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CARACTERISTICAS
DE LA HIDRODINAMICA
DE UN BIORREACTOR
INDUSTRIAL TIPO TANQUE AGITADO
213 Derivation and application of the Stefan-Maxwell equations
HYDRODYNAMIC(Desarrollo
CHARACTERISTICS
OF THE INDUSTRIAL STIRRED TANK
y aplicacin de las ecuaciones de Stefan-Maxwell)
BIOREACTOR
Stephen Whitaker
J. Raffo-Duran1 , A. Figueredo-Cardero1 y J.C. Dustet-Mendoza2
Biotecnologa / Biotechnology
1 Centro
de Inmunologa Molecular. Calle 216 esq 15a, Reparto Atabey, Playa, CP 11600. La Habana, Cuba
2 Instituto Superior Polit
245 Modelado de la biodegradacin en biorreactores de lodos de hidrocarburos totales del petrleo
ecnico Jose Antonio Echeverra, CUJAE, Facultad de Ingeniera Qumica. Calle 114
No. 11901intemperizados
entre Ciclov
a y yRotonda,
en suelos
sedimentos Marianao, CP 19390. La Habana, Cuba.
(Biodegradation
of sludge
of total petroleum
Recibido
12 de modeling
Diciembre
de bioreactors
2013; Aceptado
28 dehydrocarbons
Junio de weathering
2014 in soil
and sediments)
S.A. Medina-Moreno, S. Huerta-Ochoa, C.A. Lucho-Constantino, L. Aguilera-Vzquez, A. Jimnez-
Resumen
Gonzlez y M. Gutirrez-Rojas
Palabras clave: biorreactor, tanque agitado, DFC, transferencia de masa gas-lquido, inundacion del impelente, dispersion
(Plant site selection: Critical review and adequation criteria used in this decision)
gas-liquido.
J.R. Medina, R.L. Romero y G.A. Prez
Abstract
This paper proposes the use of Computational Fluid Dynamics (CFD) to gain insight into the on flow patterns and other
variables related to them in the industrial bioreactor for animal cell culture, and experimentation and to obtain information
on the hydrodynamics by handling of the air flow and agitation operating parameters. We propose a mathematical model
using the CFD tool, with which velocity fields comparable to those reported in the literature for a bioreactor with the same
geometry as the one studied were obtained. By experimentation the time of mixing and the residence time distribution
(RTD) were determined in the operating condition of the bioreactor (without aeration), and a flow pattern of perfect mix
for the liquid phase was obtained. Also the mixing time was determined by CFD reaching a good approximation to that
obtained experimentally. The operation of the bioreactor with air was characterized using a factorial experimental design
32 and the results obtained showed that the coefficient of volumetric oxygen transfer (kLa ) depends on the variables stirring
speed (N) and air flow rate (Qa).Using published correlations in the literature it was concluded that the phenomenon of
flooding of the impeller occurs in the operating condition.
Keywords: bioreactor, stirred tank, CFD, gas-liquid mass transfer, flooding of the impeller, gas-liquid dispersing.
823
Raffo-Duran y col./ Revista Mexicana de Ingeniera Qumica Vol. 13, No. 3 (2014) 823-839
Introduccion
2
2.1
Materiales y metodos
Equipamiento y condiciones experimentales
www.rmiq.org
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Sensor de DO
(t) i
H(t) =
f i
(1)
con dos impelentes acoplados al mismo eje.
Una representacion esquematica del mismo puede
Donde: H(t): es el ndice de homogeneidad en el
apreciarse en la Figura 1. El impelente inferior
tiempo
(t) es la conductividad en el tiempo t,
es factorial
una turbina empleado
Rushton de 6en
paletas
para impulsar
triz del diseo
las determinaciones
del kt,La.
es
la
conductividad
inicial (t = 0 s) y f es la
el fluido radialmente. Mientras que el impelente
i
conductividad
final
(t
=
).
superior presenta una propela marina con 3 aspas
orientadas(N)
para impulsar el Flujo
fluido axialmente
En el estudio de la distribucion de tiempos de
cidad de Agitacin
de Airehacia
(Qa)
abajo. Ambos impelentes presentan un diametro de
residencia (DTR) se empleo la condicion de agitacion
alor
Valor
1
0.3Valor
m y estan separados entre
s a 0.512 m, la distancia
Valor de 30 min sin aireacion a 35C y1se mantuvo un
del impelente inferior con
respecto al fondo es de 0.23
flujo volumetrico de agua de 20 Lh . Para graficar
soluto
Absoluto
Normalizado
Normalizado
-1
-1
m.
El
di
a
metro
del
tanque
es
de
0.98
m
y
presenta
la
curva de DTR se emplearon mediciones de la
min )
(Lmin )
4 deflectores, la altura del lquido es de 1.54 m. La
conductividad en el tiempo a la salida del reactor, para
50
1on se realiza mediante 30
aireaci
un burbujeador tipo tubo 0
ello fue usada la siguiente expresion (Levenspiel and
perforado.
30
-1
30
0 Barreiro 2002):
30
40
40
40
50
30
50
-1
40
1
Determinacion experimental del tiempo
0
30
0
de mezclado y la distribucion de
0tiempos de residencia
20
-1
0
40
1
El tiempo de mezclado esta definido como el tiempo
1 para alcanzar el 9540
requerido
% de la homogeneidad 1
en un-1tanque agitado una vez
20 anadido un trazador -1
(Xing, Kenty et al. 2009). Para los biorreactores que
1
20
-1
son usados en la produccion comercial no es posible
C =
2.2
(t)
t
R
(t)dt
(2)
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Tabla 1. Matriz del diseno factorial empleado en las determinaciones del kLa .
Velocidad de Agitacion (N)
Valor Absoluto
(min1 )
Valor
Normalizado
Valor Absoluto
(Lmin1 )
Valor
Normalizado
50
30
30
40
40
40
50
30
50
1
-1
-1
0
0
0
1
-1
1
30
30
40
30
20
40
40
20
20
0
0
1
0
-1
1
1
-1
-1
VL
v0
(4)
2.3
Determinacion
experimental
del
coeficiente volumetrico de transferencia
de oxgeno (kLa )
(5)
(7)
www.rmiq.org
= kL a |{z}
ln
t
DO
|{z}
1 100
x
m
|
{z
}
y
(8)
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Correlacion
Regimen
de flujo
T (m)
D/T
c/T
Tipo de
burbujeador
(Zlokarnik 1973)
FlF = 0.19FrF075
0.01 Fr 2
0.2-0.45
0.2 -0.45
1/3
Tubo perforado
Re >
Esc. Ind.
0.3 -0.4
Anillo perforado
(Henzler 1982)
(Nienow 1990)
0.21FrF2.1(D/T )
FlF = (T/D2.04)
1.3 +
7.54(D/T )
0.14FrF
(T/D2.25)1.5
1104 ,
Fr 5
Tubo perforado
FrF 0.85
0.29-1.2
2.4
0.25 -0.4
Anillo perforado
30*
30
30
30
30
40*
40
40
40
40
50*
50
50
50
50
1*
10
20
30
40
1*
10
20
30
40
1*
10
20
30
40
0.33 -0.5
*Condiciones hipoteticas.
2.5
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Modelos de interaccion (transferencia de
movimiento entre fases: flotacion y arrastre).
El coeficiente de arrastre calculado tomando en
cuenta la fraccion volumetrica.
Fig. 2. Geometra y mallas computacionales usadas para la modelacion DFC. (A) Vista isometrica de la geometra
Figura 2. Geometra y mallas computacionales usadas para la modelacin DFC. (A) Vista
del biorreactor. (B) Vista isometrica de la malla del dominio estacionario. (C) Vista isometrica de la malla del
isomtrica
dominio
rotatorio.de la geometra del biorreactor. (B) Vista isomtrica de la malla del dominio
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A
0,3
0,2
y/T= 0,213
y/T = 0,453
y/T = 0,8
y/T = 0,213 (Joshi et al. 2011)
y/T = 0,453 (Joshi et al. 2011)
y/T = 0,8 (Joshi et al. 2011)
Uy/Utip
0,1
0
-0,1
-0,2
-0,3
-0,4
0
0,1
0,2
0,3
0,4
0,5
0,6
r/T
Figura 3A. Lneas fijadas en las geometras del biorreactor simulado para la obtencion de datos de velocidad axial
Figura
fijadas
geometras
del A)
biorreactor
simulado
la obtencin
de
ubicadas 3A.
en unLneas
plano central
entreen
loslas
deflectores
( = 45).
r/T=0.213; B)
r/T=0.453;para
C) r/T=0.8.
Figura 3B.
1 , empleando el
Componente
de
la
velocidad
axial
media
normalizada
vs
distancia
radial
adimensional
a
30
min
datos de velocidad axial ubicadas en un plano central entre los deflectores (=45). A)
modelo de turbulencia k- y el metodo estacionario.
r/T=0,213;
B) r/T=0,453; C) r/T=0,8. Figura 3B. Componente de la velocidad axial media
-1
normalizada
distancia radial adimensional a 30 min
, empleando
el modelo
dey turbulencia
Empleando
las ecuaciones
(9) y (10)
los valores
2.5.1 Calculosvs
adicionales
k- y el mtodo estacionario.
de , g y db obtenidos de las simulaciones en DFC se
(10)
3
3.1
Resultados y discusion
Estudio del campo de velocidades
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Grado de Homogeneizacin vs tiempo
1,20
1,15
1,10
1,05
Exp
punto 1
punto 2
punto 3
punto 4
punto 5
punto 6
punto 7
punto 8
punto 9
punto 10
H(t)
1,00
0,95
0,90
0,85
0,80
tm = 100 s
(Experimental)
tm= 97 s
(Simulado)
0,75
0,70
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
110
120
130
tiempo, s
Figura 4A. Distribucion aleatoria de los puntos en el vaso del biorreactor para mediciones del tiempo de mezclado.
Figura 4A. Distribucin aleatoria de los puntos en el vaso del biorreactor para mediciones del
Figura 4B. Curvas respuestas de la concentracion normalizada del trazador en los puntos de monitoreo obtenidos
tiempoonde
mezclado. aFigura
4B. Curvas
respuestas
de1la. concentracin normalizada del
por simulaci
y experimental
una velocidad
de agitaci
on de 30 min
trazador en los puntos de monitoreo obtenidos por simulacin y experimental a una velocidad
Esto garantizo condiciones de similitud de
din
amica.
agitacin
delos
30autores
min-1.mencionados.
Tambien se comprobo la similitud entre las relaciones
etricas. Se verificaron los resultados de la
geom
velocidad axial media normalizada (Uy /Utip ) para las
distintas
posiciones axiales (ver Figura 3A) con los
resultados experimentales de Velocimetra por efecto
Doppler Laser obtenidos por Joshi y col. (2011).
La Figura 3B muestra las componentes axiales de
la velocidad media normalizada en la coordenada
axial normalizada vs la distancia radial adimensional
a distintas posiciones axiales para la region de la
turbina Rushton. Estos datos se comparan con la
tendencia correspondiente a los datos de la literatura
antes referenciados.
3.2
830
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H(t)
1 sin
deadimensional
respuesta adimensional
obtenida experimentalmente
en la ocondicin
Fig. 5.Figura
Curva 5.
de Curva
respuesta
obtenida experimentalmente
en la condicion de agitaci
n de 30 minde
-11
-1
agitacin
de 30
min y. flujo volumtrico de agua de 20Lh .
aireacion y flujo volum
etrico de agua
de 20Lh
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Figura
6.
Relacin lnE vs para los datos experimentales en la condicin
de agitacin de 30
Fig. 6. Relacion ln Et heta vs-1 para los datos experimentales en la condicion de agitaci
on de 30 min1 y flujo
-1
min
volumetrico de agua de 20
Lh1 .y flujo volumtrico de agua de 20Lh .
DO, %
100
90
80
DO
Flujo de aire
70
60
50
Grfico Dinmica
40
30
DO
20
Flujo de aire
10
0
10
20
30
0
DO, %
100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
de Oxigenacin
t, min
40
50
A
60
100
90
80
Qa,
70
L/min
60
50
100
40
30
90
20
80
Qa,
10
70
L/min
0
60
70
50
40
30
Fig. 7. A-Curva de reoxigenacion. B- Curva ln(1/(1-DO/100))
vs t para determinar
20
-1
agitacion de 40 min1 y aireacion de 40 Lmin1
en el medio
de cultivo.
10
0
10
20
30
40
50
60
70
el kLa adeterminar
35C en la condici
Figura 7. A-Curva de reoxigenacin. B- Curva ln(1/(1-DO/100)) vs t para
el kLoan a
de 35C en la condicin de agitacin de 40 min y aireacin de 40 Lmin-1 en el medioB
de
cultivo.
0
t, min
En la Figura 7B se incluye tambien la recta resultante
Determinaci
on
experimental
del
del ajuste lineal a los valores junto con la expresion
coeficiente volumetrico de transferencia
matematica del modelo ajustado, el coeficiente de
7.
A-Curva
de(kreoxigenacin.
B-transferencia
Curva ln(1/(1-DO/100))
vsdedistintas
t kpara
determinar
geno
Tablade
4.ox
Coeficiente
de oxgeno
las
condicionesel kLa
La ) volumtrico de
correlaci
on (R2 ) ypara
el valor
.
3.3
Figura
a
La
-1
-1
2
35CPara
en de
la agitacin
condicin
agitacin(Qa)
de segn
40 min
y aireacin
40
Lmin
en
el medio de
(N)de
y aireacin
el diseo
factorial
3 se
enobserva
medio
de cultivo.
En la
Figura de
7B
como
el coeficiente
determinar la capacidad de oxigenacion del
2
de
correlacion (R ) se -1
aproxima notablemente a 1,
cultivo.
biorreactor es necesario determinar
-1 el coeficiente
-1
N (min
Qaesta
(Lminlo)que indica que
kLaexiste
(h )una buena correlacion lineal
volumetrico de transferencia
de ox)geno. Con
El valor de kLa es obtenido a partir
30 de determinaciones 20 entre los puntos. 0,996
finalidad se hicieron una serie
la recta y es igual a 0.0405 min1
usando el metodo estatico30en las condiciones 30 de la pendiente de
1,458
1
procedimiento fue aplicado para
de la Tabla 1. 30
De manera ilustrativa, 40 (2,43 h ). El mismo
2,016
Tabla experimentales
4. Coeficiente
volumtrico
de transferencia
de oxgeno
para experimentales
las distintasdelcondiciones
el resto
de las condiciones
diseno
la Figura 7 muestra la curva de reoxigenacion (A), y
2
40
20
1,494
factorial yfactorial
los resultados
muestran
en lade
Tabla
4.
delosagitacin
(N) y aireacin
(Qa)
3 seen
medio
cultivo.
datos transformados
segun la ecuaci
on (8),segn
en la el diseo
40obtenida para una de 30
curva ln(1/(1-DO/100)) vs t (B),
Se observa 1,914
que al aumentar la velocidad de
-1 la Tabla 1 (aireacion 40
-1
las condiciones experimentales40
de -1
gas constante aumenta el
N (minde
)
Qa (Lminagitaci
) on para un2,43
kflujo
La (h )
de 40 Lmin1 y velocidad de agitacion de 40 min1 ).
coeficiente volumetrico de transferencia de oxgeno.
832
30 50
50
30
50
30
40
40
20
20
30
www.rmiq.org
30
40
40
20
30
2,178
0,996
2,922
1,458
3,588
2,016
1,494
1,914
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Qa (Lmin1 )
30
30
30
40
40
40
50
50
50
20
30
40
20
30
40
20
30
40
kLa (h1 )
0.996
1.458
2.016
de 8.
Pareto
de los efectos
individuales
y sus interacciones
1.494Figura 8. Diagrama
Fig.
Diagrama
de Pareto
de los efectos
individualessobre la variable
respuesta kLa.
1.914
y sus interacciones sobre la variable respuesta kLa .
2.43
2.178
El estadstico de Durbin-Watson igual a 2.28 (valor-P
2.922
= 0.560 > 0.05) prueba la aleatoriedad de los residuos
3.588
con un 95.0% de nivel de confianza. De todo este
833
respuesta kLa.
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Figuraobtenido
10. Grfico
de contornoenpara
coeficiente
volumtrico
de(A)
transferencia
de-1. oxgeno
-1
pordelacontorno
modelacin
DFCel
avolum
30
min
lquidodeagua).
Qa = por
1 Lmin
(B)
Fig. 10. Grafico
para el coeficiente
etrico
de transferencia
oxgeno
obtenido
la modelaci
on-1
-1 (fluido
-1
-1agua).
obtenido
por
la
modelacin
en
DFC
a
30
min
(fluido
lquido
(A)
Qa
=
1
Lmin
. (B)
1
1
1
1
Qa
=
10
Lmin
.
(C)
Qa
=
20
Lmin
.
en DFC a 30 min (fluido lquido agua). (A) Qa = -1
1 Lmin . (B) Qa = 10 Lmin-1 . (C) Qa = 20 Lmin .
Qa = 10 Lmin . (C) Qa = 20 Lmin .
As, por ejemplo de ser necesario un kLa de 2 h1 se
puede escoger una velocidad de agitacion y un flujo
de aire de 47 min1 y 20 Lmin1 respectivamente.
Es importante destacar que la correlacion de kLa
determinada solo es valida para los niveles de las
variables N y Qa estudiados experimentalmente.
3.4
Determinacion
del
coeficiente
volumetrico de transferencia de
oxgeno por simulacion
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DFC
kLa
(h1 )
Exp
kLa
(h1 )
Error
relativo
(%)
1
10
20
0.15
1.22
2.19
0.13
1.06
1.76
15.4%
14.9%
24.9%
3.5
www.rmiq.org
835
10
201
10
20
kL1,22
a (h ) kL1,06
a (h )
0,15
0,13
2,19
1,76
1,22
1,06
2,19
1,76
(%)
14,9%
15,4%
24,9%
14,9%
24,9%
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1 yde
Figura 13. de
Isovolumen
la fraccin
volumtrica
dela aire
( 0,01)
a un
de aire
Fig. 13. Isovolumen
la fraccionde
volum
etrica del
aire ( 0.01)
un flujo
de aire
de flujo
10 Lmin
a diferentes
-1
-1
-1
1
1
1
10
Lmin
y
a
diferentes
velocidades
de
agitacin:
A
(50
min
);
B
(40
min
)
y
C
(30
min-1),
velocidades de agitacion: A (50 min ); B (40 min ) y C (30 min ).
836
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Conclusiones
Los resultados del modelo matematico obtenido por la
Dinamica de Fluidos Computacional para predecir el
campo de velocidades en un sistema monofasico (fase
lquida) fueron comparados con otros informados en
la literatura observandose el mismo comportamiento
para ambos casos.
El modelo matematico propuesto predice un
tiempo de mezclado para la condicion de operacion
sin aireacion analizada igual al determinado
experimentalmente.
Se obtiene a traves de la modelacion matematica
y el uso de correlaciones informadas en la literatura
que el patron de flujo del sistema bifasico en las
condiciones de operacion del biorreactor industrial
para el cultivo de celulas animales esta caracterizado
por la inundacion del impelente.
El modelo matematico propuesto predice el
coeficiente volumetrico de transferencia de oxgeno
promedio con un 20% de diferencia respecto a los
valores determinados experimentalmente. A traves del
modelo matematico se predicen zonas del biorreactor
con una pobre transferencia de oxgeno que es
consecuente con el fenomeno de inundacion detectado
con los otros estudios realizados. Se obtiene por la
Nomenclatura
a
c
CL
C
C
D
db
di
DOL
DO
FlG
Fr
H(t)
kL
kLa
M
N
ni
OT R
P
Pg
Qa
r
Re
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t
T
Utip
Referencias
Calderbank, P. H. (1958). Physical rate processes in
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