Manual de Toxicologia

Laboratorio de Toxicologa
UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICO

FACULTAD DE QUMICA
OF
ES
OR
ES
DE
TO
X
IC
OL
O
G
A,
FQ
,U
NA
DEPARTAMENTO DE FARMACIA
DE
PR
Manual de guiones experimentales para la enseanza y
OL
EG
IO
aprendizaje del laboratorio de Toxicologa (clave 1614)
BO
RR
AD
OR
,C
Alejandra Quijano Mateos

Araceli Prez Vzquez
Bernardo Lucas Florentino
Carlos Prez Muoz
Eduardo Hernndez Vzquez
Francisco Hernndez Luis
Francisco Snchez Bartez
Jorge Cornejo Garrido
Jos Alberto Rivera Chvez
Juan Francisco Palacios Espinosa
Facultad de Qumica, UNAM
Manuel Gutirrez Aguilar

Mara Elena Bravo Gmez
Mariana Flores Torres
Martha Leyte Lugo
Paulina Del Valle Prez
Perla Carolina Castaeda Lpez
Silvia Graciela. Dvila Manzanilla
Sitlali del Rosario Olgun Reyes
Sol Cristians Niizawa
Viridiana Morales Snchez
Mxico, D.F. 2014
PROGRAMA DE APOYO A PROYECTOS PARA LA INNOVACIN Y MEJORAMIENTO DE LA ENSEANZA
NDICE
Pgina
3
PRLOGO
REGLAMENTO DE HIGIENE Y SEGURIDAD PARA LOS LABORATORIOS DEL

DEPARTAMENTO DE FARMACIA
REGLAMENTO PARA LOS ESTUDIANTES Y PROFESORES DE LOS CURSOS

EXPERIMENTALES DEL DEPARTAMENTO DE FARMACIA
10
REGLAMENTO DE HIGIENE Y SEGURIDAD PARA LOS LABORATORIOS DE LA

FACULTAD DE QUMICA
FQ
,U
NA
REPORTE DE SEGURIDAD E HIGIENE
G
A,
HOJA DE SEGURIDAD DE REACTIVOS
12
13
15
IDENTIFICACIN Y CUANTIFICACIN DE TXICOS NO VOLTILES EN UNA

MUESTRA PROBLEMA
16
CUANTIFICACIN DE CIANURO DE HIDRGENO, COMO TXICO VOLTIL, A

PARTIR DE GLUCSIDOS CIANOGNICOS
30
ES
OR
ES
DE
TO
X
IC
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O
HOJA DE VALORACIN PARA LA EVALUACIN DEL BIENESTAR DE LOS

ANIMALES DE EXPERIMENTACIN
40
DE
PR
OF
DETERMINACIN DEL MECANISMO DE ACCIN DE LA ACTIVIDAD

ANTIOXIDANTE DE COMPUESTOS DE ORIGEN NATURAL
55
OL
EG
IO
DETERMINACIN DE MUTGENOS AMBIENTALES A TRAVS DE LA PRUEBA

DE AMES
69
EFECTO TXICO DE LA ADMINISTRACIN DE PLOMO EN RATAS
80
RR
AD
OR
,C
EVALUACIN DE LA ACTIVIDAD GENOTXICA DE LA CICLOFOSFAMIDA

UTILIZANDO LA TCNICA DE MICRONCLEOS EN MDULA SEA
94
DETERMINACIN DE ETANOL EN UNA MUESTRA PROBLEMA
100
GUIONES COMPLEMENTARIOS
EXTRACCIN Y CUANTIFICACIN DE TXICOS NO VOLTILES EN UNA
MUESTRA PROBLEMA
108
109
DETERMINACION DE MALATION RESIDUAL
123
PRODUCCION DE METAHEMOGLOBINA POR NITRITOS Y EFECTO PROTECTOR

DEL AZUL DE METILENO IN VIVO
132
BO
EFECTO DEL pH EN LA LIBERACIN DE PLOMO POR UTENSILIOS DE BARRO

VIDRIADO
PRLOGO
A partir del semestre 2006-I se inici
la implementaci n gradual del mapa curricular del plan de
estudios vigente de la carrera de Qu mica Farmac utico Biol gica (QFB).

En este mapa curricular, se ubic
en el sexto semestre la asignatura te rico-experimental de
Toxicolog a, con clave 1614. El dise o del contenido program tico de la asignatura, consider revisar
los conocimientos b sicos de toxicolog a como son citotoxicidad, bioactivaci n t xica, estr s oxidante,
mutag nesis, carcinog nesis y teratog nesis, para integrarlos al estudio del riesgo de exposici n, as
NA
como a la toxocin tica y toxodinamia de las reacciones adversas ocasionadas por xenobi ticos
G
A,
FQ
,U
f rmacos, metales pesados y sustancias de abuso.
IC
OL
O
Acorde a lo antes se alado, se consideraron guiones experimentales que permitieran la aplicaci n e

integraci n de los conocimientos adquiridos en diversas asignaturas de semestre previos y de
TO
X
manera importante, los obtenidos en la clase te rica de la asignatura. En el a o 2012 se contaba con
DE
Manual de guiones experimentales para la ense anza y aprendizaje del laboratorio de
ES
el
OR
Toxicolog a , constituido por diez guiones experimentales dise ados de acuerdo a la Reforma de la
OF
ES
Ense anza Experimental. Dos de estos guiones, se implementaron con el apoyo del proyecto
PR
PE202006 a trav s del Programa de Apoyo a Proyectos para la Innovaci n y Mejoramiento de la

la adquisici n de equipos, materiales y reactivos para la
IO
DE
Ense anza (PAPIME), lo que permiti
,C
OL
EG
ense anza experimental de esta asignatura.
OR
Posteriormente, el grupo de profesores de toxicolog a, en forma colegiada, decidi continuar con la
RR
AD
revisi n del curso pr ctico, incluyendo temas de inter s actual en esta asignatura como toxicolog a
BO
ambiental y estr s oxidante; y redise ando dos de los guiones existentes con la finalidad de mejorar
el aprendizaje haci ndolos m s completos e integrales. Con esta intenci n, se implementaron tres
guiones experimentales con apoyo de otro proyecto (PE201111) del mencionado programa: a)
Identificaci n y cuantificaci n de t xicos no vol tiles en una muestra problema , b) Determinaci n
del mecanismo de acci n antioxidante de compuestos de origen natural y sint tico , ambos resultado
del redise o de pr cticas incluidas en el manual del 2012; y c) Determinaci n de mut genos
ambientales a trav s de la prueba de Ames para integrar el tema de toxicolog a ambiental.
Es as que los autores de esta nueva edici n presentamos el Manual de guiones experimentales
para la ense anza y aprendizaje del laboratorio de Toxicolog a (clave 1614) . Este manual est
constituido por once guiones experimentales tres de los cuales, est n incluidos en la secci n de
Guiones experimentales complementarios , mismos que permiten reforzar los conocimientos en

toxicolog a anal tica y en el caso de uno de ellos, evidenciar efectos t xicos. Cabe destacar que todos
los guiones del manual permiten cubrir las unidades tem ticas del curso te rico (Tabla 1) y propician
tambi n su aplicaci n a la resoluci n de problemas en esta
rea. Asimismo, la secuencia de los
guiones experimentales est en concordancia con las clases te ricas lo que favorece el proceso de
ense anza-aprendizaje de los alumnos.
Tabla 1. Relaci n entre las unidades tem ticas del curso te rico y los guiones experimentales.
Curso laboratorio
Gui n experimental
NA
Introducci n a la Toxicolog a
G
A,
Identificaci n y cuantificaci n de t xicos no
FQ
,U
Unidad tem tica
Curso te rico
IC
OL
O
vol tiles en una muestra problema
TO
X
Cuantificaci n de cianuro de hidr geno, como La biotransformaci n de xenobi ticos y su

t xico vol til, a partir de gluc sidos cianog nicos
importancia toxicol gica.
OR
ES
DE
Determinaci n del mecanismo de acci n

El estr s oxidante
antioxidante de compuestos de origen natural
OF
ES
Determinaci n de mut genos ambientales a Mutag nesis, Carcinog nesis y Teratog nesis y
PR
trav s de la prueba de Ames
DE
Cuantificaci n de micron cleos en eritrocitos de
Mutag nesis, Carcinog nesis y Teratog nesis

Toxicidad de metales pesados
,C
OL
Efecto t xico de plomo en ratas
EG
IO
m dula sea como indicador de genotoxicidad
Toxicolog a ambiental
RR
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OR
Efecto del pH en la liberaci n de plomo por

Toxicidad de metales pesados
utensilios de barro vidriado
BO
Determinaci n de etanol en una

problema
GUIONES COMPLEMENTARIOS
muestra
Toxicidad de sustancias de abuso
Extracci n y cuantificaci n de t xicos no vol tiles

Introducci n a la toxicolog a
en una muestra problema
Determinaci n de malati n residual
La biotransformaci n de xenobi ticos y su

importancia toxicol gica
Producci n de metahemoglobina por nitritos y La biotransformaci n de xenobi ticos y su

efecto protector del azul de metileno in vivo
importancia toxicol gica.
Cabe recordar que los guiones experimentales se elaboraron siguiendo los criterios establecidos por
la Reforma de la Ense anza Experimental, donde la adquisici n del conocimiento se da a la luz de las
evidencias observables o medibles de los fen menos que ocurren en el laboratorio. El estudiante es
enfrentado a los mismos a trav s de un problema bien definido, el cual debe ser resuelto encontrando
las relaciones causa-efecto a trav s del trabajo experimental.
Cada uno de los guiones est estructurado de la siguiente manera:
OBJETIVO ACAD MICO.
Se establece para reforzar y enriquecer los conocimientos adquiridos en el curso te rico, as como el
NA
FQ
,U
com nmente para determinar y/o identificar la presencia de xenobi ticos.
desarrollo de habilidades en el manejo de materiales y empleo de t cnicas anal ticas usadas
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A,
PROBLEMA
Se plantea con la intenci n de enfrentar al estudiante con fen menos de inter s en el rea que le
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DE
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permitan adquirir los conocimientos planteados en el OBJETIVO ACAD MICO a trav s del trabajo
experimental; encontrando las relaciones causa-efecto y relacionando estos hallazgos con el riesgo
de intoxicaci n y/o el potencial toxicol gico.
DE
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DESARROLLO EXPERIMENTAL
Describe el procedimiento y t cnicas utilizadas para el desarrollo y obtenci n de resultados que
permitan resolver el PROBLEMA.
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,C
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CUESTIONARIO
Se incluye con la intenci n de dirigir al estudiante hacia la resoluci n del PROBLEMA, resaltando los
aspectos vivenciales de la experiencia en el laboratorio y, de esta forma, reforzar el proceso
cognoscitivo.
RR
AP NDICE I : CONOCIMIENTOS PREVIOS
BO
ste ap ndice contiene un listado de los conceptos indispensables para que el estudiante comprenda
el gui n y sea capaz de resolver el PROBLEMA planteado.
AP NDICE II: PREPARACI N DE REACTIVOS
En este ap ndice se indican las cantidades necesarias para la preparaci n de los reactivos a emplear
en el DESARROLLO EXPERIMENTAL.
AP NDICE III: DISPOSICI N DE RESIDUOS
Considerando que en cada sesi n de laboratorio se generan un n mero importante de residuos, se
contempl
la necesidad de indicar puntualmente cada uno de ellos as como la manera en que
deber n ser confinados y etiquetados para su posterior tratamiento.
Los autores consideramos importante tambi n incluir el presente material:

Reglamento de Higiene y Seguridad de la Facultad y del Departamento de Farmacia, para
concientizar a los alumnos de la relevancia y car cter obligatorio de ambos, promoviendo de esta
forma el desarrollo de actitudes apropiadas para un profesional en el rea de las ciencias biol gicas y
de la salud.
Formato de Reporte de Seguridad e Higiene y la Hoja de Seguridad de Reactivos, para que
los alumnos se familiaricen con el rombo de comunicaci n de riesgos y de esta forma, puedan
FQ
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NA
identificar el equipo de protecci n personal para el manejo de sustancias qu micas y el grado de

riesgo de sustancias peligrosas.
G
A,
Hoja de valoraci n para la evaluaci n del bienestar de los animales de experimentaci n, con
realizar una revisi n de la salud animal peri dica
TO
X
Laboratorio (CICUAL), misma que permitir
IC
OL
O
base en la recomendaci n emitida por el Comit Institucional para el Cuidado y Uso de Animales de
causarles sufrimiento innecesario y, en su caso, se
OR
experimentaci n. Con esta medida se evitar
ES
DE
posterior a la administraci n del xenobi tico en los guiones en donde se emplean animales de
DE
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aplicar adecuadamente el punto final humanitario del experimento.
IO
Finalmente, los autores agradecemos el apoyo brindado a travs del proyecto PAPIME No.
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PE201111 de la Direccin General de Asuntos del Personal Acadmico (DGAPA) de la UNAM para la
,C
implementacin de tres guiones experimentales y la elaboracin de esta segunda edicin. Asimismo,
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agradecemos a los becarios de este proyecto Carolina Rivera Santiago, Jos Guadalupe Becerril
RR
Vega, Valeria Abigail Rosales Zariana, Marcela Alejandra Lpez Snchez y Rodrigo Hernndez por
BO
sus valiosas aportaciones y dedicacin para lograr el desarrollo e implementacin de los nuevos
guiones.
Hern ndez Luna, M. y Llano Lomas, M. Propuesta de Reforma de la Ense anza Experimental . Revista
del IMIQ, A o XXV, vol. 07, 1994, pp. 5-7.
Reglamento de Higiene y Seguridad para los Laboratorios de la Facultad de Qumica

ARTCULO 1. El presente Reglamento es aplicable en todos aquellos espacios de la Facultad de Qumica donde se realice trabajo
experimental, sea de docencia o de investigacin. Estos sitios, para efectos del presente Reglamento, sern denominados
laboratorios.Su cumplimiento es obligatorio para el personal acadmico, administrativo y alumnos y no excluye otra
reglamentacin que resulte aplicable. Deber exhibirse en un lugar visible en cada laboratorio de la Facultad de Qumica.
ARTCULO 2. Es necesario que el personal que trabaja en cada laboratorio conozca los sistemas de alerta, las zonas de menor
riesgo, las rutas de evacuacin, el equipo para combatir siniestros y las medidas de seguridad en cada laboratorio, as como los
procedimientos establecidos para actuar en caso de presentarse una emergencia.
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,U
G
A,
Un control maestro para energa elctrica

Un botiqun de primeros auxilios
Extintores
Un sistema de ventilacin adecuado
Agua corriente
Drenaje
Un control maestro para suministro de gas en los lugares donde se utilice
Sealamientos de proteccin civil
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OL
O
a.
b.
c.
d.
e.
f.
g.
h.
ARTCULO 3. Los laboratorios debern estar acondicionados, como mnimo, con lo siguiente:
ES
DE
Regadera
Lavaojos
Polvo para derrames
OR
i.
j.
k.
(NOM-018.STPS-2000)
TO
X
Todos
los
laboratorios
que
trabajen
con
sustancias
qumicas
http://www.stps.gob.mx/bp/secciones/dgsst/normatividad/normas/Nom-018.pdf, debern tener adems:
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ARTCULO 4. Cada uno de los Departamentos y Unidades Acadmicas de la Facultad debern nombrar al menos a un responsable
de seguridad.
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DE
ARTCULO 5. En los laboratorios de enseanza de Licenciatura, al realizar actividades experimentales, nunca deber estar una
persona sola. El nmero mnimo de personas deber ser de dos y al menos una de ellas deber ser parte del personal acadmico
de la Facultad. En el caso de los laboratorios de investigacin el nmero mnimo de personas que debern permanecer es de dos,
sin importar su nombramiento.
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OR
,C
ARTCULO 6. Para trabajar en los laboratorios, es obligatorio usar bata, lentes de seguridad y en caso de ser necesario guantes;
es responsabilidad del usuario contar con el equipo mencionado. Queda prohibido el uso de lentes de contacto, pelo suelto y
zapatos abiertos.
BO
RR
ARTCULO 7. Queda prohibido fumar y consumir alimentos o bebidas en los laboratorios.

ARTCULO 8. Todas las reas donde se realice trabajo con material radiactivo debern estar claramente identificadas. Para poder
manipular este material radiactivo, es indispensable aprobar el curso de capacitacin, as como la obtencin del dosmetro
correspondiente.
ARTCULO 9. Para poder realizar trabajo experimental con Organismos Genticamente Modificados (OGMs), se deber informar a
la Comisin Interna de Bioseguridad. El manejo y disposicin adecuada de estos organismos, se llevar a cabo de acuerdo con el
reglamento interno de cada Departamento.
ARTCULO 10. En caso de trabajar con compuestos que contengan azufre, selenio y fsforo o cualquier sustancia olorosa se
deber informar a la Coordinacin de Seguridad Prevencin de Riegos y Proteccin Civil para su conocimiento. Para el manejo de
las mencionadas sustancias debern seguirse las recomendaciones establecidas en las hojas de seguridad correspondientes que
estarn
disponibles
en
cada
laboratorio
(NOM
018.STPS-2000).
http://www.stps.gob.mx/bp/secciones/dgsst/normatividad/normas/Nom-018.pdf
ARTCULO 11. Las puertas de acceso y salidas de emergencia debern estar siempre libres de obstculos y en posibilidad de ser
utilizadas ante cualquier eventualidad. El responsable del rea deber verificar el cumplimiento de este artculo.
ARTCULO 12. Las regaderas debern funcionar correctamente, contar con el drenaje adecuado, estar lo ms alejadas posible de
instalaciones o controles elctricos y libres de todo obstculo que impida su uso. El responsable del rea deber verificar el
cumplimiento de este artculo.
ARTCULO 13. La localizacin de los controles maestros de energa elctrica y suministros de gas en cada laboratorio, deber
estar sealada adecuadamente, de manera que puedan ser identificados con facilidad.
ARTCULO 14. Las tuberas de cada laboratorio debern estar sealadas de acuerdo con la norma oficial mexicana
correspondiente
(Norma
Oficial
Mexicana
NOM-0026
STPS
1998).
http://www.stps.gob.mx/bp/secciones/dgsst/normatividad/normas/Nom-026.pdf
ARTCULO 15. Cada laboratorio deber contar con un botiqun de primeros auxilios. Su contenido ser el siguiente: apsitos
estriles, vendas elsticas. tela adhesiva, abatelenguas, frulas de cartn de 15 x 50 cm, mascarilla para respiracin artificial (Tipo
mascarilla nariz boca con fuelle, sin contacto directo de boca a boca o un equipo de funcin semejante), algodn, alcohol en gel o
alcohol lquido desnaturalizado, termmetro axilar y tijera recta. El responsable se har cargo de revisarlo peridicamente.
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ARTCULO 16. Los extintores de incendios debern ser de CO2 y de polvo qumico seco, segn lo determine el Departamento de
Prevencin y Combate de Siniestros de la UNAM. Debern ser recargados peridicamente de conformidad con los resultados de la
supervisin que se realiza regularmente o despus de haber sido utilizados. En caso de que un extintor sea utilizado, deber
informarse a la Coordinacin de Seguridad, Prevencin de Riesgos y Proteccin Civil para obtener un extintor de reemplazo
temporal. El extintor debe tener la fecha de la ltima recarga y cuando se le debe de dar mantenimiento.
TO
X
ARTCULO 17. Todo el personal acadmico, administrativo y estudiantes debern de tener conocimiento de los procedimientos de
seguridad establecidos para emergencias ocasionadas por incendios, derrames o personas accidentadas. Estos procedimientos se
deben de tener a la vista en cada laboratorio.
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ES
DE
ARTCULO 18. Los sistemas de extraccin de gases debern mantenerse sin estorbos ni impedimentos para su correcto
funcionamiento. Se les deber proporcionar el mantenimiento preventivo o correctivo que solicite el responsable de cada rea.
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ARTCULO 19. Los sistemas de suministro de agua corriente y de drenaje, debern recibir el mantenimiento preventivo o
correctivo que solicite el responsable de cada rea, tan pronto como sea posible.
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ARTCULO 20. Los lugares donde se almacenen reactivos, disolventes, equipos, materiales, medios de cultivo y todo aquello
relacionado o necesario para el funcionamiento correcto de los laboratorios, estarn sujetos a este Reglamento en su totalidad.
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ARTCULO 21. Queda prohibido desechar sustancias o materiales al drenaje, a la basura municipal o al medio ambiente. Todos
los laboratorios debern contar con procedimientos bsicos para la disposicin adecuada de los residuos y del personal responsable
de su tratamiento.
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ARTCULO 22. Queda prohibido pipetear directamente con la boca cualquier lquido.
BO
RR
ARTCULO 23. Al finalizar las actividades cotidianas, el responsable o el profesor correspondiente en los laboratorios de
enseanza deber verificar que queden cerradas las llaves de gas, agua, vaco, etc., as como apagar todos los equipos que se
hayan utilizado. En caso de requerir que algn equipo trabaje continuamente, debern indicarse tanto en el interior como en el
exterior del laboratorio correspondiente, en forma claramente visible y legible, las precauciones que deben seguirse, as como la
informacin para localizar al responsable.
ARTCULO 24. Queda prohibido dejar experimentos bajo condiciones de calentamiento a reflujo toda la noche, fines de semana y
en periodo vacacional excepto cuando cuenten con un sistema de recirculacin de agua.
ARTCULO 25. En cada laboratorio de la Facultad debern exhibirse, visible y legiblemente, los telfonos de emergencia a los
cuales llamar en caso de requerirlo.
ARTCULO 26. Los anaqueles, libreros y muebles de oficina que puedan caerse, debern estar sujetos. Los cilindros vacos o que
contengan gases debern estar asegurados individualmente para prevenir accidentes.
ARTCULO 27. Queda prohibido que menores de edad permanezcan en el laboratorio sin la autorizacin por escrito del
responsable del rea.
ARTCULO 28. El personal (acadmicos, administrativos o estudiantes) que labora, o realiza sus actividades en los laboratorios,
debe informar al responsable del rea o a su jefe inmediato si padece alguna enfermedad que requiera atencin especial y pueda
generar incidentes dentro del rea.
ARTCULO 29. A todas las Unidades, Centros o Departamentos que estn certificados se regirn por el reglamento general y ser
complementado por su reglamento interno.
ARTCULO 30. Todas aquellas cuestiones que no estn especficamente sealadas en el presente Reglamento debern ser
resueltas por la Coordinacin de Seguridad, Prevencin de Riesgos y Proteccin Civil, la cual se apoyar en la Direccin de la
Facultad.
ARTCULO 31. Cualquier alteracin de las condiciones de seguridad, o en el cumplimiento del presente Reglamento, deber ser
reportada la Coordinacin de Seguridad, Prevencin de Riesgos y Proteccin Civil.
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ARTCULO 32. Las personas que sean sorprendidas haciendo mal uso de equipos, materiales, instalaciones, etc., propias de los
laboratorios, o de las sealizaciones instaladas para proteccin civil, sern sancionadas conforme a la Legislacin Universitaria,
segn la gravedad de la falta cometida.
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A,
ARTCULO 33. En el caso de los alumnos, las sanciones aplicables sern las que decida el H. Consejo Tcnico de la Facultad,
conforme a las disposiciones de la Legislacin Universitaria.
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ARTCULO 34. Si se trata de personal acadmico o administrativo, se levantarn las actas correspondientes y se dictarn las
sanciones conforme a las disposiciones de la Ley Federal del Trabajo.
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ARTCULO 35. Cada rea acadmica deber tener un Reglamento Interno de Higiene y Seguridad que ser complementario al
presente Reglamento, en tanto no lo contravengan.
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ARTCULO 36. Se informar de este reglamento, as como de los particulares, a los usuarios de cada rea acadmica, quienes
debern firmar de enterado.
Reglamento de Higiene y Seguridad de los Laboratorios del Departamento de Farmacia

ARTCULO 1. El presente Reglamento es complementario del Reglamento de Higiene y Seguridad, para Laboratorios de la
Facultad de Qumica de la UNAM, aprobado por el H. Consejo Tcnico el 28 de abril de 1994.
Su observancia es obligatoria para el personal acadmico, alumnos y trabajadores administrativos, y no excluye otra
reglamentacin que resulte aplicable.
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ARTCULO 2. REGLAS DE SEGURIDAD

2.1 Seguir todas las indicaciones de seguridad que se sealan en cada equipo o reactivo, as como las sealadas en cada prctica.
2.2 Queda prohibido correr dentro del laboratorio.
2.3 Todas las lesiones sufridas dentro del laboratorio, no importa qu tan insignificantes sean, debern darse a conocer al
coordinador del laboratorio.
2.4 Antes de desarmar o limpiar un aparato elctrico, debe asegurarse de que est desconectado de la corriente elctrica. Nunca
opere un equipo que desconoce, pregunte primero al laboratorista o al profesor.
2.5 No debe usarse material de vidrio roto o despostillado.
2.6 Si en su rea o equipo se va a efectuar algn servicio de mantenimiento, asegrese de dar aviso oportuno a todos los
involucrados y comunquelo a la Coordinacin de Seguridad.
2.7 El alumno que necesite salir por cualquier motivo, deber comunicarlo a los profesores.
2.8 El alumno que acta como supervisor de cada equipo de trabajo, deber verificar, al finalizar la prctica, el orden y la limpieza
de cubculos y equipos.
2.9 Al finalizar cada sesin prctica, los alumnos entregarn al profesor responsable de la asignatura o al laboratorista en turno,
los cubculos y equipos empleados, limpios y en buen estado; asimismo debern informar cualquier defecto o anomala detectada
en los mismos.
2.10 Deber colocar sus artculos personales en el sitio que para tal efecto se asignar en cada laboratorio.
TO
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ARTCULO 3. MANUFACTURA DE MEDICAMENTOS
PR
OF
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OR
ES
DE
3.1 Todo el personal involucrado en la manufactura de medicamentos, deber cubrir totalmente su cabello con una cofia limpia y
en buen estado.
3.2 Deber usar guantes de cirujano y cubrebocas limpios, en buen estado, cuando el proceso lo indique (por ejemplo, surtido y
pesado de materias primas, etc.).
3.3 De preferencia debe portar zapatos cerrados con suela antiderrapante.
3.4 Queda prohibido introducir alimentos, bebidas o golosinas, excepto cuando as se requiera (Biofarmacia).
3.6 Quedan prohibidas las visitas.
3.7 Las puertas de los cubculos deben permanecer cerradas.
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ARTCULO 4. DISPOSICIN DE RESIDUOS BIOLGICOS

4.1 En caso de romper o derramar material contaminado, se deber agregar fenol al 5% y dejar actuar el desinfectante por 10
minutos.
4.2 Queda estrictamente prohibido arrojar medio de cultivo, disolventes orgnicos o productos biolgicos, al sistema de drenaje,
as como a los colectores de basura; estos residuos se debern incorporar a recipientes que se localizan en cada laboratorio, para
ser dispuestos adecuadamente.
4.3 Los cultivos deben esterilizarse antes de ser desechados; si se encuentran en material desechable, ste debe depositarse en
los recipientes que se localizan en cada laboratorio. Estos residuos sern reciclados.
4.4 Otros desechos orgnicos (alimentos, animales, muestras biolgicas) se depositarn en los recipientes etiquetados que para
este propsito se encuentran en cada laboratorio.
4.5 El material de plstico se depositar en otro recipiente especial.
4.6 El material de vidrio se colectar aparte, en el recipiente indicado.
4.7 El papel limpio de desecho se depositar en otra caja para ser reciclado.
ARTCULO TRANSITORIO NICO. El presente Reglamento entrar en vigor al da siguiente de su aprobacin por el H. Consejo
Tcnico de la Facultad.
10
REGLAMENTO PARA LOS ESTUDIANTES Y PROFESORES DE LOS CURSOS

EXPERIMENTALES DEL DEPARTAMENTO DE FARMACIA
Para realizar las actividades experimentales en los laboratorios del Departamento de Farmacia, se
debern observar las siguientes indicaciones:
1. Es indispensable que el alumno cuente con el Guin o Manual actualizados de los
experimentos, el Calendario de Prcticas y los tiles o materiales adicionales que le hayan
sido solicitados por su profesor(a).
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2. Para tal efecto es necesario que los coordinadores de la asignatura enven, en el periodo
sealado para esta actividad, el Calendario de Prcticas que se elabor de manera colegiada
y de acuerdo al formato vigente que les enva la Coordinacin de Laboratorios de Docencia
previo al inicio del semestre.
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3. Las actividades que se registren en el calendario de prcticas deben estar asociadas a un

espacio fsico en donde se desarrollar la actividad. Si durante el semestre, surge alguna
modificacin en la ubicacin de las actividades se deber comunicar a la Coordinacin de los
Laboratorios al menos una sesin antes de que realice la actividad en la que hay
modificaciones al calendario.
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4. Al finalizar el curso prctico de cada asignatura los profesores subirn las calificaciones a la
pgina de escolares: escolares.quimica.unam.mx/profesor, en tiempo y forma de acuerdo al
Calendario de Actividades vigente y de acuerdo a la forma en la que cada asignatura haya
definido de manera colegiada la forma en la que deben aparecer sin que quede duda entre los
estudiantes. Los alumnos que adeudan material ya estarn sealados en el recuadro
correspondiente y solamente la Coordinacin de los Laboratorios de Docencia podr eliminar
la seal de adeudo. Se entregar en la Coordinacin una copia del Acta de Calificaciones
del grupo con las firmas de los profesores que impartieron la asignatura.
5. SOLICITUD DE MATERIAL:
Al solicitar el material para las sesiones prcticas, y antes de firmar de conformidad la
papeleta de solicitud, el alumno, deber revisar el material cuidadosamente en la presencia
del laboratorista y si es el caso anotar las observaciones pertinentes en la papeleta. Al finalizar
las actividades prcticas, el material se entregar limpio y en el mismo estado en que se
recibi. No olvide recoger la papeleta de SOLICITUD DE MATERIAL que firm. En caso de
haber roto material, el alumno deber llenar correctamente, firmar y entregar al laboratorista
un VALE DE ADEUDO DE MATERIAL. El material roto y que sea irreparable, se debern
depositar en el contenedor identificado para tal funcin en cada uno de los laboratorios.
6. REPOSICIN DE MATERIAL
Para la reposicin de material roto o extraviado, el estudiante deber comprarlo de las mismas
especificaciones y entregarlo, con la factura de compra, en la Coordinacin de los
11
Laboratorios de Docencia de Farmacia, a ms tardar en la siguiente sesin de laboratorio o en

su defecto y de acuerdo al costo la semana anterior a la entrega de calificaciones finales de
las asignaturas Terico-Prcticas. La calificacin de la Enseanza Experimental no aparecer
en listas hasta que se liquide el adeudo de acuerdo a las especificaciones mencionadas en
este reglamento.
DE
TO
X
IC
OL
O
G
A,
FQ
,U
NA
7. SOLICITUD DE EQUIPO E INSTRUMENTOS:

La solicitud del uso del equipo e instrumentos, as como la bitcora de uso, deber llevar la
firma del alumno y al menos uno de los profesores de la asignatura como co-responsable del
equipo, quien deber sealar a los estudiantes el uso de tales equipos e instrumentos y
supervisar en todo momento que el estudiante lo est utilizando adecuadamente. Al finalizar
las actividades prcticas, los equipos e instrumentos se entregarn en el mismo estado en
que se recibieron. No olvide recoger la papeleta de SOLICITUD DE MATERIAL que firm. En
caso de haber perdido o roto alguno de los insumos del equipo o instrumento, el alumno
deber llenar correctamente, firmar y entregar al laboratorista un VALE DE ADEUDO DE
MATERIAL de acuerdo a las instrucciones que en su momento se le indique en la
Coordinacin de los laboratorios de docencia.
BO
RR
AD
OR
,C
OL
EG
IO
DE
PR
OF
ES
OR
ES
Atentamente: JEFATURA DEL DEPARTAMENTO DE FARMACIA.
12
REPORTE DE SEGURIDAD E HIGIENE

Fecha:
Guin:
Integrantes:
Grupo :
Equipo:
Responsable:
UTILIZACIN DE REACTIVOS
Observaciones anormales
Cantidad empleada
Reactivo
(contaminado, ms de una fase, coloracin anormal,

precipitados)
IC
OL
O
G
A,
FQ
,U
NA
(por equipo)
DE
Condiciones de uso
Hora de
inicio de
uso/
trmino
OF
ES
OR
ES
(Cantidad pesada1, longitud de

2
3
4
onda , rpm , tiempo ,
5
temperatura , disolvente
6
7
8
utilizado , aumento , volumen )
Observaciones
(Sucio, no funciona
adecuadamente, sin
observaciones, anotar el nmero
de equipo o inventario cuando
considere que requiere
mantenimiento)
BO
RR
AD
OR
,C
OL
EG
IO
DE
PR
Equipo
Balanza1
Espectrofotmetro2
Centrfuga3,4
Microcentrfuga3,4
Estufa4,5
Rotaevaporador5,6
Microscopio7
Lmpara de luz UV2
Incubadora4,5
TO
X
VIGILANCIA DE EQUIPO
TRATAMIENTO DE RESIDUOS
Residuo (R)
Observaciones
CRETIB+
(contenido, estado fsico, si hay ms de una fase o tiene precipitado)
CR
CR
CR
CR
CR
E
E
E
E
E
T
T
T
T
T
I
I
I
I
I
B
B
B
B
B
Marque con una X, la(s) letra(s) correspondiente de acuerdo al sistema CRETIB (Corrosivo, Reactivo, Explosivo, Txico,
Inflamable, Biolgico-Infeccioso)
_______________________________________________________________
(Nombre y firma del encargado de seguridad)
13
HOJA DE SEGURIDAD DE REACTIVOS

Investigue los siguientes datos (MSDS, Merck Index) y complete las siguientes tablas para
cada sustancia a emplear. Posteriormente, en el Rombo de comunicacin de riesgos,
indique el valor de 0 a 4, correspondiente a cada riesgo (Salud, Inflamabilidad, Reactividad y
Caractersticas especficas) de acuerdo a la Clasificacin y grados de riesgo de las
sustancias peligrosas (ANEXO 1 DEL REPORTE DE SEGURIDAD E HIGIENE).
G
A,
FQ
,U
NA
Reactivo:
DL50/CL50 (rata):
Punto de ignicin:
Reactividad / Incompatibilidad:
Caractersticas especficas:
Equipo de proteccin personal:
TO
X
DE
ES
OR
ES
OF
PR
DE
IO
EG
,C
OL
Reactivo:
DL50/CL50 (rata):
Punto de ignicin:
IC
OL
O
Reactivo:
DL50/CL50 (rata):
Punto de ignicin:
BO
RR
AD
OR
Reactivo:
DL50/CL50 (rata):
Punto de ignicin:
Reactivo:
DL50/CL50 (rata):
Punto de ignicin:
En Equipo de proteccin personal indique la(s) letra(s) de identificacin correspondiente(s) con base en la
tabla del ANEXO 1.
14
OL
EG
IO
DE
PR
OF
ES
OR
ES
DE
TO
X
IC
OL
O
G
A,
FQ
,U
NA
ANEXO 1 DEL REPORTE DE SEGURIDAD E HIGIENE

CLASIFICACIN Y GRADOS DE RIESGO DE LAS SUSTANCIA QUMICAS
J
K
X
RR
AD
Equipo de proteccin personal

Anteojos de seguridad
Anteojos de seguridad y guantes
Anteojos de seguridad, guantes y mandil
Careta, guantes y mandil
Anteojos de seguridad, guantes y respirador para polvos
Anteojos de seguridad, guantes, mandil y respirador para vapores
Anteojos de seguridad, guantes y respirador para vapores
Gafas de seguridad para salpicaduras, guantes, mandil y respirador para vapores
Anteojos de seguridad, guantes y respirador para polvos y vapores
Gafas de seguridad para salpicaduras, guantes, mandil y respirador para polvos y
vapores
Capucha con lnea de aire o equipo SCBA, guantes, traje completo de proteccin y
botas
Consulte con el supervisor las indicaciones especiales para el manejo de estas
sustancias
BO
Letra
A
B
C
D
E
F
G
H
I
OR
,C
LETRAS DE IDENTIFICACIN PARA EL EQUIPO DE PROTECCIN PERSONAL
15
Efecto txico de plomo en ratas
Hoja de valoracin para la evaluacin del bienestar de los animales de experimentacin
UN
AM
Debido a que el trabajo experimental del guin se desarrollar en cuatro sesiones de laboratorio y en tres de ellas, los animales de experimentacin sern
administrados con acetato de plomo va intraperitoneal, por recomendacin expresa del CICUAL, se realizar la revisin de los mismos posterior a la administracin
del xenobitico. Para tal efecto, debern reportar las caractersticas enunciadas en los recuadros presentados a continuacin, con la finalidad de identificar a los
animales que puedan presentar dao provocado por una inadecuada administracin del acetato de plomo. En caso de detectar cualquier dao se deber reportar a los
Profesores de laboratorio, para que se realice la eutanasia1 del animal.
Fecha de trmino: ______________________________
,F
Q,
Fecha de inicio:_______________________
BO
Nombre del revisor
RR
AD
OR
,C
OL
EG
IO
DE
PR
OF
ES
OR
ES
DE
TO
XI
C
OL
OG
Fecha
Macroequipo responsable
Hora
Actividad2
Aislado3
Pelo Erizado3
Frecuencia de respiracin4
Acicalamiento en el punto de
administracin3
Presencia de herida o irritacin
en la zona de aplicacin3
Inquisitivo o alerta al momento
de sujetarlo3
Orificios sucios (diarrea u orina)3
Coloracin anormal de los ojos3
Extremidades azules3
Observaciones adicionales:
1. Se recomienda recuperar 3 mL de sangre y guardarla en un tubo heparinizado.

2. En caso de que uno o varios animales presenten poca actividad con respecto a la del control, anote los nmeros de las ratas correspondientes.
3. En caso de que la respuesta sea S, anote el nmero de rata. Compare con los animales control.
4. (#Rata) + R = rpida; D = dbil. Compare con los animales control.
IDENTIFICACIN Y CUANTIFICACIN DE TXICOS NO VOLTILES EN UNA

MUESTRA PROBLEMA
OBJETIVOS ACADMICOS
Que el alumno emplee mtodos de extraccin cida y bsica para separar txicos no voltiles de
naturaleza cida y bsica en una muestra problema.
FQ
,U
NA
Que el alumno emplee reacciones coloridas y cromatografa en capa fina (CCF) para la identificacin
G
A,
de txicos no voltiles en una muestra problema.
IC
OL
O
Que el alumno cuantifique un txico no voltil en una muestra problema.
DE
TO
X
PROBLEMA
ES
Separar e identificar escopolamina, paracetamol, cido 4-hidroxibenzoico y cido barbitrico de una
OF
ES
OR
muestra problema; y cuantificar el cido barbitrico presente.
IO
DE
PR
REACTIVOS
OL
EG
Hidrxido de amonio (NH4OH)
,C
Metanol (MeOH)
AD
OR
cido actico glacial (AcOH)
BO
RR
Reactivo de Dragendorff *
Solucin de NaOH al 10%*

Acetato de etilo (AcOEt)
Escopolamina
Diclorometano (CH2Cl2)
Reactivo de Dille-Koppanyi *
cido barbitrico
Paracetamol
cido 4-hidroxibenzoico
cido tartrico *
Solucin acuosa de cido actico 2 M*
Solucin saturada de nitrito de sodio (NaNO2) * cido clorhdrico (HCl) concentrado

cido clorhidrico 1N*
Sulfato de sodio anhdro (Na2SO4)
Acetato de etilo (AcOEt)
Solucin de NaHCO3 al 10%
*Ver APNDICE II
PROGRAMA DE APOYO A PROYECTOS PARA

LA INNOVACIN Y MEJORAMIENTO DE LA ENSEANZA
17
EQUIPO
Rotaevaporador
Bomba de aspersin
Lmpara de luz ultravioleta
Espectrofotmetro
Parrilla de calentamiento
MATERIAL POR E QUIPO (Primera sesin)
2 Agitador de vidrio
Embudo de cola corta
2 Probeta de 10 mL
Matraz Erlenmeyer de 125 mL
6 Pipeta graduada de 10 mL
Matraz de bola de 50 mL
2 Anillo metlico
Vaso de precipitados de 250 mL
5 Tubos de ensayo
Vaso de precipitados de 100 mL
4 Anillos de corcho
Vidrio de reloj de 9 cm
2 Pipeta Pasteur
2
2
2
8
OR
ES
DE
TO
X
IC
OL
O
G
A,
FQ
,U
NA
Embudo de separacin de 250 mL
OF
ES
MATERIAL PARA LA CURVA (Primera sesin)
1 Pipeta volumtrica de 4 mL
DE
PR
Matraz volumtrico de 25 mL
EG
IO
Matraz volumtrico de 10 mL
OR
,C
OL
Pipetas volumtricas de 5 mL
4 Micropipetas de 100-1000 L
BO
Cromatoplacas
RR
AD
MATERIAL POR E QUIPO (Segunda sesin)
Vasos de precipitados de 100 mL
1 Tubos capilares
4 Pipeta graduada de 10 mL
NOTA: El profesor proporcionara las celdas para las lecturas
DESARROLLO EXPERIMENTAL
El profesor proporcionar una muestra problema de 30 mL, la cual contiene los txicos no voltiles
escopolamina, paracetamol, cido 4-hidroxibenzoico y cido barbitrico.
18
PRIMERA SESIN
A) EXTRACCIN CIDA
1. A 15 mL de la muestra problema se agrega una solucin acuosa de cido tartrico al 10% hasta
llegar a pH = 2. La muestra acidificada se trasvasa a un embudo de separacin y se extrae con dos
porciones de 15 mL de AcOEt; se colectan las fases orgnicas y se renen en un matraz. Guardar y
etiquetar
la fase orgnica y la acuosa y tratar segn lo indicado en los incisos 2 y 3
FQ
,U
NA
respectivamente.
2. Tratamiento de la fase orgnica:
IC
OL
O
G
A,
2.1 La fase orgnica se extrae con dos porciones de 15 mL de una solucin de bicarbonato de sodio
(NaHCO3) al 10%; reunir las fases acuosas en un matraz y tratarlas de acuerdo a lo indicado
TO
X
en el inciso 2.3.
ES
DE
2.2 A la fase orgnica obtenida en el inciso 2.1 se le adiciona sulfato de sodio anhidro para
OR
eliminar el exceso de agua en la muestra, posteriormente la fase orgnica se filtra a travs de
OF
ES
algodn y se concentra in vacuo; el residuo final se reconstituye con 2 mL de AcOEt. Etiquetar
DE
PR
como fraccin A1.
IO
2.3 La fase acuosa que se reuni en el inciso 2.1 se acidifica con HCl concentrado hasta llegar a un
OL
EG
pH = 1 y posteriormente se extrae con dos porciones de 15 mL de AcOEt; las fases orgnicas
OR
,C
se renen en un matraz, se elimina el exceso de agua adicionando sulfato de sodio anhidro y
RR
AD
filtrando a travs de algodn, finalmente la fase orgnica se concentra in vacuo y el residuo
BO
obtenido se reconstituye con 2 mL de AcOEt. Etiquetar como fraccin A2. Nota: La fase
acuosa se desecha de acuerdo a lo indicado en R0 (Apndice disposicin de residuos).
3. Tratamiento de la fase acuosa:
3.1 Adicionar gota a gota (aproximadamente 5 gotas), una solucin de NaOH al 10% hasta pH = 10.
La solucin bsica se trasvasa a un embudo de separacin y se extrae con dos porciones de 15 mL
de CH2Cl2; las fases orgnicas se renen en un matraz, se seca sobre sulfato de sodio anhidro, se
concentra in vacuo y el residuo final se reconstituye con 2 mL de CH2Cl2. Etiquetar como
fraccin A3.

19
3.2 A la fase acuosa obtenida en el inciso 3.1, se adiciona gota a gota, HCl concentrado hasta llegar a
pH = 2. Etiquetar como fraccin A4.
4. Tomar 2 mL de la fraccin A4 y llevar a sequedad con ayuda de una parrilla de calentamiento; el
residuo obtenido se reconstituye con 2 mL de MeOH y se conserva para su posterior anlisis con
las pruebas de identificacin.
5.
El remanente de la fraccin A4 se conserva para la cuantificacin de cido barbitrico de acuerdo
FQ
,U
NA
al procedimiento indicado en el apartado C (Cuantificacin).
IC
OL
O
G
A,
B) EXTRACCION BSICA
A 15 mL de la muestra problema se agrega gota a gota una solucin de NaOH al 10% hasta llegar a
TO
X
un pH = 10 (aproximadamente 10 gotas). La solucin bsica se trasvasa a un embudo de separacin
ES
DE
y se extrae con dos porciones de 15 mL de CH2Cl2; se separan las fases orgnicas y renen en un
OR
matraz. Guardar y etiquetar la fase orgnica y la acuosa y tratar segn lo indicado en los incisos 2 y
OF
ES
3 respectivamente.
DE
PR
Tratamiento de la fase orgnica:
IO
Adicionar sulfato de sodio anhidro para eliminar el exceso de agua, filtrar sobre algodn y
OL
EG
concentra in vacuo. El residuo obtenido se reconstituye en 2 mL de MeOH. Etiquetar como
OR
,C
fraccin B3.
RR
AD
Tratamiento de la fase acuosa:
BO
3.1 Adicionar gota agota, una solucin de HCl 1N hasta pH = 7. La solucin resultante se trasvasa a
un embudo de separacin y se extrae con dos porciones de 15 mL de AcOEt
3.2 A la fase orgnica obtenida se le adiciona sulfato de sodio anhidro, se filtra a travs de algodn
y se concentra in vacuo, el residuo final se reconstituye en 2 mL de AcOEt. Etiquetar como
fraccin B1.
3.3 La fase acuosa neutra del inciso 3 se lleva a pH = 2 adicionando HCl 1N, se trasvasa a un
embudo de separacin y se extrae con dos porciones de 15 mL de AcOEt. A la fase orgnica
obtenida se le agrega sulfato de sodio anhidro, se filtra a travs de algodn, se concentra a
presin reducida y el residuo final se reconstituye en 2 mL de AcOEt. Etiquetar como fraccin
B2.
20
3.4 La fase acuosa remanente de la extraccin anterior, se etiqueta como fraccin B4.
Tomar 2 mL de la fraccin B4 y llevar a sequedad con ayuda de una parrilla de calentamiento; el
residuo obtenido se reconstituye en 2 mL de MeOH y se conserva para su posterior anlisis.
El remanente de la fraccin B4 se conserva para la cuantificacin de cido barbitrico.
Nota: El disolvente recuperado al final de la concentracin in vacuo se depositar en el contenedor
etiquetado como R1 para A3 y B3 y en R2 para A1-2 y B1-2. Los residuos de sulfato de sodio
G
A,
FQ
,U
NA
anhidro se depositan en el contenedor etiquetado como R3.
TO
X
IC
OL
O
C) CUANTIFICACIN DE CIDO BARBITRICO
ES
DE
PREPARACIN DE LA CURVA PATRN DE CIDO BARBITRICO
OR
La curva patrn de cido barbitrico se prepara colocando en matraces volumtricos de 10 mL los
OF
ES
volmenes de la solucin patrn de cido barbitrico indicados en la Tabla 1 y llevando al aforo con
DE
PR
agua destilada:
EG
IO
Tabla 1. Curva patrn de cido barbitrico

Alcuota de la
Concentracin
solucin patrn de cido barbitrico (mL)
de cido barbitrico (mg/mL)
0.0
BLANCO
1.5
0.45
0.90
1.80
2.40
OR
,C
OL
No. de tubo
RR
BO
AD

21
TRATAMIENTO DE LAS FRACCIONES QUE CONTIENEN CIDO BARBITRICO:

MUESTRA PROBLEMA, CURVA PATRN Y BLANCO
1. Colocar en tubos de ensaye 1 mL de cada una de las fracciones que contienen cido barbitrico
(muestra problema, curva patrn y blanco).
2. Adicionar a cada uno de los tubos de ensaye 0.5 mL de la solucin saturada de NaNO2, 0.1 mL de la
solucin de AcOH 2M y 2.4 mL de agua destilada.
3. Determinar la absorbancia de cada una de las muestras en el espectrofotmetro a 530 nm, utilizando
NA
como blanco el tubo nmero 1 de la curva (ver Tabla 1).
FQ
,U
4. Despus de haber realizado la lectura de cada una de las muestras colocarlas en un contenedor
TO
X
IC
OL
O
G
A,
etiquetado como R12.
DE
SEGUNDA SESIN
ES
OR
ES
D) IDENTIFICACIN
DE
PR
OF
Cromatografa en capa fina
EG
IO
Solicitar a los profesores 4 placas para cromatografa en capa fina (CCF). Los anlisis por CCF se
,C
OL
realizan en cromatoplaca de 5 cm X 2.5 cm, que consisten en placas de aluminio recubiertas con una
RR
AD
OR
capa de gel de slice (slica Kieselgel 60 F254 Merck)
BO
1. Previamente, se aplicar en el lado izquierdo de una cromatoplaca (placa 1) la referencia de

escopolamina, en la placa 2 la de cido barbitrico, en la placa 3 la referencia de paracetamol y en la
4 la de cido 4-hidroxibenzoico. Colocar la muestra de los residuos reconstituidos previamente
aplicndolas en el lado derecho de cada una de las placas de acuerdo al siguiente esquema.

22
0.3 cm
Lmite de elucin
Rf= d1/d2
d2
Mta1
0.5 cm
Mta2
G
A,
Ref
FQ
,U
NA
d1
IC
OL
O
Ref= alcaloide o barbitrico

Mta= Reconstituido
Para la identificacin de la escopolamina emplear como sistema de elucin una mezcla de
ES
2.
DE
TO
X
Esquema 1. CCF de las muestras en estudio.
ES
OR
CH2Cl2-MeOH- NH4OH (9:1:0.1). Nota: Para preparar este sistema de elucin es necesario
PR
OF
mezclar el hidrxido de amonio y metanol y posteriormente verter la mezcla resultante en el
IO
Para la identificacin del cido barbitrico emplear como sistema de elucin una mezcla de
EG
3.
DE
CH2Cl2.
Para la identificacin de paracetamol utilizar como sistema de elucin una mezcla de CH2Cl2-
OR
4.
,C
OL
AcOEt-MeOH-AcOH glacial (7:2:1). Agitar vigorosamente la fase mvil antes de eluir la placa.
RR
Para la identificacin de cido 4-hidroxibenzoico utilizar como sistema de elucin una mezcla
BO
5.
AD
MeOH (9:1).
de CH2Cl2-MeOH (9:1) + 10 gotas de AcOH glacial, por cada 10 mL de mezcla.

6.
Saturar las cmaras durante 10 minutos antes de eluir las muestras en las cromatoplacas.
7.
Eluir hasta la lnea limite de elucin indicada en el esquema 1.
8.
Visualizar la presencia de las sustancias con una lmpara de luz U.V. a 254 nm y
posteriormente, revelar las cromatoplacas utilizando la solucin etiquetada como solucin
reveladora de reactivo de Dragendorff para el caso del alcaloide (escopolamina), con una
cmara de yodo para el cido barbitrico, y con sulfato crico amoniacal/H2SO4 para el
paracetamol y cido 4-hidroxibenzoico.

23
9.
Calcular el factor de retencin (Rf) para cada sustancia de acuerdo al esquema 1 y comparar el
valor obtenido con el de la referencia correspondiente.
10. Una vez identificados las sustancias, desechar los sistemas de elucin de la siguiente forma:
depositar la mezcla CH2Cl2-MeOH-NH4OH (9:1:0.1) en el contenedor etiquetado como R4;
depositar la mezcla AcOEt-MeOH-AcOH glacial (7:2:1) en el contenedor etiquetado como R5;
depositar las mezclas que contengan CH2Cl2-MeOH-AcOH en el contenedor etiquetado como
R6. Depositar las cromatoplacas en una bolsa de plstico etiquetada como R7
FQ
,U
NA
Identificacin por reacciones de color
IC
OL
O
G
A,
Con el excedente de las fracciones reconstituidas realizar los ensayos respectivos.
TO
X
Escopolamina: reactivo de Dragendorff
ES
DE
1. Colocar 10 gotas de la fraccin reconstituida correspondiente a escopolamina en un tubo de ensayo
OR
y agregar 2 gotas de solucin reveladora de Dragendorff.
OF
ES
2. Realizar un control positivo con la muestra de referencia y un control negativo con CH2Cl2 para esta
IO
DE
PR
reaccin.
,C
OL
EG
Barbitricos: reactivo de Dille-Koppanyi
OR
1. Colocar 10 gotas de la fraccin reconstituida correspondiente a barbitricos en un tubo y agregar dos
RR
AD
gotas del reactivo A y una gota del reactivo B (Dille-Koppanyi).
BO
2. Realizar un control positivo con la muestra de referencia y un control negativo con MeOH para esta
reaccin.
3. Una vez identificadas TODAS las fracciones desechar de la siguiente manera: Depositar las
fracciones A4, B4 y los residuos de la reaccin de Dille-Koppanyi en el contenedor etiquetado
como R8. Depositar las fracciones A3, B3 y los residuos de la reaccin de Dragendorff en el
contenedor etiquetado como R9.
Nota: Los residuos de paracetamol y cido 4-hidroxibenzoico se depositarn en los contenedores
etiquetados como R10 y R11, respectivamente.

24
CUESTIONARIO.
1. En el caso de emplear una muestra biolgica indique cul es el objetivo de adicionar cido tartrico
adems de ajustar el pH?
________________________________________________________________________________
2. Una vez desarrollado el guin qu puntos del proceso y propiedades fisicoqumicas considera que
FQ
,U
NA
son crticos para la extraccin eficiente de un xenobitico?
G
A,
________________________________________________________________________________
IC
OL
O
3. Reporte en la siguiente tabla los resultados que obtuvo en las pruebas de identificacin. Marque con
DE
TO
X
una cruz si la reaccin fue positiva y un guin si fue negativa.
IO
ES
DE
PR
OF
Referencia
Residuo
escopolamina reconstituido
de
escopolamina
OR
ES
Tabla 1. Resultados de las pruebas de identificacin
OL
EG
Dragendorff
Dille-Koppanyi
Rf
AD
OR
,C
Rf
Referencia
Residuo
barbitrico reconstituido
de cido
barbitrico
BO
RR
4. Indique si su muestra contena cido barbitrico. Explique su respuesta.

________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
5. Indique si su muestra contena escopolamina. Explique su respuesta.
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
25
6. Indique si su muestra contena cido 4-hidroxibenzoico y paracetamol. Explique su respuesta.

________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
7. En la extraccin en medio cido cual es la finalidad de utilizar la solucin de NaHCO3 al 10%.
FQ
,U
NA
________________________________________________________________________________
8. Cules son los puntos que considera crticos para la adecuada identificacin de los componentes en
IC
OL
O
G
A,
la muestra problema? Explique su respuesta.
TO
X
________________________________________________________________________________
DE
________________________________________________________________________________
OR
ES
________________________________________________________________________________
PR
OF
ES
________________________________________________________________________________
DE
9. Reporte en la siguiente tabla los valores de absorbancia obtenidos, e indique los valores de la
EG
IO
regresin lineal.
BO
RR
AD
OR
,C
OL
Tabla 1. Absorbancias de la curva patrn

Concentracin de cido
Absorbancia
barbitrico [mg/mL]
0.0
0.45
0.9
1.8
2.4
Pendiente (m)
Ordenada al origen (b)
Coeficiente de correlacin (r)

26
10. Interpole los valores de absorbancia en la curva y calcule la concentracin de cido barbitrico en
la muestra. Indique el procedimiento.
___________________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________________
OL
EG
IO
DE
PR
OF
ES
OR
ES
DE
TO
X
IC
OL
O
G
A,
FQ
,U
NA
___________________________________________________________________________________
OR
,C
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS.
BO
RR
AD
Clark E.E. Isolation and Identification of Drugs. Vol. I y II. Pharmaceutical Press, London, 1972.
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nitrite in water. Talanta 66, 11811186.
27
APNDICE I: CONOCIMIENTOS PREVIOS.

1. Efectos txicos de la escopolamina, cido barbitrico, cido 4-hidroxibenzoico y paracetamol.
2. Relacin del grado de disociacin de una sustancia con el pH del medio en el que se encuentra
disuelto en funcin del valor de su pKa.
3. Valores de pKa de la escopolamina, cido barbitrico, cido 4-hidroxibenzoico y paracetamol.
4. Forma ionizada y no ionizada de cada uno de ellos.
5. Solubilidad de una sustancia inica en medio acuoso y en un disolvente orgnico.
FQ
,U
NA
6. Densidad de los disolventes a emplear.

7. Fundamento de una extraccin mltiple y selectiva.
IC
OL
O
G
A,
8. Sustancias que pueden precipitar protenas.
9. Especificar las especies qumicas que se encuentran en cada una de las fases obtenidas en los
TO
X
tratamientos cido y bsico
ES
DE
10. Objetivo de adicionar una solucin de NaOH 2.5 N en el proceso de extraccin cida.
OR
11. Objetivo de adicionar una solucin de HCl 1N en el proceso de extraccin bsica.
OF
ES
12. Fundamento y esquema de la reaccin de Dragendorff.
DE
PR
13. Fundamento y esquema de la reaccin de Dille-Koppanyi.
IO
14. Fundamento de cromatografa en capa fina como herramienta de identificacin de sustancias
OL
EG
qumicas utilizando luz UV, Yodo y reactivo de Dragendorff como agentes reveladores.
OR
,C
15. Reaccin involucrada en la cuantificacin de cido barbitrico.
RR
AD
16. Ley de Lambert y Beer
BO
17. Sugiera un esquema de separacin para la siguiente mezcla de sustancias no voltiles, indicando
los reactivos y disolventes utilizados, los valores de pH y la naturaleza de las sustancias durante
las diferentes etapas del proceso.
COOH
OH
HO
CH3
HO
OH
OH
cido glico [A, pKa 3.0]
cido propanico [B, pKa 4.36]

NH-CH3
CH3
Efedrina [C, pKa 9.36]
28
APENDICE II: PREPARACION DE REACTIVOS

Solucin de sulfato crico amoniacal en cido sulfrico.
Pesar 12 g de sulfato crico amoniacal y adicionarlos lentamente y con agitacin constante sobre 350 g
de hielo, posteriormente, adicionar 12.5 mL de H2SO4 concentrado manteniendo la agitacin. Una vez
obtenida la solucin se filtra a travs de algodn. Guardar la solucin anterior en un frasco mbar.
FQ
,U
NA
Reactivo de Dragendorff (Solucin reveladora)
Solubilizar 2.6 g de carbonato de bismuto y 7.0 g de yoduro de sodio en 25 mL de cido actico glacial,
IC
OL
O
G
A,
calentar por 10 minutos a 40oC para solubilizar el reactivo. Dejar reposar por 12 horas y posteriormente
filtrar la solucin. 20 mL del filtrado (solucin rojo-caf) se mezclan con 8 mL de acetato de etilo, la
DE
TO
X
solucin anterior guardarla en un frasco mbar (la cual es estable por 6 meses).
ES
OR
ES
Reactivo A (Dille-Koppanyi)
DE
PR
OF
Solubilizar 1 g de acetato de cobalto tetrahidratado en 100 mL de metanol absoluto.
OL
EG
IO
Reactivo B (Dille-Koppanyi)
AD
OR
,C
Mezclar 5.0 mL de isopropilamina con 95 mL de metanol absoluto
BO
RR
Solucin de hidrxido de sodio al 10%

Disolver 10 g de NaOH en 100 mL de agua destilada.
Solucin de cido clorhdrico 1 N
Colocar 83 mL de HCl concentrado en un matraz aforado y adicionar agua destilada hasta 1 L.
Solucin de cido tartrico al 10%
Colocar 10 g en 100 mL de agua destilada.

29
Solucin patrn de cido barbitrico 3 mg/mL

Pesar 75.0 mg de cido barbitrico y transferir la pasada cuidadosamente a un matraz volumtrico de
25 mL, llevar al aforo con agua destilada.
Solucin saturada de nitrito de sodio. (NaNO2)
Pesar 82 g de NaNO2 y disolver en 100 mL de agua destilada.
FQ
,U
NA
Solucin de cido actico 2 M.
G
A,
Medir 1.14 mL de cido actico glacial (densidad 1.049 g/mL) y agregarlos a 5 mL de agua, vaciar en
DE
TO
X
IC
OL
O
un matraz volumtrico de 10 mL y aforar en seguida con agua destilada.
ES
OR
ES
APNDICE III: DISPOSICIN DE RESIDUOS
PR
OF
R0: Residuo acuoso extraccin cida. Desechar en la tarja.
DE
R1: Residuos de escopolamina en diclorometano.
EG
IO
R2: Residuos de acetato de etilo.
,C
OL
R3: Sulfato de sodio anhidro.
OR
R4: Mezcla CH2Cl2-MeOH (9:1) + 7 gotas de NH4OH
RR
AD
R5: Mezcla MeOH-acetato de etilo-cido actico
BO
R6: Mezcla CH2Cl2-MeOH-cido actico

R7: Cromatoplacas
R8: Reactivo de Dille-Koppanyi, cido barbitrico (fracciones A4 y B4), acetona y MeOH
R9: Reactivo de Dragendorff, escopolamina (fracciones A3 y B3), CH2Cl2 y MeOH
R10: Residuos de paracetamol.
R11: cido 4-hidroxibenzoico.
R12: cido barbitrico, NaNO2, AcOH, acetona y MeOH

30

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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICO

Manual de guiones experimentales para la enseanza y

aprendizaje del laboratorio de Toxicologa (clave 1614)

Alejandra Quijano Mateos

Facultad de Qumica, UNAM

Manuel Gutirrez Aguilar

Mxico, D.F. 2014

PROGRAMA DE APOYO A PROYECTOS PARA LA INNOVACIN Y MEJORAMIENTO DE LA ENSEANZA

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REGLAMENTO PARA LOS ESTUDIANTES Y PROFESORES DE LOS CURSOS

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