CENTRO UNIVERSITRIO FRANCISCANO UNIFRA

CURSO DE FARMCIA
CONTROLE BIOLGICO DA QUALIDADE DE MEDICAMENTOS

A necessidade de confirmao da IDENTIDADE,

PUREZA, POTNCIA, INOCUIDADE e EFICCIA
teraputica de medicamentos envolve vrios aspectos
analticos, principalmente quando o medicamento no
consiste de substncia que possa ser completamente
caracterizada pelas propriedades qumicas e fsicofsicoqumicas..
qumicas
Prof. Marcos R. dos Santos

Diferem das demais drogas de baixo peso molecular (convencionais)

por apresentarem:
apresentarem:
-

Estrutura geralmente complexa

Derivados de organismos vivos (hormnios,peptdeos, protenas)

Requerem procedimentos especiais de produo e controle de

qualidade devido:
devido:
- natureza biolgica do material de partida
- bases biolgicas do processo de produo
- necessidade de Mtodos Biolgicos para caracterizao dos
lotes.
lotes.

So procedimentos destinados a avaliar a potncia de

princpios ativos contidos nas matrias

matrias--primas e
preparaes farmacopicas.
Atravs do uso de reagentes biolgicos tais como:
como:
- Micro
Micro--organismos
organismos;;
- animais
animais;;
- fluidos e rgos isolados de animais.
animais.

Utilizados para detectar e medir a concentrao de

substncias, observando seus efeitos farmacolgicos
sobre animais vivos, tecidos ou clulas
clulas..

Uma importante caracterstica dos reativos biolgicos a

variabilidade enquanto os reativos fsicofsico-qumicos podem

ser definidos e padronizados para fornecerem resultados
idnticos em todos os laboratrios.
Devido a esta variabilidade torna
torna--se imprescindvel:
imprescindvel:

Em geral so mais complexos e menos

precisos do que os ensaios fsicofsico-qumicos
qumicos..

Possibilita assegurar a compatibilidade e equivalncia de

potncia de lotes de produtos farmacuticos produzidos por
diferentes indstrias Nacionais e Internacionais.
Importante tambm para padronizar a avaliao de:
-

Pureza

Impurezas relacionadas ao Produto e Processo

Processo..
Padro Internacional uma preparao para a qual foi definida uma
unidade Internacional (UI) de atividade, geralmente com base em
estudo colaborativo internacional.

1) O emprego de padres de referncia adequados para se obter

potncias relativas.
relativas.
2) O emprego de mtodos estatsticos para os delineamentos
experimentais e anlise dos resultados.
resultados.

Compreende::
Compreende
a) Seleo do conjunto de doses do padro (P) e das
amostras do desconhecido (A) que sero ensaiadas;
ensaiadas;
b) Especificao das unidades experimentais (animais ,
micro--organismos, anti
micro
anti--soros, sangue etc
etc..
..));
c) Regras pelas quais se distribuiro as doses para as
unidades experimentais;
experimentais;
d) Especificaes das medidas ou outros registros que
devam ser procedidos em cada unidade experimental.
experimental.

Aleatrio
Unidades experimentais homogneas.

Blocos ao acaso
Segrega fonte de variao.

Os mtodos devem se relacionar com o delineamento

experimental utilizado.

Quadrado latino
Duas fontes de variao.

o procedimento matemtico aplicado aos resultados

experimentais para estimar a potncia da amostra e
avaliar a validade e preciso do ensaio.

Cruzado
O mesmo bloco recebe os dois tratamentos.

Deve ser acompanhada por limites de confiana

inferior e superior (Li, LS)

LS)..
Estes limites definem o intervalo de modo que seja prprdeterminada a probabilidade (p) de a verdadeira potncia
relativa (p) estar fora do intervalo.
intervalo.
Probabilidade de erros mais utilizadas:
utilizadas:
p = 5% e p = 1%, tambm expressas como p = 0,05 e p = 0,01.
01.

Expressar os resultados de avaliao biolgica como

estimativa da potncia relativa (impossvel de ser
calculada com certeza variabilidade dos reativos
biolgicos)..
biolgicos)

As monografias estabelecem especificaes para a

amplitude aceitvel desses intervalos em relao
potncia estimada.
estimada.

Levam em conta a dificuldade dos mtodos e a

necessidade prtica de se estimar a verdadeira potncia
com determinada preciso.
preciso.

Pgina:: 204
Pgina

5.5.2 ENSAIOS BIOLGICOS pg

pg:: 226
5.5.2.1 PIROGNIOS
5.5.2.2 ENDOTOXINAS BACTERIANAS
5.5.2.3 TOXICIDADE
5.5.2.4 SUBSTNCIAS VASOPRESSORAS
5.5.2.5 HISTAMINA
5.5.2.6 SUBSTNCIAS VASODEPRESSORAS

1- Qualitativos
So testes realizados com a finalidade de identificar o produto e
avaliar as caractersticas de inocuidade ou toxicidade devido
presena de contaminantes de diferentes origens
origens..
Ex:
Ex:
- Esterilidade;
Esterilidade;
- Pirognios;
Pirognios;
- Toxicidade;
Toxicidade;

2. QUANTITATIVOS
DIRETO
Mede--se diretamente as doses de cada preparao
Mede
(padro e amostra) necessrias para produzir respostas
prpr-determinadas em cada unidade experimental de dois
grupos equivalentes de animais ou outros reativos
biolgicos..
biolgicos
Ex.:
Ex.: Ensaio biolgico de Digital
Digital..

- Substncias vasopressoras;
vasopressoras;
- Pesquisa e identificao de patgenos.
patgenos.

MTODO BIOLGICO QUANTITATIVO

INDIRETO
Comparam-se nveis de resposta produzidas por doses do
Comparampadro, em escala quantitativa, com aquelas produzidas
por uma ou mais doses da amostra
amostra..
Ex.:
Ex.: Ensaio de potncia da Oxitocina
Oxitocina..

Os procedimentos de padronizao biolgica so geralmente

menos precisos, consomem mais tempo e so mais dispendiosos
de realizar que os mtodos qumicos.
qumicos. So realizados quando:
quando:
1. A identidade qumica da substncia ativa no foi totalmente
elucidada;;
elucidada
2. No foi desenvolvido ensaio qumico adequado para medir a
substncia qumica, ainda que sua estrutura qumica seja
estabelecida.. Ex.:
estabelecida
Ex.: Insulina.
Insulina.
3. Se o frmaco compecompe-se de uma mistura complexa de substncias
de estrutura variada.
variada. Ex.:
Ex.: Digital
Digital..

4.

Se o ensaio qumico no uma indicao vlida de atividade

farmacolgica, devido, por exemplo a falta de diferenciao entre
ismeros ativos e inativos;
inativos;

Um ensaio biolgico mede a atividade biolgica real de uma

determinada amostra, que pode representar a soma algbrica da
interao de numerosos fatores qumicos e fsicofsico-qumicos
qumicos..

http:
http://www.
//www.anvisa
anvisa..gov
gov..br/cosmeticos/guia/html/apresentacao.
br/cosmeticos/guia/html/apresentacao.htm

3 Rs
Refinamento

Os 3 R's
A idia de ensaios alternativos muito mais abrangente do que a
substituio do uso de animais, incluindo tambm a questo da reduo e
refinamento na utilizao dos mesmos.

Este princpio est baseado no conceito dos 3R's (Three

R's), o qual foi definido por William Russell e Rex Burch, em
1959, no livro Principles of Human Experimental Technique.
Os 3 R's que representam o refinamento, reduo e
substituio (Refine, Reduction e Replacement).

O Termo refinamento significa a modificao de algum procedimento operacional

com animais, objetivando minimizar a diminuio da dor e o estresse. A experincia
da dor e do estresse tem, como resultado, mudanas psicolgicas que aumentam a
variabilidade experimental dos resultados.
Reduo
A concepo de reduo como alternativa estratgica, resulta em menor nmero
de animais sendo utilizados para obter a mesma informao, ou maximizao da
informao obtida por animal. Existem vrias possibilidades para reduo do uso
de animais.
Substituio
Um sistema experimental que esteja vinculado totalidade da condio de vida
animal, pode ser considerado como substituto alternativo. Pode-se citar a proposta
de obteno de clulas, tecidos ou organismos para subseqentes estudos in vitro
ao invs da matana de animais.

Toxicidade: Capacidade de certas substncias

Toxicidade:
causarem danos a seres vivos.
Materiais a serem testados:
testados:
Matrias-primas de fonte natural: devido a complexidade e
processos de purificao, como no caso de antibiticos e
hormnios.
Produtos terminados: aqueles contendo matrias-primas
de fonte natural, ou nos demais casos como mecanismo
de verificao de pureza do processo de produo.

Materiais a serem testados:

testados:
Material plstico de correlatos e de acondicionamento
de produtos parenterais: devido a presena de
monmeros e oligmeros ou de aditivos incorporados
em seu processamento (plastificantes, antioxidantes,
lubrificantes) entre outros.
Emprego de espcies de animais para avaliar o risco
toxicolgico no ser humano.
humano.
Problemas: extrapolar resultados obtidos em animais a
Problemas:
humanos (diferentes dosagens, espcies de animais).
animais).

- estudar a natureza dos efeitos txicos ao nvel celular, tecidos e de

rgos;;
rgos
-

Testes com produtos da rea da sade:

sade:
-

Obter dados para estimar o potencial de dano ao usurio (DL50);

identificar doses nas quais possam ocorrer alteraes fisiolgicas,

bioqumicas e morfolgicas;
morfolgicas;

Obter informaes sobre o mecanismo pelo qual se manifesta a

toxicidade;;
toxicidade

conhecer possveis efeitos cumulativos do agente e de seus produtos

de biotransformao
biotransformao;;

Estabelecer dose para testes subseqentes de toxicidade a longo

prazo, caso se faam necessrios;
necessrios;

Garantir a segurana do consumidor, em ensaios lote

lote--a-lote ou
peridicos..
peridicos

avaliar a variao da resposta , por diferentes espcies, durante

exposio repetitiva ao agente
agente;;

Predizer efeitos adversos sade decorrentes de exposio

intermitente, repetida ou crnica ao agente em questo

Aplicaes tpicas , ocular (mais comuns para produtos cosmticos),

injeo intradrmica ou subcutnea, aplicaes intraintra-vaginal e intraintranasal, assim como direta a superfcies internas da cavidade oral so por
vezes requeridas para os

medicamentos, correlatos

escalas e
respostas da

Irritao em pele de coelhos - Avaliada atravs de

frmulas de clculo
pele (eritema, edema).
edema).

de acordo com as

cosmticos.
Tipos de testes:
testes:
Teste de irritao primria de pele:
pele: PRODUTOS DE
HIGIENE, COSMTICOS, E PERFUMES, alm de certos
correlatos (FDA).
(FDA).

Teste de sensibilizao da pele

pele:: Primeira exposio a
uma substncia qumica provoca pequena reao,
tornando-se severa e persistente aps exposies
subsequentes (semanas ou anos).

Teste de irritao ocular:

ocular: Inicialmente avaliaes
fisiolgicas observadas na crnea, conjuntiva e ris de
coelhos albinos. A partir de 1962, incluso de parmetros
como eritema, espessura das plpebras e membranas,
abrangendo edema, lacrimejamento, opacidade, danos
capilares e neovascularizao (pannus) da crnea.
Avaliao atravs de valores de graduao para leses oculares
oculares..

Outros tipos de testes:

-

Fototoxicidade;

Teste de implante intramuscular;

Avaliao de toxidade aguda com efeito sistmico;

Teste de administrao oral;

Teste de aplicao drmica ou percutnea;

Teste com inalao.

Aplicaes: sabonetes levemente cidos ou bsicos, xampus,

Aplicaes:
solues de limpeza, cremes e loes, delineadores, mscaras,
desinfetantes, lquidos de enxge bucal entre outros
outros..

Ensaios em que animais so tratados com material teste

de 5 7 dias por semana num perodo mnimo de 20 dias
e mximo de 1 ano.

Estudos de longo prazo ou tempo de vida (meses, anos),

so planejados para durar durante a maior parte da vida
dos animais.

Adio de outros testes (ex

(ex:: bioqumicos, hematolgicos)
para avaliao dos efeitos sobre as cobaias, alm das
observaes listadas para estudos agudos, servindo para
estudo crnico subseqente.
subseqente.

Estudos
de
oncogenicidade,
(anormalidades ou deformidades no
fetal), toxicidade sobre a reproduo
acasalamento, gestao, nascimento e
do feto)
feto)..

teratogenicidade
desenvolvimento
(interferem com
desenvolvimento

Alternativas cientificamente comprovadas, evitando o uso

de animais.
animais.

Uso de rgos isolados, culturas de clulas e de tecidos,

ensaios qumicos e fsicos, tecidos simulados e fludos
corpreos, modelos mecnicos, matemticos e
simulaes em computador.
computador.

Para medicamentos (hormnios, soros e vacinas de uso

humano), nos quais haja exigncias sob toxicidade na
monografia da Farmacopia Brasileira 5 edio
edio..

TESTE PARA PRODUTOS BIOLGICOS, SOROS E VACINAS

Procedimento: Utilizar 5 camundongos com peso entre 17 g e 22 g e,
Procedimento:
pelo menos, dois cobaios sadios com peso entre 250 g e 350 g.
Vias de administrao
administrao:: Ver mtodo ou monografia especfica
Intravenosa, intraperitoneal
intraperitoneal,, Subcutnea ou Oral.
Oral.
Interpretao::
Interpretao
Por um perodo de, no mnimo, 7 dias, observar os animais quanto a
sinais de enfermidade, perda de peso, anormalidades ou morte
morte..
Se,
Se, durante o perodo de observao
observao,, todos os animais sobrevivem, no
manifestam respostas que no so especficas ou esperadas para o
produto e no sofrem reduo de peso, a preparao cumpre o teste
teste..
Caso contrrio, realizar novo teste e reteste (dobro de animais)

Registro de Produtos Biolgicos e Hemoterpicos

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