janeiro 89

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Tcnicas de

coleta, preservao e herborizao de material botnico

tl'l;.Ji'JUJ[.[.

Instituto de Botnica

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INSTITUTODE

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Tcnicas de

BOTNICA

cOleta proservaio'
9

e herborizao
de material botnico

INSTITUTO de BOTANICA (So Paulo). Tcnicas de

coleta, preservao e herborizao de material
botnico. 1984.
61 p., il. (Manual, n9 4)
Bibliografia.
1. Tcnicas de coleta - Material botnico
2. Herborizao 3. Herbrio - Organizao
I. FIDA[,GO, Oswaldo, coord. 11.BONONI, Vera.Lcia
Ramos, coord.
f"

C.D.D.580.74202

INSTITUTO

DE BOTANICA

Ca ixa Postal 4005

01000 . So Paulo, SP . Brasil

'"
COORDENADORES
Oswaldo Fidalgo
Vera Lcia Ramos Bononi

Todas as artes finais das ilustraes foram executadas

por Norga Maria Mascarenhas dos Santos baseadas em
dados fornecidos sob a forma de objetos, desenhos origi
nais (Maria Aparecida de Paula e Maria deI Carmen Bosque Martinezl.
quis.
S[CRETARIA 0[' AGRICUlIURA [ A8ASHCIM[NIO
I

Cooroeneoone

1-J

da Pesquisa

INSTITUTO
MANUAL

de Becueos

NalUfais

DE BOTANICA

N'? 4 - SAo PAULO -19B4

impressos (Joaquim F. de Toledo} e cro-

aI'

CONTEDO
APRESENTAAO

INSTRUOES GERAIS.
A. Materiais gerais para coleta
B. Materiais gerais para herborizao
C. Materiais para anotaes.
D. Dados a serem anotados

1. ALGAS
1.1. Introduo
1.2. Algas de guas continentais.
1.3. Algas marinhas bentnicas

5
6
.

.
.
.
.

2. FUNGOS E LfoUENS
2.1. Introduo..
..
.
2.2. Fungos do ar
.
2.3. Fungos de guas continentais
2.4. Fungos de guas marinhas
.
2.5. Fungos microscpicos
do solo e em substratos
orgnicos
.
2.6. Fungos e lquens macroscpicos
.

3. BRIOFITAS
3.1. Introduo
3.2. Tcnicas

.
.
.

4. PTERIDOFITAS
4.1. Introduo
4.2. Pteridfitas
4.3. Fanergamas
4.4. Fanergamas
4.5. Fanergamas
4.6. Fanergamas
4.7. Fanergamas

5
5
.

E FANEROGAMAS
. .. .. ..
.. ............ .. ....
herbceas. . . . . . . . . . .
arbustivas. . . . . . . . . . .
arbreas . . . . . . . . . . . .
suculentas ou volumosas
aquticas. . . . . . . . . . .

.. .. ..
. . . . . . . ..
. . . . . . . ..
. . . . . . . ..
. . . . . . . ..
. . . . . . ..
.......

1
8
8
11

14
15
16

17
20
22

24

27
28
28

31
32
33
34

36
38
46
48
APRESENTAAo

5. ORGANIZAAO

6. FORMULAS

7. LITERATURA

8. BIBLIOGRAFIA

DE HERBARIO

..............

E MEIOS DE CULTURA

RECOMENDADA.

52

Coleta, preservao e herborizao de material botnico requerem metodologias especificas

que, infelizmente, no se encontravam disposio do nosso estudante de nlvel universltrto.
Procurando preencher essa lacuna, idealizou-se o presente manual, com o objetivo de oferecer
as informaes bsicas indispensveis.
No se pretende aqui descer a mincias, particularizando tcnicas muito especializadas e adotadas apenas para pequenos conjuntos de seres. Almeja-se, to somente, divulgar aquelas de aplicao
mais ampla.
Na tentativa de apresentar a matria de forma didtica, levou-se em considerao para o melhor
arranjo da matria, no s, os grandes grupos de plantas, mas tambm, aspectos estruturais peculiares
ou condies ambientais em que vivem, que impliquem no emprego de tcnicas especiflcas.
Complementando, considerou-se como fundamental a incluso de um capitulo de frmulas e
meios de cultura, bem como, outro sobre normas gerais de organizao de herbrio.

56

CITADA........

61

. . . . . . . . . . . ..

62

<'

INSTRUES

prensa de madeira

GERAIS

Para a melhor utilizao. da presente manual, considerou-se

recamendvel
destacar algumas instrues de ardem geral. Tanta neste capitula,
cama nas demais, as materiais
requeridos
para coleta,
preservao. e herborizao
so apresentadas
na singular e em termas genricas, a titula de lembrete.
Assim, a seleo. das materiais, bem cama, a definio. de quantidades,
tamanhas e modelos, sero. estabelecidas pela pesquisador,
em adequao. aas mtodos descritas e particular
natureza da trabalha a
ser realizada ou da material a ser coletado.
Os pracedimentos
ou materiais aqui relacionados
tm aplicao,
na seu todo ou em parte, nas
diferentes
atividades
previstas para cada agrupamento. vegetal. Em contraposio,
nas demais caprtulos
ou subcapi'tulos
direcianadas
a determinadas
grupas vegetais, s sero. listadas infarmaes
especificas
a eles pertinentes
e no inclujdas na presente capitula,

ou pasta de plantas

querosene
Essa relao. destina-se ao. trabalha geral de herbarizaa
para usa na acampamento. au na sede.
Carrespande
atividade que antecede a processo de Incorporao da material no herbria. Todo esse
conjunto
a coletor dever levar em excurses prolangadas ou a locais distantes e mant-Ia na acampamente. Nesse casa a fator limitante
fica restrita s candies de transparte.

Materiais para anotaes

apontador
de lpis
bar racha
caderneta ou caderno. para anotaes
etiqueta de papel, gamada au no.
lpis preta ou caneta
papel sulfite (40 kg)

Materiais gerais para coleta

de campa

altnetro
D

barbante, corda (fina, mdia ou grossa) ou cordel

binculo.
bornal, cesta, mochila ou sacola
canivete au esptula
faca afiada ou faco. com bainha
fita crepe
fita mtrica
fsforo au isqueiro.
jornal
lupa de mo. (aumentas de 10 -15x)
mquina fatagrfica
e filme
papel indicador
de pH (principalmente
na coleta de plantas aquticas "sensu lata")
papelo. refarada ou tbua fina campensada
pasta de plantas au prensa de madeira
saca de papel (vrias tarnaohos+principalmente
para 500 e 1000g)
saco de plstica (vrias tamanhas - especialmente
de 25 x 12cm ou 90 x 60cm)

Dados a serem anotados

CONSELHO
NACIONAL
DE DESENVOLVIMENTO
CIENTI"FICO
E TECNOLOGICO
tem
requerido, para cada material coletado,
a preenchimento.
da ficha adiante apresentada. Esse modela deve ser seguida para efeito. de uma padranizaa
nacional. Dadas adicianais relativos consistncia,
textura, odor e outros, devem constar das observaes, Sempre que possrvel, as cores mencianadas devem
ser referidas a uma carta de cores, de preferncia de MAERZ
& PAUL (1930) para fungas, au HORTICULTURAL
COLOUR
CHART
(1938), para as demais grupas de plantas.
Essas anotaes devero, pasteriarmente,
ser transcritas para a rtula e fichas de herbria.

IFAM!UA:

GRUPO:

NOME VUL,I.J'U:Sl.OCAIS,COM

Esse conjunto
de materiais usualmente
carregada pela coletor durante a atividade de coleta.
Em seu todo, recamendvel
para coleta de pteridfitas
ou de plantas faneragmicas,
enquanto. aos demais gruaas, pade atender em parte. Em termas de quantidades,
os materiais devem ser selecionados
pela coletor que dever levar em considerao a valume total da que ser par ele transportado
(Ex. materiais adicionais
de coleta, alimentas,
caixa de primeiras
socorros, etc.), a pesa desse conjunto,
a distncia a ser percarrida
e sua prpria resistncia Usica. A pasta de plantas pade ser feita com dols pedaos de papelo. refarada (ou tbuas finas campensadas) de 45 x 30cm, ligadas entre si par cordas, tenda entre eles as falhas de jornal. Recamenda-se que faco. e faca afiadas devem estar sempre dentro. de
suas bainhas quando. no. em uso, para evitar perdas e acidentes.

ro"u

OETUIIoCIHAOOR:

HBITO DE CRESCIMENTO:
-'-011--00

'111,110 OU 00$

UPOR05:

I'NTERUU

o,t. OEHRI.4IN.l.~o;ll.4"nRIAL
FILOTAXIAls

I)lcor.):

!CORDA

fLOR OU OO~PORFORO

CCONOMICO:

SU6STII"TOf;fAAI.:
l'AEOUlIICIA

COMPORTAMENTO:

PAI,:

IESTAOO,

IIIEGI.l:O:

11. .. 1ITUOE:

09SEIIVAOES:

lcool
cam fivela

fsforo. ou isqueiro
jarnal
papel chupo au mata-borro
papel sulfite (40 kg)
papelo. ondulado
ou canelada
6

RELAtiVA:
HARITQI\IO

ILONGITUDE:

ou

0" COLETA'

oISPONiv[1,."

AliifififH'frGtRli:

Materiais gerais para herborizao

IN~

DO ;:ollloIlIO"T.\

NOME 00

barbante, cordel, corda fina ou mdia ou correia

envelope resistente
estufa metlica ou.de madeira para secagem
etiqueta
fagareira
falha de alumnio
carrugada

10.01.1,1.$:

SIMILAR:
IALTifUOE:

(,

-:

(
'.:.'

ALGAS

1.1

Introduo

1;..

ALGAS

Alga hoje um nome popular e, como grupo de vegetais, extremamente heterogneo. Rene
formas encontradas principalmente em ambiente aqutico (marinho ou continental), mas tambm em
solos; que podem viver no in teria r de outros vegetais ou de alguns animais; que podem ser de vida livre
ou fixas sobre cenas animais, vegetais, rochas e outros substratos; que normalmente so capazes de
produzir seu prprio alimento (auttrofas) mas, que tambm incluem alguns organismos saprfitos ou
parasitas (hetertrofas); que podem variar desde seres unicelulados at os multicelulados. Quanto s variaes de forma do corpo e da cor que apresentam, as algas renem a maior gama jamais imaginada pelo homem. Tudo isso conseqncia da primitividade morfolgica e fisiolgica das algas, cuja reunio,
do ponto de vista sistemtico, num nico grupo, forada e decorrente simplesmente da inexistncia
de um envoltrio, constitudo por clulas estreis, que recobrisse seusrgos de reproduo, tanto sexuada como assexuada.

1.2
Algas de guas continentais
1.1. INTRODUO

Certos Eduardo de Mattos Bicudo

1.2. ALGAS DE GUAS CONTINENTAIS

Clia Leite Sant'Anna

Certos Eduardo de Mattos Bicudo
Rosa Maria Teixeire Bicudo
Miriam Borges Xavier
1.3. ALGAS MARINHAS

BENTONICAS

Marilza Gordeiro-Marino
Noemy Yemeuishi- Tomita
Silvia Maria Pita de Beauclair Guimares

A coleta de algas de guas continentais requer, necessariamente, como para qualquer outro qrupo de organismos, resposta a algumas questes preliminares, quais sejam: 1) onde existem algas normalmente? 2) que tipo de trabalho pretende-se realizar? e 3) que material e como se pretende coletar?
A resposta primeira pergunta dada conhecendo-se, previamente, os ambientes naturais onde
vivem as algas e qual dessesambientes se pretende visitar para a coleta,
O meio mais rico em algas , com certeza, o aqutico, a saber: pntanos, empoados, lagoas, lagos, represas e rios. Certas algas, porm, podem ser encontradas vivendo no ar, em locais constantemente umedecidos, tais como: troncos de rvores; paredes, pedras, solos, etc. Isto, sem mencionar os
chamados ambientes "pouco usuais": plantas (algas endofticas ou epifticas), animais (algasentozorias ou epizorias), guas termais, neve, etc.
De um modo geral, mais aconselhvel, quando em excurso, fazer-se uma coleta completa,
com grande nmero de amostras, de algumas poucas localidades, do que apanhar uma ou duas amostras de um grande nmero de reas. Na realidade, nada mais improdutivo do que no se dispor de
quantidade suficiente de material de alguma alga mais rara encontrada, ou dispor de alguns exemplares apenas, imaturos, de uma dada espcie, que no possibilitem sua identificao.
Quanto segunda questo, o trabalho pode ser simplesmente o levantamento das espcies de
algas que ocorrem num determinado corpo d'gua ou numa rea circunscrita. Este um trabalho qualitativo, isto , um catlogo, que deve ser o mais completo possivel. das espciesde algas da rea estudada. Por outro lado, pode-se pretender efetuar, alm do levantamento qualitativo de um local, estudos da variao quantitativa de sua composio ao longo das quatro estaes do ano e do nmero de
individuos por volume, de cada espcie considerada.
Quanto ltima questo, pode-se afirmar que a coleta de algas de guas continentais um
processo relativamente fcil, desde que se tenha os materiais adequados que podem variar dos mais
simples e de fabricao caseira a aparelhamento bastante refinado.
Considerando-se que as algas, em geral, so mais abundantes e diversificadas no meio aqutico, so aqui mencionados apenas os mtodos de coleta, preservao e herborizaro das algas deste ambiente.
1.2.1.

Coleta
A - Materiais
esptula
frasco de vidro com tampa (vrios tamanhos)
garrafa especial para coleta de gua (Fig. 3)
luva de borracha ou de plstico
papel vegetal cortado em tamanho de 4 x 2cm para rtulo

j
(
(

:<}

rede de plncton com malha de 20-45JJm

tesoura
Ver -INSTRUOES
GERAIS

B -

(F ig. 1)

lugol actico (ver capo 6)

papel de filtro
pipeta graduada (vrios tamanhos)
proveta
soluo de Transeau (ver capo 6)

Mtodos
a. Qualitativo

B -

mtodo mais simples de coletar algas planctnicas

consiste em passar um frasco aberto em
meio massa visvel de algas ou, mesmo, na gua aparentemente
sem elas, enchendo-o aproximadamente at metade. Se, no primeiro
caso, pode-se conseguir uma quantidade
aprecivel de algas para
exame, no segundo, o nmero delas por volume pode ser muito pequeno, tornando difcil a localizao
dos espcimes para estudo, Assim vantajoso conseguir amostras concentradas
de material. Para tanto,
pode-se empregar a rede de plncton. Trata-se de uma rede com a forma de um cone truncado, feita de
tecido de nilon ou de seda, de malha muito fina. Na poro de maior dimetro,
adapta-se um aro de
metal com cabo e, na parte mais estreita, amarra-se um frasco (F ig. 1).
Ao se passar a rede, a gua atravessar o tecido e as algas ficaro concentradas
no frasco. Quando se julgar que foi coletado
material suficiente,
basta esvaziar o frasco num outro ou, simplesmente,
substituf-to
na rede,
Quanto s algas bentnicas
macroscpicas,
por exemplo
as carceas, costuma-se arrancar as
plantas com a prpria rede de plncton ou retlr-las com a mo usando-se neste caso luvas de borracha
ou de plstico como proteo.
O material coletado dever ser colocado em saco plstico com um pouco de gua do prprio ambiente.
As cianofrceas
que crescem formando
massas em substratos como rochas, solo, outras plantas,
. etc., so coletadas com uma esptula e colocadas em frasco de vidro com um pouco de gua do ambiente ou diretamente
em envelopes de papel. Neste ltimo caso, os envelopes devem ficar abertos e
expostos ao ar para secagem do material.
Para coleta de algas epifitas
usa-se cortar com uma tesoura ou arrancar com a mo as partes
imersas da planta hospedeira,
Este material dever ser colocado em frascos de vidro com gua do ambiente. Posteriormente
no laboratrio,
estudam-se as epi'fitas ao microscpio,
atravs de cortes bem finos do hospedeiro.
Na coleta de algas de guas continentais,
usa-se preencher tambm os frascos at a metade no
mximo,
pois, se completada
sua capacidade
total e mantidos fechados, as algas podem, mesmo em
poucas horas, entrar em processo de deteriorao
e o material torna-se imprprio
para a ident ificao
sistemtica.
sempre aconselhvel
destampar os frascos contendo material coletado, assim que se chegar ao laboratrio,
ou cada vez que se parar para pouso numa excurso de dois ou mais dias.
Como medida de segurana, conveniente
por o nmero
ou outra informao
qualquer,
breve, em papel vegetal e coloc-Io
rial coletado, na eventualidade
da etiqueta externa se perder,

partir

Ainda que seja preferlvel

estudar organismos vivos, a maioria dos trabalhos sobre algas feita a
de material preservado. praticamente
imposslvel manter uma coleo viva at que seja comple-

tamente

examinada.
A fixao e a preservao da amostra devem ser feitas o mais breve possivel e at 48 horas depois do momento
da coleta, mormente
em se tratando de amostras concentradas
de material.
A soluo ideal para as algas ainda no est bem determinada.
O melhor seria uma soluo de
fcil obteno
e que alterasse o menos possrvel a aparncia da alga. Em vrias alternativas
de chaves dlcotmicas
artificiais
para identificao
de algas, a opo entre uma ou outra alternativa,
a cor ti'pica
dos organismos.
Infelizmente,
a cor de certas algas pode variar com as diferentes solues utilizadas
e,
em geral, a grande maioria das algas desbota com o tempo, ficando at totalmente
esbranquiadas.
. O mtodo mais simples para preservao de algas de guas continentais
usar formalina
em soluo aquosa (1 : 1 O).
Das inmeras solues tentadas, talvez a que melhor
servao seja a adio da soluo de Transeau (ver capo 6)

1.2.3.

Herborizao
A -

Materiais
formalina

(= formo I 40%) ou formo

I bruto

(= 10(010)
9

(do tamanho

da folha de papel sulfite

usada

papel manteiga
pina
pincel
tecido de algodo alvejado e lavado (pedaos)
Ver - INSTRUOES
GERAIS

Se houver interesse em coletar em vrias profundidades,

faz-se necessrio o uso de um barco,
para se ir ao meio do lago, e uma garrafa especial para coleta de gua tipo Van Dorn, Nansen, cilindro
de Kemmerer (Fig. 3), Meyer, etc.

Preservao

Materiais
gua de torneira
bandeja de plstico (F ig. 2)
chapa metlica lisa, usualmente,
de alurrunio
ou ligeiramente
maior) - Fig. 2
mica folheada bem uniforme
(pedaos)

Existem
diversos mtodos para o estudo quantitativo
de algas planctnicas.
O mais simples e
prtico consiste na coleta de gua de superft'cie em frascos com capacidade de 15 litros. Se o material
for pouco concentrado,
recomenda-se
usar umvolume
maior de gua, caso contrrio
usa-se um volurrie
menor.

A -

atenda s caracterlsticas
para melhor congua da prpria amostra na proporo
de

O material em liquido se utilizado

em concentrao
apropriada,
preserva melhor a forma do espcime, mas, tem a desvantagem da evaporao lenta e, eventualmente,
de determinar
a perda irreparvel do material coletado,
pela secagem completa da amostra. Adicionando-se
um pouco de glicerina pura amostra posstvel diminuir
a intensidade
de evaporao e, conseqentemente,
a dessecao do
material.
Quanto preservao de eprfitas, colocam-se pedaos da planta hospedeira em um frasco contendo gua destilada e soluo de Transeau na proporo de 1: 1.
Especificamente,
para o estudo de fitoflagelados,
aconselha-se fixar o material com lugol actico (ver capo 6) que preserva melhor seus cilios e flagelos.

b. Quantitativo

1.2.2.

1:1.

correspondente
ao material a lpis
dentro do frasco contendo o mate-

Posteriormente,
no laboratrio,
deve-se proceder homogeneizao
do plncton coletado (agitao manual cuidadosa]
e transferir
uma subamostra
para uma cubeta ou cmara de contagem (volume de 150ml) para anlise em microscpio
invertido
(maiores detalhes, ver mtodo de Uther ml em
VOllENWEIDER,1971).

Mtodos

B -

Mtodos

Muitas algas podem ser preservadas como espcimes secos de herbrio. Em se tratando
de algas
microscpicas,
pinga-se 1-3 gotas da amostra contendo material vivo e concentrado
(ou mesmo morto,
fixado e concentrado)
sobre uma ficha de cartolina branca, deixando-se secar espontaneamente.
A cartolina, com o borro seco, poder ser guardada em envelope, num fichrio. Quando se desejar estudar
esse material, basta raspar um pouco do borro sobre uma lmina de microscopia
contendo
uma gota de
soluo aquosa 4% de hidrxido
de potssio. O hidr6xido
limpa o material e facilita a penetrao
de
solues corantes que sejam necessrias a seu estudo. Muitas vezes, em vez de cartolina branca, preferlvel usar folhas bem uniformes
e delgadas de mica como substrato da preparao.
A mica permite o
exame direto do material
ao microscpio,
ernpreqando-se
o hidrxido
de potssio, no havendo n10

'''':'''

.~--~"._;
~-..
/."

~:J

;I

cessidade de danificar a exsicata a cada utilizao, como acontece quando se raspa o borro da cartolina. Procedimento semelhante usado para cianofl'ceas.

o material macroscpico, principalmente de carceas. deve ser distendido e seco em uma folha
de papel resistente. Para isto, deve-se: 1) escolher o espcime da alga que se deseja distender; 2) colocar
uma folha de papel sulfite sobre uma chapa de alumlnio lisa e mergulhar ambas em um recipiente contendo gua de torneira (Fig. 2); 3) deixar flutuar na gua do recipiente o exemplar escolhido da alga e,
em seguida, elevar cuidadosamente a chapa metlica com o papel at que a alga assente sobre este; 4)
distender, arrumando, as vrias pores do talo da alga, utilizando um pincel fino e macio, trabalhando
sempre com o material sob a gua, para obter uma preparao que assemelhe o mais possrvel planta
viva; 5) tomar o material distendido e fazer o seguinte conjunto:
folha
folha
folha
folha
folha
folha

de
de
de
de
de
de

papelo ondulado
papel mata-borro ou chupo
papel com a alga distendida
papel manteiga ou tecido de algodo alvejado
papel mata-borro ou chupo
papelo ondulado

]~
I:,

Depois de feitos vrios desses conjuntos, os mesmos so colocados entre duas prensas (tbuas
de madeira) e amarrados firmemente com cordo resistente, para secar. O material pode ser colocado
ao sol, tendo-se, porm, o cuidado de trocar diariamente as folhas mais midas de papel chupo ou de
mata-borro, at que se apresente bem seco. Tambm pode ser seco em estufa temperatura de
40-500C.
Os exemplares mais delicados de algas podem ser distendidos sobre folhas de rnica, em vez de
papel.

~r

1.3
Algas marinhas bentnicss
As algas marinhas bentnicas ocorrem no litoral, desde a zona das mars at profundidades limitadas pela penetrao da luz. A ocorrncia dessas algas sempre condicionada existncia de substrato slido, de natureza variada, para sua fixao,
Na faixa litornea, os costes rochosos propiciam uma diversificao de ambientes onde as algas ocorrem, incluindo locais sujeitos arrebentao violenta, locais protegidos e ernpoados em depresses de 'rochas. Nas balas calmas, alm de crescerem nos costes rochosos, podem ser encontradas
sobre conchas, pedras soltas, pedaos de madeira, etc. depositados no fundo. Os mangues constituem
outro ambiente onde as algas so encontradas, sendo o substrato representado por troncos e raizes de
rvores que vivem nesselocal. Em cada um dessesambientes h uma diversificao muito grande quanto ao tipo, forma e tamanho das algas. Nesses locais as algas esto sujeitas ao periodismo das mars,
sendo que, as condies de mar baixa, so as mais adequadas para sua coleta.
Por outro lado, algas tambm so encontradas submersas, em diferentes profundidades, crescendo fixas a substratos rochosos, recifes de corais e outros materiais slidos. Sua coleta feita por
mergulho ou dragagem.

~i

1.3.1. Coleta
A - Materiais

balde plstico
draga
equipamento de mergulho
esptula
frasco de vidro com tampa (vrios tamanhos)
martelo (para algas incrustantes)
talhadeira (para algas incrustantes)
Ver-INSTRUOES
GERAIS

Figura 1. Rede de plancton de nilon ou seda. Figura 2. Bandeja de plstico + chapa lisa de aluminio + papel sulfite +
material coletado. Figura 3. Garrafa especial para coleta de gua: cilindro de Kemmerer.
11

12

r .

B - Mtodos
As algas que crescem na zona das mars, podem ser coletadas rnanualmente, com auxilio de
esptula, tendo-se o cuidado de retirar as plantas inteiras. Estas so mantidas midas, acondicionadas
em sacos plsticos, sendo as menores e as mais delicadas colocadas em frasco com tampa. Deve-se
tomar o cuidado de no colocar muitas plantas juntas, evltendo-se, assim, danos e facilitando sua poso
terior separao. Os frascos e sacos contendo o material coletado devem ficar protegidos do calor in
tenso e da luz solar.
A coleta de algas, que crescem em profundidades no muito grandes, feita manualmente por
mergulhadores com equipamentos adequado. munidos de sacos plsticos presos cintura, com pequenos furos. para transporte do material. Em profundidades maiores, essa coleta requer o auxlio de
barcos e dragas.
Para a coleta de algas incrustantes h necessidadedo emprego de martelo e talhadeira.
1.3.2.

Preservao

FUNGOS

A - Materiais
2.1. INTRODUO

gua do mar ou de torneira

bandeja de plstico

Joo Salvador Furtado

brax
etiqueta
formalina (=formoI40%)
frasco de vidro com tampa (vrios tamanhos)
microsc6pio estereosc6pico
papel chupo ou mata-borro
pina
pipeta graduada (vrios tamanhos)
placa-de-petri
proveta (vrios tamanhos)

2,2. FUNGOS DO AR
Sandra Farto Botelho Trufem
2.3. FUNGOS DE GUAS CONTINENTAIS
Adauto Ivo Milanez
2.4. FUNGOS DE GUAS MARINHAS
Rosely Gomes da Silva
2.5. FUNGOS MICROSCOPICOS DO SOLO E EM SUBSTRATOS ORGNICOS

B - Mtodos

Rosely Ana Plccolo Grandi

a. Separao
2.6. FUNGOS E LI'QUENS MACROSCOPICOS
O material coletado pode ser fixado no pr6prio local de coleta ou pode ser trazido vivo para o
laborat6rio. Neste, as algas devem ser colocadas, quando vivas, em bandejas ou em outro reciplente
qualquer contendo gua do mar. Cada planta posta em placa-de-petri com gua do mar e examinada
cuidadosamente sob lupa, para separao das epfitas.
Quando as algas so fixadas no local de coleta, posteriormente, devem ser examinadas e separadas sob microsc6pio estereosc6pico.
b. Fixaq
Para fixao, neutralizar um litro de formalina com uma grama de brax. A partir dessasoluo, preparar formalina a 4% com gua do mar ou mesmo de torneira. Os frascos devem ser preenchidos com esta soluo. Antes de colocar as plantas nos frascos, deve-se retirar com papel chupo ou
mata-borro. seu excesso de gua. O material deve ser deixado na soluo de formalina a 4% por um
tempo rnnirno de 24 horas, sendo o frasco devidamente rotulado. Anotar nos r6tulos o local e a data
da coleta.
1.3.3.

Herborizao
A -

Materiais

idnticos aos relacionados em 1.2.3. (A)

B-

Mtodos
metodologia idntica de 1.2.3. (B)
13

Oswaldo Fidalgo
Vera Lcia Ramos Banam'

LfaUENS

2.2
Fungos do ar

2
FUNGOS

LfaUENS

2.1
Introduo

O ar um repositrio natural, sob a forma de esporos, dos mais diversos tipos e grupos de funqos, O isolamento de esporos depender do local, do tempo de exposio e do substrato empregado.
Oescrever-se-oapenas mtodos qualitativos e no quantitativos para o isolamento de fungos do ar.
2.2.1.

Complexo tuno-subtreto:
Como organismo heterotrfico, todo fungo depende, direta ou indiretamente, de outro ser vivo, para sua alimentao. A condio saprbia bastante evidente quando o fungo encontrado sobre
troncos, ramos, folhas, restos ou partes de vegetais ou animais mortos. O predatismo leva ao abate sumrio do hospedeiro, enquanto o parasitisrno o tipo de associao em que o fungo provoca srie gradativa de danos ao hospedeiro que, eventualmente, podem provocar sua morte. Entre os fungos, o parasitismo pode ser facultativo ou obrigatrio.
Nos casos de fungos saprbios e parasitas, a ateno ao complexo fungo-substrato de grande
valia nas iniciativas de coleta. E oportuno chamar a ateno para a ocorrncia de fungos com desenvolvimento intramatrical, cujo ciclo se passa inteiramente no interior do hospedeiro e o extramatrical, que
se desenrola em seu exterior.
E como se tudo isso no bastasse, h determinadas estruturas, como esporas e suas variaes
morfolgicas e funcionais, que efetivamente no exibem qualquer manifestao de relacionamento f(sico e biolgico a substrato orgnico, at o momento em que iniciam o processo de germinao.

Coleta
A - Materiais

A classificao dos grandes grupos de fungos tem sido baseada no tipo e complexidade da rnorfologia, nas caracterrsticas das estruturas de reproduo e no padro de comportamento exibido nos
processos sexuais.
Inmeros botnicos e, seguramente, poucos micologistas podem, ainda hoje, 'admitir os fungos
como plantas. Por revelarem estruturas espec/ficas. exibirem comportamento diferenciado e serem incapazes de realizar a fotossintese. os fungos tornam-se organismos distintos dos demais seresvivos.
A situao dos h'quens mais complexa, uma vez que constituem produto da associao simbintica entre fungo e alga. Alm de revelarem caractenstica metablica e, de certa forma, estrutura
prpria, os integrantes liqunicos mantm sua individualidade biolgica.

graxa de silicone ou glicerina

lmina e lami'nula para microscopia (Fig. 10)
meio de cultura BOA ou outros (ver capo 6)
placa-de-petri
Ver -INSTRUOES
GERAIS
B-

.Exposio
ao ar, r'lO ambiente selecionado, da lmina corri leve camada de graxa desilicone ou
glicerina, ou ainda da placa-de-petri com meio de cultura, onde os esporos existentes no ar, por ao da
fora da gravidade, iro depositar-se e aderir-se s superfcies expostas. O tempo de exposio pode variar de 30 segundos a 15 minutos a critrio do interessado, em funo das condies ambientais (DAVIES,1971).
2.2.2.

Preservao
A - Materiais
agulha de repicagem (Fig. 4)
lmina e larmnula para microscopia (Fig. 10)
placa-de-petri

tampo de gaze e algodo para tubo de ensaio (Fig. 7)

tubo de ensaio (Fig. 7)
meio de cultura: BOA ou outros (ver capo6)

Coleta e manuteno de fungos

B-

Nunca ser demasiado alertar o coletor para o fato de que as estruturas mais visrveis de um fungo no representam, necessariamente, todas as suas partes, nem tudo o que constitui o ciclo do organismo coletado. Grande parte do seu ciclo ou dos remanescentes estruturais poder estar sendo perdida
no interior do substrato ou, simplesmente, j ocorreu em outro lapso de tempo, em outro hospedeiro,
ou em partes distintas do mesmo substrato.
Resultado: o que se coleta de um fungo constitui, em geral, um momento, no ciclo biolgico
da espcie.
As condies ideais para o estudo e compreenso dos fungos reside no isolamento de organismos, a partir de diferentes substratos e nos diversos ambientes em que os fungos ocorrem: ar, gua e
solo.
As partes mais evidentes, nos fungos, constituem, como regra geral, o que mais resiste ao manuseio e ao tratamento que leva constituio da amostra do material (a exsicata) a ser incorporado
ao herbrio. Os espcimes podem ser preservados pela simples secagem; em meios Ii'quidos, o picles;
em lminas, para exame ao microscpio, sob forma desidratada e liofilizada; em nitrognio h'quido, e
por outros processos.
Isolamento e cultivo de fungos
A obteno de culturas de fungos, a partir dos substratos onde ocorrem, requer o dorruno de
tcnicas e o emprego de cuidados especiais. Os procedimentos, as frmulas, as receitas e as prticas so
variadrsslrnos, dependendo do tipo de fungo, da natureza do substrato e do ambiente no qual se trabalha.
imprescindrvel levar em considerao a assepsia e selecionar o meio mais indicado para isolamente.

Mtodos

Os esporos do ar, depositando-se na lmina com silicone ou glicerina, ficaro a ela aderidos. A
observao direta da lmina ao microscpio ptico comum poder, em muitos casos, permitir a identificao do fungo. Estudos mais acurados requerem a tcnica de exposio de placa-de-petri com meio
de cultura. O esporo, em contato com o meio de cultura adequado germinar, dando origem a uma colnia. No momento oportuno, as diversas colnias da placa-de-petri exposta, devero ser individual
mente repicadas, por meio de agulhas apropriadas (Fig. 4-5), em outras placas tambm com meio de
cultura, para o crescimento de culturasaxnicas, que so as indicadas para estudos mais minuciosos. A
preservao dessascolnias feita atravs de repicagens peridicas das colnias em novos meios, acondicionados em tubos de ensaio inclinados (Fig. 7), tamponados com algodo e gaze. A periodicidade
das repicagens em funo do tipo de fungo, do meio de cultura e das condies ambientais em que
so mantidos, mas de modo geral variam de 1-4 meses. Um dos meios de cultura mais utilizados o
BOA (ver capo 6), A manuteno de culturas em geladeiras, a temperaturas de 4100C, acarreta baixa
no metabolismo do fungo e menor dessecaodo prprio meio, possibilitando maior intervalo entre as
repicagens (6 meses).
Mtodos mais sofisticados de preservao de fungos (miclio ou esporos) podem ser a liofilizao, imerso da cultura em leo mineral, utilizao de nitrognio lquido e outros (ONI ONS, 1971).
2.2.3.

Herborizao
A - Materiais

t:

15

Mtodos

estufa
formo I
16

I.

"

glicerina
lactofenol com azul de algodo (ver capo 6)
lmina e laminula para microscopia (Fig. 10)
luto ou esmalte incolor para unhas
papel de filtro
place-de-petri de vidro ou de plilstico (polietileno ou policarbonato)
Ver - INSTRUOES GERAIS
B-

b. Para isolamento

Mtodos

Se apenas os esporos constituern o material de interesse, lminas serni-perrnanentes podem ser

preparadas. O mtodo mais simples consiste em colocar a estrutura do fungo sobre uma gota de lacrofenol com azul de algodo disposta na lmina. Espalhar bem. Colocar a lamnula de tal modo que no
fiquem bolhas. Retirar o excesso com papel de filtro e vedar com esmalte incolor.
H outros mtodos mais minuciosos e de preparo mais demorado para confeco de lminas
permanentes. As lminas assim preparadas e numeradas devem ser acondicionadas em laminrios
(Fig. 10).
Se houver necessidade da herborizao da prpria cultura, coloca-se em placa-de-petrl, de preferncia de material plstico, o meio de cultura aoequado.ern camada fina ( 5mm de esoessural e inocula-se, no centro da placa, o fungo de interesse. Aps o tempo necessrio para o desenvolvimento adequado da colnia, coloca-se em dessecador a ptace-de-petri aberta, em contato com vapores de formol,
que iro matar o fungo, mantendo, no entanto, o aspecto da colnia no que se refere forma, tipo de
crescimento, cor, altura, consistncia, etc. Aquarda-se o tempo necessrio para a completa secagemdo
meio de cultura, podendo-se, para acelerar o processo, utilizar estufa a uma temperatura de 30350C.
Sela-sea placa-de-petri com esmalte e rotula-se adequadamente o material.

2.3
Fungos de guascontinentais
Os fungos encontrados' em ambientes aquticos podem ser divididos em dois grandes grupos:
zoospricos (planospricos) - Fig. 8
no zoosprieos (aplanospricos)
Fungos zoospricos soaqueles realmente adaptados ao ambiente aqutico, pois possuem estruturas mveis de reproduo - zoosporos (Fig. 8) - dotados de um ou dois flagelos. O tipo, nrnero e modo de insero dos flagelos constituem importantes parmetros para a delimitao de grupos texonmieos.
Fungos no zoospricos so aqueles cujos esporos no apresentam flagelos.
Os fungos aquticos podem ser tambm encontrados no solo, atravs de estruturas de r esistncia, necessitando de gua apenas para completar seu ciclo de vida. Para a observao dessesfungos torna-se necessrio coletar amostras de gua e de solo, s quais adicionam-se iscasespeciais. amostra de
solo junta-se ainda gua requerida Pelo fungo.
2.3.1.

Coleta e Isolamento
A -

qua destilada esterilizada

agulha com ponta em lao (Fig. 5)
agulha histolgica
bico-de-Bunsen ou lamparina
bisturi ou lmina de barbear (Fig. 6)
Karo (para observao de flagelos)
lmina para microscopia (F i9. 10)
laminula (Fig. 10)
meio: extrato de malte a 2%, MP5 (ver capo6)
microscpio
pina de ponta fina
pipeta de Pasteur esteri Iizada
ptaca-de-oetri autoclavilvel (100x2,0 ou 100x1 ,5cm)
vidro atoclavve'
de boca larga (60200m!)

Materiais
a. Para iscagem
cido clondrico a 1%
frasco de 100ml, de boca larga e com tampa de polietileno
hidrxido de potssio a 2"10
hipoclorito de sdio (gua sanitria) a 10%
isca: asa de inseto (siriri); celofane; ecdise de cobra; epiderme de cebola; exoesqueleto
de camaro, lagosta ou siri; folha descorada ou fervida (gramineas); fruto (ma,
pera, ameixa, tomate verde, caqui, carambola, etc.): gro de plen (Liquidambar
sp, Pinus spp, Araucaria angustifo/ia, milho e outras gram(neas, etc.): graveto; inseto (inclusive larvas); semente (cnhamo, Grota/aria spp, laranja, melancia, etc.l
papel alumnio
.
papel encerado
saco de tela de nilon ou lata de alimento
17

B-

Mtodos

A iscagem pode ser feita no campo ou no laboratrio (ver capo6).

A transparncia dos substratos utilizados como isca, fundamental, pois, o exame das estruturas dos fungos que crescem dentro deles, indispensvel para uma correta identificao.
Para estudos taxonmicos, as amostras de gua, para iscagem no laboratrio, devem ser coletadas em frascos esterilizados (vidro ou qualquer outro material) de boca larga com capacidade para
60.200ml. Quando da coleta, juntar gua gravetos, folhas, exvia de irisetos, algas, etc.
No laboratrio, uma parte do contedo com os materiais coletados transferida para placas-de-petri esterilizadas, s quais se adicionam as iscasj citadas.
As primeiras observaes devem ser feitas nos substratos coletados e aps 4872 horas, nas iscas
adicionadas. Para continuidade dos estudos necessrio o isolamento dos espcimes em cultura pura.
Os fungos que crescem nas sementes podem ser isolados utilizando-se o meio MP5 (ver capo 6).
Com uma pina ou agulha flambada (Fig. 4), porm fria, pedao do miclio removido e inoculado no
. meio de cultura. Depois de 4872 horas desenvolve-se a colnia em torno do inculo. Da parte mais perifrica da colnia, um pequeno quadrado com 1cm de lado retirado com auxrlio de um bisturi ou lmina de barbear (Fig. 6) flambados e colocado em uma placa-de-petri esterilizada, adicionsndo-se gua
destilada esterilizada e 23 metades de sementes de cnhamo. Aps 48 horas, observaes podero ser
feitas, montando-se, em gua, parte do material entre lmina e lamnula com auxilio de agulhas e
pinas.

As prprias placas-de-petr! podaro ser observadas diretamente ao microscpio, retirando-se a

tampa.

Fungos que aparecem crescendo em outros substratos, como gros de plen, quitina e queratina, so de diversas naturezas e, devem ser isolados. Os substratos contendo os espcimes devem ser se
parados, lavados em gua destilada e, em seguida, colocados em placas-de-petri esterilizadas, adicionando-se mais substrato da mesma natureza e gua destilada esterilizada. Espera-se que haja invaso dos
novos substratos e produo de grande nmero de zoosporos que podero ser apanhados com uma pio
peta de Pasteur ou uma agulha com ponta em lao (Fig. 5) e inoculadas em meio prprio para cultivo.
Para observao dos flagelos, coloca-se i2 gotas de Karo na montagem, que pela sua maior
densidade diminui a mobilidade dos zoosporos facilitando a observao.
Alguns fungos, no entanto, no aparecem nas iscas colocadas nas amostras, em laboratrio.
Neste caso, as iscas, geralmente constituidas de frutos e gravetos, so colocadas em SdCOS feitos de tela
de nilon, com malha fina, ou ento, utilizam-se latas de alimentos, tais como, de leite, de chocolate
em p, etc., perfuradas com pregos em todas as suas faces. As latas ou sacos so amarrados a fios de
plstico e imersos nos corpos de gua, proteqendo-os adequadamente da curiosidade popular. Depois
de 2.3 semanas, as iscas so retiradas e lavadas em gua corrente, por cerca de 30 minutos. Jatos fortes devem ser utilizados para a remoo de detritos, bactrias, protozorios e pequenos invertebrados.
Se os fungos estiverem presentes, pequenas pstulas esbranquiadas aparecero, firmemente aderidas
epiderme do fruto. Cada pstula contm numerosos espcimes de fungos. Isolada uma pstula em
lmina, esta deve ser dissociada com agulhas histolgicas, sob microscpio estereoscpico, a fim de
separar os espcimes que, uma vez isolados, so colocados em gua destilada, entre lmina e laminula
para exame.
.
.
18

\.

;,
(
I.

2.3.2.

Preservao
A -

Materiais
gua desti lada ester iIizada
agulha histolgica
esmalte incolor
FAA (ver capo6)
frasco Pyrex de boca larga (60-200mll
lactofenol com azul de algodo (ver capo6)
lmina para rnicroscopia
Iam(nula
meio: extrato de malte a 2%, fub-de-milho (ver capo 6)
pipeta de Pasteur esterilizada
semente de cnhamo

][
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J,

8 -

Mtodos

~':'fj."=

A preservao do material pode.ser em lmina (ver item 2.1.3).

As colnias que crescem em sementes de cnhamo devem ser transfericlas para um frasco Pyrex
estril, de boca larga, com metade a dois teros de sua capacidade preenchida de gua destilada esterilizada. Adicionam-se 2-3 metades de sementes novas e incuba-se temperatura ambiente. Em 4-7 dias,
as culturas estaro maturas e podero ser levadas geladeira, a 4-100C. Neste momento os vidros so
fechados com tampa de polietileno (sob presso). A fim de permitir a circulao de oxignio, pois que
no h suspenso metablica, fendas longitudinais devero ser feitas na rolha ou dois furos na tampa
de polietileno. Dessa maneira, os fungos permanecero viveis por penedos variveis de 4-8 meses. Findo este, retiram-se os frascos da geladeira, troca-se a gua destilada e adicionam-se novas sementes. t
conveniente retirar algumas das sementes mais antigas, para evitar acmulo de material.
Utiliza-se, tambm, a preservao em FAA, principalmente para as espcies patognicas, porm, as estruturas fngicas, por serem bastante delicadas, no se preservam bem.
A conservao do material vivo pode ser efetuada com utilizao de meios de cultura (EMERSON, 1955), tais como: meio de fub-de-milho e extrato de malte a 2% (ver capo6).
Para fungos zoospricos e no zoospricos deve-se apanhar os esporos com pipetas de Pasteur
ou pedaos do fungo com agulha e inocul-tos em meio de cultura e proceder corno no (tem 2.2.2.

11

1I

C/I'

~III

I]
j:l:t::

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11
I, I. ~,;1'1 1'1I'" I

I,.:

..

III1

10

2.4

Fungos de guas marinhas

2.4.1.

<0'f\

Coleta e isolamento
A -

gua do mar esterilizada

antibiticos: sulfato de estreptomicina, penicilina
estilete
garrafa escura com boca larga ( Scm dim. x 15cm cornpr.)
lmina para microscopia
Iam(nula
meio de cultura (Tubaki. Czapek, BDA ou MHU) - ver capo6
papel de filtro
peneira (com malhas de 2 a 5mm)
pina
placa-de-petri
toalha de papel

I:
Vltl)\i

Materiais '

J]

08S.

Figura 4. Agulha de repicagem. Figura 5. Agulha com ponta em lao. Figura 6. Lmina de barbear. Figura 7. Tubc de
ensaio com tampo de gaze e algodo e com meio de cultura solidificado inclinado. Figura 8. Fungos aquticos zoospricos com 1-2 flagelo,. Figura 9. Corpo de frutificao de basidiomlceto estipitado (Agaricale,).
19

I. para isolamento de fungos que atacam raizes de plantas relacionadas com a orla marrtirna deve-se preparar 45 vidros com 20ml de gua do mar esterilizada.
11. para obteno de fungos que crescem na areia deve-se levar:
papel celofane

20

,
placa-de-petri
p len de Pinus sp.
Ver - INSTRUOES
B -

Fungos microscpicos
GERAIS

Mtodos

Coletar
pedaos
de madeira
em processo de decomposio,
com dimenso
em torno
de
1O-15cm de comprimento,
obtidos de ambientes. como: parte alta, mdia e baixa da regio intertidal,
em rea acima da mar alta, dunas e entre rochas.
Para o exame dos fungos existentes nesses substratos, efetua-se o isolamento
por observao direta, sob lupa.
Em seqnia,
procede-seao
exame microscpico,
com o material
entre lmina e laminula
(Fig. 10). Para posterior
identificao,
pode-se inocular as estruturas
encontradas
em places-de-pstri
com meio de cultura,
Tubaki ou BOA (ver capo 6), contendo gua do mar e antibitico,
que fornecer
os nutrientes
bsicos para o desenvolvimento
do fungo e impedir o crescimento
de bactrias,
Folhas cardas e em estado de decomposio
tambm podem ser coletadas e estudadas aplicando-se este mesmo mtodo.
Outra tcnica consiste em recolher as amostras e di.stribu-Ias em garrafas escuras com boca lar.. gq (em posio hor izontal}
acomodadas
em toalha de papel dobrado e embebido
em gua'do mar este-

de dinmica e viva.
Para isolar fungos
cos) que impeam
2.5.1.

Coleta
A -

microscpicos

o crescimento

precisa-se

dos organismos

a. Coleta
lcool comum
algodo
esptula ou colher

(vrios

etiqueta
pina
Ver - INSTRUES
b. Isolamento

gua destilada esterilizada

antibiticos:
sstreptomicina

estante

para tubo de ensaio

estiete
lmina

para microscopia

laminula
meio de cultura
meio de cultura:

Ou

solidificado:
BDA
Czapek (ver capo 6)
Czapek, com antibiticos
(ver capo 6)

microscpio
astereoscpico
papel alurrunio ou pano de algodo limpo
papel de filtro ou outro papel absorvente
pina (vrios tamanhos)
pipeta de 0,5-1 ,Oml esterilizada

B -

para microscopia

B -

de ensaio com meio de cultura

de gua destilada

com tampo

de gaze e al-

Mtodos

cam-se cinco ou mais colheres de solo em sacos plsticos

As. amostras devem ser guardadas em geladeira,
BDA ou outros

cada um, fechado

esterilizado

As amostras de solo, para anlise, devem ser coletadas com uma esptula ou colher, tomanco-se
o cuidado de esteriliz-Ia
parcialmente
com algodo embebido
em lcool, antes de cada coleta. Colo-

(ver capo 6)

larnnula
tubo

e rosa-de-bengala

bico-de-Bunsen
ou lamparina
bisturi ou lmina de barbear (Fig. 6)
cristalizador
ou recipiente grande de-vidro

Materiais

lmina

tamanhos)

GERAIS

godo hidrfobo

com azul de algodo

especiais (ex: antibiti-

e isolamento

Preservao

lactofenol

usar tcnicas ou substncias

indesejveis.

Materiais

placa de petri esterilizada

tubo de ensaio com 9ml

A -

2.5
orgnicos

O solo um ambiente
muito complexo.
Est longe de ser um simples amontoado
de matria
inorgnica
sem vida, como costuma parecer. ~ na verdade habitado por bactrias, fungos, algas, pretozorios, artrpodos
(caros,
insetos), aneldios.
nematides.
moluscos e outros organismos
que. na
maioria das vezes, no se percebe por serem diminutos
ou microscpicos.
Todos esto em ntimo contato com minerais, razes, matria orgnica mona, etc. existentes no solo. H, portanto.
uma interao
muito grande entre todos esses componentes
do solo. fazendo com que ocorram transformaes
constantes. de natureza fsica. qumica e biolgica.
~ importante,
pois. considerar o solo como uma entida-

rilizada. Este conjunto

dever permanecer
de 1-6 semanas em local fresco e umedecido
tambm com
gua do mar j esterilizada,
para observao.
Para fungos que atacam raizes de plantas, cortam-se 20 pedaos destas, de 2-3mm de comprimento. Cada 2-3 pedaos devem ser colocados em frasco com 20ml de gua do mar esterilizada.
Agita-se violentamente
por um minuto.
Despreza-se essa gua e acrescentam-se
mais 20ml de gua do mar
repetindo-se
o processo por mais 20 vezes. Os pedaos de razes sero transferidos
para placas-de-petri
com papel de filtro esterilizados,
permanecendo
durante 24 horas para secagem temperatura
ambiente. Aps este tempo,
lotes de cinco pedaos sero transferidos
para meio apropriado
(BOA ou Czapek
modificado
- ver capo 6).
Este mtodo
tambm utilizado
para fragmentos de folhas e madeira, com ligeira modificao
na preparao
das amostras. Pedaos de folhas e madeira em decomposio
devero ser triturados
em
liqidificador,
com gua do mar esterilizada,
por dois minutos. Aps este tempo, o contedo
dever
ser vertido sobre duas peneiras de diferentes dimenses de malha. A peneira maior dever ser colocada
sobre a menor para melhor reteno dos pedaos. Os fragmentos
resultantes devero ser transferidos
para vidros, contendo
20ml de gua do mar esterilizada e dar inrcio s sucessivas lavagens conforme
j
descrito.
Quanto a fungos que crescem em areia, coletar amostras de solo da praia em sacos plsticos. De
cada amostra. trs colheres de ch devero ser colocadas em placa-de-petri
e completadas
com gua do
mar esterilizada.
Sobre este conjunto,
colocar pedaos de celofane e gros de plen, como iscas. Aps
trs dias podero ser iniciadas as observaes microscpicas.
Esses exames podero ser feitos de 3-30
dias aps a iscagem das amostras. Os espcimes isolados podero ser inoculados
em meio de cultura
MHU com antibitico
(ver capo 6).

2.4.2.

do solo e em substratos

meios de cultura

(ver capo 6)

(Fig.

7),

crito

o.

21

no for

imediata,

mas, exigem

tratamento
mais rpido possrvel, devido perda da viabilidade
de hifas e esporas.
.
A coleta de substratos orgnicos como folhas, frutos. raizes, troncos. em diferentes estgios de
decomposio
ou no, insetos e outros pequenos animais feita com a mo usando-se os saquinhos de
plstico pelo avesso como luva ou com auxilio
de uma pina. Utilizam-se
saquinhos plsticos individuais para cada tipo de substrato. As regras de assepsia parcial e colocao de etiquetas, tal como des

Mtodos

Para manter os organismos

vivos, deve-se uard-tos
em tubos de ensaio inclinados
com BDA ou outro meio que atenda s necessidades bsicas do fungo.
material poder ser preservado morto em lminas semipermanentes
(ver (tem 2.2.3).

de 25 x 12cm.
se a utilizao

22

para coleta

de solo, so idnticas

para toda e qualquer

coleta.

r-

Esterco de herbvoros coletado ainda fresco, com esptula grande,

ticos maiores que os indicados para coleta de solo.
Para isolamento
de fungos utilizam-se diversas tcnicas.

e colocado

etiqueta ou lpis para vidro

lmina para microscopia
laminula
microesptula
ou estilete
tubo de ensaio com meio de cultura,

em sacos pls-

O mtodo de placa de solo consiste em colocar, com a esptula, pequena quantidade

de solo
(semelhante
a uma cabecinha de fsforo)
dentro de uma placa-de-petri
esterilizada.
Havendo torres,
colocar 0,5- 1,Oml de gua esterilizada
dentro da placa e, com movimentos
circulares,
tentar desfaz-tos. pondo-os em contato com a gua. Verter o meio de cul tura com antibiticos
(Czapek + estreptomicina
+ rosa-de-bengala - ver capo 6), ainda liquido ( 400C), sobre a placa com solo; fazer movimentos circulares
para espalhar bem o solo no meio e deixar solidificar.
Se o solo for muito arenoso e
no houver torres,
no haver necessidade de colocar gua esterilizada.
Deixar temperatura
ambiente e observar o aparecimento
de colnias. I solar os fungos em crescimento
cortando
com o esti lete um
pedacinho
do meio com a colnia,
transferindo-o
para meio de cultura
sem antibitico
(BOA ou
Czapek - ver cap, 6) j solificado, em tubos de ensaio ou placas. Qualquer
meio pode ser ut ilizado.
Todos esses passos .so efetuados
bem prximos
chama, evitando-se deixar a placa aberta para no

B -

solidificado',

sem antibitico

Mtodos

A preservao atravs de repicaqens sucessivas o mtodo mais usado para manuteno

de culturas vivas (ver item 2.2.2).
Os microrganismos
preservados
em lminas (ver item 2.2.3), devem ser organizados por ordem
taxonmica
e guardados em armrios especiais, os larninrios,

2,6
Fungos e l/quens macroscpicos

contaminar.
O mtodo de diluio
do solo consiste em esterilizar
alguns tubos de ensaio com 9ml de gua
destilada cada um. Pesar 1,Og de solo da amostra e colocar em um dos tubos. Agitar bem. Este o tubo
da soluo inicial, o qual dever ser etiquetado
e marcado 1 :10. Com uma pipeta, retirar 1,Oml deste
tubo, e colocar em outro, marcando
1: 100, Do tubo 1: 100 retirar 1,Oml e colocar n tubo seguinte,
marcando
1: 1000. E assim sucessivamente,
usando uma pipeta esteril izada para cada transferncia,
marcando
as diluies e agitando os tubos a cada nova diluio. Transferir
1,Oml de cada tubo de diluio para placas esterilizadas
marcando-as
com a diluio
correspondente.
Verter o meio de cultura
(Czapek)
com antibiticos
(estreptomicina
+ rosa-de-bengala), ainda liquido, sobre as' placas e agitar
para espalhar a soluo no meio, Deixar solidificar
e observar o aparecimento
de colnias. Isolar as colnias, seguindo as recomendaes
para placa de solo, no esquecendo de anotar a que diluio pertencern.
Para isolamento
de fungos de substratos orgnicos usar o mtodo de presso de folhas que consiste em pressionar com a pina uma folha sobre a superfcie do meio de cultura com antibitico,
e retir-Ia em seguida. Deixar temperatura
ambiente e observar diariamente
o aparecimerito
de colnias,
Isolar as colnias
de aspectos diferentes,
seguindo as recomendaes
para placa de solo. Pode-se
pressionar, desta maneira, folhas em diferentes estgios de decomposio
ou recm-caldas.
O plaqueamento
de partes do substrato feito colocando,
numa placa-de-petri
esterilizada,
pequena subamostra
da coleta. Com o bisturi, cortar osubstrato
em pedacinhos.
Depositar
1-3 pedacinhos no centro
de uma placa com meio de cultura com antibiticos.
Verter pequena quantidade
de
gua esterilizada
sobre o substrato, .fazer movimentos
circulares para espalhar a gua e deixar temperatura ambiente,
Isolar as colnias em crescimento
seguindo as recomendaes
para placa de solo. Cuidar para que os instrumentos
sejam esterilizados
parcialmente
com lcool, a cada mudana de substrato, mesmo pertencente
mesma amostra, Se a amostra for de insetos muito pequenos, coloc-tos nas
placas sem cortar.
Para isolamento
de fungos do esterco de herbivoros,
preparar o cristalizador,
colocando
dentro
papel de filtro embebido
em gua. Introduzir
o esterco e tampar. Se for outro tipo de recipiente,
tampar com papel aluminio
ou amarrar um pano limpo. Deix-to temperatura
ambiente
e ao abrigo do
sol, porm, com iluminao.
Cuidar para que insetos e outros artrpodos
no penetrem no recipiente.
Observar macroscopicament
os fungos que aparecero. Tentar isol-los, tal como em placa de solo,
mas no colocar esterco na placa com meio, pois, outros microrganismos
podero crescer. Se tomado
esse cuidado,
isso acontecer,
isolar o fungo novamente. Observar os fungos ao microscpio,
entre lmina e laminula.
Para o isolamento
de fungos "aquticos"
do solo, ver item 2.3.1.
2_5.2.

Preservao
A -

Materiais
gua destilada ou meio de montagem
blsamo-do-Canad
benzina
bico-de-Bunsen
ou lamparina
esmalte incolor
estante para tubo de ensaio

Existe uma variao muito grande de fungos e liquens macroscpicos. Para coleta, preservao
e herborizao
levam-se, especialmente,
em considerao,
o tamanho e a consistncia,
Alguns, aps coleta, decompem-se
rapidamente,
tomando-se
impossivel
reconhec-tos, Nas tcnicas recomendadas,
procurou-se
abranger o maior nmero de fungos, embora, alguns, exijam procedimentos
especiais que
fogem ao objetivo deste manual.
.
Uquens ocorrem tanto sobre madeira como sobre rochas e folhas vivas. Ouando sobre pedra,
necessrio equipamento
especial, como martelo e talhadeira
usados pelos gelogos,
So relacionados
materiais considerados
ideais embora, algumas vezes, dispensveis ou substituiveis.
Em qualquer
2_6.1.

caso, cuidado

e bom senso so essenciais

A -

Materiais
carta de cores
cristalizador
esptula
folha de papel com uma das metades branca e outra
frasco de vidro com tampa de plstico ( 200m!)

preta,

para coleta de escores

de vidro escuro com fixador:

FAA + sulfato de cobre (ver cap. 6) ou FAA
cool a 5%
instrumento
com p-de-cabra, machadinha e martelo, conjugados
martelo e talhadeira
(para o caso especrfico de coleta de material sobre rocha)
papel de filtro ou algodo
Ver - INSTRUOES
GERAIS
frasco

B -

ou l-

Mtodos

Coletar preferencialmente
pela manh para dispor do resto do dia para o preparo e secagem do
mas, no muito cedo, pois o orvalho deixa o material muito molhado e fcil de embolorar.
Retirar, com faca ou esptula, o material por inteiro com cuidado, afofando em volta do subsevitando quebra ou esfarelamento.
Trazer junto parte do substrato.

material
trato,

No misturar materiais diferentes

num mesmo saco para evitar mistura de esporos.
Procurar coletar amostra significativa
com espcimes em diferentes estgios de desenvolvimento, ou mesmo formas teratolgicas
ou doentes e assegurar-se, sempre que possvel. da presena de partes frteis.
A quantidade
de material coletado
dever prever
Deve-se coletar, sempre que possrvel, um nmero mrnlrno
ca limitada s condies de transporte,

especifico

para uma coleta adequada.

Coleta

as atividades de intercmbio
da instituio,
de cinco duplicatas. A coleta de material fi-

Acomodar
com cuidado
e convenientemente
o material
coletado dentro da cesta ou sacola.
Proteger com folhas de jornal. Ouando muito grande embrulha-se
em jornal amarrarido com barbante.
Quando muito pequenos e frgeis (mixomicetos),
fixa-se o material com cola plstica no fundo de uma.
caixa de fsforo,
24 .

23

1.

! ,

"~o
No caso de fungos e liquens de textura crostosa procurar sobre o solo e outros substratos, como tambm em qualquer superf(cie voltada para o solo.
.
Na coleta de fungos de textura carnosa ou macia (delicada) aconselhvel fotografar ou desenhar o material no local, assim como anotar suas cores, utilizando para tanto uma carta de cores, pois
podem mudar muito de aspecto depois de secos. Em seguida, colocar em saco de papel ou plstico
acompanhado de pedaos de folhas verdes para preservar umidade.
To cedo quanto possivel, separar os prleos (Fig. 9) para coleta de esporas (excludos gasteromicetos cujos esporas se acumulam no interior e em seguida: a. separar o estipe do pileo; b. colocar o
pi'leo sobre o meio da folha de coleta de esporas com as lamelas, dentes, poros ou a parte frtil, voltadas para o papel; metade deve ficar sobre a parte branca e metade sobre a parte negra; c. colocar em
cmara mida (recipiente coberto - cristalizador - contendo em seu interior papel de filtro ou algodo para manter a umidade); d. aguardar 12 horas; e. retirar o fungo, dobrar as falhas, sec-Iase guardar no mesmo saco de coleta. Os esporas sero utilizados para identificao da espcie.
Para fungos deliqescentes, como por exemplo Coprinus, melhor trazer em saco aberto para
diminuir a autodigesto ou colocar diretamente em frasco contendo fixador.
2.6.2.

cartolina (ver capo5)

envelope de papel
naftalina
parad iclorobenzeno
Ver - INSTRUOES GERAIS
B-

Mtodos

Colocar o material seco em caixas de papelo, com tamanho adequado ou embrulh-Ia em pa

pel Kraft dobrado como envelope e colar em cartolina. Quando o material for muito grande, cort-Ia
em fatias, que devem ser representativas do aspecto geral do fungo.
No caso de material seco prensado, pregar as partes em folha de cartolina, procurando imitar a
posio orig inaI.
Para outros esclarecimentos, ver capo 5.

Preservao
A - Materiais
i.:'

bisturi ou lmina de barbear

caixa de fsforo ou papelo
cola plstica
estufa (na falta, seca-seao solou prximo a uma lmpada)
fixador (ver capo 6)
jornal
placa-de-petri com meio de cultura (preferencialmente, extrato de malte ou BDA
cap.6)
prensa
tampo de gaze e algodo para os tubos-de ensaio
tubo de ensaio com meio de cultura
B-

...!

ver

Mtodos

Para preservao de material seco em herbrio, coletar cuidadosamente com a esptula o material de interesse, se possvel com parte do substrato. No caso de fungos de aspecto pulverulento, acondicionar os diferentes espcimes em caixas de fsforo ou papelo, de acordo com a convenincia e dimenses do material.
Como geralmente os fungos pulverulentos so frgeis, liberando com facilidade grande quantidade de esporas, sugere-se, no momento da coleta, fixar o material nas caixas, com o auxilio de cola
plstica. Esta mais indicada, por ser menos susceptvel ao ataque por outros fungos e insetos e por secar rapidamente.
.
No caso de fungos crustosos a secagem pode se processar ao solou em estufa por cerca de 24
horas a uma temperatura de aproximadamente 400C.
Os demais fungos so secados ao sol, ou em estufa, no prprio saco de coleta, temperatura
entre 50600C. No caso de material carnoso muito espesso ou quando conveniente, cortar em fatias,
dispor sobre cartollnaenvolver
com diversas camadas de jornal, prensar e secar.
'
Quando um material, aps a secagem, se torna muito r(gido e quebradio, recomenda-se deix-Ia absorvera umidade do ar por 24 horas antes de guard-Ia.
Para preservao em meio I(quido coloca-se o material em frasco com fixador. Isso pode ser
feito no momento da coleta ou depois.
Outros tipos de preservao so a liofilizao (ONIONS, 1971) e preservao em meio de cultura por inoculao de esporas ou por pedaos do corpo frutifero.
2_6.3_ Herborizao
A.-

Materiais
caixa de papelo (tamanhos diversos - so mais usadas as caixas de 10 x 12 x 5cm,
10 x 12 x 15cm, 14 x 22 x 15cm, respectivamente, de largura, comprimento e altura)
25

26

r';'

r'

3
BRIFITAS

3.1
Introduo
A diviso Brifita constituda de trs classes: musgos, hepticas e antceros. No entanto, o
nome musgo aplicado pelo leigo tanto a representantes das trs classes,como tambm, a Iquens, algumas pteridfitas (Lycopodium, SelaginellaJ e, at mesmo, a algumas fanergamas da farrn lia bromelicea (Tillandsia usneoides, conhecida como "musgo espanhol" ou "barba-de-velho").
Na colorao, as brifitas so na maioria verdes, variando do verde escuro ao verde-amarelado,
exceto os "musgos brancos" e os "musgos de turfeiras" que so paleceos, rseos e vinosos.
As brifitas crescem nos mais variados substratos tais como: tronco vivo, ou em decomposio,
humus, superfl'cie de rochas, solo arenoso, argiloso, calcreo. folhas vivas, conchas e outros materiais
orgnicos.
As brifitas so encontradas tanto em florestas de regies midas, como tambm no cerrado,
na caatinga e mesmo no deserto, onde a umidade relativa muito baixa.
3.2
Tcnicas

3.2.1.

Coleta
A -

Materiais

BRIOFITAS
caixa de papelo grande
leno de papel macio
saco confeccionado com jornal (19 x 12,5cm)
tesoura pequena
Ver - INSTRUOES GERAIS

Diga Yano

B-

Mtodos

Quase no existe tcnica especial para a coleta de brifitas, porque o material de fcil conservao; raramente embalara e quase no atacado por insetos, quando seco. Como conseqncia, os
amadores tm coletado as brifitas desde tempos remotos.
O material, sempre coletado com um pouco do substrato, deve ser secado temperatura ambiente ou levemente prensado entre jornal ou papel chupo, mas nunca colocado em prensa. Quando a
brifita possui caulrdio ereto (Ex.: Polytrichum) os indivduos devem ser arrumados todos numa mesma posio, para evitar o emaranhamento. Sempre que for o caso, deve-se coletar tanto os gametfitos
masculinos como os femininos. Havendo poucos esporfitos, estes so separados e colocados juntos,
no saco original, com o mesmo nmero, para evitar que se percam ria meio do material. Recomenda-se
que o material coletado seja mantido temperatura aproximada de 230C. Em se tratando de brifita
aqutica ou muito mida, retira-se o excesso de gua, comprimindo-a levemente entre papel chupo,
sem espremer e, em seguida, para reduzir a umidade, coloca-se em saco de papel comum ou confeccionado com jornal evitando seu estiolamento ou emboloramento. Permanecendo o material coletado em
recipiente, apenas por 1-2 dias, pode-se usar saco plstico, evitando-se excesso de gua e compresso.
Sendo a expedio muito longa, as colees de um mesmo local ou do mesmo dia so colocadas em
saco plstico grande ou em caixa de papelo com as respectivas data de modo a evitar mistura. Material
vivo pode ser assim conservado sob refrigerao (2-30C), desde que a planta permanea apenas mida
e fique solta no saco.
Sempre que possrvel, coleta-se quantidade suficiente de material para estudos posteriores e para a confeco de duplicatas. Quando muito misturado, o material deve ser dissociado e deixado dentro do mesmo saco. Se em grande quantidade, distribui-se em sacos diverssos, sempre com o rnesmo
nmero, mas diferenciados por letras. Em cada pacote so escritos os nomes das espcies associadas.
Tambm importante o uso de sacos pequenos para manter as espcies delicadas, em boas cond ies
ou para estudo microscpico, com a proteo adicional de leno de papel macio. No prprio saco de
papel so feitas as anotaes.
28

!~

".

3.2.2.

Preservao
A - Materiais
FAA (ver capo 6)
formalina (= formal 40%) a 1%
soluo de Transeau (ver capo 6)
B -

Mtodos

Preservao somente usada para as estruturas delicadas, como por exemplo, talo, espor6fitos
e anteridios de hepticas e ant6ceros, que so fixados-em FAA, soluo de Transeau ou em formalina

a 1%.
3.2.3.

Herborizao
A -

Materiais
envelope padronizado (12,8 x 9,5cm) de papel sulfite (28 x 21 ,5cm)

B -

Para a secagem de bri6fitas, coloca-se o material entre jornais, espalhando-o e depois apertando-o levemente. Depois de secado temperatura ambiente ou em estufa (nas regies tropicais midas)
o material colocado em sacos de papel e, em seguida, dentro de um envelope padronizado (12,8 x
9,5cm). confeccionado com papel sulfite, (28 x 21 ,5cm), conforme modelo indicado (Fig. 11). Esses
envelopes so rotulados e colocados em caixas de tamanho padro ou em gavetas.

1
1
1

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4.11em

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2 I

I,

.. ,....

11

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Figura 11. Forma de dobrar folha de papel sulfite, tamanho

de 12,8 x 9,5cm.

Mtodos

carta, de 28 x 21 ,5cm, para a confeco

de envelope padro

29

30

(;

,"

I,'

4
PTERIDOFITAS

(-

FANEROGAMAS

4.1
Introduo

4
PTERIDFITAS

FANEROGAMAS

4.1. INTRODUO
De autoria dos responsveis pelas partes deste captulo

A estrutura e o habitat do vegetais determinam o emprego de tcnicas especificas para a coleta

e a herborizao. Assim, em se tratando de trabalho de cunho eminentemente tcnico, as plantas so
distribuidas, no presente capitulo, em funo das tcnicas requeridas e no de acordo com suas relaes evolutivas.
Como j salientado no iru'cio, os materiais bsicos exigidos, tanto para a coleta como para a
herborizao, constam das relaes encontradas no caprtulo: INSTRUOES GERAIS. Dessa forma,
neste capitulo, s sero listados os materiais mais especrficos requeridos na coleta e herborizao de
exemplares dos conjuntos de plantas aqui considerados.
Quanto s tcnicas de coleta e herborizao, deve-se levar em conta que existe um padro bsico a ser adotado, no todo ou em parte para os grupos tratados. Por isso mesmo, deixar-se- para os
conjuntos enfocados, na descrio das tcnicas, apenas o que for ,a eles pertinente em termos mais especrficos.
''.
.

4.2. PTERIDOFITAS
Amaldo

c-

Padro geral da coleta

Tosta Silva

4.3. FANEROGAMAS

Sempre que possivel deve-se colher um minimo de cinco exemplares (espcimes ou ramos) de
uma planta, em seu estado mais perfeito e completo. Na coleta de uma planta intelra aconselha-se o
uso de desplantador que permitir a retirada do sistema subterrneo sem grandes danos e no arranc-Ia do solo, puxando-a por qualquer de suas partes. Os exemplares no devem ultrapassar 3O-40cm.
Caso, entretanto, isto venha a acontecer com uma planta inteira, o que ultrapassar deve ser dobrado
em V ou N (F ig. 12). de forma a caber na cartolina padro de herbrio. Quando o tamanho do exem
piar, espcime ou' parte dele (ramos, folhas, etc.) ultrapassar em demasia as dimenses desejadas, recomeada-se seu corte no tamanho adequado e no, quebr-to ou rasq-10. Cada segmento deve receber,
ento, a indicao da frao que representa do todo (Ex.: "Parte um de cinco partes"). O conjunto
de fraes relativas a um mesmo exemplar deve permanecer sempre junto e sob o mesmo nmero de
herbrio. Os ramos so cortados, sempre que possvel, junto com folhas, flores e frutos, indispens
veis que so, em geral, identificao das plantas. Sendo vivel, o espcime a ser conservado em her
brio, deve incluir tambm, raiz e caule. No caso de plantas monicas di'clinas ou de plantas diicas,
especial cuidado deve ser tomado na obteno de flores de ambos os sexos. Para evitar que flores se:
jam danificadas por aderncia s asperezas do jornal, recomendado, quando necessrio, proteq- Ias
com papel manteiga. Tanto quanto possivel, deve evitar-se o corte da extremidade das inflorescncias. Frutos secos, que pelo seu tamanho no possam ficar presos aos respectivos ramos, ou frutos caro
nosos, so colocados em sacos de papel, devidamente rotulados, com numerao igual a do ramo, do
qual foram destacados.
Obs.: Evita-se colher material muito mido, pois, alm de dificultar a secagem, propicia orpido apodrecimento e o emboloramento. Tambm, no se recomenda coletar frutos e sementes que
estejam no cho sob uma rvore, j que podem no pertencer mesma e terem sido trazidos por enxurradas ou por qualquer outro meio.
'

HERBCEAS

Celi Ferreira da Silva Muniz

Maria das Graas Lapa Wanderley
Mizu Kirizawa
Tatiana Sendulsky
Theophilo Selem da Silva
4.4. FANEROGAMAS

ARBUSTIVAS

Angela Maria Maluf

Maria Stella Femandes Silvestre
Silvia Antnia Corre Chiea
4.5. FANEROGAMAS

ARBOREAS

Alcebiades Custodio
Waldir Mantovani
4.6. FANEROGAMAS

Filho

SUCULENTAS OU VOLUMOSAS

Sigrid Luiza Jung

Fbio de Barros
4.7. FANEROGAMAS

('

AQUTICAS

,'I
('

Lucia Camargo de Abreu Oliveira

Padro geral de herborizao
Col~tados os exemplares, estes so arrumados de forma a reproduzir a posio vista no carnpo, e distendidos em folhas inteiras e dobradas de jornal (nunca meias folhas) ou papel absorvente,
colocadas entre papelo canelado com os canais orientados sempre no mesmo sentido e assim sucessivamente de modo a constituir um empilhado entre dois cartes resistentes ou duas tbuas, sendo o
conjunto arrochado por uma corda com toda fora possvel. Formam-se desta maneira as pastas de
coleta ou prensas, de fcil transporte (Fig. 37). No campo, o processo de secagem inicia-se nas prprias
prensas, pela troca constante e/ou diria das folhas de jornal umedecido por outras secas,ou colocando-as ao sol, por 56 dias, em posio tal que favorea a penetrao dos raios solares. Aconselhs-severificar periodicamente, tanto de forma visual como pelo tato, a secagem do material, providenciando
troca de papel e, se necessrio, o reaperto das prensas para eliminar os espaos que surgem com a di31

32

I
!

-e

~'.'

minuio do volume. A fim de acelerar a secagem pode-se transferir o material para estufa com circulao de ar quente, onde permanecer por 10-12 horas ou mais, dependendo de sua consistncia. Antes
de levar a prensa estufa, coloca-se uma chapa de alumt'nio corrugado entre as folhas de papelo canelado com o sentido do corrugado acompanhando o dos canais do papelo enquanto as prensas so colocadas na estufa em posio tal que favorea a circulao de ar. Evita-se o ressecamento excessivo
pois. as plantas perdero muito do colorido, alm de se tornarem quebradias. Uma vez secosos exemplares, deles se retira todo material inaproveitvel e que no oferea qualquer informao cientfica
adicional (Ex.: excesso de ramagem, materiais estranhos, folhas secas,partes corrodas ou semi-decompostas, etc.) tornando-os, assim, mais fceis de serem examinados, mais limpos e em condies de ofecerem melhor apresentao exsicata. Esta montada sobre cartolina cortada no tamanho padro utilizado no herbrio (no Brasil, o tamanho mais econmico e usual o ele 42 x 2Bcm) e qual o espcime preso, usualmente costurado, enquanto, materiais delicados ou de pequeno porte so colocados
elentro de envelope resistente que colado cartolina. Rtulo, contendo os dados de coleta, igualmente colado. Em seguida registra-se a exslcata apondo sobre a mesma o nmero de herbrio a ela
correspondente, bem como, sobre a capa que ir revesti'-Ia. Esta, em bom nmero de herbrios, de
papel pardo resistente, enquanto, em outros usam-se capas diferenciadas em suas cores, de acordo
com a correlao estabelecida com sua procedncia geogrfica.
Obs.: Alguns rgos vegeiais (espatas, frutos e estrbilos) ou amostras de madeira que so de
difl'cil herborizao por sua constituio e tamanho, podem ser guardados em colees separadas, em
carpotecas ou xilotecas, mantendo-se no registro o nmero da exsicata de herbrio . qual se relacionem.

Todas as partes de uma pteridfita so necessrias taxonomia, portanto, cada planta deve ser
coletada inteira. A ausncia de qualquer parte, desvaloriza e, s vzes, at impossibilita uma identificao precisa, razo pela qual se recomenda o emprego de desplantador, tesoura de poda e estopa para a
coleta, sem causar grandes danos, e a necessria proteo do material.
No caso das psilotceas, himenofilceas e outras que possuem rizoma muito incrustado em seus
substratos, parte deste deve ser removido junto com a planta.
Das arbreas, coleta-se a fronde toda, inclusive as escamasda base da raque, se for o caso.
4.2.2.

Preservao
A - Materiais
Conforme requeridos pelo mtodo escolhido (ver 4.2.2.B)
B-

Mtodos

H grande diversidade de porte e de habitar entre as pteridfitas. Assim sendo, possivel encontrar-se pteridfitas herbceas, arbustivas, arbreas e aquticas. As tcnicas de preservao diferem
entre si, mas, equivalem-se s utilizadas para plantas fanerogmicas em condies equivalentes, onde essastcnicas so descritas.
4.2.3.

4,2

Herborizao
A - Materiais

Pteridfitas

Ver - INSTRUOES GERAIS

Samambaias, avencas, selaginelas, cavalinhas, enfim todos os vegetais que dispem de sistemas
condutores de seiva, que no produzem flores e que se reproduzem por esporos, pertencem Diviso
Pteridophyta.
Trata-se de um grupo de plantas um tanto numeroso, com cerca de dez mil espcies j descritas.
So encontradas nos mais variados habitats, tais como: solo; gua; sobre pedras ou rvores;
nos barrancos de estradas, de rios e de riachos; nos arredores de casase construes; nos cerrados, matas, etc.
Tem havido grande interesse por estas plantas, principalmente na ornamentao, devido popularidade de muitas espcies. Contudo, outras so destacadascomo medicinais, txicas, infestantes de
pastagens, cornestrveis, etc.

B-

Mtodos
Ver 4.1:

PADRO GERAL DE HERBORIZAO,

com as seguintes recomendaes:
a. as pteridfitas e.entre elas principalmente avencas e himenofilceas, devem
ser imediatamente prensadas para evitar o enrolamento dos bordos; b. as espcies mais delicadas devem ser colocadas em pasta parte, pois merecem secagem mais gradual e menos intensa, para evitar a falsificao da cor e a quebra
do material botnico, quando manuseado depois de sco.
4.3
Fanergamas

4.2.1.

herbceas

Coleta
A -

Materiais
desplantador (ou outro implemento que sirva para a remoo das plantas) - Fig. 31
estopa
tesoura de poda
Ver - INSTRUOES GERAIS

B-

Mtodos
Ver 4.1. PADRO GERAL DE COLETA

As plantas destinadas ao cultivo devem ser coletadas quando ainda jovens, isto , em forma de
"mudas". Quando novas, as plantas apresentam maior viabilidade para adaptao nos ambientes em
que so cultivadas. Contudo, algumas espcies de pteridfitas, so pouco prejudicadascom o transplante.
Os rizomas tambm podem brotar e constituir novas plantas.
Para fins taxonmicos, aspteridfitas, devem ser coletadas apenas quando frteis, ou seja, quando possuem rgos de reproduo assexuada. Nas pteridfitas, estes rgos no formam flores, e sim
soros, conjunto de esporngios, visrveis com auxlio de uma lupa ou mesmo a olho nu, dentro dos
quais se acham os esporos.
33

Em qualquer ecossistema, observa-se a presena de plantas de pequeno porte, com rgos epgeos ou subterrneos com pouca ou nenhuma lignificao. Estas so plantas herbceas,geralmente de
caule fino e delicado, no qual o meristema do cmbio vascular acha-se ausente ou com desenvolvimento. No entanto, em certas famlias ocorrem herbceas de grande porte, tais como: musceas, gramneas, marantceas, etc.
As plantas herbceas so comuns em monocotiledneas e em vrias famlias de dicotiledneas.
Das angiospermas que possuem bulbos ou colmes. a maioria monocotilednea, especialmente da ordem Liliales.
As herbceas so em g'eral anuais, isto , florescem e frutificam em um ano; mas h, tambm,
representantes bienais, que completam seu ciclo vital em dois anos, ou as perenes, que continuam indefinidamente o processo biolgico, em geral com florao anual.
Adaptaes morfolgicas ou fisiolgicas existentes em vrias plantas herbceaspossibilitam que
sobrevivam em habitats desfavorveis. O grupo das plantas efmeras, xerfitas, resiste seca, porque
completa seu ciclo de vida, enquanto h gua disponvel no ambiente (plantas anuais); outras herbceas adaptadas a ambientes ridos so as portadoras de sistema subterrneo, com reservas nutritivas,
que Ihes permitem suportar a seca ou o frio. comum tambm, em muitas gramneas e ciperceas de
campos cerrados, a presena de restos de bainhas foliares (tnicas), protegendo as partes vivas da planta na poca das queimadas. Certas qramneas. convolvulceas, malpiguiceas, amarantceas, etc. contribuem, com seus estoles e rizomas para reduzir a movimentao de dunas.
4.3.1.
34

Coleta

'~:~.-::~
..
('

cJ

(i

(,

A -

Em plantas muito altas, a superposio de folhas e ramos deve ser evitada, cortando-se a planta
em pores menores, ou herborizando apenas as partes basal, mdia eterrninal. como em certas qr arruneas. Neste caso, no esquecer de numerar a folha onde cada parte foi colocada, segundo a ordem na

Materiais
desplantador (F ig. 31)
picaretinha (camartelo)
tesoura de poda

tural em que estava localizada na planta.

Quando se tratar de herbceas providas de muitas folhas (bromeliceas), ou de caules espessos
(arceas), conveniente seccionar as plantas longitudinalmente em duas partes.
Para se obter melhor herborizao de exemplares de folhas muito grandes, como certas marantceas e rnusceas. pode-se recorrer ao corte ao longo da nervura mediana, e posterior dobramento em
Vou N (Fig. 12) ou diviso em partes, j referidos.

Ver - INSTRUES GERAIS

B-

Mtodos

4.4
Ver 4.1: PADRO GERAL DE COLETA

Fanergamas arbustivas

/>

rl

,!

,j

,\
I'

,I

~ j

~iI

,!

4.3.2.

Preservao

Define-se arbusto como vegetal lenhoso, de menos de 5m de altura, sem um tronco pr eponde-

A - Materiais

rante, que se ramifica a partir da base.

Os arbustos esto compreendidos entre as plantas lenhosas, nas quais os tecidos de sustentao
e conduo do caule formam camadas que se acrescentam ano a ano. O crescimento do caule continua
a cada ano, a partir do tecido embrionrio que se forma nos vrios pontos de crescimento. Incluern-se
nas plantas lenhosas'perenes quando vivem mais de dois anos. Na maioria dos casos, formamos rgos
vegetativos no primeiro ano, mas s produzem flores uma ou rnais estaes depois, desde que as condies sejam favorveis.
.

lcool
gua desti lada
FAA (ver capo6)
frasco' de vidro com tampa (vrios tamanhos)
glicerina pura
parafina ou cera de abelha ou breu
pina
Sulfato de cobre

Coleta

Mtodos

Muitas vezes surge a necessidade de preservar a planta em liquidas apropriados, principalmente,

quando se trata de plantas rnuito pequenas e delicadas, que facilrnente se prejudicam pela secagem.
Tambm costuma-se fixar a planta inteira (pequeno porte), ou partes da planta, como flores e frutos
carnosos, em frascos ou tubos de tamanhos variados,
Na preservao, devem ser tomados os seguintes cuidados: deixar os frascos parcialmente
cheios de li'quido conservador, com um pequeno espao vazio entre a superfl'cie liquida e a tampa;
imergir completamente as partes vegetais; colocar apenas uma espcie em cada frasco; colocar dentro
do frasco, com a face escrita aposta naturalmente parede interna, o rtulo escrito a lpis, numerado e
com indicaes precisas sobre a cor das partes; no forar a posio natural da planta dentro dos frascos, principalmente no caso de preparao definitiva para mostrurios; calafetar os interstrcios com parafina, ou mistura fundente de parafina e partes iguais de cera de abelha e breu, quando aplicar ao fr asco e a ,tampa esmerilhada ou de cortia, com sua superfl'cie previamente bem enxuta e limpa com um
solvente qualquer (xilol, gasolina ou benzina).
Como principais preservadores de estruturas para estudos morfolgicos e anatmicos usam-se
solues de lcool etilico 70%, 85% e mesmo 90% conforme o caso.
Apesar de muito usado, o lcool tem o inconveniente de descorar por completo as plantas e
torn-Ias duras e quebradias. No entanto, submetendo-as a uma breve fervura na hora do estudo, ou a
uma permanncia mais ou menos prolongada em gua fria, podem tornar-se mais macias e tlexiveis,
4,3,3.

Herborizao
A -

Materiais
Ver -INSTRUES

B-

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4.4.1.

A - Materiais
B-

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cajado de corda
frasco de vidro com tarnpa (vrios tamanhos)
gancho para abaixar e/ou cortar galhos (forrnatos diversos) - F ig. 13-16
tesoura de alto-poda com cabo de encaixe (Fig, 1719)
tesoura de poda manual
Ver - INSTRUES GERAIS
B-

Ver 4.1 : PADRO G ER AL DE COLETA

Obs.: No caso de usar sacos plsticos, no esquecer de etiquetar o material coletado para
caracteriz-to bem e no confundi-lo corn outras coletas.
Para a coleta de ramos de partes muito altas utilizam-se ganchos para abaixar e/ou cortar galhos, de formatos diversos (F ig_ 13-16) ou tesoura de alto-poda com cabo de encaixe (Fig. 17-19).
Nem sempre se encontram flores e frutos simultaneamente no mesmo p, conseqentemente,
deve-se ter a ateno despertada para colh-tos na prirneira oportunidade. O rnesmo aplica-se plantas
que perdem as folhas na ttoraco.
Para plantas diicas, isto , que possuem flores masculinas e femininas em ps diferentes, suqere-ss procurar pelas redondezas a de sexo oposto, Semelhante procedimento deve ser tomado quando
houver poca de maturao diferente entre as flores de cada sexo, no mesmo p (plantas monlco-dlclinas) ,

GERAIS

Mtodos

Cabe chamar a ateno para o fato de que muitas plantas possuem flores minsculas que so-

mente so perceptiveis com a lupa na mo.

Mtodos

4.4,2,

Preservao
A -

Ver 4.1. PADRO GERAL DE HERBORIZAO

lcool 70%, 85% e 90%

etiquetas
FAA (ver capo6)
frasco com tampa esmerilhada

Caso os espcimes herbceos, de 1,Om a 1,5m (como certas gramineas), tenham tendncia de se
desdobrarem, devem ser amarrados levemente ou presos com a segunda capa colocada dentro da primeira pasta em posio oposta, para que no se soltem pelas laterais do invlucro. Ao arnarr-los, no
se utiliza esparadrapo ou fita adesiva.
35

Materiais

36

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lquido
soluo
soluo
soluo
soluo
B-

de Hammarlund (ver capo6)

aquosa de cido sulfuroso a 56% (ver capo6)
aquosa de formalina (= formol 40%) a 10%
aquosa de sulfato de cobre a 5% (ver capo6)
de lcool a 90% com gua destilada e glicerina pura, em partes iguais

Mtodos

Algumas plantas devem ser preservadas em meio lquido. Frutos carnosos ou flores muito tnues so colocados em tubos ou frascos de tamanhos variveis.
As recomendaes descri tasem 4.3.2.8 para o uso de lquido conservador, aqui tambm se aplicam. Para conservao da cor verde do material, adiciona-se sulfato de cobre soluo de FAA (ver
capo 6). Depois de retirado o excesso de sulfato do material por lavagem, a planta transferi da definitivamente para a mesma soluo sem sulfato. Em se tratando de partes suculentas, acrescenta-se, soluo, definitiva, at 20% de glicerina. As plantas submetidas a estes diversos lquidos, podero ser novamente preparadas a seco na prensa, depois de lavadas e enxutas.
Alm deste processo, o mais usado o emprego de lcool a 70%, 85% e mesmo 90%, conforme
o caso. Quanto aos inconvenientes que determina, veja 4.3.2.
Outra soluo conservadora a de formal comercial (formalina), que no aqeto violentamente como o lcool na descolorao dos tecidos.
Para partes vegetais que se tornaram quebradias, em especial as carnosas, recomenda-se uma
mistura, em partes iguais, de gua destilada, lcool a 900 e glicerina pura.
Esta mistura poder ser usada tambm como amolecedor de material seco de herbrio.
Excelentes resultados na conservao de cores naturais das plantas so obtidos pelo emprego
do processo de Orummond edo lquido de Hammarlund (ver capo 6.1, b-c).
4.4.3.

Herborizao
A -

Materiais
Ver - INSTRUOES GERAIS

B-

Mtodos
Ver 4.1: PADRO GERAL DE HERBORIZAO

4.5
Fanergamas arbreas
As rvores so plantas lenhosas perenes que apresentam um caule principal, sem ramificaes,
que se distingue da copa. So os maiores vegetais existentes, atingindo vrios metros de altura.
O principal problema na coleta das amostras para herborizao de espcies arbreas a localizao dos ramos frteis, geralmente nas partes mais altas do vegetal. Alm disto, freqente enoontrar-se rvores em formaes densas, com suas copas entrelaadas, aumentando a dificuldade da amostragem.
4.5.1.

Coleta
A -

Figura 12. Exsicata com uma planta inteira que ultrapassa

dobrada e arrumada.

o tamanho

da folha de herbrio,

mostrando

cinto de segurana (Fig. 22)

escada de alurm'nio com extremidades encaixveis (produo comercial)
escada de corda (F ig. 23)
espingarda
espora especial (Fig. 23)
estribo de ferro (F ig. 23)
ganchos (Fig. 13-16)
gancho de ferro para escalada na escada de corda (Fig. 23)
lance de alumnio ou bambu encaixvel
linha de nilon resistente

como deve ser

38
37

Materiais

::

1
peso de chumbo (50,300g)
serra, serro te ou motosserra
serra articulada (Fig, 27)
tesoura de alto-poda com cabo de encaixe (Fig, 17-19)
tesoura de poda manual

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Ver - INSTRUES GERAIS

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Mtodos

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Um dos mtodos mais simples para a coleta de plantas arb6reas o do uso de ganchos (Fig,
13-16) presos numa extremidade de varas de altura desejada, fixa, ou num lance encaixvel de aturrunio ou de bambu, Por trao ou empuxo os ramos florlsticos e/ou frutiferos so derrubados,
Utiliza-se, tambm, tesoura de alto-poda que elevada at o ramo desejado, atravs de lances
encaixveisde alurru'nio ou bambu de fcil transporte e manuseio (Fig, 17-19). A tesoura acionada
,mecanicamente por um cordel.
,
'Em certos casos emprega-se espingarda de calibre 22 a 45 alvejando' o' ramo desejado,
A escalada de rvores, para coleta, pode ser feita com auxilio de esporas que se prendem ao calado e se fixam nos troncos e de correias presas a uma cinta e passadasao redor do tronco, segurando
o coletar (F ig, 20 -22, 241, Neste processo recomenda-se um bom treinarriento prvio,
Diferentes tipos de escadas podem ser utilizadas na coleta de plantas arbreas. A escada articulada encontrada no mercado com lances de 2m, de alurnrnio, de fcil manuseio, bem como, resistente e leve para o transporte, Cada lance provido de uma correia de couro pela qual se prende ao
tronco do vegetal e com encaixes para o lance seguinte, A escada de corda (KUHLMANN, 1947), consiste de uma corda com ns simples, espaados de aproximadamente 30cm entre si. Esta corda tem
presa na sua extremidade um gancho de ferro que a fixar num ramo capaz de suportar o peso do coletar (Fig, 231. A fixao da escada de corda feita com o arremesso de um peso amarrado a uma linha
de nilon (ver forma de arremesso - Fig, 251, que alm de servir para o posicionamento da escada, servir tambm para sua retirada (Fig, 25), A extremidade da corda que fica no solo presa a um toco,
raiz ou pino (Fig. 231. a fim de evitar oscilaes, Para sua utilizao so necessrios dois ganchos, ajustados ao calado por meio de correias, que serviro para o apoio nos ns. Por segurana, usa-seum gancho preso a um cinturo de couro, que tambm se apoia na escada por um n e libera as mos do coletar para manejo dos instrumentos de corte, Em ambas as escadas, ao atingir o ioeal adequado a, conforme a disposio e/ou resistncia do material a ser coletado, o coletar usar tesoura manual ou de
alto-poda, serra, serrote ou motosserra.
Outra tcnica que pode ser utilizada para a coleta consiste no arremesso manual de uma pea
de metal pintada (branca ou vermelha) de 200-3009, presa a uma linha de nilon, que deve passar sobre o ramo desejado (Fig, 25). O arremesso pode ser feito tambm por meio de estilingue usando-se
uma pea de 50-1 OOg,A linha de nilon prende-se a uma corda na outra extremidade que assim passada sobre o ramo, Juntando-se as duas pontas da corda e tracionando-a, o ramo deve partir-se e vir ao
solo, Neste processo pode-se acrescentar as tcnicas descritas por KUHLMANN (19471 que incluem o
uso de serra articulada ou fixa na parte mediana da corda (Fig, 26-271, serrando-se o ramo desejado.
4,5,2,

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Preservao
A -

21

Materiais
etiqueta
formalina (= formal 40%) ou FAA (ver capo6)
frasco de vidro coni tampa (vrios tamanhos)
lpis ou caneta a prova d'gua
parafina
.

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B --Mtodos
Figuras 13-16, Ganchos, Figuras 1719. Tesouras de alto-poda, Figuras 2021, Espora especial. Figuras 22, Cinto de se.
gurana,
.

39

Consiste em colocar a planta ou partes da planta em frascos contendo fixador (FAA ou formalina),

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Figura 23. Apetrechos

para subida em rvores: escada de corda; pino de fixao; ganchos
preso em clnturo de couro (Kuhlmann, 1947).

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Figura 25.

Arremesso

manual' de peso de chumbo (Kuh/mann,

1947).
Figura 26.

43

Uso de serra fixa (Kuh/mann,

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19471.

44

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Os dados sobre a planta, devem ser escritos a lois ou a caneta prova d'gua numa etiqueta de
papel e colocados dentro de um vidro com o material. Deve-se cuidar para que a concentrao
inicial
do preservado no seja alterada por evaporao ou por diluio, em conseqncia
de perda de gua peIa prpria planta.
Os frascos tampados devem ser calafetados com parafina.
4.5.3.

Herborizao
A -

Materiais
Ver -

B -

INSTRUES

GERAIS

Mtodos
Ver

4.1.

PADRAO

GERAL

DE HERBORIZAAO

4.6
Fanergamas suculentas ou volumosas
Materiais
botnicos
muito volumosos,
como grandes frutos, flores carnosas, plantas suculentas,
ou mesmo, caules e raizes muito desenvolvidos,
apresentam dois grandes problemas
na herborizao:
precisam ser mantidos
durante mais tempo na secagem e, ao serem prensados perdem muitas das formas primitivas
da planta viva por amassamento
ou enrugamento.
Alm disso. muitas plantas suculentas, como crassulceas e partes vegetativas de orqurdeas, resistem muito aos mtodos usuais de secagem
e no morrem,
podendo
continuar
seu crescimento,
perdendo as folhas e adquirindo
uma aparncia
anormal.

(.

As orqudeas
normalmente
apresentam
um acentuado contraste entre a suculncia das partes
vegetativas e a tenuidade
das flores, 'de forma que, ao serem secas segundo as tcnicas usuais, as flores
tornam-se ressecadas, enquanto
as partes vegetativas mal comeam a secar. So, portanto,
necessrias
precaues especiais.

4.6.1.

Coleta
A -

Materiais
desplantador
(F ig. 31)
tesoura de poda
Ver -INSTRUES
GERAIS

B -

Mtodos
Ver

4.1.

PADRAO

GERAL

DE COLETA

As plantas suculentas e as volumosas so coletadas segundo os mtodos usuais. Geralmente

podem ser mantidas em sacos plsticos fechados at o final do perlodo de coleta sendo, s ento, prensadas. Isso possrvel. por se tratar de material relativamente
resistente ao dessecamento e a eventuais danos no transporte.
No caso especrtico
das orquldeas,
aconselhvel prensar-se a inflorescncia
j no campo, deixando-se as partes vegeta.tivas para preparo posterior. Nunca demais lembrar que, no preparo das partes de uma planta, deve-se tomar o cuidado de numer- Ias, para que no haja confuso e mistura de

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Figura

27,

Serra

articulada

Kuhlmann,

materiais.

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4.6.2.

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Preservao
A -

Materiais
lcool 50% a 70%
etiqueta
FAA (ver capo 6)
formalina
(= formal
glicerina

1947),
46
45

40%)

(,

rparafina
sulfato de oxiquinolina
vidraria
B-

Mtodos

Em alguns casos, recomenda-se a conservao da planta ou parte dela em liquide preservativo,

para manter o material quase indeformado e, para tanto, o uso da soluo a 10% de formalina ou da soluo de lcool etico (50%- 70%) com um pouco de glicerina ou de FAA (ver capo 6) indicado.
Um excelente auxiliar de campo a soluo aquosa de sulfato de oxiquinolina de 0,1% a 1%
(SWINGlE,
1930). Sua grande vantagem poder ser preparada no local de trabalho, pois peq-uena
quantidade de soluto em gua suficiente para prevenir o desenvolvimento de bactrias. Alm disso,
no venenosa, nem voltil. A nica desvantagem sobre o lcool e o formol sua ao antissptica
ser restrita a um perodo curto.
No caso de preservao de flores e, mais especificamente, das de orqurdeas. o lquido mais usado o lcool 70% com 10% de glicerina (ver capo 6).
Os dados sobre a planta devem ser escrito a lpis ou a caneta, com tinta prova d'gua, numa
etiqueta de papel que colocada dentro do vidro com o material.
Deve-se cuidar para que a concentrao 'inicial do preservado no seja alterada por evaporao'
ou por diluio devida perda de gua pela pr6pria planta, o que pode ser evitado, calafetando-se os
frascos tampados com parafina ou trocando-se o lquido com freqncia, respectivamente.
Sendo o material preservado em h'quido correspondente a uma coleta depositada em herbrio,
importante fazer-se a referncia cruzada.
4.6.3.

Herborizao
A -

Materiais
gua
areia
caixa ou frasco com tampa (vrios tamanhos)
faca com bainha (Fig. 32)
formo I
naftalina
sal
vinagre (cido actico)
Ver - INSTRUES GERAIS

B-

palhar um pouco de naftalina sobre o material mido, que alm de absorver a umidade funciona tambm como fungicida (JOHNSTON, 1939), Como alternativa, coloca-se o material entre duas folhas de
papel absorvente e passa-secuidadosamente com ferro eltrico, completando-se a secagem em estufa
(BIMONT, 1945) Um procedimento pouco conhecido, mais trabalhoso, mas que traz bons resultados,
o "banho de areia" (HARRIS, 1977), A planta deitada num recipiente em cujo fundo tenha sido
colocada uma fina camada de areia lavada; areia intensamente aquecida, ento despejada sobre a
planta. Deixa-se esfriar o conjunto e, posteriormente, retira-se o material para prens-to e sec-Io em
estufa. Plantas excessivamente suculentas, especialmente certos pseudobulbos de orqudeas
(a maioria
dos Catasetum, Cycnoches e Cyrtopodiuml.
vrias bromeliceas e cactceas. podem receber talhos nas
regies carnosas, o que facilita a evaporao da gua durante a secagem. tambm comum fazer-se um
corte longitudinal por onde se retira parte do tecido interno. Plantas com formas excntricas, so encontradas com certa freqncia entre euforbiceas e cactceas. No caso dos cactos, pode-se utilizar
apenas algumas costela, ou apenas uma costela florida, acompanhada por uma seco transversal da
planta, para mostrar o nmero de costelas que a compem. Aconselha-se anotar no rtulo, que acompanha o espcime de herbrio, o procedimento adotado para orientar estudos futuros.
preciso salientar que, para todas as plantas ou partes de plantas volumosas citadas anteriormente, deve-se tomar o cuidado de suplementar as informaes, com anotaes pormenorizadas, fotografias e/ou bons esquemas. a fim de que, o aspecto geral da planta no seja perdido.

4,7
Fanergamas aquticas
Os limites do conceito de planta aqutica variam de um autor para outro.
Em termos gerais so considerados, como "planta aqutica", os vegetais que, para sua sobrevivncia e propagao, necessitam mais da gua do que do solo ou que; mesmo quando fixos neste, no a
dispensam, pois tanto para germinao como para o crescimento exigem que pelo menos suas ra(zes
nela fiquem imersas (THEOPHRASTUS in SeUL THORPE, 1967; HOEHNE, 1948; FASSETT, 1957)
Muitos autores no enquadram entre "plantas aquticas", as de brejo, de quedas d'gua, ou de guas'
salgadase salobras.
..
.
Para efeito de tcnicas de coleta, preservao e herborizao, o que realmente importa so os
cuidados especiais que esse agrupamento venha requerer, em funo da estrutura de seus 6rgos e do
excesso de gua acumulado nos tecidos.
O cultivo de plantas aquticas no pede muitos cuidados. Espcies flutuantes, dado o colorido
e beleza de suas folhas e flores, so muito utilizadas como ornamento em lagos, tanques, represas, etc.,
enquanto as subrnersas so usadas tanto para embelezar aqurios como para suprr-ios de oxignio.
Plantas aquticas so muito procuradas, pois, suas folhas servem como esconderijo para peixes
e outros animais contra seus predadores e como fonte de alimento para seresde vida aqutica.

Mtodos
4.7.1.

Ver 4.1. PADRO GERAL DE HERBORIZAO

Coleta
A - Materiais

Os frutos, tubrculos, bulbos, razes tuberosas grandes e xilop6dios podem ser cortados em
seces longi tudinais e transversais com espessurade 0,5-1 ,Ocme secosna prensa, juntamente com as demais partes da planta. O aspecto externo do material importante, sendo aconselhvel que se herborize, juntamente, um trecho da estrutura de revestimento. Essasestruturas tambm podem ser penduradas intactas na estufa e, aps secagem, guardadas em coleo parte. No caso de flores grandes, como
as de certas cactceas, parte-se uma flor longitudinalmente ao meio, utilizando-se apenas uma metade,
a fim de que as estruturas internas sejam facilmente observadas.
'
As plantas com rgos suculentos, como pseudobulbos de orqudeas, folhas de babosa (Aloe},
pita (Fourcroye}, foiha-da-fortuna (Ketenchoe}, necessitam de muito tempo para secar, pois a gua
fortemente retida pelo tecido vivo. Para contornar este problema, mata-se a planta antes de prens-Ia,
o que torna a perda da gua mais rpida. O mtodo consiste em rnerqulbar-se a planta ernvinagre, lcool, formal ou numa mistura dos dois ltimos por algum tempo (cerca de uma hora, variando com a
suculncia da mesma) ou ento, em gua fervente durante cerca de um minuto (TOLEDO, 1942). Neste ltimo caso, desejando-se manter a cor verde natural sem grande alterao acrescenta-se um pouco
de sal gua, evitando-se o excesso, pois o sal, sendo higr6filo, pode ocasionar problemas de umidade
nos espcimes de herbrio. Nunca se deve colocar as flores em gua quente. Aps mergulhar os materiais em lquidos, deve-se enxu-los. em papel absorvente, antes de coloc-tos na prensa: Pode-se es-

balde
balsa com dois varejes
bota de borracha de cano mdio e longo
camartelo
desplantador (F ig. 31)
enxada (F ig. 29)
luva de borracha
p
peneira de tamano mdio com malha fina
picaretinha
tesoura de poda
Ver - INSTRUES GERAIS
B-

Ver 4.1. PADRO GERAL DE COLETA

48

47

Mtodos

f-

No h dificuldade para a coleta de plantas aquticas, apenas so necessrios certos cuidados

que variam de acordo com o local onde se encontram. No caso de guas mais ou menos profundas, como as de certos lagos, represas, rios, etc., ut iliza-se uma balsa por oferecer maior segurana e estabilidade. recomendado o uso de salva-vidas como medida de precauo mesmo para quem saiba nadar,
assim como o uso de alpargatas, mais fceis de serem removidas do que botas, no caso de queda na
gua.
Na falta de balsa e salva-vidas, sugere-seamarrar uma corda na cintura do coletar enquanto outro fica na margem, segurando-a durante a coleta, devidamente atento a qualquer emergncia.
O uso de luvas e de botas de borracha com cano longo (at as virilhas) aconselhvel para evitar que o coletor se contamine em guas polurdas. As botas de borracha com cano mdio so recomendadas para evitar picadas de animais peonhentos.
Procura-se coletar as plantas com cuidado, pois, em sua maioria, so muito delicadas, encontrem-se fortemente enraizadas no substrato e podem danificar-se diante de qualquer movimento mais
brusco. Os apetrechos, tais como enxada (Fig, 29), desplantador (Fig, 31), faco (Fig, 33), p (Fig.
30), tesoura de poda, peneira de malha, etc., so usados de acordo com as necessidades, dependendo
do porte e consistncia ela planta e ele seu "habltat". A enxada com gadanho conjugado (Fig. 28) possibilita a coleta de plantas sem danific-Ias. A peneira utilizada para coletar material que se encontra na
superfl'cie da gua.

No caso detransporte da plaina viva, usam-sesacos plsticos ou baldes com um pouco de gua.
Coloca-se a planta juntamente com um papel contendo o nome elo coletar e nmero de coleta e data
escritos a lpis, fechando-se os sacos com barbante ou cordinha.
Costuma-se usar binculo em excurses para localizao de reas de coleta distantes e mquina
fotogrfica quando documentao complementar se fizer necessria.
As anotaes, em caderneta de campo, devem ser feitas no local.
4.7.2.

I~I

'~~)~f
t@\i

321;";:-.:

\;"

,.1

30

Preservao
A -

36

Materiais

]J

lcool a 70%
durex
escova de tamanho mdio com cerdas duras (Fig, 34)
FAA (ver capo6)
frasco elevidro com tampa (vrios tamanhos)
isopor
pina
pincel (F ig. 35)
proveta graduada com basto de vidro (F ig. 36)
recipiente de plstico (cubas, bacias, etc.)
tesoura comum
tesoura de poda
B-

291

;1
"

1:-

~[

Mtodos

As plantas aquticas devem, de preferncia, ser preservadas no local da coleta.

Limpa-se a planta, usando, se necessrio, escova (Fig. 34) para tirar o lodo da raiz. Retiram-se
as folhas que no estiverem em bom estado, limpando as restantes com pincel (Fig. 35), sempre tomando precaues para no estragar os botes e flores. Para estudo do gro de plen, colocam-se, de preferncia, botes fechados em cido actico glacial p.a.. D-se preferncia aos botes fechados, porque
esto completos e ainda no foram contaminados. Para estudos taxinmicos suficiente colocar a
planta inteira em vidro contendo soluo de lcool a 70%. Quando isto no for possrvel, preservam-se
desta forma somente botes, flores e frutos.
Para estudos morfolgicos, costuma-se usar soluo de FAA (ver capo6). Coloca-se de preferncia a planta inteira num vidro ou em vrios, dependendo do tamanho da planta e, em seguida, enche-se
com soluo de FAA at cobrir toda a planta. Entre o vidro e a tampa coloca-se um plstico resistente
e amarra-se bem forte o plstico ao vidro com barbante, colocando-se a tampa em seguida.
Todos os frascos devem ser rotulados, com os dados da coleta, mais o nome do liquido preser-'
vador, em etiquetas gomadas e cobertas por durex para evitar que borrem, quer por extravasamento do
liquido ou por ocasio de limpeza dos frascos. No caso de uma mesma planta ter que ser dividida em
partes e colocada em vrios vidros, deve-se numer-Ias.
49

28

,t:,7

1(1.

'J
.

:~

Figura 28. Enxada com gadanho conjugado. Figura 29. Enxada.Eisura

30. P. Figura 31. Desplantador. Figura 32. Faca
com bainha. Figur~ 33. Faco com bainha. Figura 34. Escova mdia de cerdas duras. Figura 35. Pincis. Figura 36.
Proveta graduada e basto de vidro. Figura 37. Prensa. Figura 38. Exsicata ..
50

, .'
J'

o estudo da planta viva o ideal, mas isto, nem sempre posslvel. Pode-se, quando a viagem
no for muito longa, trazer alguns exemplares vivos, acondicionados em sacos plsticos, contendo um
pouco de gua. Este mtodo usado tambm quando no h possibilidade de colocar-se as plantas em
soluo preservadora no local da coleta.
Quando a planta est muito suja como o caso das plantas submersas, costuma-se deix-Ia por
mais ou menos 24 horas em recipientes de plstico ou similares contendo gua limpa. Sua limpeza dependendo da planta, efetuada com escova ou pincel, e em seguida remove-se a gua antes de colocar
a planta em frasco contendo soluo preservadora.
O isopor usado para o transporte das solues preservadoras.
4.7.3.

Herborizao
A - Materiais
gua de torneira
banheira de fotgrafo
bisturi ou lmina de barbear
cartolina branca - tamanho 28 x 42cm
chapa metlica
durex ou fita crepe de 25mm x 55m
escova mdia de cerda dura (F ig. 34)
faca com bainha (Fig. 32)
papel celofane
pina
pincel (F ig. 35)
recipiente de plstico (Ex: cubas, bacias)
rtulo - tamanho 12,5 x 8cm - papel fino
tesoura comum
tesoura de poda
Ver -INSTRUOES

ORGANIZAO

GERAIS
Maria Sakane

B-

Mtodos
Ver 4.1: PADRO GERAL DE HERBORIZAO

Deve-se ter bastante cuidado com as flores das plantas aquticas que, em geral, so muito delicadas, necessitando tratamento especial. Assim, sua herborizao deve ser feita no local da coleta, pois
murcham com facilidade. Muitas plantas aquticas fecham suas flores, por volta de 15:00 horas da tarde, tornando a desabrochar somente no dia seguinte com a luz do sol, razo pela qual no se recomenda coletar nesseperodo.
Separam-se as partes vegetativas e reprodutivas das plantas com tesoura de poda, No caso de
plantas frgeis, a separao deve ser feita com o auxilio de bisturi ou lmina de barbear. aconselhvel
distender as partes das flores com pincel ou pina, conforme o caso, envolvendo-as em papel celofane,
chupo ou papel sulfite de 40kg, fixando-o ao jornal com durex ou fita crepe. Se for necessrio, por
causa da sua fragilidade, as flores, devidamente numeradas, devem ser preparadas parte, evitando-se
que sequem em demasia na estufa, at esperar que a parte vegetativa correspondente, mais consistente,
seque. Depois de prontas, devero ser colocadas juntamente com o resto do material a que pertencem.
As plantas aquticas submersas, em geral muito delicadas, devem ser transportadas em sacos
plsticos para o laboratrio, onde precisam ser colocadas em recipientes com gua limpa; necessitam
limpeza com pincel ou pina. Para herborizao, coloca-se uma folha de cartolina branca sobre uma
chapa de alumnio, num vasilhame raso, como bandeja de fotgrafo, com pouca gua e em seguida as
plantas so limpas. Depois levanta-se lentamente a chapa metlica, dispondo a planta com pincel ou
pina para que adquira o aspecto natural. Feito isto, vai-se retirando com cuidado a cartolina da gua
para evitar que a planta saia do lugar. Retoca-se o que for necessrio e deixa-se escorrer a gua remanescente. Se for o caso, cobre-se ou envolve-se a planta com papel adequado e coloca-se dentro de jornal para secagem. Depois de seca, caso haja necessidade, troca-se a cartolina. O material ento montado na forma usual (Fig. 38) - ver 4.1. PADRO GERAL DE HERBORIZAO.
52
51

DE

HERBRIO

/'

I
I
I
I

i-

ORGANIZAO

DE

HERBRIO

Herbrio
uma coleo de plantas mortas, secas e montadas de forma especial, destinadas a
servir como documentao
para vrios fins, O herbrio utilizado
nos estudos de identificao
de ma.
terlal desconhecido,
pela comparao
pura e simples com Outros espcimes da coleo herborizada;
no
levantamento
da flora de uma determinada
rea; na reconstituio
do clima de uma regio; na avalia.
o da ao devastadora do homem ou da ao deletria da poluio;
na reconstituio
do caminho se.
guido por um botnico
coletor, etc, Muito possrvs] conseulr-ss
pelo simples manusear de exsicatas
de um herbrio.
Um herbrio tambm o centro de treinamento
e capacitao de pessoal especializado
em taxinomia vegetal. A metodologia
proposta no presente trabalho a adotada no Herbrio do Estado "Maria Eneyda P. Kauffmann
Fidalgo", do Instituto
de Botnica de So Paulo.

Para a profilaxia
dos insetos de modo geral, coloca-se naftalina em bolas ou cnfora cristalizada
em contato com os espcimes montados. Sempre que possivel, usa-se, preferencialmente,
em substituio, mistura de naftalina
triturada com paradiclorobenzeno
em partes iguais. Para evitar que o material
profilatizante
entre em contacto
direto com as exsicatas de herbrio, costuma-se guardlo em pequenos sacos costurados
de pano de algodo cru alvejado. O contato direto pode provocar a cristalizao
do material qurrnico sobre as exsicatas e prejudic-Ias em maior ou menor extenso,
Mais recentemente,
em alguns herbrios, as exsicatas recebem apenas o tratamento
trmico,
isto , as plantas so colocadas a uma temperatura
determinada,
50BOo
varivel conforme
o tipo de
material,
por cerca de 34 horas, eliminando,
assim, os insetos e suas larvas, bem como a umidade.
Obviamente,
o tempo acima mdio, pois material muito delicado necessita um tempo sensivelmente
menor de exposio
trmica, bem como, plantas suculentas ou mais espessas demandam
maior tempo
de secagem. Na prtica, o tempo de secagem determinado
pelo acompanhamento
peridico do material na estufa, o que deve ser providenciado
pelo prprio especialista. Somente este capaz de identificar o melhor tempo de secagem para o seu material, atravs de exames sucessivos e peridicos dos es-

e,

pcimes
5.1.

Montagem
A -

na estufa.

Materiais

(formol

Em muitos casos, usa-se pincelar o material

a 40%), antes de coloc-lo na estufa.

agulha

5.3.

Organizao

a ser secado com uma soluo

10% de formalina

,
cartolina
branca - fls. 42 x 28cm
cola tipo Cascolar hidrossolvel
linha branca
rtulo em cartolina
Ver -INSTRUOES
B -

A -

Materiais
caixa de papelo em tamanhos diversos
cartolina
dobrada para o tamanho de 42 x 28cm, em cores diversas
havana, verde, preta, azul, amarela e vermelha)
'fichaem
cartolina
branca de 12,5 x 8cm.
frasco com tampa de plstico
papel Kraft em folhas dobradas para o tamanho de 42 x 28cm

branca de 12,5 x 8cm

GERAIS

Mtodos

Na medida das possibilidades,

todo material deve ser montado
para permitir
mais fcil estudo
e manuseio. Para tanto, recomenda-se que a planta seja costurada com pontos, com agulha e linha, em
pedaos de cartolina
branca de boa textura
cortados
em tamanho
padro de aproximadamente

B -

Embora
ruvel de ordem
tes sistemas:

Cola-se o rtulo do material em toda sua extenso, de preferncia

no canto inferior direito da
cartolina
de montagem,
No canto superior esquerdo, diametralmente
oposto, deve-se afixar um pequeno envelope para conter as partes eventualmente
despencadas do material, tanto cardas durante o processo de secagem na estufa, como daquelas necessariamente
retiradas para o estudo do vegetal. Os demais rtulos, principalmente
os de anotaes dos especialistas, devem ser colados conforme
alguma ordem prestabelecida
e prximos aos rtulos originais.

ALGAS:

Preservao
A -

Materiais
armrio

formalina

(= formol

40%)

saco de pano de algodo

B -

recomenda-se
pelo menos at o
orientao
sugerem-se os seguin-

Cyanophyceae,
Rhodophyceae,
Chlorophyceae,
Euglenophyceae,
Chloromonadophyceae,
Charophyceae,
Dinophyceae,
Xantophyceae,
Chrysophyceae,
Cryptophyceae,
Bacillariophyceae e Phaeophyceae.
Sistemas recomendados:
SMITH (1950) e para as Chloromonadophyceae, PRESCOTT
(1969).
FUNGOS:
Plasmodiophoromycetes,
Myxomycetes,
Acrasiomycetes,
Labyrinthulomycetes,
Chvtr idiomycetes, Oomycetes,
Trichomycetes,
Zygomycetes,
Ascomycetes,
Basidiomycetes
e Deuteromycetes.
Sistema recomendado:
ALE XOPOU LOS (1962).
U'OUENS:
Ascolichenes
fi Hymenolichenes.
Sistema recomendado:
HALE (1961).

GIMNOSPE'RMAS:
(1968).
ANGIOSPERMAS:

ou lata especial de 45 x 28 x 30cm

naftalina em bola ou cnfora

paradiclorobenzeno

existam
maneiras diversas de organizar um herbrio,
a adoo de um sistema de classificao. Para melhor

BR IOFITAS:
Hepaticopsida,
Anthocerotopsida
PTER IDOFITAS:
Psilophytinae,
Lycopodinae,
do:VERDOORN
(1967).

de ao de 198 x 100 x 50cm

caixa de madeira
estufa

rosa, marrom,

Mtodos

42 x 28cm, ou colada com cola tipo Cascolar, solvel em gua, sobre a folha de cartolina. A primeira
forma permite um manuseio mais seguro do material, pois retir-Io da cartolina torna-se tarefa relativamente fcil e oferece menor risco de dano para o material do que quando colado. Esta diferena especialmente
significativa
com materiais delicados.

5.2.

(
(branca,

Cycadae,
Sistema

Coniferae,

recomendado:

e Bryopsida.
Psilotinae,

Sistema recomendado:
Articulatae,
Filicinae.

Chlamydospermae.
CRONOUIST

Sistema

t"

PARIHAR
(1972).
Sistema recomenda-

recomendado:

CRONOUIST

(1968).

cristalizada

cru

Mtodos

As exsicatas, aps serem montadas na cartolina,

so guardadas em recipientes secos e fechados,
tais como, caixa de madeira, lata especial ou armrio de madeira ou de ao especialmente
desenhado e
construi'do
ou adaptado para tal fim, a fim de evitar umidade e acesso a insetos.

53

Sob seus respectivos txons, famt'lias, gneros e espcies so distribudos

por ordem alfabtica.
A identificao
da origem dos espcimes feita pela cor da SObrecapa na seguinte conformidade:
Brasil - branca ou papel Kraft; Canad e E.U.A. - rosa; do Mxico ao Paraguai - marrom; Chile, Argentina e Uruguai - havana; Europa - verde; frica - preta; sia - amarela; Oceania - azul.
A sobrecapa de cor vermelha usada exclusivamente
para identificar
os espcimes-tipo,
independente
de sua origem geogrfica.
Espcimes-tipo
so organizados em armrios separados, acompanhando o mesmo sistema.
Conforme
a necessidade, espcimes podem ainda ser guardados em caixas ou em h'quidos preservativos. Para cada exsicata em caixa ou em Ii'quido, deve ser montada uma folha de cartolina,
com

54

\.-

da vlvula, lentamente. O meio poder caramelizar-se se o tempo for muito longo ou o fogo for muito forte.
Retirados os frascos da panela de presso, ou da eutoclsve, esperar que a temperatura abaixe. Quando o calor do frasco puder
ser tolerado pela mo, transferir o meio para plsces-de-petri previamente esterilizadas (por aquecimento no forno do fogo, durante 30-45 minutos ou em estufa ou em autoc/ave a seco),
flambando a boca do frasco Erlenmeyer na chama de gs ou
lmpada de lcool.
Deixar que o meio se solidifique. Formando-se gua de condensao na tampa das placas, vira-se as mesmas para que o excesso
de umidade desaparea. O meio, pronto para uso, deve ser preferencialmente conservado em geladeira ou lugar fresco, protegido do sol direto e da exposio poeira e levado novamente
temperatura ambiente no momento de usar.

Usado para o preparo de lmina de fungos pigmentados.

g. Lactofenol
- Azul de algodo
Lactofenol
(ver soluo b)
, . . . . . . . . . . .
Azul de algodo. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

100ml
500ml

Usado para o preparo de lminas de fungos no pigmentados.

h. Lugol

actico

lodo.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . .
KI .
gua destilada.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . .
cido actico
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . .

20g
20g
200ml
20g

Usado para evidenciar a presena de material aucilide, bem como, para preservar cillos e flagelos.
i. Transeau

(6/3/1)

Formol a 40% (= formalina)

lcool a 960G.L
gua destilada

b.

100ml
300ml
600ml

...................................

Preservedor para algas e brititss.

6.2.

Meios de cultura
Utilizados

samente

descrito

a.

para isolamento

e crescimento'

de fungos.

O mais usado o BOA.

por isto. minucio-

a seguir:

BOA (batata - dextrose - gar)

Batata
Oextrose
gar
:
gua destilada
o

'.

'.

Czapek
gua destilada.
. . . . . . . . . . . . . . . . . .
N itrato de sdio (NaNO)}
Fosfato de potssio bibsico (K2 HP04)
Sulfato de magnsio (MgSO 7H2 O)
Cloreto de potssio (KCI) . . . . . . . . . .
Sulfato ferroso (FeS04 7H2 O) ... _ .
Sacarose . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
gar . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

....

.
.
.
.

.
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.

'.'

.
.
.
.

.
.
.
.

.
.
.
.

.
.
.
.

1000

1.0 9
0,5 9
0.5 9
O.Olg
30
9
15
9

.
.
.
.

ml

3,0 9

.
.
.
.

Fundir o gar, juntar os demais componentes do meio exceto a

sacarose, autoc/avar a 1,5 atmosfera e 13(JJC por 20 minutos e
adicionar ento a sacarase.
.
Para isolamento de fungos de solo recomenda-se a adio de
0,5% de extrato de levedura e acidificao do meio com cido
fosfricoatpH4
(WARCUP,
19501.

140g
10g
20g
1000ml

Czapek modificado
Adicionar.
ao meio Czapek: 5g de extrato
de levedura, 0,5g de sulfato
0,05g de rosa-de-bengala para cada 1.000ml de meio de cultura.

Cozinhar a batata em 500ml de gua, amassar e filtrar em algodo ou gaze.

Fundir o gar em 500ml de gua, em benbo-msrie, mexendo
sempre.
Juntar a gua de batata filtrada com gar fundido e adicionar a
dextrose dissolvida previamente em uns poucos ml de gua.
Completar at 1000ml com gua.
Distribuir o meio bem dissolvido em frascos Erlenmeyers de
mais ou menos 250ml, com o cuidado de que o contedo no
ultrapasse a metade da capacidade total do frasco. Arrolhar o
frasco com algodo hidrfobo, de preferncia, recobrir a rolha
com um pedao de papel de embrulho, amarrar o papel sobre a
boca do frasco, com barbante ou com elstico forte, e levar esterilizao (eutocleveem).
Autoclavar a mais' ou menos 1,5 atmosfera por 30 minutos,
usando qualquer tipo de eutocteve, ou mesmo uma boa panela
de presso. Neste caso, utilizar, de preferncia, uma tela de
amianto ou qualquer cobertura no fundo da panela de presso,
para evitar que os frascos fiquem em contato direto com o fundo da panela, colocar, ento, os frascos contendo os meios e adicionar gua at atingir 4-7cm (3-4 dedos) da altura dos frascos.
Fechar a panela de presso. Usar a psnele como recomendado
para cozimento normal.
Quando o vapor comear a agitar o pino regulador da panela,
marcar 30 minutos.
Passado o tempo, deixar a panela esfriar normalmente por alguns minutos, e ento, dar seide da presso, pelo levantamento

c.

Extrato de malte a 2%
Extrato de malte (comercial).
gar
gua destilada

de estreptomicina

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
_. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
_
: . . . .. . . . . . . . . . . .

20g
20g
1000ml

Fundir o gar, juntar os demais componentes e autoclavar conforme indicado para BOA.
d.

Fub-de-rnilho
Fub
gar
_
gua destilada
Oextrose . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
o

'

.20g
20g
1000ml
20g

Cozinhar o fub a mais ou menos 600 C por uma hora em 500ml

de gua destilada e filtrar em gaze. Fundir o ga: em 500ml de
gua destilada em benho-merls. Juntar as duas preparaes e
mais 20g de dextrose. Completar os 1000ml com gua destilada.
Autoclavar conforme indicado para BOA.
e.

Glicose-glutamato
EOTA
_ .............................
K2HPO . ,
KH2 PO ..............................................
MgC/2 6H2 O
_
CaCI2 .........
o

58
57

. . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . . .
:
: . .

200
o.

- .....

87
68
160

66

mg
mg
mg
mg
mg

"

~
-r
6

rtulos e dados, a ser guardada no lugar devido na coleo geral, contendo a anotao: espcime em
,caixa ou espcime em vidro.
Rtulos e fichas devem conter: nome da instituio, da cidade, do pas; sigla do herbrio conforme registrada no Index Herbariorum; nome da famlia; nome cientltico da espcie; nome do determinador e data da determinao; procedncia, nome e nmero do coletor e data da coleta; outras
observaes (ver -INSTRUES
GERAIS).
Em adio, podem ainda ser organizados fichrios diversos para garantia de maior facilidade de
trabalho, a saber: a. numrico (de acesso); b. de distribuio geogrfica; c. de coletor; d. em ordem sistemtica.

FRMULAS

6.1.

MEIOS

DE

CULTURA

F rrnu Ias

Sob este ttulo, incluem-se lquidos e processos de preservao, assim como, solues outras
com finalidades diversas.
A.

Lquidos ou processos preservadores

a. Alcool - Glicerina
lCOOl etlico a 96oG.L.
. _...........
gua destilada ou filtrada .............................
Glicerina ..................................................

, ...................

630ml
270ml
100ml

, .....

Preservador usado para ffores.

b. Lquido de Hammarlund
,
..
Sulfato de cobre em soluo saturada'
Formol a 40% (= formalina)
Agua destilada. .
.
':,'

: ........................
',,'

750ml
50ml
250ml

Coloca-se a planta neste l/quido durante o periodo de uma semana, e transfere-se depois para uma soluo de formalina a
10%. Se o material contiver muito leo essencial, tanino, resina,
latex, etc., submete-se por duas vezesseguidas a 10 minutos numa mistura de: lcool-e ter e duas horas em gua.
c. Processo de Drummond
Sulfato de cobre em soluo aquosa a 5%
cido sulfuroso em soluo aquosa a 5-6%
Glicerina
Coloca-se a planta na soluo de sulfato de cobre por 6-24 horas, dependendo do tempo da fixao, da consistncia e do volume do tecido a ser impregnado. Em seguida o material lavado
durante umas duas horas para tirar o excesso de sulfato de cobre, trensierindo-se depois asplantas para a soluo de cido sulfuroso. Acrescenta-se a essa soluo 50ml de glicerina, no caso
de frutos ou tubrculos suculentos.
d. FAA + Sulfato de Cobre
cido actico glacial .... ' .............
_...............
lcool comercial (98oG.L.) ...................................
gua destilada
Sulfato de cobre em soluo saturada

_.....
.
.

300ml
500ml
300ml
50ml

Fixador de cor usado especialmente para fungos.

e, FAA
Formol a 40% (= formalina) , , , , , , , , , , . , , , , , , . , , , , , , , , , , , , , , , . ,
cido actico glaci~1, . , , , , . , , , , , , , , , , , , , , , , , , , . , , , , . , . , .: , ,
lcool a 50%, .. , , , . , , , , , , , , , , ' , , . , , , , , , , , , , , .. , . , , , , , . , , . , . ,

5ml
5ml
gOml

Preservador usado para todos os grupos de plantas, exceto algas,

t.

56
55

Lactofenol
Fenol cristalizado. ,
' ,
,
,
,
,
cido ltico .............................
,
Glicerina. , .......
, . , ...
, ....
,
, .. , ,
gua destilada ................
, ............................

.
.
,,.

20g
20g
40g
20ml

, 1
I

MnCl, . 4H,O
ZnCl,
FeCI3 6H, O. . . . . . . . . . .
DL-metionina . . . . . . . . . . .
Glutamato de sdio (mono)
Dglicose . . . . . . . . . . . . . . .

" ..
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..

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.

de hipoclorito de sdio (gua sanitria de qualquer marca comercial) at a descolorao

completa. Lavar em gua corrente at retirar qualquer ind(cio do hipoclorito. Sec-Ias ao
ar, cort-las em quadrados de cerca de 1cm de lado.

75 mg
40 mg
1,3mg
50 mg
500 mg
3 mg

b.

f.

GY5
KH, P04 .................................
Na, HP04 ...................
MgS04 7H, O
Extrato de levedura
Glicose
Bromarosol purpreo aquoso a 0,04%
gua destilada
:

.
.
.
.
;

c.

MHU
Extrato de malte. . . . . . .
Peptona
Glicose . . . . . . . . . . . . . .
Penicilina. . . . . . . . . . . . .
Sulfato de estreptomicina
gar . . . . . . . . . . . . . . . .
gua destilada .... , . . . .

l,4g
0,6g
O,lg
1,Og
3,Og
5 ml
1000 ml
d.

.
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..
,.
.......... ..................
.............................

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..
..
..
..
..

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.
.

3,Og
l,Og
1,Og
O,3g
O,3g
10,5g
1000 ml

e.

Mp5
Maltose. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Peptona
'.'
gar . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
gua destilada
" ...........

..
'.
..
..

.
.
.
.

4g
19
. 1520g
1000ml

Tubaki
Glicose . ................................................
Extrato de levedura.............................................
Agar
,.,
,
:. . . . . . . . . . . .
gua do mar esterilizada. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

1,09
0,19
15 9
1000 .ml

Fundir o meio, juntar os demais ingredientes e autoclavar conforme indicado para o BOA. Se necessrio, para evitar crescimento de bactrias, adicionar, aps autoclavagem do meio:
Estreptomicina . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Penicilina .. : . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
6.3.

O,5g
O,2g

Outras tcnicas (preparo de iscas)

a.

Papel celofane, ecdises de cobra, asasde insetos

Descolorao de folhas
Coletar folhas com poucas camadas de clulas (ex.: gramineas). Coloc-Ias

em soluo 10%
60
59

Sementes de cnhamo
Devem, antes de tudo, ser fervidas em gua destilada, por cerca de um minuto. Secar temperatura ambiente e armazen-Ias
em frascos bem fechados. Cort-Ias transversalmente ao
meio, antes do uso.

Fundir o gar,juntar os demais ingredientes e autoclavar cantorme indicado para o BOA. Dependendo da pureza do gar, a
quantidade para o meio ficar slido varia entre 15 e 20g.
i.

Exo-esqueleto de camares. siris e lagostas

Mergulhar antes em lcool 70%. Secar ao ar.

.......
.' .
.......
... .. ..

Fundir o gar, juntar todos os ingredientes exceto a penicilina e

sulfato de estreptomicine, autoclavar e adicionar ento os entibiticos.
h.

sobre papel e se-

Selecionar as partes mais transparentes. lav-Ias e coloc-Ias em soluo de HCI a 1% para

descalcificao durante uma semana, trocando diariamente a soluo. Retirar o material e
lavar em gua corrente vrias vezes, mergulhando em seguida em soluo de KOH a 2% durante 10 dias para retirar todo o material protico e outros materiais orgnicos, com exce
o da quitina (KARlING,
1945). As cascasdevero estar amolecidas. Retirar e ferver durante trs dias em lcool etilico (em banho-mana) para retirada de pigmentos. Lavar e se.car. O material dever ser quase transparente e flexvel. Guardar para uso oportuno. Para iscagem cortar emtiras finas.
.
,
.'
..

Juntar todos os 'ingredientes e autoclavar conforme indicado

para BOA.
g.

Epiderme de cebola
Retirar a epiderme interna da cebola. Lav-ta cuidadosamente. Coloc-ta
c-Ia ao ar. Cort-Ia em pedaos e utiliz-Ia.

Dissolver os ingredientes em 500ml de gua destilada, chegar o

volume final a 1 I, ajustar para pH 6,5 com soluo de KOH.
Adicionar 1,5g gar, para meio de cultura, ou 15gparameio de
isolamento. Autoclavar a 1200C por 15 minutos.

"

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I{

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