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FORENSE

TOMA DE MUESTRAS DE REFERENCIA.


1. Personas vivas

Siempre con consentimiento informado, no debe engaarse a la persona respecto al tipo de estudio que se
realizar

con

su

muestra.

Debe existir un documento firmado con la autorizacin expresa para realizar el anlisis.
MUESTRA

SANGUNEA

Existe la creencia popular de que en PERSONAS TRANSFUNDIDAS se cambia el patrn gentico. Esto es as slo
en teora, ya que en la prctica la persona debera transfundirse un gran volumen de sangre (casi toda) y concurrir
inmediatamente a la toma de muestra para ADN, lo cual le producira una debilidad y caractersticas fsicas
fcilmente detectables por el personal que realiza la toma. Un par de horas despus, ya aparece en la sangre el
patrn gentico real del individuo, al principio mezclado con el donante de la sangre. De todos modos, en caso de
duda

pueden

tomarse

HISOPADOS

BUCALES.

Se sugiere realizar puncin dactilar, depositar una gota -de aproximadamente 1 cm. de dimetro- en cualquier
tipo de papel de filtro y dejar secar a temperatura ambiente. Embalar en sobres de papel comn. En estas
condiciones

la

muestra

dura

ms

de

10

aos.

No tomar sangre lquida ya que debe conservarse en freezer o se deteriora rpidamente.


HISOPADOS

BUCALES

No se trata de saliva sino de clulas epiteliales retiradas de la mucosa bucal. Dos hisopos de ambos carrillos, que
se colocan en sobres de papel -nunca de polietileno- para evitar la proliferacin bacteriana. Los envoltorios de
polietileno o celofn, condensan la humedad y favorecen la degradacin.
PELOS

CON

BULBO

No se recomiendan como muestras de referencia, debe preferirse hisopados bucales o muestras sanguneas. De
ser necesario, UN SLO pelo con bulbo es suficiente, pero se recomienda recolectar no menos de tres mediante
arrancado, y fijarlos mediante una cinta adhesiva a una placa de cartulina o plstico. Se sugiere no usar
portaobjetos de vidrio, ya que pueden romperse durante el traslado.

2. Cadveres

a) Cuando se trata de cadveres en buen estado de conservacin, tomar una gota de sangre por puncin cardaca y
colocar

sobre

papel

de

filtro

como

se

indicara

anteriormente.

En fallecidos antes de los cinco das, puede tomarse aproximadamente un (1) gramo de msculo esqueltico, que se

almacena

en

un

recipiente

de

plstico

tapn

de

rosca.

Conservar

en

freezer.

Se sugiere adems retirar dos molares, que se dejan en reserva a temperatura ambiente, con el fin de evitar la
exhumacin si se requieren estudios de ADN meses o aos despus.
b) Cuando se trata de cadveres antiguos o esqueletizados, se recomienda tomar una porcin de hueso largo
(fmur, hmero, etc.), otros huesos largos de manos o pies, y/o piezas dentales no daadas externamente ni
sometidas a endodoncias.
c) En el caso particular de los cadveres quemados, contrariamente a la creencia popular, la conservacin de los
tejidos es mucho mejor que en los casos de fallecidos por muerte natural, y casi siempre es posible analizar
msculo

esqueltico

de

zonas

profundas.

Cuando la carbonizacin es casi total, es recomendable recolectar huesos o dientes, seleccionando aquellos que a
simple

vista

se

encuentren

en

mejor

estado.

An cuando las noticias periodsticas a menudo dan cuenta del hallazgo de un "cadver calcinado", esto no suele ser
cierto: la calcinacin implica transformacin en minerales, y en esas condiciones el cadver pierde su forma y se
reduce a un montculo de sales. Entonces, si el cadver pudo reconocerse por su forma, no hubo tal "calcinacin".
El fuego elimina las bacterias que producen los fenmenos de putrefaccin, y los tejidos se "esterilizan" permitiendo
una excelente conservacin. Adems, por una ley fsica, la temperatura del cadver no supera los 100 grados
centgrados hasta que toda el agua que contiene el mismo se evapora; y esa temperatura de ebullicin mata las
bacterias

pero

no

afecta

el

ADN,

que

se

conserva

inalterado.

Cuando el cadver REALMENTE est calcinado, por ejemplo, cuando procede de hornos crematorios, el ADN fue
totalmente destrudo y no es posible el anlisis; sin embargo, si se han conservado huesos no reducidos el estudio
puede igualmente intentarse.
d) Otras muestras de referencia de individuos fallecidos: a menudo se conservan en hospitales algunas muestras de
sangre, biopsias en parafina, o preparaciones histolgicas que pueden ser empleadas, siempre y cuando no hayan
sido fijadas en formol. Desde luego que previamente debe constatarse la autenticidad de las muestras.
Tambin puede recurrirse al mbito familiar, donde los peines, maquinillas de afeitar, o la saliva en estampillas o
sobres suministran una fuente segura de material gentico. Este tipo de muestras se ha recolectado para identificar
a las vctimas de los atentados terroristas a las Torres Gemelas (NY, USA) y a las estaciones de trenes (Madrid,
Espaa).

1. TOMA DE MUESTRAS DE REFERENCIA

2. TOMA DE INDICIOS BIOLGICOS en el lugar de los hechos

3. TOMA DE INDICIOS BIOLGICOS en el cuerpo de la vctima

4. TOMA DE INDICIOS BIOLGICOS en casos de agresin sexual

5. EMPAQUETAMIENTO Y ENVO DE LAS MUESTRAS

6. IDENTIFICACIN DE LA MUESTRA

7. CUSTODIA DE LA MUESTRA

8. EMPAQUETADO

9. RECOMENDACIONES FINALES sobre la toma de muestras

Fuente: Recomendaciones de la Sociedad Latinoamericana de Gentica Forense www.slagf.org.


Rocamora
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Gentica Forense
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el 24 de mayo de 2010.
Tambin puedes ayudar wikificando otros artculos.

Con la denominacin de gentica forense se define el uso de ciertas tcnicas empleadas


en gentica para la identificacin de los individuos en base al anlisis del ADN. El hecho de
utilizar el anlisis de ADN para identificar a una persona sigue un razonamiento sencillo. Cada
ser humano es diferente; dos personas pueden ser ms o menos parecidas, sobre todo entre
familiares cercanos, pero nunca son idnticos, salvo en el caso de los gemelos univitelinos.
Esta diferenciacin entre las personas se debe a que existen millones de combinaciones
posibles de ADN entre un vulo y un espermatozoide, debido a la recombinacin gentica que
se produce en la meiosis. Pero a pesar de ello, los genes de todos los seres humanos son
poco variables y constituyen un gran porcentaje de la informacin contenida en la molcula de
ADN; la informacin restante, incluye sectores que pueden exhibir un cierto grado de
variabilidad entre los individuos, en consecuencia: todos los seres humanos tenemos
sectores del ADN en comn y otros que no lo son. El llamado Anlisis de ADN es un conjunto
de tcnicas utilizadas para detectar sectores en la cadena de ADN que son variables en la
poblacin. Estas regiones son denominadas regiones polimrficas o polimorfismos. El trmino
polimorfismo expresa la variabilidad que existe dentro de un fragmento de ADN, es decir, el
nmero de alelos que hay en un locus. Como regla general cuantos ms alelos haya, mayor
polimorfismo, y por tanto mayor poder de identificacin. Al analizar un determinado nmero de
regiones polimrficas la probabilidad de que dos individuos sean genticamente iguales es
prcticamente nula, excepto en los gemelos univitelinos.
ndice
[ocultar]

1 Origen

2 Marcadores genticos que se usan en gentica forense

3 Tipos de ADN en los que se estudian los marcadores genticos


o

3.1 ADN nuclear

3.2 ADN mitocondrial

3.3 Polimorfismos del cromosoma Y

4 Tcnicas para analizar los polimorfismos del ADN extrado

5 Individualizacin de las muestras biolgicas

6 Criminalstica
o

6.1 Muestras dubitadas e indubitadas

7 Anlisis de muestras biolgicas

8 Exclusin e inclusin

9 Investigacin de la paternidad

10 La probabilidad de paternidad

11 ndice de paternidad

12 Identificacin de restos cadavricos

13 Catstrofes masivas

14 Bases de datos

15 Bibliografa

Origen[editar]

La gentica forense no surge como tal, sino que evoluciona a partir de otra rama conocida
como hemogentica forense; nace a principios del siglo XX, cuando Karl Landsteiner describe
el sistema ABO de los hemates y Von Durgen y Hirschfeld descubren su transmisin
hereditaria. El objetivo de esta ciencia era la identificacin gentica en crmenes y casos de
paternidad. Inicialmente, las investigaciones se centraban en el estudio
de antgenos eritrocitarios (sistema ABO, Rh, MN),protenas sricas y enzimas eritrocitarias.
Con el estudio de dichos marcadores poda incluirse o excluirse una persona como posible
sospechoso por poseer una combinacin gentica igual o diferente a la del vestigio biolgico
hallado en el lugar de los hechos.
Pero fue a mediados de siglo cuando gracias al descubrimiento del ADN y de su estructura y
al posterior avance en las tcnicas de anlisis de dicha molcula la Hemogentica Forense
evolucion considerablemente hasta el punto de que hoy en da puede hablarse de una nueva
subespecialidad dentro de la Medicina Forense: la Gentica Forense, puesto que en la
actualidad no solo se emplean marcadores sanguneos sino tambin muchos otros. Aunque la
ciencia posea las herramientas necesarias para el estudio del ADN, su aplicacin en la
resolucin de casos judiciales no se produjo hasta 1985.
Esta subespecialidad se centra bsicamente en tres reas:

Investigacin de la paternidad: Impugnacin por parte del supuesto padre o


reclamacin por parte de la madre y/o del hijo.

Criminalstica: Asesinato y delitos sexuales (violacin sexual). Se analizan restos


orgnicos humanos (sangre, pelo, saliva, esperma, piel).

Identificacin: Restos cadavricos (por ejemplo, los restos del zar Nicols II de Rusia y
su familia) o personas desaparecidas (como sucedi en Argentina con los nios
desaparecidos durante la dictadura militar).

Marcadores genticos que se usan en gentica forense[editar]


Los marcadores genticos que se utilizan actualmente estn constituidos por regiones de ADN
repetitivo que presentan una gran variabilidad de tamao entre los distintos individuos de una
poblacin. Estas regiones como ya hemos dicho, se conocen con el nombre de regiones
polimrficas. El principio bsico de estos polimorfismos genticos de estas regiones reside en
la variacin del nmero de veces que se repite en tndem una secuencia determinada (una
repeticin en tndem es una secuencia corta de ADN que se repite consecutivamente, en un
locus especfico). Segn esto se clasifican en:

VNTR (acrnimo ingls: Variable Number of Tandem Repeats: nmero variable de


repeticiones en tndem). Son locus cuyos alelos difieren por tener un nmero variable de
repeticiones en tndem. Un ejemplo de VNTR en humanos es una secuencia de ADN de

17 pb que se repite entre 70 y 450 veces en el genoma. El nmero total de pares de


bases en ese locus puede as variar entre 1190 y 7650. Ventajas de estos polimorfismos:
1. Son muy variables en la poblacin: los perfiles de ADN varan de una persona a otra,
por tanto podemos afirmar que no existen dos personas con el mismo nmero de
repeticiones en tndem. Cuando se comparan los perfiles de un solo locus VNTR para
individuos no relacionados entre s, habitualmente son diferentes. No obstante, es
posible que dos personas tengan el mismo perfil en uno o dos loci por casualidad. Sin
embargo, la probabilidad de que dos personas tengan el mismo perfil de ADN en 4, 5
o 6 loci VNTR diferentes es extremadamente baja. Cuando se usan los perfiles de
ADN con fines medico-legales, se analizan de 4 a 6 loci VNTR diferentes.
2. El nmero de repeticiones es heredable. Dado que recibimos un cromosoma de cada
tipo del padre y otro de la madre, tendremos un nmero de repeticiones proveniente
de ste y otro de sta. En forma de esquema, consideremos los individuos A y B.
Supongamos que existen dos hipotticos VNTR, uno de ellos en una cierta regin del
cromosoma 6 y otro en el 15.
Existen dos tipos de polimorfismos de repeticin de uso en diagnstico gentico, los VNTRminisatlites y los VNTR-microsatlites.

Los VNTR-minisatlites o MVR (minisatellite variant repeats) son loci que


corresponden a secuencias de ADN de unas pocas decenas de nucletidos (sobre 30
pares de bases) repetidas en tndem. El nmero de dichas repeticiones vara de
cromosoma a cromosoma. La singularidad ms especial de este tipo de polimorfismos
est en que cada loci puede presentar muchos alelos distintos (tantos como repeticiones),
sin embargo presentan el inconveniente que no estn distribuidos por todo el genoma y
por lo tanto solo pueden ser utilizados en el diagnstico de un nmero muy reducido de
casos. Los VNTR-minisatlites han encontrado su mxima aplicacin en la determinacin
de la paternidad y en los protocolos de identificacin gentica en el mbito judicial.
Cuando se habla de huellas dactilares del ADN se est hablando de este tipo de
polimorfismo.

Los VNTR-microsatlites o STR (short tandem repeats) Corresponden a la repeticin


en tndem de secuencias de entre 2 y 5 nucletidos. Los microsatlites presentan dos
caractersticas que los hacen ideales para su uso. En primer lugar, estn distribuidos de
forma casi homognea por todo el genoma y en segundo lugar, presentan un nmero

elevado de alelos con frecuencias similares entre s, de forma que la probabilidad de que
un individuo sea heterocigoto es muy elevada (presentan una alta heterocigosidad).
Estas regiones hipervariables pertenecen al denominado ADN no codificante son regiones
no conservadas y por tanto no sujetas a una presin selectiva intensa, originando un gran
nmero de variantes, que son los que denominamos alelos. Estas zonas llamadas
polimrficas son las que nos interesan en gentica forense para poder diferenciar unas
muestras de otras. Por tanto, no es interesante analizar la molcula de ADN completa,
principalmente por dos razones:

Se tardara mucho tiempo y

La mayor parte de la molcula es comn en todos los humanos y no se podran


distinguir.

Tipos de ADN en los que se estudian los marcadores


genticos[editar]
ADN nuclear[editar]
Siempre que sea posible se realizar el anlisis de polimorfismos de este ADN, pues son los
que ms informacin nos darn en cuanto a la identidad de la muestra. Se encuentra en el
ncleo, y se hereda mitad de la madre y mitad del padre, con excepcin del ADN presente en
el cromosoma Y masculino, que slo se hereda por lnea paterna.
Las caractersticas ms importantes del ADN nuclear para identificacin humana son:
1. Es nico para cada persona, excepto en el caso de los gemelos univitelinos.
2. Permite establecer relaciones entre hermanos, primos, abuelos nietos, y otro grados
de parentesco, porque como veremos, otros tipos de ADN slo nos permitirn
establecer relaciones de paternidad (cromosoma Y) y de maternidad (ADN
mitocondrial).
3. Sirve para determinar el sexo de la persona de la que proviene una muestra porque se
puede establecer la presencia de XX o XY en el par 23.
4. Posee un enorme potencial de estudio, por la gran cantidad de ADN no codificante y
las regiones tipo STR y SNP.

Uno de los fragmentos de ADN nuclear ms estudiados es la amelogenina. Se trata de un


marcador muy til porque nos informa sobre el sexo del individuo al que pertenece la muestra.
La amelogenina es un locus localizado en una regin homloga de los cromosomas sexuales.
Existe una diferencia de 6 pares de bases entre el tamao del alelo presente en el cromosoma
X y el Y, que se debe a una pequea delecin en el cromosoma X. El resultado de la
amplificacin por PCR de este locus en un ADN femenino (XX) ser de una nica banda,
mientras que si el ADN es masculino (XY), el resultado sern dos bandas de distinto tamao.
No obstante, hay que tener en cuenta que, aunque ocurre con muy baja frecuencia, se ha
detectado la existencia de deleciones en esta regin del cromosoma Y, de tal forma que una
muestra masculina podra asignarse errneamente como femenina. En este caso, el anlisis
de marcadores especficos del cromosoma Y permitiran una correcta asignacin del sexo. El
inconveniente que presenta el estudio de marcadores concretos del cromosoma Y, es que se
heredan sin cambios significativos en una misma familia de padre a hijo, de modo que nos
permiten identificar a un varn de la familia pero tendremos que estudiar otros marcadores
para distinguir entre abuelo, padre, hijo, etc.
Despus de una extraccin de ADN en muestras que se encuentran en muy mal estado de
conservacin, se obtienen fragmentos de slo 100-200 nucletidos debido a su estado de
degradacin (rotura), con el agravante de que muchas veces estas muestras van
acompaadas de ADN bacteriano. Por el contrario las muestras de tejido fresco proporcionan
fragmentos de ADN de ms de 10.000 nucletidos.
Pero existen situaciones en las que es recomendable el anlisis de otros tipos de
polimorfismos como son los polimorfismos de ADN mitocondrial y polimorfismos ligados al
cromosoma Y.

ADN mitocondrial[editar]
Existen numerosas mitocondrias en cada clula (entre 250 y 1000 segn el tipo celular, las
necesidades metablicas y el tipo funcional) y varias copias de ADN mitocondrial en cada
mitocondria, es decir, existen mayor cantidad de copias de ADNmt que de ADN nuclear por
clula, de forma que hay una sola copia de ADN nuclear en una clula mientras que puede
haber miles de copias de ADNmt. Este hecho hace que en muestras forenses muy crticas
(con escasa cantidad de ADN o con ADN en mal estado) tenga ms xito el anlisis de ANDmt
que el de ADN nuclear. Sin embargo, el ADNmt presenta una peculiaridad, se hereda nica e
ntegramente de la madre, sin que exista ninguna combinacin con el material del padre. Por
este motivo se dice que es un genoma haploide.
La causa de que no exista mezcla con el material del padre es la siguiente: las mitocondrias
del espermatozoide se localizan en el cuello (entre la cabeza y la cola), con el fin de aportar la
energa que esta clula necesita para mover la cola y desplazarse en busca del vulo. Al
producirse la fecundacin solo penetra en la clula femenina la cabeza del espermatozoide
(con el ADN nuclear) quedando fuera la cola y el cuello, y con l todas las mitocondrias. Esto
hace que el padre no aporte dicho material a su descendencia.

Las caractersticas bsicas que lo hacen til en investigacin forense y antropolgica son:
1. El elevado nmero de copias por clula que hace alguna de ellas resista las
condiciones adversas sin ser degradada.
2. Su pequeo tamao. Esto facilita la conservacin en el tiempo a pesar de que las
condiciones no sean apropiadas: al ser ms pequeo que el ADN nuclear la
probabilidad de verse afectado es menor.
Estas 2 caractersticas garantizan las estabilidad postmortal y una mayor resistencia que el
nuclear.
Pero tambin tiene desventajas o puntos dbiles como:
1. No es especfico de cada persona, sino que se asocia a todas las personas que
proceden de la misma madre, abuela materna, etc.
2. Slo es til cuando se trata de hacer estudios por va materna, de modo que permite
identificar a cualquier persona (hombre o mujer) frente a su madre, no frente a su
padre.
3. Presenta gran dificultad tcnica por lo que restringe su uso a laboratorios
especializados.
Este tipo de ADN se utiliza sobre todo en los casos siguientes:
1. Cuando existe una gran degradacin de las muestras por las malas condiciones de
conservacin en que permanecieron hasta que fueron encontradas en lugar del
crimen o por la antigedad que tienen. En este caso el ADN mitocondrial se
encontrar en mejor estado que el nuclear debido a su mayor nmero de copias por
clula. Tal es el caso de restos seos y dientes antiguos o sometidos a condiciones
extremas.
2. Cuando la cantidad de muestra de que se dispone es mnima (pelos sin bulbo por
ejemplo). Un pelo con bulbo caduco o un fragmento de pelo contendr una cantidad
de ADN nuclear tan escasa que en principio los anlisis de estas muestras mediante
ADN nuclear resultar negativo.

3. En la identificacin de restos biolgicos y el establecimiento de una relacin familiar


cuando no se dispone de los progenitores y no queda ms remedio que realizar una
comparacin con familiares ms lejanos. Si se trata de familiares va materna tendrn
exactamente el mismo ADN mitocondrial aunque se trate de familiares lejanos. Un
estudio de ADN nuclear en estos casos sera poco informativo ya que cuanto ms
alejada sea su relacin familiar, menos alelos compartirn.
4. Cuando existe un sospechoso en un hecho delictivo pero se dispone de muestra de la
cual no se conoce su procedencia, se puede recurrir al estudio del ADN mitocondrial
de un familiar relacionado matrilinialmente para excluirlo.

Polimorfismos del cromosoma Y[editar]


El cromosoma Y slo existe en varones y todos los individuos varones emparentados por lnea
paterna comparten el cromosoma Y (casi en su totalidad) pues se hereda directamente de
padres a hijos sin mezclarse con ningn material procedente de la madre. Por tanto, slo es
posible identificar linajes paternos mediante el estudio de su cromosoma Y, mientras que no es
posible identificar individuos. Respecto a los polimorfismos del cromosoma Y se
analizan microsatlites(STRs).
Los principales problemas derivan de las caractersticas hereditarias del cromosoma Y:
1. No es nico de cada persona, sino que es comn para todos los pertenecientes a un
linaje paterno comn.
2. Slo se puede aplicar a los hombres de modo que en un estudio de paternidad, como
por ejemplo, no sirve para determinar si un hombre es padre de una mujer.
Existen varios casos especiales en los cuales el anlisis de los polimorfismos del cromosoma
Y son de gran utilidad:

Casos de paternidad:
1. Casos de paternidad en los que no se dispone de material biolgico de la madre. Nos
bastar con disponer de la muestra del padre y compararla con la del presunto hijo
para comprobar si ambas presentan idnticos polimorfismos Y.
2. En casos complejos en los que falta el padre, pero tenemos por ejemplo al abuelo.

Casos de mezclas en agresiones sexuales:

1. Agresiones en las que el semen del sospechoso varn se encuentra mezclado con
clulas de una vctima mujer: los polimorfismos del cromosoma Y son detectados de
forma ms sensible en el ADN de un individuo a pesar de que ste se encuentre
inmerso en una gran cantidad de ADN femenino. Con marcadores nucleares esto no
ocurre pues se detecta antes el material femenino sobre todo si la cantidad de clulas
epiteliales femeninas es muy superior al nmero de espermatozoides. Adems, el uso
de polimorfismos de ADN del cromosoma Y nos permite incluir o excluir a un
sospechoso cmodamente.
2. Delitos en los que el agresor es un individuo azoosprmico: los individuos
azoosprmicos tienen ausencia de espermatozoides en el eyaculado. Los
espermatozoides son la mayor fuente de ADN en las muestras de semen, por lo que
un individuo azoosprmico tiene mucho menos ADN seminal para el anlisis. La
cantidad de ADN por mililitro (mL) en el eyaculado de un individuo esprmico es
aproximadamente de 450 microgramos (gr) en los espermatozoides y de 30 gr en
los leucocitos y clulas epiteliales.
Por ello, en un individuo azoosprmico, el contenido de ADN es aproximadamente de slo el
6.3% del contenido en un individuo esprmico. Por las mismas razones que en el caso
anterior, es posible la deteccin de ADN de las clulas epiteliales y los leucocitos en
eyaculados de individuos vasectomizados aunque se encuentre mezclado con ADN de la
vctima.
1. Agresiones sexuales mltiples: el uso de los microsatlites del cromosoma Y en estos
casos permite determinar el nmero mnimo de agresores.
2. Otros tipos de mezclas: En mezclas de sangre-sangre, o de sangre-saliva, o de
sangre-pelos, el cromosoma Y es una herramienta de trabajo que puede aportar
valiosa informacin.

Como herramienta de screening:


1. En casos de agresin sexual: los polimorfismos Y pueden servir para relacionar
rpidamente estos casos (bases de datos) y excluir sospechosos de manera rpida
antes de profundizar en marcadores autosmicos.
2. En grandes catstrofes: Cuando en una catstrofe aparece un gran nmero de
cadveres puede ser interesante clasificarlos segn sus polimorfismos Y para poder

discriminar qu cadveres tendremos que cotejar con cada familia antes de realizar
los estudios de ADN nuclear autosmico. Esto resulta muy til cuando, por ejemplo,
los familiares vivos que se usan como muestras de referencia son los hermanos de
las vctimas.
Para terminar este apartado diremos que tanto el ADNmt como los polimorfismos del
cromosoma Y tienen mucho menos poder de discriminacin que el ADN nuclear autosmico
utilizado habitualmente. Ninguno de estos tipos de ADN identifica individuos, sino lneas
familiares maternas y paternas.

Tcnicas para analizar los polimorfismos del ADN


extrado[editar]
En un principio la manera de estudiar dichos marcadores se hizo por medio de la tcnica
llamada hibridacin con sondas oSouthern blot.
El tipo de sondas que se utilizan en esta tcnica pueden ser de dos tipos:

Sondas Uni-locus (SLP): La tcnica permite detectar loci minisatlites nicos. son
especficas para una regin de un determinado cromosoma. Se unen a secuencias largas
de nucletidos y presentan mayor variabilidad que las sondas multi-locus. Como resultado
se observan una o dos bandas por individuo, segn sea homocigoto o heterocigoto. El
patrn de bandas obtenido con estas sondas se denomina perfil unilocus de ADN o DNA
profiling. Se utiliza principalmente en investigaciones de paternidad porque identifica loci
minisatlites muy informativos.

Sondas Multi-locus (MLP): permiten identificar simultneamente muchas regiones


hipervariables. Son sondas de 10 a 15 nucletidos que se repiten mltiples veces y tras el
revelado se observan de 10 a 20 bandas por persona. Este patrn de mltiples bandas es
caracterstico de cada individuo, constituye algo as como su huella dactilar de ADN y se
conoce como huella gentica multilocus o DNA fingerprint.

Las sondas multi y uni-locus presentan una serie de ventajas e inconvenientes segn:

Informacin aportada: las sondas multi-locus tienen una mayor capacidad


discriminativa al aparecer mltiples bandas. No obstante, las uni-locus son ms
especficas ya que el fragmento de ADN con el que hibridan es de mayor tamao. Por
consiguiente, para analizar 7 o 8 loci, se deberan utilizar 7 o 8 sondas uni-locus, mientras

que con una sola sonda multi-locus podra hibridar de un solo paso esas 7 o 8 regiones
hipervariables.

Cantidad y calidad del ADN: cuando se usan sondas multi-locus se requiere


aproximadamente un microgramo de ADN sin degradar mientras que en el caso de las
uni-locus se necesita menos de 100 ng y este ADN no necesariamente debe estar en
perfecto estado, siempre y cuando el fragmento complementario a la sonda est intacto.

Especificidad entre especies: las sondas multi-locus permiten su uso sobre el ADN
humano y de cientos de animales superiores, mientras que las uni-locus son exclusivas de
ADN humano.

Aunque las SLP han sido y son bastante tiles en estudios de paternidad no puede decirse lo
mismo de su aplicacin a la Criminalstica ya que presenta una serie de inconvenientes como
son:

La cantidad de ADN que se necesita est entre 20 y 100 ng, cantidad difcil de
conseguir en casos de criminalstica en los que los indicios biolgicos encontrados son
mnimos.

En cuanto a la calidad del ADN, es muy difcil encontrar en buen estado toda la
cantidad de ADN que se necesita para un anlisis con sondas mono-locus.

El tiempo requerido para este tipo de anlisis es de dos o tres das, debido a la
necesidad de tener que utilizar ms de una SLP.

El hecho de que se requieran cantidades elevadas de ADN hace que normalmente, con el
primer anlisis se consume la totalidad de la muestra, con lo que se dificulta un contraste de
pruebas o una posterior revisin del caso.
Todas estas limitaciones se superaron tras la aparicin de una tcnica muy til, la reaccin en
cadena de la polimerasa(PCR: Polymerase Chain Reaction).

Individualizacin de las muestras biolgicas[editar]


En una primera fase se deber aislar la molcula completa, posteriormente slo estudiaremos
ciertas regiones de ella, concretamente las zonas ms polimrficas.
La analtica de ADN se realiza en cuatro fases:

Extraccin de ADN: consiste en separar la molcula de ADN del resto de componentes


celulares. La duracin de este proceso depende del tipo de resto biolgico que se analice,
por ejemplo en las muestras de sangre o de saliva el proceso de extraccin es ms rpido
que a partir de un resto seo o dentario donde el ADN es menos accesible.

Cuantificacin de ADN: se realiza para saber qu cantidad de ADN se ha logrado aislar


y en qu estado se encuentra (completo o roto).

Amplificacin de ADN: consiste en copiar muchas veces el fragmento concreto de ADN


que queremos estudiar para obtener una cantidad adecuada que nos permita su
deteccin, esto se lleva a cabo por PCR.

Deteccin del producto amplificado o tipaje: esta es la fase final del anlisis y nos
permite caracterizar y clasificar los fragmentos de ADN estudiados en cada muestra para
diferenciar unas de otras.

Criminalstica[editar]
Desde siempre el delito ha venido acompaado de la necesidad de investigarlo, de aclararlo,
de buscar y de castigar al culpable. Se puede definir criminalstica como la ciencia aplicada
que estudia cientficamente los indicios y las evidencias con el objeto de convertirlos en
pruebas para permitir la identificacin de las vctimas y de los delincuentes y esclarecer las
circunstancias de un presunto delito.

Muestras dubitadas e indubitadas[editar]


Las muestras con las que se trabaja en criminalstica se pueden clasificar en dos tipos:

Muestras dubitadas o evidencias: son restos biolgicos de procedencia desconocida,


es decir, no se sabe a quin pertenecen (por ejemplo las muestras recogidas en la escena
del delito o de un cadver sin identificar).

Los tipos de muestras dubitadas ms frecuentemente analizadas por tcnicas gentico


moleculares son: sangre (habitualmente en forma de mancha), semen (lavados vaginales o
manchas sobre prendas de la vctima), saliva (colillas de cigarrillo, chicles, sobres y sellos),
pelos, uas, tejidos blandos, restos seos y dentarios (estos ltimos relacionados
fundamentalmente con la identificacin de cadveres).

Muestras indubitadas o de referencia: son restos biolgicos de procedencia conocida,


es decir, se sabe a quin pertenecen (por ejemplo la sangre tomada de un cadver

identificado, o las muestras tomadas a familiares de un desaparecido). El tipo de muestras


indubitadas ms habituales son sangre y saliva (frotis bucal).
Para la gentica forense, son de inters los denominados indicios biolgicos que son los que
contiene ADN, y por ello se definen como toda sustancia lquida o slida que provenga
directamente del cuerpo humano o que haya estado en contacto con el mismo, y en cuya
superficie o interior pueda haber restos de clulas.
Algunos ejemplos de indicios biolgicos obtenidos en la escena del crimen son: sangre,
semen, pelos, saliva, tejidos blandos, huesos y dientes, orinas, heces, sudor, etc. En cuanto a
los indicios no biolgicos, algunos ejemplos son: fibras y tejidos, restos de plvora y material
de disparos, restos de tierra, semillas, plantas y hierbas, tinta pintura, madera, material de
engrase, etc.

Anlisis de muestras biolgicas[editar]

Sangre: se puede encontrar bien en estado lquido o en forma de mancha. La sangre


lquida bien conservada no ofrece ningn tipo de problema, pero es frecuente que al
laboratorio llegue sangre putrefacta bien porque se ha estropeado durante el transporte o
bien porque pertenece a un cadver en el cual se ha iniciado la descomposicin. Para
evitar el primer problema es conveniente realizar una mancha sobre una gasa antes de
proceder al transporte de la muestra y para el segundo hay que tratar de buscar otra
muestra para el anlisis, bien sea un tejido blando, uas, o un resto seo, dependiendo
del estado de conservacin del cuerpo. Por el contrario, la sangre en forma de mancha se
conserva ms fcilmente y puede analizarse tras varios aos si las condiciones de secado
fueron adecuadas. Quizs las manchas sobre cueros, maderas tratadas, restos vegetales
y tierras sean de las ms crticas pues estos materiales tienen diferentes grados de
absorcin y en ellos se encuentran presentes gran cantidad de inhibidores de la PCR
como los taninos, que impiden que la reaccin funcione. Para detectar muestras de
sangre en la escena de una agresin, se utilizan una serie de mtodos como: colorimetra
(deteccin mediante oxidasas), cristalografa, quimioluminiscencia (mediante luminol),
inmunocromatografa, etc.

Saliva: estas muestras no suelen presentar problemas en la analtica de ADN. Suelen


llegar al laboratorio en forma de mancha, sobre filtros de cigarrillo, sellos, chicles o
prendas o bien en otros soportes como vasos, botellas o huesos de fruta. Se detectan
mediante alfa-amilasa.

Esperma: se recoge en los casos de agresiones sexuales. El principal problema es


que adems de los espermatozoides del agresor se suele encontrar las clulas del epitelio
vaginal de la vctima. Por ello, a la hora de analizar estas muestras aparece una mezcla
de perfiles genticos, pero como el perfil gentico de la vctima s lo conocemos podemos
determinar cul es el del agresor.

Pelos: estas muestras requieren un anlisis microscpico previo a la analtica


molecular con el fin de determinar el tipo de anlisis que es posible en ellos (estudios de
ADN nuclear o de ADN mitocondrial) adems de otras caractersticas importantes. Con el
anlisis microscpico se determinan, entre otros, los siguientes puntos:

- Si se trata de pelos de origen animal o humano.


- Si se trata de pelos completos (con bulbo) o de fragmentos de pelos (sin bulbo). En el caso
de fragmentos de pelos los estudios a realizar son los de ADN mitocondrial como veremos en
el siguiente apartado. En el caso de los pelos con bulbo se puede determinar en qu fase vital
se encuentra ste. En los pelos con bulbo telognico (en fase de cada) se suele realizar
anlisis de ADN mitocondrial y en los pelos con raz anagnica (en fase de crecimiento) se
puede realizar un anlisis de ADN nuclear.

Tejidos: las muestras suelen estar relacionadas sobre todo con la identificacin de
cadveres en los que han comenzado los procesos de putrefaccin. Los mejores
resultados se obtienen con msculo esqueltico tomado de las zonas que se estn ms
preservadas de la putrefaccin.

Huesos y dientes: estas muestras se obtienen de los cadveres ya esqueletizados y


son las ms problemticas en cuanto a identificacin gentica. Los huesos largos (fmur o
hmero) y los molares (muelas) son las muestras que ofrecen mejores resultados. La
extraccin de ADN a partir de este tipo de restos es ms larga y costosa que en los casos
anteriores.

Exclusin e inclusin[editar]
Una vez que se ha estudiado todo lo anterior y se han obtenidos los resultados de ADN de las
muestras y se tienen supuestos sospechosos, hay que decidir si el sospechoso es el
verdadero autor del crimen o sin embargo se ha inculpado a la persona equivocada. Para ello
se definen dos conceptos: Exclusin e inclusin.
En las muestras tomadas del supuesto criminal como en las muestras recogidas en la escena
del crimen se han analizado una serie de loci polimrficos, los mismos en los dos casos:

Si al analizar los loci de ambos, tanto en la muestra problema como en el sospechoso


aparecen los mimos alelos, se habla de inclusin, pero esta inclusin nunca es del 100%
ya que se est trabajando con probabilidades. Estas probabilidades hacen referencia a las
frecuencias de los alelos en la poblacin. As, para obtener este valor hay que multiplicar
la frecuencia de que los dos alelos del locus 1 se den en la poblacin, por la frecuencia de
que los alelos del locus 2 se encuentren en la poblacin, y as sucesivamente hasta
multiplicar todas las frecuencias de los loci polimrficos analizados. Este valor ser un
nmero muy pequeo, por lo que para dar el resultado final se hace una conversin. Por
convenio, est establecido que si tras hacer la conversin se obtiene una probabilidad del
99.73% y todos los alelos de todos los loci coinciden, se estar en lo cierto con una
probabilidad altsima si se inculpa al presunto sospechoso como verdadero sospechoso.

Si por el contrario, al analizar los loci de ambos, hay algn alelo en el que la muestra
Loci
analizados

Muestra problema
(alelos)

Sospechoso 1
(alelos)

Sospechoso 2
(alelos)

Locus 1

2,4

2,4

2,4

Locus 2

12,15

12,15

12,14

Locus 3

1,6

1,6

1,7

Locus 4

3,10

3,10

3,10

Locus 5

4,9

4,9

4,9

Locus 6

2,12

2,12

2,12

Locus 7

5,7

5,7

5,7

problema y sospechoso no coinciden, aunque slo sea uno, se habla de exclusin, y en


este caso s es del 100%, es decir, que se tiene certeza absoluta cuando se rechaza al
supuesto sospechoso como verdadero autor y por tanto hay que seguir buscando al
verdadero sospechoso.
Ejemplo:
Se puede concluir diciendo que hay una probabilidad cercana al 100% de que el sospechoso
1 sea el verdadero autor del crimen, ya que todos los alelos de todos los loci coinciden y se

puede afirmar que el sospechoso 2 queda excluido con una certeza del 100% como
sospechoso, ya que hay de los de los alelos que no coinciden con los de la vctima.
En este caso, son las bandas del sospechoso 1 las que coinciden con las bandas de la
muestra analizada. Se pueden descartar por tanto al sospechoso 2 y 3 ya que hay algunas
bandas que no coinciden con las de la muestra.

Investigacin de la paternidad[editar]
En la investigacin de la paternidad se parte del presupuesto lgico siguiente: todo el ADN
que una persona posee es mitad del padre y mitad de la madre. Para estudiar si alguien es
hijo/a biolgico de unos padres determinados el procedimiento es sencillo: se selecciona un
locus determinado de ADN y se analiza para ver el genotipo del hijo cuestionado. Despus se
analizan los genotipos del ADN del padre y de la madre.
En esta ocasin tambin se tienen en cuenta los conceptos de exclusin e inclusin vistos en
el apartado anterior.
El anlisis de la paternidad se basa en las leyes de la herencia mendeliana. Por tanto si en un
hijo encontramos un alelo que no posee el presunto padre, la paternidad queda excluida con
seguridad absoluta. Si por el contrario el hijo tiene un alelo que pueda haber heredado de un
presunto padre, hay que realizar clculos estadsticos con el objetivo de calcular cuantas
personas, entre la poblacin general, podran ser padres potenciales por tener ese alelo.
Las inclusiones en los supuestos de paternidad tienen que hacerse igual que los casos de
criminalstica, usando probabilidades estadsticas que deben ser lo ms altas posibles. En
todo caso, habra que tratar de conseguir siempre una probabilidad de paternidad (escrita
como W) superior al 99,9%. O, si se expresa en ndice de paternidad (IP), debe ser superior a
1000; esta cifra de 1000 significa que es mil veces ms probable que el seor analizado sea el
padre a que lo sea otra persona de esa poblacin. La validez de la inclusin depende del
nmero de loci examinados y de la frecuencia con que el perfil de ADN se encuentre en la
poblacin general.
Existen dos reglas fundamentales que determinan dos tipos de exclusiones:

La primera regla de Landsteiner o exclusin directa: establece que todo carcter


presente en el hijo que no lo posea la madre, debe forzosamente proceder de su padre
biolgico. Si el supuesto padre no lo posee, se produce la exclusin de primer orden.

La segunda regla de Landsteiner o exclusin indirecta: el hijo y el padre son


homocigotos para un alelo distinto en un mismo locus. Si esto sucede se produce la
exclusin de segundo orden, denominado as porque es menos categrica que la anterior.

En este caso se debe tener en cuenta la posibilidad de que existan alelos silentes,
mutaciones o alelos presentes pero no identificados.
Estadsticamente el hecho de investigar a la madre es menos frecuente, ya que en el
momento del nacimiento la madre queda perfectamente identificada. Sin embargo hay
excepciones, como confusiones de recin nacidos en hospitales, el abandono de menores tras
partos clandestinos, el secuestro infantil y las desapariciones.

La probabilidad de paternidad[editar]
La probabilidad de paternidad (W) se calcula mediante la frmula descrita por Essen-Moller,
cientfico escandinavo que en 1938 desarroll los aspectos bioestadsticos de las pruebas de
paternidad, derivados del teorema de Bayes.

Indica la probabilidad que tiene ese individuo de ser el padre biolgico (X), comparado con un
hombre al azar de la poblacin (Y). As, el valor de X depende exclusivamente del resultado
de los anlisis realizados al tro, y el valor de Y corresponde a la frecuencia en la poblacin del
alelo del hijo que obligatoriamente ha recibido del padre. Generalmente se asume que la
madre y el presunto padre no estn relacionados.

ndice de paternidad[editar]
Indica cuantas veces es mayor la probabilidad del presunto padre de ser el padre biolgico del
hijo con respecto a un hombre tomado al azar.

X = Probabilidad de que el presunto padre sea el padre biolgico del hijo/a.


Y = Probabilidad de que lo sea un hombre al azar en la poblacin de referencia.
A la hora de investigar la paternidad, si el supuesto padre ha fallecido y se hace una
reclamacin de filiacin, se presentan diversas estrategias de anlisis para responder a la
pregunta de filiacin:

Proceder a la exhumacin del cadver.

Recurrir a familiares vivos del supuesto padre, para intentar deducir su patrimonio
gentico.

Utilizar muestras biolgicas del individuo fallecido, que hayan sido obtenidas antes de
su muerte.

Identificacin de restos cadavricos[editar]


La identificacin de los restos cadavricos procedentes de los accidentes de trfico, grandes
catstrofes, personas desaparecidas, etc., constituye un tipo de anlisis muy solicitado en
gentica forense.
Cuando se produce la aparicin de un cadver o restos cadavricos cuya identidad se
sospecha pero no se pueda establecer con total seguridad por mtodos tradicionales
(antropolgicos, odontolgicos, etc.), se puede recurrir a un estudio gentico como
complemento como nica va posible de identificacin.
Los cadveres de los que no haya sospechas sobre quin se trata deben ser igualmente
analizados y sus perfiles genticos deben ser almacenados en una base de datos annima
que permita su comparacin con muestras de referencia de personas que tengan familiares
desaparecidos.
Como consecuencia de la gran variedad de situaciones con las que nos podemos encontrar,
vamos a tratar de ordenar clasificar los casos que pueden ser resueltos primero en funcin
del tipo de muestra que debemos analizar y segundo en funcin del tipo de caso.
- Atendiendo al estado de conservacin de la muestra, los casos ms tpicos son:

Restos cadavricos en buen estado de conservacin. la recogida de muestras se


realiza inmediatamente despus de la muerte, las muestras ms adecuadas son sangre
y/o msculo. En los casos en los que se producen vctimas carbonizadas, el ADN es muy
estable a las altas temperaturas a las que se ve sometido y en general es posible obtener
ADN de alta calidad.

Restos cadavricos con un avanzado estado de putrefaccin esqueletizados. Se


trata de restos en los que la toma de muestras se realiza despus de un periodo de
tiempo largo tras la muerte, en este caso las muestras ms adecuadas son piezas
dentales huesos largos. Son los casos que entraan mayor dificultad en cuanto a la
obtencin y el anlisis del ADN.

Restos cadavricos embalsamados. Normalmente son los casos que entraan la


mayor dificultad puesto que lo ms comn es que la conservacin del cadver se realice
mediante formol derivados y est demostrado que el formol produce grandes
modificaciones de los cidos nucleicos.

Restos cadavricos momificados. En ciertos cadveres se producen fenmenos


naturales de momificacin como consecuencia de la rpida evaporacin del agua del
cuerpo, con lo que se detiene el desarrollo de microorganismos y por tanto la putrefaccin
y por tanto el material gentico de los tejidos blandos momificados se preserva en
condiciones que permiten su anlisis, que en condiciones habituales no sera posible
debido a los procesos destructivos del cadver.

Catstrofes masivas[editar]
La muerte de un elevado nmero de personas en un mismo evento puntual es lo que se
denomina gran catstrofe. El objetivo primordial en stas es el de identificar correctamente
lo antes posible a las vctimas. Esto no siempre es fcil, porque las presiones de los medios
de comunicacin, de los familiares, de las autoridades, inducen a los profesionales a cometer
errores.
Desde una perspectiva forense, centrados ya en las vctimas, se pueden clasificar las
catstrofes en dos tipos:

Catstrofe cerrada: aqulla en la que se conoce el nmero exacto o muy aproximado


de vctimas. Ej.: accidentes de aviacin, autobs, tren, etc. En estos casos incluso se sabe
los nombres de las vctimas.

Catstrofe abierta: aqulla en la que no se sabe el nmero de vctimas a priori. Ej.: las
catstrofes naturales, incendios en edificios o los famosos atentados del 11-S (Nueva
York) y el 11-M (Madrid).

Los mtodos de identificacin de ADN disponibles en una gran catstrofe son:

Patologa forense: el examen externo e interno del cadver en la autopsia (cicatrices,


tatuajes, prendas de vestir, lesiones internas y prtesis). Inconvenientes: la lentitud y que
slo sirve para cuerpos enteros y no muy daados.

Huellas dactilares: se pueden obtener por medio de la denomina necrodactilar, til en


las catstrofes cerradas. Es rpida, fiable y econmica.

Odontologa forense: es de alta fiabilidad, relativamente econmica pero a veces


limitada por la falta de material de referencia y por la lentitud derivada de la necesidad de
comparar todas las muestras una a una.

Antropologa forense: es econmica y fiable pero a veces resulta muy lenta.

Gentica forense: basada en el anlisis de ADN. Ventajas: resulta til en casi todos los
casos, puede utilizarse todo tipo de fragmentos, es muy fiable y sus costes son cada da
menores. Inconvenientes: hay casos en los que no funciona, a veces faltan laboratorios
especializados, es relativamente lento, y los precios aunque disminuyen son relativamente
elevados.

Bases de datos[editar]
Muchos de los delitos que quedan sin resolver porque en un momento determinado no hay un
sospechoso, pueden ser resueltos, incluso aos despus de que se hayan cometido, gracias
al desarrollo de las bases de datos. stas pretenden colaborar en la resolucin de casos
criminales permitiendo la comparacin automatizada de perfiles de ADN procedentes de
diversas fuentes: indicios no identificados de la escena del crimen, muestras de referencia de
sospechosos y muestras de referencia de vctimas. Tras las comparaciones pertinentes, y con
un nmero suficiente de muestras analizadas, se puede comprobar si una persona (imputado
o procesado) ha dejado indicios biolgicos en ms de una escena criminal o sobre ms de
una vctima. ste es uno de los medios ms eficaces de controlar a los criminales en serie y a
delincuentes reincidentes, algo muy tpico en casos de violaciones.
As, se puede encontrar que una serie de violaciones han sido cometidas por la misma
persona, porque el ADN del esperma coincide en todos los casos, pese que an no se haya
podido detener a ningn responsable.
En la prctica y para su uso, las bases de datos de identificacin gentica permiten la
comparacin automatizada a gran velocidad de los llamados perfiles de ADN. Estos no son
si no los nmeros y letras que identifican los fragmentos de ADN, y cuya cadena exacta es
nica para cada persona y presenta ciertas caractersticas comunes en el caso de parientes.
Existen diferentes bases de datos y entre todas ellas la de mayor capacidad de aplicacin
para el rea latinoamericana es el sistema CODIS (Combined DNA Index System),
desarrollado en los EE.UU. por el FBI.
Aunque resulta obvio y evidente, no hay que olvidar que un grupo de personas es la suma de
individuos y que debemos tratar de mantener su derecho individualmente. En el momento
actual existen mltiples problemas de tipo tcnico, cientfico, econmico y social para llevar a
cabo un proyecto de banco gentico general para toda la poblacin, por lo que no se plantea
su elaboracin. S se estn realizando sin problemas en determinadas profesiones de riesgo
en las que los profesionales de forma voluntaria y con consentimiento explcito donan una
muestra de saliva o sangre para ser analizada en caso de accidente, con vistas a solucionar
todas las cuestiones civiles que pueden presentarse ante la falta de identificacin del cadver
o de sus restos. En todos los casos se aprecia un beneficio en la realizacin de este tipo de
bancos, desde el punto de vista social se ha planteado la conveniencia de proceder al archivo
de estas muestras en determinados individuos con vistas a evitar un dao a la sociedad,

concretamente la discusin se ha centrado en los casos criminales, hablando de la necesidad


de proceder al archivo de todos los criminales autores de delitos graves, limitndolas en
principio al homicidio y a las agresiones sexuales. Las decisiones han variado segn los
pases, y en la actualidad los dos nicos que tienen una base de datos gentica de utilizacin
rutinaria en los casos prcticos son Estados Unidos y Gran Bretaa. El primero de ellos slo
archiva el perfil de los criminales que han sido juzgados y condenados por agresiones
sexuales, decidiendo instaurar este tipo de archivo debido fundamentalmente a la existencia
de los denominados "violadores en serie" tendentes a repetir el mismo tipo de conductas y a
las limitaciones para combatirlos, sobre todo por la movilidad y la diferente jurisdiccin entre
los distintos estados. En el Reino Unido se ha ido ms all y se procede al archivo de
muestras biolgicas de todas aquellas personas que se han visto envueltas en un hecho
delictivo. En Espaa no es posible llevar a cabo un proyecto de este tipo debido a la falta de
un marco legal apropiado para su realizacin, especialmente por las posibles consecuencias
negativas que del mal uso de los mismos se pudiera hacer.

Bibliografa[editar]

Lorente, J.A. 2004. Un detective llamado ADN. Ed.: 1. Editorial: Temas de hoy.

Quevedo, A. 1997. Genes en tela de juicio. Ed: 1. Editorial: Mc Graw-Hill.

Lewin, R. 1993. Evolucin humana. Editorial: Salvat Editores.

UAM.es

Introduccin a la tecnologa del ADN aplicada en el laboratorio forense

Conceptos bsicos de ADN forense

La investigacin biolgica de la paternidad

CEJ.justicia.es

CEJ.justicia.es

GuardiaCivil.org

UGR.es

Criminalistica.com.mx

Payala.mayo.uson.mx

Conceptos bsicos para DNA forense

Gentica forense

Otacon-san.livejournal.com

Bioqumica del Departamento de Ciencias Forenses


Categoras:
Ciencias forenses

Gentica

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Examen de cetonas en orina


Este examen mide la cantidad de cetonas en la orina.
Forma en que se realiza el examen
Las cetonas urinarias se miden usualmente con una "prueba rpida", que est disponible en un
equipo de examen que se vende en farmacias. El equipo contiene tiras reactivas impregnadas de
qumicos que reaccionan con los cuerpos cetnicos. La tira reactiva se sumerge en la muestra de
orina y un cambio de color es un indicador de la presencia de cetonas.
Este artculo describe el examen de cetonas en orina que implica el envo de la orina recogida a un
laboratorio.
Se necesita una muestra de orina limpia. Este mtodo se utiliza para evitar que los microbios del
pene o de la vagina ingresen a la muestra. Para recoger la orina, el mdico puede suministrarle un
equipo especial para tomar la muestra limpia que contiene una solucin de limpieza y toallitas
estriles. Siga las instrucciones al pie de la letra para que los resultados sean precisos.
Preparacin para el examen

Es posible que deba consumir una dieta especial. El mdico puede solicitarle que deje de tomar
medicamentos que puedan afectar el examen.
Lo que se siente durante el examen
El examen implica nicamente la miccin normal y no hay ninguna molestia.
Razones por las que se realiza el examen
Las cetonas se acumulan cuando el cuerpo necesita descomponer las grasas y los cidos grasos
para usarlos como energa. Es ms probable que esto ocurra cuando el cuerpo no recibe suficiente
azcar o carbohidratos.
Las pruebas de cetonas casi siempre se hacen si usted tiene diabetes tipo 1 y:

El azcar en la sangre es superior a 240 miligramos por decilitro (mg/dL).

Usted tiene una enfermedad como neumona, ataque cardaco o accidente


cerebrovascular.

Se producen nuseas o vmitos.

Est embarazada.

Valores normales
Un resultado negativo del examen es normal.
Los rangos de los valores normales pueden variar ligeramente entre diferentes laboratorios.
Algunos laboratorios utilizan diferentes mediciones o analizan muestras diferentes. Hable con el
mdico acerca del significado de los resultados especficos de su examen.
Significado de los resultados anormales
Un resultado anormal significa que usted tiene cetonas en la orina. Los resultados aparecen
normalmente como pequea, moderada o grande de la siguiente manera:

Pequea: <20 mg/dL

Moderada: 30-40 mg/dL

Grande: >80 mg/dL

Esto puede deberse a la cetoacidosis diabtica, un problema que se produce en personas con
diabetes tipo 1. Se presenta cuando el cuerpo no tiene insulina o sta no provoca la seal correcta
en los adipocitos para impedir que la grasa se descomponga para formar cetonas.
Un resultado anormal tambin puede deberse a:

Ingesta anormal de alimentos o nutrientes debido a anorexia nerviosa (un trastorno


alimentario), ayunos, dietas altas en protenas o bajas en carbohidratos, inanicin, vmitos
durante un perodo prolongado

Trastornos de aumento del metabolismo

Enfermedad grave o aguda

Quemaduras

Fiebre

Hipertiroidismo

Lactancia (alimentar a un beb)

Embarazo

Riesgos
Este examen no representa ningn riesgo.
Nombres alternativos
Cuerpos cetnicos en orina; Cetonas urinarias
Referencias
Inzucchi SE, Sherwin RS. Type 1 diabetes mellitus. In: Goldman L, Schafer AI, eds. Goldman's
Cecil Medicine. 24th ed. Philadelphia, Pa: Elsevier Saunders; 2011:chap 236.
McPherson RA, Ben-Ezra J. Basic examination of urine. In: McPherson RA, Pincus MR,
eds. Henry's Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods. 22nd ed. Philadelphia,
Pa: Elsevier Saunders; 2011:chap 28.
Actualizado: 11/7/2013

Versin en ingls revisada por: Brent Wisse, MD, Associate Professor of Medicine, Division of
Metabolism, Endocrinology & Nutrition, University of Washington School of Medicine. Also reviewed
by David Zieve, MD, MHA, Bethanne Black, and the A.D.A.M. Editorial team.
Traduccin y localizacin realizada por: DrTango, Inc.
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U.S. National Library of Medicine 8600 Rockville Pike, Bethesda, MD 20894 U.S. Department of Health and Human
Services National Institutes of Health
Pgina actualizada: 09 abril 2015

Gentica

El advenimiento de la moderna tecnologa del ADN ha resultado en un incremento en la


habilidad para desarrollar pruebas de identificacin humana. La identificacin individual es
deseable en un sin nmero de situaciones incluyendo la determinacin de la perpetracin
de un crimen violento tal como un asesinato o una violacin, resolucin de paternidad e

identificacin de restos de personas extraviadas, as como en los casos de desastres


masivos.
El ADN es un acrnimo para el cido desoxirribonucleico. Es una biomolcula, la cual se
encuentra en el ncleo de cada una de las clulas que componen el cuerpo humano
(excepto en los glbulos rojos que carecen de ncleo, por ser clulas muy
especializadas). Es heredada de ambos progenitores y es nica para cada individuo, con
excepcin de los gemelos idnticos. Cada molcula de ADN consiste en dos cadenas
entrelazadas, cada una complementaria a la otra, dirigida en direcciones opuestas y
forman una doble hlice, semejante a una escalera. Cada peldao de la escalera tiene un
par de grupos qumicos llamados bases (nucletidos), unidos por puentes de hidrogeno.
Hay cuatro tipos de base conocidas por sus letras iniciales: A (adenina), G (guanina), C
(citocina) y T (tiamina). Estas bases se combinan en pares especficos A con T y G con C,
de aqu que la secuencia de una cadena de la doble hlice, es complementaria con la otra
cadena.
Existen aproximadamente tres millones de pares de bases en una copia simple del
genoma humano. Dentro de la clula humana el ADN se encuentra en el ncleo de la
clula (ADN nuclear) el cual, esta dividido en los cromosomas que son paquetes densos
de ADN protegidos por protenas histonas. El genoma humano consiste de 22 pares de
cromosomas autosmicos y un par de cromosomas sexuales. As, las clulas humanas
normales contienen 46 cromosomas agrupados en 23 pares. Mientras que los hombres
estn designados por XY debido a que contienen una copia del cromosoma X y otra del
cromosoma Y. Por tanto, las mujeres contienen dos copias del cromosoma X y son
denominadas como XX.

Las regiones de la molcula del ADN que contiene genes son conocidas como "regiones
codificantes" y se dice que son esenciales, porque son las que nos hacen humanos. Sin
embargo, los genes comprenden solo el 2% del genoma humano, el resto est constituido
por "regiones no codificantes", las cuales no tienen una funcin biolgica y
consecuentemente, se describen con frecuencia como ADN no esencial.
La tecnologa fundamental de la perfilacin del ADN fue desarrollada como resultado de
un descubrimiento inesperado por el profesor Sir. Alec Jeffreys y colegas en los 80s, la
perfilacin del ADN se refiere a la identificacin de partes especficas (regiones no
codificantes) de la molcula de ADN de una persona. Es una tcnica, la cual posibilita a
los especialistas en ADN comparar dos muestras biolgicas y determinar la concordancia
de que estas muestras provengan de un mismo individuo.
El uso de la perfilacin del ADN como una herramienta en las investigaciones criminales o
en el mbito de lo familiar est bien establecido. Los avances de la tcnica a travs de la
automatizacin y computarizacin y las mejoras en la sensibilidad y aplicacin del mtodo
permiten la investigacin y examen de los escenarios de diversos delitos con la perfilacin
de diversas muestras biolgicas humanas (sangre, semen, saliva, piel, cabello con bulbo
y otros tejidos) encontradas en stos. La perfilacin del ADN puede ahora ser usada para
establecer la paternidad inequvoca o la identidad verdadera de un individuo, vinculando a
un sospechoso en la escena de un crimen o de una vctima, vinculando delitos

perpetrados por el mismo delincuente en la escena del crimen o de una o varias vctimas
y excluir o exonerar a individuos inocentes de sospecha.

El anlisis del ADN para la identificacin de individuos se basa en lo siguiente:


1.- El ADN de cada persona es nico y convenientemente analizado sirve para diferenciar
a un individuo de entre todos los dems. La mitad del ADN autosmico de una persona es
heredado del padre biolgico y la otra mitad de la madre biolgica, por lo que se pueden
realizar estudios de filiacin.
2.- Todas las clulas con ncleo del cuerpo de un individuo tienen el mismo ADN por lo
que se obtendr el mismo resultado si se analiza sangre, saliva, tejido, semen, pelo etc.
3.- Es posible identificar a un individuo a partir de muestras biolgicas muy pequeas o
degradadas.
4.- Se puede obtener ADN de muestras biolgicas aunque haya pasado mucho tiempo,
como por ejemplo en restos seos antiguos.

La aparicin de los STRs (Single Tandem Repeat) repeticiones cortas en tndem de una
secuencia de ADN en particular, en el mbito forense ocurri a principios de los 90,
gracias al desarrollo del proceso de la tcnica de Reaccin en Cadena de la Polimerasa
(PCR). Adicionalmente, mediante esta tecnologa, se logr amplificar en una misma
reaccin (mismo tubo) varios STRs en un proceso denominado reaccin multiplex. En
Mxico los sistemas en uso contienen 15 marcadores de regiones no codificantes y el
resultado de su estudio es la obtencin de un perfil gentico. Cada rea, regin o sitio se
le llama locus y tiene dos componentes llamados alelos, uno heredado de la madre y otro
del padre. En cada locus, la cadena de ADN consiste de secuencias repetidas de bases.

FUNCIONES DEL LABORATORIO DE GENTICA

a)Estudios de paternidad a peticin de los juzgados de lo familiar, para tal efecto


se toman unas gotas de sangre y muestra de saliva de la madre, del nio y del presunto
padre previa autorizacin por escrito. Es importante sealar que en este tipo de estudios
la muestra de la madre es muy til ya que si conocemos el 50% del material gentico que
le heredo a su hijo, el otro 50% deber coincidir plenamente con el padre biolgico del
menor (en ausencia de mutacin gentica), facilitando la interpretacin y el anlisis
estadstico del estudio de paternidad.

b)Toma de muestras biolgicas de occisos desconocidos para la obtencin del


perfil gentico y o haplotipo para futura confronta con familiares, siempre y cuando sea
solicitado por Agente del Ministerio Pblico o Juez. La muestra que se tome depender
del estado de conservacin del cadver por lo que se podr tomar sangre, msculo o
hueso.

c)Atencin de juzgados penales en caso que se solicite una segunda opinin o


intervencin como perito tercero en discordia, por ejemplo en caos de violacin, homicidio,
robo, etc.

EQUIPO Y REAS DEL LABORATORIO DE GNETICA DEL INSTITUTO


DE CIENCIAS FORENSES DEL DISTRITO FEDERAL.
Extraccin de ADN nuclear.
Lugar donde se procesan las muestras biolgicas de referencia (sangre y saliva) o
muestras forenses (tejido muscular, hueso, manchas de sangre, clulas espermticas,
tejido en bloques de parafina) para la obtencin de un ADN puro.

rea
extraccin Nudear

de

Las molculas de ADN deben separarse de cualquier otro material celular antes de que
ste pueda ser examinado, por consiguiente se han desarrollado mtodos de extraccin
de ADN para poder separar las protenas y otros materiales de las molculas de ADN.
Cuantificacin de ADN
Sitio donde se valora la calidad de ADN y cantidad de ADN humano obtenido durante el
proceso de extraccin y purificacin del ADN.

rea

de

Cuantificacin.
Slo despus de que el ADN de una muestra ha sido aislado, la cantidad y calidad podr
determinarse con precisin. La determinacin de la cantidad de ADN en una muestra es
esencial para la mayora de los ensayos basados en PCR, ya que concentraciones de
ADN relativamente bajas permite que se desarrolle mejor la amplificacin de los sitios de
inters. La cuantificacin del ADN de muestras de referencia (sangre y saliva) se realiza
mediante el equipo Nanodrop marca Thermo y para la cuantificacin del ADN extrado de
muestras forenses como tejido muscular, huesos, tejidos embebidos en parafina, clulas
espermticas en casos de violacin etc., es utilizada una tcnica ms sensibles como la
que se desarrolla en el PCR Tiempo Real marca Applied Biosystems, permitiendo conocer
la concentracin de ADN humano que se obtuvo posterior al proceso de extraccin, es un
ensayo que monitorea el producto de PCR mientras tiene lugar la amplificacin, analiza
ciclo a ciclo los cambios en la seal de florescencia generados durante las tres fases de la
PCR.
Reaccin en Cadena de la Polimerasa.
A travs de un termociclador se lleva a cabo la multiplicacin exponencial de 15 regiones
especficas de ADN no codificante.

a)

rea de amplificacin de ADN.


Esta tcnica permite amplificar ms de un milln de veces el ADN obtenido a partir de una
regin seleccionada del genoma, utilizando para ello las propiedades de la Taq
Polimerasa, siempre y cuando se conozca una parte de la secuencia de los nucletidos.
El rango de tamao tpico para los productos de PCR se encuentra entre 100 y 400 pares
de bases.

Para

la

obtencin del perfil gentico o haplotipo del cromosoma "Y" se utiliza un analizador
gentico automatizado 3130 y el software GeneMapper ID-X, teniendo ste ltimo una
herramienta novedosa para la interpretacin y anlisis de las muestras biolgicas
mezcladas como por ejemplo en casos de violacin en donde existen por lo general dos
tipos de clulas: vaginales y espermticas o cuando existe una mezcla de fluidos
biolgicos como sangre y saliva. Para detectar los alelos de los diferentes loci de los 15
marcadores genticos que se analizan el laboratorio, as como el sexo de la muestra se
realiza un escaneo de los productos de PCR de las muestras en estudio, el proceso se
lleva a cabo de forma automatizada por medio de la medicin del espacio de tiempo
desde la inyeccin de la muestra hasta la deteccin por un lser que se encuentra
cercano al final del capilar.

Calendario de Labores
Directorio y Ubicacin del INCIFO
Necropsia Mdico Forense
Psicologa Forense
Psicologa Forense
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Fluidos corporales en la investigacin criminal: sangre,


semen y salva (pgina 2)
Enviado por Prof. Wanda L. Santiago

Partes: 1, 2

9. Secuestro en todas sus modalidades


10. Robo en todas sus modalidades
11. Agresin agravada en su modalidad de delito grave
12. Perversin de menores
13. Fabricacin y distribucin de sustancias controladas
14. Distribucin de sustancias controladas a personas menores de 18 aos
15. Empresa criminal continua de sustancias controladas
16. Maltrato de menores en todas sus modalidades
17. Mutilacin

Secretores y no secretores
Para poder utilizar el ADN como medio para identificar sospechosos los cientficos han
clasificados a las personas entre secretores y no secretores. En la primera categora tenemos a
individuos cuyos fluidos corporales (sangre, semen y saliva, entre otros) pueden ser
clasificados. Se puede determinar su grupo sanguneo. La saliva es la sustancia ms ideal para
este tipo de anlisis.
Los no secretores pueden ser clasificados pero no se detectan partculas de sangre en los
fluidos. No se puede determinar el tipo de sangre. Del 65 al 80% de la poblacin son secretoras.
(Machado Schiaffino, 2006, Pericias)

Serologa forense
De acuerdo al FBI Law Enforcement Bulletin (2005) los investigadores criminales o forenses
no necesitan tener conocimientos sobre la Gentica ni conocer de complicadas frmulas
trigonomtricas o de clculo. Su adiestramiento est dirigido hacia el reconocimiento
del valor de las manchas producidas por los fluidos corporales. No determinan ADN. Su labor
consiste en encontrarlas, tomar medidas, levantarlas, embalarlas e identificarlas para enviarlas
al laboratorio forense (Secured.com).
Serologa Forense es el trmino que se utiliza para identificar a la disciplina cientfica que
estudia e identifica los fluidos del cuerpo (Lic. Olga Resumil, Criminologa general 2000).

En Puerto Rico el Instituto de Ciencias Forenses cuenta con una Divisin de Laboratorio
Forense de DNA / Serologa, el cual ".fue inaugurado el 18 de marzo de 1998. Tiene
como objetivo analizar diferentes tipos de evidencia biolgica recuperada de las escenas de
crmenes violentos tales como asesinatos, homicidios, violaciones, atropello y fuga, robos,
escalamientos, entre otros, para contribuir a esclarecer unos hechos delictivos.Este Laboratorio
cuenta con tres unidades: Serologa, ADN y Banco de Data de ADN". (Instituto de Ciencias
Forenses de Puerto Rico, 2009, http://www.icf.gobierno.pr/criminalistica/index.php)

Ventajas del ADN

1. Se puede encontrar en la sangre, orina, excreta, saliva, pelo, semen y en las clulas de
la piel.

2. Ayuda a identificar cuerpos que han estado enterrados por mucho tiempo como las
momias.

3. Indica relaciones de parentesco.


4. No se puede combinar; en una escena se puede encontrar sangre de la vctima y del
sospechoso mezcladas, pero se puede identificar la huella gentica de cada uno de ellos.
(Genge. 2004, The Forensic Casebook )

El Forensic Casebook recomienda la evidencia que debe ser recolectada. Las pruebas pueden
ser cualquier cosa, pero gracias a la experiencia obtenida en la bsqueda de fluidos corporales,
estos objetos tienen que ser analizados:

1. uas,

2. pauelos,

3. papel toalla, servilletas, toallas,

4. la bolsa de basura del zafacn,

5. palillos para limpiar odos o dientes,

6. colillas de cigarrillos,

7. sorbetes,

8. celulares,

9. todo lo que aparente haber tenido contacto con la boca,

10. sbanas, almohadas, frisas,

11. ropa sucia,

12. gorras,

13. espejuelos,

14. sobre y sellos usados,

15. tape,

16. cordones,

17. sogas,

18. condones usados

Medidas preventivas
Cuando se va a manejar la evidencia de fluidos corporales el investigador tiene que evitar
la contaminacin: la mezcla accidental de los fluidos encontrados en la escena con otras
sustancias biolgicas. (Secured.com, 2006).
Genge tambin presenta unas guas para el investigador:

1. Utilizar guantes desechables y cambirselos continuamente.


2. El equipo debe ser desechable para evitar la transferencia del ADN de un objeto a
otro.

3. Evitar tocarse la cara o el pelo.

4. No tocar las superficies.

5. Utilizar mascarilla y trajes desechables.

6. Todos los fluidos corporales deben considerarse como potencialmente infecciosos.

7. Se deben lavar las manos antes y despus de manejar la evidencia, aunque utilicen
los guantes;

8. no fumar, beber o comer en la escena

En Segured.com (2006) tambin se recomienda:

Verificar el equipo antes de tomar las muestras.

Seguir el procedimiento establecido.

Manipular la prueba una sola vez.


Si se le cae la evidencia o entra en contacto con otro equipo, se debe sustituir el mismo
y comenzar la recoleccin de nuevo.

Acercar el envase y no embalar los indicios juntos.

El tamao del contenedor debe ser adecuado.

Almacenar a la temperatura adecuada.

Recoger las envolturas, los guantes y depositarlos en los envases destinados para estos
fines: bolsas porosas y de papel, envases de cartn o de plstico si el objeto esta hmedo.

Muestras de fluidos
Los resultados de las pruebas para anlisis de ADN dependen de la pureza de la muestra, el
tiempo transcurrido entre la obtencin de la misma y su llegada al laboratorio. La habilidad del
Criminalista depende de los cuidados que se tuvieron durante el recogido de las muestras.
(Schiaffino, 1995, Pericias)
Procedimientos generales:

1. El primer oficial que llegue a la escena protege la misma en su totalidad.

2. Se incluyen los fluidos para protegerlos de toda contaminacin, posible prdida o


destruccin.

3. Si estn expuestos a las inclemencias del tiempo se deben cubrir con una caja o
recipiente de metal.

4. Se deben buscar en lugares no obvios. Si el sospechoso se lav las manos, el cao de


curva debajo de desage se debe dejar secar y enviar al laboratorio.

5. El sospechoso pudo limpiarse las manos en lugares poco visibles como debajo de un
mueble, alfombra u objetos oscuros. (Schiaffino, 1995, Pericias)

6. Se deben buscar debajo de las patas de los muebles

7. Se debe buscar en las rajaduras o hendiduras del piso, en especial entre las losetas.

Sangre
La evidencia de sangre es comn en los delitos violentos como el asesinato, homicidio,
mutilacin y agresin, entre otros. (Resumil, Olga. 2000 Criminologa General) Generalmente

se encuentra en las armas utilizadas, objetos e instrumentos, cristales rotos, ropa de la vctima
y el sospechoso, superficies lisas o porosas, etc. (Schiaffino, 1995, Pericias)

1. La muestra debe tomarse lquida o slida o en forma de manchas secas o unidas a


otras partculas.

2. Su color puede variar dependiendo del lugar en donde ha estado expuesta.

3. Se debe tomar en consideracin que tambin se descompone.

Al buscar evidencia de sangre se debe tener en mente las siguientes interrogantes: (Colacci
Arrascue Nellkhand, s.f., Huellas y manchasen la escena del delito)

1. Es sangre?

2. Es humana o animal?

3. A cul clasificacin pertenece?

4. Cul es la edad de la mancha?

5. De qu parte del cuerpo es?

En Criminalistica.net se hace referencia a una prueba de campo que ayuda al investigador a


identificar si la mancha es de sangre y a conservar intacta la evidencia para entregarla al
laboratorio. El producto qumico para la identificacin se conoce como Hemident. El
procedimiento a seguir es el siguiente:

Utilizar guantes de ltex.

Si la mancha est seca se debe disolver con dos o tres gotas de agua destilada.

Se pasa un palillo de algodn sobre la mancha y se inserta en el tubo de ensayo que


contiene el reactivo.

Se rompen las ampollas que estn en el fondo del tubo de ensayo y se agita por 20 0 30
segundos.

Si la sangre recogida cambia de a un color azul verdoso la prueba resulta positiva.

Tambin se utiliza un visor nocturno. Es una linterna con un filtro especial de luz azul es que
capaz de detectar la presencia de sangre, localizar huellas y restos fisiolgicos en la escena de
un crimen. (www.segurimagen.com)

Otro producto que utilizan los investigadores forenses para localizar manchas es el Luminol. Es
solucin qumica especial, extremadamente sensitiva, que puede detectar sangre que ha sido
removida con agua o inclusive con detergentes y clorox. Es un qumico fluorescente que cuando
se roca en una sustancia que contiene o puede contener sangre hace que las partculas
de hierro se hagan luminosas y fluorescentes. Para efectuar esta prueba los investigadores
necesitan completa oscuridad. (Arrascue Nellkhand, Colacci. s.f., Huellas y manchas en la
escena del delito)

Para recoger muestras de la sangre del sospechoso, la misma se extrae y se deposita en tubos de
ensayo que contienen anticoagulantes. Esto es necesario para compararla con la encontrada en
la escena del crimen. Lo anterior es funcin del tcnico del laboratorio.
Para procesar las manchas de sangre en el lugar de los hechos, Charles Vanderbosch nos
recomienda:

1. Protegerlas

2. Localizarlas (inspeccin ocular)

3. Fotografiarlas cuidadosamente: acercamiento, por secciones, a distancia.

4. Grabar en video y ubicar su posicin en el croquis.

5. Levantarla y embalarla cuidadosamente.

6. La sangre fresca se recoge con un papel absorbente.

7. Objetos pequeos que contengan sangre se llevan al laboratorio.

8. Transportarlas al laboratorio inmediatamente.

El investigador forense debe poder identificar los patrones que establecen las manchas. Estos
son el resultado de la transferencia de la sangre lquida, cuando sta entra en contacto con una
superficie. El estudio de los patrones incluye:

Localizacin de la mancha y descripcin de los patrones.

Cmo se crearon las manchas

Direccin en que viajaron las gotas

Origen

Objeto utilizado durante el ataque

Cantidad de heridas

Presencia del sospechoso en la escena

Posicin de la vctima, el sospechoso y los objetos durante la comisin del delito.

La secuencia de los eventos (Wikipedia, 2009, Bloodstain Pattern Analisis)

Patrones de sangre
Patrn de flujo: Cambio en la figura y direccin de la mancha de sangre debido a la
influencia de la gravedad o el movimiento del objeto.

Chorro: es el patrn que resulta del flujo de la sangre que sale del cuerpo a una presin baja,
formando un charco de sangre.

Coagulo: masa gelatinosa de tejido sanguneo formada por factores coagulantes en la sangre.
Los cogulos detienen el flujo de sangre de una herida.
(http://es.mimi.hu/medicina/coagulo_sanguineo.html)

Patrn de goteo sobre sangre: Es el patrn que resulta del gotereo de sangre en sangre.

Lanzamiento: El patrn de la mancha creada cuando la sangre es sacudida o tirada a una


superficie u objeto, en movimiento.

Patrn Arterial o de Chorro: El patrn de la mancha que resulta cuando la sangre sale del
cuerpo, bajo una presin ejercida, causada por el rompimiento de una arteria.

Manchas circulares: Las manchas o gotas que se encuentran en superficies horizontales son
de forma circular, dependiendo de la altura desde donde caen.
A mayor altura, el impacto puede ocasionar que se proyecten en forma de estrellas. (Brian
Innes, 2000, Bodies of Evidence)

Formas de cadas de manchas circulares (bloodspatter.com)

Caractersticas morfolgicas

Las formas y figuras pueden variar en tamao y caractersticas morfolgicas, debido a la


cantidad, calidad, origen, dimensin, profundidad y longitud de la lesin. (Montiel)

Huellas que gotean sobre un plano inclinado, sin que la persona tenga movimiento, se
presentan ovaladas y alargadas con escurrimientos largos en la parte inferior. Son manchas
estticas. (Montiel)

Las huellas que caen en un plano horizontal cuando el movimiento es rpido se presentan en
forma de lgrimas, con una sola estra o alargamiento, que indica la direccin del movimiento.
Se conocen como manchas dinmicas.

Las manchas producidas por un goteo ininterrumpido sobre un plano horizontal presentan un
rastro de sangre en forma de franjas desplazndose estras en los lados, que segn su direccin
indican movimiento. (bloodspatter.com)

Categoras
Se clasifican en tres grupos: pasiva, proyectadas y transferidas.
Pasiva: se crea cuando la fuerza que la produce acta sobre su gravedad. Puede ser un patrn
producido por goteo o flujo. (bloodspatter.com)

Proyectadas: la mancha se produce cuando una forma de energa ha sido transferida desde la
fuente de origen de la sangre. son creadas cuando sale la sangre expuesta por un objeto
en accin o una fuerza mayor que la fuerza de gravedad. El tamao, la figura y el nmero que

resultan de la mancha van a depender del tipo de fuerza que se utilice para hacer brotar la
sangre. (bloodspatter.com)

1) Producida por una velocidad de bajo impacto. (bloodspatter.com)

2) Velocidad media: la agresin

3) Impacto de alta velocidad por una fuerza mayor como las armas de fuego.
(bloodspatter.com)

Lo anterior no describe la velocidad de las gotas de sangre cuando viajan por el aire. Solo
describe la cantidad de energa necesaria crear las manchas. (Bloodstain Pattern Analisis).
Tranferidas: Se produce cuando un objeto con sangre entra en contacto con la superficie de
otro que no tiene sangre. (bloodspatter. com)

En el 2005 el FBI public un artculo sobre el Valor de la evidencia en donde recomiendan:

Medir el largo y ancho de una gota de sangre y describir la direccin en que viaj.
Anotar la informacin en el croquis y tomar fotografas. (bloodspatter.com)

Las gotas que caen a alta velocidad se producen por una fuerza extrema mayor de 100
pies por segundos. Pueden medir menos de un milmetro. Pueden ser producidas por armas
de fuego o explosivos.

Se considera velocidad media cuando se necesita una fuerza extrema mayor de 5 pies
pero menor de 25. Estas manchas miden de 1 a 3 milmetros. Pueden ser producidas por
objetos cortantes.

Las manchas creadas por una fuerza menor de 5 pies se catalogan como velocidad
menor y se producen debido a la fuerza de gravedad. Pueden medir 3 milmetros o ser ms
largas. Son el resultado del movimiento de la vctima o el arma.

Cuando la sangre se dispersa en varias direcciones desde la herida las gotas tienden a
esparcirse. Cuando golpean el suelo son ovaladas. (Bloodstain Pattern Analisis).

Una lnea imaginaria a travs de la mancha rastrea el rea de dnde provino. Se


dibujan lneas a travs de los patrones de sangre hasta donde la persona estaba parada. Este
punto se conoce como convergencia. (Wikipedia, 2009, Bloodstain Pattern Analysis)

Para Juventino Montiel es importante que el investigador reconozca que la sangre arterial es de
color rojo y una vez lesionada una arteria la sangre se proyecta con fuerza, originando huellas
dinmicas. La venosa es de color oscuro, casi no tiene potencia y slo se produce cuando la
hemorragia es leve.
Otra caracterstica que se debe conocer es que la sangre ante morten se coagula entre 5 a 8
minutos posterior a su salida del cuerpo, lo que nos indica que la vctima no muri
inmediatamente. La post morten no se coagula. La forma, direccin y estado de las manchas
pueden indicar los movimientos posteriores de la vctima, si existi lucha o forcejeo, si estaba
con vida, si fue encontrada o movida de su posicin original.
Tambin nos indica que las manchas hmedas en ropas y telas se deben dejar secar antes de
embalarlas y no exponerlas nunca al sol o calor.
Es difcil que permanezcan en superficies como metales, cristales, porcelana, pisos pulidos,
encerados o barnizados porque se escurren. Se encuentran en lugares que ofrecen la mejor
superficie para su adherencia: piel, ropa o telas, paredes, madera, muebles, cortinas, pisos
de cemento, alfombras, en el bao, cocina, lavabo, pasillos, telfonos y otros lugares que
pueden indicar desplazamiento de la vctima o huda del sospechoso. (Juventino Montiel,
2009, Criminalistica Tomo 1)

Recoleccin

1. El rastreo es importante as como el examen metdico porque pueden estar visibles o


invisibles.

2. Se deben documentar todas las manchas de sangre durante la


investigacin preliminar.

3. Los proyectiles pueden contener restos de tejido y sangre.

4. Para recolectar una muestra de la sangre seca, se puede utilizar una navaja de afeitar
o bistur.
5. Hay que desinfectarla aunque sea nueva.
6. Se coloca un papel limpio, previamente doblado y pegado con cinta adhesiva, debajo
de la mancha, de modo que se reciba la costra al ser raspada. Luego se dobla el papel y se
guarda en un sobre sellado.

7. Si la sangre cay en tierra y fue absorbida por sta, se debe recoger una cantidad
suficiente para obtener toda la sangre.

8. Se coloca en un envase de vidrio o plstico, se sella y se anota la informacin


necesaria.

9. Esta muestra se tiene que enviar rpidamente al laboratorio para evitar que
las bacterias y moho de la tierra destruyan en valor de la prueba.

10. La ropa de las personas y la de cama, cuando estn hmedas, deben ser envueltas
de manera que no pasen a las partes limpias de la prenda.

11. Para evitar la transferencia se puede colocar un trozo de papel limpio entre cada
capa de tela.

12. Esta evidencia puede contener tambin pelo, vello pbico, fibras o manchas de
semen. (Schiaffino)

Semen
En los delitos sexuales este fluido corporal es elemento de identificacin humana. Tambin se
utiliza para eliminar sospechosos. La ausencia de espermatozoides no descarta que el fluido sea
semen porque stos se destruyen con facilidad y el sospechoso puede ser oligozooesprmico
(poca cantidad de semen) o azooesprmico (ausencia de espermatozoides). Es el qumico
forense el que determina que la mancha es de semen. (Fernando Cardini,
2001, Tcnicas de Investigacin Criminal)
Para Juventino Montiel las manchas de semen tambin se pueden encontrar en escenas de
delitos no sexuales en donde hubo una masturbacin.

Recomendaciones:

1. Semen en tierra se recoge igual que la sangre, la vestimenta y la ropa de cama.

2. Se tiene que ocupar la ropa interior de la vctima y el sospechoso.

3. Si el delito se comete al aire libre, se debe examinar minuciosamente la vegetacin y


el suelo. Si estn sobre la vegetacin, se debe retirar la planta y colocar en un envase rgido,
en donde pueda permanecer inmvil para evitar la friccin durante el traslado.

4. Pueden encontrarse tambin en toallas, papel sanitario, pauelos desechables o de


algodn, pisos, asientos de auto o inodoros y en el cuerpo de la vctima.

5. Montiel recomienda:

a. Buscar manchas visibles e invisibles. Se aprecian por el color blanco semitransparente y de aspecto grumoso; cuando son frescas el color es ligeramente amarillo y
textura endurecida.

b. Una mancha fresca o seca que se observe sobre una superficie puede corroborarse
con la aplicacin de luz ultravioleta, presentando un color blanco azuloso fluorescente: Luz
de Wood.

c. Cuando la mancha es vieja y ha sido raspada, es posible que se destruyan los


espermatozoides. En tal caso se recurre al laboratorio para pruebas qumicas.

Recomendaciones para la recogida y envo de muestras con fines de identificacin Gentica:


Grupo Espaol y Portugus de la ISFG, (2000)
Este Grupo public unas sugerencias generales para el recogido de fluidos corporales:

Manchas secas en muestras pequeas y de fcil transporte se introducen por separado


en bolsas de papel o cartn. Evidencia de colillas y chicles se recogen con pinzas. Estos
ltimos se guardan en envases de plstico. Los sobres y sellos se introducen en bolsas de
papel o plstico, sin despegarlos.

Para manchas secas en lugares no transportables o no absorbentes como metal y cristal


se recomienda utilizar un hisopo estril ligeramente mojado con agua destilada. Se puede
raspar la mancha con una navaja o bistur sobre un papel blanco limpio. Debe ser doblado
cuidadosamente y embalado en una bolsa de papel.

Para lugares absorbentes como las telas, manteles, alfombras, etc. se recorta la mancha
y se guarda en una bolsa de papel.

El semen encontrado en la piel se recoge con un hisopo estril.

Siempre es necesario obtener informacin de los hechos, de la vctima y del sospechoso.

Semen lquido encontrado en preservativos se atan para que no se derrame su


contenido y se introduce en un frasco plstico.

De la boca se pueden hacer dos muestras bucales con hisopos estriles que se pasan con
cuidado y sin frotar mucho por la lengua, encas, los dientes y el paladar.

Saliva

Curiosamente la saliva carece de ADN, pero est en un medio lleno de clulas epiteliales que se
desprenden constantemente y que llegan a formar parte de la misma. An as, es el mejor
medio para obtener muestras de esta huella gentica.

La localizacin de manchas en la escena del crimen es difcil, ya que es mnima la secrecin.


Pero en los secuestros o robos, cuando la vctima ha sido amordazada, se produce una mxima
salida-expulsin de saliva. En estos hechos delictivos la vctima por la fuerte excitacin que
sufre, segrega gran cantidad de saliva, espuma y en ocasiones vestigios sanguinolentos, como
consecuencia de ligeras autolesiones debidas al forcejeo para evadirse de la mordaza. (Gaston
Passi, 2008, http://unicit-criminalistica.blogspot.com/)
Bsqueda y localizacin

1. Sobre las telas las manchas de saliva son blanquecinas o amarillentas.

2. En el suelo da la apariencia de "rastros de caracol", con aspecto de focos brillantes.

3. En el caso de soporte impermeable presenta la forma de pequeas costras-escamas.

4. Son restos pequeos y la mancha aparece como cuarteada. (Gaston Passi, 2008,
http://unicit-criminalistica.blogspot.com/)

5. Recoger con un hisopo hmedo (agua destilada) la mancha en cuestin, dejar secar a
temperatura ambiente y enfundar el hisopo. (www.slagf.org/toma.html)

6. La saliva puede encontrarse en el piso, paredes o ropas. Chicle, hueso de aceituna,


boquilla de cigarro pueden contener clulas del epitelio bucal y por tanto ADN.

7. Debido a la existencia de mucosidades, la mancha de saliva observada con la lmpara


de Word da fluorescencia azulada. (Gaston Passi, 2008, http://unicitcriminalistica.blogspot.com/)

8. Tambin puede utilizarse la Luz Forense UltraLite ALS

9. Si la muestra est seca puede rasparse con un instrumento cortante esterilizado.


(Procuradura General de la Repblica Dominicana, 2006, Procedimientos Bsicos de
Recoleccin en el Sitio del Suceso)

Admisibilidad de fluidos corporales


Todas las muestras de fluidos corporales tienen que cumplir con la cadena de evidencia. Esta
establece un control sobre las personas que manejan la prueba desde el inicio de

la investigacin hasta que se presente en corte. Vanderbosch recomienda tomar las siguientes
medidas de seguridad:

Limitar el nmero de personas que manejan o entran en contacto con la evidencia.

Si la evidencia deja de estar bajo la custodia del investigador:

a. Anote a quien se la entrego.


b. Fecha y hora
c. Motivo
d. Condiciones al ser entregadas
e. Cuando y por quien fue devuelta
f. Condiciones al ser recibida
g. Documentar el procedimiento con recibos
Los fluidos corporales corresponden a caractersticas fsicas del sospechoso. La presentacin en
corte es admisible por tratarse de pruebas cientficas cuyas garantas de confiabilidad deben ser
corroboradas por el juzgador de los hechos. (Rafael Daz, 1997, Evidencia Criminal para el
oficial del orden pblico)
El Tribunal Supremo de Puerto Rico ha emitido importantes decisiones judiciales que han
limitado la forma de recogido de muestras que luego sern presentadas como piezas de
evidencia, debido a que se utilizan para comparar y analizar los fluidos corporales
caractersticos de una persona. No constituyen una intromisin irrazonable en contra del
derecho a la autoincriminacin.
En una sociedad tan compleja como la nuestra, en donde cada da tenemos menos testigos
dispuestos a testificar, la evidencia fsica relacionada a los fluidos corporales tiene un valor
incalculable. Por eso es tan importante que los investigadores forenses sigan los
procedimientos establecidos para garantizar que las muestras levantadas en la escena no se
contaminen o destruyan, perdiendo as su valor probatorio.
Mientras ms conserven sus caractersticas originales ms fcil y confiable ser el trabajo de los
especialistas en Serologa Forense. Se podr lograr la identificacin del sospechoso, la
evidencia ser admisible en los tribunales, se lograra la conviccin y castigo del verdadero
autor del delito.
Son muchos los que desean trabajar como investigadores forenses; pero son pocos los que
tienen las cualidades necesarias para seguir los procedimientos establecidos para recolectar y
embalar adecuadamente la evidencia de fluidos corporales en la escena del crimen. Se pueden

adiestrar yproveerles las herramientasnecesarias para realizar un trabajo de excelencia que


garantice el cumplimiento de la justicia.

Bibliografa
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de Ciencia y Tecnologa, Universidad de El Salvador.
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www.segurimagen.com

Autor:
Prof. Wanda L. Santiago

Prof. Wanda L. Santiago


M.A. Justicia Criminal
25 Aos como Profesora Universitaria: Universidad Interamericana de Puerto Rico, Caribbean
University, John Jay College of Criminal Justice/Academia de la Polica de Puerto Rico, Colegio
Universitario de Justicia Criminal, Colegio Universitario de San Juan, Universidad
Metropolitana, Colegio Universitario del Este, Universidad Sagrado Corazn y Universidad de
Puerto Rico en Carolina.
Directora del Instituto de Educacin Continua de la Asociacin de Ciencias Forenses de Puerto
Rico
Instructora Florida Regional Community Policing Institute, St. Petersburg College (SPC),
Programa Puerto Rico Training Initiative-COPS at Law Enforcement Institute, Caguas, Puerto
Rico
Conferenciante
Asesora Acadmica

Partes: 1, 2

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Comentarios

Lunes, 7 de Diciembre de 2009 a las 09:50 | 0

zaidena .
Excelente la nota.
Escribo novelas policiales cortas y estos elementos los utilizo y los incorporo y son la admiracion de quienes
leen debido al contenido que poseen.
felicitaciones por estos articulos y por los dems pues en realidad son de una calidad excelente
zaidena
Mostrando 1-1 de un total de 1 comentarios.

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Leer ms: http://www.monografias.com/trabajos76/fluidos-corporales-investigacion-criminal/fluidos-corporalesinvestigacion-criminal2.shtml#ixzz3YYTYieXu

http://www.poderjudicial.gob.ni/pjupload/iml/pdf/IML_0010.pdf

EL LABORATORIO

ESTUDIOS DE ADN

EXTRACCIN DEL ADN

ANLISIS DEL ADN EXTRADO

LA MUESTRA PARA ADN

REFERENCIAS

DIRECCIN

CONTACTO

TOMA DE MUESTRAS DE REFERENCIA.


1. Personas vivas

Siempre con consentimiento informado, no debe engaarse a la persona respecto al tipo de estudio que se
realizar

con

su

Debe existir un documento firmado con la autorizacin expresa para realizar el anlisis.

muestra.

MUESTRA

SANGUNEA

Existe la creencia popular de que en PERSONAS TRANSFUNDIDAS se cambia el patrn gentico. Esto es as slo
en teora, ya que en la prctica la persona debera transfundirse un gran volumen de sangre (casi toda) y concurrir
inmediatamente a la toma de muestra para ADN, lo cual le producira una debilidad y caractersticas fsicas
fcilmente detectables por el personal que realiza la toma. Un par de horas despus, ya aparece en la sangre el
patrn gentico real del individuo, al principio mezclado con el donante de la sangre. De todos modos, en caso de
duda

pueden

tomarse

HISOPADOS

BUCALES.

Se sugiere realizar puncin dactilar, depositar una gota -de aproximadamente 1 cm. de dimetro- en cualquier
tipo de papel de filtro y dejar secar a temperatura ambiente. Embalar en sobres de papel comn. En estas
condiciones

la

muestra

dura

ms

de

10

aos.

No tomar sangre lquida ya que debe conservarse en freezer o se deteriora rpidamente.


HISOPADOS

BUCALES

No se trata de saliva sino de clulas epiteliales retiradas de la mucosa bucal. Dos hisopos de ambos carrillos, que
se colocan en sobres de papel -nunca de polietileno- para evitar la proliferacin bacteriana. Los envoltorios de
polietileno o celofn, condensan la humedad y favorecen la degradacin.
PELOS

CON

BULBO

No se recomiendan como muestras de referencia, debe preferirse hisopados bucales o muestras sanguneas. De
ser necesario, UN SLO pelo con bulbo es suficiente, pero se recomienda recolectar no menos de tres mediante
arrancado, y fijarlos mediante una cinta adhesiva a una placa de cartulina o plstico. Se sugiere no usar
portaobjetos de vidrio, ya que pueden romperse durante el traslado.

2. Cadveres

a) Cuando se trata de cadveres en buen estado de conservacin, tomar una gota de sangre por puncin cardaca y
colocar

sobre

papel

de

filtro

como

se

indicara

anteriormente.

En fallecidos antes de los cinco das, puede tomarse aproximadamente un (1) gramo de msculo esqueltico, que se
almacena

en

un

recipiente

de

plstico

tapn

de

rosca.

Conservar

en

freezer.

Se sugiere adems retirar dos molares, que se dejan en reserva a temperatura ambiente, con el fin de evitar la
exhumacin si se requieren estudios de ADN meses o aos despus.
b) Cuando se trata de cadveres antiguos o esqueletizados, se recomienda tomar una porcin de hueso largo
(fmur, hmero, etc.), otros huesos largos de manos o pies, y/o piezas dentales no daadas externamente ni
sometidas a endodoncias.
c) En el caso particular de los cadveres quemados, contrariamente a la creencia popular, la conservacin de los
tejidos es mucho mejor que en los casos de fallecidos por muerte natural, y casi siempre es posible analizar
msculo

esqueltico

de

zonas

profundas.

Cuando la carbonizacin es casi total, es recomendable recolectar huesos o dientes, seleccionando aquellos que a
simple

vista

se

encuentren

en

mejor

estado.

An cuando las noticias periodsticas a menudo dan cuenta del hallazgo de un "cadver calcinado", esto no suele ser
cierto: la calcinacin implica transformacin en minerales, y en esas condiciones el cadver pierde su forma y se
reduce a un montculo de sales. Entonces, si el cadver pudo reconocerse por su forma, no hubo tal "calcinacin".
El fuego elimina las bacterias que producen los fenmenos de putrefaccin, y los tejidos se "esterilizan" permitiendo
una excelente conservacin. Adems, por una ley fsica, la temperatura del cadver no supera los 100 grados
centgrados hasta que toda el agua que contiene el mismo se evapora; y esa temperatura de ebullicin mata las
bacterias

pero

no

afecta

el

ADN,

que

se

conserva

inalterado.

Cuando el cadver REALMENTE est calcinado, por ejemplo, cuando procede de hornos crematorios, el ADN fue
totalmente destrudo y no es posible el anlisis; sin embargo, si se han conservado huesos no reducidos el estudio
puede igualmente intentarse.
d) Otras muestras de referencia de individuos fallecidos: a menudo se conservan en hospitales algunas muestras de
sangre, biopsias en parafina, o preparaciones histolgicas que pueden ser empleadas, siempre y cuando no hayan
sido fijadas en formol. Desde luego que previamente debe constatarse la autenticidad de las muestras.
Tambin puede recurrirse al mbito familiar, donde los peines, maquinillas de afeitar, o la saliva en estampillas o
sobres suministran una fuente segura de material gentico. Este tipo de muestras se ha recolectado para identificar
a las vctimas de los atentados terroristas a las Torres Gemelas (NY, USA) y a las estaciones de trenes (Madrid,
Espaa).

1. TOMA DE MUESTRAS DE REFERENCIA

2. TOMA DE INDICIOS BIOLGICOS en el lugar de los hechos

3. TOMA DE INDICIOS BIOLGICOS en el cuerpo de la vctima

4. TOMA DE INDICIOS BIOLGICOS en casos de agresin sexual

5. EMPAQUETAMIENTO Y ENVO DE LAS MUESTRAS

6. IDENTIFICACIN DE LA MUESTRA

7. CUSTODIA DE LA MUESTRA

8. EMPAQUETADO

9. RECOMENDACIONES FINALES sobre la toma de muestras

Fuente: Recomendaciones de la Sociedad Latinoamericana de Gentica Forense www.slagf.org.


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Histopatologa de la ua
B. Martina,
Departamento de Dermatopatologa, St John's Institute of Dermatology, St Thomas Hospital,
Londres, Reino Unido
a

Palabras clave
Patologa ungueal. Histopatologa. Ua.

Resumen
La estructura de la unidad ungueal es compleja y poco conocida para muchos dermatlogos y dermatopatlogos.
Sin embargo, la rentabilidad diagnstica de una biopsia ungueal depende en gran medida de que ambos estn
familiarizados con la anatoma e histologa de la zona. La ua puede verse afectada por condiciones inflamatorias
o infecciosas que suelen repercutir de manera marcada en la calidad de vida del paciente. As mismo, una amplia
variedad de tumores pueden desarrollarse en esta regin; estos pueden resultar fatales en ocasiones, o pueden
requerir tratamiento quirrgico que resulte en un defecto funcional de los dedos. En esta revisin repasaremos la
anatoma e histologa de esta rea y mencionaremos los hallazgos histopatolgicos bsicos en las condiciones que
afectan a las uas ms frecuentemente.

Artculo
Introduccin
Las uas son estructuras especializadas formadas por queratina dura que cubren el rea dorsal distal de los dedos
de las manos y los pies. Su misin principal es la de proteccin y facilitacin del agarre y manipulacin fina, pero
adems tienen otras funciones secundarias, como la de rascado y la cosmtica.
Las uas pueden verse afectadas en multitud de enfermedades. En muchos casos, las alteraciones ungueales son
reflejo de condiciones genticas, metablicas u otras afecciones sistmicas1. En estos casos, una anamnesis y
exploracin clnica detalladas son necesarias para reconocer la patologa subyacente. En otras ocasiones, las
anomalas de las uas responden a fenmenos inflamatorios, infecciosos o tumorales locales que pueden
comprometer seriamente la calidad de vida o incluso la supervivencia del paciente. Es aqu donde el estudio
microscpico de la ua puede contribuir en gran medida al diagnstico.

Estructura anatmica e histolgica


La estructura anatmica del aparato ungueal es compleja. Su conocimiento y comprensin son vitales para el
diagnstico histolgico de las afecciones de la ua y, sin embargo, muchos dermatlogos y dermatopatlogos no
estn familiarizados con ella. El aparato ungueal se compone de 4 elementos fundamentales:
1. La lmina ungueal, que es lo que se conoce generalmente como ua.
2. La matriz, cuya funcin es producir la lmina ungueal y que se encuentra por debajo de la parte
proximal de esta. La lnula, normalmente visible en los pulgares y primeros dedos del pie, no es ms
que la parte distal de la matriz.

3. Los pliegues ungueales proximal, distal y laterales de la ua. En la parte proximal encontramos el
sistema de cutculas, compuesto por el eponiquio o cutcula visible y la cutcula verdadera, que se
encuentra por debajo de la visible. Y en la parte distal se halla el hiponiquio, que sella la lmina ungueal
en su porcin anterior y la protege de infecciones y otras agresiones.
4. El sistema de soporte de la lmina ungueal se halla configurado por el lecho ungueal, el tejido conectivo
subyacente, la falange y sus ligamentos2 (Figura 1, Figura 2).

Figura 1. Esquema que muestra los elementos anatmicos del aparato ungueal en una visin frontal.

Figura 2. Esquema que muestra los elementos anatmicos del aparato ungueal en un corte lateral.
Todos estos elementos poseen caractersticas histolgicas particulares (Figura 3). El epitelio de los pliegues
ungueales est formado por piel normal con la nica diferencia, con respecto al resto del tegumento, de que
carece de unidades pilosebceas. La lmina ungueal se puede reconocer fcilmente en las biopsias ungueales al
estar formada nicamente por clulas muertas cornificadas que se tien con hematoxilina y eosina de un rosa
plido3. El lecho ungueal, que se encuentra por debajo de la lmina ungueal, est formado por un epitelio fino, de
2 o 3 capas de espesor, carente de estrato granuloso en estado fisiolgico, y con unas pocas capas de clulas
paraqueratsicas en su polo superior que estn fuertemente adheridas a la lmina ungueal. Este epitelio tiene un
patrn de crestas epidrmicas ms aplanado que el de la epidermis normal. Por debajo, hay tejido conectivo,
periostio y hueso. La matriz est compuesta por un epitelio germinativo mamelonado en su base y sin capa
granulosa. Las crestas del epitelio de la matriz estn orientadas oblicuamente en direccin proximal, dirigidas
hacia atrs y, probablemente, sea esta orientacin lo que permite que la lmina ungueal crezca hacia fuera en
ngulo y no en vertical hacia arriba3. El epitelio de la matriz queratiniza por medio de un proceso conocido como
onicoqueratinizacin, que produce la queratina dura que dar lugar a la ua. En la parte ms proximal de la matriz
se encuentra la llamada zona queratgena, que se encarga de producir la parte ms superficial de la lmina
ungueal. Esta zona puede reconocerse en las secciones histolgicas al estar formada por clulas aplanadas de
citoplasma rosa brillante que retienen el ncleo durante un tiempo. El resto de la lmina ungueal se produce a
partir de la matriz distal. Se cree que el lecho ungueal tambin contribuye de una manera modesta a la produccin
de la lmina ungueal. La matriz y, en mucha menor medida, el lecho ungueal son las nicas porciones del aparato
ungueal que en condiciones fisiolgicas contienen melanocitos. Estos son dendrticos, se localizan en las 3 o 4
capas ms bajas del epitelio escamoso en nmero aproximado de 5-6/mm, y son ms numerosos en la zona distal
de la matriz. Solo la mitad de los melanocitos de la matriz producen melanina, y los melanocitos del lecho
ungueal no son activos en condiciones normales 4. A veces podemos encontrar melanina en cortes histolgicos de

la lmina ungueal; esta llega a esta porcin del aparato ungueal por transferencia de melanosomas desde los
melanocitos de la matriz, sobre todo en situaciones de hiperactividad o proliferacin de los mismos.

Figura 3. Imagen de hematoxilina-eosina 20 del aparato ungueal que muestra el aspecto histolgico de los
distintos elementos que conforman la unidad ungueal.

La biopsia ungueal
La ciruga de la ua puede tener fines teraputicos, cuando un tumor afecta al aparato ungueal, o diagnsticos.
Hay diversas situaciones clnicas que justifican la realizacin de una biopsia ungueal 5. En primer lugar, pese a que
el estudio de recortes de la ua tratados con hidrxido potsico (KOH) es sufiente en la mayora de ocasiones
para alcanzar el diagnstico de onicomicosis, la exploracin histolgica de la ua puede estar indicada para
demostrar la presencia patolgica de hongos. Tambin es til para diferenciar entre patologa fngica y psoriasis y
para el diagnstico de enfermedades inflamatorias cuando la patologa est limitada a la ua (por ejemplo, en el
liquen plano ungueal). Por ltimo, es de gran utilidad en el caso de tumores ungueales, melanocticos o no
melanocticos.
Los pacientes inmunosuprimidos, diabticos o con enfermedad vascular perifrica tienen un mayor riesgo de
desarrollar complicaciones tras la ciruga ungueal, y por ello deberemos ser ms conservadores a la hora de
decidir llevar a cabo una biopsia en esta zona en estos grupos6.
La biopsia ungueal puede tener como objeto distintas zonas de la unidad ungueal la matriz, el lecho ungueal, la
lmina ungueal, los tejidos circundantes o combinaciones de los anteriores-. El dermatlogo o cirujano que
realice la biopsia debe conocer con detalle la anatoma de la ua y cul es la porcin normalmente afectada en la
patologa que sospecha clnicamente. As, la biopsia debe realizarse con la tcnica adecuada y sobre el segmento
ungueal pertinente para aumentar la rentabilidad de la muestra 7. Adems, tambin es vital que la informacin
transmitida del clnico al patlogo sea lo ms completa posible, con indicacin precisa de la tcnica de biopsia
empleada, la localizacin exacta de la misma y la orientacin del espcimen 8, 9. El envo del espcimen adherido a
una pieza de papel y acompaado de un dibujo detallando el rea biopsiada y la tcnica utilizada puede ser de
gran ayuda10. Por ltimo, hay que intentar evitar la fragmentacin y/o distorsin de la muestra.
Biopsia de la lmina ungueal
El afeitado o recorte consiste en obtener una muestra de la lmina ungueal y el hiponiquio con unas tijeras, unas
tenazas o unas pinzas gubias. Este procedimiento es muy sencillo y resulta adecuado para el diagnstico de
onicomicosis distales subungueales y psoriasis. Estas 2 entidades pueden ser indistinguibles histolgicamente,

pero una tincin de PAS de la muestra nos permitir diferenciarlas. La muestra debe tomarse de la parte afectada
de la ua, incluyendo los residuos y el material hiperqueratsico subungueal, y se debe incluir en parafina
directamente, sin fijar11.
Biopsia del lecho ungueal
La biopsia de lecho ungueal es tcnicamente sencilla y tiene un buen rendimiento diagnstico en el caso de
sospecha clnica de onicomicosis, enfermedades inflamatorias como la psoriasis, o hemorragias de origen
traumtico. Adems, la morbilidad y la cicatriz que resultan de este tipo de biopsia son mnimas 3. La biopsia de
lecho ungueal est indicada para confirmar infeccin mictica ante una sospecha clnica alta de esta afeccin y
una biopsia de lmina ungueal negativa. Las muestras se pueden obtener con una biopsia en sacabocados de
3 mm o una elipse longitudinal12.
Biopsia de la matriz
La inclusin de la matriz ungueal en la muestra es vital en la evaluacin de lesiones pigmentadas, ya que esta es
la zona donde, en condiciones normales, residen los melanocitos. Las tcnicas quirrgicas para biopsiar la matriz
son algo ms complejas. Adems, pueden potencialmente daar la matriz -principal productora de la lmina
ungueal-, con el consiguiente peligro de provocar una distrofia ungueal permanente. Una biopsia sobre la matriz
distal, que se encarga de producir las capas inferiores del plato ungueal, conlleva un menor riesgo de distrofia. Por
otra parte, esta suele ser la zona en la que se originan la mayor parte de lesiones pigmentadas y, por tanto, si
restringimos la ciruga a esta porcin tendremos una probabilidad muy alta de obtener una muestra diagnstica y
un mejor resultado cosmtico4. Se han descrito numerosas tcnicas para biopsiar la matriz, ya sea mediante
elipses transversales o sacabocados de 3 mm, y la descripcin detallada de las mismas escapa del objetivo de esta
revisin.
La muestra ideal para el diagnstico histopatolgico, en especial en lesiones melanocticas, es una biopsia en cua
longitudinal que incluya todas las porciones del aparato ungueal. Adems, cuando la patologa afecta al tercio
externo de la ua, este tipo de biopsia tiene la ventaja de provocar un defecto cosmtico mnimo, resultando
simplemente en una ua de menores dimensiones. El resultado cosmtico es peor cuando la patologa se localiza
en el centro de la ua, donde la cua longitudinal puede provocar una ua partida permanente.

Histopatologa de las afecciones de la uaPatologa inflamatoriaPsoriasis


La psoriasis es probablemente la dermatosis que afecta a las uas con mayor frecuencia. Alrededor del 3% de la
poblacin padece psoriasis, y de estos, casi el 50% tiene afectacin ungueal. Esta condicin puede manifestarse
en las uas con distintas expresiones clnicas, dependiendo del segmento al que afecte la inflamacin. Cuando
afecta a la matriz proximal, la que se encarga de producir la parte mas superficial del plato ungueal, la psoriasis se
manifiesta como pitting ungueal13. Histolgicamente, el pitting corresponde a focos de paraqueratosis en la parte
superior del plato ungueal. Si la enfermedad afecta al hiponiquio y al lecho ungueal, aparecen manchas de aceite
y onicolisis. La acumulacin de material sobre el lecho ungueal clnicamente produce hiperqueratosis ungueal.
Las hemorragias en astilla reflejan los cambios vasculares que acontecen en el lecho ungueal 14. La inflamacin de
la matriz durante periodos cortos de tiempo produce estras transversales, conocidas como lneas de Beau. La
onicorrexis o estras longitudinales corresponden a una afectacin de la matriz ms prolongada en el tiempo 15.
Histolgicamente los cambios son similares a los que se encuentran en las placas de psoriasis en la piel:
hiperqueratosis, paraqueratosis, hiperplasia psoriasiforme del epitelio, vasos dilatados y tortuosos en la dermis
papilar y presencia de neutrfilos (Figura 4). Sin embargo, a diferencia de lo que sucede en el resto del
tegumento, la presencia de espongiosis y el acmulo de exudados serosos son frecuentes, y puede haber
hipergranulosis del epitelio. Los cambios histolgicos observados en la psoriasis pueden ser virtualmente
idnticos a los que producen las infecciones ungueales por hongos. Por lo tanto, siempre se debe realizar una
tincin de PAS de la muestra para descartar una infeccin mictica. Una caracterstica que puede ayudar a

diferenciar histolgicamente ambos procesos es la presencia de exudados serosos, que son frecuentes en la
psoriasis e infrecuentes en la onicomicosis16.

Figura 4. Psoriasis ungueal. Hematoxilina-eosina A) 10; B, C y D) 20, mostrando hiperqueratosis,


paraqueratosis, hiperplasia psoriasiforme del epitelio y acmulo de neutrfilos en la capa crnea.
Liquen plano
Como ocurre con la psoriasis, el liquen plano puede afectar a distintas partes de la unidad ungueal, lo que tendr
correlaciones clnicas diferentes. La afectacin focal de la matriz produce el adelgazamiento parcial de la lmina
ungueal, resultando clnicamente en estriaciones longitudinales. Cuando la enfermedad es ms agresiva y afecta a
toda la matriz puede producirse atrofia de la totalidad de la lmina ungueal. La cicatrizacin del proceso puede
provocar cambios pigmentarios, o incluso la formacin de un pterigium o fusin de la matriz con el pliegue
ungueal proximal, lo que impide el crecimiento de la ua de manera permanente 15. Si la enfermedad solo afecta al
lecho ungueal, hay hiperqueratosis subungueal y/u onicolisis. Histolgicamente, los cambios que se observan en
las uas son muy parecidos a los de la biopsia de piel afectada (Figura 5). Encontramos hiperqueratosis,
hipergranulosis, hiperplasia irregular de la epidermis y un infiltrado liquenoide con formacin de cuerpos de
Civatte, degeneracin vacuolar de la membrana basal e incontinencia pigmentaria. Pero en la ua se pueden
encontrar ciertas particularidades, como la presencia de paraqueratosis y de exudados serosos. Los cambios
descritos no son patognomnicos del liquen plano, pudiendo aparecer tambin en otras situaciones como, por
ejemplo, en respuesta a un traumatismo 3.

Figura 5. Liquen plano ungueal. Hematoxilina-eosina A) 10, B) 20, C) 40 y D) 20, mostrando


hiperqueratosis, acantosis del epitelio y un infiltrado linfocitario liquenoide en la dermis. Se puede observar la
degeneracin de la capa basal, con queratinocitos disqueratsicos y cuerpos de Civatte.
Eccema
El eccema afecta normalmente a los pliegues periungueales. Si la inflamacin afecta a la matriz puede repercutir
en el aspecto de la lmina ungueal con cambios en la coloracin, rugosidades, pitting o estriaciones.
Histolgicamente, encontraremos focos de paraqueratosis, formacin de capa granulosa, espongiosis, formacin
de vesculas intraepidrmicas y un infiltrado linfocitario en la dermis (Figura 6).

Figura 6. Eccema ungueal. Hematoxilina-eosina 20 mostrando marcada espongiosis y exocitosis de linfocitos.


En la dermis hay un infiltrado linfocitario perivascular.
Alopecia areata
Los cambios tpicos en esta condicin se restringen a la matriz proximal y, por tanto, se traducen clnicamente
en pits en la superficie de la lmina ungueal. Histolgicamente, estos son iguales a los que se producen en la
psoriasis, pero clnicamente son menos profundos y se disponen de manera geomtrica 3.
Enfermedad de Darier
La mayor parte de los pacientes con enfermedad de Darier tienen cambios ungueales, que se presentan
clnicamente como bandas longitudinales blancas o rojas que pueden acabar en forma de V en el borde libre de la
ua. Las zonas afectadas de la lmina ungueal son frgiles y tienen tendencia a fracturarse. La correlacin
histolgica de este fenmeno clnico es la presencia de acantosis del lecho ungueal con paraqueratosis, junto a la
presencia de clulas epiteliales multinucleadas gigantes. En ocasiones puede observarse acantolisis en la matriz o
lecho ungueal16.
Patologa infecciosa fngica
Las infecciones ungueales por hongos son la causa ms frecuente de patologa ungueal 17. Las onicomicosis se
pueden clasificar en: subungueal distal, subungueal proximal, blanca superficial y onicomicosis por Candida.
1. La onicomicosis subungueal distal es la ms frecuente, habindose cifrado una prevalencia en la
poblacin general espaola de alrededor del 2,6-2,8%18. Los agentes causales ms habituales son los
dermatofitos. La patogenicidad de otras formas fngicas solo se puede demostrar cuando estas estn
presentes de manera repetida en varios cultivos de material subungueal en los que no crecen
dermatofitos3. Es habitual que estos residan en las escamas en palmas o plantas del paciente y desde ah
penetren por el hiponiquio para invadir la unidad ungueal, llegando hasta el lecho ungueal 3.
Histolgicamente, las hifas suelen encontrarse en la porcin queratinizada del lecho ungueal o en la
parte ms profunda de la lmina ungueal (Figura 7). Por ello, la biopsia superficial de la lmina ungueal
puede arrojar un resultado falso negativo. As, una biopsia del plato ungueal es ms fiable que la biopsia
superficial para el diagnstico de las onicomicosis, y est indicada en caso de cultivo negativo de la
muestra superficial19, 20, 21. Histolgicamente, veremos formacin de capa granulosa e hiperqueratosis
compacta en el epitelio del lecho ungueal. Adems, en lesiones de larga evolucin habr tambin
cambios inflamatorios, es decir, espongiosis y exocitosis de linfocitos y neutrfilos 3. Para llegar al
diagnstico es necesario confirmar la presencia de hongos en las muestras. La tincin de PAS es el
mtodo ms sensible para la deteccin de hifas en las muestras de uas (82%), por delante del cultivo
(53%) o la visin directa al microscopio con KOH (48%)22. Hay que recordar que la psoriasis puede
presentarse con caractersticas histolgicas similares y, por lo tanto, deberemos considerar este
diagnstico cuando el PAS sea negativo.

Figura 7. Onicomicosis subungueal distal. A) Hematoxilina-eosina 10. Lmina ungueal y parte del
lecho ungueal adherido a esta que muestra acantosis y presencia anmala de capa granulosa en el
epitelio. B) Tincin de PAS 40 correspondiente a A que revela la presencia de hifas en la parte ms
profunda de la lmina ungueal. C) Biopsia obtenida por recorte, teida con hematoxilina-eosina 10,
que consiste en fragmentos de lmina ungueal distrfica, con hiperqueratosis muy marcada. D) Tincin
de PAS 40 que revela hifas en la muestra.
2. La onicomicosis proximal subungueal es la menos frecuente de las infecciones micticas. El hongo
penetra por el pliegue ungueal proximal y, clnicamente, esto se traduce en la aparicin de manchas
blancas en la parte proximal de la lmina ungueal que pueden progresar y coalescer. En la biopsia vemos
cambios histolgicos similares a los descritos anteriormente, pero suele haber mayor hiperqueratosis,
costra serosa y extravasacin sangunea. La biopsia debe tomarse de las zonas blanquecinas y debe ser
profunda.
3. La onicomicosis blanca superficial est causada, en la inmensa mayora de los casos, por Thichophyton
mentagrophytes17, y se produce casi exclusivamente en las uas de los pies. El hongo invade la parte
ms superficial de la lmina ungueal. Histolgicamente, se encuentran formas fngicas cortas (y no
hifas) en la porcin superficial de la ua. La biopsia debe tomarse de la porcin ms superficial de las
reas de coloracin blanca de la lmina ungueal.
4. La onicomicosis por Candida suele afectar a pacientes con infecciones mucocutneas por este germen.
El hongo penetra por el hiponiquio para invadir rpidamente toda la lmina ungueal. Histolgicamente,
la totalidad de la lmina ungueal est invadida por seudohifas y en el epitelio hay cambios
inflamatorios3.
Hematomas
Clnicamente se manifiestan como reas de coloracin rojiza a negra de la ua. El paciente en ocasiones refiere
un antecedente traumtico. El principal motivo para la realizacin de una biopsia en este contexto es diferenciar
esta patologa de una lesin melanoctica y, concretamente, de un melanoma. Esto solo ser necesario en los
pocos casos en los que la exploracin dermatoscpica no sea suficiente para resolver esta duda diagnstica 23.
Histolgicamente, en algunos casos pueden verse colecciones de eritrocitos en la lmina ungueal. Cuando los
cambios son ms sutiles es necesario recurrir a tinciones histoqumicas, ya sea con bencidina para poner de
relieve la presencia de hemoglobina (la tincin de Perls no es adecuada en el aparato ungueal) 4, o con MassonFontana para descartar la presencia de melanina.
Patologa tumoral
Una gran variedad de tumores pueden desarrollarse en el aparato ungueal 24. En una serie mexicana reciente25 los
ms habituales fueron los tumores fibrosos (29,05%), seguidos de los osteocartilaginosos (21,79%), los
seudoquistes mixoides (11,96%) y el melanoma maligno (9,82%). De entre los tumores malignos, el segundo en
frecuencia, por detrs del melanoma, fue el carcinoma epidermoide (4,7%). En este apartado solo repasaremos las

caractersticas histopatolgicas de algunos de los tumores benignos y malignos ms comunes, pero hay que
recordar que cualquier tumor puede potencialmente afectar a la ua (Figura 8).

Figura 8. Schwannoma subungueal. A) Hematoxilina-eosina 10 mostrando ulceracin, distrofia ungueal y un


tumor polipoide compuesto por clulas fusiformes. B y C) Hematoxilina-eosina 20, detalle de la proliferacin de
clulas fusiformes con formacin de cuerpos de Verocay. D) Tincin inmunohistoqumica para S100,
confirmando la positividad de las clulas tumorales.
Tumores ungueales benignosSeudoquiste mixoide
Se presenta como una protusin qustica translcida que contiene un material gelatinoso. La localizacin ms
comn es entre la articulacin interfalngica distal y el pliegue ungueal proximal, aunque tambin puede
desarrollarse entre el pliegue ungueal y la ua, por debajo de la matriz ungueal o en el pulpejo del dedo. Puede
causar distrofia ungueal26. Los cortes histolgicos revelan una cavidad seudoqustica rodeada de tejido fibrtico y
repleta de material mixoide que contiene escasos fibroblastos de morfologa estrellada.
Verrugas vricas
Aparecen en los segmentos del aparato ungueal que poseen capa granulosa pliegues ungueales e hiponiquio,
pero desde ah pueden progresar y afectar al lecho ungueal o incluso a la matriz. Estas lesiones pueden estar
causadas por distintos serotipos de virus del papiloma humano (VPH). Los ms comunes son el 1, 2 y 4 27, pero el
16, tpicamente implicado en patologa genital, tambin puede participar en el desarrollo de verrugas en el aparato
ungueal16. La histologa es similar a la de las verrugas del resto del tegumento, excepto en el caso de verrugas
mirmecias, que se caracterizan por grnulos gruesos de queratohialina, inclusiones eosinoflicas y coilocitosis
muy marcada.
Fibroqueratoma acral adquirido
Se presenta como lesiones ssiles de color de piel normal que surgen del pliegue ungueal proximal o, ms
raramente, del lecho ungueal. Los que aparecen en pacientes con esclerosis tuberosa son reconocidos como uno
de los estigmas de esta enfermedad y reciben la denominacin de fibroma periungueal o tumores de Koenen 28.
Histolgicamente son lesiones polipoides hiperqueratsicas con acantosis del epitelio y un rea central compuesta
de tejido fibroso con fibras colgenas orientadas verticalmente. Los tumores de Koenen pueden contener, adems,
miofibroblastos estrellados atpicos16.
Fibromixoma acral superficial
Es un tumor fibroso descrito recientemente y poco frecuente que suele afectar a los dedos de las manos y los pies
y muy frecuentemente al aparato ungueal. Se presenta en pacientes adultos como un ndulo asintomtico.
Histolgicamente esta neoplasia est compuesta por clulas fusiformes que pueden tener un patrn estoriforme y
estn embebidas en un estroma fibroso o mixoide. Las clulas tumorales son positivas para CD34 y CD99 29.
Tumor glmico

Se puede desarrollar en diferentes localizaciones del aparato ungueal. La clnica vara dependiendo del rea afecta
y puede manifestarse, por ejemplo, como un ndulo azulado o como distrofia ungueal 30. Tpicamente, estos
tumores son dolorosos. Suelen ser lesiones nicas, pero se han descrito casos de tumores mltiples en pacientes
con neurofibromatosis tipo i31. El estudio histolgico de estos tumores revela una proliferacin de clulas
cuboidales con ncleo basfilo y redondeado y citoplasma eosinfilo, que se tien con actina y en ocasiones con
CD34 (Figura 9).

Figura 9. Tumor glmico. A) Hematoxilina-eosina 10. Muestra un tumor localizado en la dermis, por debajo del
lecho ungueal. B) Hematoxilina-eosina 40 alto poder mostrando las clulas tumorales, de morfologa cuboidal.
C) Tincin inmunohistoqumica para actina de msculo liso 40, mostrando positividad de las clulas tumorales.
D) Tincin inmunohistoqumica para CD34 40 mostrando positividad para las clulas tumorales.
Granuloma pigeno
Puede afectar a los pliegues ungueales, lecho o matriz ungueal. En este ltimo caso causar distrofia ungueal.
Clnicamente, son lesiones exofticas que sangran fcilmente. Pueden ser confundidos clnicamente con
melanomas amelanticos o carcinomas espinocelulares, as como con una gran variedad de tumores benignos 32.
Histolgicamente son similares a los de otras localizaciones y consisten en una proliferacin lobular de vasos
capilares embebidos en un estroma edematoso (Figura 10).

Figura 10. Granuloma pigeno. A) Hematoxilina-eosina 10 mostrando hiperqueratosis y acantosis del epitelio y
una tumoracin polipoide, ulcerada y compuesta por canales vasculares. B) Hematoxilina-eosina 40, detalle de
la proliferacin lobular de capilares incluidos en un estroma edematoso.
Inclusiones epidermoides subungueales
Estas lesiones pueden tener repercusin clnica distrofia ungueal, cambios en la coloracin de la ua, protusino ser asintomticos. A veces estn relacionados con un antecedente traumtico o quirrgico. Histolgicamente, las
inclusiones epidermoides subungueales son idnticas a los quistes epidermoides 33 (Figura 11).

Figura 11. Inclusiones epidermoides subungueales. A) Hematoxilina-eosina 10. La dermis contiene varias
estructuras qusticas repletas de queratina. B) Hematoxilina-eosina 40. Detalle de las inclusiones qusticas.

Queratoacantoma distal digital


Se presentan clnicamente como ndulos hiperqueratsicos que crecen de forma rpida bajo el pliegue ungueal
proximal. Son tpicamente dolorosos. Precisamente por su crecimiento rpido, suelen causar erosin de la falange
subyacente, lo que provoca una caracterstica imagen radiolgica con defecto ltico en semiluna del hueso. El
examen histolgico muestra una proliferacin de clulas escamosas con citoplasma eosinfilo en vidrio
esmerilado, sin displasia y con disqueratosis focal34 (Figura 12). En pacientes con incontinentia pigmenti se ha
descrito la aparicin de tumores dolorosos subungueales, frecuentemente mltiples, con caractersticas
histolgicas idnticas a las de los queratoacantomas ungueales 35.

Figura 12. Queratoacantoma distal digital. Imagen de bajo aumento. A y B) Hematoxilina-eosina 10 mostrando
hiperqueratosis, acantosis e hipergranulomatosis del epitelio junto con una proliferacin lobular de clulas
escamosas intensamente eosinoflicas que proviene del epitelio. C) Hematoxilina-eosina 20 y D) 40 que
muestran las clulas escamosas bien diferenciadas y de citoplasma brillante eosinoflico con disqueratosis focal.
Onicomatricoma
Clnicamente se presenta como bandas longitudinales amarillentas asociadas a hemorragias en astilla dentro del
rea de coloracin amarillenta o en el pliegue ungueal proximal, y engrosamiento y aumento de la curvatura de la
ua afecta36. Histolgicamente podremos apreciar un tumor velloso que proyecta mltiples digitaciones
fibroepiteliales desde la matriz ungueal hacia la lmina ungueal, que aparece engrosada. El epitelio que recubre
las proyecciones carece de capa granulosa, y las clulas tumorales en el estroma muestran positividad para CD34,
y son negativas para CD99, S100, EMA, actina y desmina37 (Figura 13).

Figura 13. Onicomatricoma. A y B) Hematoxilina-eosina 10 mostrando acantosis del epitelio y un tumor


fibroepitelial con proyecciones vellosas. C) Hematoxilina-eosina 20. Detalle de las proyecciones fibrosas
recubiertas de epitelio. D) Hematoxilina-eosina 40. Gran aumento mostrando las clulas fusiformes embebidas
en estroma colagenoso.
Exostosis
Son tumores benignos que se originan de la falange distal o de restos cartilaginosos calcificados. Clnicamente se
manifiestan como ndulos dolorosos de crecimiento lento que pueden causar deformidad de la ua. Aparecen con
mayor frecuencia en el primer dedo del pie, en la segunda y tercera dcadas de la vida, con una ligera tendencia a
afectar ms al sexo femenino. En muchos casos se asocian a un antecedente traumtico. Radiolgicamente,

observaremos un tumor de hueso trabecular con su porcin distal ensanchada y recubierta de cartlago.
Histolgicamente se puede observar hueso trabecular recubierto distalmente por cartlago fibroso 16.
Osteocondroma subungueal
Se diferencia del anterior en que el crecimiento seo se origina en la metfisis sea y no en el segmento distal de
la falange, y en que histolgicamente se compone de hueso trabecular recubierto de cartlago hialino. Adems,
este tumor afecta ms frecuentemente a varones y no est relacionado con un antecedente traumtico 16.
Tumores ungueales malignosEnfermedad de Bowen
El carcinoma epidermoide in situ se puede desarrollar en los tejidos periungueales o en el epitelio del lecho o la
matriz ungueal. Lo ms frecuente es que en su presentacin clnica simule verrugas periungueales, procesos
infecciosos, inflamatorios o traumticos. Pero tambin pueden comenzar con manifestaciones atpicas, como
pigmentacin ungueal38, 39 o eritroniquia40. El carcinoma epidermoide ungueal, tanto in situ como invasivo, se ha
relacionado con infecciones por VPH. El serotipo 16 -uno de los asociados con lesiones malignas en el rea
genital- es el que se asla con mayor frecuencia41. Una de las hiptesis que explicara este fenmeno es la
transmisin genitodigital42 y, por tanto, el tratamiento de los pacientes con enfermedad de Bowen periungueal
debe incluir una anamnesis y un examen clnico para descartar verrugas genitales o displasia cervical en el
paciente y su pareja11.
La imagen histolgica es idntica a la de piel normal afectada, con displasia queratinoctica restringida al epitelio
(Figura 14). Esta enfermedad tiende a progresar lentamente hasta invadir la dermis, y por ello es recomendable la
realizacin de biopsias mltiples, tomando muestras de distintas reas, y la evaluacin de cortes seriados de los
especmenes de biopsia3.

Figura 14. Enfermedad de Bowen. Hematoxilina-eosina A) 4, B) 10, C) 20 y D) 40 mostrando


hiperqueratosis, paraqueratosis y displasia queratinoctica de todo el espesor del epitelio.
Carcinoma espinocelular
Es poco frecuente encontrar un carcinoma espinocelular afectando a la ua. Cuando lo hace, tpicamente aparece
en varones en la quinta dcada de la vida y en las uas de la mano, sobre todo en la del pulgar 43. La radiacin
ionizante en el rea o el antecedente de displasia epidrmica congnita son factores predisponentes para este tipo
de tumor, y adems confieren un peor pronstico3. Su presentacin clnica es muy variada hemorragia
subungeal, distrofia ungueal, bandas longitudinales pigmentadas, leuconiquia, eritroniquia y puede simular
patologa benigna como verrugas, onicomicosis, trauma, etc. Por ello, el retraso diagnstico, que puede llegar a
ser de varios aos, es la norma44. Adems, es relativamente frecuente que estas lesiones se sobreinfecten con
dermatofitos debido a la distrofia ungueal, y esto puede hacer el diagnstico an ms difcil. Por esta razn, si los
signos clnicos de una supuesta onicomicosis persisten tras un tratamiento antifngico correcto, la biopsia est
indicada. El carcinoma espinocelular suele cursar con una fase larga de crecimiento in situ. La aparicin de
ulceracin, sangrado o de un ndulo son signos de invasin en dermis 45. Histolgicamente este tumor tiene una

apariencia idntica al carcinoma escamoso en otras partes del tegumento, con proyecciones de epitelio displsico
que invaden en profundidad y con un grado de diferenciacin variable.
Carcinoma verrucoso
Este tipo de carcinoma espinocelular es poco frecuente. Tiene un comportamiento poco agresivo y un crecimiento
lento. Clnicamente se presenta como verrugas. La biopsia mostrar un tumor epitelial con mnima atipia celular y
con un borde que empuja ms que infiltra46.
Metstasis subungueales
Pese a que es muy poco frecuente, un tumor maligno puede metastatizar a la ua de un paciente oncolgico
conocido. Una metstasis ungueal tambin puede ser la primera manifestacin de una malignidad en otra
localizacin. Los tumores primarios que metastatizan al aparato ungueal con mayor frecuencia son los
pulmonares, los genitourinarios especialmente el renal y los de mama 47.
Lesiones pigmentadas

1. Se denomina melanoniquia a la tincin de la lmina ungueal de color marrn o negro debido a la


presencia de melanina. Lo ms habitual es que esta pigmentacin adopte la forma de melanoniquia
longitudinal (ML)48. La ML es una banda longitudinal de pigmentacin que nace del extremo proximal
de la ua y avanza linealmente hasta el borde libre de la misma, paralela al eje anteroposterior de la ua.
Esta imagen clnica puede ser la expresin de diversos procesos subyacentes: afecciones sistmicas
como el sndrome de Laugier-Hunziker49, frmacos50, 51, la activacin o proliferacin benigna de
melanocitos y el melanoma maligno. La probabilidad de que la ML se deba a una lesin melanoctica
maligna es mayor en ML con caractersticas clnicas atpicas aparicin en pacientes de raza blanca, en
el pulgar o dedo gordo del pie, de anchura mayor de 3 mm y en pacientes ancianos, de modo que estos
casos deberan ser biopsiados52.
2. Activacin melanoctica: este fenmeno es muy frecuente en la raza negra y, en menor medida, en
asiticos. La banda de ML se produce en este caso por un exceso de melanina en la lmina ungueal que
resulta de la hiperactividad de los melanocitos de la matriz. No hay proliferacin de clulas
melanocticas. Esto se observa mejor con tintiones inmunohistoqumicas especficas (melanA o MITF
preferiblemente con un cromgeno rojo)4, que realzan los melanocitos y ayudan a calcular su densidad
en el epitelio de la matriz. La tincin con protena S100 es menos sensible y especfica para la deteccin
de melanocitos en lesiones intraepidrmicas y no debe ser de primera eleccin para este propsito 53.
3. En el lentigo existe un ligero aumento de melanocitos en unidades individuales (10-31
melanocitos/mm)54, sin distribucin pagetoide y sin atipia celular.
4. Nevus melanoctico: tiene la misma presentacin clnica que las 2 lesiones descritas anteriormente.
Histolgicamente, hay una proliferacin de melanocitos en el epitelio de la matriz que se dispone, lo
ms frecuentemente, formando nevus junturales ordinarios (Figura 15). Tambin han sido descritos
casos de nevus ordinarios compuestos, nevus de Spitz 55 y nevus azules en esta localizacin56. Los nevus
ungueales comienzan como proliferaciones lentiginosas en la unin dermoepidrmica, que progresan
hasta formar nidos en estadios ms avanzados. Estas tecas pueden ser irregulares y confluentes y
encontrarse en niveles del epitelio ligeramente superiores a la capa basal, especialmente en nios. Sin
embargo, su migracin hasta alcanzar los niveles ms superiores de la matriz debe hacernos sospechar
que nos encontramos ante una lesin maligna.

Figura 15. Nevus melanoctico. Hematoxilina-eosina A) 10, B) 40, C) 20 y D) 20, mostrando una
proliferacin melanoctica benigna en el lecho ungueal.
5. Melanoma: puede manifestarse como distrofia ungueal y/o pigmentacin atpica de la lmina ungueal.
En un 76% de los casos se presenta clnicamente como una ML4. Sin embargo, a diferencia de las
lesiones benignas, esta banda suele ser irregular, de pigmentacin no homognea, mayor de 3 mm de
anchura y de crecimiento rpido. Otro signo clnico de alarma es la extensin de la pigmentacin al
pliegue ungueal proximal y/o al hiponiquio (signo de Hutchinson). El melanoma ungueal afecta ms
frecuentemente al pulgar o al primer dedo del pie57. De manera anloga al resto de melanomas, el
diagnstico de las lesiones malignas ungueales requiere la evaluacin conjunta de una gran cantidad de
criterios histolgicos como, por ejemplo, la circunscripcin de la lesin, confluencia e irregularidad de
los nidos, extensin de los mismos a las capas ms superficiales del epitelio, atipia celular, mitosis y
falta de maduracin del componente intradrmico. El subtipo histolgico ms frecuente en esta rea es
el melanoma acral lentiginoso (Figura 16), pero otros subtipos como el nodular o el de crecimiento
superficial o desmoplsico tambin han sido descritos58. En la mayor parte de los casos la morfologa de
los melanocitos invasivos en esta rea es fusiforme (Figura 17). El hallazgo de material osteoide en
relacin con el tumor, algo muy raro en el resto de melanomas, es ms frecuente en esta localizacin 16.

Figura 16. Melanoma in situ. Hematoxilina-eosina A) 10, B) 20, C) 40. Proliferacin melanoctica
atpica lentiginosa y en nidos ocupando la matriz y el lecho ungueal.

Figura 17. Melanoma maligno subungueal. A) Hematoxilina-eosina 4. Acantosis e hiperqueratosis del


epitelio junto con una tumoracin exoftica con abundante melanina. B) Hematoxilina-eosina 10.
Detalle de la morfologa fusiforme de los melanocitos invasivos y la proliferacin lentiginosa de
melanocitos atpicos en el epitelio adyacente. C y D) Hematoxilina-eosina 20. Gran aumento
mostrando los melanocitos atpicos y con actividad mittica.

En resumen, hemos repasado la anatoma del aparato ungueal y la histologa de las afecciones ms habituales en
esta zona. Es importante que el dermatlogo conozca cundo es necesario sentar la indicacin de una biopsia
ungueal y qu parte de esta compleja regin anatmica es adecuada para la toma de muestra.

Responsabilidades ticasProteccin de personas y animales


Los autores declaran que para esta investigacin no se han realizado experimentos en seres humanos ni en
animales.
Confidencialidad de los datos
Los autores declaran que en este artculo no aparecen datos de pacientes.
Derecho a la privacidad y consentimiento informado
Los autores declaran que en este artculo no aparecen datos de pacientes.

Conflicto de intereses
La autora declara no tener ningn conflicto de intereses.
Agradecimientos
La autora desea agradecer la inestimable ayuda del Dr. Eduardo Calonje en la compilacin y toma de imgenes, y
de Rosanna Tuvhag en la realizacin de las ilustraciones.
Recibido 18 Septiembre 2011
Aceptado 23 Septiembre 2012

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