Alfredo Isaac Ponce Arias

EXAMEN A CASA PARA ENTREGAR EL 12 DE MAYO

1. La enfermedad de Parkinson (EP) se caracteriza por la prdida progresiva de
neuronas dopaminrgicas y la formacin de agregados de -sinucleina. Varios modelos
bioqumicos se han utilizado para determinar el papel de la neuroinflamacin en esta
patologa. El MPTP (1-metil-4-fenil-1,2,3,6-tetrahidrodopamina) es un modelo que
produce muerte de clulas dopaminrgicas y expresin de genes anormales.
En este estudio se demostr que la administracin de MPTP en ratones jvenes
+
+
aumenta el nmero de astrocitos GFAP hipertrficos y microglia Iba-1 ameboide,
mostrando un pico mximo a los 3 das de la administracin. Despus de este tiempo,
los astrocitos GFAP+ disminuyeron pero se mantuvieron en niveles mayores a los
+
basales, mientras que las clulas Iba-1 disminuyeron hasta mostrar los mismo niveles
que los controles.

a) Cmo explicas estos cambios?

La glia se activa en respuesta a la muerte neuronal desde el da 1, alcanzando ambos
tipos celulares un pico de activacin al da 3, despus la microgla vuelve a su estado
normal pero los astrocitos siguen activos a lo largo del tiempo (da 42), lo que sugiere
que tienen un efecto no slo en la remocin de restos celulares derivados de la muerte
celular, sino tambin en el dao o recuperacin posterior de las neuronas.
b) Qu relacin pueden tener los niveles de GFAP e Iba-1 con los niveles de
dopamina y sus metabolitos? Los niveles de DA comienzan a aumentar a partir del da
28-30 aproximadamente, en este periodo es justo cuando la microgla cesa su actividad
amoeboide y los astrocitos igualmente disminuyen su activacin, sugiriendo que a partir

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de estos das los astrocitos tienen un efecto neuroprotector ya que su actividad sigue
incrementada con respecto al control pero los niveles de dopamina comienzan a
normalizarse, adems la inactivacin de la microgla podra ser un facilitador de la
recuperacin neuronal al no favorecer an ms la muerte neuronal, ya que se ha
reportado que la microgla sobreexpresa receptores especficos para DA (Mastroeni et
al. 2009), que favorecen su migracin y regulan la produccin de NO (Frber et al.
2005).
Los niveles de DOPAC y HVA se recuperan a los 14 das de la administracin de MPTP,
pero para se periodo la DA an no se recuper al nivel basal, por lo que los datos
sugieren que se est produciendo DA en algunas neuronas (las pocas que
sobrevivieron) y que se est metabolizando rpidamente hacia DOPAC y HVA o que
estos metabolitos son de origen glial, lo que parece ms plausible ya que se ha
reportado que los astrocitos metabolizan DA hacia DOPAC preferentemente en
exposicin prolongada a DA (Asanuma et al. 2014) y pueden almacenar tanto DOPAC
como HVA para su posterior transporte hacia el sistema circulatorio. Hasta el da 28-30
que los niveles de DA comienzan a normalizarse, DOPAC y HVA aumentan hasta los
niveles basales, por lo que hasta ese entonces podra adjudicarse el papel de la
neurona en el metabolismo de la DA.

La administracin de MPTP indujo la expresin de un factor de transcripcin (Ft)

relacionado con procesos de diferenciacin, sobrevivencia neuronal, plasticidad y
neurognesis. La expresin de Ft colocaliz con astrocitos GFAP+. El efecto de Ft sobre
la toxicidad de MPTP se evalu en dos medios de cultivo neuronales y astrocitosneuronales. La presencia de astrocitos en el medio aumento la sobrevida neuronal,
efecto que se bloquea con la adicin de un inhibidor del Ft. Adems, la administracin
de MPTP al medio astroctico indujo la expresin de CCL3, CxCL10 y CxCL11

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c) Qu sugieren estos resultados?

El efecto neuroprotector de los astrocitos depende de Ft ya que al inhibir la va, el efecto
txico del MPTP se recupera al nivel de un cultivo sin astrocitos (cocultivo
neurona/astrocito +inhibidor = 37.5% sobrevivencia, cultivo neuronal puro + PBS =
37.5% sobrevivencia) y viceversa, al administrar Ft al cultivo puro se obtiene la misma
sobrevivencia que el cocultivo neurona/astrocito as como aumenta la sntesis de DA
evaluada con la incorporacin de 3H
d) Mediante qu mecanismos los astrocitos podran disminuir la neurotoxicidad
producida por la administracin de MPTP?
La produccin de CXCL10-11 puede o no estar relacionada con el efecto neuroprotector
de los astrocitos, ya que en el cocultivo neurona/astrocito, estas quimiocinas
favoreceran la proliferacin de astrocitos por medio de la activacin de la va PI3K pero
tambin pueden aumentar la concentracin de Ca+2 intracelular y activar las mltiples
vas de muerte mediadas por calcio, que no seran reprimidas ya que existe un dao
anterior provocado por el MPTP. Igualmente CCL3 puede incrementar [Ca+2] por medio
de NMDAR (Kuijpers et al. 2010) y en una neurona sana esto sera benfico para su
actividad sinptica; sin embargo la neurona est comprometida por el MPTP y puede
que el NMDAR active una va de excitotoxicidad en vez de plasticidad neuronal.

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Recientemente se ha reportado que los astrocitos pueden suprimir la respuesta

inflamatoria mediada por ellos mismos y por microgla por medio de receptores para
DA (Shao et al. 2013) que pueden mediar respuestas inmunes dependientes de MHC
II y TNF-, ste ltimo se sabe que tiene un papel fundamental en la muerte inducida
por MPTP (Ferger et al. 2004).
Por lo tanto no es fcil establecer el mecanismo preciso por el cual los astrocitos
podran tener un efecto neuroprotector al dao por MPTP, pero s es posible asegurar
que en el proceso est involucrado Ft que favorezca la expresin de genes de
sobrevivencia celular, tambin dentro del mecanismo de proteccin debe estar el
metabolismo de DA y su parte energtica y adems un componente inmunoregulador
que inhiba la produccin de citocinas proinflamatorias y favorezca la produccin de
enzimas antioxidantes que contrarresten la desregulacin del metabolismo oxidativo de
DA y MPTP.
Durante el envejecimiento ocurren cambios conductuales, morfolgicos y
neuroqumicos que podran modificar la capacidad del sistema de recuperarse del dao
causado por MPTP. Estos cambios tambin podran alterar el comportamiento glial
contribuyendo a la neurodegeneracin relacionada con la edad. En ratones de mediana
edad, la administracin de MPTP causo una muerte de clulas dopaminrgicas ms
pronunciada, acompaada de una fuerte y persistente astrogliosis, en comparacin con
ratones jvenes. Sin embrago, la expresin de Ft no aument. La muerte neuronal se
revirti con la activacin farmacolgica de la va Ft.

Alfredo Isaac Ponce Arias

e) Qu indica esto? Ilustra en un esquema el mecanismo mediante el cual MPTP

induce neuroinflamacin y como los astrocitos y la microgla interaccionan con las
neuronas dopaminrgicas para contribuir y/o prevenir este efecto.
Que Ft es un factor de crecimiento que disminuye su expresin al aumentar la edad
como la mayora de los factores de neurotrficos (Silhol et al. 2008; Guillet et al. 1999)

Astrocito

Microgla
MHC II, TNF-
MHC II, TNF-, IL-1

Ft
?

Activacin de
astrocitos, microgla y
muerte neuronal

DADOPACHVA
CCL3,CXCL11,
CXCL10
DRD2

NO

Activacin

Inactivacin

Activacin

Activacin
de otros
astrocitos,
proliferacin
por medio
de PI3K
MAPK

DRD3?

?
Sobrevivencia neuronal

NMDAR

CXCR3
Ca+2

Mitocondria
Desacoplamiento
NADH desh
NF-B

ROS

ATP

MPTP
MAO-B

Dao oxidativo
Excitotoxicidad
Muerte
DA

Neurona

MPP+

DAT

MPP+

DAMPS

Alfredo Isaac Ponce Arias

Referencias
Asanuma, Masato; Miyazaki, Ikuko; Murakami, Shinki; Diaz-Corrales, Francisco J.; Ogawa, Norio (2014): Striatal
astrocytes act as a reservoir for L-DOPA. In PLoS ONE 9 (9), pp. e106362. DOI: 10.1371/journal.pone.0106362.
Frber, Katrin; Pannasch, Ulrike; Kettenmann, Helmut (2005): Dopamine and noradrenaline control distinct
functions in rodent microglial cells. In Molecular and cellular neurosciences 29 (1), pp. 128138. DOI:
10.1016/j.mcn.2005.01.003.
Ferger, Boris; Leng, Andreas; Mura, Anna; Hengerer, Bastian; Feldon, Joram (2004): Genetic ablation of tumor
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mouse striatum. In Journal of neurochemistry 89 (4), pp. 822833. DOI: 10.1111/j.1471-4159.2004.02399.x.
Guillet, C.; Auguste, P.; Mayo, W.; Kreher, P.; Gascan, H. (1999): Ciliary neurotrophic factor is a regulator of
muscular strength in aging. In The Journal of neuroscience : the official journal of the Society for Neuroscience
19 (4), pp. 12571262.
Kuijpers, M.; van Gassen, K L I; de Graan, P N E; Gruol, D. (2010): Chronic exposure to the chemokine CCL3
enhances neuronal network activity in rat hippocampal cultures. In J. Neuroimmunol. 229 (1-2), pp. 7380. DOI:
10.1016/j.jneuroim.2010.07.004.
Mastroeni, Diego; Grover, Andrew; Leonard, Brian; Joyce, Jeffrey N.; Coleman, Paul D.; Kozik, Brooke et al.
(2009): Microglial responses to dopamine in a cell culture model of Parkinson's disease. In Neurobiol. Aging 30
(11), pp. 18051817. DOI: 10.1016/j.neurobiolaging.2008.01.001.
Shao, Wei; Zhang, Shu-zhen; Tang, Mi; Zhang, Xin-hua; Zhou, Zheng; Yin, Yan-qing et al. (2013): Suppression of
neuroinflammation by astrocytic dopamine D2 receptors via B-crystallin. In Nature 494 (7435), pp. 9094.
DOI: 10.1038/nature11748.
Silhol, M.; Arancibia, S.; Perrin, D.; Maurice, T.; Alliot, J.; Tapia-Arancibia, L. (2008): Effect of aging on brainderived neurotrophic factor, proBDNF, and their receptors in the hippocampus of Lou/C rats. In Rejuvenation
Res 11 (6), pp. 10311040. DOI: 10.1089/rej.2008.0791.