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- Amylase
CNPG3. Cintique Liquide
Dtermination quantitative dalpha-amylase (AMS)
IVD
CALCULS
Srum ou plasma A/min x 3954 = U/L AMS
Conserver 2-8C
Urine
PRINCIPE DE LA METHODE
L -amylase hydrolyse lalpha maltotrioside 2-chlore-4-nitrophnyle
(CNPG3) ou 2-chlore-4-nitrophnol (CNP) et forme du maltrioside 2chlore-4-nitrophnyle (CNPG2), du maltotriose (G3) et du glucose (G), en
fonction de la raction suivante:
10 CNPG3 9 CNP + 1 CNPG2 + G3 + G
La vitesse de formation de 2-clhore4-nitrophnol, dtermine
photomtriquement, est proportionnelle la concentration catalytique d amylase de lchantillon1.
Amylase
SIGNIFICATION CLINIQUE
L-amylase (AMS) est une enzyme qui aide dissoudre le
glycogne dans lamidon. Elle se trouve principalement dans les
glandes salivaires et dans le pancras exocrine. Sa dtermination sert
principalement diagnostiquer ou contrler les maladies du
pancras telles que la pancratite chronique ou aigue. Elle permet
aussi la maladie de la vsicule biliaire,
de dtecter certains
problmes gastro-intestinaux et dautres types de troubles2, 5,6.
Le diagnostic clinique doit tre ralis en prenant compte des
donnes cliniques et de laboratoire.
REACTIFS
MES pH 6,0
CNPG3
Chlorure sodique
Actate calcique
Tiocianate potassique
Acide sodique
100 mmol/L
2,25 mmol/L
350 mmol/L
6 mmol/L
900 mmol/L
0,95 gr/L
CONTROLE DE QUALITE
Il est conseill danalyser conjointement les chantillons de srum dont les
valeurs ont t contrles : SPINTROL H Normal et pathologique (Rf. 1002120
et 1002210).
Si les valeurs se trouvent en dehors des valeurs tolres, analyser linstrument,
les ractifs et le calibreur.
Chaque laboratoire doit disposer de son propre contrle de qualit et dterminer
les mesures correctives mettre en place dans le cas o les vrifications ne
correspondraient pas aux attentes.
VALEURS DE REFERENCE3
Srum ou plasma
Jusqu 90 U/L d -amylase
Urine
Jusqu 450 U/L de -amylase
Ces valeurs sont donnes titre dinformation. Il est conseill chaque
laboratoire de dfinir ses propres valeurs de rfrence.
CARACTERISTIQUES DE LA METHODE
Gamme de mesures: Depuis la limite de dtection 0,2439 U/L jusqu la limite
de linalit 2000 U/L.
Si la concentration de lchantillon est suprieure la limite de linarit, diluer
1/2 avec du ClNa 9 g/L et multiplier le rsultat final par 2.
Prcision:
PREPARATION
Ractif prt lemploi.
Moyenne (U/L)
SD
CV (%)
CONSERVATION ET STABILITE
Tous les composants du kit sont stables jusqu la date de premption
indique sur ltiquette du flacon, et si les flacons sont maintenus
hermtiquement ferms 2-8C, labri de la lumire et des sources de
contamination. Ne pas utiliser les ractifs en dehors de la date indique.
Une fois ouvert, le ractif reste stable pendant 60 jours, sil est referm
immdiatement aprs utilisation et sil se conserve 2-8C.
Indices de dtrioration des ractifs:
- Prsence de particules et turbidit.
- Absorbation du blanc 405 nm> 0,50.
MATERIEL SUPPLEMENTAIRE
-
ECHANTILLONS
PROCEDURE
1.
2.
3.
Conditions de test:
Longueur dondes: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 405 nm
Cuvette:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm dclairage
Temprature . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37C
Rgler le spectrophotomtre sur zro en fonction de leau distille
Pipetter dans une cuvette:
R (mL)
Echantillon (L)
Srum ou plasma
1,0
20
Urine
1,0
10
13/02/14
INTERFERENCES
Lhmolyse a une incidence sur les rsultats1. Lactivit de l -amylase peut
tre inhibe par des agents de chlation tels que le citrate et l EDTA.
Diffrentes drogues ont t dfinies, ainsi que des substances qui interfrent
dans la dtermination de l -amilase3,4.
REMARQUES
L-amylase dpend de la temprature, les essais raliss des
tempratures de <37C ou >37C peuvent faire varier les rsultats.
2.
La salive et la sueur contiennent de l -amylase. Eviter la pipette avec la
bouche et le contact de la peau avec le ractif ou la substance employe.
3.
Contient du Tiocianate potassique. Eviter linhalation ou le contact du
ractif avec les yeux ou la peau. Dans ce cas, laver la peau et les yeux
grande eau et consulter un mdecin.
4. SPINREACT dispose de consignes dtailles pour lapplication de ce
ractif dans diffrents analyseurs.
1.
BIBLIOGRAPHIE
1.
2.
3.
4.
5.
6.
PRESENTATION
Rf: 41201
Rf: 41202
Cont.
R : 20 x 2 mL
R : 2 x 60 mL