Innovateurs

Stress oxydatif et sida

Les radicaux libres (voir notre dossier dans AIM n 7 et 8) jouent un rle important
dans les consquences de linfection par le VIH. Cette notion nest pas sans implications
thrapeutiques dimportance, quexplore notamment lquipe de Ren Olivier,
au sein de lunit doncologie virale dirige par le Pr Montagnier (Institut Pasteur de Paris)

Actualits-Innovations-Mdecine : Selon plusieurs groupes de chercheurs, le stress oxydatif serait lun des mcanismes capables dactiver la rplication virale chez les patients infects par le
VIH. Par quel mcanisme ?
Ren Olivier : Un tat prooxydant existe de toute vidence chez les patients sropositifs. De plus, il pourrait
dclencher chez ces patients
le processus dapoptose, que
divers travaux ont identifi
comme un mcanisme possible
de perte de matriel cellulaire
chez les patients sropositifs
pour le VIH. En effet, les vnements pouvant rsulter dun stress oxydatif sont trs semblables ceux
qui dclenchent lapoptose : oxydation de membranes
cellulaires, altration de systmes mtaboliques, rupture de chanes de transport dlectrons, diminution
de production dATP, perte de lhomostasie calcique,
activation dendonuclases et fragmentation de
lADN. Une fois lanc, le processus devient irrversible et sachve par une mort programme.
Le dclenchement de lapoptose par le stress oxydatif pourrait rsulter de la surabondance chez le siden de formes ractives de loxygne (FRO), combine une dficience plusieurs niveaux des rserves
nutritionnelles et mtaboliques de molcules antioxydantes.

Lactivit des polynuclaires neutrophiles et

la phagocytose.
Lactivation des PN peut rsulter de diffrentes
infections opportunistes (pneumocystose, infection
mycoplasmes). Une surproduction de cytokines
(comme linterfron gamma, produit en grande quantit chez les patients infects par le VIH) peut aussi
prparer les neutrophiles
une stimulation antiProduction
gnique productrice de
excessive de
radicaux libres.
radicaux libres
Sous laction des
FRO, des quantits importantes de TNF alpha sont produites par les cellules immunitaires, pour augmenter la stimulation des macrophages et des polynuclaires.
Celle-ci entrane en retour la production supplmentaire de FRO. Le TNF ragit aussi avec les cellules T

La peroxydation lipidique.
La peroxydation de la portion lipidique des membranes cellulaires produit des acides gras libres et des
peroxydes lipidiques. De plus, des mtabolites de
lacide arachidonique constitutif des membranes,
comme les prostaglandines ou les leukotrines, stimulent la production de radicaux libres. Ces processus normaux sont augments dans linfection par le
VIH.
Le MDA (malonate di-aldhyde), mtabolite de
la peroxydation lipidique, est un marqueur tudi depuis peu dans le suivi des patients sropositifs VIH.
Un niveau lev de MDA est une caractristique de
la pathogense du sida (ce taux augmente avec laggravation de la maladie). De plus, une tude rcente
montre non seulement quun pic de MDA est observ
systmatiquement un ou deux mois avant une infection opportuniste, mais aussi quun traitement

Mycoplasme

A.I.M. : Do peut provenir cet excs de

FRO ?
R. Olivier : De plusieurs sources.
Lactivit respiratoire cellulaire.
Toute activation de lymphocytes T, accroissant
la respiration cellulaire, implique la production
de FRO qui, en retour, activent les lymphocytes
T... donc, dans linfection par le VIH, la fabrication de virus. Des tudes in vitro montrent que linhibition de la production de FRO par des antioxydants peut inhiber plus de 90 % de la prolifration
lymphocytaire T.
Une tude prliminaire dans un protocole de phase
I avec un prcurseur du glutathion, loltipraz (utilis
jusque l comme antischistosome) semble capable
in vivo de bloquer la rplication du VIH. Cette activit existe in vitro.
Source :
Ren Olivier est depuis 1986 chercheur dans
lquipe du Pr Montagnier au sein de lunit dOncologie Virale de lInstitut Pasteur de Paris. Il dirige depuis trois ans des protocoles de recherche
clinique sur lutilisation dantioxydants contre le
sida et tudie les fonctions lymphocytaires et macrophagiques par rapport au statut doxydo-rduction dans linfection VIH.

N 9 1994 A.I.M.

Mycoplasme

Les mycoplasmes sont insensibles aux formes ractives de loxygne, dont ils induisent la synthse par les polynuclaires et quils fabriquent eux-mmes. Ils apparaissent comme des co-facteurs de linfection par le VIH.

pour dclencher lexpression de linterleukine 2 et

de ses rcepteurs, provoquant une suractivation de la
respiration cellulaire, donc une cascade radicalaire
lintrieur de la cellule.
Ces processus sont normalement rguls par lactivit anti-infectieuse du systme immunitaire, qui
supprime la stimulation dorigine. Mais tout processus infectieux li une immunodpression aura
pour consquence une augmentation de FRO.
Des processus inflammatoires chroniques.
Des inflammations chroniques dues des diarrhes ou des affections localises comme les candidoses, le Kaposi ou linfection cytomgalovirus
dclenchent la production de superoxydes et de peroxyde dhydrogne, accroissant la charge globale en
FRO.

antioxydant semble rduire la dure du pic de

MDA et diminuer la gravit de linfection.
Laction des mycoplasmes.
Les mycoplasmes, dcrits comme comme cofacteur biologique de linfection VIH, sont des microorganismes dficients en catalase, enzyme essentielle
dans la gestion des peroxydes. De leur prsence rsulte une production dH2O2, soit directement par les
mycoplasmes, soit par activation des polynuclaires.
Les mycoplasmes ne sont pas sensibles aux radicaux
libres : au contraire, leur virulence pourrait rsider dans la production de FRO. Certains travaux
indiquent dailleurs que les FRO dorigine mycoplasmique auraient une biodisponibilit plus importante que celle des FRO produites normalement par
les cellules humaines.

Cystine

Glutamate
Cystine

Cystine

Les macrophages sont capables

de convertir la cystine en cystine
et de mettre celle-ci, prcurseur
du glutathion, la disposition des
lymphocytes. A condition que le
taux plasmatique de glutamate
ne soit pas trop lev.

Glutathion

Protines

Glutathion

menter la producdonne du glutathion oxyd et de leau.

On peut combattre tion dIL 2 et de
Le glutathion est ensuite rgnr grce
ses rcepteurs par
au NADPH (lui-mme transform en
Macrophages
Lymphocytes
le stress oxydatif
les lymphocytes,
NADP+) sous laction de la glutathion
chez les patients
dclencher la synrductase. Ce mcanisme permet donc
thse dADN et
de contrler la quantit de peroxyde dhydrogne.
La production doxyde nitrique (NO).
VIH+
accrotre la proliSous linfluence de linterfron gamma et de li- Or, il nest fonctionnel que si la cellule dispose de
popolysaccharides, ou de protines oncognes ex- suffisamment de cystine, prcurseur du glutathion. fration cellulaire et la rplication virale. InverseLa plupart des cellules ont perdu la capacit de ment, on a pu montrer que des antioxydants comme
primes la surface de cellules lymphocytaires, les
macrophages sont capable daugmenter leur activit synthtiser la cystine partir de la mthionine, en la BHA ou la N-actyl-cystine (NAC) peuvent inNO-synthtase (voir notre Gros plan sur le NO dans raison dune dficience en cystathionase. Non seu- hiber lactivation de NFkB, donc la rplication vilement les cellules T prsentent cette dficience, mais rale. Dans des cellules de patients mises en culture,
AIM n 8). Le NO (qui est lui-mme un radical libre)
et son interaction avec loxygne peuvent tre res- encore elles sont incapables de transporter des cys- la NAC (prcurseur cystinique du glutathion) peut
ponsables dune agression radicalaire des cellules tines travers leur membrane et ne peuvent donc dis- limiter le stress oxydatif et, par ce biais, supprimer
environnantes. Le NO pourrait avoir une action di- poser de cystine pour produire du glutathion. En re- lapoptose, restaurer la fonction lymphocytaire et
recte sur les lymphocytes et les thymocytes. La des- vanche, les macrophages sont capables dimporter la renforcer la viabilit cellulaire.
truction de cellules souches par ce biais expliquerait cystine travers leur membrane plasmique en lchan Diffrentes molcules essentiellement des prles dpltions cellulaires observes chez les patients geant avec du glutamate et de la transformer en cystine. Dans des conditions normales, ils peuvent re- curseurs du glutathion ont fait lobjet de protocoles
infects par le VIH.
Le NO est aussi capable de limiter lactivit pha- larguer la cystine en excs dans le milieu cliniques pour essayer de restaurer la concentration
gocytaire du macrophage par un phnomne de r- extracellulaire, la rendant disponible pour les lym- intracellulaire en glutathion. Un protocole utilisant
tro-action. Cela expliquerait la prolifration des cel- phocytes. Les molcules de cystine ainsi produites la NAC pendant trois ans a dmontr quil tait
lules infectes et la non rpression de la rplication pourraient tre considrs comme des cytokines possible de restaurer la viabilit cellulaire chez
puisque, relargues par les macrophages, elles sont des patients sropositifs prsentant une dpltion
virale, augmentant avec la gravit de la maladie.
Lassociation de NO avec certains neurotrans- capables dagir sur les lymphocytes, o elles aug- importante en lymphocytes T4. Ltude a montr
metteurs pourrait expliquer les dmences observes mentent le taux de glutathion, ce qui permet de contr- une stabilisation du compte de T4 et, chez un nombre
limit de patients, une restauration de cette populadans le sida. Une concentration plasmatique leve ler les radicaux libres.
tion cellulaire. Une normalisation de plusieurs paraen glutamate observe chez les patients VIH+ fa Chez les patients infects par le VIH, le glu- mtres du statut de loxydorduction plasmatique et
cilite louverture de canaux calciques dans les membranes des cellules neuronales. Les ions calcium, as- tathion intralymphocytaire peut diminuer de 30 % par cellulaire comme le glutamate et le glutathion a t
socis la calmoduline prsente dans le cytosol, rapport la normale, mme chez des sujets asympto- observe. Des rsultats similaires ont t obtenus
peuvent stimuler lactivit NO-synthtase. Le NO matiques. Cette chute est lie une lvation du taux avec loxo-thiazolidine carboxylate (OTC), autre prainsi produit en excs est capable dexciter les neu- extracellulaire de glutamate, qui empche les macro- curseur du glutathion. Cette molcule, dont la biorones voisins au del du seuil de tolrance, provo- phages dchanger leur glutamate contre de la cystine disponibilit semble tre suprieure celle de NAC,
et bloque donc leur production de cystine, qui nest pourrait bloquer la rplication virale.
quant leur mort.
plus disponible pour les lymphocytes. Les cellules
Dautres molcules antioxydantes comme la whey
A.I.M. : Comment lorganisme du siden se lymphodes sont particulirement vulnrables la
combinaison de forts taux plasmatiques de gluta- protein (extraite du petit lait) pourraient non seuledfend-il contre les radicaux libres ?
mate et de faibles taux plasmatiques de cystine. ment restaurer le glutathion intracellulaire mais aussi
R. Olivier : Normale- Les patients infects par le VIH ayant une concen- stimuler une action rgnratrice. Une tude prliment, le systme de dfense tration plasmatique favorable pour ces deux mol- minaire chez des nouveau-ns infects ns de mres
Perte de la
contre les oxydants com- cules ont un nombre de lymphocytes T4 lev. Par sropositives, qui maigrissent trs vite aprs la naisprotection
prend diffrentes molcules contre, les patients souffrant de svres dficits en sance, a montr quil tait possible de ramener rapiantioxydante antioxydantes (vitamines A, lymphocytes T4 prsentent un taux plasmatique de dement ces enfants un poids normal.
E et C, bta-carotne, fla- glutamate atteignant 5 ou
vonodes et autres phnols, bilirubine, acide urique), 6 fois la normale et un
des enzymes antiradicalaires (superoxyde dismutase, taux de cystine trs faible.
FRO
glutathion peroxydase, catalase) et des oligo-lments Ces conditions contribuent
(zinc, slnium, manganse, cuivre). La fonction pri- largement un tat promaire de ces composs est de limiter la production oxydant.
de radicaux libres, piger ceux qui sont forms et
A.I.M. : Peut-on
supprimer la peroxydation lipidique destructrice des
VIH
- Protines kinases (?)
tenter de corriger les efmembranes cellulaires.
Dans linfection VIH, cette fonction est d- fets du stress oxydatif
borde par une production excessive de FRO et af- chez les sropositifs ?
Activation de NFB
faiblie en raison dune perte de lintgrit intestinale
Antioxydants :
R. Olivier : Plusieurs
perturbant labsorption des acides amins. Les cherNAC, OTC...
cheurs tudiant la pathognie du sida ont en effet molcules ont montr sur
Cytokines
observ chez les patients une forte diminution du ce point une activit intSite
taux plasmatique de cystine et une lvation du ressante, in vitro mais
B
taux plasmatique de glutamate. Or, cet excs de aussi en clinique.
glutamate dans le plasma et cette dpltion en cys Dans des modles in
tine plasmatique (et cellulaire) ont une influence
ngative sur lactivit antiradicalaire lie au gluta- vitro dinfection VIH, on
Cytoplasme
a pu montrer quun stress
thion.
oxydatif produit par
Dans la rponse anti-oxydante normale, le H2O2 peut activer des Les travaux fondamentaux et cliniques ont dmontr la fois quun stress oxydatif stiglutathion est oxyd par le peroxyde dhydrogne facteurs nuclaires tels mulait la prolifration du VIH et que ladministration danti-oxydants pouvait bloquer
(H2O2) en prsence de glutathion peroxydase, ce qui que le NFkB, donc aug- la plupart de ses consquences.