroqumico de
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concentracin en iones Zn 2+ . La estabilidad y

definicin de este pico de corriente de redisolucin
andica del Zn a Zn2+, depende del pH en la celda
electroqumica, as como del potencial y tiempo de
electrodeposicin aplicado al electrodo de carbn
construido. Actualmente se estn realizando otros
trabajos para optimizar las condiciones de trabajo y de
esa manera estandarizar un mtodo electroanlitico
para la determinacin de iones Zn 2+ en muestras de
lquido seminal.
Muestra + 1,0 ppm de Zn2+
-5

8,0x10

Muestra de Semen
Blanco

-6

4,0x10

2,0x10-6
-1,0

-0,8

-0,6

-0,4

-0,2

2,5x10
6

l patrn
M +160
2+
Pb

i/A
-

2ppm

2,0x10
6

1,5x10
6

0,8

0,6E vs. ECS/V

0,4

0,2

0,
0

Figura 6. Familia de voltamogramas obtenidos por VRA de

la oxidacin de Pb a Pb 2+ en una muestra comercial de un
suplemento diettico rico en calcio (Oscal tab) previamente
tratada a la cual fue adicionada cantidades determinadas
de una solucin patrn de Pb 2+ , utilizando un electrodo de
carbn vtreo de construccin propia y modificado
electroqumicamente con una pelcula de mercurio.

Muestra + 0,2 ppm de Zn2+

-1,2

M + 80l patrn
2ppm
2+
Pb
2+
M +120l patrn Pb 2ppm

3,0x10

-1,0

-6

6,0x10

Solucin de
OSCAL (M)
2+
M + 40l patrn Pb 2ppm

Muestra + 0,4 ppm de Zn2+

i/A

blanco
2+

O xidacin Pb a Pb

Muestra + 0,6 ppm de Zn2+

-6

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1,0x10

Muestra + 0,8 ppm de Zn2+

1,0x10

LA

0,0

E vs. ECS/V

Figura 5. Familia de voltamogramas obtenida por VDA de la

oxidacin de Zn a Zn2+ en una muestra de lquido seminal a
la cual se aadieron cantidades determinadas de una solucin
patrn de Zn2+ , utilizando un electrodo de carbn vtreo de
construccin propia y modificado electroqumicamente con
una pelcula de mercurio.

La figura 6 muestra la familia de voltamogramas

obtenidos de la seal de oxidacin de Pb a Pb 2+ en una
solucin de un suplemento diettico rico en calcio
previamente tratado por combustin a 100 oC y
calcinacin a 750oC, al cual se le adicion cantidades
determinadas de una solucin patrn de Pb 2+. En esta
figura se observa nuevamente que bajo ciertas
condiciones experimentales, la respuesta del sensor
electroqumico utilizado es bastante buena a los
cambios en concentracin de iones Pb 2+ presentes en
la solucin que esta siendo investigada en la celda
electroqumica. Actualmente se estn realizando otras
investigaciones para optimizar las condiciones de
trabajo y de esa manera estandarizar un mtodo
electroanlitico para la determinacin de iones Pb 2+
en preparados farmacuticos y en fluidos biolgicos.

2. El uso de la tcnica de Voltametra de Pulso

Diferencial de Redisolucin andica, utilizando el
sensor electroqumico construido en el laboratorio
mostr ser bastante eficaz en la deteccin de trazas de
Pb 2+ presente en muestras de orina y suplementos
ricos en calcio.
3. La respuesta electroqumica de la oxidacin de
Zn y Cu en muestras de orina se ve afectada por la
formacin de un compuesto intermetlico de Cu-Zn en
la pelcula de mercurio cuando la concentracin de
estos iones es alta, lo cual no permite el uso de la
misma muestra para determinar simultneamente la
concentracin de estos metales.
4. El sensor electroqumico mostr una buena
respuesta electroqumica a la deteccin de Zn2+ e n
muestras de lquido seminal una vez conseguidas las
condiciones en las cuales la formacin del compuesto
intermetlico Zn-Cu es inestable.
5. El uso del sensor electroqumico construdo
junto con la tcnica de Voltametra de Pulso Diferencial
de Redisolucin andica permite identificar otros
metales trazas presentes en los fluidos biolgicos.
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

CONCLUSIONES
1. El sensor electroqumico construido,
caracterizado y modificado electroqumicamente en el
laboratorio present una alta sensibilidad y
especificidad en la deteccin electroqumica de
elementos trazas como Zn2+, Pb 2+ y el Cu 2+.

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