EXTRACCIN DEL ADN:

Introduccin:

ADN es la abreviatura del cido desoxirribonucleico (en ingls, DNA).

Constituye el material gentico de los organismos. Es el componente qumico
primario de los cromosomas y el material del que los genes estn formados.

La prctica la pudimos realizar en el laboratorio. La extraccin de ADN requiere

hacer varias series de etapas bsicas. En primer lugar tienen que romperse la
pared celular y la membrana plasmtica para poder acceder al ncleo de la
clula. Despus debe romperse igual la membrana nuclear para dejar libre el
ADN. Por ltimo hay que proteger el ADN de enzimas que puedan disminuirlo y
para aislarlo hay que hacer que se precipite en alcohol. El ADN es soluble
en agua, pero cuando se encuentra en alcohol se desenrolla y precipita en la
interface entre el alcohol y el agua. Adems de permitirnos ver el ADN, el
alcohol separa el ADN de otros componentes celulares, los cuales son dejados en
la solucin acuosa. La sal evita la unin de las protenas al ADN.

Objetivo:

Realizar la extraccin de ADN de tejidos animales y vegetales y reflexionar

sobre la simpleza de su composicin con sencillas tcnicas.
Observar la estructura fibrilar del ADN.
Establecer la relacin entre el proceso de extraccin y propiedades qumico fsicas del ADN.
MATERIALES UTILIZADOS:

Cuchara
Tubo de ensayo
Bolsas de polietileno
Gradilla
Vaso precipitado

SUSTANCIAS UTILIZAD0S:
Agua
Detergente
Alcohol etlico al 96%
Enzimas (maracuy y granadilla).
Sal.
Bicarbonato sdico.

Para qu sirve la pizca de sal que ponemos en la mezcla? La sal en

disolucin acta disminuyendo la solubilidad de las protenas, lo que hace que
precipiten y se separen ms fcilmente del ADN.
Para qu utilizamos el detergente? El detergente (O gel o champ) utilizado
en el experimento tiene como funcin destruir las membranas celulares del tejido
vivo que estamos utilizando; el detergente disuelve las grasas, que es el
componente principal de la membrana plasmtica y nuclear de las clulas (es el
mismo principio por el que el gel limpia la grasa de nuestra piel). Al romperse
las membranas celulares se permite la salida del ADN al exterior. La licuadora
ayuda
en
la
rotura
de
estas
clulas.
Para qu se utiliza el alcohol? El ADN es una molcula muy larga y tiende
agruparse. De ah la facilidad para retirarla. Para aislar el ADN hay que hacer
que precipite en alcohol. El ADN es soluble en agua, pero cuando se encuentra
en alcohol precipita en la interface entre el alcohol y el agua. Adems de
permitirnos ver el ADN, el alcohol separa el ADN de otros componentes
celulares, los cuales son dejados en la solucin acuosa.
Para qu se aaden enzimas o zumo de pia? Las enzimas son unas
sustancias que atacan a las protenas de las clulas, lo que permite romperlas y
separarlas del ADN, que es el material que buscamos. Si no disponemos de
enzimas, podemos utilizar zumo de pia (el cual contiene papana, sustancia que
degrada las protenas).
DESCRIPCIN-REALIZACION PRCTICA:
Pasos.
1: desinfectar los materiales y las muestras, en este caso la granadilla y la
maracuya .
2: se realizado el cortado la muestra
3: se extrajo el zumo
4: triturar la muestra con un poco de agua
5: agregar el cloruro de sodio a la muestra y agitar rigurosamente en un tiempo
aproximado de 2 min.
6:

Separar despus los restos vegetales ms grandes hacindolo pasar por un colador lo ms
fino posible.
7: Retirar 5 ml de muestra a un tubo de ensayo y aadir con pipeta 10 ml de alcohol de 96 % .
Se tiene que dejar escurrir lentamente el alcohol por la cara interna del recipiente, teniendo ste
inclinado. El alcohol va a quedar flotando sobre el sobre la superficie del tubo de ensayo.
8:

realizacin practica:

1.- Cortamos la zona central de la maracuy en dos

2.- En un vaso de agua echamos poco de detergente lavavajillas y una de sal y
aadimos agua de stilada hasta llenar el vaso.
3.- Mezclamos esta solucin con el zumo de maracuy.
4.- Licamos el conjunto, con la batidora, a velocidad mxima durante 30
segundos

5.- Filtramos el lquido obtenido con un filtro de caf.

6.- Llenamos un cuarto de un tubo de ensayo con la disolucin filtrada.

Aade otro tanto de zumo de pia y mezclamos bien.

7.- Aadimos un volumen de alcohol muy fro equivalente al del filtrado,

cuidadosamente, hacindolo resbalar por las paredes del vaso para que forme
una capa sobre el filtrado.

8.- Dejamos reposar durante 2 3 minutos hasta que se forme una zona turbia
entre las dos capas. A continuacin introducimos la varilla y extraemos una
maraa de fibras blancas de ADN.