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ICBAS 2010/2011 2S
Rui Silva
Anafase
A anafase uma fase rpida, caracterizada pela migrao dos cromossomos para os plos do fuso.
A anfase comea pela duplicao dos centrmeros, libertando as cromtides-irms. As fibras do fuso,
ligadas aos centrmeros, encurtam, puxando os cromossomos para os plos da clula.
D-se a clivagem dos centrmeros. Os cromatdios que antes pertenciam ao mesmo cromossoma,
agora separados, constituem dois cromossomas independentes.
APC (anaphase promoting complex) activa induz: i) a degradao de coesinas localizadas na regio
centromrica que mantm juntos os cromatdios durante toda a primeira parte da mitose, e ii)
activao da separase.
Contudo, uma clula s entra em anafase quando todos os cromossomas estiverem biorientados e o
fuso exercer a devida tenso sobre os cromossomas. Quem monotoriza este processo?
Checkpoint mittico (complexos com protenas Bub1, Bub3, BubR1, Mad1, Mad2 e cdc20) ->
Inibio da APC (anaphase promoting complex) at todos os cromossomas estarem biorientados
Telfase
A membrana nuclear forma-se volta dos cromossomas de cada plo da clula, passando a existir
assim dois ncleos com informao gentica igual;
Os nclolos reaparecem; O fuso mittico dissolve-se; Os Cromossomos descondensam e tornam-se
menos visveis;
Citocinese
Corresponde diviso celular e, consequentemente, individualizao das duas clulas-filhas
2) Cromossomas
Cromatidio brao curto p
- brao longo q
2.1) Classificao dos cromossomas de acordo com a posio do centrmero
Metacntrico
submetacntrico
acrocntrico
telocntrico
Heterocromatina
DNA de
sequncia nica,
Geneticamente activa
Geneticamente inactiva
DNA
2.1) Heterocomatina
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Heterocromatina constitutiva
- de replicao tardia
genes autossmicos
-no polimrfica
- polimrfica
O X inactivo tanto pode ser o de origem paterna como o de origem materna, nas diferentes clulas do
mesmo organismo (ao acaso no 16 dia do desenvolvimento embrionrio hiptese de Lyon).
A inactivao uma vez ocorrida mantm-se constante para cada linha celular
Consequncias da Hiptese de Lyon
Compensao de dose em clulas somticas de ambos os sexos
Mosaicismo das clulas somticas femininas para genes ligados ao X
Variabilidade de expresso em mulheres com heterozigotia para genes ligados ao X
Vantagem selectiva da variabilidade de expresso: Doenas ligadas ao X (o sexo masculino
afectado, o sexo feminino portador)
2.1.2.2) Funes da Heterocromatina constitutiva
Proteco da eucromatina
Estabilidade da cromatina (telmeros e centrmeros)
Evoluo e especiao
Silenciamento de genes?
Polimorfismos na heterocromatina centromrica (cromossomas 1, 9 e 16) foram associados a:
Infertilidade; abortamentos espontneos; Leucemias; Cancro do endomtrio; Imunodeficincia
Mendeliana C/
Galtoniana
Cromossomica
Pleiotropismo
Malformaes congnitas
Sndromes polimalformativos s. cromossmicos; s. mendelianaos com politropismo
Doenas monognicas d. autossomicas recessivas, dominantes, ligadas ao x
Doenas comuns da vida adulta
3) Histria
3.1) O mendelismo antes de Mendel
Hereditariedade ligada ao X
1532 - Talmud dispensa circunciso a RNs com familiares com tendncia a hemorragias
1803, 1813, 1815, 1820 (Otto, Hay, Buels, Nasse) - transm. hemofilia
1876 (Horner) - padro de transmisso do daltonismo
Hereditariedade dominante - 1750s (Maupertuis) - polidactilia
Hereditariedade recessiva - 1857 (Bemiss) - consanguinidade
3.2) Mendelismo
Gregor Mendel (1822-1884) infere a existncia de unidades/genes determinantes da hereditariedade
Partculas discretas
transmitindo-se intactas
caractersticas recessivas podem permanecer escondidas uma ou mais geraes, mas a
contribuio de cada progenitor sempre igual
O facto de se terem comprovado as leis de Mendel para caractersticas humanas raras (mais evidentes)
levou convico de que s se aplicariam a elas:
Mendelianos - traos discretos
3.3) Galtonismo
Galton (1822-1911)
Hereditary Genius (1869)
mtodo dos gmeos (1876)
" identificao pelas impresses digitais
caractersticas quantitativas
coeficiente de correlao
regresso para a mdia
mistura proporcional de factores de cada antepassado
lei da hereditariedade ancestral (1/4, 1/16, 1/64, ...) (1889)
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eugenia
Biomtricos - caractersticas quantitativas
3.4) Conciliao
As duas explicaes alternativas da hereditariedade, que se apresentavam como antagnicas, so
conciliadas por R.A. Fisher, 1918:
As caractersticas de tipo quantitativo podem ser "controladas" por vrios genes cada um com um
efeito pequeno sobre a caracterstica e a dominncia nem sempre completa.
2) Desvios ao mendelismo
antecipao
casos espordicos (isolados)
dissomia uniparental
imprinting genmico
outros efeitos de origem parental
mosaicismo germinal
desvio meitico
outras causas de distoro de taxas de segregao
3) Ps-mendelismo: o ps-modernismo na hereditariedade
A descoberta do mecanismo das mutaes dinmicas (expanses de repeties de trinucleotdeos,
TNRs) e do imprinting genmico, vieram explicar e unificar muitos dos princpios tidos como
desvios ao mendelismo (antecipao, casos espordicos, efeitos de origem parental, distores de
taxas de segregao).
Comeou a vulgarizar-se a aplicao de hereditariedade no-mendeliana a estas novas extenses do
mendelismo.
4) Excepes/extenses s leis de Mendel
dominncia parcial - fentipo intermdio (ptalas vermelhas, brancas ou rosas)
codominncia - fentipo com caractersticas dos dois homozigotos (trao falciforme)
polialelismo (ABO e outras sries allicas)
alelos letais e alelos semi-letais (ou subvitais) (ratinho amarelo)
expresso caracteres dominantes em homozigotia (retinoblastoma)
pleiotropismo (Marfan)
epistasia (loci H e ABO)
genes modificadores (secretor e ABO)
complementao - duplos heterozigotos para car. recessivos (erv. violeta e banco)
genes supressores (antioncogene)
duplicao gnica (forma frutos da bolsa de pastor)
efeito de dose em homozigotia para caract. AD (hipercolesterolemia familiar)
lyonizao (teoria de Mary Lyon) e variabilidade portadoras (Duchenne)
heterogeneidade gentica (surdez congnita, retinite pigmentosa)
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8 Aula - Epigentica
1) Epigentica
Epigentica estudo das mudanas na funo gentica, que so mitotica e meioticamente
herdveis e no implicam alterao na sequncia do DNA!
Por vezes sinnimo de hereditariedade no-mendeliana!
1.1) Genomic imprinting
A genetic phenomenon by which certain genes are expressed in a parent-of-origin-specific manner
It involves methylation and histone modifications in order to achieve monoallelic gene expression
without altering the genetic sequence. Alleles are silenced such that the genes are either expressed
only from the non-imprinted allele inherited from one of the parents
These epigenetic marks are established in the germline and are maintained throughout all somatic
cells of an organism
Appropriate expression of imprinted genes is important for normal development, with numerous
genetic diseases associated with imprinting defects
1.1.1) Exemplos de imprinting
Partenognese - perda da contribuio paterna, leva a teratomas ovricos
Andrognese perda da contribuio materna , leva a molas hidatiformes,
1.2) Metilao
1.2.1) Definio
Modificao covalente do DNA, pela adio de um CH3 na posio 5 do anel da citosina, no contexto
de um dinucletotdeo CpG (5-CG-3)
1.2.2) Excepo: genes em regies que sofrem imprinting e os genes inactivados no crom. X
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2) Tipos de quebras
No perodo G1: quebras cromossmicas -> alteraes cromossmicas
Nos perodos S e G2: quebras cromatdicas -> instabilidade cromossmica
Variaes de forma
Heterocromatina justacentromrica dos cromossomas 1, 9, 16
Constrio secundria dos cromossomas acrocntricos 13, 14, 15, 21 e 22
Polimorfismo do Y
3) Nomenclatura das alteraes cromossmicas estruturais
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3.1) Intra-cromossomicas
3.1.1) Deleco - terminal ou intersticial
3.1.2) Duplicao por amplificao
3.1.3) Inverso paracentrica (no envolve o centrmero), ou pericentrica (envolve o centrmero)
Sem efeito de posio: no afecta o fentipo; Com efeito de posio: afecta o fentipo
3.1.4) Desvio passagem de um bocado do cromossoma para outro local do mesmo cromossoma
3.1.5) Cromossoma em anel, por quebra nos dois cromatdios ou num s cromatdio, faz com que as
pontas colem formando um anel
3.1.6) Isocromossoma em vez dos cromatidios se separarem separam-se os 2 braos pequenos juntos
e os 2 grandes juntos.
3.2) Inter-cromossomicas
3.2.1) Translocao recproca (quebra na ponta) troca entre 2 cromossomas
Pode ser equilibrada ou desequilibrada com formao de cromossomas acntricos e dicntricos, que se
colam pelas pontas partidas
3.2.2) Translocao no recproca (quebra na ponta) um perde e outro ganha
Pode haver duplicao de DNA por translocao desequilibrada, por duplicao de cromossoma
homlogo ou heterlogo
3.2.3) Insero (quebra a meio) - translocao no recproca no terminal
3.2.4) Translocao em tandem (quebra na ponta) - translocao no recproca entre cromossomas
homlogos
3.2.5) Translocao robertsoniana - Quebra dos centrmeros nos cromossomas acrocntricos (13, 14,
15, 21 e 22), com formao de cromossomas acntricos (braos curtos) e dicntricos (braos longos)
4) Consequncias das alteraes equilibradas no emparelhamento meitico
4.1) Inverso - alsa de inverso durante o paquteno
4.2) Translocao - cruz meitica durante o paquteno
5) Traduo fenotpica das alteraes cromossmicas estruturais
Dependente de ser uma alterao equilibrada ou desequilibrada
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5.1) Alterao cromossmica equilibrada - no h aumento nem perda de material gentico activo
fentipo normal
5.2) Alterao cromossmica desequilibrada - h aumento ou perda de material gentico
activo,fentipo afectado
1) Cromossoma X
1.1) Hiptese de Lyon (1961) inactivao ao acaso do X
O corpsculo de Barr nas clulas femininas corresponde ao cromossoma X inactivo
Este tanto pode ser o de origem paterna como o de origem materna, nas diferentes clulas do mesmo
organismo (ao acaso)
Aproximadamente ao 16 dia do desenvolvimento embrionrio (nas clulas somticas)
A inactivao uma vez ocorrida mantm-se constante para cada linha celular
Nas clulas gamticas (ocitos) h reactivao do X inactivo
1.1.1) Localizao do centro de inactivo
Centro de inactivao no cromossoma X - o gene XIST
Localizao do gene XIST banda Xq13.3
1.1.2) Processo geral de inactivao
reconhecimento do n de cromossomas X
iniciao: no centro de inactivao
espalhamento da inactivao
manuteno da inactivao
O gene XIST no produz uma protena, mas antes um transcrito de RNA que permanece no ncleo,
cobre o X de onde transcrito e inactiva-o, por alterao da estrutura da cromatina mediada pelos
mecanismos de metilao de DNA e desacetilao histnica.
Nas polissomias do X s fica um X activo, os outros so inactivados
1.1.3) Consequncias da hiptese de Lyon
Compensao de dose
Mosaicismo nas clulas do sexo feminino
Variabilidade de expresso em mulheres heterozigticas
Sndrome de Rett
Exclusivamente em raparigas.
Causa hereditariedade dominante ligada ao X, com letalidade no sexo masculino hemizigtico
inactivao do X ao acaso
inactivao do X alterado
inactivao do X normal
inactivao do X alterado
inactivao de todos os X menos um
2) Cromossoma Y
Gene determinante da diferenciao sexual masculina SRY, no brao curto do Y
Alteraes na regio AZF (AZoospermia Factors) do cromossoma Y
a- ausncia de clulas germinativas
b- bloqueio na meiose
c- gametognese anormal
Diferenciao sexual
20%
46,XY/46,XX
Caritipo 46,XX/46,XY
resultado de dupla fecundao de gmeta feminino com dois ncleos por dois espermatozides X e Y,
ou por
fuso precoce - quimera - de dois zigotos de sexos diferentes
3.3) Homem XX / Mulher XY
Troca de genes responsveis pelo sexo gonadal no crossing-over
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Aparecem quase sempre como nica alterao e associadas a tipos especficos de tumor.
Principal valor: no diagnstico
Ex: Leucemia mieloide crnica, t9;22 cromossoma filadelfia
3.2) Alteraes Secundrias
Aparecem em adio alterao primria, e frequentemente dominam o padro cariotpico nas ltimas
fases da doena.
Principal valor: no prognstico
4) Efeitos gerais das alteraes cromossmicas
4.1) Aumento de material gentico activo
4.1.1) Aneuploidias
trissomias, tetrassomias, etc. - desequilbrio na dosagem protoncogene-supressor
4.1.2) Amplificao gnica
HSRs (homogeneously stained regions)
DMs (double-minutes)
4.2) Perda de material gentico activo
Deleco dos genes supressores. Exs: RB1, TP53, BRCA1, etc
4.3) Recolocao de material gentico activo (efeito de posio)
Como que as translocaes activam oncogenes? H dois mecanismos:
4.3.1) Recolocao de um protoncogene sob controlo de um promotor activo (efeito de posio)
Nas doenas hematolgicas malignas, o protoncogene normalmente colocado junto a genes
relacionados com regies promotoras de Ig, ou junto do gene TCR (T-cellreceptor)
Ex: Translocao 8;14 no linfoma de Burkitt: activao do MYC por efeito de posio
4.3.2) Fuso de genes
Envolve sempre um protoncogene que d origem formao de um novo gene (neooncogene)
Ex:
Translocao 9;22 na LMC: d origem a fuso e formao de novo gene
Translocao 15;17 na LMA-M3: d origem a fuso e formao de novo gene
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O cancro da mama triplo negativo um tumor agressivo, porque apesar de ser negativo para os 3
marcadores tende a crescer mais rapidamente, tem mais possibilidades de metstizar, reincide mais
frequentemente e menos provvel de ser detectado numa mamografia anual. Tem um prognstico
mais reservado do que os cancros da mama que so receptores hormonais positivos. Parte da razo a
falta de tratamentos especficos para este tipo de cancro da mama.
5) Opes para portadores com cancro da mama
Quimioprofilaxia
Mastectomia
Salpingo-ooforectomia bilateral
6) Opes para portadores saudveis
6.1) Deteco precoce de cancro da mama/ovrio
MRI mais sensvel do que a mamografia
Existem vrias indicae spara a idade de comeo do rastreio, a mais baixa indica 30A
6.2) Profilaxia de cancro da mama/ovrio
17 Aula PAF
1) PAF
A polineuropatia amiloidtica familiar uma amiloidose hereditria autossmica dominante, que se
manifesta na idade adulta.
A sua principal manifestao clnica uma neuropatia mista, sensitiva, autonmica e motora,
progressiva e fatal.
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Hipotenso ortosttica
incontrolvel
Disfuno esfincteriana
Da incontinncia espordica permanente
Aparelho gnito-urinrio
Impotncia
Frigidez
Bexiga neurognea
Da reteno incontinncia permanente
Olhos
Diminuio da secreo das lgrimas
Do simples incmodo leso grave da crnea
Perda de reaco pupilar
Desadaptao luz e acomodao
Sudao
Secura distal com compensao proximal
Pele seca e atrfica e excesso de sudao proximal
Intolerncia ao calor
1.5) Tratamento
Fundamental tratar os sintomas energicamente
O transplante heptico constitui hoje uma forma eficaz de impedir a progresso da doena. Os doentes
transplantados vivem mais do que os no transplantados
Medicamento que actua estabilizando a protena e que tambm se revelou eficaz a travar a progresso
da doena, sem efeitos colaterais significativos.
18 Aula Machado-Joseph
1) Caracterizao
Doena neurodegenerativa autossomica dominante, resultante de mutaes dinnicas do tipo CAG
A severidade depende da dose do gene: homozigtico mais severo
Sinais Major - Ataxia cerebelar; PEO; Sindrome piramidal ou extrapiramidais
Sinais Minor distonia, olhos esbugalhados, fasciculao lingual
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2) Alterao gentica
Autossomica dominante, resultante de mutaes dinnicas no brao longo do cromossoma 14 com
expano do tripleto CAG.
No portadores CAG entre 12 e 44 repeties
Portadores CAG entre 61 e 87 repeties
Quanto maior o n de repeties maior a probabilidade de ter a doena
O gene mutado codifica a protena ataxina 3, a qual vai acumular e provocar a doena.
3) Sintomatologia
Tipo 1 (23%)
Aos 24 anos
Tipo 2 (26%)
Aos 26 anos
Tipo 3 ( 51%)
Aos 47 anos
Ataxia Cerebelosa
Ataxia Cerebelosa
Ataxia Cerebelosa
Sndrome Piramidal
Sndrome Piramidal
Sndrome Piramidal
Oftalmoplegia externa
Oftalmoplegia externa
Oftalmoplegia externa
Mais severa
Evoluo mediana
Amiotrofias perifricas
Forma + benigna
Rpida evoluo
Sndrome extrapiramidal
4) Epidemiologia
Expresso particular em Portugal, nomeadamente em S. Miguel (GGC) e Flores (ACA)
Afecta homens e mulheres na mesma proporo
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Agregao familiar da enxaqueca: risco aumentado para os familiares -> componente gentica
Diversos loci de susceptibilidade j foram descritos, mas os genes envolvidos na MA e MO: ainda no
foram identificados
4) Linkage vs Estudos de Associao
Linkage: relao entre loci - co-segregao do marcador e da doena dentro das famlias
Associao: relao entre alelos -> alelos do marcador tm diferentes frequncias relativas nos
indviduos afectados e no afectados
4.1) Estudos de associao
4.1.1) Vantagens
Mais fcil de colher que famlias
Se houver associao, define-se uma regio candidata mais pequena onde procurar gene de
susceptibilidade
Maior poder estatstico (controvrsia)
4.1.2) Desvangagens
Dificuldades em constituir grupos de controlo
Dificuldades na interpretao do significado da associao allica
Pode ser sujeito a estratificao da populao
4.1.3) Caso-Controlo vs Family-based
4.1.3.1) Caso-controlo Populao
4.1.3.2) Family-based - TDT (transmission desequilibrium test); sib-TDT
Estratificao da populao
Grande amostra
Gentipos parentais
Pais heterozigticos
Doenas incio tardio
Complementa informao estudos caso-controlo
SNP (Single Nucleotide Polymorphism)
Desequilbrio de Ligao (LD)
Pairwise Tagging
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Haploview
Blocos de LD
TagSNPs (correlao SNPs)
Maximizar informao
Diminuir tamanho amostra
No h perda de poder estatstico: no h informao redundante
O resto estatistica No passei
2.
3.
4.
risco de 50%
5.
2.2.2) Regras
1. reconhecer direito a no saber
2. aconselhamento gentico e apoio psicossocial
3. centros experientes em testes genticos e QA
4. privacidade e confidencialidade estritas
5. os resultados de testes pr-sintomticos ou preditivos (como os da investigao!) no so
informao mdica no devendo ser includa nos processos mdicos hospitalares
population diversity
doubtful benefits for population screening
only small change in relative risk
limited usefulness at the individual level
4) Quality assurance
harmonization of nomenclature, procedures and policies
certification/accreditation of laboratories and clinical services
construction of reference materials (RMs) for lab practice
proficiency testing (PT) for external quality control (EQA)
5) Regulation by governments and professional bodies
licensing of labs and clinical services
education in genetics of health professionals
national genetics regulatory commission directory
network of reference laboratories for testing rare diseases
receiving and sending samples across national borders
DTC selling of genetic tests that have proven utility - should be performed in the context of heath-care
and proper genetic counselling
If no proven clinical utility, they may produce more harm than good to the general public and the
society.
The Portuguese law already prohibits DTC testing.
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Em cerca de 98% dos casos de DPN o feto normal e os pais so tranquilizados de que
Mesmo nos pases onde o abortamento eletivo amplamente usado, raramente eles so
No se pode presumir que o DPN exclui totalmente as anomalias fetais ou as doenas genticas!
O princpio determinar se o feto tem uma determinada condio para qual seu risco elevado,
quando comparado com a populao geral, seja por idade materna avanada, ou histria familiar ou
fatores ambientais definidos.
4) Mtodos de rastreio e diagnstico pr-natal
4.1) No invasivos
4.1.1) Doseamento no soro materno da -fetoprotena - para Defeitos do Fechamento do Tubo Neural
(DFTN)
Se o feto tem um DFTN aberto, a concentrao de a-feto protena (AFP) costuma ser mais alta
que o normal no soro materno e no lquido amnitico
98% das crianas com DFTN nascem em famlias sem histria conhecida para esta malformao;
assim, este um mtodo simples para rastreio destas anomalias
As concentraes de AFP so relativas mediana na populao (no ao valor absoluto); portanto,
necesrio conhecer a distribuio da AFP em cada populao
4.1.2) Rastreio bioqumico para aneuploidias Teste triplo
Dosagem da a-fetoprotena, estriol no-conjugado e gonadotrofina corinica humana no soro materno,
entre a 15a e 20a semana de gravidez
S. Down
Trissomia 18
DFTN
-fetoprotena
Estriol
Gonadotrofina
<
<
>
no-conjugado
<
<
NA
corinica
>
<
NA
O LA contm clulas que podem ser cultivadas para citogentica, testes bioqumicos ou
extrao de DNA para testes moleculares. No LA tambm pode ser doseada a a-fetoprotena.
4.2.3) Fetoscopia
Introduo de um endoscpio transabdominal para verificar a anatomia fetal, realizar uma bipsia
de pele ou a puno do cordo umbilical
Feita entre as 15 e 18 semanas de gestao, quando a proporo entre o fluido amnitico e o feto
maior, alm de que, nessa fase, o LA ainda bastante lmpido, permitindo melhor viso
Utilizada para investigao anatmica em doenas que no podem ser pesquisadas por US (ou cujo
sinal anatmico fundamental para o estabelecimento do diagnstico sindrmico) e em alteraes
dermatolgicas ainda impossveis de deteco por tcnicas de biologia molecular (bipsia de pele)
Risco de perda fetal de 3 a 5% (alm de complicaes, como amniorrexis crnica, parto prematuro,
infeces e descolamento da placenta)
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8. a proviso dos servios de sade deve ser adequada para a carga extra de trabalho clnico
resultante a triagem
9. os riscos, tanto fsicos quanto psicolgicos, devem ser menores do que os benefcios
Ex: Teste do pezinho; Displasia da anca
1.4) Rastreio de doenas genticas de incio tardio (em famlias afetadas)
PAF; Machado-Joseph; Doena de Huntington
No esquecer a importncia do AG pr e ps teste gentico
1.5) Rastreio de susceptibilidade para doenas comuns (complexas)
Realizados de forma prematura, sem que haja evidncias de benefcio, efetividade e utilidade
clnica
Para as doenas comuns que eventualmente tm hereditariedade monognica em cerca de 5% a
10% dos casos, como o cancro da mama e ovrio e o cancro de clon hereditrio nopolipomatoso, recomenda-se a seleo dos pacientes com maior risco por meio de realizao prvia
da histria familiar, o que aumenta o valor preditivo do teste gentico:
BRCA1 e BRCA2
Diabetes tipo MODY (Maturity Onset Diabetes of the Young)
FAP (familial adenomatous polyposis)
HNPCC (hereditary non-polyposis colorectal cancer)
Hipercolesterolemia familiar
Em algumas situaes, testes para mutaes somticas em cancros e testes de farmacogentica
devem ser incorporados, desde que exista evidncia de utilidade clnica e estudos de custoefetividade ou custo-utilidade, ex:
Pesquisa do gene HER2, que codifica o receptor tipo 2 do fator de crescimento epidrmico humano,
em pacientes com cancro da mama invasivo - estudos comprovaram que o uso do frmaco
trastuzumabe (Herceptina) melhora as taxas de resposta quimioterapia, diminui o tempo de
progresso do tumor e aumenta a sobrevida, nos pacientes HER2-positivos
Exemplos: uso da plasmaferese para retirar colesterol nos doenes com hipercolesterolemia familiar ou
flebotomia nos doentes com hemocromatose
1.6) Administrao de cofator
Exemplo: administrao de piridoxina (vitamina B6) nos casos de homocistinria
1.7) Pequenas molculas usadas para modificar as protenas mutantes
A fibrose cstica provocada por defeitos numa protena de membrana, que atua como um canal para
ies cloreto
A mutao mais comum que causa a doena a deleo de um resduo de fenilalanina o que leva ao
enovelamento incorreto da protena e faz com que a protena mutante seja degradada no retculo
endoplasmtico
No ratinho, foi observada correo na estrutura terciria da protena com administrao da curcumina
(encontrada no caril)
1.8) Chaperonas
Protenas que, alm de auxiliar o enovelamento proteico, encaminham a protena para a destruio,
caso no seja possvel atingir a configurao correta
As chaperonas constituem um importante passo na pesquisa de doenas lisossmicas
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Ela deve ser acessvel para introduo direta do gene ou, em alternativa, deve ser possvel fazer o
gene chegar at esta clula, por exemplo, por meio da corrente sangunea
8. Fortes evidncias de eficcia e segurana Estudos in vitro e em animais devem indicar que a
terapia segura e confivel
9. Aprovao regulamentar essencial que a terapia tenha sido aprovada pelos comits ticos e
governamentais competentes
1.12.3) Mtodos de introduo do vetor no hospedeiro
Aps a incorporao do DNA ao vetor necessrio introduzi-lo no hospedeiro:
1.12.3.1) O mtodo ex vivo - realizado com a colheita de clulas alvo, transferncia do gene e
transplante das clulas no hospedeiro
1.12.3.2) O mtodo in vivo - consiste na introduo do vetor diretamente no hospedeiro
1.12.4) Riscos
Reao adversa (imune) em funo do vetor especialmente comum no caso de vetores virais
1.12.4.1) Mutagnese insercional - o gene transferido integrado no DNA do doente ativa um
protooncogene ou interrompe um gene supressor de tumor, levando possivelmente a neoplasia
maligna
1.12.4.2) Inativao insercional - o gene transferido integrado ao DNA do paciente interrompe um
gene essencial para a viabilidade da clula
1.12.5) Consensos
1.12.5.1) Licitute
Em clulas somticas
Na preveno e tratamento de doenas genticas
1.12.5.1) Ilicitute
Para fins eugnicos
Para melhoramento de caractersticas triviais
Em clulas germinativas, ainda que para tratamento
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