Professional Documents
Culture Documents
Parnaba Piau
SUMRIO
PRTICA 1:
DO ESTUDO E USO DO LABORATRIO DE QUMICA,
BIOQUMICA, BIOFSICA E FISIOLOGIA
01
10
RECOMENDAES GERAIS
a) De Ordem Pessoal
Prtica 3: pH e tampes
Prtica 4: Determinao da concentrao das protenas
15
19
laboratrio;
27
potenciais;
b) Referentes ao Laboratrio
produto;
alertar a chefia;
estranhos ao trabalho;
EQUIPAMENTOS DE SEGURANA
todos:
coletadas;
luvas e aventais;
protetores faciais;
culos de segurana;
oxidantes;
extintores de incndio;
chuveiros de emergncia;
lavador de olhos;
cobertores de segurana.
estado de conservao;
OU TECNICO DO LABORATORIO.
utilizado;
Remova
frascos
de
inflamveis
do
local
onde
ir
usar
Instrues Gerais:
circuitos;
No instale nem opere equipamentos eltricos sobre superfcies midas;
No
confie
completamente
equipamentos eltricos;
no
controle
automtico
de
Vazamentos;
OPERAO EM CAPELAS
a gases e vapores;
exausto;
RESDUOS
Definio
descarte
os
materiais
biolgicos
em
local
adequado
(DESCARTEX).
RECOMENDAES FINAIS
Tenha este Guia sempre mo no laboratrio e releia-o periodicamente. O
risco de acidente maior quando nos acostumamos a conviver com o
perigo e passamos a ignor-lo.
A segurana de um laboratrio est apoiada na determinao de cada um
de seus elementos:
VOC TAMBM RESPONSVEL
193 BOMBEIROS.
192 SAMU
RISCO
A
G
E
N
T
E
S
C
A
U
S
A
D
O
R
E
S
QUMICO
(VERMELHO)
FSICO
(VERDE)
BIOLGICO
(MARROM)
ERGONMICO
(AMARELO)
Fumos metlicos e
vapores
Microorganismos
(Vrus, bactrias,
protozorios)
M postura do corpo em
relao ao posto de
trabalho
Gases asfixiantes H,
He, N e CO2
Oscilaes e vibraes
mecnicas
Lixo hospitalar,
domstico e de animais
Trabalho estafante e ou
excessivo
Pinturas e nvoas em
geral
Ar rarefeito e ou vcuo
Falta de Orientao e
treinamento
Solventes (em
especial os volteis)
Presses elevadas
Objetos contaminados
Jornada dupla e ou
trabalho sem pausas
Mau planejamento do
layout e ou do espao
fsico
Frio e ou calor e
radiao
Contgio pelo ar e ou
insetos
Movimentos repetitivos
Cargas e transportes em
geral
Picadas de animais
(ces, insetos, rpteis,
roedores, aracndeos,
etc.)
Equipamentos
inadequados e no
ergonmicos
Risco de fogo,
detonao de
explosivos, quedas de
objetos
Aerodispersides no
ambiente (poeiras
vegetais e minerais)
Alergias, intoxicaes e
queimaduras causadas
por vegetais
Fatores psicolgicos
(no gosta do trabalho,
presso do chefe, etc)
Reaes qumicas
Ingesto de produtos
durante pipetagem
DIAMANTE DE HOMMEL
ACIDENTES
(AZUL)
Equipamentos
inadequados,
defeituosos ou
inexistentes
Mquinas e
equipamento sem
Proteo e ou
manuteno
4 - Podem explodir
3 - Podem explodir com choque mecnico ou calor
2 - Reao qumica violenta
1 - Instvel se aquecido
0 Estvel
RELATRIOS
10
PRTICA 2:
VIDRARIAS E EQUIPAMENTOS
BURETA
BALO DE FUNDO REDONDO
Utilizado principalmente em sistemas de refluxo e evaporao
vcuo, acoplado a ROTAEVAPORADOR.
BALO VOLUMTRICO
11
CADINHO
ERLENMEYER
CPSULA DE PORCELANA
FUNIL DE BUCHNER
CONDENSADOR
FUNIL DE SEPARAO
DESSECADOR
12
PIPETA VOLUMTRICA
KITASSATO
Utilizado em conjunto com o FUNIL DE BUCHNER em
FILTRAES a vcuo.
PIPETA GRADUADA
13
PROVETA OU CILINDRO
GRADUADO
Serve para medir e transferir volumes de lquidos. No pode ser
aquecida.
TUBO DE ENSAIO
BICO DE BNSEN
VIDRO DE RELGIO
Pea de Vidro de forma cncava usada em anlises e
evaporaes. No pode ser aquecida diretamente.
GARRA DE CONDENSADOR
ANEL OU ARGOLA
Usado como suporte do funil na filtrao.
BALANA DIGITAL
14
PINA DE MADEIRA
SUPORTE UNIVERSAL
Usada para prender o TUBO DE ENSAIO durante o
aquecimento.
PINA METLICA
Usada para manipular objetos aquecidos.
TELA DE AMIANTO
Suporte para as peas a serem aquecidas. A funo do
amianto distribuir uniformemente o calor recebido
pelo BICO DE BUNSEN.
PISSETA OU FRASCO LAVADOR
TRIP
Usada para lavagens de materiais ou recipientes
atravs de jatos de gua, lcool ou outros solventes.
15
PRTICA 3:
pH E TAMPES
Introduo
Soluo tampo ou soluo tamponada aquela que, ao adicionarmos
uma pequena quantidade de cido ou base, mesmo que fortes, mantm o
seu pH praticamente invarivel.
provvel
que
observao
destes
fatos
leve
ao
seguinte
questionamento:
Como as solues tampo conseguem manter o seu pH praticamente
constante?
Vamos imaginar uma soluo tampo constituda por uma base fraca
(BOH) e um sal (BA) derivado desta base.
Nesta soluo, ocorrem os seguintes fenmenos:
-Pequena dissociao da base (Conceito de Bronsted):
16
Para uma soluo tampo de base fraca e um sal derivado desta base,
podemos demonstrar que:
Como pH + pOH = 14, neste caso ficamos com: pH = 14 - pOH
Com isso teremos:
presente na soluo.
INDICADOR
Azul de timol
Amarelo de Metila
Alaranjado de Metila
Azul de bromofenol
Verde de Bromocresol
Vermelho de Metila
Vermelho de clorofenol
Prpura de Bromocresol
INDICADOR
pKa
1,7
3,3
3,5
4,0
4,7
5,0
6,0
6,2
pKa
INTERVALO DE PH E COR
1,2 Vermelho 2,8 Amarelo
2,9 Vermelho 4,0 Amarelo
3,1 Vermelho 4,4 Laranja
3,8 Amarelo 5,4 Azul
3,8 Amarelo 5,4 Azul
4,2 Vermelho 6,3 Amarelo
5,1 Amarelo 6,7 Vermelho
5,2 Amarelo 6,8 Roxo
INTERVALO DE PH E COR
17
Azul de Bromotimol
Vermelho de fenol
Vermelho de cresol
Azul de timol
Fenolftalena
Indicador Universal (Laranja de
metila+Vermelho de metila+Azul
de bromotimol+Fenolftalena)
Papel de tornassol
Papel vermelho de congo
Papel Indicador Universal
7,1
7,8
8,3
8,9
9,4
DISTRBIO
pH
ACIDOSE E ALCALOSE
Acidose respiratria
P(CO2) sobe
diminui
Alcalose respiratria
P(CO2) cai
aumenta
Acidose metablica
Alcalose metablica
HCO diminui
3
HCO aumenta
diminui
aumenta
ento realizadas.
Resumindo temos:
SOLUO TAMPO
Tampo H2CO3/HCO3-
abaixo de 7,35, diz que ela est com acidose, ou baixo pH sanguneo. A
acidose causa desorientao, coma e finalmente morte. Se o pH sobe
alm de 7,45, diz-se que ela est com alcalose, ou baixo pH sanguneo. A
alcalose pode causar respirao fraca e irregular, cibras musculares e
18
Objetivos
(indicadores de pH);
de importncia biolgica
Procedimento
pH
a) Experimento 1
Preparar uma bateria de 4 tubos de ensaio
TUBO 1: 5 gotas de indicador universal + 10mL de gua destilada
TUBO 2: 5 gotas de indicador universal + 1mL do tampo fosfato + 9mL de
gua destilada
TUBO 3: 5 gotas de indicador universal + 10mL de gua destilada
TUBO 4: 5 gotas de indicador universal + 1mL do tampo fosfato + 9mL de
gua destilada
Determinar o pH de cada soluo e anotar o resultado.
b) Experimento 2
TUBO 1: adicionar 1 gota de NaOH 0,1 mol/L.
TUBO 2: adicionar 1 gota de NaOH 0,1 mol/L.
Antes
Depois
TUBO 1
TUBO 2
TUBO 3
TUBO 4
N de gotas______ para obter pH=3
19
PRTICA 4:
DETERMINAO DA CONCENTRAO DAS PROTENAS
Introduo
20
foi absorvida por essa soluo (Fig. 3). Usando um prisma o aparelho
separa a luz em feixes com diferentes
comprimentos de onda (tal como acontece no arco-ris com a separao
das cores da luz branca). Pode-se assim fazer passar atravs da amostra
um feixe de luz monocromtica (de um nico comprimento de onda, ou
quase). O espectrofotmetro permite-nos saber que quantidade de luz
absorvida a cada comprimento de onda.
21
22
nm.
equao fica:
de solues do composto a quantificar, de concentrao conhecida, fazlas contactar com o reagente e medir as absorbncias ao comprimento de
onda adequado (Fig. 8).
23
de
onda
escolhido
diretamente
proporcional
7 Tubos de ensaio;
6 Bqueres de 100
Pipetas de 1, 2 e 5 ml (prximas aos reagentes);
7 Pipetas de 2 5 ml;
1 Estante p/ tubos de ensaio;
1 Proveta de 100 ml;
Fotocolormetro (com cubetas).
Reativo do Biureto:
Sulfato de cobre cristalizado (pentahidratado) - 1,5g;
Tartarato duplo de sdio e potssio - 6,0g;
gua destilada - 500 ml;
24
DETERMINAO
AMOSTRA PROBLEMA
gua destilada.
Procedimento:
CURVA DE CALIBRAO
Reagentes (mL)
Amostra
gua destilada
Reagente do Biureto
Tubo 1
Tubo 2
Tubo 3
Tubo 4
Tubo 5
Tubo 6
0,2
0,4
0,6
0,8
1,0
1,0
0,8
0,6
0,4
0,2
5,0
5,0
5,0
(mL)
Soluo
Padro de
Protena
(5mg/mL)
gua
destilada
Reagente
Biureto
5,0
5,0
5,0
- Agitar e deixar em repouso por 10 minutos.
DA
CONCENTRAO
TUBO 1
1,0
5,0
DE
PROTENAS
TUBO 2
0,5
0,5
5,0
NA
25
PRTICA 5:
VEGETAL
Introduo
gua. Os cidos graxos dos sabes podem ser precipitados pela adio
SABES INSOLVEIS
CAPACIDADE EMULSIFICANTE
Exemplo:
26
2. Registrar o ocorrido.
saponificao e precipitao.
Materiais e Reagentes:
- 1 bquer;
- 3 tubos de ensaio;
5. Registrar o ocorrido.
- 1 Basto de vidro;
7. Registrar o ocorrido.
- Banho-maria;
(efeito do on comum);
9. Registrar o ocorrido.
10. Explicar o processo de solubilizao dos lipdios.
Procedimentos
Saponificao:
1. Colocar 15 gotas do leo em um tubo de ensaio;
2. Colocar 5 mL de KOH 40%;
3. Aquecer o tubo a aproximadamente 90C por 30 minutos;
4. Registrar os dados.
REAGENTES
soluo de sabo*
soluo de NaCl
soluo de H3CCOOH
soluo de CaCl2
Questionrio
TUBO 1
2 ml
5 gotas
-
TUBO 2
2 ml
5 gotas
-
TUBO 3
2 ml
5 gotas
27
BIBLIOGRAFIA
Ed. Scientia et
http://www.sbbq.org.br/
Disciplina: Bioqumica
REED, R., HOLMES, D., WEYERS, J. & JONES, A. J. 1998. Practical Stills
Nutrio da FAP