FUNDAMENTOS DE LOS AGARES

TSI Agar
Fundamento
En el medio de cultivo, el extracto de carne y la pluripeptona, aportan los nutrientes adecuados para el desarrollo
bacteriano. La lactosa, sacarosa y glucosa son los hidratos de carbono fermentables. El tiosulfato de sodio es el
sustrato necesario para la produccin de cido sulfhdrico, el sulfato de hierro y amonio, es la fuente de iones Fe3+ ,
los cuales se combinan con el cido sulfhdrico y producen sulfuro de hierro, de color negro. El rojo de fenol es el
indicador de pH, y el cloruro de sodio mantiene el balance osmtico.
Por fermentacin de azcares, se producen cidos, que se detectan por medio del indicador rojo de fenol,el cual vira
al color amarillo en medio cido. El tiosulfato de sodio se reduce a sulfuro de hidrgeno el que reacciona luego con
una sal de hierro proporcionando el tpico sulfuro de hierro de color negro
Resultados
1-Pico alcalino/fondo cido (pico rojo/fondo amarillo): el microorganismo solamente fermenta la glucosa.
2-Pico cido/fondo cido (pico amarillo/fondo amarillo): el microorganismo fermenta glucosa, lactosa y/o sacarosa.
3-Pico alcalino/fondo alcalino (pico rojo/fondo rojo): el microorganismo es no fermentador de azcares.
4-La presencia de burbujas, o ruptura del medio de cultivo, indica que el microorganismo produce gas.
5-El ennegrecimiento del medio indica que el microorganismo produce cido sulfhdrico.
Microorganismo

Pico/Fondo

Produccin de gas

E. coli ATCC 25922

K. pneumoniae ATCC
700603
P. mirabilis ATCC 43071
S. typhimurium ATCC 14028
S. enteritidis ATCC 13076
S. flexneri ATCC 12022
P. aeruginosa ATCC 27853

A/A
A/A

+
+

Produccin decido
sulfhdrico
-

K/A
K/A
K/A
K/A
K/K

+
+
-

+
+
+
-

A: cido
K: alcalino

Caractersticas del medio

Medio preparado: rojo

Lisina Hierro Agar.

Fundamento
En el medio de cultivo, la peptona y el extracto de levadura aportan los nutrientes para el desarrollo bacteriano. La
glucosa es el hidrato de carbono fermentable, y la lisina es el sustrato utilizado para detectar la presencia de las
enzimas decarboxilasa y deaminasa. El citrato de hierro y amonio, y el tiosulfato de sodio, son los indicadores de la
produccin de cido sulfhdrico. El purpura de bromocresol, es el indicador de pH, el cual es de color amarillo a pH
igual o menor a 5.2, y de color violeta a pH igual o mayor a 6.8.
Por decarboxilacin de la lisina, se produce la amina cadaverina, que alcaliniza el medio y esto produce el viraje del
indicador al color violeta. La decarboxilacin de la lisina, tiene lugar en medio cido, por lo que es necesario que la
glucosa sea previamente fermentada.
Los microorganismos que no producen lisina decarboxilasa, pero que son fermentadores de la glucosa, producen un
viraje de la totalidad del medio de cultivo al amarillo, pero a las 24 hs de incubacin se observa el pico de color violeta
debido al consumo de las peptonas, y el fondo amarillo.
La produccin de sulfuro de hidrgeno, se visualiza por el ennegrecimiento del medio debido a la formacin de
sulfuro de hierro.
Las cepas de los gneros Proteus, Providencia y algunas cepas de Morganella, desaminan la lisina, esto produce un
cido alfa-ceto-carbnico, el cual, con la sal de hierro y bajo la influencia del oxgeno forma un color rojizo en la
superficie del medio

Microorganismos
Proteus mirabilis ATCC 43071
Salmonella typhimurium ATCC 14028
Salmonella enteritidis ATCC 13076
Providencia spp.
Citrobacter freundii
Morganella spp.*
Edwarsiella spp.
Klebsiella pneumoniae ATCC 700603
Escherichia coli ATCC 25922

Color en el pico de flauta

Rojo
Prpura
Prpura
Rojo
Prpura
Rojo
Prpura
Prpura
Prpura

Color en la base
del tubo
Amarillo
Prpura
Prpura
Amarillo
Amarillo
Amarillo
Prpura
Prpura
Prpura

Ennegrecimiento del
medio
Negativo
Positivo
Positivo
Negativo
Positivo
Negativo
Positivo
Negativo
Negativo

Caractersticas del medio

Medio preparado: color violeta

Salmonella Shigella Agar.

Fundamento
Es un medio de cultivo selectivo y diferencial.
La selectividad, esta dada por la sales biliares y el verde brillante, que inhiben el desarrollo de bacterias Gram
positivas, de la mayora de los coliformes y el desarrollo invasor del Proteus spp.
Es diferencial debido a la fermentacin de la lactosa, y a la formacin de cido sulfhdrico a partir del tiosulfato de
sodio.
Los pocos microorganismos fermentadores de lactosa capaces de desarrollar, acidifican el medio haciendo virar al
rojo el indicador de pH, obtenindose colonias rosadas o rojas sobre un fondo rojizo.
Salmonella, Shigella y otros microorganismos no fermentadores de lactosa, crecen bien en el medio de cultivo, y
producen colonias transparentes.
La produccin de cido sulfhdrico se evidencia como colonias con centro negro debido a la formacin de sulfuro de
hierro.
Para aumentar la selectividad, se recomienda incubar previamente la muestra en Selenito caldo (B02-120-05)
Microorganismos
Salmonella typhimurium ATCC 14028
Shigella flexneri
Shigella sonnei
Proteus mirabilis ATCC 43071
Escherichia coli ATCC 25922
Klebsiella pneumoniae ATCC 700603
Enterococcus faecalis ATCC 29212

Colonias
Transparentes, centro negro
Incoloras
Incoloras
Transparentes, centro negro
Rosadas a rojas
Rosadas cremosas y mucosas
Incoloras, de muy escaso crecimiento

aractersticas del medio

Medio preparado: rojo naranja.

Mac Conkey Agar.

Fundamento
En el medio de cultivo, las peptonas, aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo bacteriano, la lactosa es el
hidrato de carbono fermentable, y la mezcla de sales biliares y el cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben
el desarrollo de gran parte de la flora Gram positiva.
Por fermentacin de la lactosa, disminuye el pH alrededor de la colonia. Esto produce un viraje del color del indicador
de pH (rojo neutro), la absorcin en las colonias, y la precipitacin de las sales biliares.
Los microorganismos no fermentadores de lactosa producen colonias incoloras.
Resultados
Microorganismos
Escherichia coli ATCC 25922
Klebsiella pneumoniae ATCC 700603
Salmonella typhimurium ATCC 14028

Colonias
Rojas con halo turbio
Rosadas mucosas
Incoloras, transparentes

Shigella flexneri ATCC 12022

Proteus mirabilis ATCC 43071
Enterococcus faecalis ATCC 29212

Incoloras, transparentes
Incoloras, transparentes
Diminutas, incoloras, opacas

Caractersticas del medio

Medio preparado: rojo prpura

Sangre Agar Base

Fundamento
La infusin de msculo de corazn y la peptona, otorgan al medio un alto valor nutritivo, que permite el crecimiento
de una gran variedad de microorganismos, an de aquellos nutricionalmente exigentes. El cloruro de sodio mantiene
el balance osmtico.
El agregado de sangre al medio de cultivo, en concentracin final de 5-10 %, aporta nutrientes para el crecimiento
bacteriano, y permite detectar hemlisis
Resultados
Microorganismos
E. coli ATCC 25922
S. aureus ATCC 25923
S. pyogenes ATCC 19615
S. pneumoniae ATCC 6305
S. pneumoniae ATCC 49619

Crecimiento
Abundante
Abundante
Abundante
Abundante
Abundante

Hemlisis
-Beta
Beta
Alfa
Alfa

Caractersticas del medio

Medio preparado: mbar.
Medio preparado con 5% de sangre de carnero: rojo cereza.

Nutritivo Agar
Fundamento
Por las caractersticas de sus componentes es un medio usado para el cultivo de microorganismos poco exigentes en
sus requerimientos nutricionales. No contiene inhibidores del desarrollo bacteriano. La pluripeptona es la fuente de
carbono y nitrgeno para el desarrollo bacteriano. El agregado de cloruro de sodio permite el enriquecimiento con
sangre de carnero u otras sustancias para facilitar el cultivo de microorganismos exigente
Resultados
a-Agar nutritivo:
Microorganismos
P. mirabilis ATCC 43071

Bueno-excelente

E. coli ATCC 25922

S. aureus ATCC 25923
B. cereus ATCC 10876
E. faecalis ATCC 29212
P. aeruginosa ATCC 27853

Bueno-excelente
Bueno-excelente
Bueno-excelente
Bueno-excelente
Bueno-excelente

Crecimiento

b-Agar nutritivo suplementado con 5% de sangre de carnero:

Microorganismos
S. pyogenes ATCC 19615
S. pneumoniae ATCC 6305
S. pneumoniae ATCC 49619

Crecimiento
Abundante
Abundante
Abundante

Caractersticas del medio

Medio preparado: mbar claro a medio ligeramente opalescente.

Hemlisis
Beta
Alfa
Alfa