Professional Documents
Culture Documents
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
MANUAL DE PROCEDIMIENTOS
Pgina:
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
NDICE
Pgina:
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
Manual de Procedimientos
INTRODUCCIN
1. PRESENTACIN.........................................................................................1
2. INTRODUCCIN.........................................................................................2
3. OBJETIVO GENERAL................................................................................3
4. OBJETIVOS ESPECFICOS.......................................................................4
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
Manual de Procedimientos
5. NORMAS OFICIALES MEXICANAS..........................................................5
6. PROCEDIMIENTOS.....................................................................................28
BIOMETRA HEMTICA.............................................................................28
GRUPO SANGUNEO
.......................31
PLAQUETAS...............................................................................................34
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
Manual de Procedimientos
RETICULOCITOS........................................................................................35
VELOCIDAD DE SEDIMENTACIN GLOBULAR.....................................37
CIDO RICO.............................................................................................40
ALT (GPT)....................................................................................................43
AMILASA.....................................................................................................45
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
Manual de Procedimientos
ASO LTEX.................................................................................................47
AST (GOT)...................................................................................................50
BILIRRUBINAS............................................................................................52
COLESTEROL-HDL....................................................................................55
COLESTEROL.............................................................................................58
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
Manual de Procedimientos
COOMBS DIRECTO....................................................................................60
COOMBS INDIRECTO................................................................................63
COPROPARASITOSCOPICO.....................................................................66
CREATININA...............................................................................................71
DEPURACIN DE CREATININA EN ORINA DE 24 HORAS....................74
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
Manual de Procedimientos
ESPERMATOBIOSCOPIA DIRECTA..........................................................78
EXMEN GENERAL DE ORINA.................................................................87
FACTOR REUMATOIDE..............................................................................97
FOSFATASA ALCALINA.............................................................................100
GAMMA GLUTAMIL TRANSFERASA........................................................102
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
Manual de Procedimientos
HIV
.........................................................................................................106
LIPASA.........................................................................................................109
PROTENA C REACTIVA............................................................................111
PROTENAS TOTALES Y ALBUMINA.......................................................114
PRUEBA DE EMBARAZO EN SANGRE....................................................116
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
Manual de Procedimientos
PRUEBAS CRUZADAS..............................................................................119
TIPO DE COAGULACIN...........................................................................122
TIEMPO DE PROTROMBINA (T.P.)............................................................124
TIEMPO DE PROTROMBINA.....................................................................126
TIEMPO DE SANGRADO...........................................................................129
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
Manual de Procedimientos
TIEMPO DE TROMBOPLASTINA PARCIAL ACTIVADA (TTP)................131
TRIGLICRIDOS.........................................................................................134
UREA .........................................................................................................136
VDRL .........................................................................................................138
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
1
Manual de Procedimientos
PRESENTACIN
Este documento se ha desarrollado con la finalidad de contar con un
instrumento que funcione como gua para la correcta ejecucin de todos los
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
2
Manual de Procedimientos
procedimientos tcnicos del Laboratorio, y de esta manera contribuir al orden y
estandarizacin del mismo.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
3
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
4
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
INTRODUCCIN
Pgina:
5
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
6
Manual de Procedimientos
Los laboratorios clnicos representan un apoyo primordial para el rea mdica,
ya que a travs de los anlisis realizados en ellos se pueden diagnosticar
diferentes patologas y establecer el tipo de tratamiento que se debe administrar
al paciente. Es por eso, que conscientes de la gran importancia y con la
finalidad de alcanzar un trabajo de calidad, es indispensable contar con un
manual que presente de manera formal y sistemtica los procedimientos del
Laboratorio.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
7
Manual de Procedimientos
El siguiente manual se ha elaborado de forma sencilla y prctica para que su
contenido sea de fcil aplicacin por el personal que desarrolla estas
actividades diarias.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
8
Manual de Procedimientos
Se espera que este manual sea una gua efectiva y til para lograr la
estandarizacin de los procedimientos y calidad de los resultados obtenidos en
el laboratorio.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
9
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
10
Manual de Procedimientos
OBJETIVO GENERAL
Proporcionar al Laboratorio Novo, un instrumento que facilite el desarrollo
adecuado, sistematizado y estandarizado de los procedimientos tcnicos que
se realizan en Laboratorio Novo.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
11
Manual de Procedimientos
OBJETIVOS ESPECFICOS
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
12
Manual de Procedimientos
un solo documento.
Contribuir a la aplicacin de las medidas de bioseguridad y controles de
calidad que deben cumplirse, cuando se desarrolle un procedimiento
tcnico.
Contar con un instrumento que sirva de gua para la evaluacin y
monitoreo de las actividades de laboratorio.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
13
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
14
Manual de Procedimientos
NORMAS OFICIALES MEXICANAS
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
15
Manual de Procedimientos
manejo, transporte y almacenamiento de sustancias qumicas peligrosas.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
16
Manual de Procedimientos
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
17
Manual de Procedimientos
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
PROCEDIMIENTOS
Pgina:
18
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
19
Manual de Procedimientos
Biometra Hemtica
1.- Objetivo
La biometra hemtica es uno de los estudios que con ms frecuencia se
solicita en el laboratorio, asimismo, es el primer examen al que se enfrenta el
clnico en la valoracin diagnstica de un paciente. Aunque se considera como
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
20
Manual de Procedimientos
un solo examen de laboratorio, en realidad valora 3 lneas celulares, cada una
con funciones diferentes entre s pero que comparten u n origen comn en la
mdula sea: eritrocitos, leucocitos y plaquetas.
Los usos de la biometra hemtica son mltiples, pero lo ms frecuentes
son para el seguimiento de pacientes con quimioterapia o radioterapia, y el
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
21
Manual de Procedimientos
diagnstico de pacientes con sndrome anmico, sndrome febril o sndrome
purprico.
2.- Material, Reactivos e instrumental
Para toma de muestra:
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Para procesar la prueba:
Un mezclador
Equipo Wiener Lab Counter 19
Cubetas para contador
3.- Procedimiento
Se toma la muestra
Pgina:
22
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
23
Manual de Procedimientos
paciente:
o Nombre
o Edad
o Sexo
Se toma la muestra de la mezcladora y se coloca en la aguja del equipo
Wiener Lab Counter 19
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
o Se esperan resultados y se imprimen
4.- Valores de Referencia
4.1 Eritrocitos en hombre: 5,000,000 6,000,000 por mm cbico
Mujer: 4,000,000 5,500,000 por mm cbico
4.2 Hemoglobina en hombre: De 14 18.0 g%
Mujer: De 12 16 g%
Pgina:
24
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
4.3 Hematocrito en hombre: De 34 46 %
Mujer: De 32 40 %
4.4 Leucocitos en hombres y mujeres: 5,000 10,000 por mm cbico
4.4.1 Linfocitos: 20 50%
4.4.2 Monocitos: 0 10%
4.4.3 Basfilos: 0 2%
4.4.4 Eosinfilos: 0 5%
Pgina:
25
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
4.4.5 Neutrfilos: 35 70%
4.4.6 Segmentados: 90 100%
4.4.7 En banda: 0 10%
4.4.8 Metamielocitos: 0%
4.4.9 Mielocitos: 0%
4.4.10 Promielocitos: 0%
4.4.11 Mieloblastos: 0%
Pgina:
26
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
27
Manual de Procedimientos
4.5 Plaquetas: Van de 150,000 450,000 por mm cbico
4.6 Reticulocitos: 0.5 1.5%
5.- Bibliografa
Jaime Prez Jos Carlos, David Gmez Almaguer HEMATOLOGA. La sangre y
sus enfermedades. Edit. Mc Graw Hill. Mxico, D.F. 1 Edicin 2005 captulo 3
pginas 15 19.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
28
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
29
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Grupo Sanguneo
Pgina:
30
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
31
Manual de Procedimientos
1.- Objetivo
Determinacin de los diferentes grupos sanguneos ya sea en placa o en
tubo.
2.- Fundamento
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
32
Manual de Procedimientos
En la membrana del eritrocito estn presentes diferentes antgenos que
determinan el grupo sanguneo de un individuo siguiendo las leyes de Mendel.
3.- Material y Reactivos
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
33
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
4. - Procedimiento
Pgina:
34
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
35
Manual de Procedimientos
A, B, AB Y D.
Aadir una gota de suspensin de glbulos rojos a cada tubo
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
36
Manual de Procedimientos
Aadir una gota de cada suero segn corresponda una gota de anti A,
una gota de suero de anti B, una de anti D y una gota de suero anti
AB al tubo AB.
Mezclar y meter todos los tubos a la centrfuga por uno o dos minutos
Observar si hay o no aglutinacin
Si hay aglutinacin en el tubo A, debe haber en el tubo AB, y no hay en
B, y si en D entonces la sangre es A(+)
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
37
Manual de Procedimientos
sanguneo AB(+)
Y si no hay aglutinacin ni en A, en B, ni en AB, pero si en D, entonces
estamos hablando del grupo O(+)
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
4.1 Prueba Du
Pgina:
38
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
39
Manual de Procedimientos
Cuando nos da negativo el Rh, hacemos un prueba complementaria
llamada Du y consiste en la bsqueda de anticuerpos incompletos.
Para ello se agrega una gota de albmina bovina al 22% al tubo que resultara D
o Rh(-) y se mete a bao mara por espacio de 15 minutos una vez transcurrido
ese tiempo sacar el tubo del bao mara y se centrifuga observando si hay o no
aglutinacin en caso negativo lavar 4 veces con solucin salina y al final se
aade una gota de suero de Coombs y se centrifuga observando si hay o no
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
40
Manual de Procedimientos
aglutinacin y se reporta como Du(-) en el caso de que no haya aglutinacin,
pero si la hubiera entonces se reporta como Du(+).
5.- Bibliografa
Lynch M,J/S.S. Raphael/L:D:Mellor/P:D:Spare/MJH Inwood MTODOS DE
LABORATORIO, 2da Edicin. 1997 Mxico, D.F. Vol. 2 CAP 23 PAGS. 845
857.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
41
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
42
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Plaquetas
1.- Objetivo
Pgina:
43
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
44
Manual de Procedimientos
Determinar la cuenta de plaquetas de una muestra mediante el frotis de
sangre.
2.- Introduccin
Las plaquetas son clulas especiales que no tienen ncleo y derivan de
los megacariocitos y no se dividen sintetizan DNA. Cuando hay la ruptura de un
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
45
Manual de Procedimientos
vaso sanguneo se activa el sistema de coagulacin por la presencia de
colgeno y adems se activa la adhesin plaquetaria.
3.- Procedimiento
Una vez teido por el mtodo de Wright entonces se va a contar las
plaquetas que haya en 10 campos y se va a multiplicar el resultado por 2000 y
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
46
Manual de Procedimientos
esto nos dar el resultado aproximado de plaquetas por mm cbico en el
paciente.
4.- Valores de referencia
Tanto en hombres como en mujeres el resultado esperado es de 150,000
a 450,000 plaquetas por mm cbico de sangre.
5.- Bibliografa
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
47
Manual de Procedimientos
LYNCHM.J./S.S.RAPAHEL/L.D.MELLOR/P.D.SPAREM/M.J.H.INWOOD
MTODOS DE LABORATORIO EDIT INTERAMERICANA, MXICO,D.F. 2da
EDICIN 1997 VOL 2 CAP 22 PG 818.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
48
Manual de Procedimientos
Reticulocitos
1.- Objetivo
Determinar el porcentaje de Reticulocitos en un frotis de sangre
perifrica.
2.- Fundamento
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
49
Manual de Procedimientos
Los Reticulocitos son glbulos rojos jvenes que se caracterizan por la
presencia de una red, o malla formada por filamentos, restos de las fases
nucleadas, lo que indica su produccin reciente por la mdula sea. No se
observan en un estudio de rutina como la biometra, porque se necesita una
tincin especial con azul de cresilo o de metileno para que sean evidentes. La
cifra normal se expresa como porcentaje y se haya entre 0.5 y 1.5%. La
elevacin de la cifra de Reticulocitos indica un aumento de la produccin de
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
50
Manual de Procedimientos
eritrocitos por la mdula sea. La elevacin ms importante se produce en el
caso de las anemias hemolticas, porque la destruccin de los eritrocitos y la
hipoxia tisular por la anemia estimulan una serie de factores, como
eritropoyetina, interleucinas, etc., que obligan a la mdula sea a aumentar la
produccin.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
51
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
52
Manual de Procedimientos
anticoagulante.
Colorante azul de metileno nuevo.
Tubo de ensayo de 5 ml de capacidad
Pipetas Pasteur
Tapn para tubo de ensayo
Bao Mara a 37C
Mezclador
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Microscopio
Portaobjetos
Aceite de inmersin
4.- Procedimiento
Pgina:
53
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
54
Manual de Procedimientos
5.- Resultados
El valor de referencia es de 0.5 1.5%
6.- Bibliografa
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
55
Manual de Procedimientos
Jaime Prez Jos Carlos, David Gmez Almaguer HEMATOLOGA La sangre y
sus enfermedades. Editorial Mc Graw Hill. Mxico D.F. 1 Edicin 2005 PG 12.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
56
Manual de Procedimientos
1.- Objetivo
Determinar la velocidad de sedimentacin en una muestra de sangre
anticoagulada.
2.- Fundamento
La velocidad de sedimentacin globular es una prueba empleada
universalmente como ndice de la presencia de enfermedades activas de
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
57
Manual de Procedimientos
muchas clases. La prueba depende del hecho de que la sangre a la que se ha
aadido un anticoagulante los glbulos rojos sedimenta hasta que forma una
columna compacta en la parte inferior del tubo o recipiente. La velocidad de
este proceso depende de varios factores, siendo los principales:
a. Formacin de Rouleaux
b. Concentracin de fibringeno es plasma
c. Concentracin de globulinas alfa y beta en el plasma
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
3.- Material, Reactivos, Instrumental
Pgina:
58
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
59
Manual de Procedimientos
4.- Mtodo
Toma de muestra:
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
60
Manual de Procedimientos
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
61
Manual de Procedimientos
Tcnica para determinar la V.S.G.
a. Mediante una pipeta de Pasteur, llenar un tubo de Wintrobe
hasta la marca cero con sangre anticoagulada, evitando la
formacin de burbujas.
b. Colocar el tubo en la gradilla de sedimentacin en una
posicin exactamente vertical
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
62
Manual de Procedimientos
c. Al final de la hora, se lee la V.S.G. mediante la longitud de
la columna del plasma sobre las clulas en los nmeros de
la izquierda.
A veces se acostumbra hacer las lecturas cada 5 minutos durante una hora
para sacar curvas graficando tiempo contra sedimentacin en milmetros.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
63
Manual de Procedimientos
Lmites
0-7 mm/Hr
0-15 mm/Hr
1-15 mm/Hr
Promedio
4 mm/Hr
10 mm/Hr
5-10 mm/Hr
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
64
Manual de Procedimientos
6.- Bibliografa
Lynch M,J/S.S. Raphael/L:D:Mellor/P:D:Spare/MJH Inwood MTODOS DE
LABORATORIO, 2da Edicin. 1997 Mxico, D.F. Vol. 1 cap. 12 pg. 738-740.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
65
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
66
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
cido rico
1.- Objetivo
Pgina:
67
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
68
Manual de Procedimientos
Determinar el cido en sangre de un paciente.
2.- Fundamento
El cido rico es en los mamferos el metablico final del catabolismo de
las bases pricas y su elevacin est asociada a la gota, es decir, los
reumatismos hiperuricmicos. En los pacientes con tal difusin, aparecen
cristales de cido rico en las articulaciones y en los tendones lo que originan
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
69
Manual de Procedimientos
las manifestaciones reumticas caractersticas. Niveles altos de cido rico
estn tambin asociados a patologa renal por retencin de productos
nitrogenados asocindose en estos casos a valores tambin altos de urea y de
creatinina.
El cido rico es oxidado por la uricasa a alantona y perxido de
hidrgeno y en presencia de POD y 4-AF y DCPS forma un compuesto rosceo.
uricasa
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
cido rico + 2H2O + O2Alantona + CO2+ 2H2O2
POD
2H2O2+ 4-AF + DCPS
quinona + 4H2O
Pgina:
70
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
71
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pipetas automticas
Puntas para pipetas
Bao Mara
Termmetro
Cronmetro
Gradilla
Reactivo para cido rico Serapack Bayer
Centrfuga
Estndar de cido rico
Pgina:
72
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Sueros control
4.- Procedimiento
Pgina:
73
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
74
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
5.- Valores de referencia
Mujeres: 2.5 5.7 mg/dl
Hombres: 3.5 6.0 mg/dl
6.- Bibliografa
Manual de tcnica de reactivos Spinreact. Mxico 2002
Pgina:
75
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
76
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
77
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
ALT (GPT)
1.- Objetivo
Determinar la ALT en un paciente determinado.
Pgina:
78
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
79
Manual de Procedimientos
2.- Fundamento
La determinacin cintica de la alanina aminotransferasa (ALT) se basa
en las recomendaciones de la IFCC;
L-alanina + alfa-cetoglutarato
Piruvato + NADH + H+
ALT= Alanina Aminotransferasa
LDH= Lactato Deshidrogenasa
ALT
LDH
Piruvato + L-glutamato
L-Lactato + NAD+
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
3.- Material, reactivos e instrumental
Pgina:
80
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Bao Mara
Analizador RA 50
Sueros control
Pipetas Automticas
Puntas para pipetas
Reactivo para ALT
Pgina:
81
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
4.- Procedimiento
Centrifugar la sangre
Separar el suero en un tubo limpio y seco
Seleccionar la funcin ALT en el RA 50
Medir 1 ml de solucin de trabajo y ponerlo en un tubo
Aadir 100 ul del suero
Verter la mezcla en una cubeta
Leer en el RA 50
Pgina:
82
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
83
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Manual de tcnicas de Serapak Bayer, Mxico
Pgina:
84
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Amilasa
1.- Objetivo
Determinar la amilasa en el suero de un paciente.
Pgina:
85
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
86
Manual de Procedimientos
2.- Fundamento
Durante aos los niveles de alfa-amilasa en suero y plasma nos han
evidenciado la necesidad de la determinacin para el diagnstico de
pancreatitis aguda.
Este mtodo de determinacin de alfa-amilasa utiliza un substrato
cromognico, 2-cloro-4-nitrofenol ligado a la maltotriosa.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
87
Manual de Procedimientos
CNPG3
a amilasa
CNP + CNPG2 + G3 + G
Como se indica, la a amilasa hidroliza el substrato 2-cloro-4-nitrofenola-D-maltrotiosido, (CNPG3) dando lugar a 2-cloro-4-nitrofenol (CNP), 2-cloro-4nitrofenol-a-D-maltrotiosido, (CNPG2), maltotriosa G3 y glucosa G.
La
cantidad
de
CNP
formado
puede
ser
detectado
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
88
Manual de Procedimientos
la a-amilasa de la muestra. La reaccin no est inhibida por factores
endgenos.
3.- Material, reactivos e instrumental
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Analizador RA 50
Termmetro
Gradilla
Suero control
Pipetas
Puntas para pipetas
Pgina:
89
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
4.- Procedimiento
Reactivo
Suero o Plasma
Orina Muestra
1.0 ml
20 ul
10 ul
Pgina:
90
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
5.- Valores de referencia
Suero, Plasma
Orina
<90 U/L
<450 U/L
6.- Bibliografa
Manual de tcnicas Spinreact, Mxico.
Pgina:
91
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Aso Ltex
Pgina:
92
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
93
Manual de Procedimientos
1.- Objetivo
Determinar las antiestreptilosinas de un paciente que se tenga sospecha
de que haya tenido contacto con Streptococo beta hemoltico.
2.- Fundamento
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
94
Manual de Procedimientos
El mtodo se fundamenta en una reaccin de aglutinacin de una
suspensin de partculas de ltex poliestireno sensibilizadas con estreptolisina
O estabilizada. La aglutinacin es visible en una concentracin de ASO en
suero = > a 200 UI/ml.
3.- Material, Reactivos e instrumental
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Tubos de ensayo
Reactivo de ltex ASO
Sueros control
Placa de reaccin
Pgina:
95
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
4.- Procedimiento
Mtodo cualitativo
Pgina:
96
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
97
Manual de Procedimientos
diluir
Aadir, al lado del anterior una gota de reactivo 1 ASO ltex
Mezclar las 2 gotas y extenderlas por todo el crculo
Colocar el porta en el agitador rotatorio
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
98
Manual de Procedimientos
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
99
LABORATORIO NOVO
Pgina:
100
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Mtodo semicuantitativo
Disoluciones
1/2
1/4
1/8
LABORATORIO NOVO
Pgina:
101
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Suero muestra
100 ul
..
..
Solucin salina
100 ul
100 ul
100 ul
100 ul
Dosificar en porta
50 ul
50 ul
100 ul
50 ul
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
102
Manual de Procedimientos
200 x n dilucin
UI/ml
200 x 2
400
200 x 4
800
200 x 8
1600
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Manual de Tcnicas de Spinreact Mxico
Pgina:
103
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
104
Manual de Procedimientos
AST (GOT)
1.- Objetivo
Determinar el AST en un paciente determinado.
2.- Fundamento
La determinacin cintica de la aspartato aminotransferasa se basa en:
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
L aspartato + alfa-cetoglutarato
Oxaloacetato + NADH + H
AST
NDH
L-malato + NAD+
Oxaloacetato + L-glutamato
Pgina:
105
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Tubos de ensayo
Bao mara
Termmetro
Cronmetro
Centrfuga
Reactivo de AST
Controles
Pipetas automticas
Puntas para pipetas
Pgina:
106
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
4.- Procedimiento
Pgina:
107
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
108
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
6.- Bibliografa
Manual de procesos de reactivos SERAPAK, BAYER, Mxico.
Pgina:
109
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
110
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Bilirrubinas
1.- Objetivo
Determinacin de la bilirrubina directa y total.
2.- Fundamento
Pgina:
111
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
112
Manual de Procedimientos
La bilirrubina se origina por degradacin del grupo hem de la
hemoglobina, que a su vez aparece en el plasma como consecuencia de la
destruccin de los glbulos rojos en el sistema retculo endotelial. La
hemoglobina una vez liberada en el interior del eritrocito, se combina con las
haptoglobinas, protenas plasmticas especficas para su transporte. En una
primera etapa y tras su liberacin de la haptoglobina, se forma, por accin de
una oxigenasa, en un grupo formilo, con lo que se rompe el anillo tetrapirrlico
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
113
Manual de Procedimientos
del hem, formndose el compuesto denominado biliverdina, que en una etapa
posterior y por accin de una reductasa se transforma en bilirrubina.
Casi todas las tcnicas de cuantificacin de la bilirrubina se basan en la
reaccin de Malloy Evelyn, que valora colorimtricamente por la formacin de
azobilirrubina, de color rojo cereza, cuando a la bilirrubina se la hace reaccionar
en determinadas condiciones con el cido sulfanlico diazotado.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
114
Manual de Procedimientos
La bilirrubina conjugada, muy polar, reaccionar en medio acuoso con el
reactivo de diazotacin, por lo que se llam directa, pues al poner en contacto el
suero y el reactivo apareca directamente el color. Sin embargo, la bilirrubina
libre, poco polar, no da directamente la reaccin y es preciso aadir un tercer
reactivo que inicialmente fue el metanol para que produzca la reaccin de
diazotacin con la consiguiente aparicin de color; por este motivo se le llam
bilirrubina indirecta.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
3.- Material, reactivos e instrumental.
Pgina:
115
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Termmetro
Cronmetro
Reactivo para bilirrubina directa serapack bayer
Reactivo para la bilirrubina total serapack bayer
Sueros de control
Analizador RA 50
Cubetas para analizador
4.- Procedimiento
Pgina:
116
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
117
Manual de Procedimientos
Reactivo 1
Bilirrubina
Bilirrubina
Bilirrubina
Bilirrubina
Directa (Pb)
1.5 ml
Directa (Bco)
1.5 ml
Total (Pb)
1.5 ml
Total (Bco)
1.5 ml
Reactivo 2
Muestra
50 ul
100 ul
100 ul
50 ul
100 ul
Ul
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
6.- Bibliografa
Manual de tcnicas Serapack Bayer.
Pgina:
118
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
119
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
120
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
121
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Colesterol HDL
1.- Objetivo
Determinar la cantidad de colesterol hdl contenido en la sangre.
Pgina:
122
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
123
Manual de Procedimientos
2.- Fundamentos
Mediante un reactivo precipitante de protenas, se logran precipitar las
lipoprotenas de baja densidad y las de muy baja densidad (LDL y VLDL)
quedndose sobrenadante las lipoprotenas de alta densidad, donde se
determina el colesterol ligado a las mismas.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
3.- Material, Reactivos e instrumentos
Pgina:
124
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
125
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
4.- Procedimiento
Centrifugar la muestra
Separar el suero en un tubo limpio y seco
En otro tubo poner 500 ul de reactivo precipitante
Mezclar
Dejar reposar 10 min a temperatura ambiente
Centrifugar 20 min a 4000 rpm o 2 min 12000 rpm
Determinar el colesterol del sobrenadante
Pgina:
126
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
127
Manual de Procedimientos
muestra
En el blanco poner 2.0 ml de R.B (colesterol)
En el tubo de muestra poner 40 ul de sobrenadante y 2.0 ml de R.B
(colesterol)
Para la semimicrodeterminacin se utilizan 2 tubos uno blanco y el otro
muestra
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
128
Manual de Procedimientos
(colesterol)
Mezclar e incubar 5 min a 37C o 10 min a temperatura ambiente
Leer a 505 nm o 546 nm frente al blanco de reactivos
Reportar el resultado final
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
5.- Valores
HDL - Colesterol
Hombres
Riesgo menor
>55 mg/dl
Riesgo normal
35 55 mg/dl
<35 mg/dl
Mujeres
>65 mg/dl
45 65 mg/dl
Pgina:
129
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Riesgo elevado
6.- Bibliografa
Manual de tcnicas de Spinreact, Mxico 2003.
<45 mg/dl
Pgina:
130
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
131
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
132
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Colesterol
1.- Objetivo
Determinar el colesterol en la sangre de un paciente.
2.- Fundamento
Pgina:
133
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
134
Manual de Procedimientos
El colesterol es una sustancia hidrfoba, insoluble en medio acuoso y por
tanto insoluble en el plasma sanguneo. La circulacin sistemtica del colesterol
es posible gracias a la formacin de complejos solubles por su unin a
protenas, las lipoprotenas sercas, y entre ellos la de tipo b low desinty
lipoproteins (LDL) son las que representan el mayor porcentaje, con
aproximadamente un 60 70% del total. El hgado es el rgano principal donde
se produce la incorporacin del colesterol y otros lpidos a las lipoprotenas. As
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
135
Manual de Procedimientos
mismo, en el hgado, se esterifca, con cidos grasos, la mayor parte del
colesterol (60-75% del total).
El colesterol esterasa hidroliza los steres de colesterol presentes en la
muestra dando colesterol libre y cidos grasos, una posterior oxidacin
enzimtica mediante el colesterol oxidasa se forma H 2O2 y colesterona. El H2O2
se valora por la reaccin de Trinder, mediante un cromgeno, fenol y 4Aminoantipirina, en presencia de Peroxidasa, formando una quinonimina cuya
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
136
Manual de Procedimientos
coloracin, encarnada, es proporcional a la concentracin de colesterol
presente de la muestra.
steres colesterol + H2O
CHE
Colesterol + O2
4-colesterona + H2O2
CHOD
H2O2 + AF + Fenol
POD
Quinonimina + H2O
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
3.- Material, reactivos e instrumental
4.- Procedimiento
Pgina:
137
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
138
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
150 260 mg/dl
6.- Bibliografa
Manual de tcnicas de Spinreact, Mxico 2003.
Pgina:
139
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Coombs Directo
1.- Objetivo
Pgina:
140
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
141
Manual de Procedimientos
Llevar a cabo la prueba de Coombs directo en la sangre del recin
nacido.
2.- Fundamento
Al investigar los grupos sanguneos del sistema Rh, Race demostr la
existencia de dos tipos de anticuerpos a los primeros los denomin normales o
completos, ya que aglutinaban directamente los eritrocitos suspendidos en
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
142
Manual de Procedimientos
solucin salina, y a los segundos, incompletos debido a que no aglutinaban los
eritrocitos en forma directa. Sin embargo, si se incubaban las clulas con los
anticuerpos incompletos, estas no podan aglutinarse despus por los
anticuerpos completos, por lo que a los anticuerpos incompletos se les
denomin tambin anticuerpos bloqueadores. La prueba de Coombs directa
sirve para detectar anticuerpos sobre el eritrocito, y la indirecta para identificar
los anticuerpos libres en el suero.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
3.- Material, reactivos e instrumental
Pgina:
143
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Suero de Coombs
Cronmetro
Termmetro
Solucin salina al 0.9%
Centrfuga
4.- Procedimiento
Pgina:
144
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
145
Manual de Procedimientos
Coombs
Del tubo 2 al 12 se le vana a poner a cada tubo 100 ul de solucin salina
0.9%
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
146
Manual de Procedimientos
glbulos rojos
Se centrifugan los tubos y se ven si hay o no aglutinacin
En caso negativo se les agrega 1 gota de albmina bovina y se meten en
los tubos a bao mara por 15 min a 37C
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
147
Manual de Procedimientos
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
148
Manual de Procedimientos
6.- Bibliografa
Jaime Prez Jos Carlos, David Gmez Almaguer. HEMATOLOGA La sangre y
sus enfermedades Edit. Mc. Graw Hill Mxico D.F. 2005 1era edic. cap. 1 pg. 7
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
149
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
150
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
151
Manual de Procedimientos
Coombs Indirecto
1.- Objetivo
Llevar a cabo la prueba de Coombs indirecto en el suero de la madre que
es Rh (-).
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
152
Manual de Procedimientos
2.- Fundamento
Se sensibilizan los glbulos rojos in vitro, por ejemplo, en el tubo de
ensayo, exponindolos en un suero que contengan anticuerpos incompletos si
se trabaja con un suero cuyo contenido de anticuerpos se conoce, puede
establecerse el contenido de antgeno (fenotipo) en los glbulos. Inversamente
si se realiza la prueba con glbulos de fenotipo conocido, puede saberse si un
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
153
Manual de Procedimientos
suero problema contiene los anticuerpos correspondientes. Son ejemplos de
esta segunda aplicacin, la prueba cruzada (q.v) y tambin las pruebas
prenatales.
3.- Material, reactivos e instrumental
Suero de la madre
11 tubos de ensayo 13 x 100
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
154
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
155
Manual de Procedimientos
Termmetro
Cronmetro
4.- Tcnica
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
156
Manual de Procedimientos
dilucin y se tiran
Preparar una suspensin de glbulos rojos o (+) al 5%
Aadir 100 ul de dicha suspensin de glbulos rojos a todos los tubos del
1 al 11
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
157
Manual de Procedimientos
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
158
Manual de Procedimientos
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
159
Manual de Procedimientos
No hay anticuerpos incompletos en suero de la madre o Coombs Indirecto
Negativo (-)
6.- Bibliografa
Lynch M.J / S.S. Raphael/L.D. Spare/M.J.H. Inwood MTODOS DE
LABORATORIO. Edit. Interamericana Vol. 2 cap. 23 pg. 850
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
160
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
161
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
162
Manual de Procedimientos
Coproparasitoscopico
1.- Objetivo
El examen Coproparasitoscopico sirve para investigar la presencia de
parsitos ya sea gusanos (helmintos) o protozoarios en heces.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
2.- Fundamento
Parsitos ms comunes:
Pgina:
163
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Dientamoeba fragilis
Hartmannella castellani
o Clase Mastigophora (flagelados) Especies:
Giardia lamblia
Chilomastix mesnili
Embadomonas intestinalis
Enteromonas hominis
Trichomonas hominis
Trichomonas vaginalis
Pgina:
164
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Leishmania
Tripanosoma
o Clase Haemosporidia Especies:
Pasmodium
o Clase Ciliata Especies:
Balatidium coli
o Clase incierta Especies:
Toxoplasma gondii
Nemocistis carinii
Pgina:
165
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
166
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Taenia solium
Taenia saginata
Enchinococcus granulosus
Enchinococcus multilocularis
Hymenolepis nana
Diphyllobothrium latum
Nematelmintos (gusanos redondos)
o Clase Aphasmidia Especies:
Trichinella spiralis
Pgina:
167
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Trichuris trichura
o Clase Plasmidia Especies:
Ancylostoma duodenale
Nector americanus
Irichostrongylus sp
Enterobius vermicularis
scaris lumbricoides
Toxocara canis y cati
Angiostrongylus cantonensis
Pgina:
168
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Strongyloides stercoralis
Arthropodos
o Clase Arachnidia (insectos) Especies:
Latrodectus mactans (araa)
Loxoceles (araas)
Ixodes (garrapatas)
Demodex follicolorum (caros)
Pgina:
169
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
170
Manual de Procedimientos
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
171
Manual de Procedimientos
humanas puede diagnosticarse a travs de examen de las heces ya que
habitan en las vas gastrointestinales. Muy pocos protozoarios que afectan al
ser humano causan problemas clnicos, pero casi todas las infecciones por
gusanos producen estados patolgicos. Los organismos que con mayor
frecuencia causa estados diarreicos relacionados con parsitos en EUA son
Giardia Lamblia y Entamobea histolytica. Giardia lamblia es quiz la que se
presente ms a menudo de las dos. La amibiasis causada por Entamobea
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
172
Manual de Procedimientos
histolytica, es una enfermedad ms grave. Ambos microorganismos son
resistentes a la acidez gstrica y sus quites o trofozoitos pueden encontrarse en
varias reas de las vas gastrointestinales (por ejemplo, los quistes de Giardia
se encuentran en muestras de heces). El principal sntoma de ambos
padecimientos es diarrea o evacuaciones voluminosas ftidas.
3.- Material, reactivos e instrumental
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
173
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pipeta graduada
Yodo lugol
Pgina:
174
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
4.- Procedimiento
Pgina:
175
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
176
Manual de Procedimientos
agua destilada
Despus del cuarto lavado se tira el sobrenadante y se aaden 5.0 ml de
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
177
Manual de Procedimientos
Reportar resultados
5.- Resultados
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
178
Manual de Procedimientos
6.- Bibliografa
Morrison Treseler Kathleen LABORATORIO CLNICO Y PRUEBAS DE
DIAGNSTICO. Edit. Manual moderno Mxico 1999 Cap. 9 pg. 330-334.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Creatinina
1.- Objetivo
Determinar la Creatinina en el suero de un paciente.
2.- Fundamento
Pgina:
179
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
180
Manual de Procedimientos
La reaccin qumica aplicable para fotometra es la descrita por Jaff
basada en el color anaranjado que se produce al reaccionar la Creatinina con el
picrato alcalino. Hay varias sustancias en el suero y la orina que actan como
cromgenos inespecficos, por lo que es un problema para el clculo del
aclaramiento. Por este motivo tiene una gran importancia la adecuacin de
todas las variables de la reaccin, muy especialmente el pH, con el fin de
obtener la mxima sensibilidad para la Creatinina y la mnima interferencia de
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
181
Manual de Procedimientos
cromgeno. Adaptando la reaccin a una medida cintica, se logra una gran
especificidad debido a que la Creatinina reacciona con el picrato alcalino con
ms rapidez que los cromgenos (metil guanidina, picramato) por lo que la
medida del incremento de color en un breve periodo de tiempo inicial de la
reaccin valorar principalmente Creatinina, con poca influencia de los
cromgenos inespecficos, por esto es recomendable hacer posible la
determinacin cintica.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
3.- Material, reactivos e instrumental
Pgina:
182
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Bao mara
Termmetro
Cronmetro
Estndar de Creatinina
Sueros control
4.- Procedimiento
Pgina:
183
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
184
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
185
Manual de Procedimientos
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
6.- Bibliografa
Manual de tcnicas de reactivos Spinreact Mxico D.F.
Pgina:
186
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
187
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
188
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
189
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
190
Manual de Procedimientos
Depuracin de Creatinina en orina de 24 horas
1.- Objetivo
La depuracin de Creatinina es un mtodo til para seguir los procesos
una enfermedad renal evolutiva.
2.- Fundamento
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
191
Manual de Procedimientos
El grupo de pruebas que en general se designan como pruebas de
depuracin renal son un medio extremadamente til, eficaz y sensible de medir
la capacidad de eliminacin del rin pues miden la cantidad de una sustancia
eliminada en la orina en comparacin con la concentracin de la misma
sustancia
en
el
plasma.
Por
ello
las
pruebas
de
depuracin
son
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
192
Manual de Procedimientos
protenicos en suero o en plasma, los cuales pueden no estar en cantidades
anormales hasta que no se han producido disminucin importante en la funcin
renal (por debajo del 50% del valor normal).
La cantidad de sustancia bajo investigacin depurada por el rin se
expresa en general como el volumen de plasmas que contienen la cantidad de
sustancia eliminada en la orina, o sea, depuracin es el volumen de plasma en
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
193
Manual de Procedimientos
ml que puede ser limpiado (depurado) de una sustancia dada, por los riones,
en un minuto. Esto puede expresarse matemticamente como sigue:
Ml de plasma depurado por minuto = O/P x V en donde O=Concentracin de la
sustancia en orina, P=Concentracin de la sustancia en plasma y V=Volumen
de orina por minuto expresado en ml.
Volumen total en ml/tiempo en minutos.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
194
Manual de Procedimientos
La concentracin de la sustancia de orina y en plasma puede expresarse
en cualquier unidad que sea cmoda, pero por costumbre se usa mg/dl.
O y P han de expresarse en las mismas unidades. Con igualdad de todos
los dems factores, la velocidad de depuracin es aproximadamente
proporcional al tamao del rin y al rea de la superficie corporal del individuo.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
195
Manual de Procedimientos
Por ello, el clculo de la depuracin de una sustancia dada. Han de entraar
correccin por las desviaciones de la superficie medida del adulto.
Esto se consigue agregando el factor 1.73/S, en dnde 1.73 es la
superficie media del cuerpo aceptada en general en metros cuadrados, y S es
la superficie del cuerpo del paciente en estudio.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
196
Manual de Procedimientos
La frmula para calcular la depuracin renal se puede ampliar por ello
como sigue:
Ml depurados por minuto=O/P x V x 1.73/S. EL rea de la superficie corporal
puede determinarse a partir de uno de los nomogramas disponibles o mediante
la siguiente formula: S=167.2 x (peso en kg)1/2 (altura en cm)1/2
3.- Material, reactivos e instrumental
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
197
Manual de Procedimientos
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Analizador RA 50
Agua destilada
Tubos de ensayo
Cubetas para RA 50
4.- Procedimiento
Pgina:
198
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
199
Manual de Procedimientos
corporal
Centrifugar la nuestra de sangre
Medir y anotar el volumen de orina de 24 horas
Preparar una dilucin con la orina 1.25 con agua destilada
Procesar la Creatinina en suero
Procesar la Creatinina con la orina diluida
Anotar resultados y hacer clculos
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
200
Manual de Procedimientos
5.- Resultados y valores de referencia
O/P x V x 1.73/S
Volumen: Se divide el volumen de orina de 24 horas/1440 minutos para
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
201
Manual de Procedimientos
6.- Bibliografa
Lynch M.J S.S. Raphael, L.D. Mellor, P.D. Spare, M.J.H. Inwood MTODOS DE
LABORATORIO. 2da Edicin Edit. Interamericana Vol. 1 cap. 6 pg. 122-124
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
202
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
203
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
204
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
205
Manual de Procedimientos
Espermatobioscopia Directa
1.- Objetivo
Proporcionar un panorama general de los principales procedimientos
utilizados en el Laboratorio.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
206
Manual de Procedimientos
2.- Fundamento
El anlisis de semen es la piedra angular en la valoracin androlgica de
los pacientes que presentan problemas de infertilidad, valora la integridad del
eje hipotlamo-hipfisis-testculos que ayuda al diagnstico, tratamiento y
manejo se los pacientes que presentan disfunciones prostticas, disfunciones
eyaculatorias,
varicocele,
cncer
vasectomizados y recanalizados.
testicular,
as
como
de
pacientes
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
207
Manual de Procedimientos
El anlisis de semen manual es un procedimiento fcil, rpido y nada
costoso
potencialmente frtiles.
3.- Material, reactivos e instrumental
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
208
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
209
Manual de Procedimientos
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
210
Manual de Procedimientos
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
211
Manual de Procedimientos
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
212
Manual de Procedimientos
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
213
Manual de Procedimientos
4.1 Protocolo de la prueba
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
214
Manual de Procedimientos
normal. Las muestras normales o anormales pueden presentar
grnulos gelatinosos de los cuales se desconoce hasta la fecha su
importancia clnica y su repercusin sobre el estudio.
Lmite de referencia: La muestra debe licuar dentro de los 30 60
minutos a temperatura ambiente luego de ser recolectada.
LABORATORIO NOVO
Pgina:
215
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Calificacin:
1=
Normal
(Si
la
muestra
cumple
con
las
especificaciones anteriores)
2= Anormal
o Volumen: Se determina virtiendo el semen en un tubo cnico
graduado
bien
con
una
pipeta
graduada
de
vidrio.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
216
Manual de Procedimientos
Lmite de referencia: Normal: mayor a 2.0 ml. Anormal: menor a
2.0 ml.
La disminucin del volumen del lquido seminal por debajo del
lmite de referencia se denomina hipospermia.
o Aspecto: Se valora por observacin visual
Lmite de referencia: Las muestras normales presentan un
apariencia homognea GRIS OPALESCENTE.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
217
Manual de Procedimientos
Calificacin:
1=
Normal
Si
la
muestra
cumple
con
las
especificaciones anteriores.
2= Anormal.
o Consistencia o viscosidad. Se valora con la ayuda de una pipeta
Pasteur o graduada.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
218
Manual de Procedimientos
Lmite de referencia: La muestra es normal si gotea libremente y si
forma un filamento de ms de 2 cm, entonces la muestra presenta
la viscosidad alterada y es anormal.
Calificacin: 1= Normal (si la muestra gotea libremente)
2= Anormal (si la muestra forma un filamento de 2 cm o ms)
o pH: Se valora con tiras de pH en un rango de 5 a 14.
Lmite de referencia: pH de 7.2 8.0
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
219
Manual de Procedimientos
uno
de
los
espermatozoides
hasta
llegar
100
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
220
Manual de Procedimientos
espermatozoides, clasificndolos tal y como se vayan observando
en:
A.
B.
C.
D.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
221
Manual de Procedimientos
Es necesario realizar la observacin de 4 a 6 campos en el centro
de la preparacin para verificar que la distribucin fue homognea
y evitar una fuente de error.
Es conveniente repetir el recuento de la motilidad contando otros
100 espermatozoides y si los resultados no difieren en ms de un
10% se pueden promediar; de ser mayor el porcentaje es
preferible montar otra preparacin.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
222
Manual de Procedimientos
Lmite de referencia: 50% o ms con progresin antergrada
(A+B) o 25 % o ms progresin lineal rpida (A). A los 60 min
despus de haber sido recolectada la muestra.
Si el paciente presenta disminucin de la motilidad se denomina
Astenozoospermia la cual debe clasificarse en:
Astenozoospermia leve: Se observa del 40 al 50 % de motilidad
progresiva.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
223
Manual de Procedimientos
Moderada: Se observa del 20 al 40 % de
motilidad progresiva.
Severa: Se observa menos del 20 % de
motilidad progresiva.
o Valoracin de otros elementos celulares: Leucocitos, bacterias,
eritrocitos, clulas germinales, clulas epiteliales y detritus
celulares.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
224
Manual de Procedimientos
En la misma preparacin donde se observa la motilidad se pueden
valorar
todos
los
elementos
celulares
anteriormente
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
225
Manual de Procedimientos
inespecfica (los espermatozoides se aglutinan con cualquier otra
cosa que no sea espermatozoide: leucocitos, clulas germinales,
etc).
especifica (aglutinacin de un espermatozoide con otro
espermatozoide puede ser cabeza con cabeza, flagelo con flagelo,
pieza media con flagelo, cabeza o combinaciones de estos).
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
226
Manual de Procedimientos
Lmites de referencia: Leucocitos: menos de 1,000,000 x ml (0-1
leucocito por campo)
Eritrocitos: no deben encontrarse
Bacterias: no deben encontrarse
Clulas germinales: mximo 2+.
Clulas epiteliales: mximo 1+.
Detritus celulares: mximo 1+.
Aglutinacin especfica: negativa (-).
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
227
Manual de Procedimientos
o Viabilidad: se emplea una tensin supravital con eosina Y en
preparados frescos o con eosina-nigrosina en preparados secos.
Su principio se basa en que las clulas muertas cuyas membranas
de la cabeza estn daadas permiten el paso del colorante
tindolas.
La viabilidad se valora colocando en el otro extremo del
portaobjetos 10 mcl de la muestra de semen ms 10 mcl de
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
228
Manual de Procedimientos
eosina al 0.5% en solucin salina, se mezclan y se coloca un
cubreobjetos para observar al microscopio en 40X.
Al igual que la motilidad se deben observar de 4 a 6 cuadrantes
contando 100 espermatozoides diferenciando los que estn
teidos (muertos) de los que no estn teidos (vivos)
Calificacin: Se reporta el % de espermatozoides vivos (no
teidos)
Lmite de referencia: mayor o igual a 75%
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
229
Manual de Procedimientos
Es importante verificar que el porcentaje de la viabilidad reportado
debe ser mayor o igual al de la suma de la motilidad en A ms
B ms C.
o Concentracin: se determina con la cmara de Neubawer. Se
llena la cmara con una dilucin 1.20 de semen con citrato de
sodio al 3.8% utilizando una pipeta para glbulos blancos. Se
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
230
Manual de Procedimientos
cuentan 2 cuadrantes de la cmara de los que se utilizan para
determinar glbulos blancos y el resultado se divide entre 10.
Lmite de referencia: 20 millones de espermatozoides por ml o
ms.
Si el paciente presenta disminucin de la concentracin se
denomina Oligozoospermia y se clasifica en:
Oligozoospermia leve: 11-19 millones de espermatozoides/ml
Moderada: 5-10 millones de espermatozoides/ml
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
231
Manual de Procedimientos
Severa:
menos
de
millones
de
espermatozoides /ml.
o Morfologa: se valora realizando un frotis como en hematologa y
se tie por Papanicolaou, tincin que permite diferenciar cada una
de las partes del espermatozoide, se observa al microscopio a
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
232
Manual de Procedimientos
100X y se valoran 100 espermatozoides, examinando la forma de
la cabeza, acrosoma, parte media y flagelo.
Con la tincin del Papanicolaou el acrosoma se tie azul claro y
de azul oscuro la regin posacrosomal, la pieza media se tie rojo
plido, el flagelo de azul y la gota citoplsmica de verde. Los
leucocitos por presentar puentes de cromatina bien definidos que
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
233
Manual de Procedimientos
permiten diferenciarlos de las clulas germinales las cuales
presentan los ncleos separados y redondos.
Los espermatozoides normales de acuerdo a los criterios estrictos
de Kruger deben poseer una cabeza oval sin bordes irregulares, el
acrosoma debe estar bien definido y debe cubrir del 40-70% de la
cabeza, no debe haber defectos en el cuello, pieza media ni cola,
y la gota citoplsmica no debe ser mayor de 1/3 de la cabeza del
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
234
Manual de Procedimientos
espermatozoide.
Todas
las
formas
dudosas
deben
se
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
235
Manual de Procedimientos
espermatozoide; otra tincin es la de Shorr que es muy simple de
usar y es suficiente para evaluar la forma rutinaria la morfologa;
otra tincin es la de Bryan-leishman que permite identificar bien a
los espermatozoides y es til para diferenciar clulas germinales
inmaduras de leucocitos.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
236
Manual de Procedimientos
Lmites de referencia: criterios estrictos de Kruger: 14% ms de
formas normales. Si el paciente presenta disminucin de las
formas normales se denomina Teratozoospermia.
5.- Bibliografa
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
237
Manual de Procedimientos
I.
II.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
238
Manual de Procedimientos
III.
SU Chem y cols When is the pois coital test normal? A critical appraisal.
Human Reproduction. 1995, 10:(7): 1711-1714.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
239
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
240
Manual de Procedimientos
Examen General de Orina
1.- Objetivo
Realizar un examen general de orina para determinar el metabolismo de
carbohidratos, funcin heptica y renal, balance cido base e infecciones del
tracto urinario.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
241
Manual de Procedimientos
2.- Fundamento
Las tiras reactivas que actualmente se utilizan son Multistix 10 SG de
Ames- Bayer. La tiras reactivas de Ames- Bayer para urianlisis son bases
plsticas en las que hay adheridas diversas reas reactivas para determinar la
glucosa, bilirrubina, cetonas (cido acetoactico), gravedad especfica, sangre,
pH, protenas, urobilingeno, nitrito y leucocitos en la orina. Las pruebas que se
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
242
Manual de Procedimientos
pueden realizar, dependen del tipo de tira que se este empleando. Los
resultados obtenidos con las tiras reactivas de Ames-Bayer proporcionan
informacin referente al metabolismo de carbohidratos, funcin heptica y renal,
balance cido base e infecciones del tracto urinario.
-Glucosa tiempo de lectura 30 seg.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
243
Manual de Procedimientos
Esta prueba se basa en una doble reaccin esencial de enzimas. Una
enzima la glucosa oxidada, cataliza la formacin de cido glucnico y perxido
de hidrgeno a partir de la oxidacin de la glucosa. Una segunda enzima la
peroxidasa, cataliza la reaccin del perxido de hidrgeno con un cromgeno
de yoduro de potasio, el cual es oxidado produciendo colores que van del verde
al caf. La prueba es especfica para la glucosa. No se conoce otra sustancia
que secretada en la orina d un resultado positivo. El rea reactiva no reacciona
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
244
Manual de Procedimientos
con lactosa, galactosa, fructuosa, o metabolitos reductores de medicamentos
(por ejemplo salicilatos y cido nalidxico). Esta prueba puede ser utilizada para
determinar si la sustancia reductora encontrada en orina es glucosa.
-Bilirrubina tiempo de lectura 30 seg.
Esta prueba se basa en el acoplamiento de la bilirrubina con la
dicloroanilina diazotizado en un medio fuertemente cido. El color es crema
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
245
Manual de Procedimientos
para resultados negativos y vara dentro de distintos tonos claros de color caf
para resultados positivos. Normalmente no se detecta bilirrubina en la orina,
an por los mtodos ms sensibles. Cualquier cantidad de bilirrubina se
considera anormal y se requiere de una evaluacin ms a fondo. Los colores
atpicos (diferentes a los cuadros de color negativo y positivo de la carta de
colores) pueden indicar que hay pigmentos biliares anormales derivados de la
bilirrubina que pueden enmascarar la reaccin, por lo que es conveniente
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
246
Manual de Procedimientos
realizar pruebas adicionales por ejemplo con las tabletas reactivas Ictotest que
son ms sensibles. El sulfato de indoxilo (indican) puede producir un color
amarillo-naranja a rojo que puede interferir en la interpretacin de la lectura
negativa.
-Cetona tiempo de lectura 40 seg.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
247
Manual de Procedimientos
Esta prueba se basa en la reaccin del cido acetoactico con el
nitroprusiato de sodio. Las tiras Ames-Bayer no reaccionan con acetona o cido
beta-hidroxibutrico. Algunas orinas con gravedad especfica alta o pH bajo
pueden dar resultados positivos incluyendo trazas. Las lecturas negativas
producen un color caf claro y las positivas colores que van desde rosa hasta
purpura. Las muestras de orina normal, generalmente dan resultados negativos
para cetonas. Niveles detectables de cuerpos cetnicos pueden aparecer en
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
248
Manual de Procedimientos
caso de dieta, estados de tensin (estrs), embarazo o ejercicio intenso
frecuente. En acetoacidosis o ayuno prolongado, junto con otras alteraciones
del metabolismo lipdico o de carbohidratos pueden encontrarse altas
concentraciones de cetona en orina antes de que se manifiesten en suero.
-Gravedad especifica tiempo de lectura 45 seg.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
249
Manual de Procedimientos
Esta prueba se basa en el cambio aparente de pka de ciertos
polielectrolitos pre tratados en relacin con la concentracin inica. En
presencia de un indicador los colores varan desde un verde-azul obscuro en
orinas con concentracin baja pasando por tonalidades verdes, hasta un verdeamarillo en orina con alta concentracin inica. Esta prueba permite la
determinacin de la gravedad especfica de la orina entre 1,000 y 1,030. En
general existe una correlacin que no rebasa las 0.005 unidades de los valores
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
250
Manual de Procedimientos
obtenidos con el mtodo del ndice de refraccin. En orinas con un pH igual o
mayor a 6.5 se puede mejorar la exactitud aadiendo 0.005 al valor obtenido. Si
la lectura es instrumental el ajuste es automtico. Sustancias no inicas
presentes en la orina tales como la glucosa o el medio del contraste radiolgico
no afectan esta prueba. La gravedad especifica de orinas recolectadas al azar
puede variar de 1,001 a 1,035 en orinas recolectadas por 24 horas de adultos
sanos y con una ingesta normal de agua se encuentran valores de 1,016 a
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
251
Manual de Procedimientos
1,022. Debido a los diferentes constituyentes agregados a los controles
comerciales diferentes a Check stix o a la manera en que estos son
procesados, los valores obtenidos de gravedad especfica pueden no siempre
corresponder con los valores dados con los insertos de tales productos.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
252
Manual de Procedimientos
-Sangre tiempo de lectura 60 seg.
Esta prueba se basa en la similitud entre la actividad de la peroxidasa y
la actividad de le hemoglobina, las cuales catalizan la reaccin del dihidroperxido de di-isopropilbenceno y la 3.3,5.5-tetrametilbencidina. El color
resultante vara del amarillo naranja hasta verde oscuro o azul, en orinas con
altos niveles de sangre. El color verde homogneo indica la presencia de
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
253
Manual de Procedimientos
hemoglobina o mioglobina libre ya que la prueba es igualmente sensible a estas
2 sustancias. El desarrollo de puntos verdes indica la presencia de eritrocitos
intactos, la escala visual permite detectar trazas o cantidades moderadas de
eritrocitos no hemolizados. Las reacciones que van de trazas hasta alto pueden
observarse con moteado proporcionalmente numeroso. Una concentracin de
hemoglobina de 0.015-0.062 mg/dl equivale aprox. A 15-20 eritrocitos intactos
por microlitro. Debido al sistema ptico de los instrumentos, los valores
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
254
Manual de Procedimientos
eritrocitos intactos pueden ser menores que el valor apreciado visualmente. El
significado de encontrar trazas puede variar de paciente a paciente y se
necesita del juicio clnico para evaluar cada caso en particular. El desarrollo de
puntos verdes (no lisados) o color verde homogneo (hemoglobina/mioglobina)
en el rea reactiva dentro de los primeros 60 seg. Indica la necesidad de
realizar una valuacin ms a fondo. A menudo se encuentra sangre, aunque no
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
255
Manual de Procedimientos
siempre, en orinas de mujeres que estn menstruando. Esta prueba es de gran
sensibilidad a la hemoglobina y se completa con el examen microscpico.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
256
Manual de Procedimientos
-pH tiempo de lectura 60 seg.
Esta prueba se basa en un principio de doble indicador que produce una
amplia gama de colores, cubriendo los lmites del pH urinario por completo. Los
colores desarrollados van del naranja al amarillo y del verde al azul. El rea de
prueba del pH mide valores de 5.0-8.5 en forma visual y de 5.0-9.0 en forma
instrumental. Las lecturas del pH no se alteran por las variaciones de
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
257
Manual de Procedimientos
amortiguadores urinarios. De no seguir el procedimiento correcto para eliminar
exceso de orina en la tira, se puede producir un fenmeno conocido como
corrimiento, en el cual el amortiguador cido del rea reactiva para protena
contamina el rea de pH dando un resultado falsamente disminuido. Los valores
normales y anormales de pH urinario van de 5.0-9.0 cada 100 mg de reactivo
de impregnacin contiene: 0.2 mg de rojo de metilo, 2.8 mg de azul de
bromotimol, 97.0 mg de ingredientes no reactivos.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
258
Manual de Procedimientos
-Protenas tiempo de lectura 60 seg.
Esta prueba se basa en el principio de error proteico de los indicadores
de los indicadores. A un pH constante el desarrollo de cualquier color verde es
debido a la presencia de protenas. El rango de colores va de amarillo para
negativo pasando por verde-amarillo y verde a verde-azul para resultados
positivos. Normalmente se excreta una cantidad mnima de protena por el
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
259
Manual de Procedimientos
rin, pero no se detecta por mtodos convencionales. Un color comprobable a
cualquier bloque de color mayor al de trazas, indica proteinuria significativa.
Para orinas con alta gravedad especfica, la tira podr indicar trazas aun
cuando sea normal la concentracin de protenas presentes. Se necesita el
juicio clnico para evaluar el significado de los resultados de trazas. Se pueden
obtener resultados falsos positivos con muestras de orina alcalina o altamente
amortiguada as como con residuos de compuestos cuaternarios de amonio
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
260
Manual de Procedimientos
(por ejemplo algunos antispticos y detergentes) o con limpiadores de la piel
que contengan clorhexidina. El rea reactiva es ms sensible a la albmina que
a las globulinas, hemoglobina, protena de Bence Jones y mucoprotena. Por lo
tanto un resultado negativo no descarta la presencia de estas otras protenas.
-Urobilingeno tiempo de lectura 60 seg.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
261
Manual de Procedimientos
Esta prueba se basa en una modificacin de la reaccin de Ehrlich, en la
cual el pdietilaminobenzaldehido en combinacin con un intensificador de color
reacciona urobilingeno en medio fuertemente cido. Los colores producidos
varan de una tonalidad rosa plido hasta rosa intenso. Esta rea reactiva
detecta urobilingeno en concentracin estn bajas como 0.2 mg/dl que
aproximadamente equivalen a 2.0 unidades Ehrlich. La ausencia de
urobilingeno no puede ser determinada con esta prueba.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
262
Manual de Procedimientos
Los lmites normales obtenidos con esta prueba varan de 0.2 a 1.0 mg/dl
(1.0 mg/dl es aproximadamente 1.0 UIE). Un resultado de 2.0 mg/dl representa
la transicin entre un estado normal y un patolgico, debiendo someter al
paciente y/o la muestra a exmenes posteriores.
Esta rea reactiva puede reaccionar con sustancias que se sabe
interfieren con el reactivo de Ehrlich, tales como el cido p-aminosalicilico y las
sulfonamidas. En presencia del cido p-aminobenzoico es posible tener
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
263
Manual de Procedimientos
reacciones de color atpico. Es posible obtener resultados falsos negativos
cuando hay presencia de formalina. La temperatura ptima para realizar la
prueba es de 22-26 C porque la reactividad de esta rea aumenta con la
temperatura.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
264
Manual de Procedimientos
-Nitritos tiempo de lectura 60 seg.
Esta prueba depende de la conversin de nitratos (obtenidos de la dieta)
a nitritos, por la accin de bacterias gram(-) en la orina. A pH cido del rea
reactiva, los nitritos de la orina reaccionan con cido p-arsanlico para formar un
compuesto de diazonio. Este compuesto a su vez reacciona con el 1,2,3,4tetrahidrobenceno (h) quinolin-3-ol para producir un color rosa. La prueba es
especfica para nitritos por lo que no reacciona con ninguna otra sustancia
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
265
Manual de Procedimientos
normalmente excretada en la orina. Los puntos o bordes de color rosa no deben
interpretarse como resultados positivos, nicamente cualquier grado de color
rosa uniforme que se desarrolle deber interpretarse como un resultado positivo
que sugiere la presencia de 10 a la quinta, o ms microorganismos sobre ml. La
intensidad del color no es proporcional a la cantidad de bacterias presentes. La
comparacin del rea reactiva contra un fondo blanco puede ayudar en la
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
266
Manual de Procedimientos
deteccin de niveles bajos del in nitrito, que de otra manera pueden pasar
desapercibidos.
-Leucocitos tiempo de lectura 2 min.
Cualquier cambio de color despus de los 2 minutos carece del valor
diagnstico. Los leucocitos granulocitos contienen esterasas que catalizan la
hidrlisis del derivado ster cido aminopirrol, liberando 3-hidroxi-5 fenil pirrol.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
267
Manual de Procedimientos
Este compuesto de pirrol reacciona con una sal de diazonio. El color de la
reaccin negativa es crema y violeta para las reacciones positivas. La
sensibilidad de la prueba ha sido verificada por diversos estudios clnicos,
generalmente las muestras de orina normal darn resultados negativos. Los
resultados positivos (bajo o ms) son significativos. Los resultados individuales
de trazas vistos espordicamente pueden ser de importancia clnica dudosa, no
as cuando estos resultados se repiten en forma constante, lo cual indica la
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
268
Manual de Procedimientos
necesidad de realizar exmenes adicionales al paciente y/o a su orina, de
acuerdo a los patrones mdicos para la deteccin de piuria. Adems se pueden
encontrar resultados en forma ocasional en muestras de mujeres debido a la
contaminacin del espcimen por descarga vaginal o debido a causas externas
al tracto urinario.
3.- Material, reactivos e instrumental
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Muestra de orina
Centrifuga
Tiras para orina Multistix 10 SG Ames-Bayer
Cronmetro
Tubos de ensayo
Gradilla
Pgina:
269
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
270
Manual de Procedimientos
4.- Procedimiento
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
271
Manual de Procedimientos
o Aspecto. Se valora al observar desde arriba al fondo del tubo. Si
se ve perfectamente es transparente si se ve ms o menos
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Se centrifuga la orina
Se tira el sobrenadante
Se observa el sedimento al microscopio y se anota los resultados
pH de 5-7
Color: amarillo claro a mbar
Pgina:
272
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
273
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Sangre(-)
Examen microscpico del sedimento
Leucocitos: 4-5 por campo
Eritrocitos: 2-3 por campo
Clulas algunas epiteliales
Cristales: no hay
Cilindros escasos tipo hialino
Piocitos: no hay
Monilias: no hay
Pgina:
274
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
275
Manual de Procedimientos
6.- Bibliografa
Inserto de tiras por orina Multistix 10 SG de Ames-Bayer, Mxico DF 2001
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
276
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
277
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Factor Reumatoide
1.- Objetivo
Pgina:
278
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
279
Manual de Procedimientos
Determinar el factor reumatoide en una persona que se sospeche
padezca de artritis reumatoide u otra enfermedad similar: fiebre reumtica,
lupus eritermatoso, etc.
2.- Fundamento
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
280
Manual de Procedimientos
Es una prueba rpida en placa que aglutina inmunoglobulinas anormales
en suero conocidas como factor reumatoide. En presencia de partculas de
ltex sensibilizadas con gama globulina humana.
3.- Material, reactivos e instrumental
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Gradilla
Placa
Suero control
Reactivo ltex globulina
Amortiguador
Pipetas automticas
Puntas para pipetas
Pgina:
281
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
4.- Procedimiento
Mtodo cualitativo
Colocar el tubo en una gradilla
Pgina:
282
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
283
Manual de Procedimientos
8.2)
Aadir 0.05 ml de suero problema
Despus de haber agregado el suero problema la disolucin
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
284
Manual de Procedimientos
Aadir a cada uno de los tres anillos una gota del frasco 1
macroscpicos
Resultado negativo (-): ausencia de agregados macroscpicos
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
285
Manual de Procedimientos
Mtodo semicuantitativo
cualitativa
Colocar en una gradilla 8 tubos y numerarlos
Depositar al tubo 1 1ml del frasco 4
Depositar del tubo 2 al 8 0.05ml del frasco 4. Diluido.
Aadir al tubo 1 0.05ml de suero problema y mezclar
Pasar 0.50ml del tubo 1 al tubo y mezclar
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
286
Manual de Procedimientos
diferentes de la placa
Aadir una gota del frasco 1 a cada una de las diluciones
Mezclar manualmente la placa de reaccin durante 2 minutos
Realizar la lectura del resultado en este momento
Interpretacin
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
287
Manual de Procedimientos
Ejemplo:
Tubo 1 2 3 4 5 6 7 8 Resultado Dil. 1:20 1:40 1:80 1:160 1:320 1:64
0 1:1280 1:2560
Pos 1:320
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
5.- Valores de referencia
Normalmente no hay factor reumatoide en sangre.
6.- Bibliografa: Mtodos analticos de Lincoln, Mxico
Pgina:
288
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Fosfatasa Alcalina
Pgina:
289
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
290
Manual de Procedimientos
1.- Objetivo
Determinar la fosfatasa alcalina de la muestra de suero de un paciente.
2.- Fundamento
La fosfatasa alcalina hidroliza los steres del cido fosfrico en medio
alcalino, produciendo fosfato inorgnico y el correspondiente resto orgnico con
el que se haba esterificado.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
p-nitrofenilfosfato
ALP
p-nitrofenol + fosfato
Pgina:
291
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Tubos de ensayo
Gradillas
Reactivo para fosfatasa alcalina
Analizador RA 50
Cubetas para RA 50
Pipetas automticas
Puntas para pipetas
Sueros control
Pgina:
292
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
4.- Procedimiento
Centrifugar la sangre
Separar el suero
Seleccionar ALP en la RA 50
Poner un tubo 1.0 ml de solucin de trabajo
Aadir 20 ul de suero o control
Pgina:
293
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
294
Manual de Procedimientos
RA 50
Dejar que el aparato de su resultado
Reportar el formato correspondiente
25C
30C
37C
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
295
Manual de Procedimientos
Nios (U/L)
Adultos (U/L)
110-720
60-170
6.- Bibliografa
Manual de Tcnicas Serapak Bayer. Mxico
145-950
80-220
180-1,200
100-290
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
296
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
297
Manual de Procedimientos
1.- Objetivo
Determinar el GGT es el suero de un paciente.
2.- Fundamento
La determinacin cintica de la gamma glutamil transferasa (GGT)
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
298
Manual de Procedimientos
GLUPA-C + Glicilglicina
amino
GGT
L-gamma-glutamil-gliciglicina + cido 5
2 nitrobenzoico.
GLUPA C: L-gamma-glutamil-3-carboxi-P-nitroanilida
3.- Materia, reactivos e instrumental
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Gradilla
Tubos de ensayo
Pipetas
Puntas para pipeta
Reactivo para determinar GGT, Serapak Bayer
Cubetas para RA-50
Analizador RA-50
Bao Mara
Cronmetro
Pgina:
299
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Termmetro
Sueros control
4.- Procedimiento
Centrifugar la sangre
Separar el suero en un tubo
Preparar la solucin de trabajo
Pgina:
300
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
301
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
302
Manual de Procedimientos
Mujeres (U/L)
Hombres (U/L)
25C
4-18
6-28
30C
5-25
8-38
6.- Bibliografa
Manual de tcnicas de laboratorio de Serapak Bayer Mxico.
Glucosa God Pap Trinder Spinreact
37C
7-32
11-50
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
303
Manual de Procedimientos
1.- Objetivo
Determinar la glucosa en ayunas de un paciente determinado.
2.- Fundamento
La glucosa (a y b D-glucopiranosa) es un sustrato hidrosoluble que
constituye el principal alimento energtico de las clulas. Es absorbida, casi
siempre bajo la forma de polisacrido, (almidn, glucgeno), o de disacridos
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
304
Manual de Procedimientos
(sacarosa, lactosa maltosa). Estas sustancias son degradadas parcialmente por
la accin de la amilasa salival y posteriormente por una hidrlisis cida en el
estmago. Los oligcidos liberados son escindidos por las amilasas
pancreticas y los disacridos intestinales en monosacricos, de los cuales el
principal es la glucosa. La absorcin de la glucosa a nivel de tubo digestivo es
un mecanismo de transporte activo que, una vez entrando en circulacin, se
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
305
Manual de Procedimientos
reparte entre los diferentes compartimientos: circulatorio (sanguneo, linftico),
intestinal y tisular.
A nivel del hgado y de los msculos, la forma primaria de
almacenamiento de la glucosa es el glucgeno (polmero de almacenaje). La
glucosa circulante es captada por las clulas de los diferentes rganos y les
sirve de sustrato energtico principal (gluclisis) en caso de necesidad
energtica
anormal
(esfuerzo),
hay
una
movilizacin
del
glucgeno
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
306
Manual de Procedimientos
(glucogenlisis) y/o una biosntesis de glucosa (neoglucogenlisis). El
mantenimiento de la glucemia dentro de los valores normales asegura una
aportacin energtica permanente a las clulas.
Glucosa + O2+ H2O
2H2O2+ Fenol + 4 AF
3.- Material, reactivos e instrumental
H2O2+ Gluconato
Quinona + 4H2O
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
307
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Sueros control
Termmetro
Cronmetro
4.- Procedimiento
Pgina:
308
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
309
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
5.- Valores de referencia
De 70-105 mg%
6.- Bibliografa
Manual de procesos de Spinreact. Lab. center Mxico 2002
Pgina:
310
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
HIV
1.- Objetivo
Determinar el virus de HIV en la sangre del paciente.
2.- Fundamento
Pgina:
311
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
312
Manual de Procedimientos
El virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) es un retrovirus
identificado en 1983 como el agente etiolgico del sndrome de la
inmunodeficiencia adquirida (SIDA). El virus VIH consiste en una molcula
genmica de ARN asociada con una transcriptasa inversa protegida por una
cpside y una envoltura. Se han diferenciado dos tipos: VIH-1 y VIH-2.
Las vas principales de transmisin de VIH son el contacto sexual,
contaminacin por sangre o sus productos, y transmisin de la madre al recin
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
313
Manual de Procedimientos
nacido. El VIH afecta principalmente a los linfocitos CD4. El descenso
progresivo del nivel CD4 durante el desarrollo de la enfermedad facilita las
enfermedades oportunistas con consecuencias fatales. Actualmente el anlisis
de suero para detectar anticuerpos al VIH es el mtodo ms comn para
tamizar infecciones.
3.- Material, reactivos e instrumental
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
314
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
315
Manual de Procedimientos
4.- Procedimiento
muestras
Aplicar 2 gotas de reactivo de lavado (que facilite el flujo de la muestra
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
316
Manual de Procedimientos
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
317
Manual de Procedimientos
Dispositivo de Pruebas
Prueba de Muestras
control
Lnea de pruebas
Lnea de
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
6.- Bibliografa
Pgina:
318
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Manual de tcnicas PBS Orgenics, USA 2004
Pgina:
319
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
320
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
321
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Lipasa
1.- Objetivo
Pgina:
322
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
323
Manual de Procedimientos
Determinar la cantidad de lipasa que contiene la sangre del paciente
2.- Fundamento
La lipasa pancretica en presencia de colipasa, desoxicolato e iones
calcio, hidroliza el sustrato 1-2-0-dilauryl-rac-glycero-3-glutrico cido-(6metilresorufina)-ster, segn la secuencia de reacciones siguientes.
LABORATORIO NOVO
Pgina:
324
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
1-2-0-dilauryl-rac-glycero-3-glutrico
cido-(6-metilresorufina)-ster
1-2Lipasa
0-dilauryl-rac-glycero + glutrico cido-(6-metilresorufina)-ster (no estable)
OH
OH
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
3.- Material, reactivo e instrumental
Pgina:
325
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Agua destilada
Gradilla
Termmetro
Cronmetro
Bao mara
4.- Procedimiento
Pgina:
326
LABORATORIO NOVO
Pgina:
327
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Agua Destilada
Blanco
10 ul
Standard
--
Muestra
--
Standard
--
10 ul
--
Muestra
--
--
10 ul
R.1
1.0 ul
1.0 ul
1.0 ul
R.2
100 ul
100 ul
100 ul
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
328
Manual de Procedimientos
5.- Bibliografa
Manual de tcnicas Spinreact, Mxico
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
329
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Protena C Reactiva
1.- Objetivo
Determinar la Protena C Reactiva en la sangre de un paciente
2.- Fundamento
Pgina:
330
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
331
Manual de Procedimientos
Protena C Reactiva es una prueba rpida en un placa que aglutina una
protena que se encuentra en suero de pacientes con diversas enfermedades
inflamatorias conocida como Protena C Reactiva, en presencia de partculas
ltex sensibilizadas con Anti-Protena C Reactiva.
3.- Material, reactivo e instrumental
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Centrfuga
Tubos de ensayo
Gradilla
Suero control
Placa de reaccin
Suero problema
Pgina:
332
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
333
Manual de Procedimientos
4.- Procedimiento
Mtodo Cualitativo
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
334
Manual de Procedimientos
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
335
Manual de Procedimientos
Aadir a cada uno de los 3 anillos una gota del frasco No. 1 (ltex anti-
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
336
Manual de Procedimientos
comparable al control negativo. La no aglutinacin o una ligera aparicin
de granulosidad que no exceda a la observada el control negativo indica
un resultado (-).
Mtodo Semicuantitativo
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
337
Manual de Procedimientos
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
338
Manual de Procedimientos
Aadir una gota del frasco No. 1 a cada una de las diluciones
Mezclar manualmente la placa de reaccin por 2 minutos
Realizar la lectura del resultado en este momento
El ttulo del suero problema ser la ltima dilucin que presente
agregados macroscpicos (aglutinacin)
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Normalmente no hay protena C-reactiva en el suero.
6.- Bibliografa
Mtodo analtico de Licon, Mxico.
Pgina:
339
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
340
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
341
Manual de Procedimientos
Protenas totales y albumina
1.- Objetivo
Determinar el valor de protenas totales y de albumina en un suero
determinado.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
342
Manual de Procedimientos
2.- Fundamento
Protenas Totales. Los grupos CO-NH- unidos entre s dan una reaccin
con formacin de color violeta con las sales cpricas en medio alcalino,
siendo la ms representativa y simple la que da con el biuret-NH2-CONH-CO-NH2. Es en la actualidad el mtodo colorimtrico exacto y simple
para la determinacin de protenas totales.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
343
Manual de Procedimientos
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Centrfuga
Gradilla
Tubos de ensayo
Pipetas
Puntas para pipetas
Reactivo para albmina
Reactivo para protenas totales
Bao mara
Cronmetro
Pgina:
344
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
345
Manual de Procedimientos
Termmetro
4.- Procedimiento
Reactivo
Agua Destilada
Blanco
1 ml
10 ul
Estndar
1 ml
-
Problema
1 ml
-
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
346
Manual de Procedimientos
Estndar
Muestra
10 ul
-
10 ul
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
347
Manual de Procedimientos
Una vez transcurrido este tiempo leer las absorbancias en el aparato RA
50.
5.- Valores de referencia
Protenas Totales.
Nios: 5.4-8.7 g % Adultos: 6.7-8.7 g %
Albmina: 3.5-5.0 g %
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
6.- Bibliografa
Mtodos Analticos de Serapak Bayer Mxico.
Pgina:
348
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
349
Manual de Procedimientos
1.- Objetivo
Determinar cualitativamente la hormona gonadotropina corinica humana
(hCG) en orina o suero.
2.- Fundamento
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
350
Manual de Procedimientos
Biopreg hCG prueba en tira es un ensayo colorimtrico de base slida
para la deteccin cualitativa de niveles elevados de hCG en orina o suero, para
el diagnstico temprano de embarazo.
Al principio se basa en un ensayo inmunomtrico de sndwich que utiliza
una combinacin nica de anticuerpos monoclonales y policlonales para
identificar selectivamente hCG con un alto grado de sensibilidad. Biopreg hCG
prueba en tira contiene una prueba plstica con un cojn de absorcin de
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
351
Manual de Procedimientos
muestra y una zona de membrana. La frmula contiene anticuerpo monoclonal
anti hCG de ratn con oro coloidal.
La membrana de nitrocelulosa es impregnada con IgG chivo-anti ratn en
la zona de control y anticuerpo chivo anti hCG en la zona de test (prueba).
Durante la prueba, la orina o el suero son absorbidos por el cojn en la zona
dnde se coloca la muestra en la prueba por fenmeno de accin capilar y la
hormona hCG en la muestra de la orina se combina con el oro coloidal,
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
352
Manual de Procedimientos
movindose cromatogrficamente a lo largo de la membrana. El anticuerpo
chivo-anti hCG pre impregnando en la zona del test atrapa el complejo
resultante. La aparicin de una lnea prpura en la zona del test resultante de la
recreacin muestra un resultado positivo (+), el cual indica la presencia de hCG
y sugiere un embarazo. La ausencia de esta lnea muestra un resultado
negativo o la no presencia de hCG en la muestra de orina o suero. La aparicin
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
353
Manual de Procedimientos
de una lnea en la zona de control demuestra un comportamiento apropiado y la
validez del reactivo.
3.- Material, reactivos e instrumental
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Gradilla
Cronmetro
4.- Procedimiento
Pgina:
354
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
355
Manual de Procedimientos
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
356
Manual de Procedimientos
observacin es de 2.5 a 3 min. Sin embargo, un resultado positivo puede
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
357
Manual de Procedimientos
test. Esta prueba deber excluirse. Lo anterior puede deberse a que se
llevaron a cabo pasos de manera inapropiada en el procedimiento de la
prueba o simplemente el deterioro de los reactivos. En dicho caso la
muestra deber ser evaluada con otra nueva tira.
6. - Bibliografa
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
358
Manual de Procedimientos
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
359
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
360
Manual de Procedimientos
PruebasCruzadas
1.- Objetivo
Llevar a cabo las pruebas cruzadas de compatibilidad entre una sangre
para transfundir y el receptor que va a recibir dicha sangre o algn componente
de sta.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
361
Manual de Procedimientos
2.- Fundamento
Se cuenta con pruebas cruzadas de compatibilidad para las clulas
sanguneas: hemates, leucocitos y plaquetas. La primera es la ms importante
porque previene la aplicacin de la sangre destinada a sufrir hemlisis, con
peligro de la vida del paciente. Los dos ltimos se utilizan para obtener mejor
sobrevida de los leucocitos y de las plaquetas, transfundidas a pacientes con
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
362
Manual de Procedimientos
anticuerpos anormales. Solo se llevarn a cabo las pruebas de compatibilidad
bsica.
Se sabe que el paciente que haya recibido varias transfusiones es
susceptible que desarrolle anticuerpos inmunes, no aglutinantes, contra
cualquier antgeno sanguneo distinto a los que tienen sus propios hemates.
3.- Material, reactivos e instrumental
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
363
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
364
Manual de Procedimientos
Cronmetro
Suero de Coombs
Albumina bovina al 22%
4.- Procedimiento
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
365
Manual de Procedimientos
Se van a separar tambin los sueros tanto del donador como del receptor
Prueba menor. En un tubo se va a colocar 2 gotas del suero del donador
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
366
Manual de Procedimientos
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
367
Manual de Procedimientos
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
368
Manual de Procedimientos
paciente durante la transfusin y en caso de una reaccin suspender la
transfusin.
6.- Bibliografa
Lynch M:J:/S:S: Raphael / L.D. Mellor/ P.D Spare / M.J.H.Inwood Mtodos de
Laboratorio. Edit. Interamericana. Vol. 2 cap. 25 pg. 903
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
369
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
370
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
371
Manual de Procedimientos
Tipo de Coagulacin
1.- Objetivo
Determinar mediante la tcnica de Lee White el tiempo de coagulacin.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
372
Manual de Procedimientos
2.- Fundamento
Se denomina tiempo de coagulacin al tiempo que transcurre para la
transformacin de una protena llamada fibringeno en otra denominada fibrina
que tiende a polimerizar formando fibras largas que van a impedir que la sangre
salga de los vasos sanguneos.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
373
Manual de Procedimientos
Esta determinacin es una prueba gruesa del
mecanismo de
coagulacin que mide desde la activacin del factor XII a la formacin de fibrina;
como el factor XII se activa por el contacto con el vidrio se mide va intrnseca y
comn pero no se mide el factor VII ni el factor tisular. Se miden los factores
XII, XI, IX, VIII, X, V y II.
3.- Material y mtodos
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Jeringas
Agujas estriles
Algodn
Alcohol
Cronmetro
Aplicadores de madera
Tubos de ensaye de 7 ml
Pgina:
374
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
375
Manual de Procedimientos
4.- Mtodo de Lee White
Se extrae sangre venosa con un jeringa utilizando una aguja gruesa (no
18 19). La puncin venosa debe ser perfecta, pues la contaminacin
con linfa modifica los resultados. Se pone en marcha el cronmetro en
cuanto la sangre penetra en la jeringa, pues en este momento se inicia la
coagulacin sangunea.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
376
Manual de Procedimientos
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
377
Manual de Procedimientos
coagulacin de cada tubo y la cifra definitiva es el promedio de los 4
resultados.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
378
Manual de Procedimientos
Lynch M:J:/S:S: Raphael / L.D. Mellor/ P.D Spare / M.J.H.Inwood Mtodos de
Laboratorio. Edit. Interamericana. Vol. 2 cap. 22 pg. 826-827
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Tiempo de Protrombina (T.P.)
1.- Objetivo
Determinar el tiempo de protrombina utilizando plasma sanguneo.
2.- Fundamento
Pgina:
379
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
380
Manual de Procedimientos
El T.P. es una de las pruebas de rutina usadas en el estudio de los
problemas de coagulacin. Mide los siguientes factores de coagulacin:
Protrombina, Fibringeno, Factor V, Factor VII y Factor X. Se utiliza para vigilar
a los pacientes tratados con anticoagulantes orales. (cumarnicos).
3.- Material, reactivos e instrumental
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Analizador RA 50 de Bayer
Centrifuga
Tubos de ensaye
Cubetas para RA 50
Plasmas control
Pipetas automticas
Puntas para pipetas automticas
Pgina:
381
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
382
Manual de Procedimientos
4.- Procedimiento
exactamente
Transcurrido el tiempo se separa el plasma en tubo limpio y seco
Se mete el tubo con el plasma a bao mara a 37C durante 3 minutos
Se coloca tambin el reactivo para T.P. a bao mara
Se enciende el RA 50
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
383
Manual de Procedimientos
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
384
Manual de Procedimientos
5.- Valores de referencia
Actualmente estamos considerando de base 10.4 seg = 100% de actividad.
INR se calcula conociendo el ISI del reactivo y el cociente de dividir el T.P. del
paciente sobre el T.P. normal
6.- Bibliografa
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
385
Manual de Procedimientos
Jaime Prez Jos Carlos, David Gmez Almaguer HEMATOLOGA La sangre y
sus enfermedades. Edit. Mc Graw Hill, Mxico D.F. 1 edicin 2005
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Tiempo de Protrombina
1.- Objetivo
Pgina:
386
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
387
Manual de Procedimientos
Determinar el tiempo de protrombina en una muestra anticoagulada con
citrato de sodio.
2.- Fundamento
El T.P. es una de las pruebas de rutina usadas en el estudio de los
problemas de coagulacin. Mide los siguientes factores de coagulacin:
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
388
Manual de Procedimientos
Protrombina, Fibringeno, Factor V, Factor VII y Factor X. Se utiliza para vigilar
a los pacientes tratados con anticoagulantes orales. (cumarnicos).
3.- Material reactivos e instrumental
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Bao mara
Analizador RA 50
Cubetas para RA 50
Centrifuga
Aplicadores de plstico
Pipetas automticas
Puntas para pipetas
Tromboplastina
Plasma control
Pgina:
389
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
390
Manual de Procedimientos
4.- Procedimiento
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
391
Manual de Procedimientos
Se enciende el RA 50
Presionar la tecla PT
Se miden 200 ul de tromboplastina
Una vez transcurridos los 2 minutos de incubacin aadir 100 ul del
plasma
Dejar que el aparato se detenga y reporte el resultado
Hacer la prueba por duplicado
Sacar el promedio de tiempo de protrombina
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
392
Manual de Procedimientos
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
393
Manual de Procedimientos
El tiempo normal segn el plasma control es de 10.4 seg y equivale a 100% de
actividad.
6.- Calculo de IRN
IRN=(TP PACIENTE/TP NORMAL). ELEVADO AL ISI
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
394
Manual de Procedimientos
7.- Bibliografa
Jaime Prez Jos Carlos, David Gmez Almaguer HEMATOLOGA La sangre y
sus enfermedades. Edit. Mc Graw Hill, Mxico D.F. 1 edicin 2005 cap. 44 pg.
247
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
395
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
396
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Tiempo de Sangrado
Pgina:
397
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
398
Manual de Procedimientos
1.- Objetivo
Determinar el tiempo de sangrado en un paciente
2.- Fundamento
El tiempo de sangrado o de sangra es ms bien una prueba de
hemostasia no de coagulacin pues se alarga con:
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
399
Manual de Procedimientos
Problemas vasculares
Pocas plaquetas o deficiencia en su funcionamiento
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
400
Manual de Procedimientos
nmero de plaquetas es normal puede deberse a defectos de estas en su
funcin y hay que hacer la prueba de agregacin y adhesin plaquetarias.
3.- Material y equipo empleado
Lancetas
Papel filtro
Cronmetro
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
401
Manual de Procedimientos
Alcohol o ter
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
402
Manual de Procedimientos
antebrazo y con una lanceta de resortes se efectan rpidamente 3 punciones
de 3 mm de profundidad. Se pone en marcha el cronmetro.
Con intervalos de 30 seg; se seca cuidadosamente cada gota de sangre
con su correspondiente papel filtro. El punto final est dado por el cese de flujo
de la sangre. Se toma la media de los 3 tiempos.
5.- Valores de referencia
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
403
Manual de Procedimientos
De 2 a 7 minutos
6.- Interpretacin
Un tiempo de sangrado normal indica una retraccin normal de los
capilares y la existencia de un nmero suficiente de plaquetas con actividad
normal. La metamorfosis normal depende de un buen mecanismo extrnseco de
produccin de tromboplastina; por lo tanto el sangrado se alarga en la
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
404
Manual de Procedimientos
insuficiencia del Factor VII (acelerador plasmtico de la conversin de
protrombina). Puede presentarse tambin en los individuos de salud normal
pero de edad avanzada, debido a la atrofia y el escaso tono de piel, a la vez
que a la contractibilidad insuficiente y fragilidad aumentada de los capilares.
7.- Bibliografa
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
405
Manual de Procedimientos
Lynch M:J:/S:S: Raphael / L.D. Mellor/ P.D Spare / M.J.H.Inwood Mtodos de
Laboratorio. Edit. Interamericana. Vol. 2 cap. 22 pg. 827-828
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
406
Manual de Procedimientos
Tiempo de tromboplastina parcial activada (TTP)
1.- Objetivo
Determinar el tiempo de tromboplastina parcial activada en un paciente
2.- Fundamento
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
407
Manual de Procedimientos
El TTP se indica para detectar deficiencias en la va intrnseca de la
coagulacin y vigilar la anticoagulacin con heparina. Es una prueba rutinaria.
Se
prctica
con
un
tiempo
de
protrombina.
Entre
ambos
detectan
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Mezclador
Centrifuga
Analizador RA 50 Bayer
Bao mara
Pipetas automticas
Puntas para pipetas
Tromboplastina activada
Cloruro de calcio 0.02 M
Tubos de ensayo
Pgina:
408
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Cubetas para RA 50
4.- Procedimiento
Pgina:
409
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
410
Manual de Procedimientos
de 13 x 100
Meter a centrifugar durante 5 minutos exactamente
Separar el plasma y vaciarlo a un tubo limpio y seco
Poner el tubo en bao mara durante 3 minutos
Poner la tromboplastina parcial activada, el cloruro de calcio, en bao
mara a 37C
Encender el RA 50 y cuando pida la prueba pulsar la tecla PTT
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
411
Manual de Procedimientos
homogenizada
Pulsar la tecla analyze
Esperar el tiempo de incubacin y aadir 100 ul de cloruro de calcio
El aparato reportar el resultado en el papel
Realiza la prueba por duplicado
Calcular el TTP promedio
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
412
Manual de Procedimientos
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
413
Manual de Procedimientos
6.- Bibliografa
Jaime Prez Jos Carlos, David Gmez Almaguer HEMATOLOGA La sangre y
sus enfermedades. Edit. Mc Graw Hill, Mxico D.F. 1 edicin 2005 cap. 44 pg.
247
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
414
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
415
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
416
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
417
Manual de Procedimientos
Triglicridos
1.- Objetivo
Determinar la cantidad de triglicridos que se encuentran en la sangre.
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
418
Manual de Procedimientos
2.- Fundamento
Los triglicridos son hidrolizados enzimticamente a glicerol, el cual,
mediante GK y GPO, libera el perxido de H que se valora mediante la reaccin
de Trinder, de acuerdo a las siguientes reacciones:
Triglicridos + H2O
Glicerol + ATP
GK
LPL
Glicerol + c. Grasos
Glicerol-3-Fosfato + ADP
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
419
Manual de Procedimientos
Glicerol 3-P + O2
GPO
Dihidroxiacetona-P + H2O2
POD
Quinona + H2O
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
4.- Procedimiento
Pgina:
420
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
421
Manual de Procedimientos
Centrifugar la muestra
Preparar 3 tubos, blanco, estndar y muestra
Agregar 2.0 ml de reactivo a los 3 tubos
Al tubo estndar agregar 20 ul de estndar
Al tubo de muestra agregar 20 ul de muestra
Mezclar e incubar 5 minutos a 37C o 10 minutos a temperatura
ambiente
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
422
Manual de Procedimientos
reactivos
El color es estable en 30 minutos
Reportar el resultado final
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Mujeres: 40-140 mg/dL
6.- Bibliografa
Manual de tcnicas de Spinreact, Mxico 2003
Pgina:
423
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Urea
Pgina:
424
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
425
Manual de Procedimientos
1.- Objetivo
Determinar la urea en una muestra determinada
2.- Fundamento
En presencia de ureasa, la urea se hidroliza en amonio y dixido de
carbono. El amonio producido en esta reaccin se combina con a-cetoglutarato
y NADH en presencia de glutamato de hidrogenasa dando como resultado
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
426
Manual de Procedimientos
glutamato y NAD. El consumo NADH, que se mide por la disminucin de su
absorcin en la regin ultravioleta, es proporcional a la cantidad de urea de la
muestra.
3.- Material, reactivos e instrumental
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Tubos de ensaye
Gradillas
Pipetas automticas
Puntas para pipetas
Analizador RA 50
Reactivo para urea
Sueros controles
Bao mara
Termmetro
Pgina:
427
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Cronmetro
4.- Procedimientos
Pgina:
428
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
429
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
430
Manual de Procedimientos
Una vez listo hacer lo mismo para el problema y los controladores pero
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
6.- Bibliografa
Manual de procesos Serapak Bayer Mxico 2001
VDRL
Pgina:
431
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
432
Manual de Procedimientos
1.- Objetivo
Determinacin de VDRL en una persona con sospechas de sfilis u otra
enfermedad venrea.
2.- Fundamento
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
433
Manual de Procedimientos
Es una reaccin inmunolgica de aglutinacin entre la cardiolipina
absorbida a partculas de carbn y los anticuerpos reagnicos presentes en el
suero o plasma del paciente.
3.- Material, reactivos e instrumental
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pipetas automticas
Puntas para pipetas
Gradilla
Centrfuga
Tarjeta
4.- Procedimiento
Pgina:
434
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
435
Manual de Procedimientos
de cada determinacin
Colocar en un crculo de la tarjeta una gota del suero del paciente,
extendiendo la gota en el rea de reaccin, con la parte posterior del
tubo gotero de polietileno. Repetir la operacin con el suero control (-) y
suero control (+)
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
436
Manual de Procedimientos
Interpretacin de resultados
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Pgina:
437
Manual de Procedimientos
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
6.- Bibliografa
Inserto de RPR para VDRL.
Pgina:
438
LABORATORIO NOVO
Fecha de elaboracin:
Febrero de 2015
Manual de Procedimientos
Pgina:
439