Biologia Celular II

Mdulos
1, 2 e 3
Bruno Azevedo
Mrcia Attias
Narcisa Cunha e Silva
Prescilla Emy Nagao
Biologia Celular II
Volume nico
Biologia Celular II
Volume nico - Mdulos 1, 2 e 3
Bruno Azevedo
Mrcia Attias
Prescilla Emy Nagao
Apoio:
Fundao Cecierj / Consrcio Cederj

Rua Visconde de Niteri, 1364 Mangueira Rio de Janeiro, RJ CEP 20943-001
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Material Didtico
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Bruno Azevedo
Mrcia Attias
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eletrnico, mecnico, por fotocpia e outros, sem a prvia autorizao, por escrito, da Fundao.
A994b
Azevedo, Bruno.
Biologia celular II. v. nico / Bruno Azevedo et al. Rio de
Janeiro : Fundao CECIERJ, 2009.
261p.; 19 x 26,5 cm.
ISBN: 85-7648-134-0
1. Ciclo celular. 2. Ncleo interfsico. 3. Funes celulares. 4.
Matriz extracelular. 5. Clula nervosa. 6. Clula muscular.
7. Clulas-tronco. 8. Clula apoptptica. I. Attias, Mrcia. II.
Silva, Narcisa Cunha e. III. Nagao, Prescilla Emy. IV. Ttulo.
CDD: 571.6
2009/1
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DO RIO DE JANEIRO
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Biologia Celular II
SUMRIO
Volume nico
Mdulo 1
Aula 1 - O ciclo celular _____________________________________________ 7
Mrcia Attias / Narcisa Cunha e Silva
Aula 2 - A clula em diviso _______________________________________ 25

Aula 3 - Ncleo interfsico ________________________________________ 41

Aula 4 - Transporte ncleo-citoplasma________________________________ 59

Mdulo 2
Aula 5 - Junes celulares 1: Junes ocludentes _______________________ 77
Mrcia Attias / Narcisa Cunha e Silva / Prescilla Emy Nagao
Aula 6 - Junes celulares 2: Junes ancoradouras e junes comunicantes ___ 89

Aula 7 - Matriz extracelular_______________________________________ 107

Aula 8 - Matriz extracelular: as protenas da matriz _____________________ 119

Aula 9 - Parede celular __________________________________________ 135

Mdulo 3
Aula 10 - A clula nervosa ________________________________________ 145
Aula 11 - A clula muscular _______________________________________ 163

Aula 12 - As clulas-tronco ________________________________________ 187

Aula 13 - A clula apoptptica _____________________________________ 209

Mrcia Attias / Narcisa Cunha e Silva / Bruno Azevedo
Aula 14 - A clula cancerosa _______________________________________ 233

Mrcia Attias / Narcisa Cunha e Silva / Bruno Azevedo
Gabarito ____________________________________________247
objetivos
AULA
O ciclo celular
Ao final desta aula, voc dever ser capaz de:

Definir o que ciclo celular.
Listar e caracterizar as quatro fases que compem
o ciclo celular.
Descrever o mecanismo bsico de controle do
ciclo pelas ciclinas e quinases associadas a ciclinas
(Cdks).
Conceituar o que so e onde se situam os pontos
de checagem.
Relacionar a protena p53 ao surgimento de
tumores malignos.
Conceituar G0.
Pr-requisito
Sinalizao celular
(Aulas 13 e 14
de Biologia Celular I)
Biologia Celular II | O ciclo celular
INTRODUO
O ciclo celular, que voc estudar agora do ponto de vista celular, j foi
estudado na disciplina Gentica.
Ao longo de toda a vida de um organismo, mesmo depois de terminado
o perodo de crescimento, vrias de suas clulas continuaro se dividindo,
seja para renovao de tecidos, como o epitlio intestinal e as clulas
sangneas, seja para reparo de leses, como um corte na pele ou a
fratura de um osso.
A etapa de diviso celular, que voc estudar na Aula 2, compreende a
mitose, na qual o DNA dividido em duas cpias idnticas, e a citocinese,
quando a membrana plasmtica se estrangula, dividindo o citoplasma,
suas organelas e estruturas, entre as clulas-filhas. Cada clula-filha entra
ento no perodo de intrfase. O nome intrfase induz idia de que
esse perodo apenas o intervalo entre duas divises celulares. Quando os
perodos do ciclo celular foram denominados, os pesquisadores realmente
consideravam a intrfase apenas como o intervalo entre duas divises,
porque eram as divises celulares que mais chamavam a ateno, eram
mais fceis de observar, por isso mais estudadas. Com o tempo, ficou claro
que durante a intrfase que a clula desempenha todas as suas funes.
Nesse perodo, ocorre a sntese de componentes celulares citoplasmticos
e a duplicao do DNA. Uma diviso sempre precedida de uma intrfase
e aps a intrfase muitas vezes sobrevm uma diviso. Essa , em essncia,
a dinmica do ciclo celular (Figura 1.1).
Figura 1.1: O ciclo celular de uma clula de mamfero

dura, em mdia, 24 horas, e composto por um perodo de crescimento e uma diviso. A clula leva cerca
de uma hora para se dividir. O perodo de sntese
inclui uma fase de crescimento (G1) , a duplicao do
DNA (S) e um segundo perodo de crescimento (G2).
8 CEDERJ
MDULO 1
AULA
AS FASES DO CICLO CELULAR

A Figura 1.1 sintetiza as principais caractersticas do ciclo celular
de uma clula de mamfero tpica. A fase M, ou de diviso celular, em geral
dura apenas cerca de uma hora, mas muito impactante, pois vemos
ao microscpio ptico, em tempo real, a condensao e movimentao
dos cromossomos, a separao das clulas-filhas etc. (pea ao tutor
para mostrar a voc algumas animaes na Internet). J na intrfase,
que corresponde s restantes 23 horas do ciclo, a simples observao
ao microscpio ptico no d nenhuma indicao da intensa atividade
que ocorre nesse perodo.
A intrfase compreende trs fases: G1, S e G2. As fases G1 e G2
correspondem a intervalos (G de gap, espao em ingls) onde a clula
cresce para recuperar o volume que a clula-me tinha antes da diviso.
Nesse perodo, so sintetizadas membranas para o complexo de Golgi,
o retculo e para incorporao membrana plasmtica. Alm disso,
organelas celulares como mitocndrias crescem e se clivam. Sem esse
acrscimo de volume, a cada diviso, as clulas-filhas seriam menores
(veja a Figura 1.3). Na fase S (de Sntese), o DNA duplicado. Como
voc pode perceber, a mitose s se inicia depois de garantida a herana
que cada clula-filha vai receber. Nisso consiste a beleza do ciclo celular:
cada fase s tem incio depois de cumprida a tarefa anterior. Isso evita
que sejam produzidas clulas onde possa estar faltando alguma parte
do genoma. De forma anloga, a clula no consegue formar membrana
plasmtica, retculo ou Golgi, a no ser pela incorporao de elementos
estrutura preexistente. Assim, cada clula-filha precisa herdar parte do
Golgi, do retculo e tambm mitocndrias da clula-me.
Num organismo adulto, cada tipo celular tem o ciclo com uma
durao diferente, desde algumas horas, at anos. Nesses ciclos, o que tem
durao varivel a fase G1. As fases S e M tm durao aproximadamente
constante em cada organismo. A fase M, especialmente, curta, durando
cerca de uma hora. Veja a comparao da durao do ciclo em diferentes
tipos celulares na Figura 1.2.
CEDERJ 9
Figura 1.2: Em A, a representao do ciclo celular de uma clula epitelial; em B, de um hepatcito. Embora clulas
epiteliais se dividam a cada 24 horas, aproximadamente, e clulas hepticas apenas uma vez a cada dois anos, o tempo
gasto pelos diferentes tipos celulares nas fases S, G2 e M aproximadamente igual. O que varia a durao de G1.
Multiplicao sem crescimento. Ser que pode?

No incio do desenvolvimento embrionrio, o zigoto, ou clulaovo, sofre ciclos sucessivos de mitose em que as clulas-filhas so cada
vez menores. Nessa fase, diz-se que o ovo est sofrendo clivagem e,
embora o nmero de clulas aumente, o volume do embrio quase
igual ao da clula inicial (Figura 1.3). Esta uma situao especial
em que o ciclo celular uma sucesso de fases S e M, sem parar em
G1 e G2. Isso acontece porque a clula-ovo tem, quando comparada
s clulas do indivduo adulto, um grande volume citoplasmtico,
e nesse citoplasma h um estoque das molculas necessrias, o que
permite que a clula se divida muitas vezes sem precisar esperar
que essas molculas sejam sintetizadas de novo durante a intrfase.
Em conseqncia disso, as divises so rpidas, mas o volume das
clulas-filhas vai diminuindo, embora o do ncleo permanea constante.
Num determinado momento, o estoque citoplasmtico de molculas
acaba ficando abaixo do necessrio para disparar a duplicao do
DNA e a mitose. A partir da, nas etapas seguintes do desenvolvimento,
essas clulas continuaro no apenas a se dividir, mas comearo a se
diferenciar nos diversos folhetos e anexos embrionrios.
Figura 1.3: No incio de seu desenvolvimento, o zigoto sofre sucessivas clivagens, um tipo
de ciclo celular no qual a intrfase curta e no ocorre crescimento das clulas-filhas.
10 C E D E R J
MDULO 1
AULA
CONTROLE DO CICLO CELULAR

Mesmo para um leigo, as imagens de uma clula em diviso so
sempre surpreendentes: a sincronia do afastamento dos cromossomos
na anfase, o estrangulamento que separa as clulas-filhas, a
recomposio do envoltrio nuclear, tudo parece orquestrado como
num teatro onde fios invisveis coordenam os movimentos dos bonecos,
no caso, as clulas.
Essa seqncia ordenada de eventos no se restringe mitose,
ela caracterstica de todo o ciclo celular: o DNA s vai se duplicar
aps a fase de sntese e crescimento celular, e a mitose s se inicia se o
DNA estiver duplicado e a clula tiver o tamanho correto. Concluindo:
o disparo de cada etapa do ciclo celular feito durante a etapa anterior.
como o ciclo de uma mquina de lavar: encher lavar enxaguar
centrifugar. A mquina possui sensores para medir o nvel de gua,
temporizadores para que cada etapa dure apenas o necessrio... Mas e
na clula? Quais so os sensores que liberam a etapa seguinte?
Esse mistrio comeou a ser elucidado a partir de experimentos
com ovcitos de sapo (Xenopus). Como j comentamos na Figura 1.3,
o zigoto dos animais normalmente uma clula grande, e no caso do
Xenopus (Figura 1.4) mede mais de 1mm!
Figura 1.4: O ovcito de Xenopus mede mais

de 1mm. (Foto de Tony Mills, publicada em
Molecular Biology of the Cell, Garland Pub. Co.)
C E D E R J 11
CONTROLE INTERNO DO CICLO

Quinases
So enzimas que
catalisam uma reao
em que uma outra
protena fosforilada,
isto , um fosfato vindo
do ATP liga-se a um
de seus aminocidos.
Essa reao pode ser
rapidamente revertida
pela ao de um
outro tipo de enzima
as fosfatases. A
adio ou remoo de
grupos fosfato uma
das maneiras mais
freqentes de ativao e
inativao de molculas
(Aulas13 e 14 de
Biologia Celular I).
A princpio, acreditava-se que o controle do ciclo celular estava

no ncleo das clulas, mas um experimento crucial demonstrou que o
controle exercido por molculas do citoplasma.
O experimento consistia em retirar com uma agulha bem fina
uma poro do citoplasma de um ovcito fecundado (zigoto) e injetar o
contedo em um ovcito no fecundado (Figura 1.5). Pois bem, a clula
que recebia esse extrato citoplasmtico entrava imediatamente em mitose
(embora fosse haplide!). Injetando-se o extrato citoplasmtico de uma
clula na fase G2, no produzia nenhum efeito no ovcito. Concluiu-se,
ento, que no citoplasma do zigoto havia um fator promotor de mitose
ou MPF (de M-phase promoting factor).
Quando o MPF foi purificado, constatou-se que ele
continha uma nica enzima: uma protena quinase (veja o boxe).
Ao fosforilar protenas-chave, eventos caractersticos da mitose como
a condensao dos cromossomos, desagregao do envoltrio nuclear
e outros eram disparados.
Injeo de extrato
Injeo de extrato
de citoplasma de
zigoto na fase M
Ncleo
de citoplasma de
Formao de
clula em intrfase
fuso mittico
Ovcito inicia mitose
Ovcito no se divide
Figura 1.5: Demonstrao experimental da presena do fator de promoo de mitose. Apenas

o extrato do citoplasma de clulas na fase M capaz de induzir a diviso de um ovcito no fecundado.
12 C E D E R J
MDULO 1
Um fato intrigante que essas quinases estavam presentes no ovo
AULA
de Xenopus em todas as fases do ciclo celular, enquanto a ativao do

MPF era cclica (Figura 1.6). Como poderiam essas quinases estarem
ativadas apenas em determinado momento?
Figura 1.6: Aps injeo do extrato citoplasmtico de Xenopus, a atividade

da MPF aumenta rapidamente, caindo abruptamente ao final da mitose.
Essa pergunta no foi respondida atravs de experimentos feitos

com ovos de Xenopus e sim ovos de mariscos. Nesses organismos, foram
detectadas protenas cuja concentrao ia aumentando gradativamente
durante a fase S, caindo abruptamente quando a clula entrava na fase
M (Figura 1.7). Essas protenas foram batizada de ciclinas.
Figura 1.7: A concentrao citoplasmtica da ciclina disparadora da mitose aumenta gradativamente durante a intrfase, caindo abruptamente ao final da mitose. A concentrao da quinase
promotora da mitose constante ao longo de todo o ciclo celular, apenas sua atividade varia.
C E D E R J 13
Concluiu-se assim que o MPF , na verdade, um complexo

de protenas: uma ciclina e uma quinase dependente dela, ou Cdk
(cyclin dependent kinase) (Figura 1.8). Aps a descoberta da ciclina e da
Cdk disparadoras da mitose M-ciclina e M-Cdk foram identificadas
outras ciclinas (e respectivas Cdks) disparadoras de outros eventos do
ciclo celular. Assim, embora as Cdks estejam presentes o tempo todo, sua
atividade regulada pela presena, ou no, da ciclina que a ativa.
Figura1.8: Para que determinada fase do ciclo

celular se inicie, necessria a ativao da Cdk
por uma ciclina especfica. A Cdk ativa, por sua
vez, vai fosforilar outras molculas e provocar
Ciclina
mudanas na clula, como a condensao dos

cromossomos, a formao do fuso mittico etc.
Quinase dependente
de ciclina (Cdk)
Tambm ficou mais clara a dinmica de ativao das Cdks: as

ciclinas da mitose, por exemplo, comeam a ser sintetizadas no incio
da fase G1. Sua concentrao citoplasmtica vai aumentando at atingir
a concentrao reativa. Isso ocorre imediatamente antes de a clula
entrar na fase M. Nesse intervalo, a clula estar cumprindo o roteiro
de atividades das fases G1 (crescimento), S (duplicao do DNA) e
G2 (crescimento), sempre pela ativao de Cdks especficas dessas
etapas, que vo sendo ativadas por ciclinas cuja concentrao reativa
alcanada primeiro.
CONTROLE EXTERNO DO CICLO: A ORDEM DOS FATORES

ALTERA O PRODUTO
Um ponto fundamental para o ciclo celular dar certo que cada
evento s seja iniciado quando for concluda a fase anterior (o mesmo
princpio da correta lavagem de roupas: nada de enxaguar antes de
ensaboar). No difcil prever as conseqncias desastrosas de entrar
em mitose antes de concluda a duplicao do DNA, ou da entrada na
fase S sem que a clula tenha crescido o suficiente. Por isso, ao longo
14 C E D E R J
MDULO 1
do ciclo celular existem diversos pontos de checagem. Para passar
AULA
etapa seguinte, cada item da etapa anterior checado e, se no estiver

cumprido, o ciclo celular no avana. Veja na Figura 1.9 quais so esses
pontos de checagem.
Figura 1.9: Ao longo do ciclo celular existem trs pontos de checagem: em G1, G2 e em M. Em cada um
desses pontos, so checados os itens correspondentes s perguntas contidas nas caixas. Se todos estiverem corretos, a clula passa etapa seguinte, cumprindo a ordem inserida na caixa sombreada.
Uma clula pode ficar muito tempo em G1 se no houver nutrientes

suficientes para manter um nmero maior de clulas. Do mesmo modo,
a disponibilidade de espao tambm limita a proliferao celular.
Alm disso, mesmo com nutrientes e espao suficientes, as clulas no
se dividem se no receberem de outras a informao de que devem
se dividir. Esta informao vem na forma de molculas sinalizadoras
chamadas fatores de crescimento, detectadas por receptores de superfcie.
O somatrio de sinais, que engloba os nutrientes, o espao disponvel
e os fatores de crescimento, constitui a resposta para a pergunta
O ambiente favorvel? feita na checagem de G1.
Em G1 a clula precisa crescer para recuperar o volume perdido
ao ter o citoplasma dividido entre as clulas-filhas. Esse crescimento,
naturalmente, depende de um ambiente favorvel para a obteno de
C E D E R J 15
nutrientes, de temperatura e pH adequados realizao dos processos

metablicos. No se sabe como a clula consegue calcular que o volume
do citoplasma em relao ao ncleo atingiu a proporo correta, mas
quando isso acontece a clula fica liberada para entrar na fase S, de
sntese do DNA.
A deciso de entrar na fase S da intrfase conhecida como
ponto de Start, pois inicia um processo que irreversvel a partir desse
ponto. Depois que uma clula inicia a duplicao do genoma, ter de
se dividir ou morrer.
O segundo ponto de checagem est em G2. A o tamanho e o
ambiente so novamente conferidos. Embora o maior crescimento
ocorra em G1, a clula pode crescer mais um pouco em G2. Entretanto,
o ponto mais importante a ser conferido se o DNA est total e
corretamente duplicado. Nesse ponto, vrias anomalias genticas, como
mutaes e delees, podem ser detectadas e corrigidas, ou as clulas
defeituosas podem ser eliminadas. Uma falha nesse ponto pode levar ao
desenvolvimento de tumores malignos.
A ltima chance de eliminar uma clula defeituosa no ponto
de checagem que antecede a sada da fase M. Enquanto todos os
cromossomos no estiverem alinhados na placa metafsica, a diviso
celular no prossegue para a anfase e para a citocinese (separao das
clulas-filhas). Isso visa a garantir que cada clula-filha receber uma
cpia exata do genoma da clula-me.
CICLINAS E CDKS: PRECISO ALGO MAIS

J compreendemos que a clula entrar na fase M quando a
M-Cdk formar um complexo com a M-ciclina, cuja concentrao
citoplasmtica aumenta gradativamente a partir de G1. Para garantir
que a M-Cdk no comece a fosforilar as protenas da fase M antes da
hora, o complexo M-ciclina-M-Cdk inicialmente inativo. Para que a
Cdk se torne ativa, precisa ser fosforilada. Duas quinases fosforilam a
M-Cdk. Uma fosforila um stio que inibe a atividade da M-Cdk, a outra
fosforila o stio de ativao da enzima. Assim, o complexo s se tornar
ativo depois de ter um desses fosfatos (o inibidor) removido pela ao
de uma fosfatase. A partir da, o complexo ciclina-Cdk (ou MPF) se
torna ativo e capaz de catalisar inclusive a ativao dos complexos
ainda inativos (Figura 1.10).
16 C E D E R J
MDULO 1
M-ciclina
Quinase
inibitria
Fosfato
inibidor
AULA
MPF inibido
Fosfato
ativador
M-Cdk
Quinase
ativadora
M-Cdk
Figura 1.10: O complexo promotor de mitose depende

da fosforilao de um stio e da defosforilao de
Fosfatase
ativadora
outro da Cdk para que o complexo se torne ativo.
MPF ativado
VOC UM HOMEM OU UM COGUMELO?

(O pequeno prncipe Antoine de Saint-xupery)
Enquanto o ciclo celular era estudado em ovos de sapos e mariscos, as leveduras,
formas unicelulares de alguns fungos (como o fermento de po), foram escolhidas
como clula eucaritica modelo para estudar os genes que controlam o ciclo celular.
Apesar de serem clulas eucariticas, as leveduras levam quase o mesmo tempo que
uma bactria para se duplicar. Seu ciclo celular todo leva cerca de uma hora. Associado
a isso, foram produzidas muitas formas mutantes de leveduras que interrompiam o
ciclo celular em diferentes pontos, permitindo identificar que genes estavam envolvidos.
Isso permitiu concluir que, do ponto de vista evolutivo, o ciclo celular
um evento extremamente conservado. Os mesmos genes que
controlam o ciclo em um simples fungo tambm esto presentes em
seres complexos como os mamferos, ou seja, eu, voc e todos ns!
C E D E R J 17
Afinal, o que as Cdks fosforilam?

As Cdks de cada etapa do ciclo celular catalisam a fosforilao
de diferentes protenas com diferentes resultados. A M-Cdk, por
exemplo, atua, entre outras, sobre as seguintes protenas (que so, claro,
seus substratos):
catalisa
fosforilao
das
laminas,
filamentos
intermedirios que formam uma rede que reveste o envoltrio

nuclear (Aula 22 de Biologia Celular I e Aula 3 de Biologia Celular II).
As laminas fosforiladas despolimerizam, provocando a fragmentao da
lmina nuclear e a vesiculao (e desaparecimento) do envoltrio nuclear.
A fosforilao de uma outra protena, a condensina, promover
a condensao dos cromossomos observada na mitose (Aula 2).
A fosforilao de protenas associadas aos microtbulos tambm
promover sua reorganizao para formar o fuso mittico (Aula 2).
Cada etapa do ciclo depende de ciclinas diferentes

O disparo de cada etapa do ciclo celular depende da ativao de
complexos ciclina-Cdk especficos daquela etapa (Figura 1.11).
Ciclina mittica
Cdk
MPF
Substratos a serem
Quinase start
Ciclina de G1
Substratos a serem
fosforilados
fosforilados
na mitose
em START
Figura 1.11: Cada complexo ciclina-Cdk

capaz defosforilar vrias protenas
(substratos) relativas quela fase.
18 C E D E R J
Cdk
MDULO 1
Em contrapartida, uma vez encerrada aquela etapa, como
AULA
interrompida a atividade dessas quinases? Respondeu certo quem

se lembrou do mecanismo de degradao de protenas em proteassomas,
estudado na Aula 18 de Biologia Celular I. Ao fim de cada etapa
as ciclinas so ubiquitinadas e direcionadas para rpida destruio
nos proteassomas (Figura 1.12).
Os substratos do MPF, como as laminas, as condensinas, as
protenas associadas a microtbulos etc., que tinham sido fosforilados
no incio da fase M, sero defosforilados no final dessa fase por fosfatases
que so ativadas ainda pelo prprio MPF, imediatamente antes da
degradao das ciclinas.
Disparo da mitose
M- Ciclina
degradada em
proteassomas
M-ciclina
M
M-Cdk
G-Cdk
G2
G1
G-ciclina
G- Ciclina degradada
em proteassomas
Iniciar duplicao do DNA
Figura 1.12: Em cada etapa do ciclo celular, diferentes Cdks so ativadas por ciclinas especficas. Finda a etapa, as ciclinas so destrudas em proteassomas. No esquema, esto
representados apenas a ativao da duplicao do DNA e o disparo da diviso celular.
C E D E R J 19
Desastre vista? O ciclo celular pode ser interrompido

Que o ciclo celular constitudo de etapas (G1, S, G2 e M), voc
j sabe. Que cada uma dessas etapas disparada pela formao de
complexos ciclina-Cdk, voc tambm j sabe. Que cada etapa regulada
pela etapa anterior, onde existem pontos de checagem, tambm j foi
comentado.
Agora, como que o processo pode ser interrompido, caso em
algum ponto de checagem a clula no passe na vistoria?
Em cada ponto de checagem existem freios moleculares capazes de
impedir o prosseguimento do ciclo. Porm, a maioria dessas molculas
pouco conhecida, ou mesmo desconhecida. Uma exceo so as
protenas inibidoras de Cdks, que bloqueiam a formao ou a atividade
de complexos ciclina-Cdk.
No ponto de checagem de G1, danos na estrutura do DNA induzem
o aumento da concentrao e da atividade da p53, protena reguladora
da atividade gnica. Quando ativa, a p53 estimula a transcrio de um
gene que codifica a p21, uma protena inibidora de Cdk. A protena p21
se liga aos complexos ciclina-Cdk
da fase S, responsveis por levar
DNA
a clula fase S, bloqueando sua
p53 inativa
leso no DNA
Ativao
da
p53
ao (Figura 1.13). A parada na

fase G1 d oportunidade clula
p53 ativa
A p53 ativada liga-se regio
reguladora do gene p21
p21 gene
de reparar seu DNA antes de

replic-lo. Mutaes na p53 so
incapazes de impedir a replicao
Transcrio
mRNA p21
Traduo
p21 (protena
inibidora de Cdk)
de DNA lesado. No portanto

surpreendente que diversos tipos
de clulas tumorais possuam
mutaes no gene que codifica
essa protena, o que evidencia sua
relao com o desenvolvimento
de cncer.
ATIVO
complexo ciclina-Cdk
de fase S
INATIVO
complexo ciclina-Cdk
p21 de fase S
Figura 1.13: Mecanismo de inibio da atividade do complexo ciclina-Cdk provocado por uma leso no DNA.
20 C E D E R J
MDULO 1
AULA
Dividir ou no dividir, eis a questo

A partir do estgio de oito clulas, j tm incio os processos
de diferenciao celular de um embrio. Algumas iro constituir os
anexos (placenta, saco amnitico e saco vitelnico), outras faro parte
dos folhetos embrionrios. Nessa etapa, todas as clulas se dividem
intensamente. No indivduo adulto, alguns tecidos, como a pele, o sangue
e os ossos, renovam-se constantemente. Isso implica a permanncia, na
idade adulta, de linhagens de clulas capazes de se dividir e se diferenciar
nos diferentes tipos celulares encontrados nesses tecidos as clulastronco, assunto de uma outra aula nesta disciplina. No epitlio intestinal,
as clulas se dividem a cada 24 horas, aproximadamente. J no fgado,
que tido como um rgo com grande capacidade de regenerao, os
hepatcitos se dividem, em condies de normalidade, apenas uma vez
por ano! Clulas com grau ainda maior de especializao, como os
neurnios e as clulas musculares, em princpio no se dividem. Via de
regra, quanto mais especializada a clula, menor a freqncia com que
ela entra em diviso.
Uma clula que no mais se dividir, como os neurnios e as
clulas musculares, abandona o ciclo celular durante a fase G1 e entra
num estado particular, denominado G0 ou quiescncia.
Uma clula pode permanecer no estado G0 por tempo indefinido.
No caso dos neurnios, para sempre. Nos hepatcitos, o perodo G0
pode atingir dois anos, mas eles continuam podendo voltar G 1
e reentrar no ciclo.
C E D E R J 21
Dividir at quando?
Cada tipo celular que compe um organismo parece j ter uma
programao intrnseca de quantas vezes vai se dividir antes de morrer.
Tomando como exemplo um fibroblasto humano: se ele for retirado
de um embrio e mantido em cultura de clulas em condies ideais
de nutrio e espao, vai se dividir cerca de 80 vezes; j um fibroblasto
humano retirado de um adulto de 40 anos, mantido nas mesmas
condies, vai se dividir cerca de 40 vezes apenas. Essa observao coloca
em evidncia uma possvel relao entre o controle do ciclo celular e o
envelhecimento e a longevidade.
Procurando o mecanismo de controle do nmero de divises que
uma clula capaz de realizar, os achados apontam para a replicao do
genoma. A cada replicao, a ponta do cromossomo, o telmero, precisa
ser restaurada por uma enzima, a telomerase. Nas clulas humanas,
o gene que codifica a telomerase no expresso em clulas somticas do
adulto. Por isso, a cada diviso celular, o telmero fica mais curto, at
que no mais possvel replicar o cromossomo corretamente. Clulas
podem se manter nessa situao, denominada senescncia celular, por
longo tempo realizando perfeitamente suas funes antes de morrer.
A manuteno das propores corporais depende da
entrada e sada, no ciclo celular, de cada clula do organismo
no momento exato.
Alm da velocidade com que as clulas se dividem, outro fator
importante no controle do nmero de clulas de um organismo
a apoptose ou morte celular programada, que ser discutida na
Aula 14 de Biologia Celular II.
22 C E D E R J
MDULO 1
O ciclo celular constitudo por uma intrfase, subdividida em G1, S e G2, e uma
fase de diviso, denominada M.
O controle interno do ciclo celular exercido por molculas citoplasmticas: as
ciclinas, que vo se acumulando em cada fase do ciclo, e as quinases dependentes
de ciclina (Cdk), presentes em quantidades constantes por todo o ciclo.
Quando as ciclinas atingem concentraes reativas numa fase, elas se combinam
com as quinases, promovendo a passagem para a prxima fase.
O complexo formado pela M-Cdk e a M-ciclina se chama MPF e dispara a mitose,
fosforilando vrias protenas, dentre elas as que compactam os cromossomos, as
que desmontam o envoltrio nuclear e as que levam os microtbulos a formar
o fuso mittico.
No final de cada fase do ciclo, as ciclinas so degradadas em proteassomas.
O ciclo celular tambm tem um controle externo, dado pela disponibilidade
de nutrientes, de espao e de fatores de crescimento.
Em conjunto, os controles interno e externo formam os pontos de checagem:
no final de G1, a clula precisa ter o volume suficiente e o ambiente favorvel
para entrar em S. No final de G2, alm do ambiente e do volume favorveis,
preciso que o genoma esteja correta e completamente duplicado. Na metfase,
os cromossomos precisam estar todos alinhados para que a diviso prossiga.
Clulas bastante diferenciadas, como neurnios e msculos, escapam do ciclo
celular em G1 e permanecem num estado de quiescncia chamado G0, a partir
do qual podem at voltar ao ciclo em algum momento.
C E D E R J 23
AULA
RESUMO
EXERCCIOS
1. O que e quais so as fases que compem o ciclo celular?
2. O que so ciclinas? Como atuam?
3. O que so Cdks? Como atuam?
4. O que MPF?
5. O que acontece com as ciclinas de uma determinada fase do ciclo quando
a mesma se encerra?
6. Como feito o controle externo do ciclo celular?
7. O que so pontos de checagem?
8. O que G0?
24 C E D E R J
objetivos
AULA
A clula em diviso

Associar a mitose distribuio do material gentico entre
as clulas-filhas.
Caracterizar cada uma das fases da mitose.
Explicar os fenmenos de:
condensao dos cromossomos;
duplicao dos centrossomos;
formao do fuso mittico;
migrao dos cromossomos para o equador da clula;
formao da placa metafsica;
migrao dos cromossomos para os plos;
desagregao e reorganizao do envoltrio nuclear.
Pr-requisito
Microtbulos (Aula 23 de Biologia Celular I).
Biologia Celular II | A clula em diviso
INTRODUO
Na Aula 1, voc j estudou que todas as clulas obedecem a um ciclo celular,

perodo que compreende uma fase em que a clula cresce e reproduz suas
estruturas internas e uma outra durante a qual ela se divide.
O perodo da intrfase compreende trs etapas (G1, S, G2) e algumas
clulas podem permanecer para sempre em G 1, sem passar fase
de diviso, chamada M.
O ciclo celular dura, em mdia, de 12 a 24 horas. A fase M dura cerca de 1
hora. Esse um valor mdio, havendo, naturalmente, muitas variaes. Cada
fase do ciclo celular disparada por Cdks (do ingls ciclyn dependent
kinases, ou seja, quinases dependentes de ciclinas ). As ciclinas, como j
sabemos, so protenas que, uma vez ativadas (pelas Cdks), deflagram
eventos especficos. A diviso celular ou mitose disparada pela M-Cdk.
A mitose um evento bastante complexo, que tem por objetivo distribuir
eqitativamente o material gentico, duplicado na fase S, entre as duas
clulas-filhas.
FASES DA MITOSE
A mitose inclui uma seqncia de eventos que, embora nem
sempre possam ser claramente delimitados, foram divididos em fases.
Provavelmente, esses nomes so seus velhos conhecidos:
1. Prfase
2. Prometfase
3. Metfase
4. Anfase
5. Telfase
citocinese
A Figura 2.1 mostra o aspecto tpico das principais etapas.

Entender como e por que as estruturas envolvidas mudam de aspecto
ou mesmo desaparecem o tema central desta aula.
Uma clula em diviso bastante diferente de uma clula em
intrfase em, pelo menos, trs caractersticas:
O envoltrio nuclear, presente na clula interfsica, desaparece
durante a diviso.
Os cromossomos, que formam uma massa na clula interfsica,
se condensam e se individualizam durante a diviso.
Durante a diviso, os microtbulos se rearranjam, dando origem
ao fuso acromtico.
26
CEDERJ
MDULO 1
2
AULA
S/G2
Citocinese
G1
Metfase
Incio da prfase
Prfase
Figura 2.1: Aspecto do ncleo e centrossomos nas diferentes fases do ciclo celular. A duplicao dos cromossomos e
dos centrolos precede a fase M propriamente dita. Esta tem incio com a prfase, em que os cromossomos comeam a
se condensar, individualizando-se. Na metfase, cada centrossomo ocupa um plo da clula e dele partem microtbulos que formam o fuso mittico. Os cromossomos se encontram alinhados no plano mdio da clula, eqidistantes
dos dois plos. Na anfase, o material gentico (cromossomos) dividido igualmente, migrando em sentidos opostos para os dois plos da clula. A ltima fase da mitose a citocinese, ou seja, a separao das duas clulas-filhas.
E A, CLULAS? VAMOS COMEAR A NOS DIVIDIR?

As condies necessrias para que a clula entre na fase M
so providenciadas durante a intrfase. Nesse perodo, erroneamente
chamado descanso, os cromossomos se duplicam, permanecendo unidos
pela regio chamada centrmero (Figura 2.4).
Tambm se duplicam nesta fase os centrossomos. Voc j aprendeu
sobre o centrossomo na aula sobre microtbulos. Eles so o que chamamos
centro organizador de microtbulos, isto , todos os microtbulos de uma
clula partem da. Nas clulas animais, os centrossomos incluem um par
de centrolos, cuja estrutura formada por nove trios de microtbulos
bem caracterstica (Figura 2.2).
CEDERJ
27
C
B
A
(b)
(a)
Figura 2.2: (a) Um par de centrolos observado ao microscpio eletrnico. Note que um centrolo sempre est posicionado a 90 graus em relao ao outro. (b) Esquema da estrutura do centrolo composta por nove trios de microtbulos, designados como A, B e C. Cada centrolo mede cerca de 100nm.
(Foto: M., McGill, D.P., Highfield, T.M., Monahari e B.R. Brinkley, J. Ultrastr. Res. 57: 43-53,1976).
Os centrolos de um par no so idnticos. Um deles dominante e

possui filamentos que o conectam matriz pericentriolar (de onde partem
os microtbulos). Quando os centrolos de um par vo se duplicar,
eles se separam e cada um d origem (nucleia) a um novo centrolo
(Figura 2.3). Os dois pares de centrolos permanecem prximos at
o incio da prfase.
G1
G2
G1
Figura 2.3: Apenas um dos centrolos de um par est ligado matriz pericentriolar. Na fase S, os centrolos de um par se
distanciam e cada um d origem a um novo centrolo. O centrolo mais antigo ser sempre o dominante no novo par.
28
CEDERJ
MDULO 1
Uma vez que os cromossomos e centrossomos estejam duplicados,
AULA
a mitose pode ter incio.
PRFASE
Na prfase, o envoltrio nuclear ainda se encontra intacto.
nesta etapa que os cromossomos duplicados se condensam
e assumem sua forma caracterstica de dois bastes, as cromtides-irms,
ligados pelo centrmero (Figura 2.4).
Figura 2.4: Cromossomo na forma condensada e duplicada observado ao microscpio eletrnico de varredura. O estrangulamento que mantm as cromtides
unidas o centrmero (seta). (Foto: Terry Allen)
1m
Voc pode estar curioso para saber como os cromossomos

interfsicos, longos e finos, se enovelam dessa forma. A resposta est numa
protena que possui dois domnios capazes de se ligarem hlice de DNA.
Por ser capaz de promover a condensao dos cromossomos, s custas
da hidrlise de ATP, foi denominada condensina. A condensina funciona
como uma pina em que cada extremidade se liga a um ponto da cadeia
de DNA e se fecha em seguida, aproximando as duas (Figura 2.5).
Na regio do centrmero, uma protena da mesma famlia mantm
as duas cromtides coesas. Seu nome? Coesina. Veja na Figura 2.5.b como
se acredita que essa protena mantenha as cromtides-irms unidas.
CEDERJ
29
ATP
ATP
Cromtides-irms
(a)
Figura 2.5:
(a) Tanto as
Hlice de DNA
(c)
(b)
coesinas quanto as condensinas so protenas dimricas, capazes de
ligarem-se s hlices de DNA, aproximando-as. A coesina (b) aproxima as duas cromtides-irms, enquanto
a condensina (c) ajuda na espiralizao da cadeia de DNA, resultando na condensao do cromossomo.
Embora o envoltrio nuclear ainda esteja intacto, a migrao

dos centrossomos para os plos opostos tem incio nessa etapa.
medida que migram para plos opostos da clula, os microtbulos
se irradiam a partir dos centrossomos. Por lembrar uma estrela, cada
uma dessas estruturas chamada ster (Figura 2.6). Este o incio da
formao do fuso acromtico, que s estar completamente formado
na etapa seguinte.
Figura 2.6: O ster formado pela distribuio

radial de microtbulos em torno do centrossomo. Na prfase, os centrossomos, j duplicados, comeam a migrar para plos opostos.
PROMETFASE
Nas descries mais antigas da prometfase, dizia-se que nessa
fase do ciclo celular o envoltrio nuclear desaparecia. Na verdade, o
envoltrio nuclear, o retculo endoplasmtico e o complexo de Golgi no
so visveis nessa fase porque se fragmentam em vesculas, permitindo
que alguns microtbulos do fuso acromtico se liguem ao cinetcoro
dos cromossomos, j totalmente condensados.
O cinetcoro um complexo de protenas que se liga
aos cromossomos na regio do centrmero (Figura 2.7).
30
CEDERJ
MDULO 1
Cromossomo
Centrmero
Cinetcoro
AULA
condensado
Figura 2.7: O cinetcoro um complexo de protenas que se associa ao cromossomo na regio do

centrmero. nessa regio que se ancoram microtbulos
Microtbulos
do fuso responsveis por movimentar os cromossomos.
cinetocoriais
Cromtide
Os cromossomos s se ligam ao fuso pelo cinetcoro. Essa ligao

parece ser feita de modo aleatrio, pelo sistema de tentativa e erro, isto
, os vrios microtbulos, que partem dos centrossomos de acordo com
a instabilidade dinmica que lhes caracterstica, crescem e encolhem
rapidamente. Eventualmente, alguns deles tocam os cromossomos.
Se esse contato acontecer na regio certa, isto , a extremidade do
microtbulo fazendo contato com o cinetcoro, o cromossomo
permanecer ancorado quele microtbulo. Como os cromossomos
esto duplicados, os cinetcoros de cada uma das cromtides-irms
ficar ligado a microtbulos de um plo. Os microtbulos mais longos
so mais fortes, puxando o cromossomo na direo do centrossomo no
qual tm sua origem (Figura 2.8). Estabelece-se, assim, um verdadeiro
cabo de guerra entre os dois plos. Essa disputa
termina empatada, com os cromossomos
Cent
rosso
alinhados no equador da clula. Quando
mo
todos os cromossomos se alinham de forma

eqidistante dos plos, significa que a diviso
celular entrou na metfase.
Ce
nt
ro
sso
mo
Figura 2.8: Na prometfase, os cromossomos so puxados pelos microtbulos do fuso. A maior fora
exercida pelos microtbulos mais longos (cromossomo da parte superior da figura). No plano mdio,
as foras se equilibram (cromossomo da parte inferior da figura) e o cromossomo permanece alinhado.
CEDERJ
31
METFASE
Na metfase, o fuso acromtico j est plenamente desenvolvido e
os cromossomos se alinham no plano equatorial da clula, eqidistantes
dos dois plos. Alm dos microtbulos astrais isto , que compem o
ster , e dos microtbulos cinetocoriais que se ligam ao cinetcoro
dos cromossomos , o fuso possui microtbulos que desempenham uma
terceira funo. Trata-se de microtbulos que partem dos plos opostos
e se interpenetram no plano equatorial da clula. Podemos cham-los
microtbulos interpenetrantes (Figura 2.9). Os trs tipos de microtbulos
so altamente dinmicos, polimerizando-se e despolimerizando-se mais
rapidamente que os microtbulos das clulas interfsicas e formam o
fuso acromtico ou fuso mittico (Figura 2.9). Conforme as foras
exercidas pelos microtbulos cinetocoriais ligados a cada uma das
cromtides-irms se equilibram, encolhendo de um lado e alongandose do outro, os cromossomos vo se dispondo na placa equatorial.
Esta a fase mais demorada da mitose e a diviso s prossegue quando todos
os cromossomos se encontram alinhados.
Centrossomo plo do fuso
Microtbulos astrais
Cinetcoro
Microtbulos
Microtbulos
cinetocoriais
interpenetrantes
Figura 2.9: Esquema mostrando o fuso acromtico na etapa de metfase e as

diferentes funes desempenhadas pelos microtbulos que o formam.
32
CEDERJ
MDULO 1
AULA
ANFASE
Na anfase, as cromtides-irms se separam e cada uma delas
puxada pelos microtbulos cinetocoriais em direo a plos opostos.
Voc pode estar se perguntando: como as cromtides-irms se
separam se elas esto ligadas pela coesina?
Boa pergunta! A resposta bastante simples: a enzima
separase se encarrega de cortar as pontes formadas pela coesina.
Assim, cada cromtide puxada para um plo pelos microtbulos
cinetocoriais respectivos.
A migrao dos cromossomos para plos opostos resulta no
apenas do encolhimento dos microtbulos cinetocoriais. Protenas
motoras associadas aos microtbulos interpenetrantes tambm
contribuem para que haja entre eles um deslizamento que aumenta
a distncia entre os plos (Figura 2.10).
Ainda no foi possvel explicar como subunidades de tubulina
podem se soltar da extremidade do microtbulo voltada para o cinetcoro
sem que a ligao entre a cromtide e o microtbulo se desfaa.
O distanciamento provocado pelo deslizamento entre microtbulos
do fuso o prenncio da ltima fase da diviso celular, a telfase.
(a)
(b)
O encolhimento dos microtbulos cinetocoriais movimenta as
Os microtbulos que partem de

plos opostos deslizam entre si,
aumentando a distncia entre eles
cromtides na direo dos plos
Protenas motoras
Zona de crescimento
dos
microtbulos
Figura 2.10: O afastamento das cromtides resulta de duas foras complementares. (a) Os microtbulos cinetocoriais se despolimerizam e (b) os microtbulos que se superpem crescem. Alm disso, protenas motoras
promovem o deslizamento entre eles.
CEDERJ
33
TELFASE
A telfase corresponde ao final da mitose. Nessa etapa,
os cromossomos j se encontram segregados em plos opostos
da clula e distanciados pelos microtbulos que se superpem
(Figura 2.11). Esse distanciamento fundamental para que ocorra a
distribuio do citoplasma e das organelas entre as duas clulas-filhas.
Esse processo chamado citocinese.
Os microtbulos astrais tambm exercem fora de separao
entre as clulas-filhas deslizando sobre protenas motoras ligadas
membrana plasmtica (Figura 2.12).
Regio central de
Regio de
superposio dos
Plo
microtbulos
Plo
Microtbulos
superposio
do plo
reduzida
2m
Figura 2.11: Na clula esquerda, a sobreposio dos microtbulos maior que na da direita. Isso resulta
em que os cromossomos esto mais afastados na segunda. (Foto: Jeremy D. Pickett-Heaps em Molecular
Biology of the Cell, Garland Publ. Co.,3rd ed.)
(a)
Afastamento pelo deslizamento
entre microtbulos superpostos
(b)
Afastamento pelo deslizamento

de microtbulos astrais sobre
protenas motoras
Figura 2.12: A interao com protenas motoras leva os microtbulos a se afastarem no plano equatorial da clula (a), ou a empurrar a membrana plasmtica por ao de protenas motoras acopladas a ela (b).
34
CEDERJ
MDULO 1
A separao final entre as clulas-filhas depende de um anel
AULA
de constrio (ou anel contrtil) formado por filamentos de actina e

molculas de miosina (Figura 2.13).
Anel contrtil
Figura 2.13: A separao entre as clulas-filhas se d pelo estrangulamento resultante do deslizamento do anel de constrio, formado por filamentos de actina e
molculas de miosina. (Foto: Mrcia Attias)
COMO SE DIVIDEM AS CLULAS VEGETAIS

A rgida parede de celulose que envolve as clulas vegetais
impede que as duas clulas-filhas resultantes da mitose se separem
por estrangulamento. Neste caso, o ponto de clivagem, onde as
duas clulas sero delimitadas, vesculas contendo precursores da
parede e elementos da prpria membrana sero determinados pela
disposio de microtbulos. O processo pode ser acompanhado
em linhas gerais na Figura 2.14, mas nas disciplinas de Botnica
mais detalhes sero abordados.
CEDERJ
35
Complexo de Golgi
G2
Parede celular da clula-me

Microtbulos corticais formam uma
G1
banda que envolve a clula logo abaixo

da membrana plasmtica. Essa banda
prediz onde a nova parede celular
se fundir quando a clula se dividir.
Telfase
Banda de microtbulos
O fragmoplasto formado na telfase
pelos microtbulos sobrepostos. Vesculas derivadas do complexo de Golgi carreando precursores da parede celular se
associam a esses microtbulos, acumulando-se na regio equatorial e fundindo-se
para formar a placa crivada primordial.
Vesculas derivadas do Golgi
Microtbulos do fuso
Citocinese
Microtbulos associados ao fragmoplasto
se formam na periferia da placa crivada
primordial. Novas vesculas derivadas do
Golgi so recrutadas para essa regio,
fundindo-se com a borda da parede celular,
estendendo-se para fora. Os microtbulos impedem a total fuso dessas memPlaca crivada primordial
Microtbulos ligados
branas, resultando nos plasmodesmas.
ao fragmoplasto
G1
A membrana da placa crivada em expanso funde-se membrana plasmtica
da clula-me, completando a nova
parede celular. O arranjo cortical de
microtbulos interfsicos restaMicrotbulos corticais
Plasmodesmas
Figura 2.14: As principais etapas da diviso de uma clula vegetal.
36
CEDERJ
belecido em cada uma das clulas-filhas.
MDULO 1
AULA
A DIVISO NOS PROCARIOTOS

Nas bactrias, a diviso celular chamada fisso binria e muito
mais simples (e rpida) que nos eucariontes. O processo se resume na
duplicao do cromossomo nico da bactria. O cromossomo duplicado
translocado para o plo oposto da clula e uma invaginao da
membrana bacteriana separa a bactria em duas. Essa fisso depende
de uma protena, a FtsZ, que possui algumas semelhanas com a tubulina
de eucariotos e forma um anel que se contrai, orientando o crescimento
da parede bacteriana na fenda que se forma, resultando na fisso binria
(Figura 2.15).
(1) O DNA se distribui em

um nico cromossomo.
(2) Esse cromossomo

se duplica a partir de
um ponto de origem.
A clula tambm cresce.
(3) Uma vez duplicados,
os pontos de origem
migram para plos opostos na clula bacteriana.
(4) A membrana se invagina e uma nova parede

bacteriana forma-se,
(5) separando as duas

clulas-filhas.
Figura 2.15: Principais etapas da diviso de uma clula procarionte.
CEDERJ
37
Entre a diviso celular bacteriana e a mitose, na qual um aparelho

mittico sofisticado montado a partir do citoesqueleto, vrias etapas
adaptativas aconteceram. Ainda hoje existem organismos em que a diviso
celular parece representar estgios intermedirios dessa evoluo.
Em alguns dinoflagelados (um tipo de alga), o envoltrio
nuclear no se desfaz. Na verdade, nesses organismos a segregao dos
cromossomos depende da adeso membrana interna do ncleo.
Em alguns protozorios, o fuso mittico se forma atravs de
um tnel, e o envoltrio nuclear no se desfaz, mas alguns microtbulos
penetram no ncleo, ligando-se aos cromossomos.
Em algumas leveduras (fungos), o fuso se forma dentro do
ncleo. Essas formas de diviso esto esquematizadas na Figura 2.16 e
so uma demonstrao clara das muitas tentativas que a natureza faz at
encontrar o sistema mais eficiente para replicao de cada organismo.
Cromossomo
Bactrias
Cromossomos-filhos aderidos
membrana plasmtica so separados
pelo crescimento da mesma.
Membrana plasmtica
Dinoflagelados tpicos
Vrios feixes de microtbulos passam
atravs de tneis no envelope nuclear
intacto, estabelecendo a polaridade
da diviso. Os cromossomos se movem
associados membrana nuclear interna,
Cromossomo
Envoltrio nuclear
sem aderir aos microtbulos.
intacto
Outros protozorios
Um nico feixe de microtbulos forma o
fuso que atravessa o envoltrio nuclear,
formando um tnel. Os cromossomos
Centrolos
se ligam pelos cinetcoros membrana

nuclear e interagem com os plos pelos
Microtbulos
Microtbulos
polares
cinetocoriais
38
CEDERJ
microtbulos cinetocoriais.
O envelope nuclear permanece intacto;
MDULO 1
o fuso se forma dentro do ncleo, asso-
Microtbulos
cinetocoriais
polares
Leveduras e algas diatomceas
ciado ao envelope nuclear. Cada cinetcoro se liga a um nico microtbulo.

Microtbulos polares
Microtbulos cinetocoriais
Clulas de animais
Centrolos
O fuso comea a se formar fora do

ncleo. Na prometfase, o envoltrio se
desagrega e os cromossomos podem se
ligar a microtbulos do fuso.
Fragmentos do envelope nuclear
Figura 2.16: Formas de diviso de vrios organismos.
RESUMO
Quando a fase M (mitose) se inicia, os cromossomos e os centrossomos j foram
duplicados, nas fases S e G2.
Na prfase, os dois centrossomos se separam e comeam a se dirigir para
plos opostos da clula. Os cromossomos tambm iniciam o processo de
individualizao.
A prometfase a fase em que o envoltrio nuclear se fragmenta e alguns
microtbulos do fuso capturam os cromossomos.
Os cromossomos duplicados permanecem unidos pelo centrmero. Um complexo
de protenas ao redor do centrmero constitui o cinetcoro. Os cromossomos se
ligam ao fuso sempre pelo cinetcoro.
Foras antagnicas, exercidas pelos microtbulos que partem dos plos, levam os
cromossomos para o plano equatorial da clula, formando a placa metafsica.
A enzima separase corta a ligao entre as cromtides-irms e cada uma delas
se dirige a um dos plos. Essa separao essencial para a anfase.
Na anfase, dois mecanismos levam ao afastamento das cromtides-irms: a
despolimerizao dos cromossomos cinetocoriais e o deslizamento, mediado por
protenas motoras, entre os cromossomos sobrepostos.
Na telfase, novo envoltrio nuclear se forma em torno de cada ncleo-filho e
o citoplasma se contrai no plano equatorial. Os microtbulos do fuso predizem o
local onde o anel contrtil, formado por actina e miosina, se formar, levando
separao das clulas-filhas.
CEDERJ
39
AULA
Microtbulos
EXERCCIOS
1. Qual o principal objetivo da diviso celular?
2. Quais so as fases tradicionalmente estabelecidas para descrever a diviso
celular?
3. Em que etapa do ciclo celular ocorre:
a) Duplicao dos cromossomos?
b) Condensao dos cromossomos?
c) Duplicao dos centrossomos?
d) Formao do fuso mittico?
e) Migrao dos cromossomos para o equador da clula?
f) Formao da placa metafsica?
g) Migrao dos cromossomos para os plos?
h) Desagregao e reorganizao do envoltrio nuclear?
4. Qual o papel das seguintes protenas que participam da diviso celular?
Coesina:
Condensina:
Separase:
5. Como os microtbulos podem participar da mitose?
6. O que a citocinese?
40
CEDERJ
objetivos
AULA
Ncleo interfsico

Discutir a importncia do aparecimento
de um ncleo individualizado.
Listar os componentes estruturais do ncleo
durante a intrfase.
Enumerar os diversos graus de organizao
da cromatina.
Correlacionar aparncia, composio
e funo do nuclolo.
Pr-requisitos
Compartimentalizao celular (Aula 15 de Biologia Celular I).
Controle do ciclo celular (Aula 1 de Biologia Celular II).
Diviso celular (Aula 2 de Biologia Celular II).
Biologia Celular II | Ncleo interfsico
INTRODUO
Durante a intrfase, quase todo o genoma de um eucarioto est dentro de

um compartimento, o ncleo. O ncleo o maior compartimento celular,
ocupando em mdia 10% do volume total da clula. A maioria das clulas
possui apenas um ncleo, com exceo de:
eritrcitos de mamferos, que perdem o ncleo durante a diferenciao;
clulas derivadas da fuso de clulas precursoras, como as clulas musculares
esquelticas, que possuem muitos ncleos;
certos protozorios, como os do gnero Giardia, que so binucleados
(Figura 3.1).
Ncleos
Flagelos
a
Miofibrila
Ncleos
Figura 3.1: (a) Clula muscular multinucleada; (b)

o protozorio Giardia lamblia possui dois ncleos
e quatro pares de flagelos.
O ncleo costuma ter formato arredondado e ocupar posio

central nas clulas, mas pode ficar na periferia, como nas clulas
musculares (Figura 3.1) ou nos adipcitos (reveja a Figura 27.2 em
Biologia Celular I) e no serem redondos, como os ncleos de leuccitos
(Figura 3.2).
IMPORTNCIA EVOLUTIVA
Voc aprendeu em Biologia Celular I (Aula 15) que a compartimentalizao foi um grande avano evolutivo porque permitiu que as diferentes funes
celulares pudessem ser distribudas em diferentes locais, onde as molculas
envolvidas em determinada atividade celular esto prximas. Esse raciocnio
se aplica perfeitamente ao compartimento nuclear, mas h outras vantagens
que tornaram o aparecimento do ncleo evolutivamente to importante.
42
CEDERJ
MDULO 1
3
AULA
Figura 3.2: Micrografias eletrnicas de

glbulos brancos: em A, um neutrfilo;
em B, um basfilo; em C, um eosinfilo;
em D, um moncito. Todos possuem
apenas um ncleo (N), que tem formato
irregular. Como estamos vendo cortes
ultrafinos dessas clulas, nem sempre
todas as partes do ncleo aparecem no
plano de corte. Fotos: Dorothy Bainton.
2mm
CADA COISA EM SEU LUGAR

A maior vantagem evolutiva do aparecimento de um
ncleo individualizado foi, sem dvida alguma, a separao entre
a transcrio (sntese de uma fita de RNA a partir do DNA) e
a traduo (sntese de um peptdeo a partir da fita de RNA).
Os dois eventos esto separados em eucariotos porque no
Ncleo
DNA
Transcrio
existem ribossomos maduros no compartimento nuclear. Isso
RNA
garante que os mRNA produzidos na transcrio tenham de

sair do ncleo para o citoplasma antes de comearem a ser
Processamento
traduzidos. Qual a vantagem disso? Criar oportunidade de
mRNA
processar o RNA antes que ele saia do ncleo (Figura 3.3).

Transporte
Traduo
Ribossomos
Figura 3.3: Em eucariotos, a transcrio e a traduo ocorrem em
compartimentos diferentes. Assim, o RNA sintetizado na transcrio
pode ser processado ainda no ncleo, antes de ser transportado
Protena
Citoplasma
para o citoplasma, onde ser traduzido pelos ribossomos.
CEDERJ
43
Para que voc possa avaliar o impacto evolutivo da separao

dos eventos de transcrio e traduo, basta lembrar que a quantidade
de informao contida no genoma de procariotos muito menor que a
contida no genoma dos eucariotos. Essa diferena no se deve apenas
maior massa de DNA presente neles. Nos procariotos, os genes esto
arranjados em seqncia linear. Se toda a diversidade de informao
dos eucariotos tivesse de ser arranjada na forma de genes enfileirados,
seria impossvel acomodar o comprimento de seu genoma numa clula!
Foi a oportunidade de processar o RNA resultante da transcrio que
gerou a possibilidade de sobrepor informaes. Ao ser processada, cada
molcula de RNA ora perde uma parte, ora outra parte, transpe regies
etc., podendo gerar vrios mRNA, cada um resultando numa protena
diferente. Assim, as clulas eucariticas puderam se tornar muito mais
complexas, com uma variedade de protenas muito maior do que
a variedade genmica.
Se voc tinha aprendido que o aparecimento do ncleo foi
evolutivamente importante porque protegeu o DNA, no se preocupe.
Esse conceito no est errado. De fato, envolvido por um envelope to
bem estruturado (voc j vai ver!), o genoma est protegido de todo o
movimento do citoplasma. Mas vamos reconhecer que, se nada mais
tivesse acontecido depois do aparecimento do ncleo, a diferena entre
eucariotos e procariotos seria muito menor!
A ORGANIZAO GERAL DO NCLEO INTERFSICO

O ncleo o compartimento que contm o DNA, organizado na
forma de cromatina, e est separado do citoplasma por um envelope
ou envoltrio nuclear. O envoltrio define um ambiente nuclear, cuja
matriz diferenciada, o nucleoplasma. O nucleoplasma e o citoplasma
se comunicam diretamente atravs de aberturas no envoltrio.
Essas aberturas no so simples buracos, e sim poros muito bem
estruturados, denominados complexos do poro.
Partes diferentes da cromatina tm arranjos especiais, sendo o
nuclolo o mais conhecido deles. O envoltrio nuclear, formado por
duas membranas, est sustentado tanto pelo lado citoplasmtico quanto
pelo lado nuclear, por filamentos do citoesqueleto (Figuras 3.4 e 3.5).
No lado nuclear, filamentos intermedirios formam a lmina nuclear.
44
CEDERJ
MDULO 1
No lado citoplasmtico, outros tipos de filamentos intermedirios,
AULA
alm de microtbulos, colaboram com a sustentao. O prprio centro

organizador de microtbulos (centrossomo) se encontra bastante prximo
do envoltrio nuclear.
Vamos dedicar ateno especial a cada uma dessas principais
estruturas nucleares nesta e na prxima aula.
Figura 3.4: Micrografia eletrnica da
Envoltrio nuclear
regio nuclear. Note que a cromatina

aderida fica excluda da rea sob o
Complexo do poro
complexo do poro. Foto: Larry Gerace.
Lmina nuclear
Cromatina aderida
Matriz nuclear
1m
Cromatina
Ncleo
Retculo endoplasmtico
Centrossomo
Filamentos intermedirios
Microtbulos
Lmina nuclear
Poro
1m
Membrana externa
Membrana interna
Envoltrio nuclear
Figura 3.5: Esquema ilustrativo da organizao geral do

ncleo. Esse esquema se baseia em informaes obtidas
a partir de micrografias como a mostrada na Figura 3.4.
CEDERJ
45
ORGANIZAO DA CROMATINA
Voc est estudando a organizao do DNA e seu metabolismo
em Biologia Molecular, por isso aqui s vamos abordar alguns aspectos
da organizao do DNA de eucariotos, especialmente na intrfase.
Como acabamos de ver, o genoma dos eucariotos muito grande,
e esse tamanho torna difcil sua acomodao dentro do ncleo.
necessrio que as molculas de DNA estejam compactadas.
O grau de compactao do DNA varia no ciclo celular, como j
foi mencionado nas duas ltimas aulas, atingindo seu mximo na fase
M, quando possvel individualizar, contar e classificar as molculas
de DNA, ali chamadas cromossomos. Existem regies do cromossomo
essenciais para a manuteno de sua integridade e para que possa
haver replicao. Essas regies so o centrmero, os telmeros e as
origens de replicao (Figura 3.6). Nos eucariotos, as molculas de
DNA esto compactadas com protenas, formando o arranjo que ns
chamamos cromatina.
Telmero
Figura 3.6: Regies essenciais dos

cromossomos: cada cromossomo tem
Origem de
replicao
de ter um centrmero, sobre o qual se

alojam as protenas do cinetcoro na
mitose, telmeros nas extremidades
Centrmero
e vrias origens de replicao, que

assumem o aspecto de bolhas na fase S.
Origem de
replicao
Telmero
Bolha de replicao
Cinetcoro
Cromossomos duplicados
em clulas
As protenas que compactam o DNA so classificadas em histonas

e no-histonas. As histonas so protenas muito adequadas para interagir
com o DNA (cido desoxirribonuclico) porque tm alto teor de
aminocidos carregados positivamente, sendo, portanto, bsicas. Quatro
histonas diferentes (H2A, H2B, H3 e H4), com duas cpias de cada,
formam um octmero ao redor do qual a fita dupla de DNA est enrolada
(Figuras 3.7 e 3.8). Esse arranjo chamado nucleossomo. O segmento
de DNA que fica entre dois nucleossomos chamado DNA de ligao e
pode variar de tamanho. J o segmento que envolve um nucleossomo tem
tamanho bastante regular, de cerca de 200 pares de bases.
46
CEDERJ
MDULO 1
3
AULA
Figura 3.7: Modelo do nucleossomo visto de dois ngulos

diferentes, com o DNA representado pelo tubo helicoidal (A) ou
pelas linhas paralelas (B) ao
redor das histonas. Esquema
de Evangelos Moudrianakis.
Histonas do
nucleossomo
DNA de ligao
DNA de ligao digerido

por nucleares
200 pares de nucleotdeos
Figura 3.8: Procedimento para dissociar

os nucleossomos e separ-los das histonas.
Nucleossomos
liberados
11nm
Dissociao com alta

concentrao de sal
Octmero
de histomas
Duplas hlice de DNA
Dissociao
Existe ainda uma outra histona compactando

o DNA, a histona H1, que no faz parte do
H2A
H2B
H3
H4
nucleossomo. Ela fica por fora do arranjo de

nucleossomos, ajudando a torn-lo mais frouxo ou
mais compactado (Figura 3.9).
CEDERJ
47
Histona H1
Figura 3.9: A histona H1 liga-se

por fora dos nucleossomos,
ajudando a mant-los mais
prximos ou mais afastados.
Nucleossomo
Octmero
de histomas
A estrutura formada pelos nucleossomos intercalados por DNA

de ligao assemelha-se a um colar de contas (Figura 3.10.b). Quando
assume a configurao nativa, ela se arranja como a fibra de 30nm
(Figura 3.10.a). A fibra de 30nm consiste no colar de nucleossomos
enrolado sobre si prprio, encurtando muito a molcula de DNA
(Figura 3.11).
a
Figura 3.10: Micrografia eletrnica de um

trecho de DNA no estado compactado
natural (a) e depois descompactado (b).
A molcula nativa (A) chamada fibra de
30nm e o DNA no seu estado descompactado
(B) comparado a um colar de contas. Fotos:
(a) de Barbara Hamkalo; (b) Victoria Foe.
b
50nm
1
6
4
30nm
5
3
3
4
a
Figura 3.11: Nucleossomos enrolados sobre si prprios. Em (a), aspecto

frontal de uma fibra, em (b), o aspecto lateral. Os primeiros seis nucleossomos
esto numerados, para facilitar a compreenso.
48
CEDERJ
MDULO 1
Mesmo na forma de fibra de 30nm, um cromossomo tpico teria
AULA
aproximadamente 1mm de comprimento, ficando impossvel acomod-lo

dentro de uma clula. necessrio, portanto, que o DNA seja ainda mais
compactado. Em contrapartida, se o DNA estiver compactado demais
durante a intrfase, atividades como transcrio e replicao certamente
ficaro muito dificultadas. Assim, fcil supor que o mecanismo de
compactao do DNA tenha de ser dinmico, facilitando o acesso das
enzimas quando necessrio (Figura 3.12). Regies descompactadas do
DNA tambm so alvo fcil para degradao por DNAses.
RNA
Gene que ser

transcrito pouco depois
Gene sendo transcrito
Figura 3.12: Para que haja transcrio,

necessrio que o DNA esteja descom-
Tratamento com DNAse
pactado. As regies descompactadas

tambm ficam acessveis degradao.
Regies condensadas
da cromatina
DNA
degradado
Talvez voc j tenha ouvido ou lido os termos eucromatina e

heterocromatina. A eucromatina (ou cromatina verdadeira) aquela
que transcreve; portanto, corresponde ao estado descompactado.
J a heterocromatina est no seu estado mais compactado, inacessvel
a enzimas de transcrio ou de degradao. Fica assim mais protegida
e ocupa menos espao (Figura 3.13). Cada regio do genoma ora est
na forma de eucromatina, nos momentos em que transcreve, ora na de
heterocromatina, quando quiescente.
Os vrios nveis de organizao da cromatina, desde o estado mais
compactado o cromossomo metafsico at a molcula de DNA sem
as protenas de compactao esto representados na Figura 3.13.
CEDERJ
49
Cromossomo metafsico
1400nm
inteiro
Segmento de cromossomo
na forma condensada
700nm
Segmento de cromossomo
300nm
na forma estendida
Fibra de 30nm formada por
30nm
nucleossomos compactados
Colar de contas de
nucleossomos
11nm
Pequena regio da dupla

2nm
hlice de DNA
Figura 3.13: Um cromossomo metafsico

pode ir sendo desenrolado at chegar ao
estado mais simples do DNA, a dupla hlice.
Se voc reparar nas micrografias eletrnicas de ncleos interfsicos,

sejam irregulares como os da Figura 3.2, ou regulares, como os das
Figuras 3.5 e 3.14, vai perceber que parte da cromatina tem aspecto
bastante eletrondenso.
50
CEDERJ
MDULO 1
3
AULA
Figura 3.14: Micrografia eletrnica de

um ncleo interfsico tpico de clulas
de mamfero. Foto: Daniel Friend.
5 m
O aspecto eletrondenso est, na maior parte das vezes, relacionado

ao estado compactado da cromatina, a heterocromatina (nem sempre,
voc j vai conhecer as excees). Poderamos, assim, correlacionar
as regies eletrondensas do ncleo com regies do genoma que no
esto transcrevendo. Observando bem as fotos, voc vai reparar que
sempre existe heterocromatina na regio mais perifrica do ncleo,
bem juntinho do envoltrio nuclear. A identificao dessa parte da
cromatina veio por acaso: testando o soro de pacientes de
AUTO-IMUNES
DOENAS
por imunofluorescncia em clulas em mitose e na intrfase,
constatou-se que os anticorpos fluorescentes reconheciam os telmeros

dos cromossomos mitticos e tambm a heterocromatina aderida ao
envoltrio nuclear em clulas interfsicas.
Examinando clulas de outras espcies, nem sempre encontramos
os telmeros aderidos ao envoltrio nuclear durante a intrfase. Mas esse
dado foi importante porque deu incio idia, cada vez mais aceita, de que
durante a intrfase os cromossomos descondensados no esto embolados
dentro do ncleo. Muito ao contrrio, parece haver grande organizao
DOENAS
AUTO-IMUNES
So causadas por
falhas do sistema
imune, que no elimina
clulas produtoras
de anticorpos que
reconhecem as
molculas do prprio
indivduo (self). Os
pacientes dessas doenas
possuem na circulao
anticorpos que
conhecem e atacam suas
prprias clulas.
do genoma. Alguns autores supem que, semelhana do que ocorre

no citoplasma, existe um nucleoesqueleto sustentando essa organizao.
De fato, se aplicarmos a ncleos isolados a mesma metodologia de extrao
do citoesqueleto, usando detergentes no-inicos, um material protico
isolado. Sob certas condies, esse material parece formar filamentos,
mas sua organizao no semelhante dos grupos de filamentos do
citoesqueleto. Nenhuma das protenas conhecidas do citoesqueleto faz
CEDERJ
51
parte do nucleoesqueleto. Na verdade, foi recentemente demonstrado

que a actina, que forma microfilamentos no citoplasma, apesar de poder
entrar no ncleo (na prxima aula voc vai ver quem pode entrar no
ncleo), nunca encontrada l, sendo ativamente excluda. Por enquanto,
fica a noo de que o ncleo interfsico organizado. Ainda faltam dados
para estabelecer quem responsvel por essa organizao.
NUCLOLO
Ainda reparando nas micrografias do ncleo interfsico, voc diria
que h outra regio eletrondensa, que, portanto, deve corresponder
heterocromatina: o nuclolo. Nesse caso, no entanto, a correlao no
se aplica. O nuclolo eletrondenso por outro motivo. Na verdade, seria
injusto dizer que o nuclolo heterocromatina. Se heterocromatina o
estado compactado, aquele inacessvel a enzimas, portanto, quiescente,
o nuclolo tudo menos isso! Talvez voc j tenha ouvido antes que o
nuclolo uma fbrica de ribossomos. Como tal, uma das regies do
ncleo que mais trabalha! Na verdade, no nuclolo esto os genes que
codificam para os RNA ribossomais (rRNA) e para as protenas que
fazem parte dos ribossomos. Se o nuclolo fosse mesmo uma fbrica,
ela teria o certificado ISO9001 de qualidade total!
Sabendo que os genes que codificam
para os rRNA esto no nuclolo, voc
poderia pensar que esses genes esto no
Partes de cromossomos que
mesmo cromossomo. No esto! Na espcie
contm genes para rRNA
humana, por exemplo, esto em cinco

cromossomos diferentes: 13, 14, 15, 21
Rompimento
mecnico
e 22. Mas como eles podem estar na mesma

regio do ncleo? A soluo desse enigma
est na Figura 3.15.
Nuclolo isolado
contendo pedaos
Envoltrio
52
CEDERJ
Nuclolo
de cromossomos
Figura 3.15: Ncleos isolados podem ser usados

para, por rompimento mecnico, isolar nuclolos.
MDULO 1
Durante a intrfase, as regies dos cromossomos que contm genes
AULA
que codificam para os RNA se aproximam. Os genes que codificam os

mRNA que vo produzir as protenas ribossomais no citoplasma tambm
se aproximam no nuclolo. Depois de serem produzidas no citoplasma (por
outros ribossomos!), as protenas ribossomais voltam ao ncleo pra comear
a se associar aos rRNA e formar novos ribossomos.
Mas ateno, perigo! Se os ribossomos ficassem prontos, poderiam
iniciar a traduo dos mRNA antes que eles fossem processados! L se ia a
maior vantagem evolutiva dos eucariotos por gua abaixo!
As subunidades ribossomais ficam quase prontas no ncleo, mas
s amadurecem depois de chegar ao citoplasma (Figura 3.16).
Gene de
DNA
rRNA
Transcrio
rRNA precursor
Protenas
ribossomais
sintetizadas
RNA e protenas
no cito-
envolvidas
plasma
no processamento
Nuclolo
Subunidade
maior imatura
Subunidade
menor
Nuclo
Citoplasma
Transporte e
maturao ativa
dos ribossomas
18S
rRNA
40S
5.8S
5S
2.8S
rRNA
60S
Figura 3.16: Esquema geral da

produo de ribossomos pelo nuclolo.
CEDERJ
53
Todo o processamento dos rRNA a partir do precursor

realizado no nuclolo por um conjunto de RNA e protenas
muito bem organizado. As protenas vm do citoplasma e se
juntam ao nuclolo, facilitando o arranjo ao mesmo tempo em que os RNA
so processados. Para que tudo funcione a contento, o prprio nuclolo
precisa ser muito organizado. Em micrografias de grande aumento possvel
perceber que o nuclolo subcompartimentalizado, com regies densas
e regies fibrilares (Figura 3.17). Com tantos RNA e protenas associados,
no de estranhar que o nuclolo seja eletrondenso, apesar de no ser
formado por heterocromatina!
Heterocromatina perifrica
Envoltrio
nuclear
Figura 3.17: Sub-regies do nuclolo.
Nuclolo
Fotos: E. G Jordan e J. McGovern.
rea
densa
rea
granular
Centro
fibrilar
2m
1m
QUANTOS NUCLOLOS TEM UMA CLULA?

Depende da fase do ciclo celular em que ela se encontra. Durante
a intrfase, o nuclolo um s.
medida que a fase M se aproxima e os cromossomos comeam
a se compactar, os diferentes cromossomos que possuem genes para
rRNA se afastam, mas ainda continuam a transcrever, fazendo parecer
que existem vrios nuclolos. A transcrio dos genes ribossomais s
pra mesmo na prometfase, por isso nessa fase no h nuclolo nenhum.
A diviso celular mal terminou e os genes ribossomais recomeam
sua intensa atividade de transcrio e montagem de ribossomos,
ainda antes que os cromossomos onde se localizam possam se
reaproximar (Figuras 3.18 e 3.19).
54
CEDERJ
MDULO 1
3
Mitose
G1
AULA
G2
Nuclolo
Envoltrio
nuclear
Desassociao
Reassociao
Figura 3.18: Aparncia do nuclolo durante o ciclo celular.
10m
Figura 3.19: Aspecto do nuclolo visto por microscopia ptica de contraste de fase. As clulas da esquerda esto em final de diviso celular; a do
meio, no incio de G1; a da direita, em G2. Fotos: E. G Jordan e J. McGovern.
OUTROS SUBCOMPARTIMENTOS NUCLEARES

Nos ltimos anos, vrios subcompartimentos nucleares foram
observados. Assim como o nuclolo, eles no so envoltos por membrana.
Os mais estudados so os corpsculos nucleares, ou corpsculos de
Cajal (aquele mesmo que voc conheceu como um dos descobridores
do complexo de Golgi) e os grnulos de intercromatina, ou speckles
(Figura 3.20). A funo desses compartimentos ainda no est clara,
mas acredita-se que sejam agrupamentos de enzimas e RNA envolvidos
na transcrio e no splicing de RNA, respectivamente.
CEDERJ
55
Figura 3.20: Imunofluorescncia

usando anticorpos que reconhecem diferentes subcompartimentos
nucleares. As setas apontam os
corpsculos de Cajal. As regies brancas
correspondem a speckles. Os grandes
crculos escuros correspondem ao
nuclolo (essa clula est bem no incio
de G1). O cinza do fundo corresponde
cromatina. Foto: Judith Sleeman.
CONCLUSO
O ambiente nuclear , portanto, altamente organizado, com
compartimentos formados pela associao de macromolculas que se mantm
unidas sem estarem cercadas por uma membrana. Apenas o envoltrio nuclear
formado por duas bicamadas lipdicas, como veremos na prxima aula.
RESUMO
Nos eucariotos, o genoma fica dentro de um compartimento especfico,
o ncleo.
A maioria das clulas eucariticas possui apenas um ncleo, mas existem
clulas binucleadas, como alguns protozorios; multinucleadas, como as fibras
musculares e clulas anucleadas, como os eritrcitos de mamferos.
A presena do ncleo faz com que os eventos de transcrio e traduo ocorram
em compartimento separados, possibilitando o processamento do RNA.
Nucleossomos so arranjos octamricos de histonas em torno dos quais se
enrola a dupla fita de DNA com cerca de 200 pares de bases. O DNA entre os
nucleossomos chamado DNA de ligao.
A cromatina corresponde ao DNA compactado por protenas e pode estar
alternadamente na forma de eucromatina, em processo de transcrio, ou de
heterocromatina, estado mais compactado em que no h transcrio.
O nuclolo corresponde regio em que esto sendo sintetizados
os ribossomos, por isso apresenta-se mais denso que o resto da eucromatina.
56
CEDERJ
MDULO 1
AULA
EXERCCIOS
1. Quais as vantagens evolutivas do aparecimento do ncleo?
2. Construa um esquema com a organizao geral do ncleo interfsico.
3. Qual a importncia da compactao do DNA?
4. O que um nucleossomo?
5. O que DNA de ligao?
6. Qual o papel da histona H1?
7. Diferencie eucromatina de heterocromatina.
8. O que vem a ser a heterocromatina aderida ao envoltrio nuclear de clulas
interfsicas?
9. O nuclolo heterocromatina? Por qu?
10. Podemos dizer que os genes que codificam os ribossomos ficam todos em um
mesmo cromossomo?
CEDERJ
57
objetivos
AULA
Transporte ncleo-citoplasma

Conhecer a estrutura do envoltrio nuclear.
Correlacionar a estrutura do envoltrio com sua
dinmica no ciclo celular.
Conhecer a estrutura do complexo do poro.
Conhecer as principais caractersticas do transporte
entre ncleo e citoplasma.
Pr-requisitos
Compartimentalizao celular (Aula 15 de Biologia Celular I).
Filamentos Intermedirios (Aula 22 de Biologia Celular I).
Controle do ciclo celular (Aula 1 de Biologia Celular II).
Diviso celular (Aula 2 de Biologia Celular II).
Biologia Celular II | Transporte ncleo-citoplasma
INTRODUO
Voc aprendeu na ltima aula que o envoltrio nuclear est encarregado

de estabelecer o limite fsico e qumico entre os ambientes nuclear e
citoplasmtico, alm de funcionar como suporte adicional para a prpria
organizao do genoma durante a intrfase. Seu aparecimento foi um passo
evolutivo importantssimo porque separou, espacial e temporalmente, a
transcrio da traduo. Se o envoltrio muito til durante a intrfase, em
contrapartida, pode ser um estorvo durante a mitose, j que necessrio
que os microtbulos do fuso mittico possam fazer contato com os
cromossomos. Assim, na maioria dos eucariotos, o envoltrio se desarranja
no incio da mitose, sendo novamente montado ao redor do genoma nas
clulas-filhas. Nesta aula, vamos examinar a estrutura do envoltrio nuclear,
que permite a segregao entre ncleo e citoplasma, mas tambm promove
as trocas necessrias entre os dois compartimentos, e que caractersticas do
envoltrio garantem que ele se rearranje corretamente nas clulas-filhas.
ORGANIZAO ESTRUTURAL DO ENVOLTRIO NUCLEAR

O envoltrio nuclear (Figura 4.1), tambm chamado envelope
nuclear ou carioteca, formado por duas membranas concntricas
separadas pelo espao perinuclear e sustentadas no lado nuclear por
estruturas filamentosas. A seguir, descrevemos as principais caractersticas
dos componentes do envoltrio nuclear.
Membrana nuclear
interna
Membrana nuclear
externa
Membrana do
retculo
Lmen do retculo
Ncleo
Lmina nuclear
Espao perinuclear
Poros nucleares
Figura 4.1: Esquema bsico do compartimento nuclear,

mostrando as duas membranas que formam o envelope.
60
CEDERJ
MDULO 1
Membrana nuclear externa contnua com o retculo
AULA
endoplasmtico rugoso, tendo freqentemente ribossomos aderidos,

capaz, portanto, de sintetizar protenas.
Espao perinuclear contnuo com o lmen do retculo
endoplasmtico.
Membrana nuclear interna a bicamada lipdica dessa membrana
tambm semelhante do retculo endoplasmtico, sendo contnua com
a membrana externa em alguns pontos, porm seus lipdios e protenas
no se difundem livremente pela membrana externa e pelo retculo.
Por isso, a membrana nuclear interna tem composio especial. Entre
as molculas mais importantes dessa membrana, destacam-se receptores
que vo ancorar a lmina nuclear, que est abaixo dela, e molculas
envolvidas com a homeostase de clcio (veja boxe).
UM NOVO COMPARTIMENTO: O RETCULO NUCLEOPLASMTICO

Manter a concentrao de clcio baixa no citoplasma e aument-la repentinamente
faz parte dos mecanismos de sinalizao celular, como voc aprendeu nas Aulas 13 e 14
de Biologia Celular I. O estoque intracelular de clcio fica no lmen do retculo, que o
libera quando molculas de IP3 ligam-se a seus receptores na membrana do retculo.
Muitos eventos intranucleares dependem de sinais de clcio, mas a regulao desses sinais
ainda no tinha sido descrita. Recentemente, foram observados perfis de membrana
contnuos com o envelope nuclear e com o retculo endoplasmtico que constituem um
depsito intranuclear de clcio (Figura 4.2).
Figura 4.2: Clula epitelial marcada com

um traador fluorescente especfico para
retculo endoplasmtico, o ER tracker.
A seta aponta um segmento do retculo
nucleoplasmtico. (Foto: Echevaria
et al., Nature Cell Biol, 5: 440, 2003.)
Embora seja contnuo com o retculo, a liberao do clcio desse compartimento no

regulada pelo retculo, tendo mecanismos independentes. O novo compartimento recebeu
o nome de retculo nucleoplasmtico.
CEDERJ
61
Lmina nuclear uma rede de filamentos entrecruzados

(Figura 4.3), classificados como filamentos intermedirios por causa
de sua espessura e caractersticas de polimerizao e despolimerizao
(reveja Aula 22 de Biologia Celular I).
Figura 4.3: Microscopia eletrnica

da lmina nuclear do ovcito de
Xenopus, preparada por congelamento rpido e rplica. (Foto: Ueli
Aebi, J. Cell Biol. 119:1429, 1992.)
1 m
TRANSFECTAR
Os filamentos da lmina so formados por protenas chamadas
UM GENE
laminas (a palavra assim mesmo, paroxtona quando se refere
coloc-lo,
usando recursos
de laboratrio, em
uma clula de outro
organismo, ou mesmo
em uma clula do
mesmo organismo,
com o objetivo de
forar sua expresso.
s protenas e proparoxtona quando se refere ao conjunto dos

filamentos). As laminas so expressas nas clulas de quase todos os
metazorios, com exceo dos fungos e dos vegetais. Nos mamferos
existem cerca de 60 laminas, que podemos classificar em dois diferentes
grupos: laminas A e B. A lmina nuclear fica sempre logo abaixo da
membrana nuclear interna, porque um de seus componentes, a lamina
tipo B, est preso a esta membrana por um receptor. J as laminas do
tipo A tm afinidade pela cromatina interfsica. Reveja o esquema da
DELETAR UM GENE
retir-lo do genoma
de uma clula, usando
recursos de laboratrio,
substituindo-o por
outro no relacionado,
que poder at ajudar
na seleo das clulas
que realmente tiveram
o gene deletado.
J existem tcnicas
de laboratrio que
impedem que um gene
seja expresso sem que
seja necessrio
delet-lo. Voc vai
aprender em Biologia
Molecular.
62
CEDERJ
Figura 3.5, na aula passada.

As laminas tm um papel importante na manuteno da forma e do
tamanho do ncleo. Isso ficou demonstrado com o seguinte experimento:
o gene da lamina B3 de camundongo, que expresso em espermatcitos,
foi transfectado para clulas somticas. Depois da transfeco, as clulas
somticas, cujo ncleo era arredondado, passaram a apresentar ncleo
em forma de gancho, caracterstico dos espermatcitos.
As laminas tambm esto envolvidas em suportar as deformaes
que o ncleo sofre quando empurrado pelas outras organelas. Clulas
mutantes que tiveram os genes de laminas deletados no so mais
capazes de consertar deformaes do ncleo, que continua deformado
at a prxima mitose.
MDULO 1
Cromatina aderida Existe uma camada de heterocromatina logo
AULA
abaixo da lmina que permanece associada ao envoltrio nuclear durante

toda a intrfase. Esse posicionamento da cromatina importante para a
prpria organizao do genoma e mantido pela associao das laminas
do tipo A com a cromatina.
Voc pode perceber que o posicionamento dos componentes do
envoltrio nuclear mantido pela interao da lmina com a membrana
interna (atravs das laminas tipo B) e com a cromatina aderida
(atravs das laminas tipo A).
Complexos do poro O envoltrio nuclear possui poros
estruturados que atravessam as duas membranas nucleares, constituindo,
assim, uma comunicao direta entre os ambientes citosslico
e nuclear (Figura 4.4).
Citoplasma
Membrana externa
Espao perinuclear
Membrana interna
Ncleo
50nm
Figura 4.4: Esquema simplificado do complexo do poro. Repare que as membranas externa
e interna so contnuas, mas se mantm isoladas porque protenas transmembrana que fazem
parte da estrutura do poro bloqueiam a livre movimentao de protenas e lipdios entre elas.
Na regio dos complexos do poro a lmina e a cromatina esto

afastadas (reveja as Figuras 3.4 e 3.5 na aula passada). A estrutura
dos complexos do poro tem sido alvo da ateno de microscopistas
eletrnicos h vrios anos. O modelo desses estudos o ovcito de
Xenopus, por ser uma clula grande e que est sintetizando muitas
protenas, necessitando, assim, enviar grandes quantidades de mRNA
para o citoplasma e importar muitas protenas para o ncleo, para
trabalhar nas etapas da transcrio e montagem de ribossomos. J foi
constatada a relao direta entre o nmero de complexos do poro e a
intensidade da sntese de protenas, que aumenta obrigatoriamente o
transporte entre ncleo e citoplasma. Isto , quanto maior a quantidade
de protenas sintetizadas, maior o nmero de complexos do poro.
CEDERJ
63
O modelo que est na Figura 4.6 foi idealizado a partir de micrografias

como as da Figura 4.5.
Figura 4.5: Complexos do poro preparados por congelamento rpido e rplica metlica. Em A, a face citoplasmtica do envoltrio nuclear, em que se pode distinguir as partculas que formam o anel citoplasmtico.
Em B, a face nuclear do envoltrio, permitindo
observar as cestas nucleares. Em C, um corte ultrafino
100nm
100nm
(b)
(a)
atravs do envoltrio nuclear em preparao convencional para microscopia eletrnica. Fotos: Fahrenkrog & Aebi, Nature Rev Mol Cell Biol, 4: 757, 2003.
Fibrilas
100nm
Membrana externa
(c)
Anel citoplasmtico
CITOPLASMA
Estacas radiais
Figura 4.6: Modelo
Anel nuclear
do envoltrio nuclear
com dois complexos
do poro inseridos.
Anel distal
Lmina
nuclear
NCLEO
Membrana interna
Cesta
A estrutura de cada poro formada por trs anis: o anel

citoplasmtico, exposto na membrana externa; o anel nuclear, exposto
na membrana interna, e um anel mediano na regio do espao perinuclear.
Cada anel formado por oito partculas. As partculas do anel mediano
so transmembrana, sendo por isso chamadas estacas radiais, e formam
a barreira que limita a fluidez de protenas e lipdios entre as membranas
externa e interna. Do anel citoplasmtico projetam-se longas fibrilas
envolvidas com o reconhecimento das molculas que podero atravessar
o poro. Do anel nuclear, projetam-se outros filamentos que se prendem
a um anel distal, parecendo uma cesta de basquete. O conjunto desses
filamentos mais o anel distal chamado cesta nuclear.
64
CEDERJ
MDULO 1
Alguns complexos do poro possuem uma partcula central
AULA
(tambm chamada plug central), que parece obstruir a passagem.

Depois que os complexos do poro foram observados por tomografia,
o plug passou a ser considerado, na maioria dos casos, uma projeo
do anel distal. Em algumas micrografias, no entanto, o plug
realmente era formado por material (RNA ou protena, ou ambos)
em trnsito pelo poro.
Agora voc h de concordar que o complexo do poro realmente
merece esse nome! Em mamferos, ele formado por cerca de trinta
cadeias proticas, coletivamente denominadas nucleoporinas. Ainda
no se conhece a funo particular de cada uma delas, mas o conjunto
certamente est encarregado do controle do transporte de molculas
entre ncleo e citoplasma.
TRANSPORTE ENTRE NCLEO E CITOPLASMA

Os complexos do poro mantm abertas passagens diretas entre
os ambientes citoplasmtico e nuclear. Assim, era de se esperar que a
composio dos dois compartimentos fosse semelhante, mas no o
que se observa. A estrutura do complexo sustenta uma abertura que
deixaria passar livremente protenas de at cerca de 50.000 daltons.
Se examinarmos o tamanho das protenas que funcionam dentro
do ncleo, constatamos que grande parte delas bem maior do que
isso. Pensando bem, qualquer molcula de mRNA que precise sair
do ncleo tem massa maior do que 50.000 daltons. Pensando ainda
melhor, uma subunidade ribossomal saindo do ncleo maior ainda!
Em contrapartida, existem protenas citoplasmticas menores do que
50.000 daltons que deveriam transitar sem dificuldade entre os dois
ambientes, como os monmeros de actina, por exemplo. No entanto,
a actina nunca encontrada dentro do ncleo.
Portanto, evidente que existem mecanismos de transporte
especializados, tanto para promover a passagem de molculas maiores
do que o poro quanto para evitar a passagem de molculas menores.
Ainda h muitos mistrios sobre esse assunto, mas algumas
caractersticas desse transporte foram descobertas experimentalmente.
Foi escolhido como modelo de estudo o transporte da protena
nucleoplasmina, j que ela funciona exclusivamente no ncleo e grande
CEDERJ
65
demais para passar pelo complexo do poro por difuso. A protena ntegra
ou parcialmente digerida foi marcada com fluorocromo, microinjetada no
citoplasma e observada em microscpio de fluorescncia (Figura 4.7).
A nucleoplasmina formada por vrios domnios, uma cabea
globular e vrias caudas lineares, iguais entre si. Quando essa protena
injetada no citoplasma de uma clula interfsica, em poucos minutos
de incubao ela entra no ncleo. Se a nucleoplasmina for submetida
a uma digesto com enzimas proteolticas, de modo a separar a cabea
das caudas, e depois estas forem injetadas separadamente, observa-se
que as cabeas permanecem no citoplasma, enquanto as caudas entram
no ncleo. Esse experimento mostrou que as caudas da nucleoplasmina
possuem algum sinal especfico que permite a entrada no ncleo.
Protelise parcial
Cauda
Cabea
Nucleoplasmina
Cabeas
Caudas
Microinjeo no citoplasma
Figura 4.7: Experimento realizado

com a nucleoplasmina para estudar as
caractersticas do transporte de uma
Incubao a 37C
protena entre o ncleo e o citoplasma.

Observao da fluorescncia
Entram
Ficam no
Entram
no ncleo
citoplasma
no ncleo
Os experimentos seguintes procuraram determinar qual era

a menor seqncia de aminocidos contida nas caudas da nucleoplasmina
necessria e suficiente para a entrada no ncleo. Assim se chegou
seqncia de localizao nuclear (NLS nuclear localization sequence),
uma seqncia reconhecida no envoltrio nuclear para permitir a entrada
no ncleo. Do ponto de vista molecular, houve surpresas: a) em cada
protena nuclear estudada havia variaes na seqncia; assim, no se pde
apontar uma seqncia de localizao nuclear, mas vrias possveis com
66
CEDERJ
MDULO 1
caractersticas comuns; b) a seqncia no est na ponta da cadeia, como
AULA
as seqncias j conhecidas para entrada no retculo endoplasmtico (a

primeira seqncia sinal descoberta, lembra? Se no, reveja a Aula 16 de
Biologia Celular I) ou nas mitocndrias; portanto, no pode ser cortada
depois da entrada no ncleo. Essa caracterstica teria alguma importncia?
Muita importncia! Espere s um pouquinho que voc j vai ver!
Muitos anos depois, experimentos semelhantes ao da
nucleoplasmina foram feitos com a actina: o gene que codifica para
essa protena foi manipulado, resultando em vrios genes modificados,
cada um codificando actina sem uma parte da cadeia. Os vrios genes
foram transfectados em clulas diferentes e observou-se em qual delas a
actina conseguia entrar no ncleo. Na nica clula em que a actina foi
encontrada no ncleo, observou-se que o gene transfectado correspondia
a uma actina sem a seqncia de aminocidos que especificamente era
excluda do ambiente nuclear, definindo, assim, a primeira seqncia de
excluso nuclear (NES - nuclear exclusion sequence). Ainda continuam
sendo assunto de investigao se a seqncia de excluso tambm
est presente em outras protenas e o significado biolgico dessa
descoberta.
Voc tambm j deve estar curioso para saber como, com aquela
morfologia do complexo do poro, as protenas entram no ncleo. Esta
tambm uma dvida dos biologistas celulares: ser que as protenas
passavam mesmo pelos complexos do poro? S por eles? Passavam com
a conformao nativa ou eram desenoveladas? Se no desenovelam,
os poros dilatam? Esse transporte gasta energia? Precisa de protenas
auxiliares? Calma! Uma pergunta de cada vez! Vamos l!
As protenas nucleares passam pelos complexos do poro?

A passagem de protenas s ocorre atravs dos complexos do
poro. Isso foi demonstrado acoplando a nucleoplasmina com partculas
de ouro coloidal e observando essas clulas ao microscpio eletrnico
de transmisso (Figura 4.8).
CEDERJ
67
Figura 4.8: Em a, o experimento

realizado para determinar por onde
(a)
passam as protenas que entram
Ouro coloidal
(b)
no ncleo; em b, o resultado em microscopia eletrnica de transmisso (MET),

onde podemos ver que os complexos
protena-ouro
passam
apenas
pelos
coloidal
Caudas de
nucleoplasmina
complexos
Microinjeo
do poro, delimitados por colchetes.

Note
mitocndria
(M)
indi-
cando de modo inconfundvel o

lado citoplasmtico. A foto b de
Feldherr et al. J Cell Biol, 99: 216, 1984.
Incubao a 37
met
Citoplasma
Esses experimentos responderam ainda a outras perguntas:

o acoplamento com ouro coloidal impede que as protenas mudem de
conformao; assim, ficou demonstrado que as protenas atravessam
o complexo do poro em sua conformao nativa. Alis, se voc estava
imaginando como uma protena maior do que o dimetro do poro
pode atravess-lo, repare (Figura 4.8.a) que, no acoplamento com
ouro coloidal, vrias protenas se associam a uma mesma partcula
(o tamanho da partcula de ouro usada no experimento era
de 10nm). Portanto, vrias protenas e mais uma partcula de
10nm passam ao mesmo tempo pelo poro!
E a sada do mRNA?
Para estudar o transporte de mRNA, foram realizados experimentos
equivalentes aos realizados com protenas nucleares, j esquematizados na
Figura 4.8. Partculas de ouro coloidal foram acopladas a molculas de
mRNA e microinjetadas no ncleo de uma clula. Depois de alguns minutos
de incubao a 37oC, a preparao foi fixada, processada, e observada em
microscpio eletrnico de transmisso. O resultado que as molculas de
mRNA saem do ncleo exclusivamente atravs de complexos do poro.
68
CEDERJ
MDULO 1
AULA
Entrou por uma porta, saiu pela outra?

Ser que existem complexos do poro s para a entrada de
protenas e outros s para sada de mRNA? Essa pergunta s pde
ser respondida quando protenas e mRNA foram acoplados a
partculas de ouro de tamanhos diferentes, s protenas com ouro de
10nm e aos mRNA com ouro de 20nm. Os complexos protena-ouro
foram injetados no citoplasma, enquanto os complexos
mRNA-ouro foram injetados no ncleo da mesma clula, que depois
de processada foi observada ao microscpio. Advinha o resultado?
Foram observadas partculas de 10nm entrando e partculas de
20nm saindo pelos mesmos poros! Assim foi demonstrado que os
complexos do poro so competentes tanto para transportar protena
do citoplasma para o ncleo quanto mRNA do ncleo para o citoplasma,
isto , na direo oposta.
Agora ns tocamos num ponto chave quando se trata do
transporte entre ncleo e citoplasma: direo. A direo exclusiva
uma das principais caractersticas desse transporte: as molculas de
mRNA s saem do ncleo, enquanto as protenas que tm a seqncia
de localizao nuclear s entram (por isso voc vai encontrar em alguns
textos que o transporte entre ncleo e citoplasma vetorial, isto , tem
direo e sentido). Se voc pensou na biognese dos ribossomos, em que
protenas so sintetizadas no citoplasma, entram no ncleo e depois
saem para o citoplasma, lembre que antes de retornar ao citoplasma
elas se associaram a molculas de RNA, formando ribonucleoprotenas,
que tm caractersticas de transporte especiais.
O transporte entre ncleo e citoplasma consome energia?

Para responder a essa pergunta, foi feito um experimento
muito semelhante ao descrito na Figura 4.7, mas em vez de incubar
a preparao a 37oC, a incubao foi feita a 4oC. Nessa situao, a
nucleoplasmina no entrava no ncleo, ou entrava to devagar que
tornava o experimento difcil de observar. O passo seguinte foi fazer a
DEPLETAR
Diminuir,
extinguir, no caso,
o estoque celular
de ATP.
microinjeo de nucleoplasmina em clulas que tinham sido depletadas

de ATP (Figura 4.9). O resultado foi a reteno da protena no envoltrio
nuclear. Esse experimento levou idia de que o transporte entre
ncleo e citoplasma tem duas etapas: reconhecimento, independente
CEDERJ
69
de ATP, e translocao, dependente de ATP. Curiosamente,

a depleo de ATP no bloqueou a sada RNA do ncleo
para o citoplasma, o que s foi compreendido anos
depois
(se os pesquisadores esperaram anos, voc pode esperar

um pouquinho, n?).
Nucleoplasmina
Microinjeo
Incubao na ausncia de ATP

(Observao por fluorescncia)
Acumulao ao
redor do ncleo
Figura 4.9: O transporte de protena do ncleo para o citoplasma no ocorre na

ausncia de ATP. A protena se associa ao envoltrio, mas no translocada.
A etapa de reconhecimento das protenas que sero transportadas

para o ncleo certamente envolve receptores que reconhecem as
seqncias de localizao nuclear. A identidade exata dos receptores
ainda no foi determinada, mas h indcios de que eles estejam localizados
nas fibrilas que se projetam do anel citoplasmtico do complexo do poro
(Figura 4.6). Depois do reconhecimento, a acomodao da protena na
abertura do canal inicia a etapa de translocao.
No era bem assim

Recentemente, novos experimentos mostraram que o
nucleotdeo envolvido no transporte do ncleo para o citoplasma no
o ATP diretamente, e sim o GTP. A entrada de protenas no ncleo,
e tambm a sada de RNA, dependem da associao dessas molculas
com co-fatores que ligam e hidrolisam GTP. Como a recomposio
do estoque citoplasmtico de GTP depende da produo de ATP
(e transferncia do fosfato do ATP para GDP na mitocndria,
relembre na Aula 27 de Biologia Celular I), o bloqueio do transporte
na ausncia de ATP fica explicado.
70
CEDERJ
MDULO 1
AULA
O bichinho do Ran-ran
Ran, a GTPase envolvida no transporte entre ncleo e citoplasma,
pertence mesma famlia de GTPases monomricas cujo representante
mais famoso Ras, que atua na sinalizao celular (Aula 14 de Biologia
Celular I), e que tambm abriga as Rab, que trabalham no controle
do trfego intracelular de vesculas (Aula 25 de Biologia Celular I).
Como todas as GTPases, Ran pode estar ligada a GTP ou a GDP.
A forma Ran-GDP mais abundante no citoplasma e a forma Ran-GTP
mais abundante no ncleo. Essa distribuio conseqncia da ao
de outras protenas sobre as Ran (Figura 4.10). No citoplasma existem
protenas que estimulam a atividade enzimtica de Ran, fazendo com
que ela hidrolise o GTP, enquanto no ncleo protenas associadas
cromatina roubam o GDP de Ran, que logo substitudo por GTP.
Supe-se que Ran-GTP tenha tendncia a sair do ncleo, enquanto
Ran-GDP tenha tendncia a entrar.
Ran-GDP
p
GDP
Figura 4.10:
O ciclo de
Ran-GAP
Ran
Citoplasma
entre o citoplasma e o ncleo.

Ncleo
Ran-GEF
GDP
GTP
Cromatina
GTP
Ran-GTP
Mais personagens: vou entrar, voc se importa?

Outra descoberta recente que as seqncias de localizao
nuclear, no citoplasma, e de excluso nuclear, no ncleo, no so
reconhecidas diretamente pelos componentes do complexo do poro e
sim por receptores de transporte. O complexo formado pelas protenas
a serem transportadas (carga) mais os receptores de transporte
que reconhecido no poro e transportado. Os receptores de
transporte so protenas chamadas, coletivamente, carioferinas ou
importinas (reconhecem as NLS no citoplasma e so importadas)
e exportinas (reconhecem as NES no ncleo e so exportadas).
Veja na Figura 4.11 como Ran e importina funcionam em conjunto.
CEDERJ
71
Figura
Importina
Carga com NLS
4.11:
Uma
protena
no
cito-
plasma (carga) que tenha a seqncia de

localizao nuclear (NLS) acopla-se a uma
Ran-GDP
importina e o conjunto reconhecido pelo
complexo do poro e translocado. J no ncleo,
Citoplasma
a protena liberada porque a importina tem

mais afinidade pela Ran-GTP, liga-se a ela e
saem juntas para o citoplasma. L chegando,
Ncleo
Ran hidrolisa o GTP e se solta da importina,

que est pronta a reconhecer outra carga.
Ran-GTP
Importina+Ran
Carga j
importada
Supe-se que a excluso de uma carga do ncleo funcione

do mesmo modo (Figura 4.12).
Exportina
Carga j no
Ran-GDP
citoplasma
Citoplasma
Figura 4.12: Uma carga com seqncia de

excluso nuclear (NES) que esteja dentro do
ncleo acopla-se exportina e Ran-GTP
Ncleo
da Ran roubado e o complexo se desfaz.
Carga com NES
Ran-GTP
Exportina+carga+Ran-GTP
Diviso celular: apertem os cintos, o envoltrio sumiu!

Voc viu como o envoltrio nuclear bem estruturado e
o trabalho que d para transportar protenas entre os ambientes
citoplasmtico e nuclear. Mas no esquea que toda essa organizao
s vale durante a intrfase! Quando as clulas iniciam a fase M, na
maioria delas o envoltrio se desarranja e s volta a se organizar ao
final do processo, j nas clulas-filhas. Se o envoltrio se desarranja, no
h mais separao entre os ambientes nuclear e citoplasmtico e seus
componentes se misturam.
72
CEDERJ
entre eles as protenas que vo compactar a cromatina, outras que vo

despolimerizar microtbulos, fragmentar o retculo endoplasmtico
e tambm as membranas que formam o envoltrio nuclear, que
vesiculam. As laminas tambm so substrato para as quinases da fase
M e, como todos os filamentos intermedirios quando so fosforilados,
despolimerizam. As laminas do tipo A ficam solveis no citoplasma, mas
VESICULAO
A vesiculao de
um compartimento
diferente do
brotamento.
A vesiculao
um processo mais
dramtico, no
qual TODO o
compartimento se
fragmenta, formando
inmeras vesculas.
as laminas do tipo B continuam presas ao seu receptor nas vesculas de

membrana nuclear interna. Alguns componentes do complexo do poro
tambm so fosforilados e o conjunto se desassocia (Figura 4.13).
Cromatina
Poro
Membrana nuclear interna
Lmina nuclear
Membrana nuclear externa

Fosforilao
Ncleo interfsico
Vesculas de membrana interna

Fim da telfase
Cromossomo
P
P
Prfase
Cromatina
P
P
P
P
Lamina B fosforilada
P
Desfosforilao
Figura 4.13: O envoltrio nuclear se
Incio da telfase
desorganiza no incio da mitose e

se reorganiza ao final do processo.
REORGANIZANDO O ENVOLTRIO NUCLEAR

Ao final da mitose, so ativadas fosfatases que desfosforilam
os substratos que foram alvo do MPF no incio do processo.
Com a desfosforilao, a cromatina volta a descompactar,
tornando a expor os stios de afinidade por laminas do tipo A e por
protenas da membrana nuclear interna. Nesse mesmo perodo, as
laminas desfosforiladas voltam a polimerizar a lmina, no em qualquer
lugar, mas exatamente em volta do genoma das clulas-filhas porque tm
afinidade pela cromatina que est descompactando. Ao se incorporar
ao polmero, as laminas do tipo B ajudam a aproximar as vesculas de
membrana interna onde esto presas.
CEDERJ
73
MDULO 1
MPF (reveja na Aula 1), que nessa ocasio fosforila muitos substratos,
AULA
O desmonte do envoltrio nuclear disparado pelo complexo
A incorporao dos componentes do complexo do poro ao

envoltrio um fenmeno ainda menos conhecido. Durante muito
tempo se sups at que os complexos do poro permaneciam ntegros
durante a mitose. Hoje, j se sabe que os complexos do poro se
desorganizam e que alguns de seus componentes tm afinidade pela
prpria cromatina. Alguns pesquisadores formularam a hiptese de
que os componentes do complexo do poro podem mesmo ajudar na
reorganizao do prprio envoltrio.
E agora? Salve-se quem puder!

Depois que o envoltrio nuclear se reestruturou nas clulas-filhas,
os ambientes nuclear e citoplasmtico voltam a se separar. E as protenas
que estavam no ncleo antes da mitose? Ser que conseguiram correr para
dentro do ncleo das clulas-filhas antes que o envoltrio se fechasse?
E se no conseguirem, sero degradadas? Que desperdcio!
Mas espere a! Elas no tinham mantido a seqncia de localizao
nuclear (NLS) porque esta ficava no meio da cadeia? Puxa, que alvio!
Ento s usar a NLS e passar por um complexo do poro de novo!
CONCLUSO
Vimos que o envoltrio nuclear uma estrutura altamente
complexa e dinmica. Os complexos do poro regulam a passagem de
protenas do citoplasma para o ncleo e dos mRNA na direo oposta.
Como em muitas clulas, o envoltrio se desorganiza durante a
mitose, protenas de localizao nuclear ficam dispersas no citoplasma
durante essa fase, mas so capazes de reentrar no ncleo (de uma das
clulas-filhas) passando atravs de um complexo de poro graas presena
de uma seqncia de localizao nuclear (NLS) no meio de sua cadeia
peptdica.
74
CEDERJ
MDULO 1
4
AULA
RESUMO
O envoltrio nuclear formado por duas membranas concntricas separadas
pelo espao perinuclear e sustentadas no lado nuclear pela lmina nuclear.
Os filamentos da lmina so formados por protenas chamadas laminas.
As laminas tm um papel importante na manuteno da forma
e do tamanho do ncleo.
O envoltrio nuclear possui complexos do poro estruturados que atravessam
as duas membranas nucleares, estabelecendo uma comunicao direta entre
os ambientes citosslico e nuclear.
A estrutura de cada poro formada por trs anis (citoplasmtico, mediano
e nuclear), longas fibrilas envolvidas com o reconhecimento das molculas que
podero atravessar o poro e outros filamentos que se prendem ao anel distal,
formando a cesta nuclear.
Os complexos do poro mantm abertas passagens diretas entre os ambientes
citoplasmtico e nuclear. Existem mecanismos de transporte especializados,
tanto para promover a passagem de molculas maiores do que o poro quanto
para barrar a passagem de molculas menores.
A seqncia de localizao nuclear (NLS) corresponde menor seqncia de
aminocidos necessria e suficiente para a entrada no ncleo. Entretanto, em cada
protena nuclear, h variaes na seqncia e esta no est na ponta da cadeia.
Protenas de localizao citoplasmtica, como a actina, possuem uma
seqncia de excluso nuclear (NES).
As protenas atravessam o complexo do poro em sua conformao nativa.
Os mesmos poros so utilizados para a entrada de protenas e a sada de RNA.
A entrada de protenas no ncleo e tambm a sada de RNA dependem
de GTP e de sua associao com co-fatores as carioferinas e as Ran que
respectivamente ligam e hidrolisam o GTP.
Durante a mitose, a fosforilao de laminas e protenas do complexo do poro
leva ao desmonte do envoltrio nuclear: as laminas do tipo A ficam solveis no
citoplasma, mas as do tipo B continuam presas ao seu receptor nas vesculas de
membrana nuclear interna. O complexo do poro tambm se desassocia.
A recomposio do envoltrio nuclear depende da desfosforilao das
protenas envolvidas. As protenas de localizao nuclear so reconduzidas ao
novo compartimento nuclear graas s seqncias NLS.
CEDERJ
75
EXERCCIOS
1. Quais so os componentes do envoltrio nuclear?
2. Quais so as caractersticas da membrana nuclear externa?
3. Quais so as caractersticas da membrana nuclear interna?
4. O que lmina nuclear? Qual a sua funo?
5. O que so complexos do poro?
6. O que seqncia de localizao nuclear?
7. Por onde as protenas que tm seqncia de localizao nuclear entram
no ncleo?
8. Por onde as molculas de mRNA saem do ncleo?
9. Por que se pode dizer que o transporte entre ncleo e citoplasma vetorial?
10. O transporte entre ncleo e citoplasma consome energia?
76
CEDERJ
objetivos
AULA
Junes celulares 1:
Junes ocludentes

Reconhecer a importncia e a necessidade
da formao de junes entre as clulas.
Entender o papel das junes oclusivas (tight)
para separao de compartimentos e formao
de domnios de membrana.
Transporte paracelular e transcelular.
Pr-requisitos
Aulas 7, 8, 9 e 12 (Biologia Celular I).
Biologia Celular II | Junes celulares 1: Junes ocludentes
INTRODUO
Os organismos pluricelulares no so simples aglomerados de clulas

coladas umas s outras. Neles, as clulas se organizam em tecidos e
estes em rgos. Duas solues foram desenvolvidas para manter
as clulas de um tecido coladas (Figura 5.1): a primeira est bem
representada nos tecidos epiteliais, em que as clulas se encontram
justapostas e quase no h espao entre elas; essas clulas permanecem
unidas graas a junes existentes entre elas ou entre uma clula e a
lmina basal. No outro extremo est o tecido conjuntivo, no qual as
clulas esto esparsamente distribudas, havendo entre elas uma matriz
rica em polmeros fibrosos que sustenta o tecido, a matriz extracelular,
que ser abordada em outra aula.
Luz do tubo digestivo
Epitlio
Tecido conjuntivo
Figura 5.1: Ao formar um epitlio, como o do tubo digestivo, as clulas permanecem

justapostas com pouco ou nenhum espao entre elas, formando uma superfcie
contnua. Nos tecidos conjuntivos, localizados abaixo do epitlio, as clulas se
apresentam dispersas em uma matriz extracelular, secretada por elas mesmas.
O QUE SO JUNES
Num epitlio, o espao entre as clulas vizinhas precisa estar
bem selado, impedindo que o fluido extracelular extravase. Tambm
importante que a unio entre essas clulas suporte tenses sem se romper.
Por ltimo, j que as clulas de um tecido atuam de modo integrado,
importante que haja comunicao e cooperao metablica entre elas.
As junes celulares so reas especializadas da membrana plasmtica
que so classificadas em trs grupos, de acordo com a funo que
desempenham: junes ocludentes, junes aderentes ou de ancoragem e
junes comunicantes.
78
CEDERJ
MDULO 2
AULA
!
Junes, como e por qu?
Os epitlios, que revestem os diversos rgos, e os endotlios, que revestem a parede dos
vasos sanguneos, so os melhores modelos para estudo dessas junes. Por qu? Porque
as clulas que constituem esses tecidos dependem das junes aderentes para se manterem
unidas umas s outras. Da mesma forma, cabe aos epitlios formar um revestimento contnuo,
impedindo o vazamento de substncias e fluidos do meio extracelular para o intracelular e
vice-versa. Essa funo desempenhada pelas junes ocludentes ou oclusivas. Finalmente,
o bom funcionamento de um tecido depende da cooperao e sincronia entre as clulas que
o constituem, sendo, portanto, necessria a comunicao entre elas. Essa comunicao se d
pelas junes comunicantes.
JUNES OCLUDENTES
Nesta aula, vamos nos deter no estudo das junes ocludentes,
tambm chamadas tight (apertadas, em ingls). Quando determinadas
substncias eletrondensas (que barram a passagem do feixe de eltrons
do microscpio eletrnico) eram injetadas na superfcie basal de um
epitlio, observava-se que o corante penetrava por entre as clulas at
determinado ponto. Nessa regio, a distncia entre as membranas das
duas clulas era menor, o que poderia explicar a barreira passagem do
corante (Figura 5.2). Quando o corante era injetado na superfcie apical
do epitlio, ele descia at o mesmo ponto e tambm ficava retido, ou
seja, as junes tight formavam em torno das clulas um cinturo que
impedia o vazamento de fluidos e solutos entre elas. muito importante
que a passagem de substncias por entre as clulas seja barrada, pois isso,
a princpio, obriga praticamente todas as substncias presentes no tubo
digestivo a passar pelo processo seletivo de permeabilidade da bicamada
lipdica, ou pelas protenas transportadoras (Aulas 7 a 12 de Biologia
Celular I). Essa passagem de substncias atravs das clulas chamada
transporte transcelular, enquanto a passagem por entre as clulas tem o
nome de transporte paracelular.
CEDERJ
79

Lmen
(a)
(b)
0,5 m
0,5 m
Figura 5.2: (a) As junes ocludentes formam um cinturo que impede a passagem de substncias por entre as clulas. Em (b) vemos duas micrografias
eletrnicas mostrando que no importa se a substncia injetada na parte apical ou na basal do epitlio, a juno ocludente forma um cinturo que impede
o seu extravasamento para o outro lado do epitlio. (Fotos: Daniel Friend)
Quando as clulas puderam ser observadas pela tcnica da criofratura (Aula 3 de Biologia Celular I), ficou mais fcil entender como as
junes ocludentes se organizavam e funcionavam. Na regio onde as
membranas de duas clulas vizinhas se aproximavam, existem protenas
transmembrana que formam verdadeiros labirintos em ambas, entrecruzando-se e formando uma espcie de costura entre as duas membranas,
o que impede a passagem de substncias nesses pontos (Figura 5.3).
(a)
(b)
Figura 5.3: Em (a), uma imagem da membrana de uma clula epitelial onde se vem
as microvilosidades da poro apical e as linhas formadas pelas partculas intramem branosas que selam o espao entre duas clulas, conforme esquematizado em (b).
80
CEDERJ
MDULO 2
AULA
AS JUNES OCLUDENTES CONSTITUEM UMA BARREIRA

FLUIDEZ DE PROTENAS DA MEMBRANA
As protenas que formam as junes de ocluso, por estarem ligadas umas s outras, formando fileiras, e a protenas correspondentes na
membrana da clula adjacente (Figura 5.4), no apenas no se movem
livremente no plano da bicamada lipdica em que se inserem como tambm no permitem que protenas inseridas na poro apical da membrana
plasmtica passem para a poro basolateral da clula, e vice-versa.
Membranas das duas clulas

adjacentes
Espao intercelular
0.6 m
Cadeias de protenas
formando a juno
Citoplasma da clula 1
Citoplasma da clula 2
Figura 5.4: As protenas que formam a juno de ocluso formam cadeias que se ligam
a cadeias semelhantes na membrana adjacente. Isso limita a mobilidade dessas protenas
no plano da membrana e tambm impede que outras protenas ultrapassem essa barreira.
Assim, as junes ocludentes formam uma barreira na

membrana plasmtica. As pores de membrana (apical e basolateral)
que ficam separadas por essa barreira constituem diferentes domnios
da membrana (Figura 5.5).
CEDERJ
81
Superfcie apical
Glicose
Simporte de Na+ e glicose
Figura 5.5: As junes de ocluso impe-
Juno ocludente
dem o livre movimento de protenas

Glicose
entre a poro apical e a basolateral

da membrana plasmtica. Com isso, os
transportadores de Na+-glicose ficam restritos poro apical e o uniporte de glicose
Uniporte de glicose
poro basolateral, criando dois domnios
Poro basolateral
distintos na membrana desse tipo celular.

Glicose
Sangue
Voc deve estar achando a Figura 5.5 familiar, e tem razo! Quando estudamos transporte atravs da membrana (Aulas 8 a 12 de Biologia
Celular I), vimos que o transporte de glicose na poro basolateral do
epitlio intestinal era feito por uniporte e na poro apical por simporte
com o sdio. Sugerimos que voc volte a consultar essas aulas para reforar como fundamental para o correto funcionamento do organismo
que esses dois domnios de membrana sejam mantidos.
No so apenas os transportadores de glicose que tornam
diferentes os dois domnios de membrana do epitlio intestinal, outras
protenas tambm se distribuem de maneira diferente e, como voc pode
observar nos esquemas e micrografias, apenas a superfcie apical possui
microvilosidades. O fenmeno de uma clula como a epitelial apresentar
diferenas entre uma regio e outra chamado polarizao tecidual,
e essas clulas so ditas polarizadas.
82
CEDERJ
MDULO 2
AULA
QUE PROTENAS EXISTEM NAS JUNES DE OCLUSO?

At o presente momento, j foram caracterizados trs tipos de
protenas formando as junes de ocluso: as claudinas, as ocludinas
e as molculas de adeso juncional JAM. Pouco se conhece sobre as
funes das molculas JAM.
As claudinas so suficientes e altamente necessrias para a
formao das junes tight e constituem uma famlia de mais de 20
protenas. A claudina-5, por exemplo, predominantemente expressa
em junes tight de clulas endoteliais. Contudo, a maioria dos rgos
e tecidos possuem junes tight apresentando mais de um tipo de
claudinas que podem interagir com claudinas da clula vizinha de forma
homoflica (interao entre claudinas do mesmo tipo) e algumas claudinas
podem realizar adeses heteroflicas (interao entre claudinas de tipos
diferentes). Essa heterogeneidade de claudinas expressas em diferentes
tecidos responsvel pela diferena de permeabilidade e seletividade
paracelular dos diferentes rgos e tecidos (Figura 5.6).
J as ocludinas no possuem um papel to fundamental para a
formao das junes tight como as claudinas. Estudos realizados at
o momento classificam as ocludinas como componentes facultativos
das junes tight, uma vez que a sua deleo ou ausncia em algumas
junes tight no interferiram nem com a formao, nem com a funo
da barreira. As ocludinas so capazes de realizar somente a interao
homoflica com ocludinas da clula vizinha (Figura 5.6).
Claudinas em interao
heteroflica
Ocludinas
Clula 1
Clula 2
Claudinas em interao
homoflica
Figura 5.6: As claudinas e as ocludinas so as principais protenas formadoras de junes de ocluso. Enquanto
duas claudinas de tipos diferentes podem se reconhecer e se ligar, apenas duas ocludinas idnticas se reconhecem.
CEDERJ
83
QUANDO A BARREIRA ROMPIDA

As junes tight tm como principal papel fazer com que as clulas
epiteliais constituam um revestimento contnuo que limite dois ambientes.
fcil entender isso quando pensamos no contedo do intestino e da
bexiga e quais as conseqncias para o resto do organismo se houver
vazamento (transporte paracelular) por entre as clulas para o interior
do organismo.
Entretanto, as clulas do epitlio intestinal so capazes de abrir
transitoriamente as suas junes oclusivas. Isso permite a rpida absoro
(via transporte paracelular) de uma grande quantidade de aminocidos
e monossacardeos recm-digeridos. Nesse momento, o gradiente de
concentrao favorece a entrada dessas substncias (Figura 5.7). Isso
demonstra que:
1. essa barreira varivel e fisiologicamente regulada;
2. importante que existam protenas de ocluso diferentes em
diferentes tipos de epitlio, pois num tecido como o epitlio da bexiga a
passagem paracelular de contedo seria um enorme desastre.
Transcelular
Paracelular
Juno tight
Figura 5.7: Esquema das vias de transporte transcelular e paracelular. Este ltimo,
quando acontece, sempre obedece ao gradiente de concentrao das molculas envolvidas.
84
CEDERJ
MDULO 2
AULA
DOMNIOS E BARREIRAS EM OUTROS EPITLIOS

Outro exemplo que demonstra a importncia da existncia de diferentes domnios (apical e basolateral) nas clulas epiteliais so as clulas
pancreticas (Figura 5.8). Essas clulas sintetizam e estocam em vesculas
secretrias enzimas digestivas (relembre a aula de retculo endoplasmtico
e complexo de Golgi, da Biologia Celular I), que sero posteriormente
liberadas atravs da regio apical da clula para dentro do lmen pancretico (interior do pncreas). Em contrapartida, a regio basolateral
responsvel pela captao de nutrientes dos vasos sanguneos para o
interior das clulas pancreticas, bem como pela interao com os vrios
hormnios que vo estimular a secreo dessas glndulas.
Vesculas de secreo
Superfcie apical
Secreo
(a)
(b)
Superfcie basolateral
Figura 5.8: Clulas que formam o epitlio de glndulas secretoras como o pncreas e as glndulas
mamrias (a) tambm dependem da barreira formada pelas junes para garantir que a secreo se
d sempre na superfcie apical. Na poro basolateral, so realizadas outras funes, como a absoro de nutrientes e molculas necessrias sntese. Em (b), vemos uma dessas clulas em destaque.
CEDERJ
85
OCLUSO SIM, FORA NO

Embora sejam muito eficientes no sentido de no permitir a passagem de molculas por entre as clulas, o cinturo de ocluso no confere
ao tecido resistncia para suportar tenses. Assim, medida que um
rgo como a bexiga fosse acumulando um volume maior (no caso de
urina) a tenso desse lquido sobre as paredes do epitlio poderia acabar
causando o rompimento das junes oclusivas. Isso no acontece porque,
entre outras razes, alm das junes de ocluso, as clulas possuem
junes de adeso ou ancoragem, que conferem grande resistncia
tenso e deformao. Na prxima aula, elas e as junes comunicantes
sero nosso assunto.
RESUMO
Em tecidos organizados, as clulas so conectadas atravs de junes
celulares, as quais so estruturas especializadas constitudas primariamente
por protenas.
Junes oclusivas ou tight selam a passagem de fluidos entre os dois lados
da camada celular e definem dois domnios na membrana plasmtica: as
regies apical e basolateral.
A composio das junes tight ainda no est totalmente esclarecida.
Entretanto, duas protenas descritas (claudinas e ocludinas) tm sido bastante
estudadas. Existem diferentes tipos de claudinas e ocludinas. Cada epitlio
apresenta um conjunto prprio dessas protenas.
As claudinas parecem ter papel fundamental para formao das junes

oclusivas, podem realizar ligaes heteroflicas ou homoflicas, enquanto
as ocludinas s podem ligar-se com ocludinas do mesmo tipo (ligao
homoflica) entre clulas vizinhas.
Cada domnio contm lipdios e protenas nicas que so responsveis
pelas funes especializadas de cada superfcie celular, como as interaes
com hormnios ou fuso com vesculas intracelulares que contm
protenas secretrias.
86
CEDERJ
MDULO 2
AULA
EXERCCIOS
1. Quais so as duas formas bsicas de associao entre clulas?
2. Quais os trs tipos de junes celulares e qual a funo bsica de cada um?
3. Por que as junes de ocluso receberam os seguintes nomes:
Juno tight Cinturo de ocluso 4. Por que o cinturo de adeso forma uma barreira?
5. O que um domnio de membrana?
6. Quais so as protenas que formam a juno de ocluso?
7. O que transporte transcelular? Exemplifique.
8. O que transporte paracelular? Exemplifique uma situao em que ele ocorra.
CEDERJ
87
objetivos
AULA
Junes celulares 2:
Junes ancoradouras
e junes comunicantes

Relacionar estrutura e funo das junes
ancoradouras.
Relacionar estrutura e funes das junes
comunicantes.
Citar as principais doenas relacionadas a essas junes.
Pr-requisitos
Aulas 7 e 8 de Biologia Celular I (Estrutura da Membrana).
Aulas 9 a 12 de Biologia Celular I (Permeabilidade e Transporte).
Aulas 21 a 24 de Biologia Celular I (Citoesqueleto).
Biologia Celular II | Junes celulares 2: Junes ancoradouras e junes comunicantes
INTRODUO
Na aula anterior, procuramos deixar claro que medida que constituem tecidos,
as clulas passam a fazer parte de um contexto social em que necessrio que
haja unio e cooperao entre elas. Tambm vimos que os epitlios formam
folhetos que separam dois ambientes, por exemplo, o interior e o exterior dos
vasos sanguneos ou do tubo digestivo (Figura 6.1).
Interior do tubo digestivo

(meio extracorpreo)
Figura 6.1:
O interior do tubo digestivo revestido por
epitlio que separa o meio intra do extracorpreo. Assim,

apenas os alimentos digeridos e selecionados sero absorvidos.
Essa funo de isolamento entre dois compartimentos

desempenhada pelas junes de ocluso. Entretanto, essas junes
no so eficientes em conferir adeso e resistncia entre as clulas,
mantendo-as aderidas entre si e lmina basal, camada de tecido
conjuntivo sempre presente abaixo de um epitlio. Nesta aula
vamos abordar tanto as junes de adeso, ou ancoradouras,
quanto as junes comunicantes.
JUNES ANCORADOURAS
As junes ancoradouras so abundantes em tecidos submetidos
a grande estresse mecnico, como o msculo cardaco e o epitlio da
pele, ocorrendo sob trs formas funcional e estruturalmente diferentes:
(1) cinturo de adeso, (2) desmossomas e (3) hemidesmossomas.
Clulas que se aderem matriz extracelular tambm formam com ela
um tipo de juno de adeso: so os contatos focais. Em invertebrados,
existe ainda um tipo especial de juno ancoradoura: a juno septante.
Todas as funes ancoradouras possuem em sua organizao bsica
trs tipos de protena: uma protena transmembrana, um tipo de
filamento do citoesqueleto e protenas adaptadoras que ligam a protena
transmembrana ao citoesqueleto (Figura 6.2).
90
CEDERJ
MDULO 2
Filamentos do citoesqueleto
Clula 1
Protenas adaptadoras
intermedirias
Protenas
transmembrana
AULA
Membrana plasmtica
Clula 2
Matriz extracelular
Figura 6.2: Algumas junes de adeso ancoram as clulas entre si, enquanto
outras ancoram a clula matriz extracelular. Todas so formadas por uma protena
transmembrana que, atravs de protenas adaptadoras, se liga a filamentos do citoesqueleto.
Observando a Figura 6.2, voc pode notar que as junes de adeso

podem ser do tipo clula-clula ou do tipo clula-matriz extracelular.
Vamos comear estudando as primeiras.
Matriz extracelular
A matriz extracelular (MEC) ser estudada de forma mais
detalhada na Aula 7. Basicamente, a MEC composta
por um conjunto de protenas e glicoprotenas que so
produzidas e lanadas para o meio extracelular onde exercem
vrias funes importantes.
CEDERJ
91
CINTURO DE ADESO
Conforme j comentamos, as junes de ocluso formam
um cinturo na poro lateral superior das clulas epiteliais, muito
eficiente na impermeabilizao do espao intercelular. Logo abaixo
desse cinturo de ocluso, posiciona-se um cinturo de adeso
(Figura 6.3), formado por protenas transmembrana da famlia das
caderinas. As caderinas pertencem a uma grande famlia de molculas de
adeso clula-clula que so dependentes de Ca+2 para manter sua estrutura
e funcionalidade (Figura 6.5).
Lmen
Microvilosidades
Juno de ocluso
Caderinas
Microfilamentos
Cinturo
Membranas adjacentes
de adeso
Figura 6.3: O cinturo de adeso se posiciona logo abaixo do cinturo

de ocluso. Enquanto o primeiro no permite a passagem de substncias
por entre as clulas, o segundo assegura que o epitlio resista a tenses.
Por que dois cintures?

Ser que o cinturo de ocluso no daria conta, por si s, de
manter a unio entre as clulas? Acompanhe a Figura 6.4 e voc j vai ver
que sem as junes de adeso nossos epitlios estariam irremediavelmente
comprometidos em sua integridade.
92
CEDERJ
MDULO 2
Figura 6.4 : Em (a), vemos o que
AULA
aconteceria se fosse exercida uma

tenso (puxo) sobre protenas
inseridas numa bicamada lipdica
fluida como a membrana
(a)
plasmtica: as protenas seriam

arrancadas, como se estivssemos tirando uma faca espetada em manteiga. J quando
as protenas se prendem a
filamentos do citoesqueleto,
a tenso aplicada a essas protenas transmitida a esses
cabos de fora, que respondem deformando aquela regio,
(b)
incluindo a membrana, como

mostra o esquema em (b).
AS CADERINAS FORMAM PONTES UNINDO

O CITOESQUELETO DE DUAS CLULAS
VIZINHAS
NH2
Pelo lado extracelular, as caderinas fazem um
Ca2+
reconhecimento homotpico, isto , uma caderina
Ca2+
se liga a outra semelhante da membrana da clula

vizinha. Pelo lado intracelular, as caderinas se
Ca2+
ligam a protenas adaptadoras que, por sua vez,

se ligaro a filamentos de actina (Figura 6.5). Vrias
Bicamada lipdica
protenas adaptadoras dessas e de outras junes j

foram identificadas e batizadas com nomes como
vinculina, catenina, -actinina e placoglobina, bem
sugestivos da sua funo, no acha?
Citoplasma
COOH
Y
X
Protenas
adaptadoras
Actina
Figura 6.5: As caderinas dependem de Ca ++ para manterem

sua conformao. Pelo lado extracelular se ligaro a outra
10mm
caderina e pelo lado citoplasmtico a protenas adaptadoras que, por sua vez, se ligaro a microfilamentos de actina.
CEDERJ
93
Os microfilamentos associados ao cinturo de adeso formam

feixes contrteis de actina-miosina (protena motora, lembra?) no interior
de cada clula epitelial. Isso especialmente importante e interessante
durante a embriognese, quando os folhetos embrionrios esto se
curvando para formar estruturas tubulares como o intestino primitivo
e o tubo neural (Figura 6.6).
Epitlio
Invaginao do folheto
epitelial por contrao
Cinturo de
progressiva do cinturo de
adeso com
feixes de actina
adeso em reas especficas
associados
O epitlio tubular se destaca
do folheto sobre ele
Figura 6.6: O cinturo de adeso, graas

contrao dos feixes de actina/miosina,
Tubo formado por epitlio
provoca uma contrao e encurvamento

de um epitlio que termina por originar
uma estrutura tubular.
Diferentes tipos de caderinas esto envolvidos nesse processo.

Assim, as clulas que vo originar o tubo neural esto ligadas pela
N-caderina, as epiteliais pela E-caderina, e assim por diante.
DESMOSSOMAS, VERDADEIROS CABOS DE GUERRA

No resta dvida de que o cinturo de adeso desempenha papel
fundamental na manuteno da integridade dos epitlios. Entretanto,
s ele no capaz de suportar as tenses exercidas sobre o epitlio.
Afinal, ele se localiza apenas numa faixa abaixo do cinturo de ocluso.
As clulas epiteliais contam ainda com numerosos desmossomas, junes pontuais que se distribuem pela poro lateral entre as clulas
epiteliais (Figura 6.7). Os desmossomas tambm so formados por
caderinas as caderinas desmossomais: desmoglena e desmocolinamas
ligam-se a filamentos intermedirios, como a queratina (no caso dos epitlios) e a desmina (no caso do msculo cardaco), atravs de protenas
intermedirias adaptadoras.
94
CEDERJ
MDULO 2
Caderinas
Caderinas
intermedirios
AULA
Filamentos
Placa de protenas
adaptadoras
Espao intercelular
Membranas das
Filamentos
(a)
duas clulas
intermedirios
(b)
Figura 6.7: (a) Os desmossomas se distribuem como botes pelas laterais das clulas
epiteliais, ligando-se a uma rede de filamentos intermedirios. Em (b), vemos em detalhe
a organizao de um desmossoma. As caderinas se ligam umas s outras pelo lado
extracelular.
Pelo
lado
citoplasmtico
se
ligam
uma
placa
formada
por
diversas
protenas que, por sua vez, se ligam a filamentos intermedirios.
Embora sejam bem pequenos, os desmossomas so facilmente

reconhecidos ao microscpio eletrnico de transmisso, pois a placa
citoplasmtica de protenas intermedirias e os filamentos intermedirios
que dali partem lhes do um aspecto nico (Figura 6.8).
(a)
(b)
Figura 6.8: (a) Uma seqncia de trs desmossomas une duas clulas adjacentes. (b) Maior
aumento de um desmossoma, onde se pode observar claramente a placa citoplasmtica de onde
partem os filamentos intermedirios e a densidade intercelular que corresponde s caderinas.
Fotos: (a) N.B. Gilula, (b) D. E. Kelly.
CEDERJ
95
Fogo selvagem, mas que diabo isso?

Algumas pessoas desenvolvem uma doena auto-imune chamada pnfigo ou
fogo-selvagem, em que a pele se abre em bolhas, exatamente como numa queimadura. Por razes ainda pouco compreendidas, essas pessoas produzem anticorpos
que destroem protenas como a desmoglena e a desmocolina, rompendo, assim, a
ligao entre as clulas, causando inchaes e vazamento de fluidos corporais para o
epitlio frouxo. Essa doena tratada com corticides, que inibem a resposta imune,
e substncias que aliviam os sintomas bastante dolorosos e incmodos da doena.
Testes de laboratrio mostraram que os anticorpos produzidos pelas pessoas afetadas reconhecem apenas os desmossomas da pele, sugerindo que os desmossomas so
bioquimicamente diferentes daqueles presentes em outros tecidos.
AS JUNES SEPTANTES
Em invertebrados, o papel do cinturo de adeso desempenhado pelas junes septantes, amplamente distribudas nos seus tecidos.
Estas possuem vrias caractersticas em comum com os cintures de
adeso. As junes septantes tambm formam uma banda contnua ao
redor da borda apical das clulas epiteliais e parecem ajudar a manter
as clulas unidas, bem como servem como stios de ligao para os
filamentos de actina. Elas possuem morfologia bastante distinta, sendo
formadas por protenas pouco caracterizadas que esto dispostas em
fileiras paralelas com periodicidade regular unindo as membranas citoplasmticas das clulas vizinhas (Figura 6.9).
Figura 6.9: Juno septante entre duas

clulas de molusco. (Foto: N. B.Gilula).
96
CEDERJ
MDULO 2
AULA
JUNES CLULA-MATRIZ EXTRACELULAR

Alm das ligaes aderentes clula-clula, tambm fundamental
que as clulas epiteliais permaneam aderidas lmina basal. No tecido
conjuntivo, as clulas tambm estabelecem contatos com as protenas
da matriz extracelular que as envolve. Essas junes clula-matriz
tambm esto esquematizadas na Figura 6.2, e sua principal diferena
com relao s junes clula-clula que as protenas transmembrana
que fazem o reconhecimento e a conexo entre o meio extracelular
e o citoesqueleto so da famlia das integrinas. As junes entre a
poro basal dos epitlios e a lmina basal so os hemidesmossomas.
J as clulas do tecido conjuntivo estabelecem com a matriz
extracelular os contatos focais.
HEMIDESMOSSOMAS NO SO DESMOSSOMAS
PELA METADE
Embora o nome e o aspecto ultra-estrutural sugiram que os
hemidesmossomas so exatamente a metade de um desmossoma
(da seu nome), no podemos esquecer que nos desmossomas a protena transmembrana sempre uma caderina e esta s se liga a outra
caderina. Como a lmina basal no uma membrana e, muito menos,
possui caderinas, no hemidesmossoma, a protena transmembrana
sempre uma integrina, que reconhece uma protena da lmina basal,
como a laminina. Alm disso, a placoglobina, uma das protenas que
formam a placa citoplasmtica dos desmossomas, no encontrada nos
hemidesmossomas. No mais, os hemidesmossomas so bem semelhantes
aos desmossomas, com protenas intermedirias formando uma placa que
as liga a filamentos intermedirios. Na prtica,
desmossomas e hemidesmossomas se interligam
Desmossomas
Filamentos intermedirios
atravs da rede de filamentos intermedirios

(Figura 6.10) e, assim como o pnfigo
uma doena que destri os desmossomas, a
epidermlise bullosa uma doena geneticamente determinada em que os hemidesmossomas so
frgeis e o rompimento entre estes e a lmina basal
propicia a formao de bolhas que tambm se
assemelham a queimaduras.
Hemidesmossomas
Lmina basal
Figura 6.10: Os filamentos intermedirios interligam os desmossomas e os hemidesmossomas.

CEDERJ
97
A BOLHA
Uma experincia que quase todo mundo j deve ter tido a de
usar um sapato novo que, por roar ou apertar continuamente o p,
acaba causando uma bolha dgua. Isso mostra bem a importncia
das junes de adeso: nossa pele formada por diversas camadas de
clulas epiteliais unidas por muitos desmossomas. As camadas superiores
so formadas por clulas mortas, das quais resta principalmente a
rede de filamentos de queratina. Essa cobertura impermevel nos
protege tanto dos agentes ambientais (chuva, sol) quanto suporta
a tenso exercida pelos fluidos extracelulares. O atrito contnuo
do calado sobre essas camadas protetoras acaba provocando seu
desgaste; assim, o fluido extracelular acaba preenchendo a epiderme afinada, resultando na incmoda bolha. Para nossa felicidade,
as clulas da pele esto em constante renovao (como vimos na
Aula 2) e em poucos dias a camada protetora de clulas mortas
se recompe (Figura 6.11).
Clula queratinizada
descamando
Clulas mortas
queratinizadas
Lmina basal
Tecido conjuntivo
Clula basal subindo
Clula basal em diviso
Figura 6.11: O desgaste das camadas queratinizadas da epiderme destri

o equilbrio capaz de suportar a tenso do fluido extracelular, provocando as bolhas.
98
CEDERJ
MDULO 2
AULA
CONTATOS FOCAIS
Clulas capazes de migrar, como os fibroblastos, estabelecem
com o substrato (o equivalente ao cho celular) pontos de adeso,
chamados contatos focais, onde protenas transmembrana da famlia
das integrinas se ligam a molculas da matriz extracelular. Pelo lado
citoplasmtico, as integrinas se ligam a protenas como alfa-actinina,
talina e vinculina e, finalmente, a filamentos de actina (Figura 6.12). A actina
se organiza em feixes paralelos, constituindo as fibras de tenso, estudadas na aula de microfilamentos, de Biologia Celular I.
Filamentos de actina
Protenas acessrias
Figura 6.12: Os contatos focais so

regies da membrana onde as integrinas aderem matriz extracelular
pelo lado extracelular e, indiretamente, a feixes de filamentos de
Integrina
actina, pelo lado citoplasmtico.
Contato focal
Lmina basal
A grande diferena entre os contatos focais e as demais junes

de adeso que, como essas clulas se movem, esse tipo de juno se
desfaz em um ponto da clula e se reorganiza mais adiante, permitindo
a mudana de forma e de posio da clula (Figura 6.13).
CEDERJ
99
Novos contatos
Contatos focais
focais se formam
A clula se desloca
Contatos focais se
desfazem em uma regio
Figura 6.13: A dinmica de formao de contatos focais em um ponto

da clula e seu desaparecimento em outros levam mudana de
forma e deslocamento desta.
AS JUNES COMUNICANTES
A necessidade de comunicao e de cooperao metablica entre
as clulas de um organismo pluricelular faz com que as primeiras junes
comunicantes se formem quando o embrio animal atinge o estgio de
apenas oito clulas! Essas junes so denominadas junes em fenda ou
Gap (espao em ingls). A existncia das junes Gap foi intuda muito
antes de elas haverem sido visualizadas.
Experimentos de Eletrofisiologia mostravam que a estimulao
eltrica de uma clula causava a despolarizao no apenas desta, mas
tambm das clulas vizinhas, evidenciando
algum tipo de comunicao entre elas
(Figura 6.14). J clulas isoladas umas das
outras no apresentavam essa resposta,
indicando que a passagem do estmulo ocorria
(a)
atravs do citoplasma.
Figura 6.14: A estimulao eltrica

de uma clula transmitida s clulas
(b)
100 C E D E R J
vizinhas se elas estiverem conectadas.
MDULO 2
AULA
Que molculas so capazes de passar pelas junes

comunicantes?
Os experimentos de medidas eletrofisiolgicas indicavam que
os ons podiam passar do citoplasma de uma clula para a clula
vizinha. Experimentos realizados com pequenas molculas fluorescentes injetadas em uma clula demonstraram que molculas de
at 1.000 daltons conseguiam atravessar prontamente as clulas
adjacentes sem vazamento para o espao extracelular. Dessa forma,
clulas acopladas pelas junes tipo Gap so capazes de compartilhar
pequenas molculas (ons inorgnicos, aminocidos, nucleotdeos e
vitaminas), mas no as suas macromolculas (protenas, cidos nuclicos
e polissacardeos) (Figura 6.15).
MW
100
Figura 6.15: O peso molecular o
1000
fator limitante para que molculas
5000
passem atravs das junes Gap.
20,000
A ESTRUTURA DAS JUNES COMUNICANTES

As junes Gap so distribudas ao longo das superfcies laterais das clulas adjacentes e permitem a troca de pequenas molculas.
Ao microscpio eletrnico de transmisso, observou-se que nas regies
onde havia junes comunicantes o espao entre as membranas das
clulas vizinhas era diferente (Figura 6.16.a), da seu nome de batismo:
Gap (= espao). Entretanto, apenas com o advento da tcnica de criofratura (Aula 3 de Biologia Celular I) e com a observao de fraes
de membrana enriquecidas em junes Gap, foi possvel esclarecer sua
estrutura (Figura 6.16.b).
Juno
Gap
Figura 6.16: Em (a) vemos a regio
de duas junes Gap em corte. Em
(b) uma rplica de criofratura onde
uma Gap grande e uma pequena
aparecem como aglomerados
de partculas intramembranosas.
(Fotos: N.B. Gilula, pedir autorizao)
Espao
intermembrana
Juno
Gap
(a)
200mm
(b)
C E D E R J 101
JUNES COMUNICANTES
Junes comunicantes medeiam a passagem de sinais eltricos
ou qumicos de uma clula para outra. Elas podem ser visualizadas
atravs da microscopia eletrnica como um aglomerado de partculas homogneas intramembrana associadas exclusivamente face
citoplasmtica (Figura 2.6).
Existem dois tipos de junes comunicantes: (1) junes tipo fenda
ou Gap e (2) plasmodesmata apenas em plantas.
As partculas observadas nas rplicas de criofratura correspondem aos conexons, verdadeiros poros moleculares formados por seis
conexinas, protenas especficas das junes comunicantes
(Figura 6.17). Os conexons projetam-se de cada superfcie celular,
segurando a membrana plasmtica a uma distncia fixa entre elas da
o termo tipo fenda. As seis conexinas de uma membrana se ligam a outras
seis na membrana adjacente e estabelecem assim o canal de comunicao.
Em contraste com as junes oclusivas, nas quais as membranas plasmticas parecem estar em contato direto, as junes comunicantes tipo
fenda mantm a membrana plasmtica a uma distncia fixa entre elas.
Figura 6.17: (a) Estrutura de um conexon. (b) As seis con(a)
exinas limitam um poro por onde passam as molculas

de uma clula para a vizinha. A mudana de posio das
conexinas tambm pode levar o canal a se fechar. Cada
conexina uma protena com quatro domnios transmembrana.
Espao (GAP) intercelular

1
Cilindro de 6 subunidades
de conexina
Citossol
3
4
Membrana alfa-hlices
transmembrana
(b)
102 C E D E R J
Espao (GAP) intercelular (2nm)

Citossol
MDULO 2
AULA
CONEXONS EM AO
As junes tipo fenda podem ter propriedades distintas nos diferentes tecidos. A permeabilidade dos canais pode variar devido a diferenas
nas conexinas que formam as junes. Existem pelo menos 11 conexinas
diferentes, cada uma codificada por um gene em separado e tendo uma
distribuio tecidual distinta. Alguns tecidos possuem mais de um tipo
de conexina, mas, apesar das diferenas entre as vrias conexinas, suas
funes e sua estrutura bsica foram altamente conservadas durante a
evoluo.
Como os canais inicos convencionais, os canais tipo fenda no
esto constantemente abertos. A permeabilidade das junes tipo fenda
rpida e pode ser aberta ou fechada atravs da alterao de pH do
citossol ou concentrao citosslica de Ca+2 livre. O papel fisiolgico
do pH na permeabilidade dessas junes ainda no est esclarecido, mas
acredita-se que possa ser uma defesa das clulas vizinhas para o caso de
uma clula romper-se ou sofrer autlise.
PARADINHA PARA UM PAPO

Existem muitas semelhanas entre os canais inicos que estudamos na Aula 8 de
Biologia Celular I e os conexons. Tantas que, para alguns autores, eles so um
tipo de canal inico. Entretanto, devemos estar atentos para duas diferenas
fundamentais: 1 os canais inicos costumam ser especficos para um determinado
on, enquanto as junes tipo fenda deixam passar todos os ons citoplasmticos
a favor do gradiente de concentrao; 2 os canais inicos se abrem e se fecham
rapidamente, enquanto os conexons permanecem abertos a menos que ocorra
um sinal de alerta (como o Ca+2) que induza seu rpido fechamento.
C E D E R J 103
Com relao ao Ca+2 as junes tipo fenda possuem um importante

papel: a presena de clcio no citossol dispara diversos eventos, e serve
para propagar um sinal eltrico entre clulas musculares ou nervosas. O
aumento do nvel de Ca+2 e Na+, relacionado abertura de canais inicos
da membrana, tambm provoca o fechamento das junes Gap. Esse
mecanismo evita tanto que a propagao de um sinal eltrico (como a
contrao das cmaras cardacas) volte no sentido errado quanto protege
as clulas vizinhas caso uma clula danificada seja invadida por ons
extracelulares. Dessa forma, as junes tipo fenda causam um efetivo
isolamento da clula danificada, fechando os conexons e impedindo
a entrada de Ca+2 e outros ons indesejveis.
Nas sinapses eltricas, existentes apenas no sistema nervoso
central, os neurnios se comunicam de forma muito rpida atravs
de junes Gap. Assim, impulsos eltricos podem passar diretamente
de um neurnio para outro. Esse tipo de transmisso nervosa bem mais
rpido do que aquele em que h necessidade de um neurotransmissor.
Plasmodesmatas
A organizao dos tecidos de plantas diferente dos existentes em
animais porque as clulas vegetais possuem parede celular rgida, rica em
celulose. As paredes celulares eliminam a necessidade de junes oclusivas
para manter as clulas unidas, mas a necessidade de comunicao direta
entre as clulas permanece. Assim, em contraste com as clulas animais,
as clulas vegetais possuem apenas uma classe de junes celulares, que
so os plasmodesmatas.
Os plasmodesmatas, assim como as junes tipo fenda, ligam
diretamente os citoplasmas de clulas vizinhas. Cada clula viva
de um vegetal (com raras excees) est ligada s clulas vizinhas
pelos plasmodesmatas, que formam finos canais citoplasmticos (0,1m) capazes de atravessar a parede celular entre duas
clulas adjacentes (Figura 6.18).
104 C E D E R J
MDULO 2
6
AULA
Retculo endoplasmtico liso

Desmotbulo
Citoplasma
Annulus
Parede
celular primria
Plasmodesmata
Lamela mdia
100mm
Membrana plasmtica comum s duas clulas
Figura 6.18: Estrutura do plasmodesmata.
Cada plasmodesmata revestido com uma membrana plasmtica

comum s duas clulas ligadas. Normalmente, o plasmodesmata tambm
contm uma estrutura tubular e fina denominada desmotbulo, derivada
do retculo endoplasmtico liso.
Assim como nas junes tipo fenda, o transporte atravs
dos plasmodesmatas inibido de forma reversvel pela elevao de
Ca+2 citosslico e permite o transporte de molculas de tamanho
inferior a 1.000 daltons.
CONCLUSO
No incio da Aula 5, comentamos que algumas clulas se associam
atravs de junes enquanto outras se mantinham distantes, porm
coladas, por meio da matriz extracelular, assunto das prximas aulas
de nossa disciplina.
C E D E R J 105
RESUMO
Os principais tipos de junes ancoradouras presentes nos tecidos de
vertebrados so junes aderentes, desmossomas e hemidesmossomas.
Junes aderentes so stios de ligao para filamentos de actina, enquanto
os desmossomas e hemidesmossomas so stios de ligao para filamentos
intermedirios.
Junes tipo fenda ou Gap so junes comunicantes formadas por conjuntos
de protenas que permitem a passagem direta de molculas menores de 1.000
daltons de uma clula para o interior da clula adjacente.
Junes Gap esto envolvidas no transporte de pequenas molculas, bem
como nas sinapses eltricas.
Os plasmodesmatas so as nicas junes celulares em plantas e, apesar
de possurem estrutura completamente diferente, funcionam como
as junes tipo fenda.
EXERCCIOS
1.Qual a principal funo dos desmossomas e quais so suas protenas

constituintes?
2.Como o cinturo de adeso contribui para a formao de estruturas
tubulares?
3. Qual a principal diferena entre desmossomas e hemidesmossomas?
4. Junes Gap permitem a comunicao clula-clula.
a) Qual a protena estrutural encontrada nas junes Gap?
b) Qual o tamanho das molculas que podem atravessar as junes Gap?
c) Qual o efeito do Ca+2 na abertura ou fechamento das junes Gap?
5. Por que as plasmodesmatas so as nicas junes encontradas em plantas?
106 C E D E R J
objetivos
AULA
Matriz extracelular

Definir o que a matriz extracelular.
Enumerar os tecidos onde a matriz extracelular
tem papel fundamental.
Caracterizar as molculas constituintes
da matriz extracelular.
Pr-requisitos
Aulas 7, 8, 16 e 17 de Biologia Celular 1.
Biologia Celular II | Matriz extracelular
INTRODUO
No desenvolvimento dos organismos pluricelulares, as clulas vo

progressivamente constituindo tecidos, conjuntos de clulas mais
especializadas. Nos animais vertebrados existem quatro tipos essenciais de
tecido: epitelial, nervoso, muscular e conjuntivo. J as plantas no possuem
sistema nervoso ou msculos, e os tecidos vegetais, embora anlogos aos
dos animais em alguns aspectos (por exemplo, as folhas tambm so
revestidas por uma epiderme), muito pouco se parecem com os nossos.
Nos epitlios, nos msculos e nos nervos, as clulas se apresentam
bem prximas umas das outras, com pouca substncia intercelular.
J nos tecidos conjuntivos que incluem cartilagens, ossos e
sangue as clulas ficam bastante espaadas entre si (Figura 7.1).
O espao entre as clulas preenchido por substncias secretadas
por elas prprias: a matriz extracelular (MEC), assunto desta aula.
At bem pouco tempo no se conheciam as principais funes da matriz
extracelular. A MEC era tida como uma estrutura inerte constituda por vrias
protenas e polissacardeos que eram sintetizados e secretados pelas clulas
para o preenchimento do espao extracelular. Atualmente, sabe-se que a
MEC, alm de auxiliar na ligao das clulas para formao dos tecidos,
tambm serve como reservatrio para muitos hormnios, controlando o
crescimento e a diferenciao celular. Vrias dessas molculas so ligantes
que podem, via receptores da superfcie da clula, ativar vias de sinalizao
(Aula 13 de Biologia Celular I).
Epitlio
Lmina basal
Fibra de colgeno
Macrfago
Capilar
Tecido
conjuntivo
Fibroblasto
Fibra elstica
Mastcito
Glicosaminoglicanas,
proteoglicanas e glicoprotenas
50m
Figura 7.1: Nos epitlios, as clulas ficam bem prximas umas das outras e aderem
lmina basal. J no tecido conjuntivo, diferentes tipos celulares se distribuem numa matriz
composta por diversos tipos de fibras proticas e outras molculas secretadas pelos fibroblastos.
108 C E D E R J
MDULO 2
AULA
O QUE A MATRIZ EXTRACELULAR?

A matriz extracelular, como o prprio nome sugere, representa o
contedo extracelular dos tecidos; nela e sobre ela repousam as clulas
dos vertebrados. Os tecidos ricos em matriz conjuntivo, cartilagem
possuem um aspecto gelatinoso. Essa verdadeira cola biolgica
constituda por fibras proticas e polissacardeos, numa combinao que
confere a esses tecidos uma imensa resistncia compresso e tenso
(Figura 7.2). Entretanto, a funo da matriz extracelular ultrapassa muito
o aspecto meramente estrutural: a matriz dita s clulas que a secretam
informaes essenciais para sua diferenciao e atividade.
Figura 7.2: A matriz extracelular confere

aos tecidos tanto resistncia compresso
(setas riscadas) quanto tenso (seta vazada).
De acordo com sua constituio qumica e ocorrncia, a matriz

abrange duas categorias de estruturas extracelulares: (1) membranas
basais e (2) tecido conjuntivo (ou conectivo) intersticial (Figura 7.1).
Ambas as estruturas, veremos, diferem no somente quanto composio
e localizao, mas tambm quanto funo.
As clulas responsveis pela produo da matriz extracelular
so os fibroblastos. Os condroblastos do tecido cartilaginoso e os
osteoblastos do tecido sseo so tipos celulares resultantes da diferenciao
de fibroblastos que secretam a matriz extracelular desses tecidos
(vide boxe).
Os principais componentes da matriz extracelular so macromolculas pertencentes a trs categorias: (a) cadeias de polissacardeos
denominadas glicosaminoglicanas, (b) protenas fibrosas de funo
estrutural (colgeno e elastina) e (c) protenas de funo adesiva
(fibronectina e laminina).
C E D E R J 109
OSSOS E SANGUE TAMBM SECRETAM MATRIZ

Embora o termo matriz extracelular seja mais facilmente associado s cartilagens e
a substncias de preenchimento, o sangue tambm um tipo de tecido conjuntivo,
embora nesse caso a matriz extracelular no seja gelatinosa, isso porque essa matriz
possui uma constituio diferente, em que no predominam as fibras proticas
nem as proteoglicanas. O sangue , por assim dizer, um tecido lquido.
No outro extremo esto os ossos, um tipo de tecido construdo para suportar
grandes compresses. A matriz ssea rica em fibras colgenas, que so secretadas
pelos osteoblastos e formam camadas concntricas em torno dessas clulas.
A incorporao de fosfato de clcio a essa matriz colgena termina por conferir
a esse tecido uma resistncia comparvel do concreto. Compare atravs dos
esquemas da Figura 7.3 como o sangue, os ossos e o tecido conjuntivo possuem
em comum o fato de serem tecidos compostos por clulas de diferentes tipos
dispersas numa matriz secretada por suas prprias clulas.
Tecido conjuntivo
a
Figura 7.3: Tanto o sangue (a) quanto os ossos (b) e o tecido conjuntivo (c) so formados
por clulas dispersas numa matriz acelular. Imagens cedidas pelo LABMEL da Universidade
do Estado do Rio de Janeiro.
110 C E D E R J
MDULO 2
AULA
GLICOSAMINOGLICANAS, UM NOME COMPRIDO PARA

MOLCULAS IDEM
As glicosaminoglicanas ou, abreviadamente, GAGs, so
formadas por unidades repetidas de dissacardeos, sendo que um
dos acares sempre um acar aminado (N-acetilglicosamina ou
Nacetilgalactosamina) e sulfatado, e o segundo acar normalmente
um cido urnico (glicurnico ou idurnico). Devido presena do
sulfato e das carboxilas dos cidos urnicos, as GAGs so carregadas
negativamente, formando uma longa molcula, contendo de 70 a 200
monossacardeos (Figura 7.4). As GAGs so as molculas mais negativas
que uma clula sintetiza. Como as cadeias de acar so, alm de longas,
bastante rgidas, se comparadas aos polipeptdeos, por exemplo, e
hidroflicas (gostam da gua; lembre-se: acares se dissolvem bem em
gua), as GAGs tendem a ocupar um enorme volume e, por conta da carga
negativa, atraem muitos ctions, especialmente Na+ e, conseqentemente,
mais gua, funcionando como verdadeiras esponjas (vide boxe).
Figura 7.4: As glicosaminoglicanas so

longas cadeias formadas pela alternncia
Dissacardeos repetidos
de um aminoacar e outro monossacardeo.
cido idurnico
Sulfato de N-acetil-galactosamina
!
D UMA PARADINHA...
Uma das principais caractersticas das GAGs a sua capacidade de reter
uma grande quantidade de gua, conferindo regio onde so liberadas
resistncia a foras de compresso. Um bom exemplo disso a cartilagem
que reveste a articulao do joelho, muito resistente a presses, graas a
esse mecanismo. Quando ocorre perda de GAGs (particularmente cido
hialurnico) nas articulaes do joelho, elas perdem a sua lubrificao
e ficam expostas ao atrito, o que acarreta dores intensas.
C E D E R J 111
A capacidade de reteno de gua pelas GAGs d origem a um

gel altamente hidratado (Figura 7.5), que preenche a maior parte do
espao extracelular, fornecendo suporte mecnico para os tecidos e
permitindo a difuso rpida de molculas hidrossolveis, bem como a
migrao celular.
GUA (E GAG s ), O SEGREDO DA JUVENTUDE?

Comparadas a outras molculas (Figura 7.5), as GAGs ocupam
um volume muito maior. Nos indivduos jovens, a quantidade de
tecido conjuntivo intersticial maior que nos idosos. Assim, por
atrarem osmoticamente grandes quantidades de gua, os tecidos
dos indivduos jovens se apresentam mais trgidos, mantendo a pele
esticadinha. Nos bebs, onde a musculatura pouco desenvolvida, esse
efeito resulta (junto com o acmulo de gordura) no que chamamos
de beb fofinho.
Protena globular (pm 50.000)
Glicognio (pm 400.000)
Espectrina (pm 460.000)
Colgeno (pm 290.000)
Figura 7.5: GAGs no tecido subcutneo ajudam

a reter gua, tornando
Hialurona (pm 8 x 106)
o beb fofinho.
AS GAG s NO SO TODAS IGUAIS

As GAGs foram subdivididas em quatro grupos, de acordo com o tipo
de acar, tipo de ligao glicosdica (nome dado ligao covalente que une
um acar a outro), nmero e localizao dos grupos sulfatos. So eles:
1. hialuronas, que no se ligam covalentemente a protenas;
2. sulfato de condroitina e sulfato de dermatana;
3. sulfato de heparana;
4. sulfato de queratana.
Todas as GAGs, com exceo da hialurona, esto ligadas
covalentemente a um ncleo protico, formando uma estrutura
denominada proteoglicana (Figura 7.6).
112 C E D E R J
MDULO 2
Cadeias de acares (GAGs)
AULA
Eixo protico
Proteoglicana
Figura 7.6: As proteoglicanas so molculas formadas por cadeias de

acares que se dispem ao longo de um eixo formado por uma protena.
AS HIALURONAS
As hialuronas, tambm chamadas cido hialurnico ou
hialuronato, no formam proteoglicanas porque possuem algumas
diferenas em relao s demais GAGs (veja Tabela 7.1).
Tabela 7.1: Diferenas entre hialuronas e demais GAGs.
Hialurona
Demais GAGs
No contm acar sulfatado
Contm acar sulfatado
Seqncias regulares de unidades
Nmero diferente de unidades
de dissacardeo formando estruturas simples
de dissacardeos formando estruturas complexas
Cadeias longas de at 25.000
Cadeias curtas de at 300
molculas de acar
molculas de acares
No ligada covalentemente a protenas
So ligadas covalentemente a protenas
A hialurona especialmente importante durante o desenvolvimento

embrionrio, porque pode atuar como molde para uma outra estrutura.
Logo aps sua sntese, a hialurona expande-se (com gua) e passa a
ocupar um grande volume, que poder ser mais tarde ocupado para
formao de rgos como corao, crnea etc. Alm de atuar como um
enchimento, ocupando espaos que sero futuramente preenchidos por
clulas, a hialurona induz a migrao celular mecanismo conhecido
como quimiotaxia. Posteriormente, a hialurona ser degradada pela
ao de uma enzima a hialuronidase secretada pelas prprias clulas
atradas por ela e as clulas se diferenciaro para formao de rgos.
C E D E R J 113
AS PROTEOGLICANAS
As proteoglicanas, assim como as glicoprotenas, so formadas
por protenas e acares. Contudo, elas se diferenciam pela quantidade e
disposio das cadeias laterais de acares (Figura 7.6). As proteoglicanas
podem possuir at 95% do seu peso em carboidratos, enquanto as
glicoprotenas contm de 1%-60% de seu peso em carboidratos
(veja o boxe). No fcil classificar as proteoglicanas, pois so formadas
por longas cadeias no ramificadas de acares bastante heterogneas.
Atualmente, elas so definidas como um grupo diverso de glicoprotenas
altamente glicosiladas cujas funes so mediadas pelo ncleo protico
e pela cadeia de GAG.
Como j foi dito, todas as GAGs com exceo da hialurona
fazem ligaes covalentes com protenas, formando as proteoglicanas
(Figura 7.6). A cadeia de GAGs se liga a uma serina do ncleo protico
atravs de um tetrassacardeo formado por uma molcula de xilose,
seguida por duas de galactose e uma de cido glicurnico (Figura 7.7).
Xilose
Galactose
Galactose
cido
Glucurnico
Tetrassacardeo de ligao
Figura 7.7: Uma GAG, formada por repeties dos sacardeos A e B,

se liga a uma serina do eixo protico por um tetrassacardeo formado
por xilose, duas molculas de galactose e uma de cido glucurnico.
114 C E D E R J
MDULO 2
7
AULA
UMAS TM TANTO, OUTRAS TO POUCO...

Antes que voc pense em outra coisa: estamos falando de acares associados
a protenas. Tipicamente, as proteoglicanas possuem inmeras cadeias
polissacardicas associadas a uma cadeia protica, o que d molcula uma
aparncia cabeluda (Figura 7.6). Entretanto, a decorina (uma proteoglicana
secretada por fibroblastos) uma exceo, pois apenas uma GAG se ancora
sua cadeia protica (Figura 7.8). Mesmo assim a decorina possui uma cadeia de
acares muito mais longa que a ribonuclease, esta sim uma glicoprotena tpica
(Figura 7.8). Voltando ao incio do pargrafo: o que voc pensou quando viu
aquele ttulo? Ns estvamos pensando em cabelos, viu?
Eixo protico
Cadeia de oligossacardeos
curta e ramificada
Polipeptdeo
GAG
Decorina
Ribonuclease
Figura 7.8: Esquema comparativo da molcula de decorina (A), com apenas

uma GAG e a ribonuclease (B) com uma cadeia de acares curta e ramificada.
FUNES DAS PROTEOGLICANAS

A importncia das proteoglicanas ultrapassa muito seu papel
estrutural de enchimento. Se assim no fosse, por que haveria to grande
diversidade entre elas? Entre as diversas funes que as proteoglicanas
podem desempenhar, podemos citar algumas.
1) Regulao da atividade de molculas sinalizadoras.
Proteoglicanas podem se ligar a vrias molculas e controlar a atividade de
protenas secretadas.
C E D E R J 115
A atividade de enzimas proteolticas (proteases) pode ser inibida

se elas se ligarem ou forem barradas pelas proteoglicanas, tendo assim
seu raio de ao limitado. O mesmo pode ocorrer com inibidores de
protease e fatores de crescimento, como as protenas da famlia do
TGF- (transforming growth factor ), que ao se ligar a proteoglicanas
da matriz tm sua atividade inibida.
2) Controle do trfego de clulas e molculas. Os gis formados
pelas proteoglicanas tm vrios tamanhos de poros e cargas, atuando
como peneiras moleculares capazes de filtrar molculas e clulas de acordo
com seu tamanho e carga. Na membrana basal das clulas do glomrulo
renal, a proteoglicana sulfato de heparana, tambm chamada perlecan,
filtra molculas que passam da corrente sangunea para a urina.
3) Co-receptores. Nem todas as proteoglicanas so sintetizadas e
liberadas para o meio extracelular, algumas so componentes integrais
da membrana plasmtica. As sindecanas so proteoglicanas integrais
encontradas em fibroblastos e clulas epiteliais. Nas superfcies celulares,
as sindecanas podem servir como receptores propriamente ditos ou
como co-receptores ligando-se a molculas (concentrando-as) e depois
apresentando-as para os seus respectivos receptores.
4) Interao com protenas fibrosas da matriz. As GAGs
e proteoglicanas podem interagir com protenas da matriz, como
o colgeno, formando estruturas altamente complexas, como
a membrana basal.
A Tabela 7.2 resume algumas caractersticas importantes das
proteoglicanas mais conhecidas.
Tabela 7.2: Algumas das proteoglicanas mais comuns.
Proteoglicana
Agrecan
Betaglicana
Decorina
Perlecan
Sindecana
116 C E D E R J
GAGs componentes
Sulfato de condroitina
Localizao
Funo
Suporte mecnico.
Cartilagem
+ sulfato de queratana
Forma grandes agregados

com hialuronas
Superfcie celular e
Liga-se ao fator de cresci-
+ sulfato de dermatana
matriz
mento TGF-
Sulfato de condroitina +
Distribuda em tecidos
Liga-se a fibras de
sulfato de dermatana
conjuntivos
colgeno do tipo 1 e TGF-
Sulfato de condroitina +
sulfato de heparana
Sulfato de heparana
Lmina basal
Epitlios
Funo estrutural e de
filtrao na lmina basal
Adeso celular. Liga-se a
fatores de crescimento
MDULO 2
AULA
AS GAG s PODEM FORMAR ESTRUTURAS COMPLEXAS

GAGs, como a hialurona, e proteoglicanas podem formar
estruturas extremamente complexas, visveis ao microscpio eletrnico
(Figura 7.9). Alm disso, as GAGs tambm podem se associar s
protenas fibrosas da matriz, como o colgeno. Podemos ento concluir
que a composio e a organizao da matriz extracelular so bastante
sofisticadas, bem diferentes de uma massa amorfa.
Esse conceito ser ainda mais enfatizado depois que voc conhecer
as protenas da matriz, assunto da prxima aula.
Agregado de agrecana
Eixo protico
Hialurona
Protenas de ligao
Figura 7.9: (a) Fotografado ao microscpio eletrnico, um agregado de agrecana pode chegar a medir vrios micrmetros; (b) cada uma dessas centopias ,
na verdade, formada por vrias proteoglicanas ligadas a um eixo de hialurona.
Podemos comparar essa organizao da folha composta que aparece em (c);
(Foto: Cortesia de Lawrence Rosenberg para Molecular Biology of the Cell 3a ed.)
C E D E R J 117
RESUMO
A matriz extracelular auxilia na ligao das clulas para formao dos tecidos
e serve como reservatrio para muitos hormnios, controlando o crescimento e
a diferenciao celular.
A lmina basal uma fina matriz extracelular que serve como suporte para
clulas epiteliais, endoteliais e musculares.
Glicosaminoglicanas (GAGs) so componentes da matriz extracelular que
conferem resistncia compresso pelo fato de serem carregadas negativamente
e, conseqentemente, seqestram ctions que acabam atraindo grande
quantidade de gua.
A maioria das GAGs, com exceo das hialuronas, encontra-se conjugada com
protenas, formando as proteoglicanas.
As proteoglicanas possuem vrias funes importantes para as clulas,
como: regular a atividade de molculas sinalizadoras; controlar o trfego
de clulas e molculas; atuar como co-receptores e interagir com protenas
fibrosas da matriz.
EXERCCIOS
1. Que tipos de tecido se caracterizam por ter matriz extracelular?
2. Onde a matriz produzida?
3. Quais so os principais componentes da matriz extracelular?
4. Diferencie glicosaminoglicanas de proteoglicanas.
5. Diferencie proteoglicanas de glicoprotenas.
6. Quais as principais propriedades das GAGs e das proteoglicanas que
tornam a matriz resistente compresso?
7. Alm da funo estrutural, que outros papis desempenham as
proteoglicanas e GAGs?
118 C E D E R J
objetivos
AULA
Matriz extracelular:
as protenas da matriz

Enumerar as principais protenas
da matriz extracelular.
Associar a estrutura das protenas de matriz
s funes que desempenham.
Analisar a sntese de colgeno.
Associar deficincias na sntese de
componentes da matriz a doenas.
Pr-requisitos
Aulas 7, 8, 16 e 17
de Biologia Celular I
e Aulas 6 e 7 de
Biologia Celular II.
BIOLOGIA CELULAR II | Matriz extracelular: as protenas da matriz
INTRODUO
Vimos na aula anterior que, longe de ser uma gelatina de preenchimento, a

matriz extracelular uma estrutura complexa, capaz de conferir resistncia
e elasticidade aos tecidos. Enquanto o gel formado pela hidratao das
GAGs e das proteoglicanas extremamente resistente compresso, as
protenas fibrosas de sua composio so responsveis pela elasticidade
e resistncia tenso da matriz. As principais protenas fibrosas da matriz
so os colgenos e a elastina.
OS COLGENOS
No, no estranhe o plural, os colgenos so uma grande famlia
de protenas fibrosas presente em todos os animais pluricelulares. Os
colgenos so as protenas mais abundantes nos mamferos (~25% da
massa protica) e so secretados tanto pelas clulas do tecido conjuntivo
como outros tipos celulares. Tecidos como a pele e os ossos so ricos
em colgeno, e a principal funo dessas protenas contribuir para a
integridade estrutural da matriz e manter as clulas ancoradas a ela.
A molcula de colgeno formada por uma tripla hlice de cadeias
polipeptdicas enroladas umas nas outras, constituindo uma estrutura
bastante tpica (Figura 8.1). Essa tripla hlice se forma espontaneamente
porque as cadeias so ricas nos aminocidos prolina e glicina. Enquanto
a estrutura em anel da prolina estabiliza a tripla hlice, a glicina, por ser o
menor aminocido, permite que as trs cadeias de colgeno se aproximem,
formando a estrutura final do colgeno.
Figura 8.1: (a) Cada uma das trs cadeias
Cadeia peptdica
alfa de colgeno possui molculas de glicina
alfa de colgeno
regularmente distribudas. A conformao

dessas cadeias alfa favorece o encaixe,
Tripla hlice de cadeias
de modo a formar a tripla hlice (b)

na qual as pequenas molculas de
glicina ficam voltadas para dentro.
alfa de colgeno (molcula de colgeno)
Cerca de 25 diferentes tipos de colgenos j foram identificados e,

de acordo com suas propriedades, foram sendo agrupados. Os principais
colgenos so os colgenos fibrilares, que incluem os tipos I, II, III, V e XI.
O tipo I , de longe, o mais comum e o mais importante, predominando
na pele e nos ossos. Os colgenos fibrilares formam cordes, como
ilustrado na Figura 8.2, chamados fibrilas colgenas.
120 C E D E R J
MDULO 2
8
Fibrila colgena
1,5nm
Molcula de colgeno
Figura 8.2: As molculas de colgeno se agrupam em feixes

paralelos de 10 a 300nm de espessura, as ibrilas colgenas.
Outro grupo de colgenos o dos colgenos associados a fibrilas.

Correspondem aos colgenos dos tipos IX e XII que se associam ao
colgeno fibrilar formando estruturas maiores, as fibras colgenas,
observadas na Figura 8.3, ou associando uma fibrila de colgeno com
outras protenas da matriz extracelular (GAGs, proteoglicanas etc.).
10 a 300nm Fibrila colgena
0,5 a 3m Fibrila colgena
b
Figura 8.3: (a) Fibras de colgeno so
formadas por feixes de fibrilas colgenas,
vistas em (b) em corte longitudinal e transversal em torno de um fibroblasto. (Foto:
Molecular Biology of the Cell, 3rd ed.)
A associao entre os colgenos fibrilares do

tipo II e os colgenos associados a fibrilas do tipo
IX est esquematizada na Figura 8.4.
Figura 8.4: Os colgenos associados a

fibrilas se dispem sobre as mesmas,
Tipo IX
Tipo II
formando, neste exemplo, ligaes cruzadas.
C E D E R J 121
AULA
10-300nm
Assim, no tendo-de-aquiles as fibrilas colgenas se dispem

paralelamente umas s outras, enquanto na pele elas se entrelaam em vrias
direes. Por conta disso, o tendo possui enorme resistncia trao no
sentido longitudinal, enquanto a pele resistente a tenses de modo geral.
Nos ossos e na crnea, as fibrilas formam camadas; como num compensado
de madeira, cada camada se dispe transversalmente anterior, dando
grande resistncia e pouca elasticidade ao tecido (Figura 8.5).
Figura 8.5: O colgeno associado s fibrilas pode formar feixes paralelos, como em
(a), ou camadas ortogonalmente alternadas, como em (b), ou feixes cruzados

resistentes a traes em vrios sentidos (c).
!
RECORDAR E COMPARAR
Lembra da aula sobre microfilamentos em Biologia Celular I? Pois , os filamentos de
actina podem formar feixes paralelos muito resistentes (as fibras de tenso) ou redes
entrecruzadas, de acordo com as protenas que os conectam (respectivamente alfa-actinina
e filamina). Embora as fibrilas de colgeno estejam do lado de fora da clula e sejam
muito maiores (e mais fortes) que os filamentos de actina, o princpio de formar feixes
e aumentar a resistncia o mesmo. Observe a Figura 8.4 e compare com as da Aula 24.
Nas lminas basais, estudadas mais adiante, o colgeno formador

de rede (tipo IV) forma um tapete de filamentos entrecruzados.
Por ltimo, as fibrilas ancoradouras colgenos que auxiliam na
conexo das clulas do epitlio ou endotlio ao tecido conjuntivo que
se localiza logo abaixo. Essas fibrilas so abundantes na pele.
122 C E D E R J
MDULO 2
A Tabela 8.1 sintetiza as principais caractersticas dos
AULA
colgenos mais conhecidos. Mutaes que afetem qualquer um

dos tipos de colgeno causam graves malformaes em seus
portadores (veja o boxe).
Tabela 8.1: Tipos de colgenos, suas propriedades e localizao.
Classe
Formadores de
fibrilas
Associados
a fibrilas
Formadores
de rede
Tipo
Forma polimerizada
Distribuio tecidual
Fibrila
Ossos, pele, tendes, ligamentos, crnea,

outros rgos internos
II
Fibrila
Cartilagem, humor vtreo do olho, disco

intervertebral
III
Fibrila
Pele, vasos sangneos, rgos internos
Fibrila com tipo I
Mesma que para tipo I
XI
Fibrila com tipo II
Mesma que para tipo II
IX
Associao lateral
Cartilagens
XII
Associao lateral
Tendes, ligamentos, outros tecidos
IV
Rede em forma de camada
Lmina basal
VII
Fibrilas ancoradouras
Abaixo do epitlio escamoso estratificado
POR QUE EXISTEM TANTOS TIPOS DE COLGENOS?

que cada tipo realiza uma funo especfica. Os colgenos
formadores de fibrilas so o tipo bsico de colgeno; os associados
s fibrilas servem para juntar vrias delas e montar feixes altamente
resistentes, e os formadores de rede esto localizados na lmina basal,
um verdadeiro assoalho para as clulas epiteliais e endoteliais. Alguns
tipos celulares, moncitos e neutrfilos, especificamente, saem dos
vasos sanguneos e atravessam a lmina basal das clulas endoteliais
(clulas que formam o revestimento interno dos vasos) para combater
uma infeco em determinado tecido. Para poderem passar pela rede de
colgeno, essas clulas secretam localmente enzimas como a colagenase.
Assim, a rede de colgeno se abre e permite a passagem dessas clulas.
Da mesma forma, quando esses moncitos ou neutrfilos chegam ao
tecido, necessitam atravessar a lmina basal das clulas epiteliais.
C E D E R J 123
AS DOENAS DO COLGENO
Mutaes que afetam a sntese de colgeno, ou outros componentes da matriz,
resultam em vrios tipos de anomalias, em geral bastante severas. Dentre as mais
importantes, podemos citar:
osteognese imperfeita: causada por mutao do gene para colgeno do
tipo I. um trao dominante, pois, apesar de um dos alelos ser normal, o produto do
gene defeituoso impede a correta formao das fibras colgenas;
nanismo: algumas formas so causadas por deficincias do colgeno do tipo II;
sndrome do homem-elstico: causada por mutaes do gene do colgeno
tipo I. O indivduo afetado tem juntas, tendes e pele hiperextensveis. Alguns se exibem
em feiras de curiosidades e circos;
sndrome de Ehlers-Danlos: causada por mutaes do colgeno tipo III.
Os pacientes correm o risco de sofrer rompimento das artrias intestinais;
sndrome de Alport: a maioria dos casos envolve mutaes para o gene de uma
das cadeias do colgeno do tipo IV localizado no cromossomo X. Assim, a herana tem
o padro tpico da herana ligada ao X. Outros casos dessa sndrome tm origem em
genes autossmicos que codificam outras cadeias do colgeno IV. Os pacientes geralmente
apresentam leses nos glomrulos renais, o que causa a eliminao de sangue na urina.
Curiosamente, muitos deles tambm perdem a audio;
hrnias de disco: algumas famlias possuem mutaes no gene para cadeia alfa
do colgeno IX, um dos componentes da matriz extracelular dos discos intervertebrais.
Esses indivduos tm grande tendncia a desenvolver hrnia de disco.
Entretanto, nem todas as anomalias ligadas ao colgeno tm origem gentica:
escorbuto: causado pela deficincia de vitamina C. A falta dessa vitamina
impede a hidroxilao da prolina para converso em hidroxiprolina, um dos aminocidos
fundamentais na cadeia de colgeno. O indivduo com escorbuto apresenta amolecimento
dos dentes, sangramento gengival e infeces bucais pelo enfraquecimento que a falta
de colgeno causa aos tecidos;
sndrome de Goodpasture: uma doena auto-imune em que o indivduo
desenvolve anticorpos contra suas prprias molculas de colgeno do tipo IV. Como esse
colgeno participa da adeso dos epitlios lmina basal, esta termina por ser lesada.
124 C E D E R J
MDULO 2
AULA
COMO OS COLGENOS SO SINTETIZADOS

E SECRETADOS?
As cadeias polipeptdicas que formam o colgeno so chamadas
cadeias pr- e so sintetizadas separadamente umas das outras no
retculo endoplasmtico rugoso. Cada cadeia pr- combina-se com
outras duas, formando uma molcula helicoidal chamada pr-colgeno.
As molculas de pr-colgeno possuem uma seqncia chamada prpeptdeo, que impede que as fibrilas se formem ainda dentro da clula,
o que seria desastroso. O pr-colgeno transportado em vesculas
secretoras para o meio extracelular, onde os pr-peptdeos sero clivados.
O colgeno uma protena hidrofbica, o que facilita a sua agregao
espontnea, dando origem a fibrilas e fibras colgenas.
Parece complicado? Realmente a sntese de colgeno um
pouco complexa e utiliza uma srie de enzimas, mas no nada muito
diferente do que voc aprendeu nas aulas de retculo endoplasmtico e
complexo de Golgi, de Biologia Celular I. O processo est todo resumido
e esquematizado na Figura 8.6.
1
2
COOH
0.5-3m
10-300
nm
Figura 8.6: O colgeno formado por trs cadeias polipeptdicas que se entrelaam e formam uma
estrutura em tripla hlice no interior do RE. Contudo, a clula no forma essa estrutura de uma vez,
ela sintetiza por partes: (1) a clula sintetiza cada cadeia separadamente no RE; (2) cada cadeia recebe
hidroxilas e resduos de oligossacardeos; (3) ainda no RE essas cadeias se entrelaam, formando a tripla hlice
de pr-colgenos; (4) esse pr-colgeno transportado em vesculas secretoras para o complexo de Golgi;
(5) os pr-colgenos so liberados para o meio extracelular, tendo os pr-peptdeos clivados; (6) passando a
se associar uns aos outros, formando as fibrilas de colgenos, que, por sua vez (7), agregam-se e formam as
fibras de colgenos. O empacotamento das molculas apresenta estriaes a intervalos regulares de 67nm.
C E D E R J 125
ELASTINA FIBRAS ELSTICAS

Alm das GAGs e proteoglicanas, que retm grande volume de
gua e conferem matriz resistncia compresso, e dos colgenos,
capazes de suportar tenses, a matriz de alguns tipos de tecido ainda conta
com uma protena que lhe proporciona elasticidade: a elastina. Graas
elastina, e s fibras elsticas formadas por ela, os tecidos readquirem
sua forma aps uma deformao (lembra daquela tia que lhe puxava as
bochechas? Se voc no tivesse fibras elsticas sob a pele, hoje estaria se
parecendo com um buldogue...). Vrios tecidos de vertebrados possuem
fibras elsticas, o que confere resistncia e elasticidade aos rgos.
A parede da aorta, em particular, totalmente recoberta por elastina.
O principal componente dessas fibras a elastina, que confere
elasticidade, de modo que elas possam voltar forma original aps
uma distenso temporria.
A elastina uma protena hidrofbica (no gosta da gua; semelhante
ao leo, que no se mistura com a gua) que sintetizada e secretada
pelas clulas para o meio extracelular, onde agrupam-se em fibras elsticas
prximas membrana plasmtica. A elastina, assim como o colgeno,
tambm sintetizada numa forma precursora: a tropoelastina.
De que forma a elastina consegue mudar sua conformao, ou seja,
distender e depois retornar ao estado original? As molculas de elastina
Fibra elstica
so unidas por ligaes covalentes, produzindo

uma rede entrecruzada. As molculas de elastina
so encaracoladas, de modo que cada molcula
de elastina pode expandir-se e contrair-se
independentemente das vizinhas, como uma
mola, de modo que toda estrutura pode ser
distendida e retornar forma original, como
Extenso
Relaxamento
Molcula de elastina
uma fita elstica (Figura 8.7).

Ligao covalente
Figura 8.7: As fibras elsticas se encolhem

e se distendem individualmente, dando
grande elasticidade ao tecido.
126 C E D E R J
MDULO 2
As fibras elsticas no so compostas somente por elastina.
AULA
O cerne de elastina coberto por uma bainha de microfibrilas. As

microfibrilas so compostas por glicoprotenas diferentes, incluindo a
fibrilina. Mutaes na fibrilina acarretam a sndrome de Marfan, que
relativamente comum em humanos e afeta o tecido conjuntivo. Nos
casos mais graves a aorta chega a romper-se, pois a parede da aorta
cheia de elastina. As microfibrilas parecem ser importantes na montagem
das fibras elsticas.
FIBRONECTINA PROTENA ADESIVA

Alm dos colgenos e das fibras elsticas, a matriz extracelular
possui ainda outras protenas que atuam na organizao e na adeso
entre as clulas e a matriz. Dentre essas, uma das mais importantes e,
por isso mesmo, mais estudadas e conhecidas, a fibronectina.
A fibronectina encontrada em todos os vertebrados e uma
glicoprotena dimrica (Figura 8.8). Existem duas formas fundamentais de
fibronectina: uma solvel, presente no plasma e outros fluidos corporais;
outra insolvel, encontrada nas matrizes dos tecidos conjuntivos.
Auto associao
Ligao de
colgeno
Ligao a
clulas
Figura 8.8: A molcula de fibronectina formada por

duas subunidades (monmeros) ligadas por pontes
dissulfeto. Ao longo da molcula, dispem-se vrios
domnios de reconhecimento de outras molculas.
C E D E R J 127
Conforme assinalado na Figura 8.8, a fibronectina possui stios

que reconhecem e se ligam a diversas molculas da matriz e da superfcie
celular. Um dos primeiros domnios a ser identificado foi o que reconhece
e se liga seqncia de aminocidos RGD (arginina-glicina-asparagina).
Essa seqncia reconhecida pelas integrinas, protenas transmembrana
que voc conheceu na Aula 6. Cada tipo de integrina reconhece diferentes
molculas da matriz, o que indica que a seqncia RGD no o nico
fator de adeso entre clulas e a matriz. Alm disso, a seqncia RGD
no exclusiva da fibronectina.
A fibronectina tambm possui stios de reconhecimento para
colgeno e para outras fibronectinas, de modo que tambm pode formar
fibrilas. Essas fibrilas parecem ter um papel fundamental na progresso
das etapas do ciclo celular (Aula 1).
A FIBRONECTINA E A MIGRAO CELULAR

A fibronectina muito importante no desenvolvimento animal.
Experimentos em que um gene inativado (e, portanto, no se
expressa) demonstram que a ausncia de fibronectina em embries
de camundongos resulta em tantos defeitos morfolgicos anomalias
na formao da notocorda, corao, vasos, tubo neural que os
embries morrem precocemente.
LMINA BASAL
Na Aula 7, comentamos que existem dois tipos bsicos de
matriz extracelular: a do tecido conjuntivo e a lmina, ou membrana,
basal. At agora nos detivemos nos aspectos bsicos da MEC do tecido
conjuntivo e pouco comentamos sobre a membrana basal.
A membrana basal um tipo de matriz extracelular especializada.
Fina e flexvel, ela embasa todos os epitlios, formando uma interface
entre estes e o tecido conjuntivo propriamente dito (reveja a Figura 7.1).
Clulas individualizadas (musculares, adipcitos, clulas de Schwann)
tambm so envoltas por uma membrana basal (Figura 8.9).
128 C E D E R J
MDULO 2
O papel das lminas basais no se limita ao revestimento da
AULA
superfcie basal dos epitlios e dos outros tipos celulares mencionados.

A lmina basal determina a polaridade celular, influencia o metabolismo
celular e organiza protenas em membranas plasmticas adjacentes,
atuando na migrao e diferenciao celular.
Matriz
Lmina basal
Msculo
Figura 8.9: Clulas musculares isoladas so envoltas por membrana basal.
Membrana da clula
J os epitlios repousam sempre sobre

um tapete formado pela lmina basal.
Epitlio
Tecido conjuntivo
Lmina basal
A LMINA BASAL E A FILTRAO DO SANGUE

comum nos referirmos aos rins como os rgos que filtram o sangue, retirando
dele molculas que sero eliminadas atravs da urina. Essa filtrao ocorre em estruturas
chamadas glomrulos renais, nos quais verdadeiros novelos de capilares e o epitlio do
glomrulo ficam em ntimo contato, separados apenas pela lmina basal (Figura 8.10).
As clulas do epitlio renal, assim como a desses vasos, so relativamente espaadas, e
justo pelos espaos entre elas que o sangue filtrado. At a, talvez no tenhamos contado
nenhuma novidade, mas o que apostamos que voc no imaginava que essa lmina basal
que atua como filtro, selecionando as molculas que passaro para a urina e as que
continuaro no sangue.
Sangue
Capilares
Clula endotelial
Clula epitelial
Epitlio
a
Lmina basal
Urina
Figura 8.10: No glomrulo renal (a), a membrana basal compartilhada pelo endotlio do vaso
capilar e pelo epitlio glomerular (b).
C E D E R J 129
PROTENAS DA LMINA BASAL: LAMININA E COLGENO

DO TIPO IV
A membrana basal secretada pelas clulas que ela envolve e, por
sua vez, se ancora matriz extracelular do tecido conjuntivo por fibrilas
de colgeno do tipo VII. Entretanto, os colgenos caractersticos da
lmina basal so os do tipo IV, que no formam fibrilas e sim uma lmina,
reticulada e flexvel. Alm do colgeno IV, compem a lmina basal a
proteoglicana perlecan e as glicoprotenas laminina e nidognio.
A laminina uma protena composta por trs longas cadeias
peptdicas denominadas alfa, beta e gama (Figura 8.11). Juntas, essas
cadeias do protena a forma de uma cruz.
Cadeia gama
Cadeia alfa
Figura 8.11: A molcula de laminina

formada por trs polipeptdeos que se
associam, formando uma cruz. Vrios
domnios globulares se dispem nas
Domnio globulares
Cadeia beta
extremidades livres das cadeias.
As lamininas podem conectar-se entre si atravs dos braos da

molcula. Alm disso, o perlecan e o nidognio se ligam tanto laminina
quanto ao colgeno do tipo IV, estabelecendo pontes entre eles. Receptores
na membrana das clulas, a maioria pertencente famlia das integrinas,
reconhecem e se ligam ao colgeno do tipo IV e laminina, promovendo a
adeso das clulas lmina basal. Voc pode ter uma idia de como essas
molculas se dispem na membrana basal observando a Figura 8.12.
Figura 8.12: Modelo da lmina

basal. No esto representadas a
membrana plasmtica e a associao
Nidognio
Perlecan
Laminina
Colgeno IV
130 C E D E R J
de
protenas
integrais
desta a componentes da lmina.
MDULO 2
AULA
A MEC INFLUENCIA A FORMA CELULAR

Quando fibroblastos so cultivados sobre um gel de
colgeno, em poucos dias eles so capazes de orientar as molculas
de colgeno em fibras sobre as quais eles mesmos se orientaro
(Figura 8.13).
1mm
Figura 8.13: Dois fibroblastos de embrio de pinto migram um em direo
ao outro sobre um feixe de fibras colgenas organizado por eles mesmos.
(Foto: D. Stopak & A. AK. Haris, Dev. Biol. 90:383-398, 1082 Academic Press)
Em contrapartida, a matriz extracelular tambm capaz de

influenciar a organizao do citoesqueleto (da a forma) celular.
Observa-se que clulas cancerosas produzem menos fibronectina que
clulas normais em cultura, sendo tambm menos aderentes (da a maior
facilidade de se destacarem e darem origem aos tumores secundrios, as
metstases). Em alguns casos, quando se adiciona fibronectina a essas
culturas, as clulas tumorais se comportam como se fossem normais,
aderindo e formando contatos focais com o substrato.
Assim como o citoesqueleto pode exercer foras que orientam a
matriz extracelular secretada, as molculas da matriz podem, por sua vez,
propagar a ordenao entre clulas, como ocorre, por exemplo, nos tendes
(Figura 8.14). Nesse caso, as integrinas atuam como protenas adaptadoras
desse ordenamento entre as clulas e a matriz em torno delas.
C E D E R J 131
e 3 agora
Orientao do citoesqueleto
A matriz orientada alcana
As clulas 2
da clula 1 orienta
as clulas 2 e 3
secretam uma matriz
a disposio das molculas
o citoesqueleto dessas clulas.
e orienta
orientada em sua vizinhana;
de matriz secretadas
assim, a organizao de seu
em torno dela.
citoesqueleto propagada s
clulas vizinhas ( 4 e 5 ).
Figura 8.14: O esquema ilustra como a matriz pode propagar a orientao de uma
clula para as demais a fim de formar uma estrutura orientada, como os tendes.
CONCLUSO
A cada dia novas descobertas so feitas a respeito da participao da matriz extracelular em processos biolgicos. Essas
molculas atuam tanto na sntese como na degradao de estruturas
(como a absoro da cauda do girino) e, da mesma forma que so
secretadas as protenas da matriz, nessas ocasies, os fibroblastos
produzem enzimas, como a colagenase, que degradam a matriz e
conferem enorme plasticidade aos tecidos conjuntivos. Graas a
essas propriedades, possvel o realinhamento da arcada dentria,
a regenerao de fraturas, a regresso do tamanho do tero aps o
parto e muitas outras, pequenos milagres sem os quais nossas vidas
seriam, certamente, muito mais limitadas.
132 C E D E R J
MDULO 2
8
AULA
RESUMO
Alm das proteoglicanas e glicosaminoglicanas, a matriz extracelular possui
protenas fibrosas, os colgenos e a elastina; e protenas adesivas, a fibronectina
e a laminina, esta ltima na lmina basal.
O colgeno formado por trs hlices de um polipeptdeo rico em
prolina e glicina.
Existem diversas formas de colgeno, que podem ser classificadas em: fibrilares,
associados a fibrilas e formadores de rede.
O colgeno sintetizado pelas clulas e secretado na forma de pr-colgeno.
Depois de clivada a extremidade da cadeia, formam-se espontaneamente
as fibrilas.
A elastina outra protena fibrilar que forma redes que podem se distender
pelo maior ou menor enrolamento das molculas de elastina.
O colgeno confere ao tecido resistncia tenso e a elastina confere
ao tecido elasticidade, isto , aps sofrer a tenso ele pode se distender
e voltar forma original.
A fibronectina uma protena dimrica que possui stios de reconhecimento
para vrias molculas: colgeno, integrinas, outras fibronectinas, heparina.
A lmina basal um tipo especial de matriz, secretada pelas clulas que
sobre ela se apiam. As protenas mais caractersticas da membrana basal so
o colgeno tipo IV, formador de redes, a laminina, protena trimrica que se
liga a integrinas, e o colgeno do tipo VII, que faz pontes entre a lmina basal
e a matriz abaixo dela.
A lmina basal determina a polaridade celular, influencia o metabolismo
celular e organiza protenas em membranas plasmticas adjacentes, atuando na
migrao e diferenciao celular.
C E D E R J 133
EXERCCIOS
1. Quais as principais protenas encontradas na matriz extracelular?
2. Qual a principal caracterstica estrutural dos colgenos?
3. Como se dividem os colgenos?
4. Por que as fibrilas colgenas no se associam ainda dentro da clula?
5. Como a molcula de elastina? Como so suas redes?
6. Qual o papel do colgeno e da elastina?
7. Qual a importncia da fibronectina?
8. O que a lmina ou membrana basal?
9. Alm do papel estrutural, qual a importncia da lmina basal?
134 C E D E R J
objetivos
AULA
Parede celular

Estabelecer analogia entre a matriz extracelular e a
parede celular de clulas eucariticas.
Enumerar os componentes da parede celular.
Descrever o processo de sntese de celulose.
Relacionar o crescimento e a forma celular
parede celular.
Pr-requisito
Aulas 5, 6, 7 e 8.
Biologia Celular II | Parede celular
INTRODUO
As clulas, com sua membrana fluida e enormes quantidades de gua

citoplasmtica, no so, em princpio, o melhor tipo de tijolo que se
poderia desejar para construir um organismo pluricelular. Entretanto, so
essas pequenas e frgeis unidades que constituem seres grandes e complexos
como uma baleia e um coqueiro. No caso dos animais, vimos que as clulas
se integram e constituem tecidos seja por meio de junes celulares, muitas
delas com participao de filamentos do citoesqueleto, seja pela secreo
de molculas que constituem a matriz extracelular. Como animais e plantas
evoluram independentemente, as solues encontradas por uns e outros
para manter as clulas de um determinado tecido unidas e funcionalmente
coordenadas podem ser bastante diferentes.
Nas Aulas 5 e 6, analisamos a importncia das junes intercelulares
para a adeso, ocluso e comunicao entre as clulas dos tecidos animais.
Nos vegetais, os plasmodesmata so as nicas junes encontradas,
j que a resistncia s tenses e a adeso entre as clulas feita atravs da
parede celular, que estudaremos agora. Ao longo do processo evolutivo,
as presses sobre animais e vegetais foram de natureza diversa: os animais
desenvolveram um sistema nervoso e pelo menos a maioria deles movese em resposta a estmulos ambientais (perigo, busca por alimento etc).
J as plantas, graas aos cloroplastos, resolveram o problema de obteno
de nutrientes sem necessidade de se locomover. Os tecidos vegetais, mais
rgidos que o das clulas animais, formam-se e se mantm coesos atravs de
um tipo especfico de matriz extracelular: a parede celular. Se voc duvida
do sucesso dessa estratgia, lembre-se das sequias, rvores gigantescas,
maiores que as maiores baleias e de existncia mais longa que qualquer
ser vivo sobre o planeta.
BIOGNESE DA PAREDE CELULAR

A parede celular , em geral, mais espessa e mais rgida que a matriz
produzida pelas clulas animais. A resistncia dessa estrutura permitiu que o
tamanho mdio das clulas vegetais seja bem superior ao das clulas animais,
embora essa mesma rigidez impea o seu deslocamento.
Novas clulas vegetais surgem a partir de mitoses que ocorrem
em regies especficas da planta, os meristemas. Vimos na Aula 1 que
a parede celular impede que as clulas-filhas da planta se separem por
estrangulamento; assim, forma-se entre elas a parede primria. A parede
primria fina e extensvel, de modo que as clulas-filhas possam crescer.
136 C E D E R J
MDULO 2
Uma vez completado o crescimento e definida a forma da clula,
AULA
inicia-se a formao da parede secundria. Esta produzida pela

deposio de novas camadas por baixo da parede primria. A parede
secundria comumente impregnada por molculas que aumentam
sua rigidez, e, conseqentemente, o espao disponvel para a clula
propriamente dita diminui (Figura 9.1).
Figura 9.1: Na diviso de uma clula

vegetal 1 , forma-se nova parede primria
entre as clulas-filhas 2 . A parede primria
no impede o crescimento das clulasfilhas 3 . Uma vez completada a etapa de
crescimento, camadas de paredes secundrias
se dispem sob a parede primria, diminuindo

o espao ocupado pela clula 4 .
CARACTERSTICAS FUNCIONAIS DA PAREDE CELULAR

Assim como a matriz extracelular, a parede celular formada por
componentes fibrilares que conferem planta resistncia tanto tenso
quanto compresso; entretanto, diferentemente dessa, as molculas
formadoras da parede celular so basicamente carboidratos, sendo a
celulose o mais importante deles. Entende-se que seja assim, uma vez que,
atravs da fotossntese, os vegetais dispem de uma fonte virtualmente
inesgotvel de carbono, oxignio e hidrognio, enquanto a sntese de
protenas requer tambm nitrognio, que as plantas obtm em muito
menor quantidade atravs de uma relao simbitica com bactrias
fixadoras de N2.
C E D E R J 137
Alm do papel estrutural, a parede celular tambm confere

proteo individual a cada uma das clulas envoltas por ela. No processo
de diferenciao, as clulas vegetais assumem diferentes formas e as
paredes celulares incorporam molculas especficas. Essas caractersticas
permitem classificao e identificao dos diferentes tecidos de um vegetal
(Figura 9.2). A impregnao de molculas como a lignina confere
parede celular a dureza e a impermeabilidade caractersticas dos vasos
condutores de seiva bruta. Tambm a parede celular que permite, ou
no, a formao de canais que ligam as clulas, como os plasmodesmata
entre as clulas que constituem o floema.
Plasmodesma
Clula companheira
Xilena
a
Feixe vascular
b
Floema
c
Figura 9.2: Os tecidos vegetais se diferenciam pela forma, tamanho, espessura e composio da parede
celular. No exemplo (b), vemos um feixe vascular e em torno dele clulas do parnquima. Nos detalhes (a)
e (c), clulas do xilema, com parede espessa reforada por anis de lignina, formando tubos ocos por onde
circula a seiva bruta. J as clulas do floema permanecem vivas e se comunicam com as vizinhas pelos plasmodesmata e tambm com as clulas companheiras. Nesse caso, as paredes celulares so mais delgadas.
ESTAVA ERRADO, MAS DEU CERTO!

As lminas de cortia observadas por Robert Hooke
no sculo XVII nada mais eram do que paredes
celulares limitando compartimentos onde as
clulas j haviam morrido. Veja voc, ele chamou os
compartimentos de clulas, sem saber que a clula
mesmo no estava l! Essa mesma figura, tirada do
livro Micrographia, escrito e desenhado por Hooke,
ilustrou a Aula 1 de Biologia Celular I, lembra?
138 C E D E R J
MDULO 2
AULA
ESTRUTURA E COMPOSIO DA PARECE CELULAR

PRIMRIA
Nos vegetais superiores, as fibras de celulose respondem pelo
suporte tenso, enquanto a pectina forma uma matriz hidratada
resistente compresso.
A celulose (Figura 9.3) um polissacardeo formado
por
molculas de glicose ligadas pelo carbono 1 ao carbono 4 da
Classe
glicose vizinha. Por isso diz-se que a celulose um polmero 1-4 de glicose.
A celulose, no difcil imaginar por qu, a molcula mais abundante
na superfcie da Terra. As fibrilas de celulose se agregam entre si por
pontes de hidrognio, formando microfibrilas de celulose. A resistncia
dessas microfibrilas comparvel do ao!
Figura 9.3: Estrutura da molcula

de celulose. A ligao 1-4 produz longas molculas lineares.
Na parede primria, essas microfibrilas se dispem em camadas

com diversas orientaes. Alm das pontes de hidrognio, glicanas
que se ligam superfcie de cada microfibrila estabelecem ligaes
cruzadas entre elas.
O espao entre as fibrilas de celulose preenchido pela
pectina, uma molcula rica em cido galacturnico (parecido com as
GAGs, no ?). Da mesma forma que as GAGs do tecido conjuntivo,
a pectina negativamente carregada, atraindo, assim, muitos ctions
e, conseqentemente, gua. Alm disso, a pectina o principal componente
da lamela mdia, que gruda duas clulas adjacentes (Figura 9.4).
Figura 9.4 : Microscopia eletrnica de clulas

de meristemticas mostrando as paredes
celulares e a lamela mdia (seta) entre duas
clulas vizinhas. Foto: Raul. D. Machado
C E D E R J 139
Na Figura 9.5, se encontram esquematizados os principais

componentes da parede celular primria. Compare este esquema ao da
Figura 8.12 e veja como as duas estruturas so anlogas.
Lamela mdia
Pectina
Parede celular
Microfibrila de
primria
celulose
Membrana
plasmtica
Glicana
50nm
Figura 9.5: Modelo da parede celular primria mostrando seus principais componentes:
camadas de fibrilas de celulose ligadas entre si por glicanas e uma rede de molculas
de pectina. Enquanto as microfibrilas de celulose suportam foras de tenso, a pectina responde pela resistncia compresso.
A lamela mdia formada principalmente por pectina.
!
D UMA PARADINHA
Na presena de ons Ca++, a pectina forma um gel. Essa propriedade
utilizada na confeco de gelias. Aproveite a paradinha para
ir cozinha e conferir o rtulo daquela gelia que voc comprou
(e, talvez, fazer um lanchinho com ela!).
Nas paredes secundrias, a deposio de celulose ocorre em

orientaes alternadas (Figura 9.6). Dessa forma, a planta adquire
grande resistncia ao rompimento.
140 C E D E R J
(a) e de transmisso (b)

da parede celular de
uma alga. As fibras de
celulose de cada camada se dispem ortogonalmente umas em
relao s seguintes.
Fotos: Mrcia Attias
Alm da celulose, das glicanas e da pectina, outras molculas se

incorporam parede celular conforme a clula se diferencia. A lignina
um composto fenlico que confere grande dureza, sendo por isso mesmo
caracterstica do lenho das rvores. Embora no sejam majoritrias,
as protenas correspondem a cerca de 5% das molculas da parede e
so principalmente enzimas envolvidas com o crescimento e modelagem
desta. Entretanto, algumas protenas parecem ser produzidas em resposta
invaso de agentes patognicos, com o objetivo de proteger a planta.
FORMA E CRESCIMENTO
O crescimento de uma clula depende de dois fatores: expanso
decorrente da presso de turgor e remodelao da parede celular.
Como observado em todas as clulas (Aulas 10 a 12 de Biologia
Celular I), o meio intracelular hipertnico em relao ao meio extracelular;
assim, as clulas esto constantemente absorvendo gua por osmose.
O aumento do volume celular leva a uma presso hidrosttica, de modo que
a gua contida na clula empurra a parede celular. Isso chamado presso de
turgor e essencial tanto para que as clulas se expandam durante o crescimento
quanto para manter a rigidez natural (Figura 9.7).
Figura 9.7: A presso de turgor a

principal responsvel pela sustentao
das folhas (a). Sem o equilbrio proporcionado por ela, as folhas murcham,
como em (b). Fotos: Mrcia Attias
C E D E R J 141
MDULO 2
eletrnica de varredura
AULA
Figura 9.6: Microscopia
A direo que esse crescimento tomar determinada pela

disposio das microfibrilas de celulose (Figura 9.8). Assim, se as fibrilas
de celulose estiverem dispostas numa determinada orientao, impedindo
a expanso da clula naquele sentido, a clula se alongar no sentido
oposto. Bem bolado, n?
As molculas de celulose so sintetizadas em complexos enzimticos
existentes na prpria membrana celular, sendo ejetadas diretamente no
meio extracelular, onde se agregam espontaneamente em fibrilas, todas
elas com aproximadamente a mesma orientao. Cada nova lamela de
celulose forma-se sob a lamela mais antiga, que assim fica mais externa.
A orientao das lamelas mais recentes (mais prximas da membrana)
parece ter maior influncia sobre a direo do crescimento.
Figura 9.8: Como a orientao das microfibrilas

de celulose orienta o crescimento celular. Duas
clulas (a) e (b), inicialmente iguais, podem crescer
em direes diferentes de acordo com a disposio
de suas fibrilas de celulose da parede primria.
A pergunta lgica seria: T bem, as fibrilas de celulose orientam o

crescimento, mas o que orienta as fibrilas de celulose? Pois bem, sabe-se
que abaixo da membrana plasmtica dispem-se paralelamente uns aos
outros microtbulos, e as fibrilas de celulose acompanham a orientao
desses microtbulos. No se sabe bem como isso acontece, mas supe-se
que protenas que conectem os microtbulos membrana acabem por
delimitar um espao que seria a nica alternativa de deslocamento para
os complexos de celulose sintase, obrigando as molculas a assumir
uma nica orientao (Figura 9.9).
142 C E D E R J
MDULO 2
9
AULA
Fibras de celulose
Meio extracelular
Complexo celulose sintase
Citossol
Microtbulo ligado
membrana plasmtica
Figura 9.9: Modelo hipottico para explicar a influncia dos

microtbulos corticais na orientao das fibrilas de celulose.
CONCLUSO
Muitas analogias e comparaes so possveis entre a matriz
extracelular das clulas animais e a parede celular dos vegetais. Ambas so
estruturas relacionadas adeso entre clulas e sua estrutura resistente
compresso e tenso. Enquanto os animais podem se dar ao luxo
de sintetizar fibras proticas como o colgeno, as plantas contam com
uma matria-prima barata e abundante, a celulose. Em contrapartida, as
GAGs e a pectina possuem muitas caractersticas em comum. A parede
celular uma estrutura plstica e importante, servindo para orientar
o crescimento celular e apresentando, de acordo com molculas que a
ela se integram, diferentes graus de permeabilidade e resistncia.
C E D E R J 143
RESUMO
Os tecidos vegetais, mais rgidos que os das clulas animais, formam-se e
se mantm coesos atravs de um tipo especfico de matriz: a parede celular.
Ela formada por componentes fibrilares que conferem planta resistncia tanto
tenso quanto compresso.
Novas clulas vegetais surgem a partir de mitoses que ocorrem na regio dos
meristemas. Entre as clulas-filhas forma-se uma parede primria fina e extensvel,
permitindo o crescimento posterior das mesmas.
Completado o crescimento e definida a forma da clula, forma-se, pela
deposio de novas camadas por baixo da parede primria, a parede secundria;
conseqentemente, o espao disponvel para a clula propriamente dita
diminui. A parede secundria comumente impregnada por molculas que
aumentam sua rigidez.
As molculas formadoras da parede celular so basicamente carboidratos:
celulose, glicanas, pectina e lignina.
A celulose sintetizada em complexos de celulose sintase na membrana
plasmtica.
A disposio das fibrilas de celulose acompanha o sentido dos microtbulos
corticais.
EXERCCIOS
1. O que diferencia a parede primria da secundria?
2. A que estrutura so anlogas a parede celular e a lamela mdia,
respectivamente?
3. Quais os componentes fibrilares da parede celular?
4. Quais os componentes da parede celular que conferem resistncia tenso?
5. E compresso?
6. Como so sintetizadas as molculas de celulose?
7. O que orienta a deposio das fibrilas de celulose?
144 C E D E R J
objetivos
10
AULA
A clula nervosa

Estabelecer analogia
entre a forma e a funo dos neurnios.
Relacionar as atividades de sntese, transporte
e secreo transmisso nervosa.
Descrever as etapas de gerao e propagao
da despolarizao da membrana do neurnio.
Relacionar a polarizao e despolarizao do
neurnio bomba de Na+/K+ e aos canais inicos.
Pr-requisitos
Aulas de transporte atravs da membrana plasmtica,
de Biologia Celular I (7, 8, 9 e 10).
Aula de endocitose, de Biologia Celular I (20).
Aulas de citoesqueleto, de Biologia Celular I (21 a 24).
Aula de trfego de vesculas, de Biologia Celular I (25).
Biologia Celular II | A clula nervosa
INTRODUO
Normalmente, tanto os animais quanto os vegetais se originam a partir de uma

nica clula o zigoto , que se multiplica repetidamente, dando origem aos
diversos tipos celulares que se associam, de modo a constituir o organismo
complexo, como um p de couve ou um peixinho dourado.
As clulas de um organismo so de diferentes tipos porque em cada um deles
diferentes genes esto sendo expressos. Isso o resultado de quatro processos:
(1) proliferao celular (a partir do zigoto); (2) especializao, criando diferentes
tipos de clulas a partir de um tipo menos diferenciado; (3) interaes entre as
clulas, em que o comportamento de uma clula influencia o comportamento
das vizinhas; (4) movimentos celulares, levando estruturao dos tecidos.
Ao longo do processo evolutivo, as presses sobre animais e vegetais foram de
natureza diversa: os animais desenvolveram um sistema nervoso e, pelo menos
a maioria deles, move-se em resposta a estmulos ambientais (perigo, busca por
alimento etc.). Na verdade, h uma perfeita correlao entre a complexidade
do sistema nervoso e a posio na escala evolutiva: quanto mais desenvolvido
o sistema nervoso, mais evoludo o animal.
As clulas nervosas, ou neurnios, so das mais antigas entre as clulas
especializadas; mesmo metazorios muito primitivos, como as planrias, j
possuem um sistema nervoso rudimentar.
Os neurnios so clulas excitveis, responsveis por receber, conduzir
e transmitir estmulos. Para que essas funes sejam corretamente executadas,
alm de sua estrutura caracterstica (Figura 10.1), essencial que durante
o desenvolvimento eles faam conexes com outras clulas (veja o boxe).
Abordaremos nesta Aula, a estreita correlao entre estrutura e funo dos neurnios
motores, isto , aqueles que transmitem seu estmulo a uma clula muscular.
Axnio
Ramificaes
Corpo celular
Dendritos
Figura 10.1: O neurnio motor uma clula dotada de muitos prolongamentos. Os mais curtos so os dendritos, por onde o estmulo inicial geralmente chega; depois conduzido atravs de um longo axnio. Prximo
clula efetora (vide boxe), o axnio se ramifica, distribuindo o sinal por vrios pontos simultaneamente. As setas
indicam o sentido de propagao do estmulo nervoso.
146 C E D E R J
MDULO 3
10
Como clulas especializadas em receber e transmitir estmulos, os neurnios

esto sempre ligados a outras clulas. Estas podem ser:
Outros neurnios no sistema nervoso central. Nossa relao com o mundo
feita atravs da atividade e transmisso de impulsos entre os bilhes (isso mesmo,
bilhes) de neurnios existentes no crebro.
Clulas glandulares o sistema nervoso autnomo regula, por exemplo,
a secreo de enzimas digestivas no estmago e no intestino.
Clulas musculares tanto a musculatura lisa quanto o msculo cardaco se
contraem sob comando do sistema nervoso autnomo (VASOCONSTRIO x VASODILATAO,
TAQUICARDIA
BRADICARDIA),
enquanto os msculos esquelticos obedecem ao sistema
nervoso voluntrio. Como essas so as clulas que efetivamente vo responder ao

estmulo, so chamadas clulas efetoras.
O QUE QUE O NEURNIO TEM?

Tem tudo aquilo que estudamos at agora. Os neurnios se
diferenciam a partir de clulas chamadas neuroblastos. Possuem formatos
diversos conforme sua especializao mas, a princpio, todos obedecem
estrutura bsica ilustrada na Figura 10.1. Essa forma mantida por um
citoesqueleto muito bem organizado, formado por microfilamentos de
actina, microtbulos e um tipo especfico de filamentos intermedirios,
os neurofilamentos, mais longos e com tabiques laterais que mantm
uma certa distncia entre eles, impedindo que obstruam o espao por
onde devem trafegar vesculas e organelas.
Esses ltimos, voc lembra (Aula 22 de Biologia Celular I),
possuem um formato diferenciado, que ajuda a manter livre o axnio,
VASOCONSTRIO
Contrao da
musculatura lisa que
envolve os vasos,
causando diminuio
do seu calibre
e conferindo palidez
pessoa.
VASODILATAO
Efeito oposto ao
da vasoconstrio.
O relaxamento da
musculatura lisa leva
ao aumento do
calibre dos vasos;
a pessoa fica com
a pele avermelhada.
por onde trafegam vesculas e organelas.

No corpo celular, alm do ncleo, esto presentes e funcionais
organelas e estruturas que so nossas velhas conhecidas: mitocndrias,
lisossomas, retculo endoplasmtico e complexo de Golgi.
As mitocndrias dessas clulas so numerosas e extremamente
ativas: os neurnios utilizam apenas, e em grande quantidade, glicose
em seu metabolismo, no sendo capazes de utilizar lipdeos.
TAQUICARDIA
Taqui, do grego
tachos, no sentido de
batimentos cardacos
rpidos, acelerados.
BRADICARDIA
O oposto
taquicardia. Tambm
do grego, bradi, lento.
C E D E R J 147
AULA
Neurnios: nunca sozinhos
Embora nossos neurnios sejam sempre os mesmos (no se

dividem e no so repostos caso venham a morrer), h neles uma
constante reciclagem de membranas e molculas, o que requer atividade
do retculo endoplasmtico e do complexo de Golgi. Alm disso, h
a sntese constante de substncias, os neurotransmissores, que so
transportados em vesculas at o ponto de exocitose, na extremidade
do axnio, por protenas motoras que se deslocam sobre microtbulos.
Esses microtbulos se polimerizam a partir do centrossomo, mas, ao
atingir determinado tamanho, acabam se desprendendo e navegam,
como toras de madeira num rio, ao longo do axnio. Como os axnios
podem chegar a medir mais de um metro, esse rio seria equivalente ao
Nilo ou ao Amazonas!
A membrana plasmtica dos neurnios possui, entre outras,
protenas de reconhecimento para molculas da matriz extracelular
e para outras clulas, propiciando a interao entre elas, o que pode
resultar na formao, manuteno ou desaparecimento de contatos
entre elas, um fenmeno conhecido como neuroplasticidade. graas a
isso que, com os mesmos neurnios que voc tinha quando nasceu, foi
possvel aprender tanta coisa, formar memrias e desenvolver habilidades
variadas.
Maravilha!
Eu no sei se voc j est maravilhado com os neurnios, clulas
que, utilizando as mesmas molculas, processos e organelas que as demais,
so capazes de receber, conduzir e enviar sinais para outras clulas, mas
confesso que pensar nisso sempre me deixa assim (maravilhada). Como
ser que elas fazem isso? O mecanismo bsico simples, universal e ns
o aprendemos ainda em Biologia Celular I: polarizao e despolarizao
da membrana plasmtica.
POLARIDADE DA MEMBRANA, UM MINIFLASHBACK

Vimos na Aula 10 de Biologia Celular I que o meio intracelular
sempre mais rico em solutos (acares, protenas, ons) que o meio
extracelular (Figura 10.2), o que o torna hipertnico, levando absoro
passiva de gua do meio extracelular (osmose). Nos animais, o equilbrio
osmtico mantido principalmente pela expulso ativa de ons do meio
intracelular atravs da bomba de sdio/potssio. A atividade da bomba
148 C E D E R J
MDULO 3
10
de sdio/potssio torna a concentrao de ctions no meio extracelular
AULA
maior que no meio intracelular. Assim, o meio extracelular torna-se

eletricamente positivo em relao ao meio intracelular e esse, por sua
vez, negativo em relao ao primeiro.
ons
H2O
H2O
Figura 10.2: As clulas primitivas (A) tendiam a absorver osmoticamente grande quantidade de gua, podendo
romper-se. A bomba de sdio/potssio (B) expulsa ativamente ctions do meio intracelular, impedindo que a clula
arrebente pela absoro excessiva de gua.
Na membrana dos neurnios, no apenas a bomba de sdio/

potssio est constantemente expulsando 3 ons Na+ e internalizando 2
de K+, o que j d um saldo de mais ctions para o meio extracelular;
como tambm parte desse K+ que se acumula no citossol perdida atravs
de canais vazantes de K+, protenas tipo canal especficas para K+ que
esto sempre num ESTADO ABERTO, aumentando a polaridade da membrana
Este um canal
diferente dos que
estudamos na
Aula 11, pois fica
sempre ABERTO, sem
depender de ligante
ou voltagem.
(Figura 10.3). Essa , pois, a situao de repouso de um neurnio: bomba

de Na+/K+ funcionando continuamente e mais ons K+ sendo eliminados
atravs dos canais vazantes.
3 Na+
K+
Meio extracelular
ATP
Membrana plasmtica
ADP+Pi
Meio intracelular
2 K+
Figura 10.3: A membrana do neurnio se mantm polarizada graas atividade da bomba de Na+/K+ e
presena de canais vazantes de K+.
C E D E R J 149
NEURNIO EM REPOUSO GASTA ATP!

Gasta, sim. Para se manter ou voltar a estar polarizado, essencial
a participao da bomba de Na+/K+, e por isso que os neurnios so
vidos consumidores de glicose e O2, e tambm por isso so as primeiras
clulas a sofrerem e a morrerem com a falta dessas molculas. Mas, e no
estado ativo, como ser que essas clulas se comportam?
NEURNIOS ATIVOS: A DESPOLARIZAO DA MEMBRANA

Em princpio, bastante simples provocar a atividade neuronal:
basta induzir a abertura de canais inicos em sua membrana. Como no
estado de repouso a membrana dita polarizada, ao ser ativada dizemos
que ocorre a despolarizao da membrana. Na verdade, a membrana
no fica sem polaridade, esta apenas momentaneamente invertida:
o interior se torna positivo e o exterior negativo (Figura 10.4).
++++++++++++++++++++
_______________
Meio extracelular
MEMBRANA
Meio intracelular
POLARIZADA
________________
++++++++++++++++++++
DESPOLARIZADA
Figura 10.4: Distribuio de cargas nos meios intra e extracelular nos estados de repouso (polarizada) e atividade
(despolarizada) da membrana plasmtica.
Em repouso, a bomba de Na+/K+ mantm o meio intracelular

negativo em relao ao meio extracelular. E para despolarizao?
A abertura de canais de Na+ leva a um influxo de ctions que torna o
interior da clula positivo em relao ao meio extracelular. Logo a seguir,
abrem-se canais de K+, o que acelera o retorno do potencial de membrana
aos nveis de repouso, pois muitos dos ons K+ acumulados pela bomba
de Na +/K + passam para o meio extracelular (Figura 10.5). Aps
abrir-se, o canal de Na+ passa por uma fase em que ele fica inativo,
chamada perodo refratrio, e s ento volta ao estado de repouso,
quando ento pode ser novamente aberto. Isso garante que a onda de
despolarizao percorrer o neurnio do corpo celular para o axnio
150 C E D E R J
MDULO 3
10
(Figura 10.6), at alcanar os terminais sinpticos. Por se abrirem um
AULA
pouco depois dos canais de Na+, esses canais de K+ tambm so chamados

canais de K+ lentos.
3 Na+
Meio extracelular
Na+
ATP
K+
Membrana
plasmtica
ADP+Pi
Meio intracelular
2 K+
1
Figura 10.5: A despolarizao da membrana ocorre quando abrem-se os canais de Na+ 1 que entram, tornando
o meio intracelular positivo em relao ao exterior. Em seguida, 2 abrem-se canais que permitem a sada de K+
e iniciam a repolarizao da membrana. Por fim, 3 a bomba de Na+/K+ restabelece o potencial de repouso. Para
simplificar o esquema, os canais vazantes de K+ no foram representados.
E o que provoca a abertura desses canais? Sabemos que existem

canais inicos ativados por ligantes e outros ativados por voltagem, alm
dos ativados mecanicamente. As substncias capazes de abrir canais inicos
na membrana dos neurnios so os neurotransmissores (veja o boxe aps
a Figura 10.6).
Na superfcie dos neurnios existem tanto canais ativados por
ligantes (chamados, nesse caso, neurotransmissores) como canais
ativados por voltagem. Isso muito econmico para a clula, pois
uma quantidade mnima de neurotransmissor reconhecida por um
canal ativado por aquele ligante especfico e se abre, provocando
a despolarizao da membrana naquele ponto. Essa alterao na
polaridade da membrana suficiente para induzir a abertura de canais
ativados por voltagem naquela vizinhana e, a seguir, num ponto mais
adiante, fazendo com que a onda de despolarizao avance, sem gasto
de energia e sem necessidade de mais neurotransmissor, ao longo da
membrana do neurnio (Figura 10.6.b).
C E D E R J 151
50
- 50
Figura 10.6: (a) O canal de Na+, inicialmente fechado, abre-se, disparando (t = 0) a despolarizao da membrana
(pico da curva). Rapidamente (t = 1) o canal de Na+ passa ao estado inativado, enquanto os canais de K+ no
mostrados na figura abrem-se e iniciam a repolarizao da membrana (curva descendente). Na ltima fase
(t = 2), o canal j voltou ao estado de repouso e pode ser reestimulado. (b) O perodo refratrio (em que o canal
est inativo) garante que apenas os canais ainda no abertos entrem em atividade, propiciando a progresso do
estmulo ao longo da membrana do axnio. A rea sombreada corresponde regio em que a membrana est
despolarizada, com canais inativados na retaguarda e canais se abrindo frente. As setas apontam o sentido
de deslocamento do estmulo.
Certamente voc conhece muitos neurotransmissores. Talvez voc no saiba que alguns estimulam o neurnio que
os recebe (so os estimulatrios), outros inibem (so os inibitrios). Para inibir um neurnio, o neurotransmissor,
ao se ligar ao receptor, abre canais de K+ ou de Cl-, tornando a membrana ainda mais difcil de despolarizar.
152 C E D E R J
MDULO 3
(mas no apenas sobre elas). Falaremos com mais detalhe sobre a acetilcolina mais
adiante. Outros neurotransmissores so:
O glutamato medeia a maior parte dos sinais excitatrios no crebro dos
vertebrados.
A adrenalina um dos neurotransmissores secretados pelos neurnios do
sistema nervoso autnomo. Entre outros efeitos, provoca a acelerao do ritmo cardaco
e a vasoconstrio.
O cido gama aminobutrico (GABA) o neurotransmissor inibitrio mais
importante do sistema nervoso central.
A dopamina um dos neurotransmissores produzidos por neurnios do sistema
nervoso central. Doenas como o mal de Parkinson esto relacionadas diminuio dos
nveis de dopamina.
A serotonina outro neurotransmissor excitatrio secretado apenas no crebro.
Atua sobre neurnios associados a sensaes de prazer.
As endorfinas tambm so neurotransmissores que induzem a uma sensao de
euforia. O bem-estar relatado aps a prtica de exerccios como ginstica e corrida est
relacionado liberao de endorfinas proporcionada por essas prticas.
BAINHA DE MIELINA: RAPIDEZ E EFICINCIA

Embora a propagao de estmulo ao longo da membrana seja
bastante rpida, alguns dos axnios de uma pessoa podem chegar a ter mais
de 1 metro (e no estamos falando das girafas nem das baleias!). Alm disso,
como a transmisso ao longo do neurnio toda feita atravs da abertura
de canais ativados por voltagem, importante que os neurnios estejam
eletricamente bem isolados uns dos outros, para evitar que a despolarizao
de um neurnio induza despolarizao da membrana de um neurnio
vizinho em momento indevido.
Esse isolamento eltrico proporcionado por clulas especiais,
sobre as quais j comentamos na Aula 8 de Biologia Celular I: as clulas de
Schwann (Figura 10.7). A membrana plasmtica dessas clulas se enrola
ao redor dos axnios, formando vrias bicamadas lipdicas, o que um
timo isolante eltrico. Assim, o sinal eltrico trafega pelo interior do axnio
e apenas nos ndulos de Ranvier, (intervalos entre duas clulas de Schwann
vizinhas) ocorre a abertura de canais de Na+ e K+, seguida da repolarizao
pela bomba de Na+/K+. Como a despolarizao ocorre apenas nos ndulos
de Ranvier, diz-se que a propagao do estmulo saltatria.
C E D E R J 153
10
estimulatrio ou inibitrio dependendo da situao, e atua sobre as clulas musculares
AULA
O neurotransmissor mais conhecido e estudado a acetilcolina, que pode ser
1mm
Bainha de mielina
Camadas
Ndulos de Ranvier
Axnio
Ncleo da clula
de Schwann
b
1mm
Figura 10.7: (a) As clulas de Schwann se enrolam, formando a bainha de mielina em torno do axnio, o que
confere isolamento eltrico a essa membrana. (b) Microscopia eletrnica de transmisso da bainha de mielina,
formando uma espcie de rocambole em torno do axnio (foto: Atlas digital da UERJ).
To ou mais importante que o isolamento eltrico proporcionado

pela bainha de mielina a rapidez que sua presena confere transmisso
ao longo do axnio. O processo de mielinizao s se completa cerca
de dois anos aps o nascimento e essencial para que o indivduo se
desenvolva plenamente, tanto em termos de inteligncia quanto de
coordenao motora. A importncia da bainha de mielina pode ser
bem avaliada pela devastao provocada pela esclerose mltipla, doena
degenerativa na qual ocorre a destruio das clulas de Schwann.
A TRANSMISSO DO ESTMULO PARA A CLULA EFETORA:

QUMICA OU ELTRICA?
No incio desta Aula, chamamos a ateno para o fato de que os
neurnios so clulas especializadas em receber, conduzir e transmitir
estmulos entre clulas. A regio de contato funcional entre um neurnio
e a clula seguinte chamada sinapse. Repare que usamos o termo contato
funcional porque nem sempre h um contato fsico entre a membrana
do neurnio e a membrana da clula efetora.
Essa transmisso pode ser feita atravs de junes Gap, estudadas
na Aula 6, havendo, portanto, contato entre as conexinas das duas clulas.
Nesse caso, os ons que provocam a despolarizao da membrana passam
diretamente do citoplasma de uma clula para a clula vizinha. So
chamadas sinapses eltricas e ocorrem apenas entre neurnios localizados
no sistema nervoso central. A transmisso do estmulo nervoso bem
mais rpida nas sinapses desse tipo do que nas sinapses qumicas, onde
h a participao de um neurotransmissor (Figura 10.8).
154 C E D E R J
MDULO 3
10
AULA
Figura 10.8: (a) Nas sinapses eltricas, o sinal eltrico passa diretamente do citoplasma de um neurnio para
o vizinho por junes comunicantes. (b) Nas sinapses qumicas, o estmulo eltrico trafega ao longo do axnio
(seta longa), um neurotransmissor exocitado na extremidade (seta espessa) e a clula seguinte o recebe atravs
de receptores de superfcie especficos.
TRANSMISSO SINPTICA QUMICA

De todos os sistemas de neurotransmisso qumica, o mais
conhecido o modelo da transmisso neuromuscular. Isso se deve
principalmente ao fato de ser o tipo de sinapse mais comum e mais
acessvel, por se localizar fora do sistema nervoso central, permitindo
assim a montagem de experimentos eletrofisiolgicos. Do ponto de vista
bioqumico, ajudou bastante a descoberta de que os peixes eltricos
(veja o boxe) so capazes de gerar descargas eltricas usando o mesmo
neurotransmissor encontrado nas clulas musculares esquelticas dos
mamferos: a acetilcolina. Isso permitiu a purificao e o isolamento do
receptor de acetilcolina a partir dos rgos eltricos desses peixes.
VOC SABIA?
Que o peixe eltrico da Amaznia, ou poraqu, pode chegar a medir 1,5m e pode
gerar descargas eltricas de 200 volts? Essa corrente pode matar uma criana e provocar
o desmaio de um adulto. O nome cientfico do poraqu Electrophorus electricus e ele
tambm conhecido como enguia eltrica. 2/3 do comprimento de seu corpo so ocupados
por um tipo especfico de tecido, os rgos eltricos. Sendo quase cego, o poraqu
emite descargas eltricas de baixa intensidade para sondar o ambiente e, para ataque
ou defesa, descargas mais intensas.
Que, alm do poraqu, o Torpedo marmorata, uma espcie de raia de gua salgada,
tambm muito utilizada em estudos da transmisso sinptica colinrgica?
Que o curare, usado pelos ndios para envenenar flechas, uma molcula que se liga
ao receptor de acetilcolina na membrana das clulas musculares? Sob seu efeito, a musculatura
se relaxa, isto , o animal fica paralisado e pode ser facilmente capturado.
C E D E R J 155
A SINAPSE COLINRGICA
A contrao voluntria dos msculos esquelticos resulta da exocitose
de acetilcolina nos terminais nervosos dos neurnios motores, da sua rpida
difuso pelo espao entre estes e a membrana da clula muscular e de seu
reconhecimento pelos receptores localizados na membrana das clulas
musculares (Figura 10.9).
Axnio
Vescula sinptica
Fenda sinptica
Receptor
Clula muscular
Figura 10.9: Na sinapse qumica, um neurotransmissor exocitado na fenda sinptica, sendo reconhecido
por um receptor na membrana ps-sinptica.
A primeira pergunta que nos fazemos : como um estmulo

eltrico que vinha percorrendo a membrana convertido na exocitose
de acetilcolina?
A acetilcolina uma molcula sintetizada no retculo endoplasmtico
do neurnio, percorre o complexo de Golgi e, como muitas molculas a
serem secretadas, fica armazenada em vesculas de secreo, nesse caso
chamadas vesculas sinpticas. A secreo das vesculas sinpticas um tpico
processo de secreo regulada (recorde a Aula 25 de Biologia Celular I).
Do corpo celular do neurnio, onde ficam o retculo endoplasmtico
e o complexo de Golgi, as vesculas so transportadas para o terminal
sinptico por protenas motoras que as fazem deslizar ao longo
de microtbulos. Tendo em vista o comprimento dos axnios dos
neurnios motores, esse transporte axonal pode levar vrios dias. As
vesculas ficam armazenadas no terminal sinptico, que, por ser mais
dilatado que o axnio, tambm chamado boto sinptico, at que
a onda de despolarizao chegue l (observe a Figura 10.9).
156 C E D E R J
MDULO 3
10
O que provoca a exocitose do neurotransmissor a existncia,
AULA
apenas na membrana do boto sinptico, de canais de Ca++ ativados

por voltagem. Assim, quando a onda de despolarizao chega l,
esses canais se abrem e a entrada de clcio desencadeia a exocitose
simultnea de muitas vesculas cheias de acetilcolina na fenda sinptica
(Figuras 10.9 e 10.10).
Despolarizao da membrana
Canal de Ca++
ativado por voltagem
Axnio
Neutransmissor
Entrada de Ca++
Acetilcolina
Figura 10.10: A exocitose de acetilcolina depende da entrada de Ca++ atravs de canais ativados por voltagem
no terminal sinptico.
O QUE SER QUE A PRESENA DE CLCIO PROVOCA NO

CITOSSOL?
Como estudado na Aula 25 de Biologia Celular I, a fuso de
vesculas de exocitose na membrana plasmtica depende de protenas
especficas, as SNARES, existentes tanto na membrana das vesculas
quanto na membrana do terminal. No boto sinptico, as SNAREs
complementares da vescula e da membrana plasmtica s se aproximam
e interagem provocando a exocitose depois que os ons Ca++ se ligam
a uma protena da vescula sinptica, a sinaptotagmina (Figura 10.11).
A ligao de clcio faz com que ela estimule a interao de sinaptobrevina
e sintaxina (v- e t-SNARE, respectivamente), alm de mudar de
conformao inserindo-se diretamente na membrana plasmtica, onde
ter um papel importante na prpria fuso das bicamadas lipdicas da
vescula e da membrana, necessria para que o contedo da vescula seja
descarregado na fenda sinptica. Assim, a sinaptotagmina considerada
um sensor de clcio, isto , uma molcula que detecta aumento na
concentrao de clcio e, a partir dessa deteco, desencadeia mecanismos
em que ela prpria participa.
C E D E R J 157
Vescula
sinaptobrevina
Sinaptotagmina
Citoplasma
Membrana plasmtica
Sintaxina
Ca++
Vescula
Membrana plasmtica
Figura 10.11: Mecanismo de exocitose de uma vescula sinptica mediado por sinaptotagmina, sensvel ao
aumento de clcio, a v-SNARE sinaptobrevina e a t-SNARE sintaxina (esquema adaptado de Tucker & Chapman,
Biochemical Journal 366: 1-13, 2002).
VOC SABIA
Que a sinaptotagmina o alvo da toxina botulnica? Ao se ligar sinaptotagmina,
ela impede a exocitose das vesculas sinpticas, paralisando o msculo inervado por
aquele terminal. Isso pode ser fatal em grandes quantidades, se estivermos tratando do
diafragma, cuja paralisia leva morte por asfixia, como no botulismo; mas tambm pode
ser bom! Como? Com pequenas quantidades da toxina injetadas em locais estratgicos,
com fins teraputicos, no tratamento do excesso de suor nas axilas e nas mos, ou com
finalidade esttica, amenizando rugas de expresso. Isso mesmo, estamos falando do
famoso botox!
158 C E D E R J
MDULO 3
10
PARA ONDE VAI A ACETILCOLINA DEPOIS DE EXOCITADA?
AULA
Depois de liberado na fenda sinptica, o neurotransmissor ligase ao seu receptor. No caso, o receptor um canal ativado por ligante,
a acetilcolina. Ao abrir-se o canal, a afinidade do receptor pela acetilcolina
diminui e ela se desliga, sendo rapidamente hidrolisada por uma enzima
especfica, a acetilcolinesterase, em acetato e colina. A acetilcolinesterase
tambm hidrolisa todo excesso de acetilcolina que possa estar presente
na fenda sinptica, de modo que os receptores no msculo no fiquem
sendo estimulados sem que haja outro impulso nervoso (j pensou se
voc mandasse o msculo da sua perna contrair uma vez e ele ficasse
contraindo vrias vezes at acabar o excesso de acetilcolina na fenda?!).
Os produtos de hidrlise voltam para o citoplasma do boto sinptico
e os componentes da membrana da vescula sinptica (SNAREs inclusive)
so endocitados em vesculas recobertas por clatrina (coated vesicles,
reveja Aula 20 de Biologia Celular I).
Esse mecanismo duplamente interessante, primeiro porque
impede que o terminal sinptico aumente demasiadamente sua rea pela
contnua fuso de vesculas; e tambm porque o acetato e a colina podem
ser reciclados, no prprio terminal, por uma enzima especfica que os
rene novamente, dando origem acetilcolina. Novas vesculas sinpticas
se formam a partir do endossoma inicial, em que seus componentes de
membrana tinham sido incorporados pelas coated vesicles, e so em
seguida preenchidas com a acetilcolina recm-formada a partir de colina
e acetato (Figura 10.12), ficando prontas para nova exocitose quando
outro impulso nervoso aumentar a concentrao de clcio.
Achou difcil? Que nada! Difcil seria se nossos neurnios motores
tivessem de esperar novas vesculas sinpticas virem l do corpo
celular, que pode estar a mais de um metro de distncia! Talvez voc
tivesse de esperar algumas horas para mexer de novo o dedo do p!
C E D E R J 159
Figura 10.12: As vesculas de acetilcolina se originam primariamente no corpo celular, trafegam pelo axnio (1) e
so exocitadas no terminal sinptico. No terminal tambm ocorre a endocitose dos componentes da membrana
da vescula (2), que se incorporam ao endossoma inicial. Do endossoma brotaro novas vesculas (3) que sero
preenchidas com acetilcolina (4) formada a partir de acetato e colina recuperados da fenda sinptica. As vesculas
sinpticas esto agora prontas para nova secreo (5).
O RECEPTOR DE ACETILCOLINA
Repetindo: molculas de acetilcolina so liberadas pelo neurnio
motor e se ligam a receptores especficos existentes na membrana da
clula muscular. O receptor para acetilcolina uma protena integral
da membrana do tipo canal (Figura 10.13). Quando duas molculas de
acetilcolina se ligam a esse receptor, o canal se abre, deixando entrar ons
sdio e desencadeando a abertura de outros canais (estes ativados por
voltagem) que propagam o impulso por toda a membrana. Dessa maneira,
a membrana da clula muscular excitada, mas, diferente do neurnio,
a resposta da clula muscular a contrao de filamentos de actina de seu
citoesqueleto. Esse movimento envolve tambm a participao da protena
motora miosina e de outras, que voc vai conhecer na Aula 11.
Stio de ligao
da acetilcolina
Canal
Bicamada lipdica
4nm
Passagem
Figura 10.13: O receptor de acetilcolina um canal ativado por ligante composto por cinco subunidades proticas transmembrana. As duas subunidades alfa contm o stio de ligao para acetilcolina. direita, uma viso em corte do canal.
Podem passar ctions pequenos o bastante para no ficarem retidos pelas cargas negativas do interior do canal.
160 C E D E R J
MDULO 3
10
O neurnio motor uma clula excitvel especializada na recepo, conduo

e propagao de estmulos a uma clula muscular. A membrana dessa clula
mantida polarizada pela atividade da bomba de Na+/K+ e se despolariza pela
abertura seqenciada de canais de Na+ e K+ ativados por ligantes.
A bainha de mielina acelera a velocidade de conduo do estmulo.
Vesculas sinpticas armazenadas na extremidade do axnio so exocitadas em
conseqncia da abertura de canais de clcio existentes na membrana desses
terminais.
A acetilcolina liga-se a receptores existentes na membrana ps-sinptica
(membrana da clula muscular). Esses receptores so canais ativados por ligantes
e se abrem, causando a excitao dessa clula.
A acetilcolinesterase uma enzima existente na fenda sinptica que hidrolisa
a acetilcolina em acetato e colina.
Esses produtos de hidrlise so recuperados pelo terminal sinptico e reciclados,
dando origem a novas molculas de acetilcolina.
EXERCCIOS
1. O que so neurnios?
2. Que particularidades possui o citoesqueleto do neurnio?
3. O que so sinapses? Como se classificam?
4. O que a polaridade da membrana?
5. O que garante que o estmulo seja propagado?
6. Como a membrana volta ao estado de repouso?
7. Qual o papel do clcio na transmisso sinptica?
C E D E R J 161
AULA
RESUMO
objetivos
AULA
A clula muscular
11

Estabelecer analogia entre a forma e a funo
das fibras musculares.
Descrever as etapas de excitao e propagao
da despolarizao da membrana das fibras
musculares at o retculo sarcoplasmtico.
Seqenciar os eventos que constituem a
contrao muscular.
Associar o clcio s protenas reguladoras da
contrao.
Listar e apontar a funo das protenas: actina,
miosina, tropomiosina e troponina na contrao
muscular.
Pr-requisito
Aulas de transporte atravs da membrana
plasmtica, de Biologia Celular I (7, 8, 9
e 10). Aulas de citoesqueleto, de Biologia
Celular I (21 a 24). Aula de clula nervosa
(10), de Biologia Celular II.
Biologia Celular II | A clula muscular
INTRODUO
Na Aula 10, estudamos o processo de gerao, propagao e transmisso

de um estmulo ao longo de uma clula nervosa. Tomamos como modelo o
neurnio motor, aquele que faz contato (sinapse) com uma clula muscular.
Nesta Aula, vamos continuar acompanhando esse processo, ou seja, vamos
entender como esse estmulo recebido e interpretado pela clula muscular,
resultando em sua contrao.
As clulas musculares so altamente especializadas em realizar, sob estmulo,
um movimento especfico: a contrao muscular, tendo por isso mesmo a
maior parte de seu volume ocupada por elementos do citoesqueleto. Estamos
certos de que voc lembra que compete ao citoesqueleto, entre outras funes,
definir a forma, posicionar as organelas e possibilitar o movimento de uma
clula como um todo ou apenas o deslocamento intracelular de suas vesculas
e organelas.
Nos vertebrados so reconhecidos trs tipos bsicos de tecido muscular: liso,
esqueltico e cardaco (Figura 11.1). Cada um deles difere, entre outros
parmetros, quanto morfologia e distribuio no organismo.
Os msculos lisos so formados por clulas fusiformes e uninucleadas. Sua
contrao lenta, mais duradoura e involuntria. O msculo liso encontrado
na parede dos vasos e no tubo digestivo.
Ncleo
Miofibrilas
Juno entre
duas clulas
Figura 11.1: Os trs tipos de clulas musculares: as
lisas (a) so alongadas e uninucleadas; (b) as cardacas
tambm so uninucleadas, mas comunicam-se por junes Gap e possuem aspecto estriado em seu interior.
As fibras estriadas esquelticas (c) possuem vrios
Clula
Interior de duas clulas
164 CEDERJ
ncleos e so muito longas.
MDULO 3
11
Nos msculos estriados, os filamentos contrteis esto
AULA
ordenadamente dispostos, dando um aspecto estriado ao tecido. Podem

ser de dois tipos: o primeiro o estriado cardaco, que s se encontra no
corao e formado por clulas uninucleadas que se comunicam atravs de
junes do tipo Gap. Essa comunicao faz com que as cmaras cardacas
se contraiam seqencialmente. A ativao do msculo cardaco tambm
involuntria, sendo controlada pelo sistema nervoso autnomo.
O segundo tipo de msculo estriado o msculo esqueltico,
que forma a musculatura voluntria, permitindo-nos toda espcie de
movimentos. com essas clulas que os neurnios motores formam
sinapses qumicas e sobre esse tipo celular que vamos nos deter.
ORIGEM
O msculo esqueltico formado por clulas multinucleadas, ou
seja, o que chamamos sinccio. Estas clulas so alongadas, sendo, por isso
mesmo, chamadas fibras musculares (Figura 11.1.c). Originam-se a partir de
clulas embrionrias chamadas mioblastos. Durante o desenvolvimento do
organismo, os mioblastos se fundem, dando origem s fibras musculares.
Sendo uma clula altamente diferenciada, a fibra muscular,
a princpio, no se divide, porm novas fibras podem se formar pela fuso
de mioblastos. De fato, os seres humanos j nascem com o nmero de
clulas musculares definido. Entretanto, aps o nascimento, essas fibras
aumentam de tamanho. O alongamento da fibra muscular depende
da incorporao de mioblastos s fibras j existentes, aumentando,
assim, o nmero de ncleos em cada fibra. Em contrapartida, o crescimento
que se observa em praticantes de musculao e halterofilismo conseqncia
tanto do aumento da espessura da fibra pelo acrscimo de fibrilas contrteis
quanto pela fuso de mais mioblastos a cada clula muscular.
No adulto, persistem alguns mioblastos em estado quiescente, que
so chamadas clulas- satlite (ou mioblastos-satlite). Em caso de leses,
muito comuns em atletas, essas clulas so estimuladas a se proliferar
e a se fundir, dando origem a novas fibras musculares. Atualmente h
grande investimento em pesquisas que visam a estimular a multiplicao e
a diferenciao de mioblastos para regenerao de msculos que tenham
sido gravemente lesados (veja a Aula 12).
CEDERJ 165
ORGANIZAO ESTRUTURAL DA FIBRA MUSCULAR

ESTRIADA ESQUELTICA
A fibra muscular esqueltica, por resultar da fuso de muitos
mioblastos, uma clula muito maior do que as outras. Enquanto
uma hemcia possui cerca de 8m e um fibroblasto cerca de 20m de
dimetro, a fibra muscular estriada mede cerca de 50m de espessura e
pode atingir milmetros de comprimento. Isso resultou numa organizao
estrutural muito precisa e bem bolada, para que as fibrilas contrteis
pudessem receber rapidamente o estmulo propagado atravs da
membrana plasmtica.
A membrana plasmtica da fibra muscular (Figura 11.2) o
sarcolema. Assim como a membrana do neurnio, ela tambm excitvel
e permanece polarizada no estado de repouso graas atividade da bomba de
Na+/K+. O sarcolema forma invaginaes transversais peridicas, os tbulos
T ou tbulos transversos (Figura 11.3). A despolarizao da membrana
segue ao longo desses tbulos, permitindo que o impulso atinja rapidamente
a intimidade da clula, que bastante espessa (50m de dimetro).
Miofibrilas
Retculo
endoplasmtico
Tbulo transverso
Miofibrilas
Membrana plasmtica
(sarcolema)
Trade
Entrada do tbulo
Figura 11.2: Organizao geral da fibra muscular esqueltica: a membrana plasmtica ou

sarcolema emite invaginaes chamadas tbulos transversos. Abaixo da membrana, cisternas do retculo endoplasmtico liso ladeiam os tbulos transversos, formando as trades.
As trades envolvem as miofibrilas contrteis.
166 CEDERJ
MDULO 3
11
As estruturas representadas na Figura 11.2 so as mais importantes
AULA
adaptaes funcionais desse tipo celular. Os ncleos, regularmente

espaados, elementos do retculo rugoso, que no muito desenvolvido,
e outras organelas e estruturas tpicas das clulas de organismos
pluricelulares se distribuem no citoplasma perifrico. Em torno das
miofibrilas tambm existem muitas mitocndrias, pois, como veremos
mais adiante, a atividade muscular requer muita energia.
Retculo sarcoplasmtico
Tbulo T
Figura 11.3: Estrutura da trade conforme observada ao microscpio eletrnico de transmisso.

Observe a ntima relao entre o tbulo T e as cisternas do retculo adjacentes a ele. (Foto:
Clara Franzini-Armstrong)
AS MIOFIBRILAS
Observe atentamente as Figuras 11.1 e 11.2. Note que em ambas
apenas um fragmento da fibra muscular esqueltica foi representado.
Na Figura 11.4, voc pode ver que essas clulas so extremamente
longas, se comparadas a hepatcitos, linfcitos ou outras clulas animais.
Portanto, na Figura 11.2, est representada apenas uma fatia da clula,
isto , a clula muscular esqueltica longa e relativamente volumosa
quando comparada a outros tipos celulares.
Figura 11.4: Um fragmento de msculo foi fixado, congelado

e clivado, expondo as miofibrilas (seta) no interior de cada
fibra. Note que elas ocupam quase todo o espao intracelular.
As fibras sobre a superfcie externa so de colgeno. (Foto. I-I.
Sei Watanabe em: Scanning Electron Microscopy of Cells and
Tissues of the Oral Cavity. 1998)
CEDERJ 167
A maior parte desse volume ocupada pelas miofibrilas, que

correspondem a cerca de 2/3 do peso seco das fibras musculares. Em
cortes longitudinais (Figura 11.5), possvel ver ao microscpio ptico
que cada uma delas formada por unidades estriadas que se repetem,
formando bandas claras e escuras alternadas (da o nome msculo
estriado).
Figura 11.5: Fibras musculares esquelticas em
corte longitudinal.
(1) Bandas escuras
(2) Bandas claras
(3) Ncleo perifrico
A imagem original pode ser observada em maiores aumentos no site http://www2.uerj.br/~micron/
2
2
atlas/Muscular/Musc0.htm
(cortesia: Atlas Digital do Lab. Microscopia Eletrnica UERJ).
Combinando mtodos bioqumicos, microscopia ptica e

microscopia eletrnica de transmisso, foi possvel ver que as bandas
claras so formadas principalmente por actina e as bandas escuras por
feixes espessos, formados por molculas de miosina (Figura 11.6).
Alm das bandas claras e escuras, o microscpio eletrnico de
transmisso tambm mostrou que cada banda clara estava dividida por
uma linha mais escura, a linha, ou, melhor dizendo, o disco Z. Tambm
foi possvel ver que, quando a fibra estava contrada, o espao entre duas
linhas Z diminua. Concluiu-se, ento, que a unidade de contrao, ou
sarcmero, constituda por uma banda escura e as duas hemibandas
claras adjacentes a ela, alm dos discos Z. A contrao consiste,
essencialmente, na interpenetrao entre as bandas claras (filamentos
de actina) e as escuras (feixes de miosina) (Figura 11.7).
168 CEDERJ
MDULO 3
11
AULA
b
Sarcmero
Banda escura
Banda clara
Banda clara
Disco Z
Disco Z
Miosina
actina
Figura 11.6: (a) Miofibrilas em corte longitudinal observadas ao microscpio eletrnico de transmisso. (b)
O sarcmero, ou unidade de contrao, constitudo por dois discos Z de onde partem microfilamentos de
actina. Esses microfilamentos interpenetram feixes de molculas de miosina, formando a banda escura, como
mostrado no esquema em (c). (Fotos de Thais Souto Padrn)
Actina
Miosina
Disco Z
Figura 11.7: Na contrao muscular, os filamentos de actina deslizam sobre os feixes de miosina. H seis filamentos
de actina ao redor de cada feixe de miosina. Os sarcmeros encolhem, como os gomos de uma sanfona.
CEDERJ 169
O disco Z contm as protenas alfa-actinina e desmina, que voc j

conhece, e a cap Z, na qual os microfilamentos de actina ficam presos e
protegidos contra a despolimerizao. A alfa-actinina, que uma protena
espaadora, arranja os microfilamentos de maneira regular e eqidistante
em torno do feixe de miosina.
Se voc no se esqueceu da Aula 24 de Biologia Celular I, sabe que
os filamentos de actina so polarizados, isto , possuem uma extremidade
plus e uma minus. Esses filamentos se inserem nos discos Z sempre pela
extremidade plus. Assim, os filamentos de actina de cada hemibanda
clara do sarcmero estaro sempre em oposio (Figura 11.8), o que
explica muito bem por que os filamentos esquerda se deslocam para a
direita e os da direita para a esquerda.
Actina
Actina
Figura 11.8: A orientao dos filamentos

finos e espessos em cada sarcmero faz
com que a contrao seja sempre em
direo ao centro deste.
Disco Z
Disco Z
Como os microfilamentos no sarcmero esto estabilizados

pela cap Z e por outras protenas (veja o boxe), no esto sujeitos
instabilidade dinmica. Assim, seu movimento depende sempre de uma
protena motora: a miosina do tipo II.
Como j vimos na Aula 24 de Biologia Celular I, mas no custa
lembrar, essas molculas so compostas por duas cadeias pesadas e quatro
cadeias leves (Figura 11.9). As cadeias pesadas possuem, cada uma,
uma cabea globular e uma cauda. As caudas se entrelaam e mantm
as cadeias pesadas unidas. J as cabeas globulares ficam expostas e
a elas se associam as cadeias leves. A gerao de fora para a contrao
depende da hidrlise de ATP, e o stio cataltico para esta hidrlise reside
na poro globular da cadeia pesada. A regio da molcula de miosina
que fica entre a cabea globular e a cauda (equivaleria regio do pescoo
da molcula) flexvel, como uma dobradia.
170 CEDERJ
2 nm
Regio flexvel
150 nm
Figura 11.9: A molcula de miosina do tipo II possui duas cadeias pesadas compostas de uma cabea globular e uma cauda. Essas caudas se entrelaam. As cadeias leves se posicionam prximo s cabeas globulares.
As cabeas globulares possuem atividade ATPsica e um stio de ligao com a molcula de actina. A regio
entre a cauda e as cabeas globulares flexvel.
Quando comparada a outros tipos de miosina, chama a ateno

o comprimento das caudas da miosina muscular. Essas caudas so ricas
em aminocidos hidrofbicos e, por isso, alm de se entrelaarem duas a
duas, agregam-se em feixes que constituem os filamentos espessos, onde
as pores globulares ficam bem expostas (Figura 11.10).
Caudas
MDULO 3
AULA
Cadeia leves
11
Cabea globular
Duas hlices tranadas
Cabeas de miosina
Figura 11.10: As molculas de miosina se agregam pelas caudas, formando feixes onde metade das molculas
est orientada num sentido e a outra metade no sentido oposto. As cabeas globulares ficam expostas na
superfcie de todo o feixe e so excludas apenas da regio central, onde s h caudas.
Em resumo, a miosina possui duas caractersticas biolgicas

fundamentais, ambas localizadas na cabea globular de suas
cadeias pesadas:
1. a miosina uma ATPase;
2. a miosina se liga a um stio especfico do filamento de actina-F.
CEDERJ 171
Actina, miosina e...

A estrutura to organizada do sarcmero, com os filamentos de actina todos
do mesmo comprimento e to esticadinhos, deslizando sobre os feixes de miosina,
depende de outras protenas, que esto sendo descobertas aos poucos. Alm da alfaactinina e da cap Z, formando o disco Z, j foram identificadas as seguintes protenas
(Figura 11.11):
Tropomodulina: associa-se extremidade plus dos filamentos de actina,
protegendo-a contra a perda de monmeros.
Titina: a molcula desta protena mede mais de 1m! Uma das extremidades
da titina se liga ao disco Z e a outra ao feixe de miosina. A molcula de titina espiralada
e elstica, e encolhe conforme o sarcmero se contrai.
Nebulina: uma protena que acompanha o filamento de actina em toda
a sua extenso.
Tropomiosina: outra protena em forma de basto que acompanha o filamento
de actina. Tem importante papel na regulao da contrao, como veremos adiante
(veja Figura 11.15).
Troponina: tambm uma protena reguladora da contrao e se liga
tropomiosina. Veja Figura 11.15.
Mais adiante vamos estudar como as protenas reguladoras atuam.
Disco Z
Feixe de miosina
Disco Z
Filamento de actina
Cap Z
Tropomodulina
Titina
Cap Z
a
Nebulina
b
Figura 11.11: (a) Esquema representando a posio das protenas cap Z e tropomodulina, que
estabilizam as extremidades dos filamentos de actina, evitando que sofram despolimerizao.
(b) As protenas titina e nebulina contribuem, respectivamente, para manter esticados os filamentos de actina e para facilitar o retorno do sarcmero ao estado relaxado.
172 CEDERJ
MDULO 3
AULA
11
INTERAO ACTINA-MIOSINA: A CONTRAO DO

SARCMERO
Bem, temos agora todos os elementos para entender como a
interao actina-miosina resulta na contrao dos sarcmeros e do
msculo como um todo.
Na Figura 11.12 esto esquematizadas passo a passo todas as
etapas dessa interao. Vamos, portanto, acompanh-la.
1. Uma molcula de ATP liga-se a uma das cabeas da molcula
de miosina. Nesta situao, a ligao actina-miosina no possvel
(fibra relaxada).
2. O ATP ligado hidrolisado a ADP + Pi, mas os produtos da
hidrlise permanecem associados cabea da miosina. Nesta etapa,
a cabea da miosina j muda de posio, aproximando-a do filamento
de actina, ao qual se liga fracamente.
3. A ligao inicial entre miosina e actina dispara a liberao do
Pi, o que faz com que a miosina se ligue, agora fortemente, actina.
4. Uma vez ligada actina, a miosina sofre nova mudana
conformacional, o que gera um forte puxo no filamento de actina,
durante o qual o ADP liberado.
5. Enquanto no se ligar a outro ATP, a cabea de miosina
permanecer fortemente ligada actina numa situao descrita como
rigor. Em condies normais, onde h constante suprimento de ATP,
esse perodo muito curto, encerrando-se com a ligao de uma nova
molcula de ATP cabea de miosina, que se solta da actina e retorna
ao estado relaxado.
CEDERJ 173
Cabea da miosina
Actina ()
1 LIgao de ATP
ATP
Miosina e actina
dissociadas
A cabea da miosina
se move e se liga a
uma nova molcula
de actina
2 Hidrlise do ATP
ADP+P
A cabea da miosina d
um "puxo" brusco no
filamento de actina
3 O Pi liberado
P
ADP
Sentido do
deslocamento
4 O ADP liberado
ADP
Figura 11.12: Etapas da contrao muscular. Repare que, para cada ATP hidrolisado, o filamento de actina
caminha no sentido do centro do sarcmero. Inicialmente, a cabea da miosina estava ligada subunidade
preta da actina. Ao fim do ciclo de contrao, o filamento havia caminhado e a mesma miosina estava presa
subunidade cinza. Embora ambos se localizem na cabea globular, o stio cataltico para hidrlise de ATP
um, e o stio de ligao actina-miosina, outro.
174 CEDERJ
MDULO 3
11
Invista mais um tempinho na anlise do mecanismo de interao actina-miosina.

Observe que na Figura 11.12 s aparece uma das cabeas de miosina, e ns sabemos que
a miosina do tipo II possui duas cabeas. Se voc concluiu que enquanto uma cabea est
presa ao filamento de actina a outra est ligada a um ATP, portanto, solta, concluiu certo;
assim, contrao do msculo progressiva; enquanto algumas miosinas esto soltas, outras
mantm o msculo contrado. Isso permite no apenas manter o tnus
muscular (aquela contrao mnima, que s some quando a pessoa
perde os sentidos) como possibilita variar o tempo e a intensidade da
contrao. Podemos fazer pouca fora durante longos perodos (muitos
abraos) ou exercer a contratura mxima por perodos relativamente
curtos (como no brao de ferro).
CONTRAO VOLUNTRIA: COMO?

De que maneira ordenado e regulado o processo de contrao
muscular de modo a gerar movimentos harmoniosos, como a marcha
e a dana, ao invs de convulses desordenadas?
Todos ns j vimos, ou pior, sentimos, os efeitos de uma
descarga eltrica sobre nossa musculatura. Enquanto descargas de baixa
intensidade provocam apenas um formigamento localizado, descargas
mais fortes causam contraes violentas da musculatura (dentes cerrados,
mos crispadas) que podem at levar morte, se o msculo cardaco for
atingido. Esses tremeliques resultam da sbita e intensa despolarizao da
membrana plasmtica das clulas musculares, o sarcolema. Em estado de
repouso, o sarcolema se mantm polarizado pela atividade da nossa velha
conhecida: a bomba de Na+/K+. O estmulo voluntrio para contrao
chega atravs da acetilcolina que secretada na fenda sinptica e se liga
CEDERJ 175
AULA
No corra!
a seu receptor. O receptor da acetilcolina (veja a Aula 10) um canal

inico um pouco diferente dos que conhecemos at agora, pois permite a
passagem tanto de Na+ quanto de K+. Devido ao gradiente formado pela
bomba de Na+/K+, quando o receptor de acetilcolina se abre, o citoplasma
invadido por Na+, enquanto o K+ sai. Como a quantidade de Na+ que
entra bem maior, a membrana se despolariza. Entretanto, o receptor
da acetilcolina se localiza apenas na regio da membrana plasmtica da
fibra muscular (o sarcolema) sobre a qual existe um terminal sinptico
(Figura 11.13). A onda de despolarizao se propaga para as demais
regies do sarcolema pela abertura de canais inicos dependentes de
voltagem (so estes que se abrem quando levamos o choque eltrico).
Figura 11.13: Microscopia eletrnica de varredura de boto sinptico em contato com a
Axnio
membrana de uma fibra muscular estriada.

Os receptores de acetilcolina se restringem
regio sob as terminaes nervosas. Canais
voltagem dependentes propagam o sinal ao
restante da membrana, conduzindo-o at os
Boto sinptico
tbulos T. (Foto: Mrcia Attias)

Fibra muscular
Essa conversa toda ns j tivemos no passado: na Aula 11 de

Biologia Celular I (coincidncia, no?). Volte Figura 11.5 de Biologia
Celular I para conferir. Essa dinmica com efeito domin de abertura
e fechamento de canais inicos ao longo do sarcolema prossegue at
atingir os tbulos T, de que falamos ainda no incio desta aula. At este
momento, o estmulo eltrico est apenas percorrendo a membrana, mas a
contrao muscular, sabemos, ocorre entre filamentos de actina e miosina
do citoplasma. Como feita a passagem desse sinal para o citoplasma?
176 CEDERJ
MDULO 3
11
Acertou quem apostou nas trades, formadas pelos tbulos T e pelo
AULA
retculo endoplasmtico liso (ou retculo sarcoplasmtico). A membrana

do tbulo T possui, alm dos canais inicos voltagem dependentes, uma
outra protena que tambm muda de conformao quando a membrana
se despolariza. Esta protena se chama DHPR (do ingls dihydropiridin
receptor, receptor de di-hidropiridina). Essa protena est associada, pelo
lado citoplasmtico, a um canal de clcio, tambm chamado receptor de
rianodina (antes que voc pense em perguntar ao tutor: a rianodina um
alcalide de origem vegetal). Assim, quando a onda de despolarizao
atinge o tbulo T, a DHPR abre um canal de clcio na membrana do
retculo sarcoplasmtico (Figura 11.14).
Tbulo T despolarizado
DHPR
Tbulo T
polarizado
CITOSSOL
Potencial de ao
Ca2+
Figura 11.14: Os tbulos T possuem uma protena voltagem dependente que fica em contato com o canal de Ca2+ da membrana do
retculo sarcoplasmtico, podendo abri-lo.
E O QUE O CLCIO TEM A VER COM A CONTRAO

MUSCULAR?
Muita coisa! Veja que j havamos comentado que o retculo
sarcoplasmtico muito desenvolvido e organizado nessas clulas.
Junte essa informao com a da Aula 16 de Biologia Celular I: uma
das principais funes do retculo endoplasmtico liso regular a
concentrao intracelular de clcio. Isto feito por uma Ca2+-ATPase
presente na membrana do retculo que bombeia ativamente, isto , com
gasto energtico, Ca2+ do citossol para a luz desse compartimento.
Ora, a onda de despolarizao chega ao tbulo T e abre um canal de
clcio da membrana do retculo, que inundar (ainda que por pouco tempo)
o citossol de ons Ca++. Nesse breve intervalo, o Ca2+ ir interagir com uma
das protenas regulatrias de que j falamos no primeiro boxe: a troponina.
CEDERJ 177
TROPONINA E TROPOMIOSINA, DUAS PROTENAS PARA

NO ESQUECER
Comentamos no incio desta aula que iramos nos deter em
aspectos da contrao do msculo estriado esqueltico, aquele cuja
contrao depende de nossa vontade. Depende como, pois se havendo
ATP a miosina estar constantemente realizando sua hidrlise e
puxando os filamentos de actina aos quais se ligar? Como existem
muitas mitocndrias em torno das miofibrilas, o suprimento de ATP, a
princpio, no ser um problema (veja o boxe).
Justifica-se, portanto, o enunciado desta seo: a tropomiosina
e a troponina so as duas protenas regulatrias da contrao muscular.
Como elas funcionam?
A tropomiosina uma protena em forma de basto que se dispe
sobre o filamento de actina. Alm de contribuir para manter o filamento
de actina esticadinho, a tropomiosina encobre o stio de ligao para
miosina na molcula de actina (Figura 11.15). Funciona assim como um
verdadeiro cinto de castidade, impedindo que a miosina se aproxime da
actina. J a troponina um complexo protico menor, com uma regio
em basto, que se liga tropomiosina, e uma regio globular, capaz de
ligar ons Ca++, se eles estiverem presentes no citossol.
Voc j deve ter concludo que, se a tropomiosina o cinto de
castidade, a troponina a fechadura deste cinto e o Ca++ a chave capaz
de abri-lo. Assim, quando a onda de despolarizao chega aos tbulos T, a
DHPR induz a abertura do canal de Ca++ sensvel rianodina e a onda de
Ca++ citosslico se liga rapidamente troponina, mudando sua conformao
e obrigando a tropomiosina a se afastar. Finalmente, actina e miosina podem
se ligar e dar prosseguimento interao descrita na Figura 11.12.
Tropomiosina
Ligao do Ca
+2
Actina
Figura 11.15: A molcula de tropomiosina encobre o stio de ligao para miosina na molcula de
actina. Esse stio s fica exposto quando a troponina se liga ao Ca+2.
178 CEDERJ
Troponina
MDULO 3
11
AGORA, TODO MUNDO JUNTO!
AULA
Cada vez que voc pisca o olho, ou d um beijo, ou masca

chiclete, suas fibras musculares esquelticas seguem uma mesma
seqncia de eventos, que est resumida na Figura 11.16.
Despolarizao do neurnio
1
3
Canal de Na+ Voltagem dependente
Ca2+
2
Na+
Receptor de acetilcolina
6
Ca2+
Ca2+
ATP
Tbulo T
Na+
ADP
5
Ca2+
Ca2+
Ca2+
Ca2+
2+
Ca2+ Ca
Ca2+
Ca2+
Figura 11.16: A chegada da onda de despolarizao ao terminal sinptico leva abertura de canais de Ca2+ voltagem
dependentes 1 . A entrada de clcio no terminal sinptico desencadeia a exocitose do neurotransmissor acetilcolina, que se liga a seu receptor 2 , um canal voltagem dependente que inicia a despolarizao da membrana
da fibra muscular. A despolarizao do sarcolema prossegue pela abertura sucessiva de canais de Na+ voltagem
dependentes 3 . Ao atingir os tbulos T, a onda de despolarizao faz com que a protena DHPR 4 provoque
a abertura dos canais de Ca2+ presentes na membrana do retculo sarcoplasmtico 5 . Quando o potencial de
membrana for restabelecido, a Ca2+ ATPase da membrana do retculo sarcoplasmtico bombear o Ca2+ de volta
para a luz do retculo 6 .
CEDERJ 179
A partir da ligao da acetilcolina a seu receptor (que um canal

inico), o que se observa o efeito domin, no qual a abertura deste
canal gera um potencial de ao que provoca a mudana de conformao
das protenas daquela regio da membrana. Na medida em que a onda
de despolarizao avana, mais canais vo sendo abertos at atingir o
tbulo T, onde a DHPR provoca a abertura do canal de clcio do retculo
sarcoplasmtico. Uma vez descarregado no citossol, este clcio se liga
troponina, que afasta a tropomiosina e permite que a miosina se ligue e
puxe a actina. Simples, n? Pense nisso na prxima piscada!
DIFERENTES MOMENTOS, DIFERENTES FORMAS DE OBTER

ATP
Voc reparou, na Figura 11.12, que quando a miosina est
desligada da actina ela tem um ATP ligado? Portanto, o msculo relaxado
tem ATP ligado. Para a miosina voltar a se ligar, necessrio que ela
hidrolise o ATP. A contrao muscular um dos eventos fisiolgicos
que mais consome ATP. No entanto, a quantidade de ATP estocada
num msculo, mesmo de um atleta treinado, suficiente apenas para
alguns segundos (3 a 5s!) de exerccio intenso. Para mais do que isso
necessrio sintetizar ATP. No d nem para uma corrida de 50m!
O metabolismo da fibra muscular desenvolveu recursos especiais para
reconstituir rapidamente o ATP necessrio contrao. So basicamente
trs sistemas, com eficincia (tempo que leva para reconstituir o ATP
versus tempo que ele dura) varivel:
a) sistema fosfognico: funciona com uma outra molcula capaz
de ligar um grupamento fosfato como reserva, a creatina-fosfato ou
fosfocreatina. A ligao do fosfato creatina altamente energtica,
mais do que a ligao ADP-fosfato (10,3kcal na primeira e 7,3kcal no
segundo). A creatina-fosfato consegue transferir o fosfato diretamente
para ADP, formando ATP, em frao de segundo. Nosso atleta j teria
ATP para mais alguns segundos (8 a 10s); j d para uns 100m rasos,
ou para fugir do perigo...
b) sistema glicognio cido ltico: o msculo pode obter bastante
ATP em pouco tempo, mobilizando os estoques de glicognio, quebrando-o
em glicoses e hidrolizando-as at piruvato (reveja a Aula 27 de Biologia
Celular I). Com pouco oxignio presente, o excesso de piruvato produzido
transformado em cido ltico (Aula 11 de Bioqumica II), para que
180 CEDERJ
MDULO 3
11
a quebra de glicose possa prosseguir, produzindo mais ATP (se o piruvato
AULA
fosse acumulado, a via glicoltica logo pararia). Com esse suprimento de

ATP, que dura 1,5 a 2min, nosso atleta j poderia correr 400m. Claro
que a quantidade de glicognio acumulada na fibra muscular o fator
limitante. Da ser necessrio que o atleta mantenha uma dieta rica em
carboidratos. A reposio total do estoque de glicognio muscular leva
cerca de dois dias, por isso esse o intervalo mnimo entre os eventos
de exerccio anaerbico intenso.
c) sistema aerbico: o que voc j aprendeu: na presena de
oxignio suficiente, o piruvato entra na mitocndria e vai produzir
(via ciclo de Krebs e cadeia respiratria) uma quantidade de ATP
muito maior. Alm disso, o glicognio no o nico substrato
usado, mas tambm os cidos graxos e at mesmo os aminocidos,
se necessrio (Aula 17 de Bioqumica II). Nosso atleta j poderia
at mesmo correr uma maratona (42.200m)! Nesse sistema,
o fator limitante a quantidade de oxignio disponvel, que depende,
evidentemente, da irrigao sangnea. Mas o metabolismo muscular
tambm se especializou na distribuio de oxignio: no citoplasma dos
msculos podemos encontrar a mioglobina, uma protena semelhante
hemoglobina, capaz de ligar oxignio e tornar sua distribuio melhor
e mais rpida do que seria por difuso simples.
Entretanto, preciso ressaltar que o sistema mitocondrial leva
quatro vezes mais tempo do que o sistema da fosfocreatina para
produzir a mesma quantidade de ATP!
Assim, certamente so os sistemas da
fosfocreatina e do cido ltico que nos
livram de um perigo iminente (apoiados
pela sinalizao de adrenalina, relembre
na Aula 13 de Biologia Celular I).
Outro fato importante que precisa
ser mencionado que o exerccio intenso na ausncia de oxignio produz
quantidades de cido ltico e H+ capazes de acidificar o citoplasma da fibra
muscular, causando a dor e o grande cansao que caracterizam a fadiga
muscular. O cido ltico logo se espalha pelo citoplasma e pelos fluidos
corporais. Quando o oxignio volta a ficar disponvel em grande quantidade,
parte do cido ltico volta a formar piruvato, que usado para produzir ATP
na maioria dos tecidos corporais, e parte convertida a glicose no fgado,
o que ajuda a repor os estoques de glicognio muscular.
CEDERJ 181
O QUE PODE DAR ERRADO?

Apesar de muito bem bolado, o sistema de contrao muscular est
sujeito a algumas falhas. Podem ser o resultado de mutaes (doenas
hereditrias), de doenas auto-imunes e de intoxicaes (venenos).
Miastenia gravis: trata-se de uma doena auto-imune na qual
o indivduo produz anticorpos que destroem os receptores para
acetilcolina na membrana das clulas musculares. Gradualmente, a pessoa
vai perdendo a fora, e quando a capacidade de contrair o diafragma
fica comprometida, sobrevm a morte por asfixia.
Rigor mortis: tambm conhecido como rigidez cadavrica,
devido falta de ATP para que a musculatura volte ao estado relaxado.
um fator importante para que os legistas possam determinar a
hora provvel da morte.
Ttano: causado por uma bactria, Clostridium tetanus.
A neurotoxina tetnica bloqueia a liberao de neurotransmissores
inibitrios, isto , aqueles capazes de inibir a exocitose da
acetilcolina, levando a uma paralisia espasmdica (o msculo fica
paralisado no estado contrado).
Distrofia muscular Duchenne: uma doena hereditria
ligada ao cromossomo X, na qual a protena distrofina, que forma
pontes entre a actina e o sarcolema, no corretamente sintetizada.
Isso resulta em fibras musculares mais frgeis, que, com o uso, vo sendo
lesadas progressivamente, conduzindo perda da atividade motora.
182 CEDERJ
MDULO 3
11
Dardos envenenados com o extrato de curare, um cip amaznico, tm sido

usados pelos ndios brasileiros desde antes da chegada de Cabral. O alcalide extrado
dessa planta liga-se ao receptor de acetilcolina na membrana dos msculos estriados.
Dessa forma, a acetilcolina no consegue abrir esses canais inicos, impedindo a
contrao muscular. Ao contrrio da toxina tetnica, a musculatura paralisada
no estado relaxado. Isso levou ao uso do curare e de seus sucedneos sintticos em
processos anestsicos. A ingesto do curare por via oral no perigosa, de modo
que os ndios flechavam a presa que, ferida e parcialmente paralisada era capturada
com facilidade.
Uma outra molcula, a succinilcolina, tambm se liga aos receptores
de acetilcolina, mas provocando sua abertura. Por no ser degradada pela
acetilcolinesterase, a succinilcolina mantm os canais inicos abertos por longo
perodo, levando paralisia muscular no estado de contrao.
Curiosamente, tanto o curare quanto a estricnina
(principal componente do chumbinho, um perigoso raticida)
so extrados de plantas do mesmo gnero: Strychnos
toxifera e Strychnos nux vomica, respectivamente.
Entretanto, a estricnina compete com neurotransmissores
do sistema nervoso central.
Visto isso, por que no usar o curare no lugar do
botox, j que ambos deixam o msculo no estado relaxado?
A resposta est no fato de que o efeito do curare dura
relativamente pouco, enquanto o organismo leva vrios
meses para eliminar a toxina botulnica.
CEDERJ 183
AULA
Curare, Botox e estricnina
CONCLUSO
Vimos na aula de hoje como a organizao estrutural da clula muscular
e como ela se presta sua funo contrtil especfica. Surpreendentemente (ou
no), a musculatura voluntria dos invertebrados (caranguejos, gafanhotos,
minhocas etc.) muito semelhante dos vertebrados e muitos dos estudos sobre
a contrao muscular voluntria foram, e continuam a ser, feitos nesses animais.
Se considerarmos que o sucesso evolutivo (= sobrevivncia) de um animal depende,
em grande parte, de sua capacidade de correr atrs de suas presas e escapar das
espcies predadoras, isso muito justificvel, no acham?
Navegar preciso...
Vrios sites tratam desse assunto. Selecionamos alguns para
voc visitar. Apesar da maioria dos textos estar em ingls, as imagens
so auto-explicativas e vrias animaes e filmes esto disponveis.
cs.southwesternadventist.edu/.../ sk_muscle/- a interao actinamiosina. O papel do clcio, do ATP e a participao da troponina e da
tropomiosina no processo regulador.
Para uma bela combinao de microscopia eletrnica e animao.
V ao site http://www.bio.davidson.edu/misc/movies/musclcp.mov
184 CEDERJ
MDULO 3
11
As clulas musculares so especializadas em contrair-se, graas ao deslizamento

de filamentos de actina sobre feixes de miosina.
Existem trs tipos de clula muscular: lisa, estriada cardaca e estriada esqueltica.
As duas primeiras so de contrao involuntria, controlada pelo Sistema Nervoso
Autnomo. Apenas os msculos esquelticos possuem contrao voluntria.
As clulas musculares tm origem em mioblastos que se fundem e formam fibras
longas e multinucleadas. O crescimento das fibras feito pela fuso de mioblastos
a fibras preexistentes.
A maior parte do citoplasma da fibra muscular ocupado pelas miofibrilas. Ao redor
das miofibrilas distribuem-se mitocndrias e cisternas do retculo endoplasmtico
liso, que se associam aos tbulos T da membrana plasmtica, constituindo as trades.
Ncleos e demais organelas se situam na periferia da fibra.
A unidade de contrao o sarcmero, que compreende o espao entre dois
discos Z: duas hemibandas claras e uma banda escura.
Nas bandas claras predominam os filamentos de actina, as bandas escuras
so constitudas por feixes de miosina do tipo II e filamentos de actina que
interpenetram esses feixes. O disco Z constitudo por alfa-actinina e cap Z.
A despolarizao resulta da abertura de canais inicos dependentes do
neurotransmissor acetilcolina (receptores de acetilcolina) e subseqente
abertura de canais inicos voltagem dependentes ao longo da membrana,
at atingir os tbulos T.
O clcio, que se acumula no retculo sarcoplasmtico pela ao de uma Clcio
ATPase, liberado no citossol quando a despolarizao da membrana chega aos
tbulos T, mudando a conformao da protena DHPR. A DHPR provoca a abertura
de canais de clcio na membrana do retculo sarcoplasmtico.
No citossol, o clcio se liga troponina, que, por sua vez, empurra
a tropomiosina, liberando o stio de ligao para miosina no filamento de
actina.
Durante a contrao do sarcmero, cada cabea de miosina hidrolisa uma
molcula de ATP, liga-se ao filamento de actina e, ao liberar o Pi, o filamento de
actina puxado, encurtando o sarcmero. O relaxamento ocorre quando uma
nova molcula de ATP liga-se miosina.
CEDERJ 185
AULA
RESUMO
EXERCCIOS
1. Qual a origem das clulas musculares esquelticas? Como crescem?
2. Quais so e quais as principais caractersticas dos outros tipos de msculo?
3. Defina:
a) sarcmero
b) sarcolema
c) retculo sarcoplasmtico
d) tbulo T- ou tbulo transverso
e) trade
4. Qual a funo das seguintes protenas acessrias:
a) alfa-actinina
b) Cap Z
c) tropomodulina
d) troponina
e) tropomiosina
f) nebulina
g) titina
5. Por que nos referimos a filamentos de actina e a feixes de miosina?
6. Como, uma vez no estado contrado, o sarcmero volta ao estado relaxado?
7. Por que ocorre a rigidez cadavrica?
186 CEDERJ
objetivos
AULA
As clulas-tronco
12

Definir o que so as clulas-tronco.
Distinguir a origem e as caractersticas das
clulas-tronco embrionrias e das clulas-tronco
de adultos.
Definir totipotncia, pluripotncia e
multipotncia.
Descrever os processos de regenerao e
renovao de clulas sanguneas, musculares,
epiteliais e nervosas.
Discutir as aplicaes teraputicas potenciais da
manipulao de clulas-tronco, apontando suas
limitaes ticas e cientficas.
Pr-requisito
Aula 4 de Biologia Celular I
Aulas 5, 6, 7, 8, 9, 10 e 11
de Biologia Celular II
Biologia Celular II | As clulas-tronco
INTRODUO
A aula de hoje repleta de perguntas, muitas ainda sem resposta. Esperamos que
ela seja instigante e aguce sua curiosidade e seu interesse pela Biologia Celular.
Poucos assuntos tm gerado tanta polmica nos dias de hoje quanto a
descoberta das clulas-tronco. Sua potencial utilizao na cura de leses
decorrentes de acidentes e enfermidades como cncer e mal de Alzheimer
abre um fascinante leque de possibilidades. Por outro lado, aspectos ticos
envolvendo a manipulao de embries, a clonagem e outras questes delicadas
tambm precisam ser bem analisados. Mas, afinal, o que so clulas-tronco?
H apenas um tipo de clula-tronco? Como podem ser obtidas? Qual seu
papel natural? Como seu potencial pode ser aproveitado para melhorar nossa
vida? Antes de tomar partido, seja pr ou contra, conhea um pouco sobre
este assunto.
Por que as clulas-tronco receberam este nome?

Em ingls elas so chamadas stem cells, e sua traduo literal para o portugus
seria clulas estaminais (como de fato so chamadas em Portugal). Segundo o Dicionrio
Aurlio, significa o eixo principal de uma planta, de onde partem as ramificaes, e
tambm o fio da vida, como no caso de uma rvore genealgica em cujo tronco esto
os ancestrais, e, nos ramos, as sucessivas geraes. Por seu papel iniciador de toda a
proliferao e diferenciao celular, ambas as nomenclaturas so adequadas.
O QUE SO CLULAS-TRONCO?
As clulas-tronco so clulas no especializadas capazes de
renovar-se continuamente. Quando uma clula-tronco se divide, as
clulas-filhas tanto podem continuar sendo clulas-tronco quanto
ingressar numa via de proliferao (novas divises) e progressiva
diferenciao, dando origem aos diversos tipos celulares que compem
o indivduo (clulas cardacas, pancreticas, sangneas, neurnios etc.).
Essa diferenciao passa por tipos celulares intermedirios, tambm
capazes de se multiplicar. Os tipos intermedirios daro origem a um
ou mais tipos celulares especficos (Figura 12.1).
188 CEDERJ
MDULO 3
12
AULA
Clula-tronco
Tipo intermedirio
Clula diferenciada
Figura 12.1: Ao se dividir, uma clula-tronco tanto pode dar origem a outra clula-tronco quanto a tipos
celulares mais diferenciados, mas tambm capazes de proliferar, tanto gerando clulas ainda pouco
diferenciadas quanto clulas que resultaro num tipo especfico. A clula totalmente diferenciada no
mais se divide.
A partir dessa definio, a primeira concluso a que se pode chegar

a de que o zigoto uma clula-tronco. De fato, a partir do zigoto, tm
origem todos os tipos celulares, mais ou menos diferenciados, que formam
um organismo. Resta perguntar: em que ponto do desenvolvimento o zigoto
ou as clulas dele resultantes deixam, ou no, de ser clulas-tronco? Qual
o potencial de auto-replicao e de diferenciao de nossas clulas?
TOTIPOTNCIA E PLURIPOTNCIA: AS CLULAS-TRONCO

SO ONIPOTENTES?
Por ser capaz de se diferenciar em qualquer outro tipo celular, o
zigoto chamado clula totipotente. Nos organismos j desenvolvidos,
alguns tipos celulares conservam a capacidade de dividir-se e diferenciarse, provendo a substituio de clulas cujo tempo de vida curto, como as
do sangue. Os tipos celulares que conservam a capacidade de diferenciarse numa determinada gama de clulas so chamados pluripotentes. J
algumas clulas conservam a capacidade de se multiplicar, mas se
diferenciam em apenas um tipo celular, como o caso dos mioblastos,
que permanecem como clulas-satlite em torno das fibras musculares
(veja Aula 11). Estas clulas so chamadas unipotentes. Para entender
melhor esses conceitos, vamos acompanhar as primeiras etapas do
desenvolvimento de um embrio de camundongo, muito semelhantes
ao que ocorre com todos os mamferos, inclusive ns.
CEDERJ 189
ZIGOTOS: TOTIPOTENTES OU PLURIPOTENTES?

Nos dias que se seguem fertilizao, o zigoto se divide at que,
por volta do terceiro dia, consiste numa massa de 16 clulas (Figura
12.2). Inicia-se a o processo de compactao, estabelecendo junes do
tipo tight entre as clulas. Antes de atingir o estgio de compactao, as
clulas podem ser separadas sem muita dificuldade. Se isso acontecer,
espontnea ou artificialmente, dois organismos idnticos, porm
independentes, se desenvolvero. Assim tm origem os gmeos idnticos.
Portanto, at atingir o estgio de mrula, as clulas do embrio so, de
fato, totipotentes.
As junes tight (de ocluso) isolam as clulas no interior da
mrula, e outra fase se inicia. Com quatro dias de vida, uma cavidade
se desenvolve no interior da mrula, convertendo-a num blastocisto.
O blastocisto uma esfera oca na qual uma camada de clulas forma
a parede e chamada trofoectoderma. Essas clulas daro origem
placenta, enquanto a massa de clulas em seu interior dar origem ao
embrio propriamente dito e outros anexos embrionrios, como o saco
vitelino. Por no serem capazes de dar origem placenta, as clulas do
blastocisto so consideradas, por parte dos pesquisadores, como apenas
pluripotentes; entretanto, elas possuem potencialidade para dar origem
a todas as clulas que compem o animal, inclusive os gametas.
vulo
fertilizado
(zigoto)
1 12 dia
2 clulas
4 dias
blastocisto
visto em corte
2 12 dias
3 dias
mrula de 8
16 clulas
clulas compactao
corpo polar
Zona
pelcida
Proncleos
materno e paterno
Massa interna
de clulas
Trofoectoderma
Blastocele
Figura 12.2: Primeiras etapas do desenvolvimento de um zigoto de camundongo. At o estgio de mrula,

todas as clulas so totipotentes, mas a partir da formao do blastocisto j existem dois tipos celulares
distintos. A zona pelcida uma camada protetora que envolve o ovo fecundado, desempenhando papel
anlogo ao da matriz extracelular.
190 CEDERJ
MDULO 3
12
Bem, como voc pode perceber, essa questo de pluripotncia ou
AULA
totipotncia sutil, e no chega a ter grande importncia no contexto da

nossa disciplina. O fato que as culturas formadas por clulas retiradas
da massa interna do blastocisto conservam a capacidade de proliferar
indefinidamente e manter seu potencial de diferenciar-se, ou no, em
qualquer um dos tipos celulares que compem um indivduo. Essas
caractersticas definem as clulas-tronco embrionrias.
CLULAS-TRONCO EMBRIONRIAS
Quando clulas da massa interna de um blastocisto so implantadas
sob a pele de um camundongo nude (veja o boxe), desenvolve-se uma
massa tumoral chamada teratoma. Nesse tumor coexistem clulas que
permanecem indiferenciadas e clulas diferenciadas dos mais diversos tipos
(glandulares, epiteliais, sseas, musculares etc.), embora sem nenhuma
organizao funcional.
Os camundongos nude receberam este nome por no apresentarem plos. Entretanto, mais surpreendente do que isso
o fato de nascerem sem a glndula timo. Esta caracterstica
determinada por um gene recessivo, denominado nu. Por no
possuir timo, estes camundongos so incapazes de constituir
linfcitos T, essenciais para muitas respostas imunolgicas.
Como so incapazes de reconhecer e rejeitar enxertos de
clulas derivadas de outros organismos, so muito utilizados
no estudo de tumores em geral.
CEDERJ 191
Esse experimento comprovou que a proliferao de clulas

O QUE LIF?
embrionrias e sua diferenciao no que se tornar um organismo so
Alm de aminocidos,
glicdios e lipdeos,
as clulas dependem
de vrios peptdeos
sinalizadores do
meio extracelular
para permanecerem
saudveis
so os fatores,
de crescimento,
de diferenciao
e outros. Vrias
dessas molculas
j so conhecidas,
e sua importncia
para a clula j est
determinada. O LIF
(fator inibidor da
leucemia), mencionado
no texto, uma
dessas molculas.
Caso ele deixe de ser
produzido, por algum
motivo, o indivduo
desenvolver leucemia,
o que mostra que, para
que nossas clulas se
mantenham saudveis,
preciso que elas
sejam constantemente
guiadas em seu
comportamento por
esses sinais externos.
A ao conjunta e
coordenada do LIF
e dos demais fatores
garante a manuteno
e renovao saudvel
dos diversos tipos
celulares que compem
um organismo.
um fenmeno complexo. Em contrapartida, clulas da massa central do

blastocisto dissociadas podem ser mantidas em cultura, proliferandose sem se diferenciar, desde que seja adicionado ao meio de cultivo LIF,
ou fator inibidor de leucemia (veja observao na lateral). Na ausncia desse
fator, essas clulas se agregam espontaneamente, dando origem a massas
semelhantes aos teratomas que se desenvolvem nos camundongos nude.
Durante o desenvolvimento, a intercomunicao celular resulta
na gerao e transmisso de sinais especficos de cada clula com suas
vizinhas, determinando o comportamento subseqente destas (Aula 13 de
Biologia Celular I). Dentre os milhares de sinais que a clula pode receber
do meio ambiente, quais so aqueles que encaminham as clulas-tronco
embrionrias a seguir uma determinada via de diferenciao? J existem
estudos mostrando serem necessrios vrios fatores de diferenciao
atuando no tempo e na seqncia corretas para que determinado
tipo celular se diferencie a partir de clulas pluripotentes. S para
voc ter idia da complexidade do sistema, mais de 2.000 fatores de
crescimento j foram identificados. Apesar da enorme complexidade desse
processo, j possvel, em laboratrio, induzir a diferenciao de uma
cultura de clulas-tronco embrionrias em certos tipos celulares. Questes
ticas relacionadas utilizao de embries impedem que essas tcnicas
de terapia celular sejam aplicadas na cura, por exemplo, de diabetes do
tipo I. A idia de reparar coraes enfartados, articulaes atacadas pela
artrose e pncreas inutilizados pela diabetes (Figura 12.3) com clulastronco comeou a ser uma realidade a partir de uma outra descoberta:
clulas indiferenciadas persistem no indivduo aps o nascimento e o
acompanham durante toda a vida adulta.
192 CEDERJ
Blastocisto
Remoo da camada
externa de clulas
MDULO 3
AULA
Placa de cultura
de clulas
12
Blastocisto em cultura
Massa interna
de clulas
Camada de
clulas suporte
Massa interna
de clulas
Desagregao das
clulas
Adio de fatores
de diferenciao
especficos
Disperso das clulas
em novas colnias
Novas colnias
formadas
Grupos de clulas
Fatores de
diferenciao
Colnias de
clulas-tronco
embrionrias
Transferncia
das clulas para
tecidos lesados
Clulas musculares
cardacas
Clulas pancreticas
Cartilagem e tendes
Figura 12.3: Resumo das etapas do cultivo de clulas-tronco embrionrias. Embora a metodologia de obteno
e manuteno de clones de clulas-tronco j esteja dominada, a induo de diferenciao e real transferncia
dessas clulas para pessoas ainda est em fase experimental. Em princpio, a adio de fatores de diferenciao
especficos levar diferenciao das colnias de clulas-tronco embrionrias em virtualmente qualquer tipo
celular (adaptado de Scientific American, 1999. Roger Pedersen).
CEDERJ 193
impossvel falar em manipulao de embries, transplante de

clulas e zigotos sem que venham lembrana as experincias com a
clonagem de animais, como a ovelha Dolly (veja o boxe). Muito se tem
aprendido sobre o comportamento de clulas-tronco embrionrias e do
adulto com esse tipo de procedimento em animais.
Dolly. Por que essa ovelha ficou to famosa?

Em 1997 nasceu a ovelha Dolly. Ela ficou mundialmente
conhecida por ter sido o primeiro mamfero clonado. Como
assim? O cdigo gentico (DNA nuclear) de Dolly era idntico
ao das clulas somticas de outra ovelha. O processo consistiu
em retirar o ncleo de uma clula da glndula mamria de uma
ovelha e inseri-lo num vulo cujo ncleo havia sido previamente
removido. Aps a passagem de uma corrente eltrica, o ncleo
daquela clula mamria passou a se comportar como se fosse o
ncleo de um zigoto, dividindo-se e dando origem, sucessivamente,
mrula e ao blastocisto. Esse embrio foi implantado no tero
de uma ovelha de aluguel e de seu desenvolvimento nasceu
Dolly (Figura 12.4).
Dolly foi o primeiro sucesso. Antes dela, centenas
de tentativas de clonagem fracassaram. A cada fracasso, os
pesquisadores aprendiam um pouco mais. Por exemplo, apenas
QUIESCENTE
Equivale ao perodo
G0, quando a clula
sai da seqncia G1S-G2-M.
TELMERO
Extremidade do
cromossoma na
qual o DNA possui
uma seqncia
caracterstica que
replicada de forma
diferente.
clulas que estivessem na fase
QUIESCENTE
do ciclo celular podiam
ser utilizadas na clonagem. Para isso, as clulas retiradas da ovelha

foram cultivadas com uma quantidade de nutrientes que impedia
sua entrada em G1 (reveja a Aula 1 de Biologia Celular II).
Apesar do sucesso do experimento, Dolly viveu apenas 6
anos. Foi sacrificada por haver comeado a desenvolver vrias
doenas degenerativas (artrose, por exemplo), tpicas de ovelhas
velhas. O que aconteceu com Dolly, e que talvez tenha representado
a maior lio aprendida com a sua criao, que a clula cujo
ncleo foi utilizado para ger-la j havia se dividido diversas
vezes durante a vida da ovelha-me (doadora do ncleo). Ocorre
que, aps cada diviso celular, os
TELMEROS
dos cromossomos
ficam um pouco mais curtos, o que, acredita-se, seja um sinal do

envelhecimento celular. Assim, Dolly geneticamente tinha a idade
de sua me mais sua prpria idade.
194 CEDERJ
MDULO 3
12
Isso serviu de alerta para os pesquisadores, mostrando-lhes que,
AULA
apesar da aparncia jovem, o envelhecimento de um clone precoce.

Transposto para a manipulao de embries, isso significa que realizar
um experimento com embries para regenerar clulas pancreticas
de um diabtico, por exemplo, gerar clulas com a mesma idade
biolgica do indivduo doador. Isso d o que pensar, no d?
Ovelha doadora de clula

somtica de onde foi retirado
o ncleo (me biolgica)
Doadora
do ovcito
Ovcito
Doadora
do ncleo
Remoo do
ncleo
Ovcito
enucleado
Ncleo do
doador
nova clula
(embrio)
Injeo do
ncleo doado
Ovelha onde foi

implantado o embrio
(me de aluguel)
Dolly
Figura 12.4: A ovelha Dolly foi produzida a partir de um processo de clonagem pioneiro.
CEDERJ 195
EXISTEM CLULAS-TRONCO EM ORGANISMOS ADULTOS?

Apesar do grande potencial que as tcnicas de clonagem associadas
manipulao de clulas-tronco embrionrias podem trazer, os entraves
ticos para esse tipo de procedimento so do mesmo porte de sua
complexidade cientfica. Afortunadamente, os blastocistos no so a
nica fonte de obteno de clulas-tronco.
Aps o nascimento, a diversidade celular j se encontra bastante
definida. Mesmo assim, muitos tecidos se renovam continuamente. Essa
renovao depende de populaes de clulas-tronco que persistem no
indivduo adulto. Entretanto, as opes para diferenciao dessas clulastronco do adulto (CTA) so menores que nas clulas-tronco embrionrias.
Seu comportamento em cultura tambm diferente, sendo muito mais
difcil manter as culturas por longos perodos, enquanto as culturas de
clulas oriundas de blastocistos so mantidas por um ano ou mais.
Nos indivduos adultos persistem clulas-tronco capazes de, sob
estmulos especficos, entrar em diviso, gerando novas clulas-tronco
ou clulas precursoras especficas, que prosseguiro se dividindo e se
diferenciando. Esse processo muito interessante, na medida em que a
clula-tronco em si se divide pouco. Suas sucessoras que se dividem com
mais velocidade e se diferenciam com maior intensidade, amplificando
a populao celular sem comprometer a linhagem primordial (Figura
12.5). Entretanto, clulas muito diferenciadas no mais se dividem, como
o caso dos neurnios, das hemcias e dos linfcitos. Dessa maneira,
entende-se por que populaes relativamente pequenas de clulas-tronco
so capazes de prover a renovao celular de tecidos como o sangue, a
pele, os cabelos e o revestimento do intestino.
Clula-tronco
Clula
intermediria
Amplificao
Clula diferenciada
terminal
Figura 12.5: Quando uma clula-tronco se divide, uma das clulas-filhas fica comprometida para diferenciao, enquanto a outra idntica clula-tronco primordial. A clula comprometida se dividir vrias vezes,
gerando tipos intermedirios cada vez mais especializados, at a formao de clulas totalmente diferenciadas, que no mais se dividiro.
196 CEDERJ
MDULO 3
12
AS CLULAS-TRONCO HEMATOPOITICAS
AULA
Uma das dificuldades de se estudar as clulas-tronco do adulto

que, alm de no existirem grandes quantidades delas em cada tipo
de tecido, elas tambm no possuem uma morfologia caracterstica.
Em alguns tecidos, como a pele e o epitlio que reveste o intestino, as
clulas-tronco ocupam nichos especficos. J no msculo estriado, os
mioblastos-satlite se encontram dispersos entre as fibras musculares,
s quais, sob determinados estmulos, fundem-se, promovendo seu
crescimento. No caso das clulas da linhagem hematopoitica, as
clulas-tronco residem na medula ssea. A partir de um tipo precursor
(as clulas-tronco
HEMATOPOITICAS,
HEMATOPOITICO
De hemato: sangue
+ poese: formao;
relativo formao do
sangue.
ou CTH) tm origem hemcias,
leuccitos e plaquetas (Figura 12.6).
Neutrfilo
Clula precursora
mielide
Clula precursora
linfide
Clula-tronco
hematopoitica
Clula hematopoitica
multipotente
Linfcito T
Linfcito B
Hemcias
Clula precursora
eritride
Figura 12.6: Ao se dividir, uma clula-tronco da linhagem hematopoitica pode dar origem a clulas multipotentes que, de acordo com os estmulos recebidos, diferenciam-se em precursores de clulas mielides, clulas
linfides ou hemcias. Cada um desses tipos celulares intermedirios capaz de se dividir, amplificando a
prognie da clula-tronco que lhes deu origem; entretanto, linfcitos, neutrfilos e eritrcitos so clulas muito
diferenciadas e no se dividem mais.
CEDERJ 197
O QUE DETERMINA SE, AO SE DIVIDIR, UMA CLULATRONCO HEMATOPOITICA DAR ORIGEM A OUTRA
CLULA-TRONCO HEMATOPOITICA OU ENTRAR EM
ROTA DE DIFERENCIAO (CLULA PROGENITORA
MULTIPOTENTE)?
Essa uma questo complexa que comea a ser respondida.
As clulas-tronco hematopoiticas (CTH) expressam em sua superfcie
a protena notch. Por sua vez, um outro tipo de clula-tronco que
tambm reside na medula, as clulas-tronco estromais (CTE), possuem
um receptor para notch. Quando h o reconhecimento (adeso) entre a
protena notch da CTH e o seu receptor em CTE, a primeira permanecer
como clula-tronco aps a diviso. Na ausncia desse reconhecimento,
a clula entrar em rota de diferenciao ou ento morrer (Figura 12.7).
A protena notch no o nico fator envolvido na deciso sobre o futuro
das CTH que se dividem. O sistema bem mais complexo, envolvendo
o mtuo reconhecimento de outras protenas sinalizadoras.
notch
Clula-tronco
hematopoitica
Comprometida para diferenciao
Receptor de notch
Clula-tronco
estromal
Persiste como CTH
Figura 12.7: A sinalizao resultante da interao com outras clulas resguarda a CTH no seu estado primitivo.
As clulas-filhas no ligadas a uma CTE entram na rota de diferenciao em clula progenitora.
198 CEDERJ
MDULO 3
12
Uma vez estabelecido o comprometimento para a diferenciao,
AULA
entram em ao outros fatores que induzem formao de determinado

tipo de clula do sangue. Uma reduo dos nveis de oxignio do sangue,
por exemplo, leva os rins a secretar maiores quantidades do hormnio
eritropoietina na circulao. A eritropoietina, por sua vez, aumenta a
produo de eritrcitos a partir de clulas progenitoras CFC-E (clulas
formadoras de colnias de eritrcitos). Essas clulas do origem a
eritrcitos maduros ao final de apenas seis ciclos de diviso. As prprias
CFC-Es so derivadas de outras clulas precursoras e, na falta de
eritropoitina, no apenas no se dividem como morrem rapidamente.
A existncia de clulas hematopoiticas precursoras conhecida
h bastante tempo, tanto que so utilizadas em transplantes de medula,
principalmente para pacientes portadores de leucemias. A grande
surpresa, esta bem mais recente, foi a descoberta desse segundo tipo
de clula-tronco residente na medula, as clulas-tronco estromais ou
mesenquimais, aquelas que possuem o receptor para notch.
UMA CLULA INICIAL, DIVERSAS POSSIBILIDADES DE

DIFERENCIAO
Pois , na medula ssea coexistem dois tipos de clulas-tronco:
hematopoiticas (CTH), que do origem a todas os tipos de
clulas do sangue: eritrcitos, linfcitos de todos os tipos, neutrfilos,
basfilos, eosinfilos, moncitos, macrfagos e plaquetas;
estromais (CTE), capazes de originar clulas sseas, musculares
cardacas, cartilaginosas, adipcitos e outros tipos de clulas do tecido
conjuntivo e dos tendes. Grande volume das pesquisas sobre terapia
celular com clulas-tronco adultas tem-se concentrado nesse tipo celular.
Embora vrios sucessos teraputicos tenham sido alcanados, ainda
existem muitas dvidas quanto ao real efeito desse tratamento.
No se sabe se a regenerao tissular observada resultante
da proliferao e diferenciao das clulas estromais injetadas no
rgo doente (veja o boxe) ou se estas apenas sinalizam (estimulam)
a proliferao e diferenciao de clulas que j existiam naquele local.
Outra grande dvida quanto ao controle da diferenciao das clulastronco, pois se um mesmo tipo celular pode gerar tanto msculo quanto
osso, como garantir que as clulas injetadas vo assumir o comportamento
correto? Devido a essas incertezas, esses tratamentos s so aplicados
a pacientes sem nenhuma outra possibilidade teraputica.
CEDERJ 199
O Brasil j utiliza clulas-tronco com fins teraputicos

No ano 2001, foi realizado pela primeira vez no Brasil um procedimento em
pacientes que haviam sofrido enfarto agudo do miocrdio: a injeo em seu corao de
clulas-tronco autlogas (filtradas do sangue dos prprios pacientes). Dos 12 pacientes,
todos na fila para um transplante, 10 sobrevivem sem as enormes limitaes que a
insuficincia cardaca ocasionava. Antes do transplante, alguns mal tinham fora para
alimentar-se sozinhos.
Esse procedimento, entretanto, ainda est nos seus primrdios, pois, como
assinalado anteriormente, as clulas-tronco estromais podem se diferenciar em adipcitos,
ostecitos e outros tipos celulares que no apenas no so contrteis como podem ocasionar
maiores danos ao corao lesado. Uma pergunta que os pesquisadores se empenham
em responder : como ensinar as clulas-tronco a estabelecer-se nos locais onde so
necessrias e diferenciar-se em um tipo especfico? No h dvida de que as molculas da
matriz extracelular e fatores secretados ou presentes na superfcie das clulas de um tecido
especfico exercem influncia decisiva nesse processo. Aparentemente, uma vez colocadas
junto ao tecido muscular cardaco, as clulas-tronco so induzidas pelas clulas vizinhas
a se diferenciar nesse mesmo tipo celular.
CLULAS-TRONCO NERVOSAS
A descoberta de clulas-tronco no crebro causou grande euforia,
pois abriu a perspectiva de cura para doenas degenerativas, como os
males de Alzheimer e de Parkinson, alm de possibilitar a recuperao
de seqelas causadas por acidentes. Apesar disso, no crebro adulto essas
clulas do origem apenas a clulas da glia (astrcitos e oligodendrcitos),
embora se saiba que durante o desenvolvimento embrionrio as clulas
das cristas neurais resultem tanto em clulas da glia como em neurnios
e, conforme suas rotas de migrao no embrio, em msculo liso e
melancitos. A induo da diferenciao dessas clulas em neurnios
funcionais ainda no foi estabelecida.
Entretanto, continua havendo a possibilidade de que sejam
descobertos fatores que induzam proliferao e migrao de clulastronco do sistema nervoso central para reas lesadas. Essa esperana
provm da observao de que, em roedores, clulas-tronco provenientes
do hipocampo foram cultivadas in vitro e reimplantadas prximo ao
bulbo olfatrio no crebro do animal doador, onde formaram sinapses
e passaram a se comportar como neurnios olfatrios.
200 CEDERJ
MDULO 3
12
Um outro resultado animador foi obtido na Sucia, onde, graas
AULA
a uma legislao particular, foram realizados implantes de clulas-tronco

retiradas de embries em pacientes portadores do mal de Parkinson,
doena degenerativa em que os neurnios secretores de dopamina so
destrudos. Esses pacientes apresentaram uma significativa melhora do
quadro clnico; entretanto, esse tipo de terapia no se tornou rotineiro
nem naquele pas. Alm disso, o mesmo tipo de tratamento falhou em
portadores do mal de Alzheimer.
A utilizao de clulas-tronco neuronais possui um fator
complicador adicional: os novos neurnios devero refazer as rotas
sinpticas perdidas com a destruio das fibras nervosas (axnios, veja
Aula 10) originais. Entretanto, estamos apenas assistindo ao nascimento
da tecnologia das clulas-tronco, e os progressos nesta rea no apenas
tm sido fantsticos como tambm muito rpidos.
A RENOVAO DOS EPITLIOS

No epitlio do trato digestivo, as clulas-tronco se localizam
em criptas (Figura 12.8) e do origem a muitos tipos celulares: clulas
absortivas, secretoras (de muco), de Paneth (relacionadas imunidade)
e enteroendcrinas. A renovao desse epitlio muito rpida, apesar
de as clulas-tronco ali se dividirem apenas uma vez a cada 24 horas.
J o ciclo celular nas clulas intermedirias (ainda no completamente
diferenciadas) leva apenas duas horas, evidenciando o efeito amplificador
da proliferao dessas clulas.
O mais interessante nesse sistema como essas clulas-tronco do
origem a clulas to diferenciadas (s as clulas enteroendcrinas podem
ser de mais de quinze tipos!); alm disso, a distribuio dessas clulas
tambm no aleatria. As clulas de Paneth permanecem no interior
das criptas, enquanto as demais migram para a superfcie. Subtipos de
laminina distribudos diferencialmente na lmina basal das criptas e das
vilosidades parecem sinalizar o sentido de migrao dos diferentes tipos
celulares (Figura 12.8).
Um ponto interessante que, em camundongos com mutao
para o gene da protena sinalizadora notch (ela, de novo), produzida
uma quantidade excessiva de clulas enteroendcrinas, em detrimento
dos demais tipos. Um outro tipo de mutao, em outro gene regulador,
CEDERJ 201
d origem a camundongos em que as clulas esto todas na superfcie e

no h formao de criptas nem manuteno de clulas-tronco, o que
impede a renovao do epitlio intestinal e causa a morte dos portadores
logo aps o nascimento.
A polmica das clulas-tronco embrionrias

Embora muito se tenha avanado no conhecimento e na aplicao teraputica das
clulas-tronco de adultos, elas apresentam algumas limitaes importantes. A primeira
que seu cultivo mais difcil do que o de clulas obtidas a partir de blastocistos. Outra
o fato de que as clulas-tronco de vrios tipos celulares (neurnios, por exemplo) so
de difcil identificao. O tratamento de doenas geneticamente determinadas tambm
no pode ser feito com clulastronco de seu portador. Os implantes de clulas-tronco
da medula ssea envolve riscos, muitos deles ainda desconhecidos, pois clulas com
diferentes comprometimentos de diferenciao so injetadas num determinado tecido.
Um dos riscos terminar desenvolvendo tecido sseo entremeado ao msculo cardaco,
o que j aconteceu em experimentos com animais.
A cada ano, as clnicas de fertilizao so obrigadas a descartar um enorme
nmero de blastocistos que sobram dos tratamentos de fertilizao assistida. Esses
blastocistos nunca sero implantados no tero de nenhuma mulher. So clulas ainda
muito distantes do que se poderia chamar de feto. Muito se poderia aprender sobre o
processo de proliferao e diferenciao celular utilizando esses blastocistos. Muitas
vidas poderiam ser salvas se essas clulas pluripotentes pudessem ser utilizadas para a
recuperao funcional do pncreas de um diabtico ou das conexes nervosas de um
paciente com mal de Alzheimer ou leso da medula; entretanto, presses de grupos
religiosos tm conduzido os governos da maioria dos pases a vetar essas pesquisas.
202 CEDERJ
MDULO 3
Clulas epiteliais migram do seu local

de nascimento no fundo da cripta
at o topo da vilosidade intestinal,
onde se desprendem. Esse trajeto
dura de 3 a 6 dias
AULA
12
Vilosidade intestinal
(no h diviso celular)
Vista da cripta
intestinal em corte
Clulas epiteliais
Cripta
Vista da vilosidade
intestinal em corte
Tecido conjuntivo frouxo
Clulas diferenciadas
(no se dividem)
Direo da
migrao celular
Clulas progenitoras
que se dividem a cada
2 horas
Clulas de Paneth
(no se dividem)
Clulas-tronco
(se dividem a cada
24 horas)
Figura 12.8: (a) A renovao do epitlio intestinal depende de clulas-tronco residentes em criptas. A rpida
diviso dessas clulas d origem a outras clulas, chamadas progenitoras, que ao alcanar a superfcie das
vilosidades geram os diferentes tipos celulares. As clulas de Paneth tambm se originam a partir das clulastronco, mas migram na direo do fundo da cripta. (b) Corte histolgico do intestino delgado. Esto apontadas
(1) as clulas caliciformes (secretoras de muco) e (2) as clulas absortivas. Imagem cedida do Atlas digital do
Laboratrio de Microscopia eletrnica da UERJ http://www2.uerj.br/~micron/atlas/Menu.htm.
CEDERJ 203
Enquanto ao epitlio digestivo cabe absorver todos os nutrientes

atuando como uma barreira seletiva entre o meio extra e o intracorporal,
da sua estrutura uma fina camada de clulas fortemente ligadas
umas s outras atravs de junes de adeso e de ocluso (Aulas 5 e
6) a pele, essencialmente relacionada funo de revestimento.
A absoro de substncias atravs da pele muito pequena, cabendo a
este verdadeiro rgo impedir, por um lado, a perda excessiva de fluidos
e sais corporais e, pelo outro, o efeito de agentes ambientais sobre o
organismo (Figura 12.9). A impermeabilidade da pele depende de duas
de suas caractersticas: 1 a camada mais externa, composta por clulas
mortas e queratinizadas que descamam constantemente (veja o boxe mais
adiante); 2 das junes de adeso e de ocluso.
Figura 12.9: Sem a pele, seramos verdadeiras

esponjas sob a chuva e secaramos rapidamente
sob o sol. A pele nos protege de variaes no
meio interno, mesmo que as condies externas
mudem o tempo todo.
MULTIESTRATIFICADA
Em muitas camadas,
ou estratos.
A estrutura MULTIESTRATIFICADA da pele (Figura 12.10) foi, certamente,

um dos fatores capitais para o sucesso da conquista do ambiente terrestre.
Em contato com a lmina basal, as clulas so mais indiferenciadas. Nessa
camada esto as clulas-tronco. Acima desta, est a camada espinhosa,
que tem este nome pelo seu aspecto, resultante da grande quantidade de
desmossomas que se forma entre suas clulas. Aps a camada espinhosa,
situam-se as clulas granulosas, onde, alm de junes de adeso, junes
de ocluso formam uma barreira eficaz contra perda de lquidos e sais
para o meio externo. As clulas desta camada tambm contm grnulos
de melanina, responsveis pela colorao da pele. Progressivamente as
clulas granulosas vo morrendo, formando vrias camadas de clulas
mortas e queratinizadas.
As camadas externas da pele so substitudas centenas de vezes
ao longo de nossa vida. Na camada basal, residem as clulas-tronco
indiferenciadas que capitaneiam o processo de diviso e diferenciao.
204 CEDERJ
MDULO 3
, que as mantm fortemente
12
Essas clulas so ricas na integrina
AULA
aderidas lmina basal (onde esto os receptores para essa integrina).

Completada a diviso dessas clulas, as clulas-filhas que expressarem
menos integrinas se descolaro da membrana e iniciaro o processo de
migrao e diferenciao para as camadas superiores da pele.
!
A descamao das clulas queratinizadas um dos principais constituintes do p que se
acumula sobre os mveis de nossa casa. caros microscpicos costumam se alimentar dessas clulas. Esses caros so poderosos alrgenos para diversas pessoas. Portanto, se voc
alrgico poeira, temos uma novidade para voc: sua alergia causada por caros que se
alimentam de sua prpria pele morta!
Nesse trajeto, diferentes tipos de queratina, caractersticos para cada

camada, vo sendo expressos, ao mesmo tempo que o ncleo e as organelas
citoplasmticas vo se degradando atravs de uma rota de morte celular
programada, ou apoptose (esse assunto ser estudado no futuro).
Clula queratinizada
descamando
Clula mortas
queratinizadas
Clulas granulosas
Clulas espinhosas
Clulas basais
Lmina basal
Tecido conjuntivo
a
Clula basal
subindo
Clula basal
em diviso
Figura 12.10: (a) Representao esquemtica das diversas camadas da pele. (b) Corte histolgico de pele apontando (1) a camada de clulas mortas e queratinizadas e (2) as diversas camadas do epitlio. Imagem cedida do
Atlas digital da UERJ retirada do site http://www2.uerj.br/~micron/atlas/menu.htm.
CEDERJ 205
A proliferao in vitro de clulas epiteliais j uma realidade

e tem sido empregada no tratamento de queimados. Para isso muito
contriburam as pesquisas sobre a interao entre clulas epiteliais e
molculas da membrana basal, demonstrando mais uma vez que a pesquisa
bsica no pode nem de longe ser considerada um luxo intil. Quando
menos se espera, aqueles conhecimentos que pareciam to tericos tornamse fundamentais para a resoluo de uma questo prtica.
CONCLUSES
A terapia celular, utilizando clulas-tronco, vem avanando rapidamente.
As limitaes decorrentes da proibio da utilizao de embries humanos em
quase todos os pases, inclusive o Brasil, vm sendo superadas pelos avanos obtidos
no conhecimento das potencialidades de diferenciao das clulas-tronco adultas.
A mdio prazo essa tecnologia dever substituir em larga escala, e com muitas
vantagens, os transplantes de rgos.
Para que esse objetivo seja atingido, fundamental tornar rotineiros os seguintes
processos:
coleta e proliferao extensiva de clulas-tronco, a fim de gerar quantidades
suficientes de clulas;
domnio das etapas de induo da diferenciao em tipos celulares
predeterminados;
integrao anatmica e funcional das clulas transplantadas ao tecido
adjacente.
Um procedimento j disponvel em alguns hospitais e centros de pesquisa a
preservao, por congelamento, de clulas-tronco do cordo umbilical. Assim,
o indivduo disporia de uma fonte de clulas-tronco do tipo e do doador ideais
(embrionrias e autlogas) para utilizao em caso de necessidade.
206 CEDERJ
MDULO 3
Clulas-tronco so clulas indiferenciadas pluripotentes, isto , podem se dividir

e originar diversos tipos celulares.
No desenvolvimento embrionrio, at o estgio de 16 clulas, as clulas do
embrio permanecem totipotentes, isto , se dissociadas umas das outras cada
uma pode originar um indivduo completo.
Clulas retiradas da massa interna do blastocisto possuem potencial de originar
qualquer tipo celular, exceto a placenta.
Ao se dividir, uma clula-tronco d origem a uma clula igual a ela e outra
comprometida para diferenciao.
Conforme se multiplica e se diferencia, esta clula amplifica o efeito de
propagao da clula-tronco original.
Embora j tenham sido clonados animais completos, como a ovelha Dolly,
o grande potencial de manipulao de clulas-tronco embrionrias seria a
regenerao de tecidos e clulas danificados por traumas ou doenas, como
a artrose e a diabetes.
No adulto, persistem clulas-tronco pluripotentes em diversos rgos.
Na medula ssea, coexistem dois tipos de clulas-tronco: as hematopoiticas e
as estromais.
A regenerao de neurnios particularmente complicada, pois, alm de
proliferar, os axnios dessas clulas devem seguir um caminho determinado e
recompor as sinapses com outras clulas.
Na pele, as clulas-tronco permanecem na camada basal, enquanto no epitlio
intestinal residem em criptas. Um mesmo tipo de clula-tronco d origem a vrios
tipos de clula epitelial.
A terapia celular j permite a fabricao em laboratrio de pele para enxertos
em vtimas de queimaduras.
Clulas-tronco estromais injetadas no corao de enfartados provocaram
melhora na contratilidade de reas lesadas do corao dessas pessoas.
Existe a possibilidade de recuperao funcional de ossos e cartilagens, assim
como de rgos como pncreas e fgado, com o uso da terapia celular.
CEDERJ 207
AULA
12
RESUMO
EXERCCIOS
1. O que caracteriza uma clula-tronco?
2. O zigoto uma clula-tronco?
3. O que o blastocisto?
4. De onde so retiradas as clulas-tronco embrionrias?
5. Como se pode produzir um animal clonado, como a ovelha Dolly?
6. Qual a principal desvantagem da clonagem de animais?
7. O que so clulas-tronco do adulto?
8. Que tipos de clulas-tronco existem na medula ssea?
9. Que tipos celulares podem originar-se a partir deles?
10. O que determina se, ao se dividir, uma clula-tronco vai entrar em diferenciao
ou permanecer indiferenciada?
11. Onde se localizam as clulas-tronco do epitlio intestinal?
12. Onde se localizam as clulas-tronco do tecido muscular esqueltico?
13. Em que aplicaes teraputicas as clulas-tronco j esto sendo utilizadas?
14. Quais as perspectivas de uso dessas clulas para outras doenas?
208 CEDERJ
objetivos
AULA
A clula apoptptica
13
Definir morte celular programada

Diferenciar apoptose de necrose
Listar e caracterizar as fases do processo de
apoptose e a sua base molecular
Diferenciar as duas vias possveis de morte por
apoptose
Enumerar exemplos biolgicos de ocorrncia da
apoptose
Enumerar exemplos de outros tipos de morte
celular programada
Pr-requisito
Para acompanhar melhor esta aula,
voc dever rever as Aulas 13 e 14
de Biologia Celular I (Receptores de
membrana e princpios de sinalizao
celular I e II) e tambm a Aula 1 de
Biologia Celular II
(O ciclo celular).
Biologia Celular II | A clula apoptptica
INTRODUO
Em um organismo multicelular, as clulas possuem mecanismos finos de

controle para regular os processos de proliferao e sobrevivncia, para crescer
MORTE CELULAR
e dividir (Aulas 1 e 2). O nmero de clulas presentes em um organismo
PROGRAMADA
muito bem regulado pela ao conjunta dos processos de proliferao e de
Processo celular ativo

que leva morte
celular. Geralmente
ocorre em resposta a
fatores ambientais ou
a danos fisiolgicos
detectados
pela clula.
morte celular.
As clulas podem morrer de duas maneiras: acidental ou programada. Os
processos de morte no-acidental so promovidos e finamente regulados por
protenas sintetizadas pela prpria clula que ir morrer. Tal suicdio celular
chamado de
MORTE CELULAR PROGRAMADA.
Este processo pode ocorrer em
resposta a diversos sinais ambientais e detectado, regulado e ativado por
APOPTOSE
um complexo sistema molecular.
Tipo de morte
celular programada
caracterizada
por mudanas
morfolgicas
especficas. O nome
vem do grego
antigo e significa
queda de folhas ou
ptalas. A apoptose
observada em clulas
de metazorios,
incluindo plantas
e animais, com
genes especficos
responsveis pela
expresso de protenas
essenciais para o
processo.
Existem diversos tipos de morte celular programada. O primeiro tipo, e

tambm o mais comumente observado, a
APOPTOSE,
que apresenta um
conjunto de caractersticas morfolgicas e moleculares especficas a serem

abordadas nesta aula. Tambm veremos como esse processo ocorre em
diversas etapas de nosso desenvolvimento e como falhas nessa funo esto
relacionadas a algumas doenas.
AS CLULAS NASCEM, CRESCEM, REPRODUZEM-SE E...

MORREM!
Cada uma das clulas que convive em um organismo multicelular
exposta a centenas de diferentes sinais ambientais. Receber e enviar
sinais fundamental para a sobrevivncia de qualquer clula (como foi
visto na Aula 13 de Biologia Celular I). A combinao destes sinais
especfica para cada tipo celular, e alguns deles levam a processos de
proliferao e diferenciao. J a ausncia de sinais (no apenas os de
proliferao) aciona uma maquinaria molecular que ativa um programa
de suicdio celular.
O nome morte celular programada deve-se ao fato de ser um
tipo de morte organizado e orquestrado pelo prprio genoma da clula.
Observa-se a ocorrncia de morte celular programada mesmo em alguns
protozorios, e at acredita-se que nestes seres isto atue como um
mecanismo de controle populacional. Uma situao de superpovoamento
conduz reduo ambiental de nutrientes (ausncia de sinais de
sobrevivncia), e isso induziria uma diminuio populacional. Acredita-se
tambm que protozorios infectados por vrus podem suicidar-se para
210 C E D E R J
MDULO 3
13
evitar que a infeco se alastre para o restante da populao. De uma
AULA
maneira altrusta ou defensiva, os microorganismos foram os primeiros

a utilizar mecanismos de morte celular programada.
Historicamente, a morte celular programada foi descrita no sculo
XIX por CARL VOGT. Ele observou destruio celular no desaparecimento
da notocorda e no surgimento das vrtebras em uma espcie de anuro.
Hoje sabemos que esta destruio celular fruto de mecanismos de
morte celular programada. Em 1863, AUGUST WEISMANN, pesquisando
CARL VOGT
o desenvolvimento embrionrio de moscas, descreveu o processo de
(1817-1895)
histlise: clulas mortas extremamente vacuolizadas, com ncleos
Naturalista suo,
rduo defensor das
idias de Darwin,
foi o primeiro reitor
da Universidade
de Genebra, onde
trabalhou com
histologia animal
comparada, geologia,
entre outros assuntos.
Foi o primeiro
a descrever os
sifonforos. Saiba
mais sobre Vogt
e sua obra no site
www.darse.org/
images/ portrait_
vogt.jpg
condensados. Naquela poca no se deu muita ateno a estas observaes,

e o tempo passou.
Em 1972, o patologista australiano A NDREW W YLLIE e seus
colaboradores descreveram pela primeira vez um processo de morte
celular programada, que foi ento chamado apoptose. Este tipo de
morte celular, por ser o mais importante e mais bem descrito, ser o
objeto principal de estudo desta aula. Mas no
podemos ter pressa! Antes disso, precisamos
diferenciar a apoptose do principal tipo de
morte acidental celular: a NECROSE.
A DIFERENA ENTRE SUICDIO E

ASSASSINATO (APOPTOSE VERSUS
NECROSE)
Didaticamente,
consideramos
ANDREW WYLLIE
existncia de duas vias primrias que levam

clulas a morrer. O processo relacionado
morte celular no programada mais
Patologista
australiano,
chefe do
Departamento
de Patologia da
Universidade
de Cambridge
(Inglaterra), criador
do termo apoptose.
conhecido a necrose. Este tipo de morte

celular ocorre quando as clulas recebem algum
tipo de injria, seja ela qumica ou fsica,
causada sempre por agentes externos. Exemplos
de necrose so observados quando clulas so
expostas a condies extremas de temperatura,
falta de oxignio (isquemia), traumas fsicos, entre
outros. importante lembrar que a necrose no
NECROSE
Tambm conhecida
como morte celular
acidental, fruto
de um dano externo
leso por agente
qumico ou fsico
clula. No ocorre
a expresso de
molculas especficas
para este processo.
AUGUST WEISMANN
(1834-1914)
Bilogo alemo,
trabalhou
principalmente com
embriologia de
insetos e crustceos.
Foi um dos
primeiros cientistas
a discordar das
idias de Lamarck,
mostrando que os
caracteres adquiridos
no so herdados.
Saiba mais no site
www.nceas.ucsb.edu/
~alroy/lefa/
Weismann.html
C E D E R J 211
um processo mediado pela ativao de protenas especficas, como

na apoptose. A morte necrtica geralmente catalisada por enzimas
lisossomais e pelo rompimento das organelas celulares. Alm disso, a
morte celular por necrose geralmente atinge vrias clulas ao mesmo
tempo, em uma mesma regio (diferentemente da apoptose), j que
os agentes causadores de necrose geralmente atingem grandes reas
celulares.
A morte necrtica (Figura 13.1) caracteriza-se inicialmente pela
perda da integridade da membrana plasmtica aps o trauma. Este fato
a
Figura 13.1: (a) Seqncia da morte celular por necrose.

(b) Seqncia da morte celular por apoptose.
212 C E D E R J
MDULO 3
13
permite que ocorra uma abrupta e brutal entrada de gua no interior
AULA
da clula, resultando em um inchao da clula e de suas organelas. Com

a continuidade deste processo, as organelas rompem-se e extravasam
no interior do citoplasma seus constituintes. Como resultado, a clula
comea a sofrer um processo de autodigesto, no qual enzimas estocadas
em organelas especficas como endossomas e lisossomas comeam a
degradar os constituintes citoplasmticos. Esta degradao, somada
contnua entrada de gua, acarreta a ruptura total da membrana
plasmtica e o posterior extravasamento dos constituintes citoplasmticos
no meio extracelular (Figura 13.2). Estes contedos internos da clula
(que normalmente nunca esto no meio extracelular) induzem a invaso
de clulas fagocticas (macrfagos) que iro ativar uma forte
INFLAMATRIA
RESPOSTA
do organismo.
Diferentemente da necrose, a apoptose um tipo de morte

celular altamente organizado, tanto no ncleo quanto no citoplasma.
tambm uma morte silenciosa, j que no induz resposta
inflamatria do organismo. Geralmente acomete clulas isoladas e
RESPOSTA
INFLAMATRIA
Resposta imune local de
um tecido a um dano
ou infeco, causada
geralmente por leuccitos
ou macrfagos, ao
lanarem no local
mediadores (como a
histamina) que causam
dor no organismo.
um processo catalisado por molculas que possuem a funo especfica

de ativ-la.
A apoptose se caracteriza por uma seqncia de eventos (Figura 13.1)
bem previsveis. Inicialmente, as clulas apoptticas sofrem um drstico
murchamento de sua estrutura, bem ao contrrio do que acontece na
necrose, em que as clulas incham. Em um epitlio, por exemplo,
uma clula que entrou em processo de apoptose comear a perder as
suas microvilosidades e a desfazer as junes intercelulares. Um fato
importante, que chama muita ateno, que a cromatina desta clula
comea a condensar, concentrando-se na periferia do ncleo. Na etapa
seguinte, o citoplasma da clula apopttica comea a sofrer violentas
movimentaes, dando impresso de que a clula est borbulhando
(Figura 13.2). Este processo, conhecido por
BLEBBING
(borbulhamento),
leva a clula apopttica a fragmentar-se em diversos pedaos

completamente selados por membrana. Estes fragmentos so os corpos
apoptticos. As organelas tambm se fragmentam, mas sem nenhum
tipo de extravasamento. Nesse ponto, j so observados fragmentos
do ncleo carregando pedaos de cromatina hipercondensada que ser
fragmentada nas etapas posteriores da apoptose.
BLEBBING DE
MEMBRANA
Tambm conhecido
como zeiose, a intensa
movimentao do
citoplasma, fruto de
uma atividade ainda
no muito conhecida
das protenas do
citoesqueleto. Em
videomicroscopia,
observa-se uma
frentica formao de
bolhas na clula. Estas
bolhas, por sua vez,
estaro carregadas de
pedaos de organelas e
ncleo com cromatina
fragmentada. Este
evento, mesmo sendo
violento, garante que
no ocorra rompimento
das membranas da
clula. Para ver um
interessante vdeo de
zeiose, viaje pela Internet
em www.cellsalive.com/
apop.htm
C E D E R J 213
Figura 13.2: A figura (a) de um macrfago apapttico: note a intensa

vacuolizao e massas de cromatina condensada no ncleo. Compare com a
figura (b), de uma clula normal.
Estes corpos apoptticos, contendo pedaos de organelas e do

ncleo, modificam drasticamente a composio da membrana plasmtica,
expressando no folheto externo o fosfolipdio FOSFATIDILSERINA que,
em clulas viveis de mamferos, encontrado somente no folheto interno
da membrana plasmtica (Aula 7 de Biologia Celular I). Nos tecidos,
esses corpos apoptticos so fagocitados por clulas da vizinhana (que
no so clulas fagocticas profissionais) ou por macrfagos (Figura
13.3). Como os constituintes citoplasmticos no foram extravasados, os
macrfagos no ativam a resposta inflamatria. Da vem o termo morte
silenciosa, j que o organismo no sofrer nenhum efeito colateral
com a morte de uma ou mais clulas por apoptose.
214 C E D E R J
MDULO 3
13
AULA
Imagem: Fernando Real
Figura 13.3: Os corpos apoptticos so compartimentos selados contendo fragmentos

do ncleo e de organelas que expem na sua superfcie fosfatidilserina. Na necrose
o contedo citoplasmtico extravasado.
Parece difcil? No no! Toda esta seqncia de eventos da

apoptose mediada por um sistema molecular, ou seja, a apoptose
funciona to maravilhosamente graas a uma base molecular de
sinalizao. Certas molculas especiais sero responsveis por cada etapa
descrita anteriormente. Agora, prepare-se: vamos nos aprofundar nesse
mundo interessante e descobrir quem so os atores e atrizes responsveis
por todo esse processo e como eles atuam.
!
O parasita esperto - a translocao de fosfatidilserina do folheto interno para o folheto
externo da membrana um importante passo para a eliminao dos corpos apoptticos,
j que este fosfolipdio no folheto externo chama a ateno de macrfagos, que logo
fagocitaro estes corpos. Parasitas do gnero Leishmania, que necessitam viver dentro
de macrfagos para sobreviver e dividir-se, expressam fosfatidilserina na sua superfcie
para estimular a sua internalizao pelos macrfagos.
BASES MOLECULARES DA APOPTOSE

A morte celular por apoptose um evento extremamente
organizado. Toda a seqncia de alteraes morfolgicas descritas
anteriormente funciona graas a uma rede de sinalizao celular ativada
pela clula que entra no processo de apoptose. Para facilitar o estudo,
dividiremos as bases moleculares da apoptose em seis etapas:
C E D E R J 215
(1) Estmulo: qual o tipo de estmulo que dispara a apoptose?

(2) Gerao do sinal intracelular: em que o estmulo foi
transformado?
(3) Propagao intracelular do sinal
(4) Ativao dos efetores: atividade de enzimas (caspases) que
iniciam a converso da clula ao fentipo apopttico
(5) Clivagem de protenas celulares pelas caspases.
(6) Formao e eliminao dos corpos apoptticos.
Muita calma, pessoal! Ns vamos montar, etapa por etapa, este
interessantssimo quebra-cabea.
A ATIVAO DA APOPTOSE: O ESTMULO

A induo da apoptose em clulas de mamferos pode ocorrer de
duas maneiras distintas. A apoptose pode ser ativada por um estmulo
externo, que geralmente fruto de uma interao receptor-ligante
(Aula 13 de Biologia Celular I). Neste caso particular, as protenas
TNF
(Do ingls tumor
necrosis factor)
famlia de receptores de
membrana relacionados induo de morte
celular programada.
receptoras da superfcie celular so chamadas receptores de morte. Estes

receptores de morte ligam-se a molculas (ligantes) que se encontram
na superfcie de outras clulas; e o resultado a apoptose dessas clulas
(Figura 13.4.a). O receptor de morte mais conhecido o Fas (tambm
chamado Apo1 ou CD95), um tipo de receptor da famlia TNF (do ingls
tumor necrosis factor).
LINFCITOS T
CITOTXICOS
So um tipo de
leuccito responsvel
pela resposta imune
adaptativa capaz
de interagir com
clulas infectadas
por vrus,
protozorios ou
bactrias,
destruindo-as.
O ligante deste receptor chamado muito logicamente, alis

Fas ligante, e expresso principalmente por
LINFCITOS
CITOTXICOS
(Figura 13.4.b). A apoptose induzida por estmulo externo ocorre

principal-mente na interao destes linfcitos com clulas infectadas
por vrus. Estas clulas infectadas expressam em alta quantidade o
receptor Fas e, ao serem reconhecidos pelo Fas ligante da superfcie
dos linfcitos, entram em apoptose, o que bloqueia o prosseguimento
da infeco viral (Figura 13.4.b).
A apoptose tambm pode ser induzida por estmulos internos.
Nesta via de apoptose, a mitocndria desempenha um papel essencial,
como veremos adiante. So estmulos internos, alm de certas condies
de estresse e dano celular; aqueles que resultam do efeito de radiaes,
toxinas e drogas.
216 C E D E R J
MDULO 3
13
AULA
b
a
Ligante de Fas
Fas
Propagao
Modulao por
outros fatores
Ampliao
Divergncia para
alvos mltiplos
Apoptose
Figura 13.4: (a) A ligao entre o receptor de morte

e seu ligante correspondente dispara a morte celular
por apoptose. (b) Clulas infectadas por vrus cometem
suicdio ao serem estimuladas pelo ligante de Fas.
C E D E R J 217
CRIAO E PROPAGAO DO SINAL INTRACELULAR

O estmulo (interno ou externo) gera um sinal intracelular.
Isto , algumas molculas especiais (adaptadoras) iro relacionar o sinal
pr-apoptose (estmulo) a uma via de sinalizao. E, finalmente, estes
adaptadores iro ativar os efetores, uma classe de enzimas responsveis
pelo fentipo de morte celular (Figura 13.4.a).
Na via externa de apoptose, aps a ligao Fas/Fas ligante, uma
molcula adaptadora intracelular conhecida por FADD (do ingls, Fasassociated protein with a death domain) ir se ligar cauda citoplasmtica
do receptor Fas em uma regio conhecida por domnio de morte (ou DD),
presente no receptor Fas e no adaptador FADD. Por sua vez, FADD
tambm possui um outro domnio, conhecido por DED (do ingls death
effector domain), que ir se ligar a uma enzima da classe das caspases
(que possui este domnio DED) e continuar a via (Figura 13.5).
Ufa! Tanta informao deve ter deixado voc cansado! Faa uma
pausa, relaxe por uns minutos antes de continuar com esta aula. Afinal,
voc merece!
Figura 13.5: Na via externa, a protena adaptadora FADD se liga, por um lado,
protena Fas; pelo outro, a uma pr-caspase.
REGULAO, ATIVAO E AO DOS EFETORES DA

APOPTOSE: AS CASPASES
A clula recebeu o estmulo para morrer, transformou este
estmulo molecularmente e agora ocorrer a ativao de enzimas, que
218 C E D E R J
proteases (mais de 12 j foram identificadas) que possuem duas formas:

uma ativa (caspase) e uma inativa (procaspase). O que diferencia estas
formas a presena de uma regio regulatria que precisa ser retirada
para a enzima ficar ativa. Quem retira? Uma outra caspase ativa! Nesta
regio regulatria esto contidos os domnios que vo se ligar s protenas
adaptadoras, como o DED. Veja na Figura 13.6.a como as caspases se
ativam. Alm de se ativarem umas as outras, as caspases so responsveis
pela clivagem das protenas dos componentes do citoplasma e do ncleo
(Figura 13.6.b).
CASPASES
E eu tenho isso? Tem
sim, e ao contrrio do
que o nome sugere,
elas no so protenas
cabeludas.
O nome caspase vem
de cysteine-protease
with aspartate
specificity, ou seja,
uma protease que
possui o aminocido
cistena em seu stio
ativo, e apresenta a
capacidade de clivar
protenas nas regies
que o aminocido
cido asprtico.
As caspases atuam
na degradao de
protenas, como as
laminas nucleares,
na ativao da
DNAse, (ativando
a degradao do
DNA), de protenas
citoplasmticas
e outros eventos
relacionados morte
celular programada.
Figura 13.6: (a) Ativao das caspases: cada enzima fabricada como uma proenzima inativa (procaspase) que
ser ativada por clivagem feita por outra caspase. Uma caspase ativa composta por dois fragmentos clivados
da procaspase. (b) Cascata das caspases: uma caspase ativa capaz de ativar diversas outras caspases, que por
sua vez podem ativar muito mais caspases. Alm disso, estas enzimas estaro degradando substratos celulares.
C E D E R J 219
13
MDULO 3
uma classe de enzimas fundamentais para a apoptose. As caspases so
AULA
literalmente iro destruir a clula por dentro. Estas so as caspases,
A VIA EXTERNA DE ESTIMULAO

Sabendo como as caspases se ativam, podemos agora continuar
a nossa histria das vias de apoptose. Na via externa, a protena
adaptadora FADD, que se conectou cauda citoplasmtica do receptor
Fas, est conectada tambm (via domnio DED) procaspase-8, como
um sanduche (Figura 13.5). Esta ligao libera caspase-8 no citoplasma.
A regio regulatria (que ligava a enzima ao adaptador) permanece presa
ao adaptador, j sem funo, e a caspase-8 ir ativar a procaspase-3,
clivando seu domnio regulador. A caspase-3 ativa conhecida como
caspase efetora, porque ser ela a responsvel pela clivagem de diversas
protenas celulares que resultaro no fentipo clssico da clula
apopttica, alm de ativar outras caspases, criando a cascata das caspases
que levam morte celular (Figura 13.7).
Figura 13.7: O estmulo externo ativa, via FADD, a caspase 8 que, por sua vez, ativar a caspase 3, ou caspase
efetora. A partir da, cada caspase capaz de ativar diversas outras, gerando uma reao em cascata que
se amplifica rapidamente. Alm disso, estas enzimas estaro degradando substratos celulares.
A VIA EXTERNA DE ESTIMULAO: PAPEL DA

MITOCNDRIA NA APOPTOSE
Na apoptose ativada por estmulos internos (condies de
estresse), outros adaptadores sero utilizados. Estes estmulos ativaro
220 C E D E R J
MDULO 3
13
molculas pr-apoptose como as protenas Bax e Bid que iro
AULA
ligar-se s mitocndrias, inibindo especificamente a Bcl-2, uma

protena antiapoptose. Este processo resulta na formao de um poro
na membrana mitocondrial, liberando, no citoplasma, citocromo c e
outras molculas (Figura 13.8). O citocromo c, um dos transportadores
de eltrons da cadeia respiratria (Aula 27 de Biologia Celular I) ir
se associar a uma protena adaptadora (Apaf-1) que permitir sua
ligao a uma procaspase, formando um complexo molecular chamado
apoptossomo, que levar a clula ao fentipo apopttico.
Resumimos, em um esquema simplificado (Figura 13.9), as duas
vias possveis de apoptose.
AS VIAS INTERNA E EXTERNA SE CONECTAM

Um fato muito curioso que as duas vias de apoptose (a de estmulo
externo e interno) podem conectar-se. isso mesmo! Caspase-8 ativa
(da via externa) pode ativar a protena pr-apoptose Bid que ativa a via
mitocondrial de morte celular (Figura 13.10).
Figura 13.8: Ao se ligarem s mitocndrias de uma clula pr-apopttica, as protenas

Bax ou Bid inativam a protena mitocondrial Bcl-2, o que resulta no extravasamento
de citocromo c para o citoplasma. O complexo molecular formado pelo citocromo c,
ATP, Apaf-1 e mais uma procaspase o apoptossomo.
C E D E R J 221
a) Ativao da apoptose pela via externa

Linfcito assassino
Fas ligante
Protena
fas
Protena
adaptadora
Clula-alvo
Agregao
e clivagem de
molculas de
procaspase-8
Procaspase-8
inativa
Caspase-8
ativada
Clula-alvo
apopttica
Cascata de
caspases
b) Ativao da apoptose a partir do meio intracelular
Citocromo c no
espao intermembranas
Protena
adaptadora (APaf-1)
Caspase-9
ativada
Agregao de Apaf-1
e ligao procaspase-9
Ativao do
procaspase-9
Liberao de
citocromo c
e ligao a
Apaf-1
Mitocndria
rompida
Cascata de
caspases
Procaspase-9
inativa
Figura 13.9: Esquema simplificado das duas possveis vias de apoptose.
UMA VEZ INICIADA, A CASCATA APOPTTICA

IRREVERSVEL
Muito bem! A primeira caspase efetora est ativa. E agora?
A ativao em cascata das outras caspases resultar na clivagem de
vrias protenas. Que protenas so estas? Muitas j estudamos em Biologia
Celular I: protenas do citoesqueleto, protenas relacionadas ao reparo e
integridade do DNA, e outras (algumas destas protenas esto relacionadas
no Boxe de ateno a seguir). A degradao enzimtica dessas molculas-alvo
responsvel pelas caractersticas tpicas da apoptose, resumidas aqui:
222 C E D E R J
MDULO 3
13
fragmentao nuclear (devido degradao das laminas
AULA
nucleares)
degradao do DNA genmico (resultado da ao de
DNAase)
fragmentao de pedaos celulares envoltos por membrana
(blebbing), devido despolimerizao de protenas do
citoesqueleto
externalizao de fosfatidilserina na membrana plasmtica
(pela inativao de enzimas que as mantm viradas para o
folheto interno da membrana).
Figura 13.10: A via externa de induo de apoptose converge para ativao da protena Bid, um dos componentes
da via interna de estimulao.
!
Listamos abaixo algumas das protenas clivadas na cascata apopttica:
- GELSOLINA: protena que se liga a microfilamentos, responsvel pela estabilizao
destes filamentos.
- FODRINA: protena que tambm se liga a microfilamentos, responsvel por manter
os feixes de actina paralelos entre si.
- PARP (Poli ADP Ribose Polimerase): enzima responsvel por reparar danos causados
no DNA.
- ICAD (inibidor da DNAse ativada por caspases): protena que inibe o funcionamento
de uma enzima que quebra DNA (a CAD). A fragmentao de DNA causada por esta
enzima especfica, fragmentando DNA em mltiplos de 200 pares de bases.
C E D E R J 223
Bem, neste ponto a clula j morreu e a maquinaria molecular da

apoptose termina. Falta apenas o recolhimento dos corpos apoptticos
pelas outras clulas.
D agora uma outra paradinha para respirar, esticar as pernas e
oxigenar os neurnios. Na volta, antes de prosseguir na aula, analise
atentamente as Figuras 13.8 e 13.9, que descrevem com maior detalhe
as bases moleculares das duas vias de apoptose. Tente identificar
os estimuladores, os adaptadores, as caspases relacionadas com os
adaptadores e as caspases efetoras.
FORMAO E ELIMINAO DOS CORPOS APOPTTICOS

Ao longo do processo de morte celular, alguns sinais moleculares
que indicam a eliminao dos corpos apoptticos vo acontecendo.
Estes sinais esto relacionados induo e facilitao da fagocitose
por parte dos fagcitos profissionais e/ou das clulas da vizinhana.
O principal sinal molecular relacionado eliminao das clulas
apoptticas a translocao do fosfolipdio de membrana fosfatidilserina
do folheto interno para o folheto externo da membrana. Sabe-se que esta
externalizao facilita a fagocitose dos corpos apoptticos.
Alm disso, tambm ocorre a liberao do fosfolipdio
fosfatidilcolina para o meio extracelular. Este fosfolipdio solto no meio
extracelular atrai fagcitos profissionais. Por ltimo, uma protena de
superfcie celular chamada CD31 passa a apresentar uma conformao
molecular diferente das clulas normais, e esta conformao facilita a
fagocitose dos corpos apoptticos.
Acabou! O ciclo se completou. Agora vamos dar uma olhada
nos exemplos fisiolgicos da apoptose nos seres humanos e a vamos ver
que este fenmeno no to abstrato assim. Aproveite este momento
para fazer mais uma pequena pausa e refrescar a cabea para impedir
a apoptose de seus neurnios!
A IMPORTNCIA DA MORTE CELULAR PROGRAMADA NOS

PROCESSOS FISIOLGICOS
Os mecanismos de morte celular programada ocorrem em vrios
tipos celulares e so observados ainda no desenvolvimento embrionrio.
224 C E D E R J
MDULO 3
13
No indivduo adulto, uma grande variedade de tipos celulares sofre
AULA
processos de morte celular programada (Figura 13.11).

Morte celular no desenvolvimento embrionrio.
Dois eventos da vida embrionria esto claramente relacionados
morte celular: a eliminao de tecidos e rgos transitrios e o
remodelamento tecidual.
So exemplos clssicos de eliminao de tecidos transitrios por
apoptose a retrao da cauda de girinos e a eliminao da membrana
interdigital das patas de mamferos (Figura 13.11).
No desenvolvimento do sistema nervoso tambm ocorre morte
celular programada. No crebro embrionrio existe um nmero
desnecessariamente maior de neurnios. Este excesso uma maneira
de garantir o sucesso das conexes neuronais. Logo, neurnios que no
se conectarem de maneira apropriada entraro em apoptose e sero
eliminados. Em certas regies do crebro, mais de 80% dos neurnios
morrem desta maneira durante o desenvolvimento embrionrio.
Um outro exemplo interessante ocorre nas clulas fibrosas,
que daro origem ao cristalino dos nossos olhos. Estas clulas sofrem
apoptose nuclear (apenas o ncleo destrudo), enquanto o citoplasma
permanece intacto. Estas clulas anucleadas (conhecidas por clulas
fantasmas) formam o cristalino.
Morte celular programada na sade e na doena
Na Aula 1 desta disciplina vimos que diversos tipos celulares como
as clulas epiteliais, sanguneas e os hepatcitos possuem um
tempo de vida predeterminado, aps o qual morrem por apoptose e
so substitudos por clulas diferenciadas a partir de clulas-tronco.
A apoptose garante que, no adulto saudvel, o nmero de clulas se
mantenha constante.
Mecanismos de morte celular programada tambm atuam como
uma defesa do organismo a ataques causados por vrus, bactrias e
protozorios (Figura 13.4). Clulas infectadas geralmente apresentam
alta expresso de receptor Fas, sinalizando para o processo de apoptose
(o que muito positivo para o indivduo!).
Por outro lado, algumas vezes o feitio vira contra o feiticeiro.
o que acontece no caso de clulas infectadas pelo vrus da AIDS.
Este vrus infecta especificamente clulas do sistema imunolgico,
C E D E R J 225
os linfcitos T do hospedeiro. A morte induzida destes linfcitos

infectados reduz vertiginosamente o nmero de clulas do sistema
imunolgico do paciente, comprometendo seu funcionamento em relao
a qualquer agente infeccioso.
Doenas neurolgicas (como a esclerose lateral amiotrfica, mal
de Huntington, Parkinson e Alzheimer) esto fortemente relacionadas
capacidade dos neurnios de entrar, de maneira exagerada, nas vias
de apoptose.
Na prxima aula, veremos que mecanismos de morte celular
programada esto diretamente relacionados formao e destruio
de clulas tumorais. Clulas tumorais, que crescem de maneira
descontrolada, perdem a capacidade de ativar apoptose. Alguns tipos
de cncer bloqueiam a morte celular graas liberao de altos nveis
de Bcl-2 (protena anti-apoptose). Melanomas, por sua vez, tm o gene
para a protena Apaf-1 inativo, impedindo a formao do apoptossomo.
Cnceres de clon e pulmo inibem a expresso do receptor Fas,
essencial para a apoptose mediada por linfcitos T. Sabendo que clulas
cancerosas inativam suas vias de morte celular, diversos tratamentos
de quimioterapia so baseados em drogas pr-apoptose (apesar de
existirem diversos efeitos colaterais, j que clulas no transformadas
podero morrer).
Finalmente, no podemos esquecer o papel da morte celular
programada no envelhecimento celular. As clulas podem se dividir
por um nmero limitado de vezes, e este controle feito pelas regies
terminais dos cromossomos (os telmeros). A cada diviso, um pedao
desta terminao cromossomal retirado, at que, em um certo momento,
o cromossomo fica instvel sem os telmeros. Assim a clula, ao se
dividir, no duplica seu material gentico de maneira correta, ativando a
protena p53 (da qual voltaremos a falar na prxima aula), que tentar
reparar o DNA mal duplicado. Caso a p53 no consiga fazer o reparo,
ela ativa a apoptose. Desta forma, clulas mais velhas esto potencialmente
predispostas a sofrerem apoptose.
226 C E D E R J
Ao fim da
lactao, clulas
do epitlio
mamrio morrem
quando privadas
de hormnio
Mais de 95%
das clulas
T imaturas
morrem ainda
no timo
MDULO 3
13
Em alguns gnglios,
cerca de 80% dos
neurnios morrem
Clulas morrendo
(sombra clara)o
No homem,
clulas dos dutos
mullerianos
morrem
Quando privadas
de hormnio,
clulas da
prstata morrem
Clulas das
membranas
interdigitais
morrem por
apoptose
Figura 13.11: Tipos de clulas que podem sofrer processos de morte celular programada ( esquerda). Ao centro,
micrografias eletrnicas de varredura da formao dos dedos em uma pata de camundongo. direita, microscopia
de fluorescncia marcando as clulas apoptticas.
OUTROS TIPOS DE MORTE CELULAR PROGRAMADA

Como j dissemos, a apoptose apenas um dos diversos tipos de
morte celular programada existentes. Ela possui caractersticas moleculares
e morfolgicas tpicas, assim como os outros tipos de morte celular
programada existentes. E que tipos so estes? A parapoptose uma forma
de morte celular j observada em Dyctiostelium, uma ameba de vida livre,
na qual ocorre pouca condensao de cromatina e um elevado grau de
vacuolizao. Um outro tipo a morte celular negra, que um mecanismo
caspase independente caracterizado por uma profunda condensao
citoplasmtica e por ondulaes de membrana. Na doena de Huntington,
uma anomalia de natureza hereditria que afeta o sistema nervoso,
a degenerao neuronal segue esta via. A autofagia um mecanismo
de morte celular programada caspase independente, caracterizado pela
presena de grandes vacolos derivados dos lisossomas. Neste caso no
ocorre condensao de cromatina. Diversos outros mecanismos de morte
celular programada esto sendo descritos na literatura, e o conhecimento
vai crescendo de maneira galopante!
C E D E R J 227
AULA
Clulas epiteliais
precisam morrer para
que ocorra a fuso
do palato
CONCLUSO: MORTE CELULAR VIDA!

Para terminar, queremos deixar a idia de que morte celular
programada no um evento acidental que significa um problema para
o organismo. Na verdade, os mecanismos de morte celular programada
so muito bem regulados, o que pode ser uma excelente estrutura
defensiva contra outros organismos (vrus, parasitas), alm de ter funo
vital na criao dos organismos (no desenvolvimento embrionrio),
em diversas doenas (como o mal de Alzheimer) e no envelhecimento.
RESUMO
- A morte celular programada um processo organizado e orquestrado pelo

prprio genoma da clula que geralmente ocorre em resposta a fatores ambientais
ou a danos fisiolgicos detectados pela clula.
- A morte celular programada um processo que difere da morte por necrose
por no envolver extravasamento do contedo citoplasmtico e no desencadear
uma resposta inflamatria local.
- Na seqncia de eventos da morte celular por apoptose, a clula inicialmente
murcha. A forma da clula muda e ela perde suas microvilosidades, se as tiver, e as
junes intercelulares se desfazem. A superfcie da clula parece estar borbulhando.
A cromatina se condensa na periferia do envoltrio nuclear. A clula termina por
fragmentar-se em corpos apoptticos.
- Os corpos apoptticos so totalmente selados por membrana, e seu interior
contm fragmentos das organelas e do ncleo, onde a cromatina tambm se
fragmenta. O fosfolipdeo fosfatidilserina exposto no folheto externo da
membrana dos corpos apoptticos. A exposio de fosfatidilserina um dos sinais
para que estes corpos apoptticos sejam fagocitados pelos macrfagos.
- A morte celular por apoptose pode ser disparada por um estmulo externo, via
receptor Fas, ou por um estmulo interno, como as molculas Bax e Bid que inativam
a protena Bcl-2 na mitocndria e causam o extravasamento para o citoplasma do
citocromo c. A via externa e a via interna esto conectadas.
228 C E D E R J
MDULO 3
13
- A renovao dos epitlios, o desaparecimento da cauda dos girinos, a morte
de neurnios que no se conectam corretamente e a eliminao de clulas
contaminadas por vrus ocorrem por apoptose.
- Outros tipos de morte celular programada so a autofagia, a parapoptose e a
morte celular negra.
EXERCCIOS
1. Defina morte celular programada.
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2. Qual(is) seria(m) a(s) funo(es) primordial(ais) da morte celular
programada?
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3. Diferencie apoptose de necrose.

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C E D E R J 229
AULA
- As enzimas efetoras do fentipo apopttico pertencem famlia das caspases.
4. Quais so as etapas primordiais da biologia molecular da apoptose?

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5. Qual o papel das caspases?

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6. Quais so as duas possveis vias de apoptose?

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7. Qual a diferena entre estas duas vias possveis de apoptose?
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230 C E D E R J
MDULO 3
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9. Comente a importncia fisiolgica dos mecanismos de morte celular

programada.
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10. Apoptose e morte celular programada so a mesma coisa?
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INFORMAES SOBRE A PRXIMA AULA

Nesta aula voc viu o quanto importante para o organismo a morte programada
de suas clulas. A clula cancerosa, assunto da prxima aula, um tipo celular
que ignora as vias de morte celular programada. As conseqncias disso, voc
bem sabe, so desastrosas.
C E D E R J 231
AULA
13
8. Qual a importncia das protenas adaptadoras nas vias de apoptose?
objetivos
14
AULA
A clula cancerosa

caracterizar o que uma clula cancerosa;
descrever as vias de transformao de uma clula normal em cancerosa;
descrever as etapas de crescimento e disseminao de tumores primrios.
Biologia Celular II | A clula cancerosa
INTRODUO
Uma clula normal, seja a de uma ameba, seja de um mamfero ou de um

vegetal, cumpre um ciclo de vida o ciclo celular, que estudamos na Aula 1
desta disciplina. O ciclo celular, conforme estudamos, se inicia ao final de uma
diviso, quando tm origem as clulas-filhas. Estas clulas podem ingressar
num novo ciclo de diviso, passando pelas fases G1, S e G2, chegando a uma
nova fase M ou no. Mais adiante, na aula sobre clulas-tronco (Aula 12)
vimos que estas clulas conservam o potencial de se dividir, mas permanecem
quiescentes (dormentes) num estgio chamado G0 por tempo indefinido,
constituindo uma reserva para substituio e reparao de todos ou quase
todos os tipos celulares. A diviso sucessiva das clulas derivadas de uma
clula-tronco acompanhada de processos de diferenciao, dando origem
a diferentes tipos celulares. Assim, tanto o fibroblasto que secreta colgeno
e outras protenas da matriz extracelular (Aulas 7 e 8) quanto o neurnio
(Aula 10) atuam como instrumentos de uma mesma orquestra: todos
possuem a mesma partitura (o cdigo gentico), mas executam apenas
notas especficas.
Para que o concerto seja harmonioso, preciso que os violinos no sejam
abafados pelo rufar dos tambores e que cada msico faa sua entrada no
momento certo. Na falta de um maestro os mecanismos de sinalizao
intercelular o que seria uma melodia agradvel se torna um caos sonoro.
Podemos estender esta analogia musical ao cncer. A clula cancerosa
abandona a partitura e inicia um solo interminvel durante o qual cresce e
se divide compulsivamente, sem levar em conta nem sua programao inicial
nem as demais clulas do organismo, das quais rouba espao e nutrientes.
O que conduz uma clula a este estado? O que o cncer? Como uma
clula se torna cancerosa? Estas e outras perguntas j foram feitas inmeras
vezes por todos ns. Muito se avanou no conhecimento e tratamento dos
diversos tipos de cncer, assim como no conhecimento da biologia da clula
cancerosa. Entretanto, a humanidade ainda tem uma longa jornada at que
seja possvel o total controle dessas enfermidades.
O QUE O CNCER?
Num organismo saudvel, cada clula se encontra comprometida
com o bem-estar geral do indivduo e a proteo das clulas germinais,
a fim de garantir a prognie. Afinal, o tempo de vida de um indivduo
extremamente limitado e, aps a sua morte, apenas o cdigo gentico
234 C E D E R J
MDULO 3
14
transferido sua prole sobreviver. Vimos nas Aulas 12 e 13 que vrios
AULA
tipos celulares sendo as clulas sangneas um timo exemplo disso

se renovam durante toda a vida do indivduo, morrendo e sendo
substitudos por outras, resultantes da diviso e diferenciao de clulastronco. Em termos simples, podemos dizer que a clula cancerosa no
apenas esquece de morrer, como tambm entra numa de se dividir
alucinadamente, num comportamento egosta que leva o organismo a
uma quebra de homeostase e falncia de recursos generalizada, resultando
na sua morte.
H MAIS DE UM TIPO DE CNCER?

Sim, o que chamamos cncer , na verdade, um conjunto de
doenas de origem e evoluo diversas. As clulas cancerosas, por
sua vez, compartilham duas caractersticas bsicas: multiplicam-se
indefinidamente e terminam por invadir e colonizar outros tecidos.
A proliferao inicial de uma clula anormal gera uma neoplasia
(neo = novo, plasia = formao). A massa de clulas inicial pode permanecer
encapsulada por fibras do tecido conjuntivo e, neste caso, forma-se um
tumor benigno que pode, em geral, ser removido cirurgicamente sem futuros
transtornos para o indivduo (Figura 14.1.a). Caso as clulas se dispersem
por entre as clulas normais, o tumor dito maligno e o prognstico
quanto sua remoo e cura relativamente incerto (Figura 14.1.b).
Se estas clulas se disseminarem pela corrente sangnea e formarem
colnias em outros locais, estas sero chamadas metstases. Esta condio
agrava bastante a condio do paciente e dificulta muito a cura.
Cpsula fibrosa
Tbulos invasivos
Tecido normal
Neoplasia
Figura 14.1: Diferenas estruturais entre um

tumor glandular benigno (a) e um maligno
(b). No primeiro, a cpsula fibrosa que se
forma em torno das clulas cancerosas
restringe a invaso do tecido adjacente.
Os tumores de mama possuem uma dessas
duas conformaes.
C E D E R J 235
Na Tabela 14.1 compilamos um glossrio de termos comumente

usados na definio de tumores, tanto benignos quanto malignos,
de acordo com o tipo de tecido e tipo celular a partir do qual se
originaram.
Tabela 14.1: Glossrio de termos usados na caracterizao de tumores.
Designao tcnica do tumor
Origem e caractersticas do tumor
Carcinoma
Tumor originado de clulas epiteliais
Sarcoma
Tumor originado de clulas musculares ou do tecido conjuntivo
Leucemias
Cnceres de tecidos hematopoiticos (sangue) ou tecido nervoso
Adenoma
Tumor benigno do tecido epitelial glandular
Adenocarcinoma
Tumor maligno do tecido epitelial glandular
Condroma
Tumor benigno do tecido cartilaginoso
Condrossarcoma
Tumor maligno do tecido cartilaginoso
As clulas cancerosas conservam algumas caractersticas da clula

normal de onde se originaram. Assim que no carcinoma basocelular, um tipo bastante comum e pouco agressivo de cncer de
pele, as clulas continuam a produzir filamentos intermedirios
de queratina, e no melanoma, um tipo de cncer bastante
agressivo, as clulas seguem produzindo o pigmento melanina,
caracterstico de sua clula precursora.
O QUE TORNA UMA CLULA CANCEROSA?

Calcula-se que a clula-ovo que resulta da fecundao de um
vulo por um espermatozide divide-se 1016 vezes ao longo de nossa
vida. J tendo estudado a diviso celular na Aula 2 desta disciplina,
voc tambm sabe que, apesar dos mecanismos de checagem e de reparo,
podem ocorrer erros na replicao do DNA e na diviso deste entre
as clulas-filhas. Esses erros so as mutaes. Ora, em 1016 vezes,
admissvel que ocorram erros, e eles de fato ocorrem, s que na imensa
maioria das vezes o resultado dessas mutaes so clulas no viveis,
que no apenas no mais se dividiro como morrero e sero eliminadas.
As clulas cancerosas possuem um alto grau de instabilidade gentica,
o que significa dizer que so muito suscetveis a sofrer e acumular
mutaes. Essa instabilidade gentica ocorre em raros casos por
predisposio gentica, como num tipo de tumor que afeta as clulas
da retina o retinoblastoma ou, mais comumente, por exposio
repetida a fatores indutores, como as substncias contidas no tabaco
236 C E D E R J
MDULO 3
14
dos cigarros ou radiaes ionizantes, como os raios-X. Eventualmente,
AULA
um destes mutantes possui as caractersticas necessrias para iniciar uma

linhagem tumoral. Isto significa dizer que, comparado freqncia com
que ocorrem mutaes nas nossas clulas, o cncer uma decorrncia
rara. Por outro lado, fatores como o cigarro, o lcool e outras drogas
aumentam muito a probabilidade de isto ocorrer. Um outro dado a ser
levado em conta que, por depender do acmulo de mutaes ao longo
do tempo, as chances de uma pessoa desenvolver algum tipo de cncer
aumentam com a idade.
Outro ponto a ser enfatizado que, se vrias clulas sofrem
mutaes e apenas uma d origem ao tumor, isso equivale a dizer que:
todo tumor um clone;
cada tumor foi submetido a condies seletivas que o levaram
a sobressair-se sobre os demais, numa verso da lei da sobrevivncia do
mais apto que subverte e contraria a teoria da seleo natural de Darwin,
uma vez que leva o indivduo morte;
cada clone acumula mutaes que foram sendo acrescidas
ao longo de geraes de multiplicao de uma clula que era apenas
ligeiramente modificada.
Na Aula 4 de Biologia Celular I fizemos referncia a linhagens

celulares de clulas tumorais. De fato, determinadas linhagens
utilizadas em laboratrios no mundo todo so derivadas de
tumores humanos. Um exemplo disso so as clulas HeLa e as CACO2.
A primeira foi isolada de uma paciente com cncer cervical e a
segunda de um tumor de clon. Ao contrrio de culturas primrias
de clulas normais, que s sobrevivem em cultura por um nmero
limitado de geraes, estas clulas so virtualmente imortais.
Que condies seletivas seriam estas? Para possuir alguma

vantagem sobre as demais, no basta que as clulas mutantes se dividam
continuamente. Elas precisam ter alguma outra caracterstica que as
favorea em determinadas circunstncias. Por exemplo, se estas clulas
forem mais capazes de suportar baixas concentraes de oxignio que
as demais e o organismo for submetido a condies de restrio de
oxignio, elas sobressairo no apenas com relao a outros mutantes
eventuais, mas tambm com relao s clulas normais, assegurando a
manuteno e a propagao do gentipo alterado e a possibilidade de
incorporao de novas mutaes (Figura 14.2).
C E D E R J 237

Clulas normais
Figura 14.2: Clulas dotadas de

instabilidade gentica podem, no
correr de ciclos de diviso, gerar
mutantes que, sob determinadas
condies, so mais viveis que
as clulas normais. A exposio
dessas clulas a sucessivas barreiras
funciona como um filtro para que
essas mutaes se acumulem e
resultem na clula cancerosa.
Clulas geneticamente instveis
Barreira seletiva
Barreira seletiva
Clula cancerosa
Que tipo de mutao ocorre numa clula cancerosa?

As mutaes que afetam o DNA das clulas tornando-as cancerosas
so de diversos tipos, mesmo para um mesmo tipo de cncer.
Entretanto, em um tipo de leucemia, a leucemia mielognica
crnica, sempre observada a translocao de um pedao do
cromossomo 22 para o cromossomo 9. Existem diferenas com
relao ao tamanho do fragmento translocado entre pacientes,
mas o padro se repete em todos os indivduos, e o cromossomo
9 anormalmente alongado chamado cromossomo Filadlfia, em
referncia ao local onde foi feita esta descoberta.
QUE TIPO DE MUTAO OCORREU NUMA CLULA

CANCEROSA?
No incio desta aula, comentamos que a clula cancerosa subverte
a sua programao natural de diviso e morte. Tambm j sabemos
que no basta uma mutao para que o cncer se desenvolva, os erros
precisam se acumular ao longo de vrias geraes de replicao.
J foram identificados mais de 100 genes cuja mutao conduz
ao cncer: so os genes crticos, e podem ser agrupados em dois grupos:
aqueles cuja supresso (desligamento) leva ao cncer e aqueles cuja
superexpresso leva ao cncer.
Os primeiros so chamados genes supressores de tumor. Sua
inatividade predispe a clula a tornar-se cancerosa.
238 C E D E R J
MDULO 3
14
Os do segundo grupo so chamados proto-oncogenes, quando
AULA
seu comportamento normal, e oncogenes quando assumem a

forma hiperativa.
O primeiro oncogene a ser identificado foi o da protena Ras, uma
GTPase monomrica que participa na transduo de sinal de fatores de
crescimento presentes na superfcie da clula (que voc viu em Aula de
Biologia Celular I). A hiperatividade dessa protena causa proliferao
excessiva da clula, uma das caractersticas bsicas da clula cancerosa.
J a descoberta do primeiro gene supressor de tumor foi feita
ao estudar-se um tipo raro de cncer humano de natureza hereditria,
o retinoblastoma. Este tipo de tumor se desenvolve em clulas da
retina ainda em desenvolvimento e provoca cegueira ainda na infncia.
Descobriu-se que os portadores de retinoblastoma possuem uma deleo
no cromossomo 14 e que nessa regio se localiza normalmente o gene
Rb, ausente nesses indivduos. Mais ainda, este gene se encontra mutado
em portadores de vrios outros tipos de cncer, como mama, pulmo e
bexiga. Qual a funo do gene Rb? Esse gene codifica a protena Rb, que
uma reguladora do ciclo celular em todos os tipos celulares, atuando
como um freio do ciclo celular. Sem ela, novamente, as clulas passam
a se dividir descontroladamente, gerando tumores.
Estes so apenas dois exemplos de mutaes associadas ao cncer.
Em outros casos, mltiplas cpias de um determinado gene podem ser
produzidas, amplificando seu efeito e provocando a superexpresso da
protena codificada por ele.
COMO PODE SOBREVIVER UMA CLULA COM ALTERAES

NO DNA?
Estudamos na Aula 13 os mecanismos de morte celular
programada, responsveis por manter estvel o nmero de clulas de um
organismo adulto, eliminando aquelas que entram na fase de senescncia,
entre outras funes. Outra caracterstica bsica da clula cancerosa a
sua imortalidade, ou seja, ela ignora as restries naturais de diviso e
sobrevida das clulas normais. Acredita-se que o gene mais importante
na manuteno da normalidade celular seja aquele que codifica para a
protena P53. Esta protena se encontra mutada em pelo menos metade
C E D E R J 239
dos tipos de cncer conhecidos e possui pelo menos trs importantes

funes: no controle do ciclo celular, na apoptose e na manuteno
da estabilidade gentica. Em condies normais, a quantidade de P53
produzida muito pequena, mas em condies em que a integridade do
DNA seja rompida, como no caso de exposio a raios ultravioleta, sua
sntese aumentada e ela tenta, inicialmente, reparar o DNA. Quando
isso no possvel, a P53 atua ativando o mecanismo de autodestruio
celular por apoptose. Conseqentemente, clulas deficientes em P53 so
incapazes tanto de reparar o DNA quanto de morrer, proliferando sem
controle. Em muitos tipos de tumor so detectadas grandes quantidades
de uma forma mutada e, portanto, inativa dessa protena.
COMO SE FORMAM AS METSTASES?

As clulas cancerosas possuem seis habilidades diablicas, algumas
das quais acabamos de comentar:
1. as clulas cancerosas continuam a se dividir independentemente
do recebimento de qualquer sinal, tal como uma leso nas clulas
vizinhas;
2. ao serem comprimidas pelo tumor em crescimento, as clulas
normais enviam sinais para interromper a diviso das clulas cancerosas,
mas estas os ignoram, assim como ignoram os sinais de seu prprio
processo de envelhecimento;
3. todas as clulas cancerosas possuem alteraes importantes
em seu DNA que inibem os possessos de morte celular programada e
escapam ao sistema imune;
4. medida que se multiplicam, as clulas cancerosas so capazes
de estimular a formao de vasos sangneos em suas proximidades,
o que lhes garante o aporte de oxignio e nutrientes;
5. as clulas cancerosas so imortais. Uma clula normal divide-se, no
mximo, umas 70 vezes. Uma clula cancerosa divide-se indefinidamente;
6. as clulas cancerosas adquirem a capacidade de invadir outros
tecidos e rgos, disseminando-se na forma de tumores metastsicos.
Esta ltima propriedade a responsvel final pela letalidade do cncer.
240 C E D E R J
MDULO 3
14
O processo de metstase no simples; para disseminar-se, uma
AULA
clula cancerosa de origem epitelial tem de transpor vrias barreiras:

desfazer contatos juncionais com outras clulas;
atravessar a lmina basal;
ser aspirada pelo sistema linftico ou cair na corrente sangnea;
passar pelo endotlio em um ponto distante do tumor primrio
(no fgado, por exemplo) e ali formar nova colnia.
Este processo requer habilidades especiais que nem toda clula
tumoral possui; assim, apenas uma em cada 1.000 clulas que se
desprendem do tumor primrio formaro metstases. Um outro fato
interessante que muito comum que as clulas sejam aspiradas pelo
sistema linftico, vindo a encalhar em um gnglio e ali originem um
novo tumor.
O QUE INDUZ FORMAO DE UM CNCER?

J temos em mente que uma s alterao no DNA no causa
cncer. So necessrias vrias mutaes cumulativas em seqncia
capazes de causar uma desregulao no mecanismo de crescimento e
multiplicao. Observamos que o cncer ocorre mais freqentemente em
pessoas idosas. A partir dos 55 anos, a incidncia da doena cresce em
nvel exponencial. Isso quer dizer que quanto mais tempo uma pessoa
tem para expor seu material gentico a um fator qualquer que possa
alter-lo, maior ser a chance disso acontecer. Se vivssemos at 200
anos, todos provavelmente teramos algum tipo de cncer. Isso porque
passou tempo suficiente para que se acumulassem mutaes genticas
em nossas clulas.
Aos elementos lesivos capazes de acarretar um aumento na
probabilidade de ocorrncia de leses no DNA, e, portanto, de
aumento da incidncia de neoplasias, dado o nome de carcingenos.
Podem ser agentes qumicos, alguns vrus e diversos tipos de radiao,
como os raios ultravioleta e os raios gama. A exposio prolongada ou
repetida a esses agentes pode, aps um certo tempo, resultar num cncer.
Os fumantes, por exemplo, s costumam ter tumores diagnosticados
aps 10 ou 20 anos de tabagismo. Da mesma forma, os tumores de pele,
C E D E R J 241
ou melanomas, podem surgir depois de dcadas de exposio aos raios

solares. Num caso histrico, os sobreviventes de Hiroshima e Nagasaki
desenvolveram diversos tipos de tumor alguns anos aps o lanamento
das bombas atmicas sobre aquelas cidades.
Os agentes qumicos incluem substncias notoriamente txicas,
como o gs mostarda e a aflatoxina. Entretanto, a inflamao crnica de
algum rgo, como o intestino, por exemplo, provoca aumento da diviso
celular, aumentando a chance de alguma mutao. Dessa forma, gorduras
animais (que causam um tipo de inflamao na mucosa intestinal) so
carcingenos indiretos. por essa razo que se recomenda uma dieta
rica em fibras. Elas aumentam o volume do bolo fecal, diminuindo o
tempo de exposio de todas as substncias mucosa intestinal, alm de
diminuir a concentrao da gordura animal na massa fecal total.
A ao de hormnios semelhante. Eles aceleram a diviso celular
de alguns tipos de clulas, facilitando a ocorrncia de mutaes. Por este
motivo, as terapias de reposio hormonal para mulheres na menopausa
ainda so tema de muitos debates e pesquisas.
O fumo, por sua vez, desenvolve uma ao carcinognica mista.
Ele capaz tanto de lesar o DNA das clulas do corpo inteiro,
diretamente, quanto irritar mucosas, causando inflamao crnica na
boca, na garganta, nos brnquios e nos pulmes. por isso que o fumo
pode causar tambm cncer de bexiga e pncreas, por exemplo, no
ficando limitado apenas s vias areas.
Outras situaes em que pode ocorrer leso direta do DNA
quando ocorre invaso celular por vrus. Como exemplo mais evidente
temos o vrus das hepatites B e C, que a longo prazo podem causar
cncer heptico. Tambm h a associao do papilomavirus (HPV) com
o cncer de colo de tero. As alteraes especficas provocadas no DNA
por esses tipos de vrus ainda no esto bem determinadas. O que se
sabe que pode haver uma completa integrao do genoma do vrus ao
genoma (DNA) da clula hospedeira, sendo que esta clula dar origem
oncognese.
242 C E D E R J
MDULO 3
14
AULA
O CNCER PODE SER TRATADO HOJE?

Sim, em muitos casos. O resultado do tratamento contra o cncer varia
de acordo com cada paciente. Os tratamentos em uso atualmente incluem:
Cirurgia: em geral o tratamento mais importante e mais
definitivo, quando o tumor est localizado em local anatomicamente
favorvel. Para muitos tipos de cncer, no entanto, apenas a cirurgia
no suficiente, devido disseminao de clulas cancerosas local ou
difusamente.
Radioterapia: utilizada para tumores localizados que no
podem ser ressecados totalmente ou para tumores que costumam
recidivar localmente aps a cirurgia. O objetivo da radioterapia lesar
extensamente o DNA das clulas cancerosas, inviabilizando sua diviso
e sobrevivncia.
Quimioterapia: consiste na utilizao de medicamentos
que tm ao citotxica (causam danos s clulas). So utilizadas
combinaes de vrios medicamentos diferentes, pois nos tumores h
freqentemente subpopulaes de clulas com sensibilidade diferente s
drogas antineoplsicas. Os mecanismos de ao das drogas so diferentes,
mas em geral acabam em leso do DNA celular. Algumas das drogas
utilizadas, como o taxol e a colchicina, interferem com a integridade dos
microtbulos, essenciais na formao do fuso mittico.
Terapia biolgica: usam-se modificadores da resposta biolgica do
prprio organismo frente ao cncer, ajudando-o a combater a doena
(linfoquinas, anticorpos monoclonais). Pode-se usar tambm drogas que
melhoram a diferenciao das clulas tumorais, tornando-as de mais
fcil controle.
COMO SERO OS TRATAMENTOS NO FUTURO?

H grande esperana de que as pesquisas em Biologia Celular
abram novas perspectivas para tratamento de cncer, assim como outras
doenas. A terapia celular, utilizando clulas-tronco (Aula 12), uma
dessas possibilidades, especialmente para o tratamento de leucemias.
Alm dessas, esto sendo pesquisadas e testadas terapias baseadas em:
Imunoterapia: o tratamento imunoterpico do cncer se baseia na
ativao do sistema imune contra a clula maligna. Ela produz alguns
tipos de protenas que passariam a ser reconhecidas pelas clulas de
C E D E R J 243
defesa do organismo. Haveria ento a destruio das clulas do tumor.

Estuda-se tambm a produo de vacinas, a partir de antgenos especficos
da clula tumoral, com o fim de estimular o prprio sistema imune do
paciente a destruir as clulas cancerosas.
J est em uso uma vacina contra o vrus HPV, indutor do cncer
de colo de tero. Esta vacina preventiva, devendo ser aplicada em
mulheres que ainda no se contaminaram com o HPV.
Terapia molecular: estudam-se mecanismos de normalizao da
produo e da ativao da protena p53, a fim de corrigir erros no DNA
celular e, na impossibilidade disso, induzir a clula apoptose. Tambm
esto sendo pesquisados os inibidores da telomerase, a enzima que impede
que os telmeros da clula tumoral encurtem (Aula 12), o que um sinal
de envelhecimento celular.
Antiangiognese: medida que o tumor cresce, estimula a
formao de novos vasos sangneos. A inibio desse processo leva
as clulas tumorais morte por falta de nutrientes, pois bloqueariam a
produo de vasos sangneos, essenciais para levar o sangue com os
nutrientes ao tumor. Drogas com esse efeito j esto sendo utilizadas no
tratamento de tumores slidos.
RESUMO
No tumor benigno, as clulas permanecem juntas formando uma massa nica; ali se
pode obter a cura completa atravs de remoo cirrgica. Um tumor s considerado
um cncer se for maligno, ou seja, so clulas que adquiriram a capacidade de invadir
e colonizar tecidos vizinhos processo denominado metstase.
Muitos tipos de cncer so originados de uma nica clula que sofreu mutao;
contudo, a prognie dessa clula necessita de mutaes futuras, requerendo
numerosas mutaes adicionais para iniciar um cncer.
O fenmeno de progresso de um tumor requer muitos anos, demonstrando o
processo de evoluo por mutao e seleo natural atravs das clulas somticas.
As principais alteraes das clulas cancerosas incluem diminuio da expresso
de protenas adesivas da matriz extracelular (MEC), como a fibronectina e a
244 C E D E R J
MDULO 3
14
e trombospondina; diminuio da expresso de caderinas; sntese de colagenase,
que degrada o colgeno e liberao de fatores angiognicos.
As modalidades teraputicas mais utilizadas atualmente so: cirurgia,
quimioterapia, radioterapia e terapia biolgica.
A imunoterapia, os alvos moleculares da terapia do cncer e estudos de
antiangiognese so tcnicas em estudo para tratamento do cncer no futuro.
SITES RECOMENDADOS
http://www.inca.gov.br/conteudo_view.asp?id=469
http://www.orientacoesmedicas.com.br/oqueepapanicolau.asp
C E D E R J 245
AULA
laminina; aumento na expresso de protenas da MEC antiadesivas como tenascina
Gabarito
Biologia Celular II
Aula 1
1. O ciclo celular compreende o perodo da vida celular correspondente intrfase,

subdividida em G1, S e G2, e a fase de diviso, denominada M.
2. So molculas responsveis pelo controle interno do ciclo celular. As ciclinas vo
progressivamente se acumulando no citoplasma, ligando-se s ciclinas, e quando
atingem uma determinada concentrao, disparam uma atividade (por exemplo,
separao das cromtides).
3. So as quinases dependentes de ciclinas. As Cdks esto presentes em quantidades
constantes por todo o ciclo e entram em atividade quando ligadas s ciclinas
especficas.
4. a sigla para Fator Promotor de Mitose. o complexo formado pela M-Cdk e
a M-ciclina e dispara a mitose, fosforilando vrias protenas, dentre elas as que
compactam os cromossomos, as que desmontam o envoltrio nuclear e as que levam
os microtbulos a formar o fuso mittico.
5. No final de cada fase do ciclo, as ciclinas so degradadas em proteassomas.
6. feito pela disponibilidade de nutrientes, de espao e de fatores de crescimento.
7. Em conjunto, os controles interno e externo formam os pontos de checagem: no
final de G1, a clula precisa ter o volume suficiente e o ambiente favorvel para
entrar em S. No final de G2, alm do ambiente e volume favorveis, preciso que o
genoma esteja correta e completamente duplicado. Na metfase, os cromossomos
precisam estar todos alinhados para que a diviso prossiga.
8. Algumas clulas, como neurnios e msculos, escapam do ciclo celular em G1 e
permanecem num estado de quiescncia chamado G0, a partir do qual podem at
voltar ao ciclo em algum momento. Hepatcitos costumam se dividir a cada um ou
dois anos, mas outras clulas podem permanecer em G0 para sempre.
248 C E D E R J
Aula 2
1. Associar a mitose distribuio do material gentico entre as clulas-filhas.

2. Prfase
Prometfase
Metfase
Anfase
Telfase
citocinese
3. Em que etapa do ciclo celular ocorre:

a) Intrfase.
b) Prfase e prometfase.
c) Prfase.
d) Prometfase.
e) Prometfase.
f) Metfase.
g) Anfase.
h) Desaparece na prfase e reaparece na telfase.
4. Coesina: manter unidas as cromtides-irms.
Condensina: auxiliar a condensao dos cromossomos.
Separase: cortar a ligao das cromtides-irms na anfase.
5. Existem microtbulos astrais, que ajudam na manuteno dos centrossomos nos
plos opostos da clula; microtbulos cinetocoriais, que se ligam ao cinetcoro dos
cromossomos; microtbulos interpenetrantes, que deslizam uns em relao aos outros
afastando as cromtides-irms.
6. o estrangulamento que separa as clulas-filhas; depende da formao de um
anel de actina no sentido transversal ao fuso.
C E D E R J 249
Aula 3
1. So vrias: a separao entre a transcrio e a traduo, proporcionando maior

diversidade de informao nos eucariotos pela sobreposio de informaes de um mesmo
segmento do DNA na composio de diversos produtos gnicos, proteo do DNA.
2. Corresponde Figura 3.5.
3. Conseguir acomodar de modo organizado dentro do ncleo molculas que no
caberiam l de outra maneira.
4. o arranjo formado pelas histonas H2A, H2B, H3 e H4 que com duas cpias de
cada formam um octmero ao redor do qual a dupla fita do DNA d uma volta e
meia aproximadamente.
5. o DNA que fica entre dois nucleossomos.
6. manter os nucleossomos mais ou menos afastados, influindo na compactao
do DNA.
7. A eucromatina o estado em que o DNA est descompactado e transcrevendo.
A heterocromatina corresponde ao DNA no seu estado mais compactado, inacessvel
s enzimas de transcrio.
8. Corresponde aos telmeros dos cromossomas interfsicos, uma evidncia de que
os cromossomas interfsicos no ficam embolados.
9. O nuclolo a regio onde so sintetizados e montados os ribossomos; a densidade
dele se deve justo ao acmulo de molculas que ali esto sendo produzidas. Portanto,
o nuclolo no heterocromatina.
10. No, essas regies se distribuem por vrios cromossomos. Os segmentos envolvidos
na sntese de ribossomos se aproximam na regio que corresponde ao nuclolo, como
mostra a Figura 3.15.
250 C E D E R J
Aula 4
1. Membrana nuclear externa, espao perinuclear, membrana nuclear interna, lmina

nuclear, cromatina aderida e complexos do poro.
2. A membrana nuclear externa um domnio do retculo endoplasmtico rugoso.
3. Apesar de ser contnua com a membrana nuclear externa, os componentes da
membrana interna no podem fluir para a membrana externa. Por isso, a composio
da membrana interna particular. Suas molculas mais conhecidas so receptores
para laminas do tipo B e receptores que controlam a liberao de clcio.
4 . uma camada de filamentos intermedirios entrecruzados, formada pelas laminas
do tipo A e do tipo B. A funo da lmina sustentar o envoltrio nuclear, regular
sua forma e proteg-lo de deformaes.
5. So perfuraes que trespassam as duas membranas nucleares, mantidas por uma
estrutura complexa formada por cerca de 30 protenas diferentes.
6. uma seqncia de aminocidos necessria e suficiente para que uma protena
seja reconhecida no complexo do poro e translocada para o ncleo.
7. Pelos complexos do poro.
8. Pelos mesmos complexos do poro por onde protenas podem entrar.
9. Porque tem direo e sentido definidos: protenas s entram e mRNA s sai.
10. Sim. A energia fornecida pela hidrlise de GTP por GTPases monomricas
especiais, as Ran.
C E D E R J 251
Aula 5
1. Atravs de junes ou clulas esparsas numa matriz conjuntiva.

2. Junes de ocluso - selar compartimentos.
Junes de adeso - manter clulas aderidas entre si e ao substrato, conferindo
ao conjunto resistncia a tenses.
Junes de comunicao - comunicao e cooperao metablica entre clulas.
3. Juno tight - tight quer dizer apertado, em ingls. O espao entre as membranas
das duas clulas vizinhas menor (mais apertado) na regio da juno. Cinturo de
ocluso - a juno de ocluso forma um cinturo de cerca de 0,5 micrmetros de
largura, que circunda toda a poro lateral superior da clula.
4. Porque as protenas que o formam se organizam em fileiras e se conectam a protenas
de mesma natureza na clula vizinha. Esses arranjos impedem o livre fluxo dessas
protenas no plano da bicamada lipdica e tambm barram outras protenas que tentem
se deslocar atravs desses cordes.
5. uma regio da membrana onde so encontradas protenas e, conseqentemente,
realizadas funes diferentes de outra regio onde existam outras protenas e outras
funes. As barreiras mantm os domnios, impedindo que as protenas se misturem
pela fluidez da membrana.
6. Claudinas, as mais essenciais, e ocludinas.
7. o transporte que depende da passagem atravs da membrana plasmtica. Pode
ser por difuso simples ou transporte atravs de protenas.
8. a passagem de molculas por entre as clulas de um epitlio. Ocorre quando
o organismo tem de absorver rapidamente grande quantidade de aminocidos ou
acares obtidos aps a digesto de alimentos.
252 C E D E R J
Aula 6
1. Conferir aos epitlios resistncia a tenses. As protenas constituintes so: protenas

transmembrana da famlia das caderinas, protenas intermedirias (desmoglenas e
desmoplaquinas) e filamentos intermedirios.
2. A malha de microfilamentos em associao com miosinas pode contrair-se e puxar
a regio apican das clulas, aproximando-as e encurvando sua estrutura at formar
um tubo.
3. Os primeiros possuem como protena transmembrana as caderinas e so uma juno
clula-clula. Os hemidesmossomas so uma juno clula-matriz e possuem integrinas
como protenas transmembrana.
4.
a) As conexinas.
b) Aquelas menores que 1000 daltons
c) A elevao do clcio intracelular provoca o fechamento das junes Gap.
5. As clulas vegetais so revestidas por uma parede celulsica que as protege das
tenses e compresses, alm de promover a adeso entre elas, por isso so desnecessrias
junes de adeso ou ocluso. Por outro lado, continua havendo necessidade de
comunicao e cooperao metablica, o que feito pelas plasmodesmatas.
C E D E R J 253
Aula 7
1. Conjuntivos: propriamente dito, sangue, ossos, cartilagem.

2. As prprias clulas imersas na matriz secretam seus componentes. Essas clulas so os
fibroblastos, no tecido conjuntivo; os osteoblastos, no tecido sseo; os condroblastos,
no cartilaginoso.
3. Polissacardeos chamados glicosaminoglicanas e protenas.
4. As proteoglicanas so formadas por numerosas cadeias de glicosaminoglicanas que
se dispem ao longo de um eixo protico.
5. Nas glicoprotenas, h predomnio da parte protica com relao parte sacardica.
As cadeias de acares das glicoprotenas tambm costumam ser curtas quando
comparadas s proteoglicanas. Nas proteoglicanas, a parte glicdica pode chegar a
ser 95% da molcula.
6. As GAGs e as proteoglicanas so molculas negativamente carregadas que atraem
muitos ctions. Estes, por sua vez, atraem gua, tornando a matriz hidratada.
7. As outras funes:
1- Regulao da atividade de molculas sinalizadoras, ligando-se a vrias
molculas econtrolando a atividade de protenas secretadas.
2- Controle do trfego de clulas e molculas. Os gis formados pelas proteoglicanas
tm vrios tamanhos de poros e cargas, atuando como peneiras moleculares
capazes de filtrar molculas e clulas de acordo com seu tamanho e carga.
3- Co-receptores. Algumas proteoglicanas so componentes integrais da
membrana plasmtica podendo servir como receptores propriamente ditos
ou como co-receptores ligando-se a molculas (concentrando-as) e depois
apresentando-as para os seus respectivos receptores.
4. Interao com protenas fibrosas da matriz. As GAGs e proteoglicanas podem
interagir com protenas da matriz, como o colgeno, formando estruturas
altamente complexas.
254 C E D E R J
Aula 8
1. A matriz extracelular possui protenas fibrosas os colgenos e a elastina

e protenas adesivas, a fibronectina e a laminina, esta ltima na lmina basal.
2. O colgeno formado por uma tripla hlice de um polipeptdeo rico em prolina
e glicina.
3. Fibrilares, associados a fibrilas e formadores de rede.
4. O colgeno sintetizado pelas clulas e secretado na forma de pr-colgeno. Depois
de clivada a extremidade da cadeia, formam-se espontaneamente as fibrilas; como
isso s acontece no meio externo, as fibrilas s se formam aps a secreo.
5. A molcula de elastina uma hlice assimtrica e frouxa, como um cacho de cabelo.
Ao ser puxada, distende-se; ao cessar a distenso, enrola-se de novo. Pontes entre as
molculas de elastina formam as fibras elsticas.
6. O colgeno confere ao tecido resistncia tenso e a elastina confere ao
tecido elasticidade, isto , aps sofrer a tenso ele pode se distender e voltar
forma original.
7. A fibronectina uma protena dimrica que possui stios de reconhecimento para
vrias molculas: colgeno, integrinas, outras fibronectinas, heparina. atravs da
ponte formada pela fibronectina que as integrinas da membrana plasmtica se ligaro
s fibras colgenas.
8. A lmina basal um tipo especial de matriz, secretada pelas clulas que se apiam
sobre ela. As protenas mais caractersticas da membrana basal so o colgeno tipo
IV, formador de redes; a laminina, protena trimrica que se liga a integrinas; e o
colgeno do tipo VII, que faz pontes entre a lmina basal e a matriz abaixo dela.
9. A lmina basal determina a polaridade celular, influencia o metabolismo celular
e organiza protenas em membranas plasmticas adjacentes, atuando na migrao
e na diferenciao celular.
C E D E R J 255
Aula 9
1. A primria formada por um arranjo mais frouxo de fibrilas de celulose, sem uma
orientao definida. A parede secundria se forma por dentro da primria e cada
camada de fibrilas de celulose tem uma orientao definida e ortogonal em relao
camada anterior.
2. A parede celular a matriz da clula vegetal. A lamela mdia corresponde
membrana basal.
3. Microfibrilas de celulose, pectina, glicanas associadas celulose.
4. As microfibrilas de celulose.
5. As pectinas e glicanas.
6. A partir de complexos enzimticos existentes na membrana plasmtica.
7. As fibrilas seguem a mesma direo dos microtbulos subpeliculares da clula.
256 C E D E R J
Aula 10
1. Os neurnios so clulas excitveis, responsveis por receber, conduzir e transmitir

estmulos. Por serem muito especializadas e dependerem das conexes que fazem
para exercer sua atividade, no se renovam.
2. Alguns microtbulos se soltam do centrossoma e migram ao longo do axnio,
transportando vesculas sinpticas e outras organelas. Os filamentos intermedirios dos
neurnios, os neurofilamentos, tambm so diferentes, possuem tabiques, ajudando
a manter desobstrudo o axnio.
3. As sinapses so os contatos funcionais entre um neurnio e outra clula. As sinapses
eltricas s ocorrem entre dois neurnios do sistema nervoso central e correspondem a
junes Gap. As sinapses qumicas ocorrem tanto no SNC quanto fora dele e dependem
da secreo de um neurotransmissor, para o qual h receptores na membrana da
clula efetora.
4. o fato de o citoplasma ser negativo em relao ao meio extracelular. Essa diferena
de distribuio de cargas mantida pela bomba de Na+/K+ e, em menor escala, pelos
canais vazantes de K+.
5. Os canais inicos, depois de se abrirem, passam por um perodo refratrio,
ficando inativos. Isso garante que apenas os canais frente se abram, propagando
o estmulo.
6. o resultado conjunto da atividade da bomba de Na+/K+, dos canais lentos de K+
e do perodo refratrio dos canais de Na+.
7. As vesculas sinpticas s so exocitadas aps a entrada de clcio no terminal. Isso
s acontece pela abertura de canais de Ca++ ativados por voltagem existentes na
membrana do terminal.
C E D E R J 257
Aula 11
1. As clulas musculares se originam a partir de mioblastos que se fundem, dando

origem a clulas longas e multinucleadas. O crescimento ocorre pela fuso de mais
mioblastos s fibras existentes. O exerccio tambm estimula a sntese de mais fibrilas
contrteis, levando ao aumento do dimetro da fibra muscular.
2. O msculo liso e o estriado cardaco so uninucleados e involuntrios. O msculo
cardaco formado por clulas que se encaixam umas nas outras e possuem muitos
desmossomas entre si, para garantir a unio e junes Gap, para a passagem dos ons
que conduzem o estmulo de contrao. Os msculos lisos no possuem um arranjo to
regular de actina e miosina, por isso no so estriados. So clulas alongadas e uninuleadas
e sua contrao mais lenta e mais persistente que nos msculos esquelticos.
3.
a) sarcmero a unidade de contrao da fibra muscular;
b) sarcolema corresponde membrana plasmtica da fibra muscular;
c) retculo sarcoplasmtico corresponde ao retculo endoplasmtico liso da clula
muscular;
d) tbulo T ou tbulo transverso uma invaginao do sarcolema no sentido
transversal da fibra. Permite que o estmulo (despolarizao) chegue rapidamente
a todos os pontos da fibra;
e) trade o conjunto formado por um tbulo T e dois elementos do retculo
sarcoplasmtico adjacentes a este.
4.
a) alfa-actinina principal protena formadora do disco Z;
b) Cap Z protena do disco Z que protege a extremidade do filamento de actina
da despolimerizao;
c) tropomodulina protena que protege a extremidade plus do filamento de
actina da despolimerizao;
d) troponina protena reguladora dependente de clcio;
e) tropomiosina protena reguladora que encobre o stio de ligao para miosina
no filamento de actina;
258 C E D E R J
f) nebulina protena que envolve o filamento de actina;

g) titina protena longa e espiralada que liga o disco Z aos feixes de miosina.
5. Porque a actina se dispe em filamentos em torno de feixes formados por molculas de
miosina do tipo II que se ligam pelas caudas, formando feixes, e no filamentos isolados.
6. A ligao de ATP s cabeas de miosina provoca seu desligamento do filamento
de actina.
7. Porque, com a morte, cessa a produo de ATP, e, sem ATP, a miosina que estiver
ligada actina (msculo contrado) assim permanecer.
Aula 12
1. Ser no diferenciada e possuir capacidade de dividir-se e originar tipos celulares

especializados.
2. Sim.
3. a etapa do desenvolvimento embrionrio aps a mrula, em que o embrio
envolto por uma camada de clulas, o trofoectoderma, que dar origem placenta,
e uma massa central de clulas, os blastmeros, que daro origem ao embrio
propriamente dito e aos demais anexos embrionrios.
4. Da massa central do blastocisto.
5. Retira-se o ncleo de uma clula somtica do animal que vai ser clonado e implanta-se
esse ncleo num vulo enucleado de outro animal. O zigoto assim formado implantado
no tero de uma terceira fmea.
6. As clulas do animal gerado assim possuem a mesma idade das clulas do
animal doador do ncleo. Dessa forma, o animal cronologicamente jovem, mas
biologicamente velho.
7. So clulas que permanecem indiferenciadas no indivduo, provendo a substituio
e a renovao permanente dos tecidos.
8. As clulas-tronco hematopoiticas e as estromais ou mesenquimais.
9. Das hematopoiticas se originam os leuccitos e eritrcitos. As estromais podem
dar origem a cardiomicitos, adipcitos, clulas da cartilagem e sseas.
C E D E R J 259
10. As interaes que ela fizer, ou deixar de fazer, com molculas do meio extracelular
(por exemplo, a -integrina da membrana das clula-tronco da pele, que reconhece
molculas da lmina basal) ou com clulas vizinhas (como no caso das clulas
hematopoiticas e estromais, que se reconhecem pela protena notch).
11. Em criptas, invaginaes que no se expem na superfcie das vilosidades.
As clulas se diferenciam apenas quando vo chegando superfcie das vilosidades,
exceto pelas clulas de Paneth, que permanecem nas criptas.
12. So as clulas-satlite, que existem em pequeno nmero dispersas entre as
fibras contrteis.
13. Tratamento de queimados (pele), leucemias e tratamento de enfartados.
14. Tratamento de leses nervosas, substituio de articulaes desgastadas,
regenerao funcional do fgado e do pncreas.
Aula 13
1. A morte celular programada geralmente ocorre em resposta a fatores ambientais

ou a danos fisiolgicos detectados pela clula. um tipo de morte silenciosa em que
no se observa resposta inflamatria.
2. Na vida embrionria, participar da modelagem do embrio. Findo o desenvolvimento
e o crescimento, manter constante o nmero de clulas do indivduo adulto.
3. Na necrose h extravasamento do citoplasma e resposta inflamatria. Na apoptose,
a clula se fragmenta em corpos apoptticos selados por membrana e no h resposta
inflamatria.
4. As etapas moleculares da apoptose so as seguintes: estmulo, gerao do sinal
intracelular, propagao intracelular do sinal, ativao dos efetores (atividade de
enzimas caspases que iniciam a converso da clula ao fentipo apopttico),
clivagem de protenas celulares pelas caspases e formao e eliminao dos corpos
apoptticos.
5. So enzimas que catalisam a clivagem do DNA, dos filamentos do citoesqueleto e
outros eventos relacionados apoptose.
260 C E D E R J
6. Existem duas vias possveis de ativao da apoptose. Uma delas, conhecida por via
externa, geralmente fruto de uma interao receptor-ligante. Neste caso particular,
as protenas receptoras da superfcie celular so chamadas receptores de morte. Estes
receptores de morte ligam-se a molculas (ligantes) que se encontram na superfcie
de outras clulas, e o resultado a apoptose da clula que os expressa em sua
superfcie. A outra via, conhecida por via interna, no ativada por uma interao
receptor-ligante. So estmulos internos, certas condies de estresse e dano celular,
como aqueles que resultam do efeito de radiaes, toxinas e drogas.
7. A diferena entre estas vias est no tipo de molculas que so ativadas. A via
externa ativa molculas adaptadoras e caspases diferentes da via interna, que possui,
por exemplo, o papel essencial da mitocndria.
8. As protenas adaptadoras so fundamentais para transformar o estmulo em uma
complexa via de ativao enzimtica (via das caspases), que leva a clula morte.
9. Eles so importantes na manuteno do nmero de clulas do indivduo adulto, no
processo de desenvolvimento embrionrio e na defesa do organismo contra infeces
virais.
10. No, apoptose um tipo de morte celular programada, mas existem outros.
C E D E R J 261
Servio grfico realizado em parceria com a Fundao Santa Cabrini por intermdio do gerenciamento
laborativo e educacional da mo-de-obra de apenados do sistema prisional do Estado do Rio de Janeiro.
Maiores informaes: www.santacabrini.rj.gov.br
Volume nico
I SBN 85 - 7648 - 134 - 0
9 788576 481348

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Fundao Cecierj / Consrcio Cederj

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Ktia Ferreira dos Santos

Alexandre Rodrigues Alves

Andra Dias Fies

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UFRJ - UNIVERSIDADE FEDERAL DO

UERJ - UNIVERSIDADE DO ESTADO DO

UFRRJ - UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL

UFF - UNIVERSIDADE FEDERAL FLUMINENSE

UNIRIO - UNIVERSIDADE FEDERAL DO ESTADO

Aula 2 - A clula em diviso _______________________________________ 25

Aula 3 - Ncleo interfsico ________________________________________ 41

Aula 4 - Transporte ncleo-citoplasma________________________________ 59

Aula 6 - Junes celulares 2: Junes ancoradouras e junes comunicantes ___ 89

Aula 7 - Matriz extracelular_______________________________________ 107

Aula 8 - Matriz extracelular: as protenas da matriz _____________________ 119

Aula 9 - Parede celular __________________________________________ 135

Aula 11 - A clula muscular _______________________________________ 163

Aula 12 - As clulas-tronco ________________________________________ 187

Aula 13 - A clula apoptptica _____________________________________ 209

Aula 14 - A clula cancerosa _______________________________________ 233

Ao final desta aula, voc dever ser capaz de:

Biologia Celular II | O ciclo celular

Figura 1.1: O ciclo celular de uma clula de mamfero

AS FASES DO CICLO CELULAR

Biologia Celular II | O ciclo celular

Multiplicao sem crescimento. Ser que pode?

CONTROLE DO CICLO CELULAR

Figura 1.4: O ovcito de Xenopus mede mais

Biologia Celular II | O ciclo celular

CONTROLE INTERNO DO CICLO

A princpio, acreditava-se que o controle do ciclo celular estava

Ovcito inicia mitose

Figura 1.5: Demonstrao experimental da presena do fator de promoo de mitose. Apenas

Um fato intrigante que essas quinases estavam presentes no ovo

de Xenopus em todas as fases do ciclo celular, enquanto a ativao do

Figura 1.6: Aps injeo do extrato citoplasmtico de Xenopus, a atividade

Essa pergunta no foi respondida atravs de experimentos feitos

Biologia Celular II | O ciclo celular

Concluiu-se assim que o MPF , na verdade, um complexo

Figura1.8: Para que determinada fase do ciclo

mudanas na clula, como a condensao dos

Tambm ficou mais clara a dinmica de ativao das Cdks: as

CONTROLE EXTERNO DO CICLO: A ORDEM DOS FATORES

do ciclo celular existem diversos pontos de checagem. Para passar

etapa seguinte, cada item da etapa anterior checado e, se no estiver

Uma clula pode ficar muito tempo em G1 se no houver nutrientes

Biologia Celular II | O ciclo celular

nutrientes, de temperatura e pH adequados realizao dos processos

CICLINAS E CDKS: PRECISO ALGO MAIS

Figura 1.10: O complexo promotor de mitose depende

outro da Cdk para que o complexo se torne ativo.

VOC UM HOMEM OU UM COGUMELO?

Biologia Celular II | O ciclo celular

Afinal, o que as Cdks fosforilam?

intermedirios que formam uma rede que reveste o envoltrio

Cada etapa do ciclo depende de ciclinas diferentes

Figura 1.11: Cada complexo ciclina-Cdk

Em contrapartida, uma vez encerrada aquela etapa, como