Microbiolgia Lab.

MICROBIOLOGIA AMBIENTAL
INFORME PRACTICA DE LABORATORIO No. 1

DE RECONOCIMIENTO DEL LABORATORIO Y MATERIALES DE
MICROBIOLOGIA
CURSO:
(358010_74)
PRESENTADO POR:
YESICA YAZMIN RINCN LOPEZ

CDIGO: 1003558716
TUTOR COMPONETE PRCTICO:

LUISA FERNANDA BERNAL
TUTOR CAMPUS VIRTUAL:
DIANA CAROLINA RUBIANO
UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA UNAD

ESCUELA DE CIENCIAS AGRCOLAS, PECUARIAS Y DEL MEDIO AMBIENTE
CEAD. ARBELAEZ
MARZO DE 2015
1. Qu caractersticas debe reunir el vidrio utilizado para la fabricacin del material

de cristalera para los laboratorios y por qu?
Caractersticas.
El vidrio se fabrica mediante la fusin de arena slice con sales sosas o potasa a
una temperatura de 1,000c. por qu debido al proceso de hundimiento se vuelve
lquido y se vierte en moldes, debido a su propiedad de no cristalizarse cuando se
enfra.
Este cristal es muy vulnerable a impactos mecnicos, exposiciones elevadas de
calor, porque para el diseo de cristalera para los laboratorios se maneja con
otros componentes como el boro silicato de sodio y aluminio, su aleacin le da una
resistencia le da una resistencia mecnica, trmica y qumica (Vidrio, Prex,
Quimax).
Los materiales que se combinan con sustancias que estn fabricados con vidrio
ptico. Porque debido a su composicin son muy resistentes a los reactivos
qumicos y a los cambios bruscos de temperatura.
Dependiendo a su utilizacin se utilizan diferentes materiales son:
Material calentable: es todo aquel que pueda calentar un lquido o una sustancia.
Estos son los tubos ensayo de boro silicato, vasos precipitados, matraces
Erlenmeyer, Etc...
Material no calentable: posee paredes gruesas, cuando se calienta se dilata y su
pared exterior se calienta ms rpido que la pared interior, as se genera una
dilatacin dos fuerzas paralelas y la cual generan una rotacin. Son el Kitazato,
embudos, papel de filtro, vidrios de reloj, etc.
2. Explique brevemente las ventajas y desventajas del uso de materiales de vidrio y
de plstico, respectivamente, en los laboratorios de microbiologa.
Ventajas.
Son resistentes al calor.
Pueden contener cidos.
Son fcilmente lavables.
Por ser transparentes se pueden ver las medidas que puede contener.
Se puede ver el proceso qumico que ocurre.
Desventajas.
Si estn rotos pueden lastimar a una persona.
Son muy frgiles.
Si son sometidos a cambios bruscos de calor pueden estallar
No se debe contener soluciones concentradas a base de material de vidrio de boro

silicato, porque son sustancias muy causticas que pueden destruir la calibracin
del aparato.
3. Describa, ilustre y clasifique los siguientes materiales, indicando el uso que se les da en el laboratorio de
microbiologa (Sea breve, se le sugiere elaborar un cuadro):
INSTRUMENTO
USO
ESPECIFICACIONES
OBSERVACIONES
Portaobjetos
Utilizada para
almacenar muestras.
Portaobjetos son de 75 mm x 25
mm. Pueden variar dependiendo del
tipo de muestra.
Los portaobjetos pueden estar
hechos de vidrio, vidrio
borosilicatado y plstico.
Para mantener la
muestra segura, se
utiliza un cubreobjetos
que es colocado bajo la
muestra bajo el
portaobjeto
Cubreobjetos
Se coloca bajo un
objeto que va a ser
observado bajo el
microscopio.
Es una hoja fina hoja material

transparente de planta cuadrada y
tiene diferentes tamaos (18, 20,
22,24 mm Cuadrados).
Cubre la muestra o
preparacin
microscpica para su
observacin, examen o
conservacin.
Cajas De Petri
Se utiliza en los
laboratorios para el
cultivo de cristales, en
los laboratorios de
biologa se utilizan
para el cultivo de
bacterias y
microorganismos.
Es un recipiente de cristal o de
plstico, que tiene una base circular,
y las paredes son altura baja de 1
cm.
Los ms utilizados en
los laboratorios son los
de 10 cm de dimetro.
IMAGEN
Pipetas
Graduadas
Pipetas
Pasteur
Terminales: se utiliza
para verte volmenes
hasta su capacidad
mxima.
No Terminales: Se
utiliza para la
trasferencia de
lquidos
Se
utilizan
para
enrasar
en
los
matraces
aforados
para coger pequeas
cantidades
de
cualquier disolucin.
Terminales: Son cilindros vidrio de

pequeo de dimetro y con abertura
en sus extremos.
No Terminales: La graduacin en
ella siempre termina antes de la
punta.
Fabricadas de vidrio sdico-clcico.
Normalmente se usan para medir
cualquier cantidad entre 0.1 ml y 25
ml.
Son tubos de vidrio que por uno de
sus extremos son muy estrechos
(Tubo capilar) y en el otro extremo
se suele colocar un chupete de un
cuentagotas.
No son exactas como

las volumtricas debido
a las imperfecciones de
su dimetro interno
tiene mayor efecto en
el volumen dispensado
Es una pipeta que no

est calibrada.
Que usa principalmente
para sacar el lquido de
una probeta.
Es un cristal cerrado en uno de

sus extremos, la hay en dos
tipo en
calidad de material
son:
Tubos De
Ensayo
Matraces
Los normales que no se pueden

Se usa para realizar
calentar directamente al fuego.
experiencias o
PIREX que a su composicin tienen
pruebas con
algo de plomo, soportan grandes
pequeas cantidades.
temperaturas.
Los hay en varios tamaos:
Pequeos: 100x10 mm
Normales: 150x15 mm
Grandes y Estrechos: 200x18 mm
Grandes y Anchos: 200x28 mm
Se usa en un
Tipos.
recipiente de cristal 1) Matraz Aforado: Se emplea para
donde se mezclan las
medir con exactitud un volumen
soluciones qumicas.
determinado de lquido. La marca
de graduacin rodea todo el
cuello de vidrio, por lo cual es
fcil de determinar con precisin
cuando el lquido llega hasta la
marca.
2) Matraz de Erlenmeyer: Es un
frasco transparente de forma
cnica con abertura en el
extremo angosto, generalmente
prolongado con cuello cilndrico,
suele incluir algunas marcas.
Se pueden observar las

diferencias de color o
donde hay
separaciones de
materiales.
Se utiliza para el
armado de aparatos de
destilacin o para
hacer reaccionar
sustancias que
necesitan un largo
calentamiento.
Puede contener
lquidos que deben ser
conservados durante
mucho tiempo.
Matraz Aforado.
Matraz de Erlenmeyer
Sirve para la agitacin de

mezclas y tambin para la
evaporacin
controlada
de
lquidos.
3) Matraz de Florentino: Es un
frasco de vidrio, de cuello largo y
cuerpo esfrico. Est diseado
para el calentamiento uniforme, y
su gran ventaja es a su base
redondeada permite agitar o
remover fcilmente su contenido.
4) Matraz de Kitazato: Se puede
definir
como
un
matraz
Erlenmeyer con un tubo de
desprendimiento lateral. Sirve
para
realizar
ensayos
de
destilacin, recoleccin de gases
en
cuba
hidroneumtica
(desplazamiento de volmenes),
filtraciones al vaco de sustancias
pastosas y solidas de tamao
muy pequeo.
Matraz de Florentino:
Matraz de Kitazato:
Es un instrumento de laboratorio
volumtrico, se forma generalmente
por un tubo transparente de unos
centmetros de dimetro y tiene una
graduacin (una serie de marca
grabada) desde 0 ml hasta el
mximo indicando los volmenes.
Tipos.
Probetas
Se usa para medir

volmenes y para
depositar lquidos.
1) Plstico: La ventaja de una

probeta de plstico es que es
difcil de romperse, pero su
desventaja es que la medicin es
menos precisa.
Las probetas por lo

general estn
graduadas, es decir,
llevan grabada a una
escala (por la parte
exterior) lo cual
permitir medir un
determinado volumen
2) Vidrio: La ventaja de una

probeta de vidrio es que su
medicin de volumen es precisa
y su desventaja es que si se
trabaja con un cido Fluorhdrico
corroe el vidrio.
Tubos De
Durham
Sirve para la
determinacin de la Fabricado con vidrio sdico-clcico.
produccin de gases Fondo redondo.
de microorganismos Sin graduacin.
Por cartones de 250 a

350 piezas.
Es un instrumento tipo pinza que

consta de una base que puede estar
hecha de patino, acero o aluminio y
un filamento que puede ser nicromo,
tungsteno que termina con un arito
de 5 mm o en punta.
Asas De
Inoculacin
Tipos.
1) Asa en argolla o anillos, no
calibrada. Generalmente son de
alambre de nichrome. Sirve para
la siembra por estras e
inoculaciones
en
general.
Se usa para
2) Asa recta o en hilo: Sirve para
transportar o arrastrar
trasladar una sola colonia a
inculos
medios de identificacin, o sub(microorganismos
cultivo.
pequeos volmenes) 3) Asa de platino en anillo:
Calibrada para tomar 0.001 ml,
para uro-cultivo.
4) Asa espatulada: Para manipular
colonias duras y tomar muestras.
5) Asa de alambre grueso en L:
Para purificar colonias de hongos
y procedimientos especiales.
6) Aguja de diseccin con punta
aguda: Para purificar colonias
pequeas
y
distribuir
las
preparaciones de hongos en
fresco.
Asa En Argolla O Anillos
Asa Recta O En Hilo
Asa De Platino En Anillo
Asa Espatulada
Asa De Alambre Grueso En
L
Aguja De Diseccin Con

Punta Aguda
Tipos.
Mechero Bunsen: Est constituido
por un tubo vertical que va
enroscado a pie metlico con
ingreso para el flujo, se regula a
travs de una llave sobre la mesa
de trabajo. En la parte inferior del
tubo vertical existen orificios y un
anillo metlico mvil o collarn
tambin horadado.
Mecheros
Se utiliza para
proporcionar una Mechero Teclu: Est constituido por
llama caliente,
un tubo vertical ensanchado en su
constante y sin humo
zona baja con forma de campana.
El cual va enroscado en a un pie
metlico con ingreso para el flujo
de combustible, el cual se regula a
travs de una llave ubicada a la
salida del reservorio del mismo.
Mechero Bunsen
Al encender el mechero
conviene abrir
lentamente la llave de
gas, para evitar que
salga de golpe y pueda
producirse una
explosin. Para
encenderlo se utiliza un
fosforo o un
encendedor de chispa.
Mechero Teclu
Mechero Mecker o Fisher: Es muy

similar Bunsen, pero su diferencia
es que tiene una placa de criba
(placa metlica con hoyos).
Mechero fisher
Estufas
Bacterilogas
Bao
Bacterilogo
Se usa para el
desarrollo de cultivos
bacterianos y en la
que se mantiene a
una temperatura de
37 grados
centgrados
Se utiliza para realizar

pruebas serolgicas y
procedimientos de
incubacin,
aglutinacin,
inactivacin,
biomdicos, etc.
Es una incubadora cuadrada, cuenta

con (controlador de temperatura,
Panel de control, Gabinete Externo,
Gabinete interno).
Tiene montado en la parte inferior

del mismo un conjunto de
resistencias elctricas, mediante las
cuales se transfiere calor a un medio
como agua o aceite, que se tiene a
temperatura constante con un
(control, termostato, termistor). Se
diferencia por su control electrnico,
la pantalla, la cubierta el tanque.
Se utiliza en los
laboratorios para el
secado de material y
para secar sales
qumicas, sus
temperaturas oscilan
de 60C a 300C.
Por lo general se utiliza

agua, pero se puede
trabajar con aceite.
Son fabricados con
cmaras cuya
capacidad puede
seleccionarse entre 2 y
30 litros.
Su temperatura puede
variar entre los 60 C y
100 C
Horno Pasteur
Se utiliza para secar y

esterilizar recipientes
de vidrios y metal en
el laboratorio.
Se han fabricados dos tipos de

estufas (las que operan por
conveccin natural y las que
operan mediante conveccin
forzada, por lo general trabaja a
temperatura ambiente y hasta los
350C.
La esterilizacin que se
efecta en el horno se
denomina de calor seco
y se realiza a 180C
durante 2 horas; la
cristalera,
al
ser
calentada por aire a alta
temperatura,
absorbe
humedad y elimina la
posibilidad de que se
mantenga
cualquier
actividad
biolgica
debido a las elevadas
temperaturas y a los
tiempos utilizados.
Es un equipo la cual
su funcin es
esterilizar
La autoclave funcionan
permitiendo la entrada o
generacin de vapor de agua pero
restringiendo su salida, hasta
obtener una presin interna de 103
kPa, lo cual provoca que el vapor
alcance una temperatura de 121
grados centgrados
Las autoclaves suelen estar
provistas de medidores de presin
y temperatura, que permiten
verificar el funcionamiento del
aparato.
Preparar el equipo a ser

usado
en
cultivos
bacteriolgicos (tubo de
ensayo, pipeta,
platos
Petri, etc..), a fin de
evitar que se encuentren
contaminados.
Preparar
elementos
utilizados en la toma de
muestras (todos deben
estar en condiciones
estril: agujas, tubos,
recipientes).
Esterilizar
material
contaminado.
Autoclave
Jarra De
Anaerobiosis
Es un recipiente ideal Fabricada en policarbonato de alta

para
realizar transparencia que facilita el control
incubaciones
en de las placas.
anaerobiosis
Centrifuga
Se utiliza para
Los componentes ms importantes
generar fuerza
de una centrfuga son los
centrfuga la cual
siguientes.
genera movimientos
de rotacin, con el fin El control elctrico/electrnico que
de separar los
dispone generalmente de los
elementos
siguientes elementos:
constituyentes de una
mezcla.
1) Control de encendido y apagado,
control de tiempo de operacin
temporizador,
control
de
velocidad de rotacin en
algunas centrfugas, control de
temperatura en centrfugas
refrigeradas,
control
de
vibraciones
mecanismo
de
seguridad y sistema de freno.
2) Sistema de refrigeracin, en las
centrfugas refrigeradas.
3) Sistema
de
vaco,
en
ultracentrfugas
4) Base
5) Tapa
6) Carcaza
7) Motor elctrico
8) Rotor. Existen rotores de diverso
tipo, los ms comunes son los de
Capacidad hasta 12
placas de Petri de 90
mm. Fcil de desmontar,
se
pueden
generar
anaerobiosis que no
requieran catalizador.
la centrifuga se ha
diseado con el fin de
separar solidos
suspendidos en un
medio liquido por
sedimentacin o para
separar lquidos de
diversidad de densidad.
ngulo fijo, los de cubo pivotante,

los de tubo vertical y los de tubo
casi vertical, los cuales se
explican a continuacin.
Nefelmetro
De Mac
Farland
Es un elemento para
medir partculas
suspendidas
Para la utilizacin de este equipo

se hace empleando
una fotocelda colocada en un
ngulo de 90 con respecto a una
fuente luminosa.
Membranas
Milipore
Son filtros de
membrana de nitrato
de celulosa son de
naturaleza hidrofilica
Tiene una estructura de poro muy

uniforme, lo que asegura excelente
retencin y un ptimo crecimiento
microbiolgico de agua, bebidas,
frmacos
Cuenta
Colonias
Es un instrumento
utilizado para contar
colonias de
bacterias o de
otros microorganismo
s que crecen en una
placa de agar.
De fcil uso, apto de petri de 100

mm de Dimetro, con una memoria
de ltimo registro visualizado el
cual permite ver el registro final en
caso de corte de energa o
apagado accidental
Cuanto ms luz se
refleje en una
determinada densidad
de partculas depende
de las propiedades de
las partculas como su
forma, color y
reflectividad.
Facilita el reencuentro de
colonias, estas
disponibles retculas,
estriles y envasadas en
sobre individuales.
Las membranas
presentan una alta
absorcin.
Cuenta con una lupa que

ofrece facilidad del
conteo de colonias ms
pequeas.
4. Ilustre un microscopio ptico de campo claro con los nombres de todas sus
partes.
5. Enliste detalladamente todas las medidas que se requiere tomar en cuenta para el
manejo correcto y cuidados del microscopio compuesto.
1. Para transportar el microscopio deben utilizarse siempre las dos manos,

sujetndolo por el brazo con una mano y por el pie con la palma de la otra.
2. Una vez colocado el microscopio en su sitio, no debe moverse hasta que
finalice la prctica. Cuando se vaya a cambiar de observador se debe mover
l y no el microscopio.
3. Mover siempre suave y lentamente cualquier elemento del microscopio.
4. No sacar de su sitio el ocular ni los objetivos, a no ser que vayan a ser
sustituidos, en cuyo caso la operacin debe realizarse lo ms rpidamente
posible, para evitar la entrada de polvo.
5. Asegurarse de que el portaobjetos est bien seco cuando va a ser colocado
sobre la platina.
6. Al enfocar, sobre todo con los objetivos de mayor aumento, hay que evitar
que el extremo del objetivo choque con la preparacin. Para ello
acercaremos el objetivo a la preparacin mirando lateralmente y luego,
mirando ya a travs del ocular, enfocamos alejando el objetivo.
7. Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en

posicin de observacin, asegurarse de que la parte mecnica de la platina
no sobresale del borde de la misma y dejarlo cubierto con su funda.
8. Cuando no se est utilizando el microscopio, hay que mantenerlo cubierto
con su funda para evitar que se ensucien y daen las lentes. Si no se va a
usar de forma prolongada, se debe guardar en su caja dentro de un armario
para protegerlo del polvo.
9. Nunca poner los dedos en las lentes del ocular ni del objetivo. Si se
ensucian dichas lentes se limpiarn con un pao suave de algodn, sin
utilizar ningn disolvente.
10. No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se est utilizando el
microscopio.
11. Despus de utilizar el objetivo de inmersin, hay que limpiar el aceite que
queda en el objetivo con pauelos especiales para ptica o con papel de
filtro (menos recomendable). En cualquier caso se pasar el papel por la
lente en un solo sentido y con suavidad. Si el aceite ha llegado a secarse y
pegarse en el objetivo, hay que limpiarlo con una mezcla de alcohol-acetona
(7:3) o xilol. No hay que abusar de este tipo de limpieza, porque si se aplican
estos disolventes en exceso se pueden daar las lentes y su sujecin.
12. No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio (macromtrico,
micromtrico, platina, revlver y condensador).
13. El cambio de objetivo se hace girando el revlver y dirigiendo siempre la
mirada a la preparacin para prevenir el roce de la lente con la muestra. No
cambiar nunca de objetivo agarrndolo por el tubo del mismo ni hacerlo
mientras se est observando a travs del ocular.
14. Mantener seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama sobre ella
algn lquido, secarlo con un pao. Si se mancha de aceite, limpiarla con un
pao humedecido en xilol.
15. Es conveniente limpiar y revisar siempre los microscopios al finalizar la
sesin prctica y, al acabar el curso, encargar a un tcnico un ajuste y
revisin general de los mismos.
Cuidado
Durante su empleo
Ubique el microscopio sobre una mesa o meseta slida de superficie

nivelada, separndolo ligeramente de la orilla para evitar que
accidentalmente pueda caer al piso y daarse.
Antes de instalarlo a la red elctrica, cercirese de que el voltaje de la toma,

se corresponda con el requerido para ese microscopio, ya que un error en
este sentido ocasionara la ruptura de la lmpara y en el mejor de los casos
se produce una disminucin de la intensidad lumnica con la consiguiente
prdida de nitidez de la imagen.
Si accidentalmente se produce derramamiento de agua, reactivos u otros

compuestos orgnicos sobre la platina, no permita que se sequen por
evaporacin ya que pueden formarse costras o sufrir efectos oxidantes que
deterioran su construccin y en consecuencia su funcionamiento. Cuando
suceda, seque de inmediato la platina con material absorbente y
seguidamente lmpiela con un pao de lino fino o gamuza.
Al concluir su utilizacin.
Apague la lmpara. Si se trata de un modelo con regulador de intensidad,

reduzca la luz antes de apagarla. Con esta accin se protege al filamento
que puede quebrarse por cambios bruscos de la temperatura si no se toma
esa medida.
Antes de retirar la lmina, separe el lente objetivo de la preparacin con el

tornillo macromtrico, para evitar roces con la lente frontal que pueden
daarla. Se utiliz lente de inmersin, remueva el aceite empleado con
papel para lentes o un pao de tela fina que no ocasione ralladuras. No
utilice el alcohol para estos menesteres, pues pueden desprender la lente
del cemento que la fija al dispositivo tubular inutilizable. En caso de emplear
xilol, por estar muy impregnado el aceite, humedezca ligeramente el pao,
no lo empape, para evitar que se produzca el mismo efecto que con el
empleo del alcohol.
Coloque la tapa a cada lente ocular para evitar que se afecte por el polvo, y
cubra el microscopio con un tapacete de nylon con el mismo propsito.
Si tuviera que trasladar el microscopio para otro sitio, cercirese de que el

tornillo del cuerpo binocular lo mantiene fijo. Sujete el microscopio con una
mano por la base y con la otra agarre firmemente el brazo, realizando el
traslado todo el tiempo con el equipo en posicin vertical, para evitar que se
salgan los lentes oculares y puedan daarse.
Limpieza
1. Del sistema ptico.
El vidrio con que se fabrican las lentes es blando, de ah, que sean muy
susceptibles a la erosin. Cuando se requiera su limpieza se debe emplear,
para remover el polvo, un pincel fino y plano, de ser posible de pelo de
camello, que se utilice exclusivamente para eso o un pao de lino fino o
gamuza para la suciedad, que de manera frecuente est ocasionada por la
grasa de la pestaas y los cosmticos. La remocin del aceite de inmersin
ya fue tratada en el acpite de cuidado.
Para detectar la presencia de polvo o suciedad en las lentes oculares, basta

con observar a travs de ellas el campo microscpico; si se detectan
manchas, haga rotar el lente sin sacarlo del tubo ocular, las manchas rotan
con la lente, es que est sucia. Despus de realizada la limpieza de la
manera explicada colquela nuevamente en el tubo ocular y compruebe
que las manchas han desaparecido, si persisten, puede deberse a una
insuficiente limpieza o que el polvo ha penetrado el interior del lente, en ese
caso, desenrosque el tubito portador de las lentes y proceda
cuidadosamente a su limpieza, volviendo a colocar las lentes en la misma
posicin en que estaban, abstenindose de contactar con el diafragma
anular que se haya en su interior. Si despus de realizada esta operacin la
suciedad persiste, limpia la lente frontal del lente objetivo, cuyo soporte no
debe abrirse nunca, correspondiendo, solo a un personal especializado,
pues de lo contrario se corre el riesgo de que sufran un dao irreparable.
La limpieza de las lentes del condensador se har, con igual cuidado

externamente, sin desarmar el dispositivo.
El espejo se limpiar con un pao fino, no requiriendo cuidados especiales.
2. Del sistema mecnico.
La base, brazo, platina, etc. Se limpiarn con un pao, con el que se

remover el polvo y la suciedad de sus superficies.
No debe utilizarse alcohol para limpiar el microscopio pues tiende a

deteriorar la pintura.
3. Mantenimiento.
Los lentes que no estn en uso, deben ser colocados en dispositivos con
tapa de rosca para preservarlos del polvo.
Si desea guardar los microscopios en sus cajas, cerciorarse de que stas

no tenga humedad que crear un ambiente muy propicio para que las
lentes se contaminen con hongos que resultan muy difciles de remover.
La grasa vieja que se ha solidificado o adherido, removerla con xilol o

gasolina.
Lubricar peridicamente las cremalleras con grasa de buena calidad libre

de cidos.
Para pulir las partes metlicas lustrosas, utilizar un pao fino impregnado
ligeramente con aceite de mquina exentos de cidos.
El equipo debe recibir asistencia tcnica especializada cada 6 meses.
6. Enliste detalladamente todos los pasos que se requieren tomar en cuenta para
el manejo correcto y cuidado del microscopio compuesto.
Para el uso correcto del mismo es importante y necesario seguir los pasos que se
describen a continuacin.
ILUMINACIN: Prenda el microscopio con el objetivo de menor aumento (10X),

observe por el ocular y ajuste la luz hasta lograr una iluminacin uniforme en el
campo de visin. El condensador debe estar cerca de la platina y el diafragma
abierto.
ENFOQUE: Actualmente los microscopios poseen lentes parafocales, es decir, tienen

un sistema sincronizado de enfoque a diferentes aumentos. As una vez enfocada la
preparacin a menor aumento, queda enfocada al utilizar el objetivo de mayor
aumento. Para un ajuste mayor, se debe mover ligeramente el tornillo micromtrico.
Por el contrario, los microscopios antiguos tenan lentes no parafocales y se corra el
riesgo que al girar el revlver y pasar de una lente de menor aumento a una lente de
mayor aumento, sta ltima tropezara con la preparacin.
Para el enfoque el procedimiento tcnico es el siguiente:
ENFOQUE VISUAL A MENOR AUMENTO: Se coloca la preparacin centrada en
la platina, mirando por fuera, se acerca el objetivo de menor aumento a la lmina,
girando el tornillo macromtrico hasta que quede a una distancia ligeramente
menor de la distancia de trabajo. Ahora se enfoca girando el tornillo macromtrico
hasta ver la imagen del preparado. Una vez obtenida la imagen, complete el
enfoque con el tornillo micromtrico o de ajuste fino. Si es necesario, grada la
intensidad luminosa ajustando la apertura del diafragma y la altura del
condensador. Evite sobre iluminacin.
ENFOQUE VISUAL A MAYOR AUMENTO: Una vez observada la preparacin a
menor aumento, pase a posicin de trabajo el objetivo de mayor aumento, girando
suavemente el revlver. Para el caso de microscopio con lentes parafocales,
queda enfocado automticamente y se afina el enfoque con el tornillo

micromtrico. Si el microscopio posee lentes no parafocales, la lente puede
tropezar con la preparacin, entonces levante el objetivo empleando el tornillo
macromtrico y proceda a acercar el objetivo a la preparacin 8 menos de 1mm
observando por fuera y no a travs del ocular. Enfoque la imagen con el tornillo
micromtrico alejando siempre el objetivo de la preparacin.
ENFOQUE VISUAL CON EL OBJETIVO DE INMERSIN (100X): Coloque una
gota muy pequea de aceite de inmersin sobre la laminilla cubreobjetos (si la
preparacin es un extendido fijado, coloque la gota de aceite de inmersin
directamente sobre la lmina) y proceda como en el caso anterior, teniendo en
cuenta que la distancia de trabajo es menor con el objetivo de inmersin y se
requiere mayor intensidad de luz.
PRECAUCIN: Una vez realizada la observacin limpia con papel de lentes el objetivo
de inmersin pues al solidificarse se puede daar la lente. Para lo anterior, tenga
cuidado de girar el revlver directamente al objetivo de menor aumento sin devolverlo
ya que mojara el objetivo de mayor aumento con aceite de inmersin. Finalmente
retira la lmina del microscopio.
RECOMENDACIONES PARA EL CUIDADO DEL MICROSCOPIO:

Al limpiar las partes pticas utiliza solo papel de lentes y xilol no use pauelo.
En caso de no lograr una limpieza apropiada, solicite ayuda al profesor.
En las preparaciones de montajes hmedos o coloreados no debe quedar lquido
sobre la laminilla o debajo de la lmina.
Las preparaciones no deben tocar la lente de los objetivos.
Al colocar o retirar una lmina, el objetivo de menor aumento debe estar en
posicin de trabajo.
Cuando utilice micro preparados fjese que la laminilla quede en la cara superior
de la lmina, es decir mirando hacia el objetivo.
Mantenga seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama sobre ella algn
lquido, squela utilizando panola o papel absorbente.
Limpie siempre el objetivo de inmersin despus de usarlo, solo con papel para
lente o papel de arroz.
No debe retirar ningn componente ptico o mecnico del microscopio, ni
intercambiar los oculares.
Una vez utilizado, el microscopio debe quedar limpio y con el objetivo de menor
aumento en posicin de trabajo.
Para transportar el microscopio tmelo del brazo del aparato con una mano y con
la otra de la base, siempre en posicin vertical pues al voltearlo se pueden caer
las lentes y el espejo.
OBSERVAR EL MONTAJE A TRAVS DEL MICROSCOPIO:

Inicie sus observaciones con el objetivo de menor aumento, el cual le brindar una
imagen panormica amplia y con mayor profundidad de foco.
Luego pase a mayor aumento y precise las estructuras.
Sintese en posicin correcta y cmoda para observar y dibujar. Acostmbrese a
observar con ambos ojos abiertos eso le evitar la fatiga ocular.
7. Defina los siguientes trminos en microscopia: limite de resolucin, poder de

resolucin y poder de amplificacin, indicando las formulas mediantes la que se
calculan cada uno
Limite De Resolucin: es la menor distancia que debe existir entre dos objetos
para que puedan visualizarse por separado. Cuando se ilumina un objeto, los
puntos de su superficie reflejan las ondas luminosas. Dos puntos prximos de la
superficie se vern como distintos si la distancia que los separa es grande
comparada con la longitud de onda que reciben. Si la distancia que los separa es
inferior a la longitud de onda que los ilumina aparecern a nuestra vista como dos
puntos unidos.
LR=
C
NA
Donde: = longitud de onda de la luz (en m) C= constante de proporcionalidad

NA= abertura numrica
D, depende de la AN y de la longitud de onda de la luz empleada:
Poder de resolucion: (p) de un microscopio se relaciona con el limite de reslucion

(d) dela siguietne manera p=1/d. se define como la capacidad del microscopio de
distinguir dos puntos separados como tales. El poder de resolucin de un
microscopio compuesto de campo claro puede ser calculado de manera razonable
mediante la frmula :
Donde
delta= resolucin expresada en micrmetros.
lambda = longitud de onda de la luz empleada.
Como la ANobj y la ANcond son iguales, se resume 2AN.
Poder de amplificacion: es el poder de aumento de una lente est determinado

por el grado de curvatura de su superficie y la distancia focal. en las lentes
convexas mientras mayor sea la curvatura, menor ser la distancia focal y mayor
ser el aumento. El microscopio compuesto aumenta en dos etapas y puesto que
una sola lente no es suficiente se deben colocar varias lentes una detrs de la
otra, potenciando de esta manera el poder de aumento. el primer juego de lentes,
cercano al objeto en estudio, se denomina objetivo y el segundo juego, cercano al
ojo del observador se denomina ocular (11). cada sistema de lentes es capaz de
producir una imagen aumentada cuyo valor se enuncia con la letra x, as que 10x
significa que la imagen est aumentada 10 veces.
para conocer en el microscopio compuesto el aumento definitivo de una imagen se
aplica la siguiente frmula:
Aumento total = aumento del objetivo x aumento del ocular
Aunque esta frmula bsica permite obtener el aumento total de una imagen, con
las tcnicas de fotografa clsica o fotografa digital y el uso de software de
procesamiento de imgenes es posible lograr un aumento suplementario. para
obtener el aumento definitivo habra que considerar los factores de ampliacin que
se realizan en la pantalla del computador (para luego imprimirla) o al copiar la foto
a papel mediante la tcnica de fotografa clsica. El poder de aumento de un
sistema ptico tiene sus lmites y el aumentar las imgenes acarrea prdida de
informacin o detalles del objeto estudiado. esto puede ser resuelto mediante otro
principio: la resolucin.
el aumento lateral de la lente objetivo es:
tg i=y / f1=- y' / l
aumento lateral= = y' / y = -l / f1

el ocular acta como lupa y da una amplificacin angular expresada por la frmula:
el ngulo mximo con que el ojo ve el objeto sin usar lentes es el que logra cuando
el objeto est situado en el punto prximo del ojo. en esta posicin se forma
imagen ms grande en la retina.
el punto prximo en un ojo normal est a 25 cm por lo que la expresin anterior
queda:
mo=xp /f 2=0,25 / f 2=potencia del ocular / 4
como se defini el poder amplificador del microscopio por el producto de la
amplificacin lateral del objetivo por la amplificacin angular del ocular, tenemos:
m=b m=(l / f1) (xp/ f2)
8. Mencione los tipos de microscopios electrnicos que existen actualmente, y

cules son las diferencias y ventajas que usted considera ms importantes entre
estos y el microscopio ptico cuando se trabaja en un laboratorio de microbiologa.
Microscopio electrnico de transmisin(MET): Permite la observacin de muestras de
cortes muy finos. Una parte de los electrones son absorbidos o rebotan por el objeto y
otros lo atraviesan formando una imagen aumentada del objeto en cuestin. Las muestras
no deben ser mayores de un par de miles de ngstroms (1 ngstrom es igual a
0.0000000001 metros). Se ha de colocar una placa fotogrfica detrs del objeto para
registrar la imagen aumentada. Cabe destacar que este tipo de microscopios pueden
aumentar un objeto hasta un milln de veces.
Microscopio electrnico de barrido (MEB): En ste no es necesario que el espcimen
se encuentre en capas para observarlo. El MEB explora la superficie de la imagen punto
por punto, y recorre la muestra con un haz muy concentrado de electrones. stos pueden
provocar la aparicin de electrones secundarios, que posteriormente sern recogidos por
un dispositivo situado a los lados del objeto en cuestin. Cada punto ledo de la muestra
corresponde a un pxel, de forma que cuantos ms electrones haya, mayor ser el brillo
del pxel en el monitor. A medida que el haz de electrones barre la muestra, se presenta la
imagen de sta en el monitor. Los MEB pueden llegar a ampliar una imagen unas 200.000
veces.
Diferencias:
Dejando aparte la considerable diferencia de tamao de ambos y la mayor complejidad
del microscopio electrnico, la principal diferencia entre este nuevo microscopio y el
normal es el uso de electrones en lugar de haces de luz para aumentar la capacidad de
visin. De esta forma con el microscopio elctronico somos capaces de distinguir la
estructura interna de una clula o visualizar virus, algo inpensable en los tiempos que
corran.
9. Cual es la utiliadad del asta recta y redonda?
Asta recta o en hilo: Sirve para trasladar una sola colonia a medios de
identificacin, o sub-cultivo
Asta redonda o por rascn castrejn lizeth: se emplea para transportar o

arrastrar inculos (pequeo volumen que contiene microorganismos en
suspensin) desde la sustitucin, solucin de trabajo tambin llamada solucin
madre al medio de cultivo (solido o liquido) o de un medio a otro (resiembra).
Tambin sirve para la realizacin de frotis.
10. Que se entiende por resiembra o pase bacteriano?

Una resiembra es cuando tu posees colonias bacterianas (en este caso), y por distintos
factores, tanto como desgaste del medio de cultivo o por necesidad de obtener colonias
bacterianas aisladas (colonia aislada es aquella colonia bacteriana que proviene de una
sola bacteria que se reprodujo muchas veces), tomas mediante un instrumento llamado
asa de siembra, una parte de la colonia o agrupacion bacteriana y la traspasas a una
nueva placa de petri. Haciendo esto propiciars la duracin de tu colonia para posteriores
trabajos. Esto es recomendable realizarlo varias veces para asegurarse que la colonia es
pura y que los trabajos van a ser realizados adecuadamente.
BIBLIOGRAFIA
ECURED. Conocimiento con todos y para todos.Cristaleria de laboratorio (Consultado 26
de marzo de 2015). Recuperado de: http://www.ecured.cu/index.php/Cristaler
%C3%ADa_de_laboratorio
Torrero Vidre.porta objetos y cubreobjetos (Consultado 26 de marzo de 2015).
Recuperado de: http://www.torrerovidre.com/portaobjetos-y-cubreobjetos.html
Quimica net, materiales de laboratorio(Consultado 26 de marzo de 2015). Recuperado
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Teora del funcionamiento del microscopio (Consultado 26 de marzo de 2015).
Recuperado
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http://teleformacion.edu.aytolacoruna.es/FISICA/document/fisicaInteractiva/OptGeometri
ca/Instrumentos/Microscopio/microscopio.htm
J. Narvez D. La microscopa: herramienta para estudiar clulas y tejidos. Texto
Electrnico complementario para el estudio del TEMA N 2 EL MICROSCOPIO del
Programa Terico de la asignatura Histologa. (Consultado 26 de marzo de 2015).
Recuperado
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http://www.medic.ula.ve/histologia/anexos/microscopweb/MONOWEB/capitulo3_4.htm
Jos Gonzlez Alfaro. Laboratorio de Microbiologa: Instrumentacin y principios bsicos/

Jos Gonzlez Alfaro, Boris Gonzlez Gonzlez, Rosa T. Barrial Gonzlez. La Habana:
Editorial Ciencias Mdicas; 2004

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MICROBIOLOGIA AMBIENTAL

INFORME PRACTICA DE LABORATORIO No. 1

YESICA YAZMIN RINCN LOPEZ

TUTOR COMPONETE PRCTICO:

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA UNAD

1. Qu caractersticas debe reunir el vidrio utilizado para la fabricacin del material

Son muy frgiles.

Si son sometidos a cambios bruscos de calor pueden estallar

No se debe contener soluciones concentradas a base de material de vidrio de boro

Es una hoja fina hoja material

Terminales: Son cilindros vidrio de

No son exactas como

Es una pipeta que no

Es un cristal cerrado en uno de

Los normales que no se pueden

Se pueden observar las

Sirve para la agitacin de

Se usa para medir

1) Plstico: La ventaja de una

Las probetas por lo

2) Vidrio: La ventaja de una

Por cartones de 250 a

Es un instrumento tipo pinza que

Asa En Argolla O Anillos

Asa Recta O En Hilo

Asa De Platino En Anillo

Aguja De Diseccin Con

Mechero Mecker o Fisher: Es muy

Se utiliza para realizar

Es una incubadora cuadrada, cuenta

Tiene montado en la parte inferior

Por lo general se utiliza

Se utiliza para secar y

Se han fabricados dos tipos de

Preparar el equipo a ser

Es un recipiente ideal Fabricada en policarbonato de alta

ngulo fijo, los de cubo pivotante,

Para la utilizacin de este equipo

Tiene una estructura de poro muy

De fcil uso, apto de petri de 100

Cuenta con una lupa que

1. Para transportar el microscopio deben utilizarse siempre las dos manos,

7. Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en

Ubique el microscopio sobre una mesa o meseta slida de superficie

Antes de instalarlo a la red elctrica, cercirese de que el voltaje de la toma,

Si accidentalmente se produce derramamiento de agua, reactivos u otros

Apague la lmpara. Si se trata de un modelo con regulador de intensidad,

Antes de retirar la lmina, separe el lente objetivo de la preparacin con el

Si tuviera que trasladar el microscopio para otro sitio, cercirese de que el

Para detectar la presencia de polvo o suciedad en las lentes oculares, basta

La limpieza de las lentes del condensador se har, con igual cuidado

El espejo se limpiar con un pao fino, no requiriendo cuidados especiales.

2. Del sistema mecnico.

La base, brazo, platina, etc. Se limpiarn con un pao, con el que se

No debe utilizarse alcohol para limpiar el microscopio pues tiende a

Si desea guardar los microscopios en sus cajas, cerciorarse de que stas

La grasa vieja que se ha solidificado o adherido, removerla con xilol o

Lubricar peridicamente las cremalleras con grasa de buena calidad libre

El equipo debe recibir asistencia tcnica especializada cada 6 meses.

ILUMINACIN: Prenda el microscopio con el objetivo de menor aumento (10X),

ENFOQUE: Actualmente los microscopios poseen lentes parafocales, es decir, tienen

queda enfocado automticamente y se afina el enfoque con el tornillo

RECOMENDACIONES PARA EL CUIDADO DEL MICROSCOPIO:

OBSERVAR EL MONTAJE A TRAVS DEL MICROSCOPIO: