ENZIMAS

1.- Se identificaron ms de 2000 enzimas, el 95% de las mismas son protenas.

a) Explica las funciones de las enzimas
b) Compara la estructura de las diferentes enzimas, recuerda que la mayora son protenas
(comparar significa establecer semejanas y diferencias)
2.- a) Dibuja la curva de velocidad en funcin de la concentracin de sustrato de la reaccin
Glucosa + ATP

Glucosa-6-P + ADP

i.- en ausencia de enzima

ii.- en presencia de enzima
iii.- en ausencia de ATP
iv.- en presencia de mayor concentracin de enzima
b) Compara las curvas que obtuviste. Explcalas
c) Cmo explicas qu una reaccin catalizada por una enzima alcanza una
velocidad mxima? (recuerda la estructura de las enzimas)
3.- Cada enzima cataliza una reaccin o grupo de reacciones muy parecidas,
vale decir reconoce un solo sustrato o sustratos de estructura qumica muy
semejante.
Cmo se define esta caracterstica de las enzimas y cmo se explica en base a
su estructura. (Ejemplifica con la D y L glucosa, con los D y L aminocidos y
con la D glucosa, D manosa y D galactosa , escribe las frmulas respectivas,
compralas)
4.- Los lisosomas son las organelas encargadas de la digestin intracelular.
a) Qu sucedera si la membrana del lisosoma se daara y las enzimas
lisosomales se liberaran al citoplasma?
Ten en cuenta que el pH intralisosomal es de alrededor de 5.5 y el pH
ptimo de las enzimas lisosomales es cercano a 7, qu conclusin sacas?
b) En base a la estructura de las enzimas explica porqu es tan importante
mantener el pH del medio interno dentro de lmites tan estrechos
c) Por qu es tan importante que la temperatura corporal no sobrepase los 41
C. Grafica el efecto de la temperatura sobre la actividad enzimtica

Aplicacin clnica I
Mauricio Eisen, 31 aos, muy fumador, fue llevado al hospital tras sufrir un
desmayo despus del desayuno. Su glucemia al ingresar al hospital fue de
38 mg/ dL .
Durante el ao precedente haba notado cansancio, debilidad, sensacin de
hambre y temblores a media maana que se aliviaban comiendo
alimentos que contenan glcidos.

Tanto la hermana de Mauricio, de 36 aos, como su padre presentaban niveles

inapropiadamente altos de insulina como consecuencia de una mutacin en el
gen de la hexoquinasa.
Estudios de la glucoquinasa de la familia revelaron una mutacin en el codn
455 que se traduca en un cambio de un cido glutmico por valina. Estudios
cinticos de la enzima mutada reforzaron la presuncin de que la mutacin es
la causa del sndrome clnico ya que la mutacin disminuy en un 65% el Km
de la enzima por la glucosa .
La hexoquinasa, presente en todas las clulas del organismo, cataliza la
siguiente reaccin
Glucosa + ATP

Glucosa-6-P + ADP

La glucoquinasa es una isoenzima de la hexoquinasa presente solamente en

hgado, pncreas, rin e intestino.
1.- a) Indica la reaccin catalizada por la glucoquinasa
Ambas enzimas se diferencian tanto estructural como funcionalmente
b) El Km de la hexoquinasa por la glucosa es de alrededor de 0.1 mM mientras
que el de la glucoquinasa est cerca de 10 mM. Qu indica esta diferencia?
Explcalo teniendo en cuenta el concepto de Km.
c) La hexoquinasa es una enzima constitutiva mientras la glucoquinasa es
adaptativa
Explica el significado de esta afirmacin
d) La hexoquinasa es inhibida alostricamente por glu-6-P mientra que la
glucoquinasa es inhibida por la fructosa-6 P a travs de una protena
reguladora de glucoquinasa
Compara ambos mecanismos de regulacin.
e) la insulina aumenta la actividad de la glucoquinasa por induccin enzimtica,
no tiene ningn efecto sobre la hexoquinasa. Explica el significado de
induccin enzimtica, en que se diferencia de activacin enzimtica?
Recuerda que la mutacin disminuy en un 65% el Km de la enzima por la
glucosa
2.- a) dibuja la curva de vo en funcin de la concentracin de sustrato para
la enzima normal y la mutada.
La liberacin de insulina por el pncreas depende de la cantidad de glucosa
captada por la glucoquinasa de las clulas beta del pncreas, a mayor
captacin de glucosa mayor libracin de la hormona.
b) Explica, utilizando el concepto de Km, la relacin entre el defecto gentico
de la familia Eisen, la hiperinsulinemia y la hipoglucemia que padecen.
La constante de Michaelis-Menten, Km, se define como la concentracin de
sustrato a la cul la mitad de los sitios activos de las molculas de la enzima
estn ocupados, vale decir la velocidad de la reaccin alcanza la mitad de la
velocidad mxima.
3.- a) Dibuja la curva de velocidad en funcin de la concentracin de sustrato
para cada una de las isoenzimas normales de las hexo y glucoquinasa

considerando los Km respectivos; la velocidad mxima es la misma en ambos

casos.
b) Explica la relacin que existe entre el Km de una enzima y la afinidad de la
enzima por el sustrato ejemplificando con las curvas que dibujaste.
c) Compara la velocidad (actividad) de cada isoenzima normal en las
siguientes condiciones:
I)
Normoglucemia ([glucosa] = 5.5 mM).
II)
Hiperglucemia ([glucosa] = 8 mM).
III)
Hipoglucemia ([glucosa] = 3 mM).
d) Considerando que la nica fuente de energa del sistema nervioso es la
glucosa, discute las consecuencias que tendra en el mismo la presencia de
glucoquinasa en vez de hexoquinasa.
e) La funcin del hgado es mantener los niveles de glucosa en sangre en
valores aproximadamente constantes para lo cual debe modificar la velocidad
de captacin de la glucosa de acuerdo a los valores de la glucemia. Explica las
ventajas de la presencia de glucoquinasa en el hgado.
Otro mecanismo heptico de regulacin de la glucemia es la sntesis y
degradacin del glucgeno de reserva. Ante un estado de hipoglucemia y como
respuesta a una seal hormonal (glucagon) la enzima glucgeno fosforilasa se
activa mediante la siguiente reaccin:
ATP

ADP
E1

Glucgeno fosforilasa-OH
inactiva

glucgeno fosforilasa-OP
activa

E2
Pi

H2O

f) Compara las dos formas en que se encuentra la fosforilasa. Explica el tipo

de modificacin que sufri la enzima
Los resultados de los estudios genticos realizados a Mauricio y a los
miembros de su familia indicaron un hiperinsulinismo familiar de origen
autosmico dominante.
El gen de la glucoquinasa tiene 10 exones, la mutacin de una Timina por una
Citosina se encontr en el codn 455, en el exn 10; es una mutacin
puntual que cambia un aminocido por otro
4.- a) explica los trminos remarcados en negrita
describe la estructura de un cromosoma de una clula eucarionte
Menciona tres posibles causas de mutaciones y tres clases distintas de
mutaciones posibles. Tendr la misma consecuencia una mutacin en una
clula somtica que en una clula germinal? Explica.
d) Diferencia entre cromtidas hermanas y cromosomas homlogos
Representa en un esquema los alelos del gen mutado en los cromosomas
respectivos
Aplicacin clnica II

La otra noche invite a cenar a un grupo de amigos, prepar una rica cena,
comimos con apetito.
Al cabo de una hora Paula, una de las invitadas, comenz a sentirse mal.
Manifest sentir dolores abdominales con caractersticas de clicos, distensin
abdominal, meteorismo. Luego comenz con deposiciones abundantes,
liquidas, explosivas. Ninguno de los otros invitados tuvo sntoma alguno lo que
nos tranquiliz ya que pensamos que no se tratara de una intoxicacin
alimentaria. Llamamos a un servicio de urgencias. Del interrogatorio del mdico
surgi que en varias ocasiones ante la ingesta de ciertos alimentos haba
presentado el mismo cuadro y que siendo an nia le haban determinado un
dficit de la enzima lactasa.
Como yo no conoca estos antecedentes de Paula utilic varios alimentos que
contienen el nutriente que ella no puede digerir.
El deficit de la enzima puede tener distintos origenes.
Puede tener origen gentico. El gen de la lactasa se encuentra en el
cromosoma 2, tiene 17 intrones y codifica para una protena de 1795
aminocidos
Se identificaron 5 mutaciones en la regin codificante. La enfermedad que
afecta a ambos sexos por igual, se presenta como autosmica recesiva.
1.- a) Diferencia entre gen y cromosoma. Que tienen en comn el cromosoma 2
y el 19? En que se diferencian?
b) Explica el significado 5 mutaciones en la regin codificante
c) Cul sera el menor nmero de pares de bases que tiene el gen que codifica
para la lactasa? Justifica. Explica por qu cuando se habla de genes se refiere
a pares de bases y cuando se trata de ARNm a bases.
d) En que te basas para descartar que es una enfermedad hereditaria ligada al
sexo? Y para afirmar que es autosmica recesiva?
e) Explica si todas las enfermedades genticas son hereditarias y si todas las
enfermedades hereditarias son genticas?
La segunda causa es la causa ms comn, 70% de la poblacin mundial, es la
disminucin de la cantidad de lactasa que ocurre luego de la niez y persiste
durante la vida adulta
La lactasa cataliza la reaccin
Lactosa + H2O

glucosa+ galactosa

Esta reaccin tambin es catalizada por H+

2.- a) Compara las propiedades catalticas de la enzima con la de los protones
b) El kcat (velocidad de recambio) de la enzima es 1.6x10 4 moles/s Explica el
significado de este parmetro
Durante la purificacin de la enzima se obtuvo una muestra que contena 0.322
unidades de actividad enzimtica por mg de protena. Explica el significado de
0.322 unidades de actividad enzimtica.
c) El Km de esta enzima es 17.9 mM. Explica el significado de esta afirmacin.
Como cres que es la afinidad de la enzima por su sustrato.
d) Indica que parmetros modifican la actividad de las enzimas. Explica en
cada caso (recuerda el trabajo prctico)

Aplicacin clnica III

Gustavo Gonzlez, profesor universitario, de 61 aos de edad, recibi un
premio acadmico. El hecho deba celebrarse, sus amigos lo invitaron a
celebrar, durante la celebracin ingiri bastante alcohol. A la maana
siguiente amaneci con fuertes dolores en las articulaciones de los dedos del
pie. Al cuarto da de la persistencia del dolor decidi concurrir al Hospital
Universitario. En base a los estudios de laboratorio En base a los estudios se le
diagnostico "gota" una inflamacin en las articulaciones provocada por la
precipitacin de cido rico.
El catabolismo de los nucletidos de purina converge en una ruta comn que
conduce a la formacin de cido rico. Las purinas son metabolizadas por la
enzima xantina oxidasa para formar cido rico
1.- La xantina oxidasa es una enzima que contiene FAD, 4 centros (Fe S) y
Molibdeno en su grupo prosttico. El oxgeno molecular es el aceptor de
electrones en esta compleja reaccin.
a) Escribe con frmulas las reacciones catalizadas por la xantina oxidasa.
b) La xantina oxidasa tiene un complejo grupo prosttico. Explica que es un
grupo prosttico. Todas las enzimas necesitan de grupos prostticos para
actuar? Cul es la funcin del grupo prosttico de esta enzima?

2.- El alcohol se metaboliza de acuerdo a la siguiente reaccin:

alcohol DH
CH3 CH2OH
etanol
NAD+

acetaldehido DH
CH3-COOacetato

CH3 CHO
acetaldehido
NADH

NAD+

NADH

a) Observa la reaccin catalizada por la alcohol dehidrogenasa En esta reaccin el

NAD es una coenzima, cul es su funcin?
b) Diferencia entre coenzima, cofactor y grupo prosttico.
La oxidacin de las bases pricas es catalizada por una oxidasa, la del etanol por
una deshidrogenasa.

c) Se conocen ms de 200 NAD deshidrogenasas. De qu depende que cada una

de estas enzimas sea especfica para un sustrato
3.- La xantina oxidasa, una enzima citoslica, es un importante factor en el dao
observado en procesos de isquemia/reperfusin, especialmente en la mucosa
intestinal. En tejidos no daados, la xantina oxidasa existe como una
dehidrogenasa que utiliza NAD, preferentemente al O 2 en la va de degradacin de
las purinas.
En la hipoxia, la falta de O2 disminuye la fosforilacin del ADP a ATP, el ADP se
degrada y la base es convertida en hipoxantina. En esta circunstancia (hipoxia), se
activa una enzima proteasa que al modificar la estructura de la enzima Xantin
dehidrogenasa, la transforma en xantina oxidasa
Mientras los niveles de O 2 se mantienen bajos no existe problema porque el Km de
la enzima para el oxgeno es alto. Sin embargo, una vez que los niveles de oxgeno
vuelven a los valores normales (durante la reperfusin), la enzima generan perxido
de hidrgeno (H2O2) y anin superxido en el sitio del dao.
4-.- a) Describe la reaccin catalizada por las proteasas.
b) Que transformacin estructural sufri la enzima xantina dehidrogenasa por
accin de la proteasa?
c)Explica porqu esta modificacin se tradujo en un cambio de la actividad cataltica.
d)Explica mediante un grfico de Vo en funcin de la concentracin de oxgeno
porqu no se observan daos tisulares a concentraciones bajas de oxgeno
Gustavo padece gota, una inflamacin en las articulaciones provocada por la
precipitacin de cido rico.
Uno de los tratamientos de la gota es la administracin de alopurinol al paciente
La frmula del alopurinol es la siguiente:
5.- a)Comprala con la frmula de la hipoxantina.
a) De acuerdo a su estructura, que tipo de accin esperaras que ejerza el
alopurinol? Mediante que mecanismo se lleva a cabo esta accin? Explica.
Recuerda, la xantina oxidada tiene molibdeno en su centro activo y el producto de
oxidacin del alopurinol queda fuertemente unido al metal, por eso se dice que esta
droga acta como un inhibidor suicida.
b) Explica porqu se le da esta denominacin.
Dramatizamos el caso de Gustavo? El vino que ingiri Gustavo durante el festejo
estaba adulterado con metanol. El metanol tambin es metabolizado por la enzima
alcohol dehidrogenasa y el producto de su oxidacin, el metanal, es muy txico,
provoca ceguera. El etanol se usa como antdoto en los casos de intoxicacin con
metanol (alcohol de quemar), vale decir a Gustavo, en el hospital le dieron
cantidades grandes de bebida alcohlica para contrarrestar el efecto del metanol.
6.- a) Escribe las frmulas del etanol y del metanol, compralas.
a)
Explica la lgica de usar etanol como antdoto.
b)
Explica que son y cmo se modifican los parmetros: Km, Vmax y Keq de la
enzima alcohol dehidrogenasa en presencia del inhibidor metanol.

c)
Dibuja las curvas correspondientes a velocidad de la reaccin en funcin de
la concentracin de sustrato, en ausencia y presencia del inhibidor y las 1/Vo en
funcin de 1/S. Seala el Km y Vm en cada curva.
d)
Qu opinas sobre la especificidad de la enzima alcohol dehidrogrenasa?
Qu entiendes por especificidad de una enzima? Como la explicas?
7.- Los nucletidos de purina regulan su propia sntesis inhibiendo la enzima
marcapasos de la va
a) Qu es una enzima marcapasos de una va metablica?
b) Qu caractersticas tiene esta enzima?
c) Cul es su importancia?
d) Qu clase de reaccin cataliza esta enzima
reversible o irreversible?

En equilibrio?

cercanas al equilibrio?

alejadas del equilibrio? Explica.

e) Y las dems enzimas de la va? Qu clase de reacciones catalizan?
f) Dibuja la curva de Vo en funcin de S para la enzima involucrada con y sin
inhibidor. Describe las caractersticas de las enzimas involucradas en este tipo de
regulacin. Explica la forma de la curva.
Una de las posibles causas de gota primaria es una alteracin gentica ligada al
cromosoma X, que da lugar a un aumento en la produccin de nucletidos de
purina debido a una hiperactividad de la enzima fosforibosil pirofosfato sintetasa
Se han descripto varias mutaciones en el gen que codifica para la fosforibosil
pirofosfato sintetasa. Una de ellas es una mutacin puntual que produce una
alteracin en el sitio regulatorio de la enzima que es resistente a la inhibicin por
nucletidos de purina. En otros casos la superactividad de la enzima se debe a un
aumento en la concentracin de la enzima normal.
8.- a) Explica el significado de alteracin gentica ligada al cromsoma X.
b) Distingue entre clulas sexuales y cromosomas sexuales.
c)Cules son las caractersticas de la herencia ligada al sexo? Cmo se puede
distinguir de la herencia autosmica dominante?
d) La enfermedad de Gustavo se debe a una mutacin puntual como la que se
menciona en el texto. Si ambos padres de Gustavo son sanos, indica cual es el
fenotipo y el genotipo de los padres y de Gustavo.