Universidad Galileo

Facultad Ciencias de la Salud

Tcnico Universitario Laboratorio Clnico.
Curso: Pruebas especiales e interpretacin de pruebas.
Lic. Jos Manuel Arriaga.

Tema: Practica de hongos

Nombre:
Elvia Noemi Castro Ajucum carnet: 13003543

Fecha de entrega: Noviembre de 2014.

Introduccin
Actualmente se reconocen entre 300 y 400 especies de hongos causantes de micosis
sistmicas, las cuales constituyen un pequeo porcentaje del total de ms de 100 000
especies catalogadas.
Son infecciones del tejido celular subcutneo, adquiridas por trauma con material
contaminado por hongos saprofitos ambientales. Afectan la dermis y epidermis y las
manifestaciones clnicas son crnicas; se pueden caracterizar por ser inflamatorias y
granulomatosas.
La mayora de las micosis oportunistas siguen siendo ocasionadas por las especies
clsicas: Candida albicans,Aspergillus fumigatus, Cryptococcus neoformans. Sin
embargo, por las razones expuestas anteriormente han emergido nuevos hongos
oportunistas Durante las ltimas dcadas, el aumento en la prevalencia de las infecciones
fngicas ha sido constante, relacionado fundamentalmente con el incremento de
pacientes inmunocomprometidos y con el uso generalizado de antimicrobianos, la
utilizacin de inmunosupresores, maniobras diagnsticas invasoras y la implantacin de
alimentacin parenteral.
Junto a estas micosis invasoras, que podramos llamar oportunistas, coexisten otras
micosis, que podramos considerar primarias, causadas por hongos muy adaptados para
la supervivencia en los tejidos infectados. Algunas de ellas se comportan como micosis
profundas, y se caracterizan porque se distribuyen en determinadas zonas geogrficas,
donde resultan endmicas. Otras, ubicuas, se caracterizan por afectar a piel y mucosas:
se trata de las dermatomicosis y candidosis de las mucosas.
Con menos frecuencia, se encuentran las micosis subcutneas, caracterizadas por la
agresividad local y poca tendencia a la diseminacin a distancia, y que suelen contar con
antecedentes traumticos que justifican la inoculacin del hongo.
Las pruebas de sensibilidad a los antifngicos estn basadas en las tcnicas de
microdilucin en caldo, que se desarrollaron para conocer la actividad in vitro de los
antibacterianos

Objetivos:
1) Efectuar con eficiencia cada una de las muestras.
2) Describir y analizar los hongos.

HONGOS DIMRFICOS
Algunos hongos y especialmente, las especies patgenas, muestran dimorfismo, es decir,
dos formas de crecimiento. Estos hongos pueden crecer como moho o como levadura. A
menudo, este dimorfismo depende de la temperatura de incubacin: a 37C el hongo es
levaduriforme mientras que a 25C es filamentoso.
TOMA DE MUESTRAS
Muestras de la Piel: se deben recoger abundantes escamas de la zona lesionada,
preferiblemente de los bordes o bien pasar un trozo de moqueta especial y estril varias
veces por la lesin.
Muestras de la Cabeza: recoger las escamas, los pelos (con raz) o pasar la moqueta.
Muestras de las Uas: tomar fragmentos pequeos de las uas, o un raspado
subungueal. Si hay un exudado perungueal se recoger la muestra con una torunda
estril.
Lesiones en pliegues (interdigitales, unguinales, submamarios, labiales,...): recoger
escamas o pasar la moqueta. Si la lesin es exudativa y no se pueden recoger escamas,
la muestra se tomar con una torunda o mediante pases de moqueta.
Lesiones en mucosas oral, balanoprepucial, etc: se recoger un exudado mediante
una torunda. Se tomarn preferiblemente dos muestras, una para examen microscpico y
otra para la siembra en un medio de cultivo.
Es importante que si las lesiones tienen ms de una localizacin, se realicen tomas
separadas. Adems, en los volantes deber aparecer la fecha de la toma de muestra, la
localizacin de la lesin y tipo de muestra que se ha tomado, junto con otros datos de
inters personales.
MATERIALES Y REACTIVOS

Portas y Cubres

Placas de petri estriles

Torundas

Bistur y pinzas de diseccin

Esptulas de siembra

Asas de siembra

Pipetas estriles y no estriles

Papel celo

Cinta adhesiva

Guantes

Laca de uas para sellar portas

REACTIVOS

Suero salino

KOH (Hidrxido potsico) Dimetil Sulfxido

Azul Algodn Lactofenol: colorante para el examen directo o para teir hongos de
un medio de cultivo.

Tinta china

Alcohol de 70.

MEDIOS DE CULTIVO
Para el aislamiento primario de los hongos, se utilizan diversos medios de cultivo. Estos
medios hay que seleccionarlos en funcin del hongo que se sospeche y del tipo de
muestra.
Los medios de cultivo se pueden utilizar en tubos cerrados con tapn de rosca o en
placas de petri. La gran superficie de estas ltimas facilita el aislamiento y la dilucin de
sustancias inhibitorias en las muestras. Es importante que el medio no se deseque por lo
que el espesor de las mismas debe ser por lo menos de 25 mm, aproximadamente 35-40
mL de medio. Las placas se contaminan con facilidad durante la incubacin por lo que es
aconsejable sellarlas con cinta adhesiva. Los medios en tubo tienen la ventaja de que no
se deshidratan y se contaminan menos, pero en cambio tienen menos superficie.
Si la muestra es de una zona contaminada se deben incluir medios que
contengan Cloranfenicol y Cicloheximida. El primero inhibe los contaminantes
bacterianos y el segundo inhibe el crecimiento de hongos saprofitos. Hay algunas
especies patgenas que pueden ser inhibidas por ambos, por esta razn es importante
usar medios con y sin agentes inhibidores. Las muestras de zonas estriles pueden
inocularse en medios sin sustancias inhibitorias.
La temperatura de incubacin debe ser seleccionada teniendo en cuenta el tipo de hongo,
en general, los medios deben incubarse a 25C y a 37C durante 4 semanas antes de
considerarse como negativos. Si se emplean tubos con tapn de rosca deben estar flojos
para permitir la entrada de aire.

Materiales:

Muestra del paciente.

Tinta market o tinta china.
Porta objetos.
Hisopos
Microscopio gotero
Mechero.

Preparacin:

Cerca del mechero se abre la muestra.

En porta objetos se coloca la muestra.
Se le agrega la tinta.
Se espera 20 minutos para que seque.
Luego se observa al microscopio.