Beneficioso suicidio: por qu los neutrfilos

morir para hacer redes

Volker Brinkmann y Zychlinsky Arturo
Resumen | Los neutrfilos son uno de los principales tipos de clulas efectoras en la
inmunidad innata
sistema y se muestra en primer lugar para matar con eficacia los microorganismos por
fagocitosis ms
que hace 100 aos. Recientemente, sin embargo, se ha encontrado que los neutrfilos
estimulados
Tambin puede producir estructuras extracelulares llamados neutrfilos trampas
extracelulares (TNE)
que capturar y matar a los microorganismos. En este artculo se Progreso ofrece una visin
general de la
estructura, funcin y generacin de redes, y su papel en las infecciones.
Los neutrfilos son las clulas efectoras esenciales de
el sistema inmune innato. Maduran
en la mdula sea y, cuando terminalmente
diferenciados, que son liberados en el
torrente sanguneo, donde tienen una vida media de
slo unas pocas horas. En condiciones normales,
neutrfilos constituyen alrededor del 60% de todos los
los glbulos blancos en humans1. En sana
la mayora de los individuos los neutrfilos estn destinados a
se borrar sin ejecutar su funcin.
Durante la infeccin, sin embargo, los neutrfilos
son uno de los primeros tipos de clulas para ser reclutados
inflamatorias a los sitios, donde tienen un papel crucial
papel en la eliminacin de los microorganismos.
Para una revisin reciente sobre los neutrfilos elegante,
los lectores pueden consultar REF. 2.
Los neutrfilos son tambin conocidos como polimorfonucleares
clulas o granulocitos, que se refieren a
su morfologa y caractersticas de tincin
(Figura 1a). Tienen una nica polimrfico
ncleo que, en los seres humanos, est segregada en
3-5 lbulos, cada uno con un dimetro de aproximadamente
2 micras. Se cree que esta disposicin
podra hacer que el ncleo ms flexible
y permitir que los neutrfilos para pasar a travs de huecos
en el endotelio. El plazo de granulocitos
se refiere a una caracterstica morfolgica segundo
de los neutrfilos: estas clulas tienen numerosas
grnulos en el citoplasma que estn especializados
lisosomas que contienen hidrolasas cidas y
pptidos antimicrobianos. Subconjuntos especficos de

grnulos se producen durante la maduracin

en la mdula sea. Hay tres grandes
grupos de grnulos - primarias, secundarias
y terciaria. Primaria, o azurfilos, grnulos
desarrollar en primer lugar y contienen mieloperoxidasa;
grnulos secundarios o especficos desarrollar
prximo y se caracterizan por una falta de peroxidasa
y la presencia de la lactoferrina, y
grnulos terciarios, que contienen gelatinasa
y receptores de la superficie, se forman durante un
una etapa posterior de la maturation4.
Los neutrfilos maduros salen de la mdula sea,
entrar en la circulacin y son reclutados
al sitio de la infeccin por inflamatoria
mediadores que inducen la expresin de
E-o P-selectina en la superficie de clulas endoteliales
Las clulas, que se unen a mucinas en los neutrfilos
superficie de la clula. Una vez unido, el
neutrfilos empezar a rodar sobre el endotelio
superficie. Aqu, las quimioquinas, tales como
interleucina (IL) -8, factores del complemento, como
como C5a, y N-formil-pptidos a partir de bacterias
pueden activar los neutrfilos, que comienzan
para expresar las integrinas, tales como lymphocytefunctionantgeno asociado 1 (LFA-1 tambin
conocida como ITGAL). Las integrinas se unen a
molculas de adhesin celular que pertenecen a la
superfamilia de inmunoglobulina (intercelular
molculas de adhesin, o ICAM) en la superficie
de las clulas endoteliales y establecer un apretado
adherencia que los arrestos migracin de los neutrfilos.
Siguiendo un gradiente quimiotctico, neutrfilos
a continuacin, recorrer a travs del endotelio
lagunas y migran hacia los tejidos infectados
Fagocitosis y muerte intracelular
Ms de 100 aos, fue Metchnikoff
el primero en describir cmo los fagocitos engullen
microorganismos en la membrana
compartimento que ahora se conoce como la
phagosome6. Los fusibles fagosoma con
grnulos para producir un fagolisosoma, en
que los microorganismos estn expuestos
simultneamente a los pptidos antimicrobianos,
las enzimas y las especies reactivas del oxgeno (ROS).
Estos componentes sinergizar y eficazmente
matar los microorganismos. La fusin de la
grnulos con el fagosoma evita que el

la liberacin extracelular de su potencial

componentes nocivos. Despus de la fagocitosis,
neutrfilos muchos sufren apoptosis en una
proceso que requiere CD11b/CD18 (Mac1),
la produccin de ROS y la activacin de
caspases7, 8. Neutrfilos apoptticos son rpidamente
eliminado por los macrfagos, impidiendo que el
liberacin de protenas de neutrfilos que pueden causar
tejido damage9, 10.
Los neutrfilos matan a los microorganismos a travs de
oxgeno-independiente y dependiente de oxgenomecanismos. El oxgeno-independiente
mecanismos incluyen la liberacin de pptidos
y protenas de los grnulos, tales como
bactericidas aumento de la permeabilidad, las protenas
(BPI), defensinas y cathelicidins11.
Aunque estas protenas son estructuralmente y
evolutivamente relacionados, todos ellos son altamente
catinico. La carga positiva, probablemente medie
la unin inicial de los microorganismos,
como las superficies de las bacterias y los hongos son
principalmente aninico. Una vez consolidado, a los antimicrobianos
protenas podran perturbar la integridad del
membrana bacteriana, aunque la detallada
mecanismos implicados en la toxicidad no son todava
entendido.
El antimicrobiano oxgeno-dependiente
muerte comienza con el montaje de la multimrica
NADPH oxidasa complejo enzimtico
en la membrana phagosomal. Este complejo
NADPH se oxida, liberando dos electrones
que se transfieren a O2. Esto da como resultado
en la formacin de superxido (O2
-),
que dismuta - ya sea de forma espontnea
o catalticamente (impulsado por la superxido dismutasa
(SOD)) - en perxido de hidrgeno
(H2O2). El H2O2, a su vez, se convierte a
hipoclorito (HOCl) por mieloperoxidasa
(MPO). Estos ROS son esenciales para las bacterias
matando y se cree que funcionan por
protenas oxidantes, cidos nucleicos y otros
molecules12. Debido a su corta vida media que
ha sido difcil demostrar que ROS
los niveles de fagolisosomas llegar a microbicida
concentraciones. Curiosamente, sin embargo,
microorganismos que codifican SOD, que convierten O2

de H2O2, son ms resistentes a

asesinato de neutrfilos. Adems, los pacientes
sufriendo granulomatosa crnica
enfermedad (EGC) son portadores de mutaciones en uno de
las subunidades de la NADPH oxidasa y sufren
de las infecciones catastrficas.
NET: un mecanismo de muerte extracelular
Un nuevo mecanismo antimicrobiano para
neutrfilos ha sido descrita recientemente.
Neutrfilos trampas extracelulares (TNE) son
estructuras extracelulares que se componen de
cromatina, con protenas especficas de la
grnulos neutrfilos attached14 (Fig. 1B, C).
NET son estructuras complejas compuestas
de superficie lisa de los hilos ', de aproximadamente 15 nm
de dimetro, que es probable que representan un
cadena de nucleosomas de desplegado de la cromatina.
La cromatina se piensa que comprende
la columna vertebral de estas estructuras, como las redes pueden
ser degradado por DNasas pero no por las proteasas.
De alta resolucin de escaneo de electrones
microscopa de barrido (SEM), revel que la RED
temas estn llenos de extensiones variables con
globuli de 30-50 nm de dimetro (Fig. 1c).
Varios de los hilos de puede enrollarse en los cables de los
que puede ser de hasta 100 nm de dimetro. Estos
Los cables pasan a formar complejo tridimensional
estructuras que, mediante SEM, se asemejan a las redes
cubriendo las reas de m2 varios. En lapso de tiempo
microscopa de fluorescencia de los neutrfilos,
TNE parecen ser flexible y rodean el
clula de la cual se originaron. En efecto, se
parecen nubes, probablemente porque las redes
estn flotando en los medios de comunicacin, al igual que las algas en
agua, y por tanto es difcil analizar
la estructura de los TNE no fijadas.
Cmo y cuando las redes se forman
Tras la activacin (por IL-8, lipopolisacrido
(LPS), bacterias, hongos o las plaquetas activadas)
neutrfilos iniciar un programa que lleva a
su muerte y la formacin de redes. En nuestro
manos, in vitro, aproximadamente un tercio de
neutrfilos activados hacer redes. Esta activacin
va puede implicar diferentes receptores,
tales como los receptores Toll-like (TLRs),
as como citoquinas y Fc receptors14, 15.

Los microorganismos inducen ms redes que son

estimulacin inducida siguiente con solo
Activadores de TLR, y los granos cubiertos con
anticuerpos, pero no anticuerpos en solucin,
tambin inducen NETs16, 17. Estos resultados sugieren
que la estimulacin simultnea de varios
receptores, y su consecuente fsica
contratacin, se requiere de manera efectiva
NET de activacin.
La estimulacin de los receptores mencionados
por encima de se activa la protena quinasa C (PKC),
que inicia una cascada de transduccin de seal
que induce el ensamblaje y la activacin de
el complejo de la NADPH oxidasa, tal como se describe
anteriormente. Hay cuatro lneas de evidencia de que
indican que ROS son necesarios para la formacin NET.
En primer lugar, el H2O2, que es el producto de
la dismutacin de O2
-, Es un potente inductor
de los TNE en concentrations16 fisiolgica. Lo
Es importante sealar que el H2O2, en oposicin
de O2
-, Es membrana permeable y tiene un
vida media ms larga que la de O2
-, Lo que sugiere que
H2O2 exgeno podra apuntar el mismo
molculas como la producida endgenamente
H2O2. La segunda lnea de evidencia de la
requisito de ROS en la formacin de NET es el farmacolgico. El inhibidor de la oxidasa
difenileno yodonio (DPI), en el
la concentracin mnima necesaria para bloquear la
explosin respiratoria, tambin bloquea la formacin
de los TNE. La tercera lnea de la evidencia es que
exgeno catalasa, que degrada H2O2
al oxgeno molecular y agua, bloques NET
formacin, mientras que un inhibidor de la catalasa,
3-amino-1 ,2,4-triazol, aumenta NET
formacin. Last, y lo ms importante, los neutrfilos
que estn aislados de pacientes con EGC
no para hacer redes cuando se estimula con
bacterias o acetato de forbol miristato
(PMA), es decir, cuando se estimula aguas arriba
de la NADPH oxidasa. Curiosamente, estos
neutrfilos se hacen las redes cuando estn
aguas abajo estimuladas de la NADPH oxidasa
con H2O2. Aunque un papel para NETS in vivo
todava no se ha demostrado de manera inequvoca, el

susceptibilidad de los pacientes con EGC a microbiana

infecciones podra ser debido, al menos en parte,
al fracaso de sus neutrfilos para hacer
NET. La actividad antimicrobiana de ROS
estn bien established17 .. En un estudio reciente no se
sugiri que las ROS actan como segundos messengers18.
El requisito de ROS en la formacin de NET
indica que las ROS tambin actan como segundos
mensajeros en esta va, la promocin de la
eventos de sealizacin en que culminan
en la formacin de NET.
NET es la formacin de un proceso activo que
implica la reordenacin de la central nuclear
y la arquitectura granular (figura 2). Bajo NET
condiciones de activacin, in vitro, neutrfilos
aplanan y se hacen mviles y fagoctica,
y los picos de rfaga respiratorias dentro del
primera hora de activation16. Observaciones con
lapso de tiempo de vdeo microscopa, as como
un examen tiempo-curso con la transmisin
microscopa electrnica (TEM), tienen
demostrado que en los primeros 60 minutos de
la activacin no hay cambios importantes en la
morfologa del ncleo o los grnulos.
Posteriormente, el ncleo comienza a perder el
lobulillos y los segrega en la cromatina transcripcionalmente activo (eucromatina) y
inactivos (heterocromatina) regiones. La
resultado es una estructura globular casi lleno
con la cromatina amorfo. Las dos membranas
de la envoltura nuclear gradual
independiente. Ciento veinte minutos
despus de la estimulacin, la continuidad del
envoltura nuclear se pierde y se desintegra
en una cadena de vesculas individuales. As, el
karyoplasm y el citoplasma ya no son
separaron y la cromatina entra en
contacto directo con los componentes citoplasmticos.
Al mismo tiempo, los grnulos gradualmente
disolver. Como resultado, despus de 180 minutos de
activacin, NET se pueden mezclar libremente
en los cell16 y 15-60 minutos despus de que,
NET son liberados.
El uso de marcadores de muerte celular y NET
formacin en experimentos de microscopa de vdeo,
se ha demostrado que NET
componentes son liberados en el momento en el
se rompe la membrana celular y la clula muere;

dependiendo de las condiciones experimentales,

esto ocurre 45-240 minutos despus de la activacin.
Desde la primera descripcin de NETs14, era
No est claro si los neutrfilos de vida liberada
NET de forma activa, porque en ese tiempo NET
formacin no podran ser controlados directamente.
Sin embargo, una vez que un mtodo de microscopa de vdeo
que permiti el control simultneo de
la viabilidad celular y la liberacin de componentes NET
Se desarroll, se demostr que
los neutrfilos estn vivos hasta que los Nets estn
released16. Por el contrario, Clark y colegas
han encontrado que las redes se hacen slo unos minutos
despus de la activacin por trombocitos estimulados
bajo flujo de condiciones15. Las condiciones de
estos dos experimentos fueron diferentes, sin embargo,
y sera interesante para comparar
lado a lado usando mtodos cuantitativos.
Esta forma de muerte celular, que en un
revisin reciente se denomina "NETosis'19, es
claramente diferentes de apoptosis y
necrosis. Aunque los ncleos de necrtico
las clulas pierden la segregacin entre la UE y
heterocromatina nuclear intacta dentro de un
sobre, exhibicin de ncleos apoptticos con fuerza
cromatina condensada y se separan en
unidas a la membrana varios cuerpos apoptticos.
Por el contrario, los neutrfilos activados gradualmente
disolver sus membranas nucleares y los
grnulos, permitiendo as que la mezcla de componentes NET
en la cytoplasm16. Adems de
las caractersticas morfolgicas se describe
anteriormente, la muerte celular que conduce a NET
formacin es nica, ya que no hace
requieren las caspasas y no se acompaa de
Fragmentacin del ADN, pero no es el resultado de una
interrupcin directa de la membrana celular, tales
como ocurre cuando las clulas son atacados por bacterias
toxinas o complemento.
Aunque varios laboratorios han
NET observados en modelos animales diferentes,
la resolucin de las micrografas obtenidas
no permiti que la estructura detallada de los TNE
que se determina in vivo. Es probable que
en rganos slidos, tales como el hgado y el cerebro, los
La distribucin de redes es muy limitado

por los tejidos circundantes. En otros casos,

por ejemplo, cuando los neutrfilos colonizar
los alvolos pulmonares o el lumen del
intestino, NET se expanden ms easily14, de 21 aos. La
pregunta ms relevante, sin embargo, es si
los Nets tienen un rol en vivo. La manipulacin de
NET genticamente es difcil, ya que su principal
componentes, el ADN y las histonas, obviamente
no se puede quitar. El antimicrobiano
componentes de los grnulos y los
citoplasma es probable que sean redundantes, de modo
la eliminacin de uno de estos no podra afectar a
La actividad de NET. La presencia de los TNE tiene
ha demostrado en el tejido inflamado asociado
con apendicitis humana y un conejo
modelo de shigellosis14. Adems, era
demostrado recientemente que las redes tienen un
papel durante infections20 in vivo, de 21 aos.
La estructura de las redes es crucial
para proporcionar altas concentraciones locales de
antimicrobianos y por lo tanto para su bactericida
actividad. A medida que su columna vertebral estructural es
compuesta de la cromatina, las redes se destruy
por DNasas. De hecho, el tratamiento breve con
DNasa suprime muerte microbiana en vitro14.
Curiosamente, varios patgenos Gram-positivas
DNasas secretan o DNasas han consolidado
a su pared celular, aunque el papel de estas
nucleasas en la patognesis bacteriana no es
entiende completamente. Recientemente, y Sumby
colegas demostraron que las cepas del grupo A
Streptococcus (GAS), que no secretan
DNasas eran significativamente menos patgena
que la isognicas de tipo salvaje strains30.
Aunque la degradacin de los TNE no era
demuestra directamente que se argument que la
una mayor virulencia de la DNasa-positivo
las cepas fue el resultado de esta fragmentacin.
Prueba directa de que las redes de desempear un papel
durante la infeccin fue proporcionada por dos
grupos, que de forma independiente mostraron que
DNasa-que expresan las cepas de GAS y
S. pneumoniae puede escapar a la muerte por TNE
y son patgenas tanto, ms que las cepas
sin DNasas. Buchanan y sus colegas
utilizar cepas de gas en el que los DNasas
haba sido inactivado en un modelo murino de

fascitis necrotizante. Encontraron 100 veces

menos DNasa deficientes en las bacterias en la piel
las lesiones en comparacin con las cepas salvajes.
A la inversa, la introduccin de expresin DNasa
DNasa en cepas deficientes como resultado
en un aumento significativo en el tamao del
lesiones de la piel y en la proliferacin bacteriana
en vivo20. Aunque la cantidad de neutrfilos
la infiltracin en el tejido infectado fue similar,
NET slo poda ser visualizado en el sitio
de las infecciones con DNasa cepas deficientes.
Cuando la actividad DNasa se inhibe especficamente
con G-actina, el tamao de la inducida
lesiones de la piel se redujo significativamente.
Un mecanismo similar se demostr
para S. pneumoniae. El EndA DNasa fue
demostrado que degradan TNE in vitro. Durante
la infeccin por S. pneumoniae, las redes se
formado en el pulmn y pueden ser degradados
por DNasa-expresin de las cepas. As, estos
cepas pueden difundir, y significativamente
ms bacterias se encuentran en el pulmn y
torrente sanguneo en comparacin con isognica DNasedeficient
cepas que son menos virulent21. NET
tambin tienen un papel que desempear en la sepsis. Clark et al.
demostraron recientemente que las plaquetas activadas
inducir a los neutrfilos para hacer redes en el
sinusoides del hgado y de pulmn en un estudio in vivo
modelo de sepsis15. Despus de la administracin
de LPS, las plaquetas se activan a travs
TLR-4 y se adhieren a los neutrfilos en el hgado
sinusoides. In vitro, esta interaccin causa
los neutrfilos para producir dentro de los TNE
minutos que eran capaces de unirse a las bacterias
bajo condiciones de flujo. In vivo, Clark et al.
encontr ms bacterias en los TNE que se
fagocitados por los neutrfilos y los macrfagos,
lo que sugiere que en este modelo de sepsis,
atrapar a las bacterias en los TNE es ms eficaz
de fagocitosis.
Punto de vista
Parece plausible que la formacin de NET es un
mecanismo comn de la inmunidad innata
sistema en los vertebrados, como se ha observado
en humans14, 31, mice20-22, rabbits14, horses32,
cows33 y fish34. Experimentos con bacterias
que secretan DNasas indican la importancia

papel de las redes para el control de infections20, de 21 aos.

En un modelo animal de sepsis, se demostr
que la activacin de neutrfilos por las plaquetas conduce
a una rpida formacin NET que podra ser ms
eficaz que phagocytosis15. Adems, se
Es probable que las consecuencias catastrficas de
CGD se debe, al menos en parte, a la incapacidad
de estos pacientes para hacer NETs16.
La formacin de redes tambin puede
tener consecuencias negativas. Los pacientes con
enfermedades autoinmunes, como lupus eritematoso sistmico
eritematoso sistmico (LES), desarrollan anticuerpos
a components35 de la cromatina y granular.
Estos anticuerpos mediar en una patolgica
reaccin en contra de uno mismo. Es posible que el
fuente de antgenos en el LES son las redes que son
ya sea producido en el momento equivocado, en el
mal lugar o en la cantidad incorrecta, o
que no se puede desmontar de manera eficiente. Adems,
la formacin de redes podran ser patgenos
en s mismo cuando se produce en exceso,
por ejemplo en pacientes con fibrosis qustica,
cuando los pulmones se llenan con la cromatina.
En efecto, DNasas se utilizan actualmente para degradar
este material en los pulmones de estos pacientes. Lo
Todava no est claro si este tratamiento podra tener
consecuencias negativas debido a la liberacin de
NET nocivos en el tejido pulmonar,
aunque se ha demostrado que algunos de los
enzimas granulares se inhibe eficazmente
por el ADN, incluso si los fragmentos son ms pequeos
de 0,5 kb36.
Bajo condiciones de NET-estimulantes,
neutrfilos someterse a una profunda morfolgico
cambios que implican el ncleo y
grnulos que permiten a los componentes de la TNE
mezclar libremente. Cuando la clula revienta,
este material se libera y se desenvuelve en un
estructura fibrosa que ocupa un volumen que
es varias veces mayor que la de la clula que
origin. Este mecanismo mejora
la eficacia antimicrobiana de los neutrfilos
tanto en el tiempo y el espacio, como las redes pueden matar
microorganismos que no tienen contacto directo
con la clula, y son activas incluso cuando
el recuento de neutrfilos ha muerto. En aos recientes, se
Ha quedado claro que las redes no son slo una

importante mecanismo inmune innato, pero

tambin estn involucrados en procesos que van desde
infertilidad (RECUADRO 1) 32,37 a diseases31 autoinmune, de 38 aos.
Ser emocionante para desentraar ms
las facetas de esta estructura nica y de uso del
los conocimientos adquiridos para disear teraputica nueva
estrategias.
_________________
Neutrfilos trampas extracelulares y las enfermedades no infecciosas
Neutrfilos trampas extracelulares (TNE) tambin se han propuesto tener un
papel en no infecciosa
enfermedades. Un ejemplo se encuentra en pre-eclampsia, una grave
enfermedad relacionada con el embarazo y un importante
la causa de la mortality39 fetales y maternos. Se cree que la etiologa de esta
enfermedad implica un
hiper-reaccin del sistema inmune materno en la placenta, posiblemente
desencadenada por la elevada
liberacin de micropartculas sinciciotrofoblasto inflamatorias (STBMs). Estas
micropartculas se desprenden
en grandes cantidades por el sincitiotrofoblasto y se ha demostrado para
desencadenar la formacin NET en un
tiempo y dependiente de la dosis manner31. Los niveles elevados de ADN
liberado materna se correlacionan fuertemente
con la gravedad de la disorder38. Gupta et al. sugiri que la formacin de
redes en el
espacio intervelloso reduce el transporte de oxgeno a travs de la placenta,
que conduce a la hipoxia en el feto,
que puede conducir a loss31 fetales.
Curiosamente, NET tambin parecen estar involucrados en la fertilizacin. La
presencia de DNasa en seminal
de plasma se ha asociado con una mejor fertility37, pero la importancia de este
hallazgo no fue
entendido. Durante la inseminacin en caballos, hay una modesta respuesta
inflamatoria en el
tracto reproductivo de las yeguas. Los neutrfilos se infiltran en el sitio y
producir TNE en el lumen del
el tracto reproductor y esto ha sido demostrado para disminuir el riesgo de
infecciones bacterianas durante
la cra. Los espermatozoides de los sementales que han reducido la cantidad de
DNAsa en su plasma seminal,
quedan atrapados en las redes y no llegan a la site32 fertilizacin. La presencia
de niveles normales de DNasa,
sin embargo, conduce a la digestin de las redes, la liberacin de los

espermatozoides y la fecundacin entrelazados.

Figura 1 | Los neutrfilos y los neutrfilos trampas extracelulares (redes). NET

pueden atrapar bacterias Gram-negativas
bacterias, bacterias Gram-positivas y hongos. un | Una transmisin micrografa
electrnica que muestra una
unstimulated neutrfilos humanos. b | Un microscopio electrnico de barrido
(SEM) que muestran neutrfilos estimulados
TNE formadoras (como se indica por la flecha). c | Un SEM que muestra una
vista detallada de los TNE de captura
Shigella flexneri. Los 'hilos' (t), dominios globulares (G) y cables (C) se indican.
d | Un SEM que muestra
NET captura de Staphylococcus aureus. e | Un SEM mostrando NET captura
Candida albicans. La
barras de escala representan 5 micras de a, 10 micras de B y E, de 100 nm
para el C y 1 micras para d.

Los pasos que conducen a la trampa de neutrfilos extracelular (NET)

formacin. a | micrografas fluorescentes que muestran los pasos necesarios
para NET
formacin. b | Una representacin esquemtica de estos eventos. La activacin
conduce
a la formacin de especies de oxgeno reactivas (paso 1). Las membranas
nucleares
a continuacin, comienzan a desintegrarse en una cadena de vesculas y la
integridad del
grnulos se pierde gradualmente (paso 2). Ncleos luego perder sus lbulos y
el material nuclear llena la mayor parte de la clula, la mezcla con el contenido
del
grnulos (paso 3). Durante la etapa final, la integridad nuclear y granular
perdido por completo. Esto se muestra en la superposicin homogneos de la
fluorescencia
canales en el paso 3 en una. Las clulas de redondear al alza, contrato y
finalmente liberar
TNE (paso 4). c | Una micrografa electrnica de transmisin de los neutrfilos
en el paso
2 en el proceso. Las flechas indican la desintegracin de la membrana nuclear,
que permite que los karyoplasms para mezclar con el citoplasma. Esto tambin

es
se muestra en el patrn de tincin parcial homognea en la etapa 2 en una.