ESPECTROSCOPIA DE ABSORCION MOLECULAR ULTRAVIOLETA-VISIBLE.

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TEMA 8.-ESPECTROSCOPIA DE ABSORCION MOLECULAR ULTRAVIOLETA Y

VISIBLE
1.-Introduccin
2.-Sistemas absorbentes
3.-Sistemas conjugados
4.-Influencia del disolvente en las transiciones
5.-Definiciones bsicas
6.-Instrumentacin
7.-Fuente de energa radiante
8.-Monocromadores
9.-Celdas de muestras
10.-Detectores de radiacin
11.-El espectrofotmetro
12.-Aplicaciones analticas
13.- Bibliografa.

1. Introduccin
La Espectroscopia Ultravioleta y Visible fue uno de los primeros mtodos fsicos que se
aplicaron al anlisis cuantitativo y a la determinacin de estructuras moleculares. La tcnica de
espectroscopia UV-V destaca en el anlisis cuantitativo, siendo mejorada en la determinacin
de estructuras por otras tcnicas, como espectroscopa infrarroja y resonancia magntica
nuclear. La Espectroscopia Ultravioleta y Visible es una tcnica de absorcin molecular.
La regin espectral correspondiente al ultravioleta y visible va desde el UV lejano con
longitud de onda entre 10 y 200 nm (tambin UV de vaco porque el O2 absorbe en esta regin
justo por debajo de 200 nm y es preciso hacer el vaco), UV prximo entre 200 y 400 nm, y
visible entre 400 y 800 nm, figura 8.1. La zona del ultravioleta de vaco no es de aplicacin
prctica.
Tanto la radiacin ultravioleta como la visible se caracterizan porque al ser absorbidas
por la materia provocan la excitacin de los electrones exteriores a niveles de energa
superiores. Los electrones de enlace, fuertemente ligados, requieren mayor energa ( ms
cortas), mientras que los no compartidos se excitan con ms baja
energa.

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Figura 8.1.-Regiones ultravioleta y visible del espectro y tipos de bandas de absorcin ms

frecuentes.

2. Sistemas absorbentes
Las radiaciones electromagnticas correspondientes a la regin del UV-Vis. aportan la
energa suficiente para que tengan lugar transiciones electrnicas entre orbitales *; n*;
*; n*, transferencia de cargas y, por ltimo, de campos ligandos.
Por otra parte, la intensidad de absorcin en cada una de estas transiciones depende de la
absortividad molar , que est en funcin del tamao de la especie absorbente y de la
probabilidad de transicin (proporcional al nmero de impactos que producen absorcin).
Los electrones que son capaces de absorber radiacin UV y Vis. son:
Electrones que forman parte del enlace entre tomos y por tanto asociados a ms
de un tomo. Es sabido que cuando se combinan dos orbitales atmicos resulta
un orbital molecular enlazante de baja energa y un orbital molecular
antienlazante de alta energa; en estado fundamental la molcula tiene los
electrones de enlace ocupando el nivel ms bajo de energa, es decir, el orbital
enlazante.
Electrones no compartidos situados en tomos como nitrgeno, oxgeno, azufre
y halgenos.
En la figura 8.2 se representan los niveles electrnicos de energa molecular y las
transiciones entre ellos, expuestas con anterioridad.
Transiciones *: a partir de dos orbitales atmicos s se forman los orbitales
moleculares y *.Como se observa en la figura 8.2, la energa requerida para esta transicin es
muy elevada y corresponde a radiaciones electromagnticas con en la regin del ultravioleta
lejano; es el caso del C-H con un mximo de absorcin a 125 nm, o el C-C a 135 nm.

ESPECTROSCOPIA DE ABSORCION MOLECULAR ULTRAVIOLETA-VISIBLE. 81

Figura 8.2.-Niveles electrnicos de energa molecular.

Transiciones n*: se presentan en los compuestos orgnicos saturados que disponen
de tomos con pares de electrones no compartidos como -C-O, -C-S, -C-N, -C-Cl, etc. Estas
transiciones requieren menos energa que las anteriores, y se producen con radiaciones
electromagmticas de longitudes de onda comprendidas entre 150 y 200 nm.
Transiciones * y n*: se dan en compuestos orgnicos insaturados C=C, C=O,
CC, etc., la primera transicin (*), y en compuestos orgnicos insaturados que contienen
tomos con electrones no compartidos, la primera y segunda transicin, figura 8.3.

Figura 8.3.-Representacin esquemtica de las transiciones * y n* del grupo

carbonilo.
En la tabla 8.1 se muestran los mximos de absorcin correspondientes a estas
transiciones en algunos grupos funcionales; se puede apreciar que mientras las transiciones
* no dependen prcticamente de los tomos que forman el enlace (longitudes de ondas
parecidas), en las transiciones n*, la transicin depende del tomo al que se encuentran
unidos los electrones no compartidos.
Las longitudes de onda a las cuales tienen lugar las transiciones * estn
comprendidas entre 160 y 200 nm y entre 280 y 700 nm para las transiciones n*. La
intensidad de las bandas de absorcin del sistema * es de 10 a 100 veces superior a las
bandas de absorcin de los restantes saltos electrnicos. La figura 8.4 presenta varias
transiciones en orden creciente de energa.

ESPECTROSCOPIA DE ABSORCION MOLECULAR ULTRAVIOLETA-VISIBLE. 82

Figura 8.4 Transiciones electrnicas en orden creciente de energa

Transiciones de transferencia de carga. Se presentan en complejos inorgnicos en los
que una parte acta como dador de electrones y otra como aceptor. El estado excitado es fruto
de un proceso de oxidacin-reduccin interno. Presentan absortividades molares muy altas, >
10.000.
Transiciones de campo ligando. Se presentan en complejos de iones de metales de
transicin que implican electrones d y f.
TABLA 8.1. Mximos de absorcin correspondientes a las transiciones * y n*
para algunos grupos funcionales
Transiciones, nm
Grupos funcionales

* (absorcin intensa)

n* (absorcin dbil)

C=C

170

No absorbe

CC

170

No absorbe

C=O

166

280

C=N

190

300

N=N

340

C=S

500

N=O

665

3. Sistemas conjugados
Son aquellos sistemas que poseen enlaces dobles y sencillos de forma alternada
(-C=C-C=C) o (-C=C-C=O). Los sistemas conjugados presentan las transiciones * y n*
a longitudes de onda mayores, as como un aumento en la intensidad de absorcin. Como
ejemplo de lo primero, el sistema no conjugado (-C=C-) absorbe a 170 nm; el sistema
conjugado (-C=C-C=C-) absorbe a 200 nm; el sistema doblemente conjugado
(-C=C-C=C-C=C-) absorbe a 260 nm.

ESPECTROSCOPIA DE ABSORCION MOLECULAR ULTRAVIOLETA-VISIBLE. 83

La explicacin a este fenmeno est en que los orbitales de cada doble enlace
interaccionan para formar un nuevo conjunto de orbitales enlazantes y antienlazantes. Como se
observa en la figura 8.5, la distancia entre un orbital enlazante y otro antienlazante se hace
menor, aumentando, por tanto la longitud de onda de la radiacin absorbida.

Figura 8.5.-Diagrama de los niveles de energa y las transiciones electrnicas para el

etileno y el butadieno.

4. Influencia del disolvente en las transiciones

El disolvente no debe presentar absorcin en la zona del ultravioleta prximo ni en el
visible, pudiendo absorber en el ultravioleta lejano. Los disolventes ms utilizados son:
Hidrocarburos saturados, transiciones *, < 150 nm
Metanol, n *, = 177 nm
Eter dietlico, n *, = 188 nm
En las transiciones *, los estados excitados son ms polares que los estados
fundamentales. Un aumento en la polaridad del disolvente hace que, por la interaccin
dipolo-dipolo, disminuya ms la energa del estado excitado que la del estado fundamental, lo
que produce un desplazamiento a longitudes de onda de absorcin superiores entre 10 y 20 nm.
A este efecto se le llama "efecto batocrmico" -desplazamiento al rojo-.
En el caso de tomos con electrones no compartidos se forman puentes de hidrgeno
entre los protones del disolvente polar (agua, alcoholes) y el par de electrones no compartidos,
por lo que la transicin n* requiere ms energa y hay un desplazamiento a longitudes de
onda de absorcin ms cortas "efecto hipsocrmico" -desplazamiento al azul-.

5. Definiciones bsicas
Espectro UV-Vis. Es la representacin grfica de la absorbancia de una sustancia
sometida a radiacin ultravioleta-visible, frente a la longitud de onda. Presenta uno o varios
mximos de absorbancia a longitudes de onda determinadas max.

ESPECTROSCOPIA DE ABSORCION MOLECULAR ULTRAVIOLETA-VISIBLE. 84

Grupos cromforos. Son grupos de tomos responsables de bandas de absorcin en la

regin UV-V, como sistemas con electrones o n y electrones para el UV lejano. A
continuacin se indican unas reglas generales de absorcin de los grupos cromforos:
Si dos cromforos estn unidos directamente, el espectro es distinto a cuando
estn separados.
-C=C- long. onda max. 170 nm
=10.000
-C=C=C- long. onda max. 225 nm =500
Si los cromforos estn conjugados, mantienen su individualidad, excepto en las
transiciones * y n *, ya indicadas.
Si los cromforos estn separados por ms de un enlace, se dice que estn
aislados y el comportamiento global es suma de los comportamientos parciales.
En transiciones n* el tomo al que pertenecen los electrones no compartidos
determina la longitud de onda de la transicin.
Los diferentes medios electrnicos dentro de la molcula alteran el grado de
interaccin entre los orbitales: cuando las interacciones aumentan, la diferencia
de energa entre orbitales moleculares enlazantes y antienlazantes aumenta.
La max para sistemas de dienos, cetonas y aldehidos , insaturados y derivados
aromticos puede calcularse segn las tablas 8.2, 8.3 y 8.4.

Grupos auxocromos. Son grupos saturados que cuando se unen a grupos cromforos
desplazan la longitud de onda de absorcin de stos a valores mayores, a la vez que aumentan la
intensidad de la banda. Entre ellos estn OH-, NH2-, S=, halgenos, etc: todos poseen electrones
no compartidos.

Efecto batocrmico: desplazamiento del mximo de absorcin a longitudes de onda

mayores (en iones y radicales libres).

Efecto hipsocrmico: desplazamiento a longitudes de onda menores.

Efecto hipercrmico: aumento de la intensidad de la banda de absorcin.

ESPECTROSCOPIA DE ABSORCION MOLECULAR ULTRAVIOLETA-VISIBLE. 85

Tabla 8.2.- Reglas para la absorcin de dienos y polienos para la transicin *.

Dienos heteroanulares o polienos del tipo

Dienos homoanulares o polienos del tipo

Valor bsico para un dieno acclico

217 nm

Valor bsico para un dieno heteroanular

214 nm

Valor bsico para un dieno homoanular

253 nm

Incremento por cada sustituyente

5 nm

cada doble enlace exocclico

5 nm

cada doble enlace conjugado adicional

30 nm

cada grupo polar Oacilo

0 nm

OAlquilo

6 nm

SAlquilo

30 nm

-Cl, -Br

5 nm

-N(Alquilo)2

60 nm

Correccin debida al disolvente

0 nm

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Tabla 8.3. Reglas para la absorcin de cetonas y aldehidos , insaturados para la

transicin *
Valor asignado a la cetona matriz acclica o anular de seis miembros

215 nm

Valor asignado a la cetona matriz anular de cinco miembros

202 nm

Valor asignado al aldehido matriz

207 nm

Incremento por un doble enlace que extiende la conjugacin

30 nm

cada sustituyente en posicin

10 nm

cada sustituyente en posicin

12 nm

cada sustituyente en posicin y superiores

18 nm

cada doble enlace exocclico

5 nm

-OH en posicin

35 nm

30 nm

50 nm

-OAc en posicin ,,

6 nm

-OMe en posicin

35 nm

30 nm

17 nm

31 nm

-SAlquilo en posicin

85 nm

-Cl en posicin

15 nm

12 nm

-Br en posicin

25 nm

30 nm

-N(Alquilo)2 en posicin

95 nm

dieno homoanular

39 nm

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Tabla 8.4. Reglas para la absorcin de compuestos aromticos R-C6H4-COZ

Valor bsico Z = Alquilo o anillo

246 nm

Valor bsico Z = H

250 nm

Valor bsico Z = OH, OAlquilo, O-anillo

230 nm

Incremento por cada sustituyente

alquilo o anillo

o-, m-

3 nm

p-

10 nm

-OH, -OMe, -OAlquilo o-,m-

7 nm

25 nm

-O-

o-

11 nm

m-

20 nm

p-

78 nm

-Cl

o-, m-

10 nm

p-Br

o-, m-

o-, m-

o-, m-

-NMe2
p-

20 nm
45 nm

p-NHMe

13 nm
58 nm

p-NHAc

2 nm
15 nm

p-NH2

0 nm

p-

73 nm

o-, m-

20 nm
85 nm

6.-Instrumentacin
Los tipos de equipos empleados en la medicin de la radiacin electromagntica
ultravioleta y visible absorbida, por parte de una especie, son el "colormetro", el "fotmetro"
y el "espectrofotmetro".

ESPECTOSCOPIA DE ABSORCION MOLECULAR ULTRAVIOLETA-VISIBLE.88

El Colormetro es un instrumento muy simple que tiene al ojo humano como sistema
de deteccin, compara la intensidad de color de una disolucin problema con disoluciones
patrn de concentraciones conocidas, a partir de la cual se determina la concentracin de la
muestra problema.
El Fotmetro es un dispositivo que permite medir la intensidad de una radiacin
electromagntica y dispone de un "filtro", que selecciona una zona estrecha de longitudes de
onda, y de una fotoclula o fototubo para medir la intensidad de la radiacin.
Finalmente, el Espectrofotmetro, a diferencia del fotmetro dispone de un
"monocromador", en lugar de filtros, para hacer una seleccin ms exacta y continua de la
longitud de onda, lo que permite hacer un barrdo en una zona amplia de longitudes de onda;
asimismo, el sistema de deteccin est constituido por un fototubo o fotomultiplicador de mayor
sensibilidad.
Los componentes bsicos de un espectrofotmetro son tres, figura 8.6:
1. La fuente de energa radiante.
2. El monocromador para aislar una banda estrecha de longitudes de onda.
3. Un detector que mide la energa radiante transmitida a travs de la muestra.
El espectofotmetro se completa con un recipiente transparente para colocar las
muestras, un sistema ptico de orientacin de la radiacin asociado al monocromador y un
sistema de lectura que traduce la respuesta del detector.

Figura 8.6.-Componentes de los distintos tipos de instrumentos de espectroscopia ptica:

a) espectroscopia de emisin, b) espectroscopia de absorcin.
7. Fuente de energa radiante
Las fuentes de radiacin que emiten en el visible y ultravioleta pueden ser trmicas o de
decargas elctricas a travs de gases. Entre las primeras est la "lmpara de filamento de

ESPECTOSCOPIA DE ABSORCION MOLECULAR ULTRAVIOLETA-VISIBLE.89

wolframio" que emite en la zona del visible, figura 8.7. (a 3.000 K slo un 15 % de la energa
total pertenece a la regin visible).
En la regin ultravioleta se usan "fuentes de descarga elctrica" tales como la
lmpara de hidrgeno o la de deuterio. En ellas se hace pasar una corriente de electrones
(descarga elctrica) a travs de un gas a baja presin. Las colisiones entre los electrones y las
molculas provocan la excitacin molecular en sus niveles de energa electrnica, vibracional y
rotacional. Cuando los electrones vuelven a su estado fundamental emiten radiacin.

Figura 8.7.- Curvas de distribucin espectral de una lmpara de wolframio

La presin del gas suele estar entre 0,2 y 5,0 mm de Hg; la diferencia de potencial que
ocasiona la descarga elctrica es prxima a los 3.000 voltios, entre electrodos de aluminio
(lmparas de alto voltaje que emiten un espectro continuo); o diferencias de potencial prximas
a los 40 voltios entre un filamento calentado y revestido de xido, y un electrodo metlico
(lmparas de bajo voltaje). La emisin es ptima entre 200 y 375 nm; la diferencia entre la
lmpara de deuterio y la de hidrgeno es que la primera emite con una intensidad entre 3 y 5
veces superior.

8. Monocromadores
Los mtodos analticos espectroscpicos necesitan disponer de un sistema que permita
dispersar la radiacin policromtica y que a partir de esta dispersin se pueda aislar una
radiacin monocromtica (de una sola longitud de onda) a la cual se produzca la absorcin
selectiva de energa por parte de la especie absorbente.
Para aislar esta franja estrecha de longitudes de onda se puede utilizar un filtro que se
basa en la absorcin de las longitudes de onda que no interesan, (generalmente son de vidrio de
color), o bien un monocromador que produce una anchura de banda ms estrecha que el
anterior.
Las partes de un monocromador son una ranura de entrada, un espejo colimador que
produce un haz de radiacin paralelo, un prisma o red de difraccin que dispersa la radiacin
policromada y un elemento de enfoque, figura 8.8.
La dispersin mediante un prisma se basa en que cuando una radiacin incide sobre

ESPECTOSCOPIA DE ABSORCION MOLECULAR ULTRAVIOLETA-VISIBLE.90

un cuerpo no conductor (dielctrico) con las caras no paralelas, las caras de este material
cambian la direccin del haz refractado, y en que la velocidad de propagacin en cualquier
medio diferente al vaco es distinta para cada longitud de onda.
Ambos efectos dan como resultado que cuando una radiacin, mezcla de distintas
longitudes de onda, incide sobre un dielctrico se produce una dispersin en la cual la
desviacin ser diferente para cada longitud de onda como se observa en la figura 8.9, en la que
se aprecia como la longitud de onda ms corta se refracta ms que la ms larga.

Figura 8.8. Dos tipos de monocromadores: a) monocromador de prisma de Bunsen, y b)

monocromador de rejilla de Czerney-Turner. (En ambos casos 1 > 2)

Figura 8.9. Dispersin de la luz por un prisma de vidrio

El poder de resolucin, R, de un prisma se define como la capacidad de separacin de
dos longitudes de onda.
R= /
=longitud de onda media del par de lneas con menor que pueden separarse
mediante el prisma.
Tambin,

R= b (dn/d)

ESPECTOSCOPIA DE ABSORCION MOLECULAR ULTRAVIOLETA-VISIBLE.91

b=longitud de la base del prisma

(dn/d)=dispersin del prisma, propiedad caracterstica del material del
prisma. Representa la variacin del ndice de refraccin n con . El ndice de
refraccin aumenta, para todos los materiales, cuando la longitud de onda
disminuye (las longitudes de onda corta se refractan ms que las largas).
Dispersin mediante red o rejillas. Una red de dispersin o difraccin consta de una
serie de surcos poco espaciados (en espectroscopia V-UV, entre 2.000-6.000 lneas por mm)
sobre un vidrio o superficie metlica pulida; la radiacin incidente (figura 8.10) se refleja en una
cara del surco, que a su vez acta como nueva fuente de radiacin.

Figura 8.10. Esquema de la difraccin en una red

En una red se produce una interferencia constructiva cuando la diferencia de caminos

entre dos rayos paralelos es mltiplo de
n = (CD - AB)
CD = d sen i
AB = - d sen r
n = d (sen i + sen r)
Esta ecuacin rige el comportamiento de la red.
n= no entero, orden de refraccin
=longitud de onda
d=distancia entre surcos
i=ngulo de incidencia del rayo
r=ngulo de dispersin del haz de una determinada longitud de onda
Las lneas de primer orden son las ms intensas

= 800 n = 1

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2 orden
3er orden

= 400 n = 2
= 267 n = 3

Las lneas de orden superior pueden eliminarse mediante filtros. El vidrio elimina la
radiacin por debajo de 350 nm.
Por lo general, las redes tienen mayor poder de resolucin y dan dispersiones lineales a
lo largo de todo el espectro.

9. Celdas de muestras
Las celdas o cubetas para muestras deben estar construidas de un material que permita el
paso de la radiacin sin absorcin o dispersin de sta. Por debajo de 350 nm se suele emplear
cuarzo o slice fundida; los vidrios de silicatos se utilizan en la regin comprendida entre
350-2.000 nm. La longitud de la cubeta en UV y V es de 1 cm como valor medio. La figura 8.11
presenta diversos tipos de cubetas utilizadas en esta tcnica.

Figura 8.11 Cubetas utilizadas en espectrofotometra UV-VIS

10. Detectores de radiacin

ESPECTOSCOPIA DE ABSORCION MOLECULAR ULTRAVIOLETA-VISIBLE.93

Miden la intensidad de radiacin del haz emergente. En la zona espectral

correspondiente al UV-VIS, los detectores empleados son fotoelctricos. Los fotones VIS y UV
tienen suficiente energa para excitar a los electrones exteriores de las molculas que
constituyen el ctodo, produciendo la ionizacin de las mismas; con ello se genera una corriente
de electrones que es proporcional a la intensidad de la radiacin que llega al detector.
El fototubo de vaco es un detector fotoelctrico que consta de una cubeta de vidrio con
una entrada de cuarzo, transparente a la radiacin UV. En su interior hay un ctodo
semicilndrico con la superficie recubierta de un compuesto fcilmente ionizable como xidos
metlicos alcalinos y alcalinotrreos, y un nodo central.
Al chocar la radiacin con la superficie del ctodo, los fotones son absorbidos por el
material que recubre el ctodo comunicando energa a los electrones exteriores de los xidos
que hay sobre la superficie. Estos electrones son atrados por el nodo y se produce una
corriente elctrica que es proporcional a la potencia de la radiacin incidente. La corriente
generada es ampliada y registrada por medio de dgitos o grficas.
El tubo fotomultiplicador es similar a un fototubo de vaco, tiene una respuesta rpida,
sensibilidad muy elevada y responde al diseo que aparece en la figura 8.12.

Figura 8.12. Diagrama esquemtico de un tubo fotomultiplicador

Utiliza el mismo ctodo sensible que el fototubo, los electrones expulsados de la
superficie del fotoctodo por la radiacin incidente son arrastrados por un campo elctrico,
adquiriendo mayor energa. Al chocar con otra superficie activa (dnodo) transmite su energa y
desplaza ms electrones y as sucesivamente.
Cada dnodo est a un potencial elctrico mayor que el anterior entre 75-100 V. Los
fotomultiplicadores de 12 dnodos, hacen que un fotoelectrn primario produzca 17x106
electrones, lo que supone una corriente elctrica de 1 mA.

10. Espectrofotmetro

ESPECTOSCOPIA DE ABSORCION MOLECULAR ULTRAVIOLETA-VISIBLE.94

El espectrofotmetro diseado para la medicin de la radiacin electromagntica entre

190 y 1.100 nm contiene los elementos bsicos que se han descrito en la figura 8.6. Pueden ser
de haz simple en el que es necesario comparar la lectura de absorcin de la muestra problema
con un blanco o referencia, para cada longitud de onda; o de doble haz en el que, de forma
simultnea, se miden la absorbancia de la muestra problema y de la referencia o blanco.
Un espectrofotmetro tpico de doble haz se muestra en el esquema de la figura 8.13,
donde se pueden distinguir las distintas partes del equipo.

Figura 8.13. Esquema de dos espectrofotmetros de ultravioleta y visible

11. Aplicaciones analticas

ESPECTOSCOPIA DE ABSORCION MOLECULAR ULTRAVIOLETA-VISIBLE.95

Anlisis cualitativo. El espectro de absorcin en la regin Visible-Ultravioleta, figura

8.14, puede ser til para identificaciones de especies absorbentes a partir de las bandas de
absorcin de mayor intensidad (tablas 8.2 a 8.4). Sin embargo, la regin del infrarrojo es mejor,
para este fin, por dar bandas de absorcin ms estrechas.

Figura 8.14. Espectro de absorcin ultravioleta del benceno en etanol 95%

Asimismo, la intensidad de absorcin medida como absortividad molar, puede servir
como criterio adicional de identificacin. La caracterizacin de grupos cromforos mediante las
longitudes de onda a la cuales se produce una absorcin selectiva, por parte de la muestra,
permite determinar estructuras de compuestos orgnicos; aunque es necesaria la confirmacin
de las mismas mediante las tcnicas de resonancia magntica nuclear RMN o espectroscopia
infrarroja IR.
Tambin se estudian cinticas de reaccin a partir del seguimiento de la concentracin
del reactante o del producto, en funcin del tiempo. Por ltimo, permite la determinacin de
pesos moleculares teniendo en cuenta que la absortividad molar es igual a la absortividad
multiplicada por el peso molecular. Para ello, se forma un derivado del compuesto de inters
con un reactivo que presenta una absorcin caracterstica en otra zona del espectro. La
absortividad molar del derivado suele ser aproximadamente la misma que la del reactivo. Se
prepara una concentracin conocida del derivado y se mide su absorbancia, calculndose la
absortividad y a partir de ella el peso molecular.
Anlisis cuantitativo. La espectroscopia Ultravioleta-Visible es una de las tcnicas ms
tiles para realizar determinaciones cuantitativas, debido a que gran variedad de especies
inorgnicas y orgnicas ofrecen una absorcin selectiva en la zona espectral correspondiente al
visible y ultravioleta (sustancias con grupos cromforos o coloreadas).
Tiene una gran sensibilidad con posibilidad de analizar sustancias en concentraciones
entre 10-4 y 10-5 M. Asimismo, es una tcnica selectiva pues es posible encontrar una banda de
longitud de onda en la que el nico componente absorbente sea el deseado. Es una tcnica con
buena precisin y facilidad de manejo.
En la tabla 8.5 se dan ejemplos de grupos cromforos orgnicos comunes, con la

ESPECTOSCOPIA DE ABSORCION MOLECULAR ULTRAVIOLETA-VISIBLE.96

longitud de onda a la que se produce la absorcin mxima, y el valor de la absortividad molar.

La tabla 8.6 presenta las longitudes de onda a las que absorben los compuestos coloreados en el
visible.
Otras especies no absorbentes pasan a serlo cuando se las somete a reacciones que dan
productos fuertemente coloreados, que son capaces de absorber en el visible; ste ha sido el
mtodo empleado en el anlisis de especies inorgnicas. El proceso analtico consiste en:
1. Eleccin de la longitud de onda que corresponde al mximo de absorcin selectivo
por parte de la muestra
2. Preparacin de patrones de concentraciones conocidas dentro del intervalo lineal de
respuesta de la sustancia a medir
3. Medicin de la absorbancia de los patrones y construccin de la recta de calibrado
que relaciona, segn la ley de Lambert-Beer, concentraciones y absorbancias
4. Lectura de la absorbancia producida por la muestra problema
5. Por interpolacin en la recta de calibrado se determina la concentracin
desconocida.

Tabla 8.5. Caractersticas de absorcin de algunos cromforos comunes

CROMOFORO

EJEMPLO

DISOLVENTE

max
(nm)

max

TIPO DE
TRANSICION

Alqueno

C6H13CH=CH2

n-Heptano

177

13000

Alquino

C5H11CC-CH3

n-Hexano

178
196
225

10000
2000
160

*
-

Carbonilo

CH3COCH3

n-Heptano

1000
16

CH3CHO

n-Hexano

186
280
180
293

12

n*
n*
n*
n*

Carboxilo

CH3COOH

Etanol

204

41

n*

Amido

CH3CONH2

Agua

214

60

n*

Azo

CH3N=NCH3

Etanol

339

n*

Nitro

CH3NO2

Isooctano

280

22

n*

Nitroso

C4H9NO

Eter etlico

300
665

100
20

n*

Nitrato

C2H5ONO2

Dioxano

270

12

n*

Tabla 8.6 Relacin entre la longitud de onda absorbida y el color observado

ESPECTOSCOPIA DE ABSORCION MOLECULAR ULTRAVIOLETA-VISIBLE.97

Longitud de onda nm

Color correspondiente

Color observado

400

Violeta

Amarillo verdoso

425

Azul ndigo

Amarillo

450

Azul

Naranja

490

Verde azulado

Rojo

510

Verde

Prpura

530

verde amarillento

Violeta

550

Amarillo

azul ndigo

590

Naranja

Azul

640

Rojo

verde azulado

730

Prpura

Verde

Cuadros resumen
REGIONES ESPECTRALES UV-VISIBLE
DENOMINACION

INTERVALO (nm)

TRANSICIONES
ELECTRONICAS
*

10-200

n*

UV PROXIMO

200-400

VISIBLE

400-800

n*

UV LEJANO

GRUPOS RESPONSABLES POSICION BANDAS ABSORCION

CROMOFOROS
AUXOCROMOS

ESPECTOSCOPIA DE ABSORCION MOLECULAR ULTRAVIOLETA-VISIBLE.98

COMPONENTES ESPECTROFOTOMETRO UV-VISIBLE

FUENTE DE RADIACION

FILAMENTO DE WOLFRAMIO
LAMPARA DE HIDROGENO
LAMPARA DE DEUTERIO

MONOCROMADOR

PRISMA
RED DE DIFRACCION

DETECTOR

FOTOTUBO DE VACIO
TUBO FOTOMULTIPLICADOR

13.-Bibliografa

Creswell, C.J., Runquist, O. y Campbell, M.M. "Anlisis espectral de compuestos

orgnicos". Ed. Diana, Mxico (1979).

Ewing, G. W. "Mtodos Instrumentales de Anlisis Qumico" Ed. McGraw Hill (1978).

Morcillo, J. "Espectroscopia" Ed. Alhambra, Madrid (1979).

Olsen, E. "Mtodos Opticos de Anlisis" Ed. Revert, Barcelona (1986).

Skoog, D. A. y West, D. M. "Anlisis Instrumental" Ed. Interamericana, Mxico (1984).