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apoptosis y necrosis
Palabras Clave
Necrosis
Apoptosis
Mecanismos muerte celular
Linfocitos
Neutrfilos
Caspasas
s
s s s s
s
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Necrosis
Apoptosis
Cellular death mechanisms
Lymphocytes
Neutrophils
Caspasas
Key Words
s
s s s s
conditions, without loss of ATP levels, since energy is needed. After the death
order triggered by intra or extra-cell signals, intracellular proteases are activated
and these determine cellular death. The apoptic body or cell corpse is phagocyted
and degraded in the lysosomes of the phagocytic cells. During anesthetic-surgical
procedures, inhibition of the apoptosis of neutrophils and excessive apoptosis
of circulating peripheral lymphocytes have been detected; therefore, apoptosis
would appear to play a leading role in the postoperative changes identified by
the quantity and functions of leukocytes.
Mecanismos de morte celular: apoptose e necrose
s s s s
Introduccin
Palavras-chave
Necrose
Apoptose
Mecanismos morte celular
Linfcitos
Neutrfilos
Caspasas
Necrosis
La necrosis ocurre de manera aguda, por una forma no
fisiolgica, mediante una agresin que causa lesin en una
porcin importante del tejido, por ejemplo en el centro de
un tejido infartado, en un rea de isquemia o en la zona de
una lesin por toxinas.
El proceso de necrosis es desencadenado por toxinas,
hipoxia severa, agresin masiva y cualquier otra condicin que
genere cada de ATP. Esto crea cambios que, histolgicamente, estn representados por desorganizacin y lisis
del citoplasma, con dilatacin del retculo endoplsmico y las
mitocondrias, disolucin de la cromatina y prdida de la continuidad de la membrana citoplasmtica (proceso de oncosis).
El ADN es partido en fragmentos irregulares al azar. Debido
a la prdida de la integridad de la membrana celular, el contenido del citoplasma es volcado al espacio extracelular, producindose la atraccin de clulas inmunes en el rea, lo que
genera el proceso de inflamacin, en el cual los restos celulares son eliminados por fagocitos inmigrantes,
Apoptosis
En 1972 se descubri el proceso fisiolgico de apoptosis,
que fue dominio de estudios histolgicos hasta finales de
los aos 80. A principios de los 90 se caracterizaron los
mecanismos genticos y moleculares involucrados.
El proceso de apoptosis es desencadenado por condiciones fisiolgicas o patolgicas sin prdida de niveles de ATP,
debido a que el mismo requiere de energa para su realizacin. Existen dos vas principales que pueden llevar a la
apoptosis: induccin positiva o externa por un ligando unido a los receptores especficos de la membrana plasmtica
y la induccin negativa o interna que ocurre por prdida de
la actividad supresora de mecanismos intracelulares. La induccin positiva involucra ligandos que por una porcin
intracelular del receptor transducen al interior una seal; esa
porcin intracelular es llamada dominio de muerte. La induccin negativa se produce por prdida de la actividad
supresora a cargo de una familia de protenas especficas que
se hallan relacionadas con la mitocondria, liberndose desde la misma citocromo C que dispara la actividad de las
proteasas, enzimas encargadas de ejecutar la apoptosis.
Histolgicamente la apoptosis se caracteriza por la condensacin o encogimiento de los componentes del citoplasma,
con grandes brotes en la membrana celular y condensacin
de la cromatina que llevan a la formacin de cuerpos
apoptticos. Este fenmeno se produce en clulas aisladas
dentro de un tejido. El ADN es fragmentado en trozos de 185
pares de bases o mltiplos, mientras la membrana celular
permanece intacta. Luego el cuerpo apopttico es fagocitado
por clulas vecinas sin generar proceso inflamatorio, ya que
no se vuelca contenido intracelular al espacio extracelular. Las
diferencias principales entre los procesos de necrosis y
apoptosis estn resumidas en la Tabla I y Figura 1.
Clula Normal
Necrosis
Apoptosis
Cuerpos
Apoptticos
Fagocito
Fig. 1.- Morfologa de la necrosis y de la apoptosis. A la izquierda, el proceso de necrosis muestra el edema, la prdida de
integridad de la membrana celular y la salida de organelas intracelulares al espacio extracelular. A la derecha, el proceso de
apoptosis muestra integridad de la membrana despus de la muerte celular, condensacin de la cromatina e integridad de
la membrana y citoplasma en los cuerpos apoptticos, que contienen las organelas. Los cuerpos apoptticos luego son
fagocitados.
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TABLA I
Diferencias en las caracterstica de los procesos de necrosis y apoptosis
Caracterstica
Necrosis
Apoptosis
Estmulo
Requerimientos de energa
Histologa
En tamaos irregulares
Lisis
Fagocitos inmigrantes
Inflamacin
Proceso de Apoptosis
Estos procesos se estudiaron en forma muy precisa en un
gusano, el nematode Caenorhabditis elegans (C elegans),
que permiti determinar que la apoptosis consiste en cuatro pasos encadenados:
- consignas de muerte disparadas por seales intra o extra
celulares
- ejecucin de la clula por activacin de proteasas intracelulares
- fagocitosis del cuerpo apopttico o cadver celular por
otras clulas vecinas
- degradacin del cuerpo apopttico dentro de los lisosomas de las clulas fagocticas.
El proceso de apoptosis en sus cuatro pasos y los mecanismos genticos que gobiernan al mismo se han conservado inalterados a travs de la evolucin, razn por la cual
primeramente se describir el proceso de apoptosis en el C
elegans a manera de modelo ms simple y luego, en forma
ms precisa, el proceso de apoptosis en el hombre.
En el C elegans para la ejecucin de la apoptosis se requiere la presencia de tres protenas, que son producto de
tres genes diferentes. Seales especficas del tejido activan
la protena derivada del gen ced-4, que tiene capacidad para
activar a la protena ejecutora, una proteasa llamada caspasa
(cistena asparato proteasa) derivada del gen ced-3 y una
protena producto del gen ced-9 que tiene por funcin prevenir la apoptosis inhibiendo la activacin del gen ced-3
derivado del ced-4 (Figura 2).
Se trata de una relacin entre cantidades disponibles de
protenas reguladoras y supresoras de la apoptosis. La protena sintetizada por el gen ced-4 acta sobre el gen ced-3
cuando recibe la seal de consigna de muerte y, unindose
Seales
especficas de
compromiso de
muerte celular
&HG-
&HG
Caspasa
&HG-
Muerte celular
Familia Bcl-2
FHG
Cada del
factor de
crecimiento
Radicales libres
Activacin del
receptor de seales
de muerte
Consigna de Muerte
Dao ADN
Alteracin
metablica
Apaf-1 FHG
Activacin
Caspasa
(FHG
Muerte Celular
Procesamiento y
degradacin de
cuerpos apoptticos
Radiaciones
ionizantes
Fig. 3.- Proceso de la apoptosis en los mamferos. En el diagrama de apoptosis en mamferos se observa mayor diversidad
en el tipo de seales con capacidad para regular el compromiso de muerte, pero el esquema general de la maquinaria
apopttica se conserva. Los genes con funciones semejantes en el nematode C elegans se hallan entre parntesis.
Lneas llenas: indican activacin. Lneas discontinuas: indican inhibicin.
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)DV/
&
R
Q
V
L
J
Q
D
)DV/
Espacio extracelular
Membrana Plasmtica
Citoplasma
)$''GRPLQLRDVRFLDGRD
)DV
)DV: Receptor de
&DVSDVD
muerte
Cascada de
Caspasas
Fig. 4.- Vas de apoptosis: induccin positiva o externa por un ligando unido a los receptores especficos de la membrana plasmtica. La consigna de apoptosis la provee el ligando FasL, que se une al receptor de muerte Fas iniciando
la seal intracelular, que se trasmite por FADD (Fas associated death domain protein) a la caspasa 8, dando inicio a la
activacin de apoptosis.
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Fig. 5.- Vas de apoptosis: induccin negativa o interna que ocurre por prdida de la actividad supresora de los mecanismos intracelulares. La protena Apaf-1 se une a la protena mitocondrial citocromo C adquiriendo capacidad para
activar las protenas caspasas semejantes a ced-3.
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Fig. 6.- Vas de activacin de apoptosis: regulacin por Bcl de la induccin negativa o interna. La protena Apaf-1
podr unirse a la familia de protenas semejantes a ced-9, llamadas Bcl-2, las que pueden secuestrar a la Apaf-1 de la
unin con caspasa y suprimir el proceso de apoptosis. Alternativamente se puede activar la apoptosis por la
desfosforilacin de las protenas de regulacin de Bcl-2, que producen la unin Bcl-x o Bcl-2 con prdida de la fisiologa normal de la mitocondria y liberacin de citocromo C.
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Fig. 7.- Ejecucin de la clula por activacin de proteasas intracelulares. La activacin de las caspasasar su vez activa el clivaje de
protenas reguladoras y estructurales, llevando a la formacin de
cuerpos apoptticos.
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TABLA II
Enfermedades generadas por desregulacin de la apoptosis
Excesiva apoptosis
Deficiente apoptosis
aplicados, se ha observado que tienen capacidad para inducir alteraciones en el sistema inmunitario de defensa, con
consecuencias como aumento en la susceptibilidad a las
infecciones bacterianas, micticas y virales, aumento en la
respuesta inflamatoria y tambin en la tasa de metstasis
de tumores. Tales disfunciones del sistema inmune son
influenciadas por los profundos cambios endocrinos metablicos, presumiblemente por la afeccin directa del sistema inmune o en forma indirecta por la activacin del eje
hipotlamo hipofisiario y del sistema nervioso simptico.
Esta disfuncin tiene variada expresin en las poblaciones
celulares y sus funciones, destacndose la neutrofilia y
linfopenia desarrolladas en el postoperatorio.
Una cada en el nmero de linfocitos circulantes es usualmente observada durante el periodo postoperatorio. Varios
mecanismos han sido propuestos para explicar este cuadro.
La discusin est centrada en atribuir este fenmeno a la
redistribucin de linfocitos o a una inapropiada muerte por
apoptosis de los mismos o a ambos mecanismos en forma
conjunta. Si bien no se puede descartar la redistribucin de
linfocitos entre los rganos linfoideos y la herida quirrgica
como causa de linfopenia, varios estudios muestran que
existe un proceso de apoptosis acelerado de los linfocitos
en el postoperatorio inmediato que podra tener importantes implicancias en las defensas de los pacientes. Estudios
in vitro exponiendo linfocitos perifricos a isoflurano y
sevoflurano demostraron que esos anestsicos inducen
apoptosis de manera dosis y tiempo dependiente, por lo que
la linfopenia postoperatoria sera en parte causada por
apoptosis4 (ver artculo Influencias de estrs anestsico
quirrgico sobre la distribucin y accin de los leucocitos
pg. 389 ) Este fenmeno se ha observado principalmente
en procedimientos con trauma quirrgico extenso bajo anestesia general y se atribuye a una desregulacin del sistema
Fas y FasL, as como a la alteracin de la funcin de otros
factores apoptticos y antiapoptticos5-6. Al estudiar la influencia de la modificacin de los procesos de apoptosis en
la linfopenia que ocurre en el postoperatorio inmediato, se
comprob que en cirugas electivas del abdomen en pacientes a los que se les administraba isoflurano se generaron
perturbaciones intracelulares que resultaron en una tasa
mayor de apoptosis de los linfocitos asociada a la desregulacin del sistema Fas FasL5-6. Se ha hallado relacin entre el aumento de la apoptosis con tenores sanguneos elevados de IL107. Tambin se ha descrito la asociacin entre
la produccin de especies reactivas al oxgeno y la disrupcin
del potencial transmembrana de la mitocondria, con alteracin del metabolismo energtico de la misma, que podra
estar relacionado con aumento de la prdida de linfocitos
por elevada tasa de apoptosis8.
Con respecto a la neutrofilia, es considerada una respuesta
adecuada en el perodo inicial del postoperatorio, debido a
que los neutrfilos juegan un papel crucial en las defensas
del husped. Pero una funcin exagerada o prolongada de
los neutrfilos con infiltracin inapropiada de la herida y
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activacin de sus funciones, puede causar dao en los tejidos afectados y modificar la respuesta inflamatoria sistmica.
En este dao estaran involucrados la liberacin de metabolitos reactivos de oxgeno, metaloprotenas y citoquinas
proinflamatorias. La apoptosis modulara la respuesta
inflamatoria de los neutrfilos, y una demora o insuficiente
respuesta de apoptosis ha sido asociada a enfermedades
proinflamatorias tal como el sndrome de respuesta
inflamatoria sistmica9. Inicialmente la neutrofilia es atribuida a una liberacin aumentada de neutrfilos inmaduros
dentro de la circulacin, pero a las 24 horas del postoperatorio la apoptosis espontnea est marcadamente reducida an luego de procedimientos de ciruga electiva. Se sabe
que la interleucina IL6 contribuye en forma significativa a
la sobrevida de los neutrfilos10 . Este fenmeno de la inhibicin de la apoptosis de los neutrfilos en el postoperatorio
tiene relacin con la extensin de la lesin quirrgica y con
el tipo de anestesia administrada. Con respecto a la extensin de la ciruga se ha observado que en la ciruga electiva
de reemplazo total de cadera ocurre una inhibicin significativa de la tasa de apoptosis de los neutrfilos, que comienza a la hora de la incisin quirrgica y se mantiene al menos hasta 24 horas despus de la ciruga11, mientras que en
las cirugas que implican poca lesin de tejidos, como la
ciruga de cataratas, no se observan cambios en la tasa de
apoptosis de los neutrfilos9. La administracin de anestesia peridural en cirugas de cadera y rodilla tambin mostr
capacidad para inhibir la apoptosis de neutrfilos en el periodo postoperatorio11.
Al estudiar la influencia de los anestsicos voltiles sobre
los procesos de apoptosis en tejidos no vinculados al sistema inmunitario, se observ in vitro que drogas como el
halotano y el isoflurano producen una disminucin importante de la apoptosis inducida por beta adrenrgicos de los
cardiomiocitos ventriculares. Esta disminucin de la tasa de
apoptosis es principalmente mediada por la modulacin de
homeostasis del calcio intracelular y la inhibicin de la
caspasa-99.
En resumen, la ciruga y anestesia general interactan
induciendo apoptosis excesiva en los linfocitos perifricos
circulantes, contribuyendo a la linfopenia del periodo
postoperatorio. Asimismo, las evidencias sugieren que la
inhibicin de la apoptosis juega un rol principal en los cambios postoperatorios detectados en el nmero y las funciones de los neutrfilos. Sin embargo, el papel que juegan los
agentes anestsicos debe ser ms profundamente investigado a fin de determinar su influencia en la apoptosis y la
respuesta inmunitaria e inflamatoria.
Exposicin ocupacional crnica a anestsicos
inhalatorios y apoptosis
Una pregunta que surge respecto de la influencia de los
anestsicos voltiles sobre la apoptosis es si stos afectarn
Bibliografa
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