ATIVIDADE ANTIMICROBIANA DO LEO ESSENCIAL DE PLANTAS DO

GNERO PIPER
Maria T. B. Dodea*
a

Departamento de Fisioterapia, Centro de Cincias da Vida e da Sade, Universidade

Catlica de Pelotas; 96055-000, Pelotas-RS, Brasil.

( ) Manuscrito com material suplementar
( x ) Manuscrito sem material suplementar
*email: maria.bicca@ucpel.edu.br

ANTIMICROBIAL ACTIVITY OF THE ESSENTIAL OIL OF PLANTS OF PIPER

GENUS
Essential oils present a diversity of biological effects, among them the citotoxicity,
which is of great importance not only against certain human and animals pathogens, but
also for agriculture and marine preservation.Among the species that show these
activities we have the ones of genus Piper, and some of its compounds have shown
effects on various organisms such as fungus and bactrias. Lots of the Piper species are
aromatic and the chemical composition of its essential oils have been object of many
studies, revealing great range of compounds, specially terpenoids and arilpropanoids. Of
its biological properties investigated, the essential oils of this genus have been
sistematically submitted to toxicity essays against many micro-organisms. For all that,
this article is a systematic revision over the theme antimicrobial activity of the essential
oils of plants from genus Piper, aiming to compile the latest information over this
subject.
Keywords: antimicrobial activity; Piper; essential oil.

INTRODUO

leos essenciais

leos essenciais ou leos volteis so extrados de plantas, na maioria das vezes,

por tcnicas de arraste a vapor. Neste sentido, flores, folhas, rizomas e frutos podem ser
utilizados como matria prima para a sntese de leos essenciais. Esses leos possuem
grande utilizao na perfumaria, cosmtica, alimentos e tambm na indstria
medicamentosa. Somado a isso, podem ser empregados para diversos fins, como
aromas, fragrncias, em composies farmacuticas e ainda na forma bruta ou
beneficiada, fornecendo substncias purificadas1,2.Os leos essenciais so compostos
altamente complexos, podendo ter mais de centenas de componentes qumicos. Durante
o processo de destilao, pode haver uma variao qumica na composio dos volteis,
sendo assim, a composio qumica de um leo essencial no , necessariamente, a
mesma do material armazenado nas plantas. Quanto menor a variao, mais fiel ser o
leo em relao planta de origem3.
Estes leos apresentam diversos efeitos biolgicos, dentre eles efeito citotxico,
que de grande importncia para sua aplicao no somente contra determinados
patgenos humanos e animais, mas tambm para a preservao agrcola e de produtos
marinhos. Alguns de seus compostos mostraram-se efetivos no combate de diversos
organismos como bactrias, fungos, vrus entre outros4,5,6 . Alm disso, um trabalho de
reviso demonstrou que diferentes leos volteis no apresentaram potencial genotxico
e carcinognico, tanto in vitro quanto in vivo7.
Os leos essenciais de pimenta, em particular, vm sendo utilizados na
avicultura como alternativa ao uso de promotores de crescimento antibiticos,
considerando sua ao antimicrobiana e suas propriedades antioxidantes e
imunomoduladoras8.

Composio qumica do leo essencial do gnero Piper

A famlia Piperaceae uma famlia que ocorre em ambos os hemisfrios, e inclui

aproximadamente 4.000 espcies. Dos quatro gneros hoje considerados para a famlia,
Zippelia, Piper, Peperomia e Manekia, o gnero Piper aquele com o maior nmero de
representantes9,10. Diversas espcies do gnero Piper so amplamente utilizadas na
medicina popular em vrias partes do mundo e tm sido relatadas por produzirem
compostos com propriedades biolgicas e farmacolgicas diversas. Porm at 2004,
apenas 10% das espcies de Piper foram fitoquimicamente estudadas11.
Diversas espcies de Piper so aromticas e a composio qumica dos seus
leos essenciais tem sido objeto de intenso estudo, revelando uma grande variedade de
constituintes, destacando-se os terpenoides e arilpropanoides12. Das propriedades
biolgicas investigadas, os leos essenciais deste gnero tm sido sistematicamente
submetidos a ensaios de toxicidade contra diversos micro-organismos de natureza
bacteriana e fngica13.
Os constituintes dos leos essenciais so divididos em duas classes qumicas
inteiramente distintas: terpenides e fenilpropanides. Embora os terpenos representem
a maioria dos componentes e ocorram com muito mais frequncia e abundncia em
relao a outros compostos, sempre que os fenilpropanides esto presentes fornecem
sabor e odor indispensveis e significativos ao leo14.
No leo essencial de Piper malacophyllum, por exemplo, foram identificados 28
compostos de natureza terpnica, sendo a cnfora o constituinte majoritrio, fato que
tambm verificado em outros integrantes do gnero Piper15,16.O leo essencial
apresentou ampla atividade antimicrobiana, destacando-se a atividade antifngica, que
se apresentou como moderada contra o fungo leveduriforme Cryptococcus neoformans
e o filamentoso Trichophyton mentagrophytes, ambos de interesse clnico15.
J o eugenol, constituinte qumico dos leos essenciais das espcies P. diica e
S. aromaticum, exibe comprovada atividades como antibacteriano, antimictico
antimicrobiano, antiinflamatrio, anestsico, anti-sptico, antioxidante, aleloptico e
repelente17.

O leo de P. callosum possui na sua composio vrios componentes como

safrol (64 %), metil-eugenol (2,69 %), -pineno (6,9 %) 18. O safrol um fenil ter que
ocorre como componente voltil, sendo utilizado como precursor na fabricao de
inseticidas biodegradveis, cosmticos e produtos farmacuticos. Existem dvidas com
relao identificao botnica das espcies de Piper produtoras de safrol, podendo ser
Piper hispidinervum ou Piper aduncum19.
Atividade antimicrobiana

Nas ltimas dcadas os antimicrobianos de origem vegetal tm recebido uma

ateno especial, devido resistncia aos antibiticos tradicionais desenvolvida por
alguns microorganismos. Diversas plantas podem servir como alternativa teraputica
pela atividade antimicrobiana comumente associada aos seus leos essenciais. Tambm
promissora a utilizao destes leos como aditivos alimentares, para retardar a
deteriorao dos alimentos ou para evitar o crescimento de patgenos alimentares e
microorganismos resistentes aos antibiticos.20,21
Alm de ser utilizado na aromatizao de alimentos e perfumaria, os leos
volteis podes ser usados como uma importante fonte de eugenol, substncia utilizada
para produzir a vanilina. Alm da vanilina, o eugenol pode ser usado como precursor
para a preparao de naftoquinonas, antraquinonas, dentre outras22 (Costa, 2000). O leo
essencial dos representantes do gnero Piper exibem vrias atividades biolgicas.
Oussalah23 relatou a atividade antimicrobiana desse leo frente a Pseudomonas putida.
Dando continuidade a seus trabalhos, Oussalah24 relatou a atividade bactericida do leo
essencial frente a Escherichia coli, Listeria monocytogenes, Salmonella Typhimurium e
Staphylococcus aureus.
Embora seja menos investigada, a utilizao dos leos essenciais para o
tratamento de parasitoses vem adquirindo maior importncia25. leos essenciais podem
ser eficazes no tratamento ou preveno de doenas parasitrias, visto que propriedades
como baixa densidade e rpida difuso atravs das membranas celulares em decorrncia
da sua lipossolubilidade podem melhorar a insero intracelular dos componentes ativos
do leo essencial nos parasitas26.

Atividade antibacteriana
A ao inibitria das especiarias e de seus leos nos diferentes microrganismos
tem sido relatada em diversos estudos27. O interesse renovado no uso de especiarias
como agentes antibacterianos atribudo basicamente a duas razes: a segurana dos
aditivos qumicos constantemente questionada, havendo uma tendncia ao uso de
substncias naturais de plantas, e a reduo do sal ou do acar em alimentos por razes
dietticas tende a aumentar o uso de outros temperos28.
Em estudo realizado por Trajano et al.29 os resultados obtidos indicam que todos
os 11 leos essenciais de especiarias, com exceo do leo de pimenta preta, possuem
atividade antibacteriana. J Stoyanova et al.30 demonstrou uma atividade antimicrobiana
significante dos leos essenciais de P. nigrum e Z. officinalis contra as bactrias Gram
positivas. Alm disso, tambm observaram um efeito do leo de Z. officinalis contra K.
pneumoniae. Entretanto,em outros testes o leo de P. nigrum s no foi ativo contra
bactrias Gram positivas, enquanto o leo de Z. officinalis foi ativo apenas contra S.
aureus.

Atividade antifngica
Quando avaliada a atividade fungitxica de leos essenciais extrados de folhas
de espcies de Piper coletadas na regio amaznica, contra os fungos C. perniciosa,
causador da vassoura-de-bruxa em cacaueiro, Phytophthora palmivora (E.J. Butler) E.J.
Butler e Phytophthora capsici Leonian, causadores da podrido parda em frutos de
cacaueiros,os resultados obtidos demonstraram que o crescimento micelial de C.
perniciosa foi inibido em 100 % a partir da concentrao de 0,75 L/mL do leo de P.
callosum e na concentrao de 1 L/mL do leo de P. marginatum var. anisatum. Para a
ocorrncia de 100% de inibio do crescimento de P. palmivora, os leos de P. callosum
(1 L/mL) e P. enckea (1L/mL) mostraram mais efetivos, enquanto que, os demais
leos testados praticamente no apresentaram ao inibitria.31
Quanto a P. capsici foi verificado que apenas o leo de P. callosum provocou
100% de inibio nas concentraes de 0,75 L/mL.Os resultados obtidos
demonstraram que os leos essenciais de P. callosum, P. marginatum var. anisatum e P.
enckea tiveram ao fungitxica significativa contra os trs fitopatgenos testados. Isto

indica, portanto, boas perspectivas para uso experimental desses leos no controle dos
fitopatgenos em condies de casa-de-vegetao e de campo. A possibilidade de uso de
produtos de origem natural, que apresentam baixa toxicidade, se traduz em vantagem
por ser um procedimento menos agressivo ao meio ambiente.31

Mtodos de anlise da atividade antimicrobiana

Cada vez mais existe um interesse em aumentar o conhecimento sobre as

concentraes inibitrias dos leos essenciais, em busca do equilbrio entre a
aceitabilidade e a eficcia da ao antimicrobiana. A CIM pode ser definida em estudos
in vitro e in vivo. Os mtodos disponveis podem ser divididos em grupos: difuso,
diluio, impedncia e densidade tica32
De todos os mtodos, a diluio mostrou ser o que melhor disponibiliza dados
quantitativos, enquanto a difuso em placa de Petri se constitui em um mtodo
qualitativo, por isso, esses mtodos (diluio e difuso) no so necessariamente
comparveis. Os resultados obtidos por cada um desses mtodos podem diferir devido a
fatores intrnsecos aos testes32.
Na tcnica de difuso em disco e em gar a vantagem limitada gerao de
dados preliminares fornecendo, somente, dados qualitativos, devido a natureza
hidrfoba da maioria dos leos essenciais de plantas, uma vez que essa caracterstica
impede a difuso uniforme destas substncias atravs do meio contendo gar 33 (Lambert
et al., 2001).
Em relao s particularidades do leo, algumas pesquisas a respeito de sua
composio mostram que mesmo variaes genticas intraespecficas da espcie vegetal
podem alterar o teor do princpio ativo presente no leo. Ademais, outros fatores, como
clima, solo, poca e forma de plantio, adubao, uso de agrotxicos, irrigao, tempo e
condies ambientais, provenincia do material da planta (fresco ou seco), tcnica de
extrao, fonte botnica, tratos culturais e colheita e padres de variao geogrfica
(latitudes e longitudes) afetam a composio qumica dos leos, podendo provocar
alteraes na atividade antimicrobiana33,34,35,36.O volume e a concentrao dos leos so
parmetros que tambm devem ser observados na avaliao do efeito antimicrobiano,

pois podem afetar os resultados do sistema-teste. Por isso, nos estudos em que se
utilizam cavidades no meio de cultivo, necessrio que estas contenham um volume
mnimo de leo que possibilite a visualizao da inibio. Entretanto, a significncia
destes volumes na descrio da atividade antimicrobiana de um leo essencial no
conhecida. 37.
Para tanto, tem se desenvolvido mtodos de investigao in vitro que produzam
resultados confiveis e possam ser reproduzidos e validados. Contudo, essa tarefa tem
sido dificultada pelas peculiaridades que os leos apresentam, quais sejam: volatilidade,
insolubilidade

em

gua

complexidade,

caractersticas

que

interferem

significativamente nos resultados.

Nos testes de susceptibilidade microbiana, deve-se levar em considerao a
tcnica usada, o meio de cultura, (o(s) microrganismo(s) e o leo essencial testados.
Nascimento38 em seus ensaios sobre a atividade antimicrobiana dos leos essenciais in
vitro verificou uma variedade de metodologias propostas, o que torna a comparao
entre esses estudos problemtica.
Os testes de avaliao antimicrobiana so padronizados pela NCCLS (National
Committee for Clinical Laboratory Standards) e desenvolvidos para analisar agentes
antimicrobianos convencionais como os antibiticos. Nos testes de atividade
antimicrobiana de leos essenciais, a metodologia proposta pelo NCCLS no pode ser
seguida risca, devido s propriedades qumicas que estes apresentam. Dessa forma,
feitas modificaes esses mtodos podem ser usados em algumas situaes. Na maioria
dos estudos, as zonas de inibio formadas pelos leos so comparadas com aquelas
obtidas pelos antibiticos, no entanto, importante destacar que esses resultados no
devem ser simplesmente comparados, pois as particularidades apresentadas pelos leos,
bem como, outras variveis (tcnica usada, o meio de crescimento, o microrganismo
teste) devem ser levadas em considerao39-42
As substncias normalmente testadas pelos mtodos propostos pelo NCCLS tm
natureza hidrfila e os testes so padronizados para esta condio. Nos ensaios com
leos essenciais, deve-se considerar que os leos so volteis, insolveis em gua,
viscosos e complexos. Alm disso, podem formar uma suspenso turva que impede a
determinao visual da eficcia antimicrobiana do leo, devido interferncia da
dissoluo insuficiente dos componentes testados, sendo assim, a falta de padronizao
dos testes de susceptibilidade antimicrobiana tem sido um dos empecilhos encontrados
para a realizao desse tipo de estudo43.

Outro problema observado quando se utiliza a tcnica de difuso em gar, pois

a difuso irregular dos componentes lipfilos dos leos resulta em concentraes
desiguais do leo no gar causando a formao de regies com atividade antimicrobiana
varivel e, finalmente, a determinao de um nmero de bactrias viveis
remanescentes, aps a adio do leo. Desta forma, acredita-se que os mtodos
disponveis no favorecem a padronizao e a conseqente reproduo de resultados
que efetivamente expressem a realidade, sendo, por isso, incapazes de comparar
diretamente a verdadeira atividade dos leos43,44,45.

CONCLUSO

Pode-se concluir que diversas espcies do gnero Piper possuem diversas

atividades, dentre elas, a antimicrobiana, no entanto pouco ainda se sabe sobre seus
constituintes qumicos e ainda h muito o que investigar acerca desse assunto.
Levando em considerao que a maioria dos leos essenciais desse gnero tem
como constituintes em maior quantidade eugenol e safrol, em partes justifica sua
atividade antimicrobiana, j que ambos se mostraram inibidores de diversos
microorganismos de forma muito eficiente46.
A grande maioria dos testes realizados se do de forma in vitro, no entanto a
dificuldade de padronizao de um mtodo adequado de anlise antimicrobiana
especfico para leos essenciais ainda inexistente, tornando impossvel realizar-se
comparativos entre os diversos leos com atividade antimicrobiana.Sendo interessante
uma ampliao dos mtodos de investigao para o modo in vivo onde seria possvel
verificar os efeitos dos leos essenciais in loco, facilitando sua aplicao prtica.

AGRADECIMENTOS

Aos colegas da disciplina de Estudos avanados em produtos naturais, por

estarem juntos nessa jornada acadmica cheia de desafios.

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