MINERALIZACION DEL SULFONATO DE ALQUILBENCENO LINEAL A TRAVES DE LA

MICROBIOTA DE PLANTAS ACUATICAS

1.

INTRODUCCION

Entre los primeros productos qumicos orgnicos sintticos que crearon problemas en el
medio ambiente se encuentran los detergentes. Los detergentes domsticos e industriales
estn compuestos, entre otros, por los tensioactivos (10-20%), que son la parte activa en su
poder detersivo. De los distintos agentes surfactantes los Alquilbencenos Sulfonatos
Lineales (LAS) son los tensioactivos aninicos ms extendidos a escala mundial en su
empleo en los detergentes para el hogar y tambin en la industria.
El LAS se puede considerar un xenobitico no recalcitrante en el medio ambiente acutico
arobico (Painter y Zabel, 1998), puesto que se biodegrada hasta su mineralizacin
(Schoberl,1997). Por otra parte, hasta la actualidad solo se ha demostrado que el LAS sufre
una biodegradacin primaria en los medios anxicos. (HERA,2004).
Por lo general, una vez que son empleados los tensioactivos llegan a las estaciones
depuradoras de aguas residuales (EDAR) a travs de las redes domsticas e industriales.
En ciertos casos son vertidos directamente en cuerpos de agua receptores superficiales.
Los tensioactivos suponen para el mundo microbiano un conjunto de posibilidades
nutricionales de las que se aprovecharan si su empleo es rentable energticamente.
Los

humedales

eliminan

contaminantes

mediante

varios

procesos

que

incluyen

sedimentacin, degradacin microbiana, accin de las plantas, absorcin, reacciones

qumicas y volatilizacin (Stearman et al., 2003).

2.

ANTECEDENTES

Desde la antigedad, los aditivos qumicos fueron reconocidos por su capacidad para
facilitar el lavado mecnico con agua. Los italianos utilizaron una mezcla de azufre y el agua
con carbn para limpiar tela. Los Egipcios aadieron cenizas y silicatos para ablandar el
agua. Los jabones fueron los primeros detergentes. Los efectos detergentes de ciertos
tensioactivos sintticos se observaron en Alemania en 1917, en respuesta a la escasez de
jabn durante la Primera Guerra Mundial I. En la dcada de 1930, las rutas comercialmente
viables a los alcoholes grasos se desarrollaron, y estos nuevos materiales se convirtieron a
sus steres de sulfato, ingredientes de la marca alemana de importancia comercial FEWA,
producido por BASF, y Dreft, la marca EE.UU. producidos por Procter and Gamble. Estos
detergentes se utilizan principalmente en la industria hasta despus de la Segunda Guerra
Mundial. Para entonces, los nuevos desarrollos y la conversin posterior de las plantas de
combustibles de aviacin para producir tetrapropileno, utilizados en los detergentes
domsticos, provocaron un rpido crecimiento del consumo interno a finales de 1940.
En la actualidad, jabn en gran medida ha sido desplazado como el principal agente de
limpieza en los pases desarrollados. Por la dcada de 1950, el jabn haba sido casi
completamente reemplazado por alquilbencenosulfonatos ramificados, pero se encontr que
estos detergentes eran difcilmente biodegradables. Los sulfonatos de alquilbenceno
lineales, sin embargo, resultaron ser altamente eficaces en la limpieza y ms biodegradables
que los parientes ramificados. Por ejemplo, slo un estimado de 60 millones de kilos de los
sulfonatos de sodio se producen anualmente. Durante el desarrollo temprano de los
tensioactivos no jabonosos como productos comerciales de limpieza, el trmino detergente
sinttico, fue promovido para indicar la distincin de los llamados jabones naturales.
3.

JUSTIFICACION

La contaminacin debido a las aguas residuales resulta ser un preocupacin a nivel mundial,
entre los contaminantes ms comunes sobresalen variedad de tensioactivos utilizados con
diferentes fines domsticos o industriales.
El presente trabajo realiza un breve estudio de biodegradacin de tensioactivos como una
posible solucin a la contaminacin de efluentes comunes, utilizando como herramienta el
crecimiento bacteriano en un sistema de humedales, buscando dar resultados que conlleven

a ampliar el estudio de este mtodo a escalas mayores y, generar discusin del tema para la
implementacin de su tecnologa.
4. OBJETIVOS
4.1 OBJETIVO GENERAL
Evaluar la degradacin del tensioactivo aninico Sulfonato de Alquilbenceno Lineal,
LAS, a travs de la microbiota presente en un humedal piloto.
4.2 OBJETIVOS ESPECIFICOS
Construir un humedal piloto de flujo vertical que este equipado con un control de
nivel en el dosificador que permita mantener el flujo constante.
Controlar el caudal en el ingreso al humedal.
Aclimatar el humedal.
Evaluar el funcionamiento del humedal en trminos de concentracin del LAS.
5. FUNDAMENTO TEORICO
5.1. TENSIOACTIVOS
El trmino surfactante o tensioactivo es una contraccin del trmino agente con actividad
superficial, con el que se designa a aquellas sustancias que son capaces de modificar las
propiedades fsicas (mecnicas, elctricas, pticas, etc.) de una superficie o de una
interface, reduciendo la tensin superficial.
El trmino surfactante ha sido universalmente aceptado para describir sustancias orgnicas
con ciertas caractersticas en estructura y propiedades, con mucha frecuencia se ha
utilizado la palabra detergente en lugar de surfactante. Sin embargo, siguiendo su definicin
de sustancia capaz de lavar, el detergente puede contener adems sustancias inorgnicas
que favorecen su accin detersiva.
5.2. VEGETACION
El aporte que dan las plantas es la oxigenacin en la zona de la raz. Su presencia fsica en
el sistema (Tallo, races y rizomas) permite la penetracin a la tierra o medio de apoyo,
transporta el oxgeno de manera ms profunda, de lo que llegara naturalmente a travs de
la sola difusin. Lo importante es que se origine el substrato una pelcula de proliferacin

microbiana que es parte fundamental en el tratamiento de aguas. (U.S. EPA 1989,200), (J.
Lara, 1999).
Las plantas son organismos eucariotas pluricelulares auttrofos, que presenta clulas de
tipo clula vegetal. Las plantas obtienen la energa a travs de la clorofila presente en sus
cloroplastos, y con ella convierten el dixido de carbono y el agua en azucares, que utilizan
como fuente de energa para realizar todas sus actividades. Tambin exploran el medio
ambiente que las rodea (normalmente a travs de races) para absorber otros nutrientes
esenciales utilizados para construir protenas y otras molculas que necesitan para subsistir.
5.3. MICROORGANISMOS
Una caracterstica fundamental de los humedales es que sus funciones estn reguladas en
gran parte a causa de los microorganismos y su metabolismo. Los microorganismos
incluyendo las bacterias, levaduras, hongos, protozoos, algas de la corteza. La biomasa
microbiana es un aporte importante para el carbn orgnico y muchos alimentos.
Actividad microbiana:
a) Transforma una gran cantidad de carbn orgnico y sustancias inorgnicas en
materia inofensiva o sustancias insolubles.
b) Altera las condiciones de la reduccin/oxidacin (redox) del substrato y afecta as la
capacidad de proceso del humedal.
c) Est implicado en el reciclaje de alimentos. Algunas transformaciones microbianas
son aerobias (es decir, requieren el oxgeno libre) mientras que otras son anaerobias
(ocurre en ausencia del oxgeno libre).
Muchas especies bacterianas son anaerobias facultativas, es decir, son capaces de
funcionamiento bajo condiciones aerobias y anaerobias en respuesta a cambiar condiciones
ambientales. Las poblaciones microbianas ajustan a los cambios dentro el agua entregado a
ellas. Cuando los condiciones ambientales son convenientes, muchos microrganismos se
convierten en inactivos y pueden seguir siendo inactivos por los aos, la comunidad
microbiana del humedal artificial puede ser afectada por las sustancias txicas, por ejemplo
los pesticidas y los metales pesados y el cuidado debe ser tomado para prevenir tales
productos qumico.

5.4. BIODEGRADABILIDAD
Es el resultado de los procesos de digestin, asimilacin y metabolizacin de un compuesto
orgnico llevado a cabo por bacterias, hongos, protozoos y otros organismos. En principio,
todo compuesto sintetizado biolgicamente puede ser descompuesto biolgicamente. Sin
embargo, muchos compuestos biolgicos (lignina, celulosa, etc.) son difcilmente
degradados por los microorganismos debido a sus caractersticas qumicas. La
biodegradacin es un proceso natural, ventajoso no slo por permitir la eliminacin de
compuestos nocivos impidiendo su concentracin, sino que adems es indispensable para
el reciclaje de los elementos en la biosfera, permitiendo la restitucin de elementos
esenciales en la formacin y crecimiento de los organismos (carbohidratos, lpidos,
protenas). La descomposicin puede llevarse a cabo en presencia de oxigeno (aerbica) o
en su ausencia (anaerbica). La primera es ms completa y libera energa, dixido de
carbono y agua, es la de mayor rendimiento energtico. Los procesos anaerbicos son
oxidaciones incompletas y liberan menor energa.
5.5. HUMEDALES ARTIFICIALES
Los Humedales Artificiales son sistemas de depuracin constituidos por lagunas o canales
poco profundos (menos de 1 m), plantados con plantas propias de zonas hmedas
(macrfitos acuticos) y en los que los procesos de depuracin se ejecutan de forma
simultnea mediante acciones fsicas, qumicas y biolgicas.
5.5.1 Clasificacin
Dependiendo de si el agua a tratar circula a travs de los humedales superficialmente por
encima del sustrato) o de forma subterrnea a travs del sustrato), los humedales artificiales
se clasifican en Humedales artificiales de flujo superficial (HAFS), y Humedales artificiales
de flujo subsuperficial (HAFSs).
a)

Humedales Artificiales de flujo superficial.

En este tipo de humedales el agua se encuentra expuesta directamente a la atmsfera y

circula, preferentemente, a travs de los tallos de las plantas.
Los HAFS suelen ser instalaciones de varias hectreas que, principalmente, tratan efluentes
procedentes de tratamientos secundarios, y que tambin se emplean para crear y restaurar
ecosistemas acuticos.

b)

Humedales Artificiales de flujo sub-superficial.

En estos humedales el agua a tratar circula exclusivamente a travs de un material granular

(arena,

gravilla,

grava),

de

permeabilidad

suficiente,

confinado

en

un

recinto

impermeabilizado y que sirve de soporte para el enraizamiento de la vegetacin que,

habitualmente, suele ser carrizo.
En los HAFSs verticales la alimentacin se efecta de forma intermitente, para lo que se
recurre generalmente al empleo de sifones. Las aguas circulan verticalmente a travs de un
sustrato filtrante de arena-gravilla, de aproximadamente 1 m. de espesor, en el que se fija la
vegetacin.
En los HAFSs horizontales la alimentacin se efecta de forma continua, atravesando las
horizontalmente un sustrato filtrante de gravillas-grava, de unos 0.6 m de espesor, en el que
se fija la vegetacin.

Esquema general de un humedal artificial de flujo horizontal

Fuente: Instituto Tecnolgico de Canarias. SISTEMAS DE DEPURACION NATURAL

5.5.2 Ventajas e inconvenientes de los Humedales Artificiales
Entre las ventajas tenemos:
Sencillez operativa, limitndose a la retirada de residuos del pre-tratamiento y al
corte y retirada de la vegetacin una vez seca.
Inexistencia de averas, al carecer de equipos mecnicos.

 El sistema puede operar sin ningn coste energtico.

Sistemas flexibles y poco susceptibles a cambios en caudales y carga.
La biomasa vegetal acta como aislante del sedimento, lo que asegura la actividad
microbiana todo el ao.
No se generan olores.
Entre las desventajas tenemos:
Exigencia de mayor superficie de terreno para su implantacin que las tecnologas
convencionales de depuracin (unos 5 m2/h.e.).
Generacin de lodos en el tratamiento primario, si bien, se emplean Tanques Imhoff
o Fosas Spticas, la retirada e estos lodos se espacia en el tiempo.
Necesidad de 2 o 3 estaciones de crecimiento de las plantas para alcanzar mximos
rendimientos.
Perdidas de caudal por evapotranspiracin, con aumento de la salinidad en los
efluentes depurados.
En los humedales Artificiales de Flujo Libre, al circular el agua por encima de la
superficie del sustrato, se produce la proliferacin de mosquitos.
6. MATERIALES Y METODOS
6.1 FASE DE CONSTRUCCION DEL HUMEDAL PILOTO
Para la construccin del humedal piloto se emplearon los siguientes materiales:
2 Recipientes rectangulares de plstico de 20 y 40 L.
1 Dosificador cilndrico equipado con flotador
1 Recipiente de almacenamiento
Mangueras y vlvulas
Grava
Plantas de totora
El sistema de tratamiento consta de 2 humedales conectados en serie, cada una de estos
empacado con grava de distinto tamao.

La dosificacin se la realizo por gravedad, el dosificador instalado consta de un flotador que

permite mantener un nivel constante y de esta manera, garantizar un flujo uniforme.

Se instal una vlvula al dosificador para controlar el flujo de ingreso al sistema de

humedales.
Las totoras fueron plantadas en los humedales a una profundidad media respecto de la
altura del lecho de cada humedal.

Para determinar la porosidad del lecho empacado, se utiliz un recipiente graduado para
poder conocer la porcin que ocupaba el agua una vez empacado el lecho.
6.2. FASE DE ACLIMATACION DEL HUMEDAL
Para la aclimatacin del humedal se emple agua residual proveniente de la planta de
tratamiento de agua residual del C.A.S.A.
El agua se colecto de la tercera cmara de recoleccin de agua residual de la Planta de
Tratamiento del Centro de Aguas.
Se dosific a los humedales con un caudal promedio de 14 mL/min. y durante el periodo
aproximado de tres semanas.

6.3 FASE DE EVALUACION DEL HUMEDAL

Para evaluar el funcionamiento del humedal en cuanto a la remocin del tensioactivo
aninico LAS, se aliment al mismo con una muestra sinttica de concentracin 2,5 mg
LAS/L, 40 mg N/L y 40 mg P/L aprox.
La muestra sinttica era preparada a diario para la alimentacin al humedal.
Se colectaron muestras del agua sinttica preparada, y a la salida del humedal para evaluar
el contenido de tensioactivos.
El mtodo empleado para la determinacin de tensioactivos es una adaptacin del mtodo
MBAS (Methylene blue active substances por sus siglas en ingls) y SAAM (Sustancias
Activas al Azul de Metileno), por sus siglas en espaol, mtodo que esta descrito en el
Standard Methods for Examination of Wter and Wastewater, y referido con el nmero 5540
C.
6.3.1 METODO SIMPLIFICADO DE ANALISIS
Este mtodo est basado en la formacin de un par inico entre el tensioactivo aninico
(AS) y el azul de metileno (MB) segn la reaccin:

Reaccin de formacin del par inico tensioactivo aninico-azul de metileno

El mtodo se basa en la formacin de sales coloreadas del tensioactivo aninico, en medio

alcalino, con azul de metileno. Estas sales se extraen con cloroformo y se hace un
tratamiento acido de la disolucin clorofrmica. Se eliminan las interferencias por extraccin
del complejo sustancia aninico-azul de metileno contenido en la disolucin alcalina,
posteriormente se agita el extracto en presencia de una disolucin acida de azul de metileno
y se mide espectrofotomtricamente la absorbancia de la fase orgnica.
Segn el mtodo oficial, se requieren tres extracciones sucesivas del par inico AS-MB
contenido en 100 ml de muestra previamente alcalinizada, con 15, 10 y 10 ml de cloroformo
cada vez. Para evitar posibles interferencias el extracto de cloroformo se limpia de nuevo
con una solucin de lavado y se lleva a 100 ml con cloroformo. La determinacin del par
inico se realiza por espectrofotometra midiendo la absorbancia a 650 nm.
El mtodo simplificado propone que es posible realizar una extraccin cuantitativa en una
sola etapa desplazando el equilibrio de transferencia del par inico AS-MB hacia la fase
orgnica, aumentando mucho la cantidad de cloroformo respecto de la cantidad de muestra
como se muestra en la siguiente figura:

Este mtodo permite medir un rango de concentraciones de 0.1-2.0 mg/L.

Los materiales y reactivos empleados en el mtodo simplificado para la determinacin de la
concentracin de tensioactivos anionicos fueron los siguientes:
Materiales:
Viales de vidrio de 10 ml de capacidad
Micropipetas de 100-1000 ml
Vasos de precipitado
Pipetas volumtricas de 5 ml de capacidad
Espectrofotmetro de absorcin atmica UV-Visible
Reactivos y disoluciones:
Cloroformo (CHCl3)

 Disolucin de azul de metileno, estabilizada a pH ligeramente acido; se disuelven 0.1

g de azul de metileno (C16H18ClN3S.xH2O) en 100 ml de la disolucin tampn
brax 10 mM y pH 5-6. Esta disolucin se guarda en un frasco color topacio.
Disolucin madre patrn de dodecilbenceno sulfonato sdico, se prepara a 1 g/L y
pH neutro.
Disolucin patrn de dodecilbenceno sulfonato sdico de 10 mg/L; preparada por
dilucin 1/100 de la disolucin madre patrn.
Solucin tampn de tetraborato sdico (Na2B4O7) 50 mM y pH 10.5
Procedimiento
En viales de vidrio para medidas espectrofotomtricas de 10 ml de capacidad, se adicionan
5 ml de muestra, y se alcaliniza hasta pH 10 mediante la adicin de 200 l de tetraborato de
sodio 50mM y pH 10.5, a continuacin se aaden 100 l de azul de metileno de 1 g/L
estabilizado. Finalmente se adiciona 4 ml de cloroformo, y tras agitar, se esperan 5 minutos
antes de medir la absorbancia de 650 nm frente a aire o frente a un blanco con cloroformo.

7. RESULTADOS
Calculo de la porosidad del lecho del humedal:
Humedal 1:
Volumen del humedal vaco: 20 L
Volumen que ocupa el agua en el lecho empacado: 7 L
Porosidad:
Humedal 2:
Volumen del humedal vaco: 40 L
Volumen que ocupa el agua en el lecho empacado: 14 L
Porosidad:
El clculo de la porosidad nos permite conocer la fraccin til empleada del volumen total de
los recipientes empleados en la construccin del humedal, siendo la porosidad de 0.35, y el
volumen total de recipientes vacos de 60 L , se tiene que el volumen til es de:

Clculo del tiempo de retencin:

El tiempo de retencin del humedal se calcula empleando los datos del caudal y el volumen
til de humedal que se tiene:
Fecha

Conc. LAS

Conc. LAS

Caudal [ml/min]

Tiempo de

Ingreso [mg/L]

Salida [mg/L]

10/11/2014

3,903

1,155

12,11

1,204

12/11/2014

2,55

1,461

10,2

1,429

17/11/2014

2,932

1,182

9,16

1,592

18/11/2014

1,929

1,558

9,13

1,597

19/11/2014

2,220

2,244

13,11

1,112

21/11/2014

2,337

0,708

8,33

1,750

24/11/2014

2,240

0,856

7,43

1,962

25/11/2014

2,719

0,798

6,66

2,189

27/11/2014

1,777

0,423

5,7

2,558

28/11/2014

2,948

0,221

7,7

1,893

03/12/2014

2,185

0,338

6,7

2,176

04/12/2014

2,120

0,649

10,2

1,429

05/12/2014

2,165

0,341

13,4

1,088

09/12/2014

2,168

-0,268

12,55

1,162

10/12/2014

2,417

0,082

14,33

1,017

retencin [das]

CONCENTRACION LAS [mg/L]

EVALUACION DEL FUNCIONAMIENTO DEL

HUMEDAL PILOTO
4
3
2
1
0
-1

Ingreso
Salida

Es posible apreciar la disminucin de la concentracin de LAS entre la dosificacin y la

salida, sin embargo estos datos son variables, en la entrada por la necesidad de preparar
muestras diarias para los dosificadores, ocasionando una variacin de la concentracin
inicial.
La salida de los humedales muestran una mejora de remocin a partir de la segunda
semana, mostrando datos ms constantes en cada anlisis realizado, es posible justificar las
pequeas variaciones entra mediciones por la variacin en los horarios de toma de muestra
que en todos los casos estuvieron sujetos a cambios en la medida del caudal.

% REMOCION DE LAS EN EL HUMEDAL

120
100
80
60
40
20
0
2.558 2.189 2.176 1.962 1.893

1.75

1.597 1.592 1.429 1.429 1.204 1.088 1.0177

TIEMPO DE RETENCION [DIAS]

Se obtuvo una mxima remocin del 95% y una mnima de 18%. Con la grfica de
porcentajes se demuestra que la remocin tiene un promedio mayor al 50% de remocin,
demostrando la factibilidad de este mtodo.

8. OBSERVACIONES Y CONCLUSIONES

8.1. OBSERVACIONES

Inicialmente las plantas de totora plantadas en el humedal fueron marchitndose y

muriendo, despus de terminada la fase de ambientacin se pudo notar el crecimiento de

nuevos brotes que iban aumentando por cada semana que pasaba.

En la etapa de aclimatacin del humedal la cual se realiz alimentando este con

agua residual domstica se observ la presencia de larvas de gusanos ya con el paso del
tiempo se observ la presencia de una pelcula negra en la superficie de la grava lo cual
puede indicar el establecimiento de la pelcula bacteriana

8.2. CONCLUSIONES

La construccin de un humedal piloto es satisfactoria, y este es til para la remocin

de tensioactivos siempre y cuando las variables se puedan controlar en la medida de los

clculos necesarios para su funcionamiento, si el volumen del humedal no satisface el
control de las variables, es posible conectar en serie otros humedales para lograr un mejor
control en el proceso de degradacin.

Por el uso de un dosificador por gravedad al humedal es necesario tener un control

constante del caudal; una gran disminucin de nivel en el dosificador ocasiona la reduccin
del caudal, por lo tanto errores en los tiempos de retencin, es necesario implementar un
sistema de control que mantenga constante el nivel del dosificador.

Para la aclimatacin del humedal es necesario dosificar inicialmente agua con

contenido bacteriano, el tiempo de dosificacin puede variar en funcin del tamao de

empaque del humedal y del tamao del recipiente contenedor, si es necesario, ser mejor
aclimatar por un tiempo mayor al programado para garantizar la adherencia de la pelcula
bacteriana en todas las superficies que harn contacto con la muestra que se analizara.

La degradacin o mineralizacin del tensioactivo aninico LAS es posible, sin

embargo es necesario aumentar los tiempos de retencin para las dimensiones utilizadas en
el experimento, o ajustar las variables de clculo del humedal para alcanzar un mayor
porcentaje de remocin en la medida de lo posible y necesario para el proceso; si los
resultados continuaran siendo insatisfactorios; siempre se puede complementar este mtodo
con algn otro mtodo eficiente de mineralizacin.

9.

BIBLIOGRAFIA

Caracterizacion Microbiologica de la Biodegradacion de Alquilbenceno Sulfonato Lineal

(LAS) en Tunel de compostaje de lodos procedentes de EDAR Eva Sanz Cartona 2005

Estudio del comportamiento ambiental del sulfonato de alquilbenceno lineal (LAS) en una parcela
de la Vega de Granada. Mrcio Nimer Leite. Departamento de Qumica Analtica. Universidad de
Granada. 2007

Efectos biolgicos de los sulfonatos de alquilbenceno lineales (LAS) en suelo agrcola:

Biotransformacin y estudios de biodiversidad. M Mar Snchez Peinado. Departamento de
Microbiologa. Universidad de Granada. 2007

Standard methods for examination of wter and wastewater 20th edn. L.S. Clescerl, A.E.
greenberg. Whashington DC. American Public Health Association, 2001
Ecologia microbiana y microbiologa ambienta, Madrir, Addison Wesley, Iberomericana. 2002

El comportamiento del Alquilbenzeno Sulfonato Sodico (LAS) en el medio ambiente.

Berna J.L., Moreno, A, Ferrer,J., Bevia. 1989