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11/09/2009

FECUNDAÇÃO
Prof. Dr. Wellerson Rodrigo Scarano

FECUNDAÇÃO OU FERTILIZAÇÃO

 Processo pelo qual o gameta masculino


(espermatozóide) se une ao gameta feminino (ovócito)
para formar uma célula (zigoto ou célula
célula--ovo)

zigoto

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Estrutura do espermatozóide
Cabeça:: Acrossomo
Cabeça Acrossomo,, Núcleo

Cauda::
Cauda Peça intermediária,,
intermediária
principal, terminal

Viabilidade:: não sobrevivem mais


Viabilidade
de 48 hrs no trato genital feminino

Alguns permanecem nas dobras


do colo uterino
uterino,, sendo liberados
gradualmente..
gradualmente

Estrutura do óvulo

• Ovócito secundário em metáfase


• Grande quantidade de citoplasma
• Membrana plasmática do ovócito
• Zona pelúcida
• Células da corona radiata

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Estrutura do óvulo
Zona pelúcida

Camada protéica: 12m de espessura, resistente, permeável


e secretada pelo ovócito

Glicoproteínas: ZP1 (200kDa), ZP2 (120kDa), ZP3 (83kDa)

Oligossacarídeos da ZP3
promove ligação com receptores da
membrana do espermatozóide
(espécie- específico)

Estrutura do óvulo
Citoplasma cortical do óvulo

Até 15 000 grânulos delimitados


por membrana:
- 1m de diâmetro
- contém enzimas que alteram
as ZP3 e ZP2 de modo que os
espermatozóides não podem
mais se ligar a zona pelúcida

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Estrutura do óvulo

Esquema do citoplasma cortical

Zona
pelúcida

Membrana
plasmática

Grânulos
corticais

Eventos preparatórios
• Maturação dos espermatozóides no epidídimo

• Capacitação dos espermatozóides no trato genital


feminino

• Transporte dos gametas

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Transporte dos
espermatozóides
na mulher

transporte dos espermatozóides na mulher

Espermatozóides depositados no fundo da vagina (1)

O pH neutro do sêmen (7-8,3) protege os


espermatozóides contra a acidez bactericida do fluido
vaginal

 Movimentação dos
espermatozóides os
permitem penetrar no
muco cervical (2)

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transporte dos espermatozóides na mulher

Ação muscular do trato genital feminino (rápida) e


motilidade dos espermatozóides estão envolvidas com
os movimentos no trato reprodutor feminino (3, 4)

transporte dos espermatozóides na mulher

Os cílios das células epiteliais que revestem as tubas


uterinas movimentam o fluido e auxiliam sua passagem
ao longo da tuba até o sítio de fertilização

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transporte dos espermatozóides na mulher

A maioria dos espermatozóides são perdidos durante


a passagem em direção às tubas

transporte dos espermatozóides na mulher

A CAPACITAÇÃO é direcionada por substâncias


secretadas por regiões da parede da tuba uterina,
principalmente íons bicarbonato

É um período de condicionamento no aparelho


reprodutor feminino, de 6-7hs

Somente os espermatozóides capacitados serão


capazes de atravessarem a corona radiata e realizarem a
reação acrossômica
acrossômica..

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transporte dos espermatozóides na mulher

As alterações decorridas da capacitação tornam os


espermatozóides hiperativos e aptos a passarem pela
reação acrossomal

transporte dos espermatozóides na mulher

Eventos que decorrem da Capacitação

remoção de proteínas aderentes do plasma seminal


alterações metabólicas (aumento do AMPc, aumento
do consumo de O2, diminuição do pH intracelular)
hiperativação da motilidade
desestabilização da membrana acrossomal
(acrossomo torna-se apto à reação acrossomal)
ativação da proteína acrosina (papel na penetração
na na zona pelúcida)

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transporte dos espermatozóides na mulher

A fertilização ocorre na região da ampola

3. clivagem
4. mórula

5. Blastocisto
2. fertilização

6. implantação
1.ovulação

Quimiotaxia e
termotaxia
dos
espermatozóides

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O óvulo atrai os espermatozóides devido à produção de substâncias


químicas – quimiotaxia - efeito a distâncias curtas (Líquido folicular)

Os espermatozóides capacitados são capazes de se deslocar em direção à


região em que o óvulo se encontra devido a diferença de temperatura cerca
de 2°C mais alta (36
36--38
38°°C) – termotaxia

Seqüência
de eventos
da fertilização

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FASES

• Fase 1 – penetração na corona radiata

• Fase 2 – penetração na zona pelúcida

• Fase 3 – Fusão das membranas plasmáticas


do ovócito com a do espermatozóide

• Fase 4 – Formação e fusão dos pró-núcleos


masculino e feminino

Eventos da fertilização
Passagem pela corona radiata:

-movimento das caudas dos sptz.


(batimento flagelar)
-ação da hialuronidase liberada do
acrossomo

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Eventos da fertilização
Passagem livre pela corona radiata

Contato com a zona pelúcida -


Reação Acrossômica:
-fase importante da fertilização pois
forma-se um caminho na ZP

-ligação da membrana plasmática do


esperm. com a ZP mediada pela ZP3

- estimula a reação acrossômica

Eventos da fertilização

Reação acrossômica
Devido ao aumento intracelular de Cálcio, surgem perfurações
no acrossomo como resultado da fusão das membrana
plasmática e membrana acrossomal

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REAÇÃO ACROSSÔMICA

- Após a ligação do espermatozóide com a zona pelúcida

Fusão

membrana acrossômica externa

membrana plasmática

liberação de enzimas

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REAÇÃO ACROSSÔMICA

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Eventos da fertilização

Liberação das enzimas acrossomais que digerem a ZP

Proteínase ácida – hidrolisa proteínas em pH ácido


Colagenase – digere colágeno
Acrosina – Protease que digere proteínas da zona
pelúcida
Betaglucuronidase
Hialuronidade
Neuraminidase
Fosfolipase C

Eventos da fertilização

As substâncias liberadas pelo acrossomo auxiliam o esperm.


atravessar a ZP, formando um caminho

Somente após o término da reação acrossômica é que o


esperm. consegue começar a atravessar a ZP

Passagem pela ZP = movimentos da cauda + digestão de um


caminho

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 Fusão das membranas plasmáticas do espermatozóide


e do ovócito

▪ As membranas do espermatozóide e do ovócito fundem-se


▪ Cabeça e cauda do espermatozóide penetram no ovócito
▪ Membrana plasmática fica para trás

Reconhecimento pelas Fertilinas

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 Após a entrada de um espermatozóide dentro do


ovócito, a entrada de outros deve ser impedida
(poliespermia), pois isso levaria a um desenvolvimento
anormal.
 2 bloqueios a poliespermia estão presentes:

- Bloqueio rápido: despolarização de membrana do ovócito

- Bloqueio lento: reação cortical

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Bloqueio rápido à poliespermia

- Após a fusão do zóide com o ovócito, o potencial de


membrana do ovócito fica positivo

- Possui curta duração

Eventos da fertilização
Passagem livre pela corona radiata:
batimento flagelar

Contato com a zona pelúcida (receptores


do espermatozóide para ZP3)- Reação
Acrossômica

Digestão da zona pelúcida: reação


da zona (Bloqueio lento a
polispermia)

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Eventos da fertilização
Reação da zona
É a liberação do conteúdo dos grânulos corticais
causada pelo contato com a membrana plasmática do
espermatozóide com a superfície do ovócito

Reação da zona

Zona
pelúcida

Membrana
plasmática

Grânulos
Actina corticais
GeF

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Reação da zona
O conteúdo dos grânulos contém enzimas que alteram a ZP,
causando seu endurecimento e modificações químicas
impedindo a ligação de outros espermatozóides (poliespermia
poliespermia))
Zona
pelúcida

Membrana
plasmática
Membrana
Do Grânulo

Actina Grânulos
GeF corticais

Eventos da fertilização
Entrada do
espermatozóide no óvulo

Entrada paralela à
superfície do óvulo na
região pós
pós--acrossomal

A cabeça e o axonema
entram no citoplasma do
ovócito, mas a membrana
plasmática permanece fora

Papel ativo do óvulo

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Eventos da fertilização

Ativação metabólica do ovócito

- O fator ativador é, provavelmente, transportado pelo


espermatozóide
- Esta ativação pós fusão é considerada para os eventos
celulares e moleculares iniciais

Eventos da fertilização
Formação dos pró-núcleos

- O ovócito termina a 2ª divisão meiótica

- Descondensação da cromatina do
espermatozóide e aumento do volume
nuclear – formação do própró--núcleo
masculino
-Após o término da meiose o material cromossômico do
óvulo descondensa – formação do pró
pró--núcleo feminino

- Durante o crescimento dos prós


prós--núcleos, o DNA é replicado
(1 crs
crs.. com 2 cromátides)

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Eventos da fertilização

- Neste estágio os pró


pró--núcleos feminino e masculino são
indistinguíveis

Quando os pró
pró--núcleos se aproximam, os envoltórios
nucleares se desagregam
Os cromossomos se condensam e dispõem
dispõem--se para
uma divisão mitótica comum
A cromatina se mistura e a seguir o envoltório se
reconstitui formando o núcleo zigótico diplóide

A combinação de 23 crs. de cada pró-núcleo resulta em um


ZIGOTO com 46 crs e neste momento a fertilização está concluída
E o desenvolvimento embrionário inicia...

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Resultados da fertilização
• Término da 2ª divisão meiótica
• Restaura o número diplóide de cromossomos (46) do
zigoto
• Promove variação da espécie
• Determina o sexo do embrião
• Causa ativação metabólica do ovócito
• Dá início à clivagem

“ E quando o nó cegar, deixa desatar em nós


Solta a prosa presa, a luz acesa
Lá se dorme um sol em mim menor”
Teatro Mágico

Por hoje é só!!!!

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