Immunologia Temari

CURSO DE INMUNOLOGA GENERAL: 13.
Inmunidad celular
14/3/15 8:53
CURSO DE INMUNOLOGA
GENERAL:
13. Inmunidad celular
Enrique Iez Pareja
Departamento de Microbiologa
Universidad de Granada
Espaa
NDICE:
13.1 INTRODUCCIN
13.2 INMUNIDAD MEDIATIZADA POR CLULAS FAGOCTICAS

13.2.1 Quimiotaxis
13.2.2 Unin del microorganismo al fagocito

13.2.3 Desencadenamiento de la captacin
13.2.4 Fagocitosis y mecanismos matadores

13.2.4.1 Mecanismos dependientes de oxgeno
13.2.4.2 Mecanismos independientes de oxgeno
13.2.5 Activacin de los macrfagos
13.3 PAPEL DE LAS CLULAS T COADYUVANTES (TH)

13.4 CITOTOXICIDAD MEDIADA POR CLULAS
13.4.1 Citotoxicidad directa especfica (mediatizada por linfocitos CTL)

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CURSO DE INMUNOLOGA GENERAL: 13. Inmunidad celular
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13.4.1.1 Activacin y diferenciacin de los linfocitos T citotxicos

13.4.1.2 Fase efectora: Ataque y destruccin de la clula diana
13.4.2 Citotoxicidad directa inespecfica mediada por clulas NK
13.4.3 Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC)
13.5 RESPUESTA DE HIPERSENSIBILIDAD DE TIPO RETARDADO

13.5.1 Fases de la hipersensibilidad de tipo retardado
13.5.1.1 Sensibilizacin
13.5.1.2 Fase efectora
13.5.2 Interaccin entre citoquinas y clulas en la DTH

13.5.3 Efectos de la hipersensibilidad retardada
13.1
INTRODUCCIN
Actualmente se tiende a considerar como "inmunidad mediada por clulas"

cualquier respuesta contra microorganismos o tumores en la que los anticuerpos
jueguen un papel subordinado o secundario. Pero a estas alturas ya sabemos que
en Inmunologa es difcil "poner puertas al campo":
En la respuesta inmune humoral especfica hay que activar clulas al principio
de dicha respuesta.
En muchas respuestas celulares los anticuerpos juegan papeles esenciales
como "puentes" entre clulas (lo veremos con la citotoxicidad celular
dependiente de anticuerpos, ADCC).
Adems, cualquier respuesta celular va acompaada en paralelo de produccin
de anticuerpos, que a su vez pueden modificar las respuestas celulares de
varias maneras: p. ej., la formacin de complejos Ag-Ac provoca la activacin
del complemento, en la que se liberan pptidos que funcionan como factores
quimiotcticos que inducen la acumulacin de mayor nmero de clulas
inmunes y el aumento de la respuesta inflamatoria.
Por otro lado, no hay que suponer que todas las respuestas celulares dependen de
linfocitos T: de hecho las primeras lneas defensivas contra microorganismos son
inespecficas, y descansan en la identificacin de componentes microbianos
comunes por parte de clulas del sistema de inmunidad natural (macrfagos,
granulocitos neutrfilos, etc.).
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Una de las posibles clasificaciones de la inmunidad mediada por clulas sera la

siguiente:
1. Reacciones dependientes de fagocitos del sistema natural:
fagocitosis
produccin de citoquinas
2. El papel central de las clulas TH en la determinacin del tipo de mecanismo
efector puesto en marcha.
3. La citototoxicidad directa que conduce a la lisis de la clula diana enferma es
realizada por varios tipos celulares:
dentro del sistema especfico: linfocitos T citotxicos (matadores),
que se denominan linfocitos T citolticos (CTL) en su fase efectora;
dentro del sistema natural: clulas agresoras naturales (NK) y
macrfagos.
Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC)
Clulas T CD4+ que median reacciones de hipersensibilidad de tipo
retardado, que en su estado efector se denominan TDTH.
13.2 INMUNIDAD MEDIATIZADA POR

CLULAS FAGOCTICAS
El alumno encontrar provechoso repasar las caractersticas de las clulas mieloides
fagocticas, tratadas en el tema 2. Aqu profundizaremos en estas clulas, sobre
todo en lo que atae a los mecanismos de destruccin intracelular del patgeno una
vez que lo han engullido.
La actuacin de estas clulas la podemos dividir a efectos pedaggicos, en varias
fases:
1.
2.
3.
4.
Quimiotaxis
unin del microorganismo al fagocito
desencadenamiento de la captacin del microorganismo
fagocitosis y mecanismos matadores.
13.2.1 Quimiotaxis
La atraccin de los fagocitos del sistema de inmunidad natural hacia el foco de
infeccin se puede deber a varios factores:
por sustancias de origen directamente microbiano. Tal es el caso de cortos
pptidos derivados de los extremos amino-terminales de protenas bacterianas
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(p. ej., el formil-Met-Leu-Phe es quimiotctico para los leucocitos, que llevan

receptores capaces de reconocerlo).
Ciertos componentes microbianos (como la endotoxina de bacterias Gramnegativas) activan la ruta alternativa del complemento, que libera los pptidos
C3a y C5a, que son muy quimiotcticos sobre fagocitos.
13.2.2 Unin del microorganismo al fagocito

Esta fase es importante, ya que de su xito depende la ocurrencia de la
internalizacin ulterior y el desencadenamiento de los mecanismos matadores. La
unin inespecfica entre bacteria y fagocito se realiza por interaccin entre
molculas de superficie del microorganismo y receptores del leucocito:
molcula
bacteriana
receptor del
fagocito
lectinas
Oligosacridos de
superficie
oligosacridos de
superficie
Lectinas
b -glucanos
CR3 y LFA-1
lpido A
(endotoxina)
CR3 y LFA-1
Podemos hacer una tabla parecida, pero en la columna de la bacteria ahora vamos a
considerar molculas del hospedador que recubren al microorganismo
(opsonizacin), y que a su vez sirven para que sean reconocidas por receptores de
leucocitos:
comp. opsonizantes
del
hospedador
unidos a la bacteria
Receptor del fagocito
C3b
CR1 (*)
inmunoglobulinas
FcR (*)
MBP
C1qR
(*) Los receptores CR1 y FcR estn entrelazados entre s por medio del citoesqueleto, lo que explica en parte su
accin sinrgica
Los receptores inespecficos de tipo lectina disminuyen en el macrfago activado (en presencia de IFN-g), mientras
que aumentan los CR1 y FcR. Ello permite a las clulas Th indicar a los macrfagos que entran al tejido que fabriquen
ms molculas capaces de citoadherencia.
13.2.3 Desencadenamiento de la captacin

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La captacin del microorganismo se ve facilitada si est recubierto por el

componente C3b del complemento y/o por anticuerpos: esta opsonizacin permite
potenciar poderosamente el mecanismo amebiano del fagocito.
13.2.4 Fagocitosis y mecanismos matadores

En el captulo 2 ya nos referimos a la fagocitosis, por lo que no volveremos a insistir
aqu en ella, sino que nos centraremos en lo que ocurre cuando el microorganismo,
englobado en el fagosoma, recibe la descarga de los grnulos (lisosomas) del
fagocito. El contenido preformado de estos grnulos, junto con sustancias
producidas de novo, constituyen una batera de mecanismos encaminados a la
muerte del patgeno. Estos mecanismos se pueden clasificar en dos grandes tipos:
dependientes e independientes de oxgeno.
13.2.4.1 Mecanismos dependientes de oxgeno

Los podemos estudiar a su vez bajo dos categoras: los que se basan en
intermediarios reactivos de oxgeno, y los intermediarios reactivos de nitrgeno.
1. Intermediarios reactivos de oxgeno (ROI). La unin de partculas a los
receptores de la membrana del fagosoma del macrfago provoca el
denominado estallido respiratorio (por activacin de la ruta de la hexosa
monofosfato), que produce mucho NADH.
a. Antes de que el lisosoma se fusione con el fagosoma, en ste tiene lugar
una reduccin de oxgeno molecular (O2) catalizada por la NADH-oxidasa
de la membrana del fagosoma; el anin superxido resultante (O-2) es
txico por s mismo, pero a su vez da lugar a otros radicales txicos de
vida corta, como el perxido de hidrgeno (H2O2), el radical hidroxilo
(OH) y el oxgeno singlete (O12). El macrfago se protege de los ROI que
puedan salir del fagosoma por medio de una cadena de reacciones redox
en que participa glutation.
b. Una vez que el lisosoma se fusiona con el fagosoma, aqul libera la
mieloperoxidasa, que acta sobre los perxidos en presencia de haluros
(I- y Cl-), para producir compuestos halogenados (hipohaluros) muy
txicos y de vida larga: cido hipocloroso (ClOH), e hipoiodoso (IOH).
2. Intermediarios reactivos de nitrgeno (NRI)
a. La enzima NOS (xido ntrico-sintetasa) combina el oxgeno molecular con
el nitrgeno guanidino de la L-arginina, para generar xido ntrico (NO),
que es txico para bacterias y clulas tumorales.
Los macrfagos de ratn (pero no los humanos) necesitan para activar
esta ruta a un nivel ptimo dos seales: interfern gamma (IFN-g ) para
activar la enzima NOS, y factor de necrosis tumoral (TNF) (ver el apartado
13.2.5).
13.2.4.2 Mecanismos independientes de oxgeno

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Estos mecanismos dependen

acumuladas en los grnulos:
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de
protenas
antimicrobianas
preformadas
1. Protenas catinicas, con actividades de tipo antibitico:

a. defensinas (en macrfagos de conejo y en PMN neutrfilos humanos). Son
pptidos catinicos , de unos 30 aminocidos, ricos en cys y arg. Forman
canales permeables a los iones en las bicapas lipdicas de los
microrganismos. Actan antes de que tenga lugar la acidificacin del
fagolisosoma.
b. Catepsina G
c. Azurozidina
2. Lisozima, que acta rompiendo el peptidoglucano de bacterias (sobre todo de
Gram-negativas).
3. Lactoferrina (producida por neutrfilos): secuestra hierro, indispensable para
las bacterias.
13.2.5 Activacin de los macrfagos

Los macrfagos en reposo pueden matar, desde luego, pero sus capacidades
microbicidas pueden mejorar por medio de su activacin. Esta activacin puede
provocarse por:
1. productos microbianos que causan
a. activacin directa de monocitos y macrfagos
b. activacin indirecta: los macrfagos sin activar y las clulas NK liberan
citoquinas que a su vez activan a los macrfagos.
2. Ulterior activacin por citoquinas producidas por linfocitos TH, sobre todo por
IFN-g . Provocan atraccin quimiotctica de fagocitos y/o activacin de los
mecanismos dependientes e independientes de oxgeno.
En aos recientes se est viendo que la activacin del macrfago es algo ms
complejo de lo que se crea. La idea clave que ha surgido es que el macrfago
despliega unas u otras de sus funciones efectoras dependiendo de la combinacin
particular de estmulos qumicos que reciba, a saber, citoquinas y molculas
inflamatorias.
La activacin de los macrfagos de ratn se puede lograr mediante el IFN-g
secretado por el TH, o por la endotoxina (lpido A) de las bacterias gram-negativas.
Pero a su vez, los macrfagos activados secretan TNF-a , que al actuar sobre
macrfagos ya activados provocan una mayor potenciacin de sus capacidades al
activarse la ruta dependiente del xido ntrico.
En humanos, el macrfago, en presencia de IFN-gamma,
activa la 1-alfa
hidroxilasa, que convierte el 15-hidroxicolecalciferol circulante en 1,25dihidroxicolecalciferol (calcitriol o vitamina D3). A su vez, este calcitriol activa ms
al macrfago al tiempo que inhibe los linfocitos Th1. Esta respuesta en humanos
puede ser parte de la razn de que cuando falla la eliminacin del parsito haya un
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cambio desde TH1 a TH2, con lo que se hace crnica la respuesta celular. La
produccin de calcitriol en el caso de tuberculosis o sarcoidiosis puede llegar a
circulacin perifrica, originando una afeccin de hipercalcemia.
Llegados a este punto, quiz sea bueno llamar la atencin sobre las diferentes fases
de la respuesta inmune en las que participan los macrfagos:
1. En la defensa inicial frente al patgeno: el macrfago sin activar tiene su
capacidad fagoctica basal. Al mismo tiempo secreta citoquinas que ayudan a
otras clulas (p. ej., recordar la IL-1 que participa en la activacin de linfocitos
B).
2. En la presentacin del antgeno: acta como clula presentadora para linfocitos
TH, que a su vez se activan secretando citoquinas.
3. En la fase efectora el macrfago se activa por citoquinas (como el IFN-g
secretado por linfocitos TH), lo cual va a potenciar sus actividades
antimicrobianas, antitumorales y de secrecin de citoquinas.
Las citoquinas secretadas por macrfagos en respuesta a componentes microbianos
cumplen importantes papeles: la IL-12 y el TNF-a , en sinergia con otros
mediadores, mejoran la actividad antimicrobiana inespecfica:
el TNF-a mejora la capacidad microbicida de PMN neutrfilos y de los propios
macrfagos;
el TNF-a junto con la IL-12 provocan que las clulas NK liberen IFN-g, el cual
aumenta la actividad de los macrfagos;
el TNF-a induce cambios en las superficies de clulas endoteliales y de
fagocitos, que pueden interaccionar de modo que los fagocitos se extravasan
para acceder al lugar de la inflamacin, donde se localiza el foco de infeccin.
13.3 PAPEL DE LAS CLULAS T

COADYUVANTES (TH)
Las clulas TH desempean papeles esenciales en la inmunidad celular:
1. determinan la especificidad de la respuesta inmune (qu antgenos y qu
epitopos son reconocidos);
2. intervienen en la seleccin de los mecanismos efectores destinados a eliminar
al patgeno;
3. ayudan a la proliferacin de las clulas efectoras adecuadas;
4. mejoran las funciones de fagocitos y otras clulas efectoras.
El primero de estos papeles citados ya ha sido abordado en otro captulo: la
interaccin del conjunto de receptores TCR-CD3-CD4 con los epitopos en el MHC-II
de clulas presentadoras condiciona la especificidad de la respuesta.
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Pero el sistema inmune ha de efectuar una segunda decisin esencial: qu

mecanismos efectores se ponen en marcha, que sean los adecuados para la
naturaleza de cada infeccin en particular. Dentro de la inmunidad mediada por
clulas, existen varios mecanismos:
1. citotoxicidad directa especfica, por medio de linfocitos T citotxicos CD8+
(CTL);
2. degranulacin de eosinfilos y mastocitos una vez que han contactado con la
clula a eliminar a travs de anticuerpos, que sirven de "puentes" moleculares
(ADCC);
3. activacin de macrfagos y reaccin de hipersensibilidad de tipo retardado.
Entonces, cmo se determina el tipo de accin para cada tipo de situacin? La
respuesta estriba en buena parte en el patrn local de citoquinas producidas al
inicio de la respuesta inmune, desencadenado ante cada tipo de patgeno, as como
en la concentracin local de metabolitos esteroideos y de vitamina D3 en el tejido
linfoide: estos factores determinan que predomine uno de dos subtipos de clulas
TH, lo que finalmente condicionar el desencadenamiento de uno u otro de los
mecanismos efectores.
As pues, los linfocitos TH presentan dos subpoblaciones, denominadas TH1 y TH2.
Dichas subpoblaciones se desarrollan a travs de una ruta que se bifurca:
TH
estimulacin estimulacin memoria
vrgenes
inicial
crnica
largo
plazo
THP
TH0
TH1
THM
TH2
Cada uno de estos tipos de linfocitos TH secreta un patrn caracterstico de

citoquinas:
THP
TH0
TH1
TH2
THM
...
IFN-g
IFN-g
...
...
IL-2
IL-2
IL-2
...
IL-2
...
IL-4
IL-4
...
...
IL-5
...
IL-5
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..
IL-6
IL-10
IL-10
..
IL-3
IL-3
...
...
...
...
TNF-a TNF-a
GMCSF
GMCSF
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(En la tabla se han resaltado en cursiva sobre color amarillo las citoquinas caractersticas de TH1 y TH2, que no son
comunes a ambas subpoblaciones).
Veamos pues, en qu se diferencian funcionalmente los lincitos de ambas

subpoblaciones:
Las clulas TH1 tienden a activar los macrfagos, y responden bien a
Las clulas TH2 tienden a incrementar la produccin de mastocitos y
eosinfilos, y mejoran la produccin de ciertos isotipos de inmunoglobulinas,
incluyendo la IgE. Las clulas TH2 responden bien a antgenos presentados por
linfocitos B.
Una vez establecidos, cada uno de estos patrones de respuesta es capaz de inhibir o
suprimir al otro, debido a la accin de ciertas citoquinas de cada tipo de clula TH:
Esta diferenciacin de TH1 y TH2 se descubri en el ratn, pero existen cada vez
ms pruebas de que igualmente existe en la especie humana. A los TH1 se les suele
llamar linfocitos T "inflamatorios", y a los TH2, "coadyuvantes".
Un ejemplo clnico de este papel particular de los dos tipos de clulas TH lo tenemos en
las dos clases extremas de lepra:
en la lepra tuberculoide se inducen sobre todo linfocitos

TH1, por lo que hay una buena activacin de macrfagos,
lo cual redunda en que se detectan pocas bacterias
intracelulares.
En cambio, en la lepra lepromatosa se induce la
subpoblacin TH2, que colabora eficazmente en la
respuesta especfica humoral; pero los anticuerpos
evidentemente no pueden acceder al interior celular, por lo
que existen abundantes bacilos en el interior de los
macrfagos; stos, al no poder ser activados eficazmente,
no pueden eliminar al parsito. Hay gran destruccin de
tejidos.
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13.4 CITOTOXICIDAD MEDIADA POR

CLULAS
En este apartado vamos a tratar aquellos mecanismos efectores que dependen de la
accin de clulas del sistema inmune capaces de matar/lisar clulas enfermas
(clulas diana), a las que se unen de modo directo o indirecto:
1. Citotoxicidad directa especfica: es la llevada a cabo por los linfocitos
citotxicos (TC), que estn restringidos por el haplotipo propio MHC-I, y que
poseen CD8+ como molculas correceptoras. (aunque algunas son CD4+ y
estn restringididas por MHC-II)
2. Citotoxicidad directa inespecfica: las clulas agresoras naturales (NK)
reconocen determinantes inespecficos de clulas tumorales o infectadas con
ciertos virus.
3. Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos: es un mecanismo indirecto
por el que clulas matadoras como NK, eosinfilos, etc., interaccionan con el
antgeno por medio de puentes de anticuerpos previamente unidos a
receptores para Fc de la clula.
13.4.1 Citotoxicidad directa especfica (mediatizada por

linfocitos CTL)
El papel ms importante de este mecanismo es el de eliminar clulas propias
infectadas por virus. Como veremos, los linfocitos TC en reposo, al activarse
apropiadamente, terminan diferencindose a los llamados linfocitos T citolticos
(CTL), que son los efectores de la inmunidad celular especfica.
El 90% de estos linfocitos son CD8+, y estn restringidos por el MHC-I propio. Son
capaces de reconocer a la mayora de clulas nucleadas. Pero existe un 10% de
linfocitos TC que fenotpicamente son CD4+ y estn restringidos por MHC-II.
La actuacin de estas clulas la podemos considerar en dos fases:
1. Activacin y diferenciacin de los precursores TC hasta CTL
2. Fase efectora: destruccin de la clula diana, a su vez diferenciable en:
adhesin y formacin del conjugado entre el CTL y la clula diana
golpe letal
disociacin del CTL
destruccin de la clula diana.
13.4.1.1
Activacin y diferenciacin de los linfocitos T citotxicos
Los linfocitos Tc vrgenes parece que se activan solamente en los rganos linfoides
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secundarios, nicos entornos en los que reciben las seales necesarias. Requieren
en realidad 3 seales:
1. La seal especfica suministrada por la interaccin entre su complejo TCRCD3-CD8 con el MHC-I de una clula presentadora profesional infectada (p. ej.,
una clula dendrtica interdigitante)
2. La seal coestimulatoria suministrada por la misma clula (unin entre B7 y
CD28).
3. La interleucina IL-2.
Parece ser que el Tc expresa tras la interaccin inicial una pequea cantidad de IL-2,
pero en el caso de estos Tc vrgenes no suele ser suficiente para activarlos. La
aportacin clave de IL-2 procede de clulas Th1 cercanas. De hecho, se piensa que
tanto el Th como el Tc vrgenes se activan simultneamente al unirse a la misma
clula presentadora (no olvidemos que las APCs exhiben MHC-I y MHC-II).
En cambio, las clulas Tc de memoria tienen menos requerimientos para su
activacin. De hecho, como ya sabemos, al tener molculas de adhesin celular
diferentes a los correspondientes Tc vrgenes, pueden encontrarse el antgeno
(epitopo peptdico en contexto MHC-I) en tejidos extralinfoides.
1. No requieren obligatoriamente la seal coestimulatoria.
2. No requieren obligatoriamente la ayuda de Th, ya que al unirse de modo
especfico a una clula propia infectada que le suministre el pptido adecuado,
provoca que el Tc produzca no slo receptores de IL-2, sino niveles adecuados
de IL-2 capaces de auto-activarlas.
De esta manera, se provoca la proliferacin y diferenciacin del linfocito en
reposo (virgen o de memoria) hasta que se convierte en linfocito T citoltico (CTL).
Este CTL se caracteriza por poseer algo ms de citoplasma que el TC, y sobre todo
por poseer grnulos densos a los electrones, rodeados de unidad de membrana
(llamados a veces granulosomas) y un aparato de Golgi.
13.4.1.2 Fase efectora: Ataque y destruccin de la clula diana

1) Formacin del conjugado
Tras el reconocimiento especfico, se produce una interaccin de gran avidez entre
molculas de LFA-1 del CTL y molculas de ICAM-1 de la clula diana. Esta unin
dura unos 5-10 minutos, durante los cuales las seales de la unin intercelular se
transducen al interior del CTL por medio de cascadas de proten-quinasas y protenfosfatasas, que conducen a la activacin de una serie de funciones del CTL. Se dice
entonces que el linfocito queda programado para la lisis.
2) Golpe letal
El citoesqueleto del CTL se reorganiza, de modo que tanto el aparato de Golgi como
los granulosomas se sitan en el polo celular que queda en contacto con la clula
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diana. Entonces, los grnulos se fusionan con la membrana citoplsmica,

producindose la exocitosis de su contenido al estrecho espacio intercelular ("beso
de la muerte").
3) Disociacin del CTL
Antes de que se produzca la lisis de la clula diana, el CTL se separa,
probablemente ayudado por el hecho de que la LFA-1 vuelve al estado de baja
afinidad.
4) Destruccin de la clula diana
Parece ser que la destruccin de la clula diana puede ocurrir por varios
mecanismos, predominando uno u otro en funcin de la naturaleza de la superficie
de la clula diana, y del grado de activacin que haya alcanzado el linfocito CTL.
Monmeros de perforina contenida en los granulosomas llegan a la
membrana de la clula diana, y en presencia de Ca++ se polimerizan para
formar cilindros huecos de poliperforina (con unas 20 unidades), que
atraviesan la bicapa lipdica. De este modo se forma un canal (con un dimetro
de 5-20 nm) que es permeable a iones, y que puede provocar la lisis osmtica
de la clula diana (aunque su papel principal es servir como canal para dejar
pasar a otros componentes de los grnulos).
Pero no siempre el efecto de la poliperforina es la lisis. En otros casos parece
que el papel de los canales es el de permitir la entrada de otras sustancias del
granulosoma que inducen la apoptosis de la clula diana. De hecho se ha
visto que pueden entrar fragmentinas (granzimas) que inducen la
fragmentacin de los cromosomas en mltiplos de nuclesoma.
Veamos algunas ideas actuales sobre el mecanismo de apoptosis desencadenado
por los linfocitos Tc.
Antes que nada, hay que aclarar el papel de la granzima B. Como ya sabemos, se
trata de una fragmentina, que induce fragmentacin del ADN en mltiplos de
nucleosomas. Ahora bien, este efecto es indirecto: las fragmentinas no son
DNAasas, sino proteasas. La Granzima B tiene una actividad parecida a la llamada
enzima convertidora de interleucina 1- (ICE).
La ICE es una proteasa endgena con un papel central en la ruta endgena de la
apoptosis. Dicha ruta se puede activar por una serie de estmulos externos (carencia de
factores de crecimiento, ciertos virus, dao al ADN), que transforman la ICE inactiva a
forma activa. Una vez activada, la ICE rompe proteolticamente un sustrato an
desconocido, que induce las ADNasas, que fragmentarn el ADN.
Pues bien, se piensa que la granzima B secretada por el CTL (y que entra a la clula
diana a travs de los canales de perforina) activa a la ICE o bien la sustituye para
desencadenar el mecanismo de esta ruta apoptsica endgena.
Pero este no es el nico mecanismo inductor de apoptosis por parte de los CTLs (de
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hecho, algunos clones de CTLs carecen de perforina y de granzimas, y sin embargo

inducen muerte celular de la clula diana). Podemos encontrar otro mecanismo
dependiente de la interaccin entre el llamado ligando Fas del CTL y el receptor
Fas de la clula diana.
El receptor Fas (tambin llamado APO-1) es una protena de membrana que
pertenece a la llamada familia TNF de receptores de citoquinas.
Por su lado, el ligando de Fas del CTL es una protena de membrana que
exhibe homologas de secuencia con TNF, y se une al Fas.
La unin entre el ligando de Fas con el Fas de la clula infectada o enferma induce
en sta una seal que dispara la ruta endgena de apoptosis, con la consiguiente
activacin de la ICE y subsiguiente fragmentacin del ADN.
Las vesculas del CTL pueden contener TNF-a y TNF-b (=linfotoxina), que junto
con el IFN-g producido por TC o por otras clulas, desencadena efectos citotxicos
que tardan ms tiempo (>3-4 horas) que los anteriores. Se desconoce el
mecanismo, pero parece que igualmente inducen apoptosis.
Cmo se protege el CTL de sus propios mecanismos matadores? Por lo pronto, el
condroitn sulfato (proteoglucano) del CTL se puede unir a la perforina,
inactivndola. Pero puede que haya otros mecanismos: por ejemplo, la hiptesis de
Peters dice que la perforina sale del granulosoma dentro de pequeas vesculas
igualmente membranosas; la membrana de estas sub-vesculas contendran
complejos TCR-CD3-CD8, que encaminaran a las pequeas vesculas hacia la clula
diana, pero no al CTL.
13.4.2 Citotoxicidad directa inespecfica mediada por

clulas NK
Recordemos que las clulas NK son un tipo de linfocitos granulares grandes (de
hecho NK es casi sinnimo de LGL), que suponen un 5% de las clulas linfoides en
sangre, y que carecen de los marcadores de linfocitos T y B. Se consideran como
linfocitos "inespecficos", pertenecientes al sistema de inmunidad natural.
El mecanismo citotxico de las clulas NK es parecido al de los linfocitos citolticos
(CTL), pero a diferencia de ellos, carecen de especificidad y de memoria, y no estn
restringidos por el MHC clsico.
Poseen un papel importante en los primeros das de una infeccin virsica, al
eliminar clulas en las que el virus se est multiplicando. Constituyen pues un
mecanismo efector celular temprano, antes de que lleguen los linfocitos TC, y
especialmente preparado frente a ciertos virus que usan la estrategia de inducir un
descenso del nivel de MHC-I
Recientemente se ha propuesto un modelo de dos receptores para explicar cmo
reconocen estas clulas inespecficas a las clulas infectadas por virus o tumorales.
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Se piensa que las NK reciben seales de dos receptores de modo que distinguen
entre clulas sanas y enfermas.
Segn este modelo, el receptor NKR-P1 se une a oligosacridos de glucoprotenas
de superficie de la clula enferma, procedentes de glucosilaciones anmalas. En
principio, esta seal le indica a la NK que debe prepararse para matar a la clula
con la que ha contactado, pero para ello debe de ocurrir simultneamente una
ausencia de seal procedente de otro receptor, el Ly-49.
El receptor Ly-49 de la clula NK se une a ciertos alelos de molculas MHC-I.
Cuando una clula NK se encuentra ante una clula normal, aunque reciba la seal
de NKR-P1, no la mata, ya que la interaccin entre Ly-49 y las MHC-I enva una
seal a la NK para que detenga su mecanismo matador. En cambio, muchas clulas
enfermas (por virus o tumorales) presentan un bajo nivel de MHC-I, por lo que el
mecanismo dependiente de NKR-P1 no se ve frenado.
La actividad matadora de NK se activa por IFN-a e IFN-b (liberado por muchas
clulas enfermas al inicio de la infeccin), y por IL-12 (producido por macrfagos).
A su vez, la IL-12 y el TNF-a (tambin del macrfago) provocan que la NK secrete
grandes cantidades de IFN-g , con lo que se mantienen a raya ciertos patgenos
intracelulares hasta que se activen las clulas T. Como se ve, un nuevo rasgo que
parece indicarnos de nuevo el carcter de lnea defensiva temprana que intepretan
estas clulas. De hecho, rara vez las clulas NK eliminan efectivamente el virus,
pero lo mantienen a raya hasta que llegan las clulas TC.
13.4.3 Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

(ADCC)
Existen varios tipos de clulas potencialmente citotxicas que poseen receptores
para Fc de anticuerpos, y que pueden por lo tanto participar en la destruccin de
clulas diana (enfermas) o de helmintos recubiertos en ambos casos por
anticuerpos. Los acontecimientos suelen tener lugar en las siguientes fases:
1. formacin de inmunocomplejos (es decir, la clula enferma o el helminto se
recubre de anticuerpos);
2. una clula agresora adecuada (p. ej., la NK) interacciona con la clula enferma
o el parsito a travs de los anticuerpos, que se engarzan con el receptor para
Fc de la clula agresora;
3. finalmente, dicha clula agresora libera por exocitosis el contenido de sus
grnulos, y/o secreta productos txicos, que tienden a matar a la clula
enferma o parsito.
De este modo, clulas que son propiamente del sistema inmune natural, y por lo
tanto son inespecficas, pueden llegar a destruir especficamente mediante el puente
de anticuerpos. De hecho, actan como clulas efectoras finales del sistema
humoral especfico (es decir, pueden llegar a ser los "brazos armados" o "verdugos"
en una respuesta que se inici con la secrecin de anticuerpos).
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Las clulas NK, monocitos y PMN neutrfilos poseen el receptor Fcg RIII
(=CD16), de baja afinidad, que reconoce las subclases IgG1 e IgG3.
Los eosinfilos posen Fce R-I y Fce R-II, estando especializados en destruir helmintos
(p. ej., las esquistosmulas, que son las larvas de Schistosoma).
13.5 RESPUESTA DE HIPERSENSIBILIDAD

DE TIPO RETARDADO
La hipersensibilidad de tipo retardado (DTH) es una reaccin inflamatoria localizada
que se induce por citoquinas secretadas por ciertas subpoblaciones de linfocitos TH
(concretamente, de TH1) activados previamente por contacto con ciertos tipos de
antgenos, y que se caracteriza por el reclutamiento al foco infeccioso de grandes
cantidades de clulas inflamatorias, sobre todo de macrfagos.
Se llama retardada porque, al contrario que la inmediata, tarda 2 o 3 das en manifestarse.
La palabra hipersensibilidad alude en principio a efectos negativos sobre el propio hospedador, pero en
muchos casos el efecto consiste en pequeos daos tisulares, siendo en general la respuesta
beneficiosa, puesto que va encaminada a destruir a ciertos patgenos intracelulares.
13.5.1 Fases de la hipersensibilidad de tipo retardado

En la respuesta hipersensible de tipo retardado podemos distinguir una fase inicial
de sensibilizacin en la que se produce el contacto inicial con el estmulo antignico,
y que no presenta sntomas, y una fase efectora, dependiente de un contacto
secundario con el antgeno, en la que se manifiestan tales sntomas y que es la
tendente a eliminar al patgeno.
13.5.1.1 Sensibilizacin
La fase de sensibilizacin dura de una a dos semanas, tiempo durante el cual los
linfocitos TH se activan y expanden clonalmente tras el reconocimiento del antgeno
presentado por clulas presentadoras (APCs). Dichas clulas presentadoras pueden
ser:
clulas de Langerhans de la piel, que transportan el antgeno desde la
epidermis hasta los ganglios linfticos regionales, donde lo muestran a los
linfocitos TH;
macrfagos;
(en humanos y otras especies) clulas del endotelio vascular.
Al final de esta fase se tiene pues una poblacin expandida de linfocitos T CD4+ de
memoria, que recirculan constantemente.
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13.5.1.2 Fase efectora

Esta fase ocurre en tejido extralinfoide, y es la reaccin de hipersensibilidad en
sentido estricto, detectndose sus sntomas a las 24 horas del contacto secundario
con el antgeno que provoc la sensibilizacin inicial, pero alcanza su apogeo a las
48-72 horas. En esta fase sale fibringeno al tejido, y se convierte en fibrina, que
junto con la acumulacin de linfocitos T y de macrfagos hace que el tejido se
hinche y se vuelva duro (esto es la base de los sntomas de induracin y edema) La
podemos subdividir en tres etapas: desencadenamiento, inflamacin y resolucin.
En el desencadenamiento el linfocito T activado (que ahora denominaremos
como TDTH), ante el contacto secundario con el antgeno presentado por una
APC, secreta ciertas citoquinas, cuyas acciones dan paso a la reaccin de
inflamacin.
La inflamacin se produce cuando las citoquinas secretadas reclutan y
activan a macrfagos y otras clulas inflamatorias hacia el sitio de infeccin,
ponindose en marcha una compleja serie de interacciones entre clulas
inespecficas del sistema inmunitario y citoquinas, con amplificacin de la
respuesta. Todo ello va encaminado a destruir al agente patgeno intracelular.
La resolucin se produce porque los macrfagos activados aumentan su
capacidad de eliminacin del patgeno. Estos macrfagos son la principal
clula efectora de la hipersensibilidad retardada, pudiendo representar el 90%
de la poblacin celular infiltrada.
Como se ve, esta respuesta tiene un claro valor adaptativo en la eliminacin de
ciertos parsitos intracelulares, pero cuando el estmulo es demasiado persistente,
la DTH se vuelve destructiva para el hospedador. Este aspecto inmunopatolgico
se manifiesta en la llamada reaccin granulomatosa: los macrfagos, con los
parsitos sin eliminar en su interior, se adhieren unos a otros, adquiriendo
morfologas epitelioides; posteriormente estas clulas epitelioides se pueden
fusionar entre s, generando clulas gigantes multinucleadas, que pueden llegar a
desplazar al tejido normal, con lo que se forman ndulos o tubrculos, que
pueden conducir a necrosis del tejido.
13.5.2
Interaccin entre citoquinas y clulas en la DTH
En este epgrafe vamos a ampliar el aspecto molecular y celular de la respuesta de

hipersensibilidad retardada, resaltando cmo las distintas citoquinas actan sobre
distintos tipos celulares, responsables de diversos aspectos de esta respuesta.
La IL-2 del linfocito TDTH funciona de modo autocrino, permitiendo la
expansin clonal, con lo que aumenta el nmero de estas clulas, que siguen
produciendo ms citoquinas. Conforme avanza la respuesta, la IL-2 tambin
ejerce un efecto paracrino, estimulando a otros clones de linfocitos TDTH.
La IL-3 y el GM-CSF inducen hematopoyesis del linaje granulocito-monoctico
en la mdula sea. Obviamente ello acarrea que mayores cantidades de PMN y
macrfagos puedan pasar al foco de infeccin.
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El IFN-g el TNF-b de las clulas T, as como el TNF-a y la IL-1 de los

macrfagos actan sobre las clulas endotelilales vasculares cercanas al foco
de infeccin, con los siguientes efectos:
aumento de la expresin de molculas de adhesin (ICAM,
ELAM, VCAM);
cambios de forma, tendentes a que las clulas endoteliales se
separen entre s, dejando paso para la extravasacin de
leucocitos;
las clulas endoteliales estimuladas secretan IL-8 y otros
factores quimiotcticos que atraen a monocitos circulantes
(quimiocinas).
Las consecuencias son que los PMN neutrfilos (primeros
leucocitos en llegar) y los monocitos circulantes se adhieren a
las clulas endoteliales de las vnulas postcapilares, pasan por
diapdesis y entran al tejido infectado. La entrada de los
monocitos lleva consigo su diferenciacin a macrfagos.
Los macrfagos son atrados y activados en el foco de infeccin debido a la
accin de IFN-g y del factor quimiotctico y activador de los monocitos
(MCAF). Otro factor secretado por TDTH, llamado MIF (inhibidor de la migracin
de macrfagos) evita que el macrfago "pase de largo" el foco infectivo,
afinando su quimiotaxis.
Por lo tanto, los macrfagos van llegando en grandes cantidades al foco
infeccioso, y se van activando (sobre todo por el interfern inmune),
experimentando importantes cambios:
aumentan su tamao
aumentan sus niveles de enzimas lticos en sus grnulos
aumentan su capacidad fagoctica (por opsonizacin con IgG2a en el ratn-)
incrementan su
intracelulares
efectividad
matadora
de
microorganismos
funcionan mejor como clulas presentadoras de antgeno,

debido a que es mayor el nmero de molculas MHC de clase II
en su membrana, porque secretan mayor cantidad de IL-1 y
porque expresan ms molculas de adhesin como la B7
(coestimulatoria), ICAM-1 y LFA-3.
El que los macrfagos acten mejor ahora como APC supone que activan a
ms linfocitos TDTH, con lo cual se cierra el ciclo, pero amplificado.
Este tipo de respuesta que se retroalimenta positivamente puede llegar a convertirse en
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un "arma de doble filo", ya que puede degenerar en una respuesta negativa para el
hospedador, una vez que se traspasa un umbral. Sin embargo, su valor positivo se ponde
de manifiesto en experimentos con ratones transgnicos noqueados (K.O.) que tienen
inactivado el gen del IFN-g : son incapaces de matar a Mycobacterium bovis, una bacteria
contra la que los ratones normales se defienden perfectamente.
13.5.3 Efectos de la hipersensibilidad retardada

El efecto positivo de la DTH es que tiende a eliminar ciertos patgenos intracelulares y antgenos de
contacto:
bacterias intracelulares como Mycobacterium tuberculosis, M. leprae, Listeria
monocitogenes, Brucella abortus.
Hongos intracelulares como Candida, Pneumocystis carinii, Histoplasma,
Cryptococcus.
Protozoos como Leishmania.
Larvas de helmintos, como las de Schistosoma.
Virus.
La DTH desempea un papel importante en la defensa contra estos agentes, ya que
el macrfago activado destruye mejor al patgeno, y el contenido de sus grnulos,
vertido a exterior, destruye clulas propias infectadas (en este ltimo papel es
importante la accin del TNF-b ). Obviamente, se produce cierto dao tisular, pero
ste suele estar autolimitado y puede ser reparado ulteriormente.
El papel positivo de la DTH se puede comprobar "por contraste" considerando aquellas
enfermedades en las que precisamente este mecanismo est alterado: por ejemplo, en el
SIDA, en el que existen bajos niveles de linfocitos T CD4+: ello acarrea que se pierda la
facultad de montar una respuesta de hipersensibilidad retardada, por lo que los individuos
afectados estn sometidos a frecuentes y amenazadoras infecciones por Candida,
Pneumocystis, Cryptococcus, o por bacterias patgenas e incluso oportunistas que no
suelen causar tanta mortalidad en la poblacin sana. De hecho, una de las maneras de
seguir el curso del SIDA es evaluar peridicamente en laboratorio la capacidad de
respuesta DTH con clulas de los pacientes.
Sin embargo, en ciertos casos la propia respuesta defensiva degenera en

patolgica: tal ocurre en la tuberculosis, en la que se pueden llegar a formar
ndulos (tubrculos) en muchos tejidos (tpicamente en los pulmones), que pueden
terminar necrosndose (cavernas caseosas en pulmn).
En una situacin de infeccin crnica por parsito intracelular (como en la tuberculosis)
las citoquinas producidas en la DTH estimulan la proliferacin de fibroblastos y la
produccin de colgeno, potencindose los efectos por la accin de PDGF (factor de
crecimiento derivado de plaquetas) y de TGF-b del macrfago activado. Posteriormente
emigran y proliferan clulas endoteliales (angiognesis, es decir, formacin de nuevos
vasos sanguneos). Se produce pues la sustitucin del tejido normal por tejido fibroso
(cicatrizacin) y formacin de granuloma.
Copyright 1999 Enrique Iez Pareja. Prohibida la reproduccin con fines

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CURSO DE INMUNOLOGA GENERAL: 13.

13.2 INMUNIDAD MEDIATIZADA POR CLULAS FAGOCTICAS

13.2.2 Unin del microorganismo al fagocito

13.2.4 Fagocitosis y mecanismos matadores

13.2.4.2 Mecanismos independientes de oxgeno

13.2.5 Activacin de los macrfagos

13.3 PAPEL DE LAS CLULAS T COADYUVANTES (TH)

13.4.1 Citotoxicidad directa especfica (mediatizada por linfocitos CTL)

CURSO DE INMUNOLOGA GENERAL: 13. Inmunidad celular

13.4.1.1 Activacin y diferenciacin de los linfocitos T citotxicos

13.4.2 Citotoxicidad directa inespecfica mediada por clulas NK

13.4.3 Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC)

13.5 RESPUESTA DE HIPERSENSIBILIDAD DE TIPO RETARDADO

13.5.2 Interaccin entre citoquinas y clulas en la DTH

Actualmente se tiende a considerar como "inmunidad mediada por clulas"

CURSO DE INMUNOLOGA GENERAL: 13. Inmunidad celular

Una de las posibles clasificaciones de la inmunidad mediada por clulas sera la

13.2 INMUNIDAD MEDIATIZADA POR

CURSO DE INMUNOLOGA GENERAL: 13. Inmunidad celular

(p. ej., el formil-Met-Leu-Phe es quimiotctico para los leucocitos, que llevan

13.2.2 Unin del microorganismo al fagocito

Receptor del fagocito

13.2.3 Desencadenamiento de la captacin

CURSO DE INMUNOLOGA GENERAL: 13. Inmunidad celular

La captacin del microorganismo se ve facilitada si est recubierto por el

13.2.4 Fagocitosis y mecanismos matadores

13.2.4.1 Mecanismos dependientes de oxgeno

13.2.4.2 Mecanismos independientes de oxgeno

CURSO DE INMUNOLOGA GENERAL: 13. Inmunidad celular

Estos mecanismos dependen

1. Protenas catinicas, con actividades de tipo antibitico:

13.2.5 Activacin de los macrfagos

CURSO DE INMUNOLOGA GENERAL: 13. Inmunidad celular

13.3 PAPEL DE LAS CLULAS T

CURSO DE INMUNOLOGA GENERAL: 13. Inmunidad celular

Pero el sistema inmune ha de efectuar una segunda decisin esencial: qu

Cada uno de estos tipos de linfocitos TH secreta un patrn caracterstico de

CURSO DE INMUNOLOGA GENERAL: 13. Inmunidad celular

Veamos pues, en qu se diferencian funcionalmente los lincitos de ambas

en la lepra tuberculoide se inducen sobre todo linfocitos

CURSO DE INMUNOLOGA GENERAL: 13. Inmunidad celular

13.4 CITOTOXICIDAD MEDIADA POR

13.4.1 Citotoxicidad directa especfica (mediatizada por

Activacin y diferenciacin de los linfocitos T citotxicos

CURSO DE INMUNOLOGA GENERAL: 13. Inmunidad celular

13.4.1.2 Fase efectora: Ataque y destruccin de la clula diana

CURSO DE INMUNOLOGA GENERAL: 13. Inmunidad celular

diana. Entonces, los grnulos se fusionan con la membrana citoplsmica,

CURSO DE INMUNOLOGA GENERAL: 13. Inmunidad celular

hecho, algunos clones de CTLs carecen de perforina y de granzimas, y sin embargo

13.4.2 Citotoxicidad directa inespecfica mediada por

CURSO DE INMUNOLOGA GENERAL: 13. Inmunidad celular

13.4.3 Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

CURSO DE INMUNOLOGA GENERAL: 13. Inmunidad celular

13.5 RESPUESTA DE HIPERSENSIBILIDAD

13.5.1 Fases de la hipersensibilidad de tipo retardado

CURSO DE INMUNOLOGA GENERAL: 13. Inmunidad celular

13.5.1.2 Fase efectora

Interaccin entre citoquinas y clulas en la DTH

En este epgrafe vamos a ampliar el aspecto molecular y celular de la respuesta de

CURSO DE INMUNOLOGA GENERAL: 13. Inmunidad celular

El IFN-g el TNF-b de las clulas T, as como el TNF-a y la IL-1 de los

funcionan mejor como clulas presentadoras de antgeno,

CURSO DE INMUNOLOGA GENERAL: 13. Inmunidad celular