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1. INTRODUO
Nos finais dos anos 90 a Tcnica Amplificao de cido Nuclico (NAT) tornou-se
comum nos laboratrios de biologia molecular, constituindo-se ento em um passo
essencial para a segurana transfusional.
A Portaria n262/2002 do Ministrio da Sade, de 05 de fevereiro de 2002, tornou
obrigatrio a incluso dos testes de amplificao e deteco de cidos nuclicos NAT,
em todas as amostras de sangue de doador. Com a implantao do NAT diminui-se o
risco de transmisso dos vrus da Hepatite C HCV e do Vrus da Imunodeficincia
Humana HIV, por transfuses de hemocomponetes, aumentando a segurana
transfusional (Ministrio da Sade, 2002). A partir daquela data, os testes so
obrigatrios, no mbito da Hemorrede Nacional, em todos os servios de hemoterapia
pblicos, filantrpicos e/ou privados contratados pelo SUS, e privados.
Alguns hemocentros, a exemplo do da Bahia, no possuem estrutura fsica adequada
para implantao da tcnica. O Hemoba estima a realizao de 1.000 testes por dia4,
que devero ser realizados em um laboratrio especialmente construdo para tal
finalidade.
O que esse trabalho pretende clarear idias, estabelecer critrios para a elaborao
do projeto do laboratrio. o esboo de um estudo a ser aprofundado.
NAT Nucleic Acid Amplification Test
HCV um vrus que infecta o fgado e resulta na doena de fgado, na falha do fgado e na morte. Mais
comum e mais infeccioso do que HIV-1, o vrus HCV afeta cerca de 170 milhes de pessoas no mundo.
O HCV transmitido de individuo a indivduo atravs dos lquidos de corpo, particularmente do sangue
e dos produtos do sangue.
3 O HIV o retrovirus que causa a Sindrome da Imunodeficiencia Adquirida (SIDA/AIDS). A AIDS foi
identificada pela primeira vez no Brasil em 1982. E desde o incio da epidemia, a faixa etria mais
atingida tem sido a de adultos entre 20 a 39 anos de idade. O ltimo Boletim Epidemiolgico da Aids,
publicao trimestral do Ministrio da Sade, j registrou 179.541 casos de Aids desde 1980. Deste
total, 4.077 so entre adolescentes na faixa etria dos 13 aos 19 anos.
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4 Fonte: Hemoba.
2. O QUE O NAT?
3. O LABORATRIO
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Preparao da Plasmateca.
Para a realizao da tcnica NAT, a depender da marca dos equipamentos utilizados,
os procedimentos de anlise das amostras podero ser diferenciados:
a) Etapas para a marca Roche
preparao dos reagentes
preparao das amostras
fase de amplificao
fase de deteco.
citada a Portaria GM/MS n1.884, de 11 de novembro de 1994, atualmente
substituda pela RDC n50, de 21 de fevereiro de 2002.
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nmero de molculas de DNA em uma amostra, possibilitando a deteco, com alta especificidade, de
concentraes extremamente baixas de um determinado organismo.
para trabalho.
Nenhum material de acabamento e de revestimento ser poroso e todos devero
permitir a limpeza com hipoclorito de sdio, inclusive piso, parede e teto.
As bancadas devero ter dimenses que permitam a instalao dos equipamentos.
Temperatura ambiente adequada para a realizao de testes que exigem
temperaturas de 22C, permanentemente monitorada para assegurar que est dentro da faixa
aceitvel;
No deve haver comunicao entre a Sala de Amplificao e a de Deteco.
No caso de utilizao de sistema de ar condicionado central, no dever haver
comunicao entre a sala de pr e a de ps amplificao, nem circulao de ar entre as
mesmas.
Para o preparo de meios e solues necessria a utilizao de gua purificada,
cerca de 10ml por dia.
Utilizar lmpadas ultravioleta a cada 2,00m, nas salas de trabalho.
Rede eltrica estabilizada 110V ( 5%) e 230V ( 5%), com garantia de suprimento
contnuo de energia.
Sistema de interfaciamento.
As lmpadas devero possuir proteo acrlica.
O armazenamento, manipulao e dejeto de materiais orgnicos e radioativos
devem obedecer s normas vigentes.
3.6. Programa e Pr-dimensionamento
Recepo de Amostras
6,00m
Depsito de Material
6,00m
Sanitrio Feminino
4,00m
Sanitrio Masculino
4,00m
Depsito Temporrio de Resduos com Autoclave
6,00m
D.M.L.
2,00m
Sala Administrativa
8,00m
Sala de Laudos
6,00m
Sala de Separao de Amostras
9,00m
Laboratrio de Pr-amplificao com antecmara
20,00m
Extrao de cidos nuclicos
Preparao de amostras e reagentes
Estoque temporrio de DNA
Plasmateca
Sala de estoque de reagentes e materiais descartveis
Sala de amplificao com antecmara
Laboratrio de Contingncias com antecmara
6,00m
6,00m
20,00m
20,00m
Total
123,00m
LAUDOS
LABORATRIO DE
AMPLIFICAO
LABORATRIO DE
CONTIGNCIAS
ANTECAMARA
ANTECAMARA
LABORATRIO DE
PR-AMPLIFICAO
ANTECAMARA
SEPARAO DE
AMOSTRAS
RECEPO
DE AMOSTRAS
3.7. Fluxograma
FUNCIONRIO
AMOSTRA
3.8. Equipamentos
Para cada rea existem os equipamentos especficos, que sero relacionados nas
tabelas abaixo. A quantidade de equipamentos ser determinada em funo do
nmero de amostras a serem analisadas pelo laboratrio.
3.8.1. rea de separao de amostras:
EQUIPAMENTO
Geladeira Domstica
Centrfuga Refrigerada
Micro-Computador
Alt.
164
35
60
DIMENSES (cm)
Larg.*
Prof.
66
68
67
58
50
70
Alt.
15
36
35
60
195
164
164
34
58
DIMENSES (cm)
Larg.
Prof.
15
25
60
42
67
58
50
70
109
75
66
68
66
68
29
50
150
73
DIMENSES (cm)
Alt.
Larg.
Prof.
15
15
25
36
60
42
60
50
70
195
109
75
164
66
68
164
66
68
58
150
73
45
60
60
Alt.
15
195
164
DIMENSES (cm)
Larg.
Prof.
15
25
109
75
66
68
Alt.
15
36
60
164
29
40
80
164
DIMENSES (cm)
Larg.
Prof.
15
25
60
42
50
70
66
68
60
50
50
40
100
70
66
68
4. CONSIDERAES FINAIS