Clonacin molecular de un gen

Fundamento
Este tipo de clonacin se basa especficamente en extraer una parte del ADN y luego
insertarlo en donde sea conveniente (precisamente un plsmido o algo en donde sea
posible la clonacin). A travs de la clonacin se pueden obtener mltiples copias de un
ser vivo, gracias a la accin de la DNA polimerasa. Podemos especificar el hecho de que
la clonacin sirve para ampliar fragmentos cuyo contenido son los genes (esenciales para
el anlisis del subsecuente). Toda clonacin debe seguir ciertos pasos para que sta
resulte efectiva: Primero, est la fragmentacin, en donde se retira un pedazo de ADN
relativamente importante para poder contar con los genes necesarios para la clonacin.
Este proceso puede realizarse a travs de la digestin con enzimas de restriccin. Luego,
encontramos la ligacin, que es el proceso por donde se une el pedazo de ADN con un
vector generalmente circular para que as se forme una secuencia para ser incubado. Es
importante contar con la enzima llamada ADN ligasa para que sta logre unirlos de buena
manera. Tercero, la transfeccin. Aqu una vez unido el vector con el gen de inters se
incorpora en una clula para que sta obtenga la informacin necesaria para que se
cumpla la clonacin.
Aplicacin mdica
Permitir la creacin de blastocistos para ser utilizados tanto con fines reproductivos, como
para la obtencin de clulas troncales.
Clonacin reproductiva, utilizada como tcnica de reproduccin asistida para prevencin
de enfermedades genticas.

Para remediar los daos primarios que se producen por falta de una determinada protena
debido a la mutacin del gen que la codifica.
Propiciar la regeneracin de tejidos destruidos o restaurar la funcin del rgano afectado.
Tratamiento en diversas patologas degenerativas, como las ataxias hereditarias, la
enfermedad de Alzheimer y la Corea de Huntington.

Anlisis bioinformtico

Fundamento
Uso de tcnicas computacionales, matemticas y estadsticas para el anlisis,
interpretacin y generacin de datos biolgicos. La secuenciacin de genomas lleva la
necesidad de obtener conclusiones de la lectura de esos millones de pares de bases,
saber qu codifican, cmo se relacionan y regulan la expresin de los distintos productos
gnicos, adems de encontrar la funcin de protenas desconocidas y de generar
modelos que permitan estudiar mutaciones puntuales. La rapidez y eficacia de esas
conclusiones se ha generado gracias al desarrollo del anlisis bioinformtico. Una
secuencia de nucletidos no nos aporta ninguna informacin, salvo que seamos capaces
de descifrarla. Para ello, debemos conocer el cdigo de cifrado y tener las herramientas
necesarias para descifrar la secuencia de una cadena de ADN. Usando estas
herramientas podemos predecir sin datos experimentales que informacin contiene la
secuencia. Podemos predecir la secuencia de la protena que codifica, la localizacin de

exones e intrones, etc. Pero hay que tener en cuenta que el resultado que obtenemos es
una prediccin terica que deber ser confirmada mediante experimentos.
Aplicacin mdica
Estudio de la secuencia y estructura de protenas, de genes (mutaciones, polimorfismos,
comparacin de secuencias), y al desarrollo de microarrays y de la espectrometra de
masas. Estas dos ltimas se aplican, respectivamente, para el anlisis sistemtico de la
expresin de genes y la deteccin de la interaccin entre protenas.
Un enfoque nuevo en el tratamiento de enfermedades en lo que se denomina medicina
individualizada.
Identificacin de dianas teraputicas, diseo de ensayos clnicos y desarrollo de
biomarcadores y herramientas toxicogenmicas y farmacogenmicas.
Deteccin temprana y tratamiento de enfermedades oncolgicas, as como en la
identificacin y reduccin de riesgos y prevencin de estas enfermedades.

Vector de expresin

Fundamento
Digamos que ya tenemos nuestro gen construido, listo para producir la protena que lleva
codificada. Para lograrlo, debemos introducir el gen en un organismo que se encargar de
la sntesis. Se utilizan para este fin vehculos moleculares denominados vectores, en los
cuales insertan el gen de inters utilizando tcnicas de clonaje.
Un vector es en esencia un armazn gentico que transporta el gen que se quiere clonar,
acompaado de una serie de accesorios que garantizarn la sntesis en el hospedador.
Los principales accesorios que incluye un vector son secuencias llamadas promotores,
diseados para localizarse fsicamente antes del inicio del gen. Estas secuencias sealan
el inicio de la transcripcin del gen, ya que son regiones reconocidas por las ARN
polimerasas, las enzimas encargadas de transcribir el ADN a ARN. En general los
vectores son propagados y multiplicados en bacterias, por lo que incluyen orgenes de
replicacin especficos. Aparte de determinar el origen desde el cual se replicar el vector,
tambin son decisivos para controlar el nmero de copias del mismo, factor que puede
llegar a ser importante si buscamos alto rendimiento en sistemas de expresin
procariotas. Otros accesorios aportados por el vector son las secuencias de
poliadenilacin para incluir detrs del gen, destinadas a estabilizar el ARNm recin
transcrito si pretendemos expresar nuestro gen en entornos eucariotas.

Aplicacin mdica
Produccin de protenas con caractersticas humanas que permitiran aplicar terapias a
enfermedades hasta ahora incurables.
Sntesis de frmacos de origen biolgico.

Willbherto Bautista Aparicio