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PROFESSORES
Nadja Cristhina de Souza Pinto - COORDENADORA
Fbio Luis Forti
Ricardo Giordano
Mrio Jos Politi
2013
GLICLISE
4. J ATP produzido em duas reaes distintas pelas quais um radical fosforil transferido
de, respectivamente, glicerato-1,3-P e P-enolpiruvato para ADP, em transferncias
catalisadas por glicerato-1,3-P-quinase e P-enolpiruvato-quinase. Esta maneira de
fosforilao de ADP conhecida como fosforilao a nvel do substrato, para distingui-la da
fosforilao oxidativa da mitocndria que ser vista mais adiante.
HOCH2
HO
GLICLISE
OH
OH
Glicose
OH
ATP
ATP
ADP
ADP
P -OCH2
O
HO
OH
Glicose 6-fosfato
OH
OH
Grupo de
P -O-CH2 O
CH2OH
HO
OH
Frutose 6-fosfato
HO
ATP
ATP
ADP
P -O-CH2 O
ADP
CH2O- P
HO OH
HO
HC=O
H2C-O- P
C=O
Diidroxiacetona
fosfato
HC-OH
H2C-OH
H2C-O- P
Gliceraldedo
3-fosfato
Pi
NAD+
Pi
NAD+
NADH
NADH
O=C-O- P
HC-OH
1,3 Bisfosfoglicerato
H2C-O- P
ADP
ADP
ATP
ATP
O=C-OHC-OH
3-Fosfoglicerato
H2C-O- P
COOHC-O- P
2-Fosfoglicerato
H2C-OH
H2O
COOC-O- P
CH2
Fosfoenolpiruvato
ADP
ADP
ATP
C=O
HC-OH
CH3
ATP
COO-
COO-
NAD+
NADH
CH3
Lactato
Piruvato
NAD+
NADH
discusso:
1.) Equacione a reao lquida da transformao de glicose em piruvato. Como regenerada
a capacidade oxidante do sistema NAD +/NADH necessria atividade glicoltica nos
CICLO DE KREBS
Piruvato
CoASH + NAD+
CO2 + NADH
Acetil-CoA
H2O
Oxaloacetato
CoASH
Citrato
NADH + H+
H2O
NAD+
cis-Aconitato
L-Malato
H2O
H2O
Fumarato
Ciclo de Krebs
FADH2
Isocitrato
NAD+
FAD
NADH + H+
Succinato
Oxalosuccinato
GTP
CO2
GDP + Pi
Succinil-CoA
NADH
+ H+
CoASH
CO2
a-Cetoglutarato
NAD+
Grupo de discusso:
1.) Escrever a reao de formao de acetil-CoA a partir de piruvato e indicar:
a) as 5 coenzimas necessrias
b) as vitaminas envolvidas
c) a sua localizao celular
2.) Quais os produtos do ciclo de Krebs?
2. A cadeia respiratria contem 4 complexos, I,II, III e IV, ordenados por ordem crescente de
potencial redox, indo do potencial padro de NAD+/NADH (E0= -0,315V) ao do O2/H2O (E0=
+0,815V). Os eltrons so transferidos do complexo I ou II para o complexo III pela
coenzima Q (ou ubiquinona), e do complexo III para o complexo IV pelo citocromo C
para chegar ao O2. NADH e FADH2 , cedem eltrons, respectivamente, aos complexo I e II.
A transferncia exergnica de eltrons do nvel redox de NADH para o de O 2 (E0= 1,130V)
envolve uma diferena de energia livre liberada (G 0= -218kJ/mol) que em parte retida
pelo transporte de H+ do lado interno para o externo da membrana, criando o gradiente
eletroqumico de prtons que permitir empurrar o processo endergnico de fosforilao
de ADP por Pi para gerar ATP, atravs da bomba de prtons que constitui a ATP sintase
(tambm conhecida com F1F0- ATPase).
Espao
Intermembranar
2 H+
4 H+
2 H+
Cit C
Complexo I
Matrix
Mitocondrial
Complexo III
Complexo IV
NAD+
1/2 O2 + 2H+
NADH + H+
H2O
Complexo II
FADH2
3. A ATP sintase distinta e fisicamente separada da cadeia de transporte de eltrons. A
transferncia de 2e de NADH at O2 envolve um G0= -218kJ/mol, que gera um incremento
no gradiente de prtons suficiente para mover a ATP sintase, permitindo a produo de 3
moles de ATP (G0= +30,5kJ/mol). Nestas condies, a ATP sintase trabalha com uma
eficincia termodinmica igual a 42%. , no entanto, necessrio destacar que quando os 2e
saem do nvel redox de FADH2 , formam-se apenas 2ATP. Naturalmente, para uma melhor
4. A grande quantidade de energia livre que seria dissipada na oxidao completa da glicose a
CO2 e H2O [C6H12O6 + 6 O2 6 CO2 + 6 H2O; G0= -2823 kJ/mol] aproveitada para
produo de ATP, graas quase exclusivamente ao processo de fosforilao oxidativa,
rendendo 38ATP por mol de glicose (incluindo neste total 2ATP da gliclise e 2 do ciclo de
Krebs).
6. A sntese de ATP a partir de ADP e P i na mitocndria, que catalisada pela ATP sintase,
dirigida pelo processo de transporte de eltrons. Mas como a ATP sintase fisicamente
separada das protenas do transporte de eltrons, a energia livre liberada no transporte de
eltrons deve ser conservada em uma forma que possa ser utilizada pela ATP sintase. A
energia livre do transporte de eltrons conservada pelo bombeamento de H + da matriz
mitocondrial para o espao intermembranar, criando um gradiente de H+ atravs
Grupo de discusso:
1.) Entre os transportadores universais de eltrons da cadeia respiratria esto NAD + e os
nucleotdeos de flavina (FAD e FMN), quais so as diferenas entre estes transportadores
de eltrons quanto a potencial redox e forma de interao com as enzimas com as quais
atuam?
3.) Classifique os seguintes inibidores quanto a seus mecanismos de ao na cadeia
respiratria: a) rotenona; b) antimicina A; c) oligomicina e d) DNP (2,4-dinitrofenol).
GLICONEOGNESE.
1. O fgado humano precisa manter nveis mnimos da glicose circulante, porque crebro e
hemcias dependem quase exclusivamente de glicose para produo de energia. No entanto,
a reserva de glicognio heptico no suficiente para essa finalidade. Por isso, o fgado
sintetiza glicose de novo a partir de lactato, piruvato, glicerol, intermedirios do ciclo de Krebs
e aminocidos, atravs de uma via anablica chamada de gliconeognese. No jejum, mesmo
o jejum de poucas horas, a gliconeognese a principal fonte da glicose liberada pelo fgado
na circulao.
2. A gliclise, como j foi visto, um a via catablica com a finalidade de produzir energia na
forma de 2NADH + 2ATP a partir da degradao de glicose a piruvato de acordo com a
equao qumica seguinte:
Glicose + 2NAD+ + 2ADP + 2Pi 2Piruvato + 2NADH + 2ATP + 2H2O + 4H+
A gliconeognese tem a finalidade de sintetizar glicose a partir de piruvato, isto , faz o
caminho metablico inverso ao da gliclise. Mas, a gliconeognese , contrariamente
gliclise, muito endergnica. Para produzir glicose a partir de piruvato necessitam-se
2NADH+4ATP+2GTP, conforme a estequiometria indicada na equao abaixo:
2Piruvato+2NADH+4H++4ATP+2GTP+6H2O Glicose+2NAD++4ADP+2GDP+6Pi
3. A gliconeognese utiliza enzimas glicolticas reversivelmente, mas trs dessas enzimas, a
hexoquinase, a fosfofrutoquinase e a piruvato quinase, catalizam reaes com G- muito
negativo,
sendo
essencialmente
irreversveis.
Estas
reaes
so
substitudas
na
1.
Algumas de suas propriedades fsico-quimicas so ideais para essa funo: a) elevado grau
de reduo de seus C, maximizando a quantidade de energia livre liberada na oxidao e b)
alta hidrofobicidade, permitindo estocagem livre de gua (estoques anidros). No por acaso
que os triglicerdeos compe cerca de 90% da reserva de energia metablica e tambm da
dieta lipdica dos humanos.
2.
glicerol e cidos graxos livres, catalisada por lpase especfica. Os cidos graxos livres so
carregados pela corrente sangunea na forma de complexos com albumina, que representa
50% da protena do plasma. cidos graxos livres so muito insolveis, a ~1microM formam
micelas, que so altamente txicas.
3.
matriz mitocondrial e se chama beta-oxidao. Esta via leva clivagem sequencial da cadeia
do cido graxo em pares de C, liberando a cada ciclo: 1acetilCoA, 1NADH e 1FADH 2 (ver
reaes abaixo), que alimentaro, respectivamente, o ciclo de Krebs e a cadeia respiratria.
Mas, a beta-oxidao exige previamente uma ativao inicial que consome 1 ATP e libera o
cido graxo na forma de acilCoA. Esta etapa preliminar de ativao se d associada
membrana externa da mitocndria e, a transferncia da acilCoa para dentro da mitocndria,
mediada pela carnitina.
(acil-CoA)
oxidao
FAD
FADH2
H
R CH2 C = C C S-CoA
(enoil-CoA)
H
hidratao
H2O
HO H
R CH2 C C C S-CoA
H
(L-hidroxiacil-CoA)
H
NAD+
oxidao
NADH
O
(ceto acil-CoA)
CoA
R CH2 C S-CoA +
H3C C S-CoA
4.
(acetil-CoA)
beta-oxidao, ciclo de Krebs e cadeia respiratria, rende 129ATP. importante destacar que
este rendimento, medido em ATP/mol-oxidado, muito superior ao da oxidao completa de
aucares e protenas, pois a oxidao de um cido graxo leva liberao de 37,6kJ/g de
energia livre, enquanto oxidao de aucares ou protenas libera apenas 16,7kJ/g.
5.
Os cidos graxos so sintetizados no citosol por via anablica prpria que adiciona
estequiometria:
AcetilCoA+7malonilCoA+14NADPH+7H+ palmitato+7CO2+14NADP++8CoA+6H2O
A elongao da cadeia alm de 16C e a insero de duplas ligaes feita por outros
sistemas enzimticos especializados,
que se localizam
na membrana do retculo
gliclise e assim podem converter C de acar em cadeias de lipdeo de reserva. Mas, estes
organismos no podem fazer o caminho de volta de cadeias de cido graxo para glicose, pois
no possuem reaes que convertam acetilCoA em piruvato ou oxalacetato.
Grupo de discusso:
1.) Ponto de fuso dos cidos graxos. Os pontos de fuso de uma srie de cidos graxos de
18 tomos de carbono so: cido esterico (69,9 oC), cido olico (13,4oC), cido linolico(5oC) e cido linolnico (-11oC). Que aspecto estrutural destes cidos graxos de 18
carbonos pode ser correlacionado com o ponto de fuso? Fornea uma explicao
molecular para esta tendncia do ponto de fuso.
2.) Mostre como os cidos graxos so ativados antes de serem degradados. Em que
compartimento celular isso ocorre?
3.) Aonde e sob que forma so estocados os cidos graxos? Como os cidos graxos da
reserva metablica so mobilizados para serem oxidados na matriz mitocondrial?
4. Explique os passos da -oxidao dos cidos graxos, partindo de uma molcula de
palmitato. Calcule o rendimento energtico da oxidao completa de palmitato a CO2 e
H2O.
5.) Na -oxidao, a cadeia de cidos graxos degradada aos pares de carbono. Na sntese
de cidos graxos, a cadeia cresce tambm aos pares de carbono. No entanto, o precursor na
elongao da cadeia, durante a sntese, malonil-CoA e no acetil-CoA. Explique porqu.
convertida
gliceraldedo-3-fosfato
frutose-6-fosfato
pela
C3 + C7
Transcetolase
C7 + C3
C4 + C6
Transaldolase
C5 + C4
C3 + C6
Transcetolase
6. O excesso de ribose-5-fosfato formado pela vias das pentoses pode ser completamente
convertido em intermedirios da via glicoltica.
7. A primeira reao da via das pentoses, a desidrogenao da glicose-6-fosfato,
praticamente irreversvel. E essa a reao em que a via das pentoses controlada. O
fator regulatrio mais importante o nvel de NADP +, o receptor de eltrons na oxidao da
glicose-6-fosfato a 6-fosfogluconolactona. Alm disso, NADPH compete com NADP + pela
ligao enzima. A parte no oxidativa da via das pentoses controlada principalmente
pela disponibilidade de substratos.]]
8. A via percorrida pela glicose-6-fosfato depende da necessidade celular de NADPH + H +,
ribose-5-fosfato e ATP:
Quando muito mais ribose-5-fosfato requerida que NADPH + H +, a maior parte de
glicose-6-fosfato convertida a frutose-6-fostato e gliceraldedo-3-fosfato pela via
glicoltica, a transaldolase e a transcetolase convertem esses em ribose-3-fosfato.
Quando a necessidade de NADPH + H+ e ribose-5-fosfato esto balanceadas, a
reao predominante a formao de 2 NADPH e uma ribose-5-fosfato de glicose6-fosfato pela fase oxidativa da via das pentoses.
Quando muito mais NADPH + H + requerido que ribose-5-fosfato, a glicose-6fosfato completamente oxidada a CO2, ou convertida a piruvato.
Grupo de discusso:
1.) Mostre os produtos das vias das pentoses e seus destinos.
METABOLISMO DE AMINOCIDOS
1.
2.
3.
H, no entanto, aminocidos que no podem ser sintetizados por animais devido a falta
do precursor que fornece o esqueleto de C. Estes so ditos aminocidos essenciais e
tem que ser obtidos na dieta. Por exemplo, humanos tem que conseguir da dieta 9
aminocidos essenciais.
4.
5.
6.
7. Por outro lado, glutamina e glutamato podem ser desaminados em reaes catalisadas
pela glutaminase e desidrogenase glutmica, respectivamente:
glutamina + H2O glutamato + NH4+
glutamato + NAD+ (ou NADP+) + H2O NH4+ + alfa-cetoglutarato + NADH (ou NADPH) + H+
8. Aminocidos como alanina, aspartato e glutamato so ditos glicognicos porque podem ser
convertidos em, respectivamente, piruvato, oxalacetato e alfa-cetoglutarato, que, por sua vez,
podem ser transformados em fosfoenolpiruvato para sntese de glicose. J os aminocidos
leucina e lisina so chamados cetognicos por produzirem exclusivamente acetilCoA como
produto de degradao, portanto servindo sntese de corpos cetnicos, mas no de glicose.
Grupo de discusso:
1.) O que so aminocidos glicognicos e cetognicos? D exemplos e explique mostrando as
reaes relevantes do metabolismo.
2.) Mostre de onde vem e para onde vai os grupamentos amina e o esqueleto carbnico na
sntese e degradao dos aminocidos.
ADENDO
CICLO DO NITROGNIO.
1.
2.
A volatilidade do NH4+ (NH3 + H+) no favorece sua permanncia no solo, mas existem
bactrias autotrficas de vida livre, muito abundantes e largamente disseminadas, que
so especializadas na oxidao do ction amnio a nitrito e nitrato para fins de
obteno de energia metablica. Desta maneira o elemento N estavelmente
depositado no solo na forma de espcies qumicas, sais de nitrito e nitrato, que so
eficientemente absorvidas pelas razes das plantas e prontamente reduzidas a NH 4+ no
interior da clula vegetal.
As etapas sumariamente mencionadas compreendem o ciclo do nitrognio na natureza: a)
reduo do N2 a NH4+; b) oxidao de NH4+ a nitrito e nitrato; c) reduo de nitrito e nitrato
a NH4+ e d) transformao do elemento N de inorgnico para orgnico com a sntese de
aminocidos a partir de NH4+, reao possvel em todas a formas de organismos
biolgicos.
sinal adrenalina de fora para dentro da clula, processo que mediado pelas protenasG. H tambm receptores presentes no citoplasma nuclear e citoplasmtico e neste caso,
o hormnio precisa ter alta solubilidade a lipdeos, atravessando a membrana plasmtica
como os hormnios esterides para encontrar o seu receptor dentro da clula.
7.
a)
b)
ativadora de adenilato ciclase e do tipo GR inibindo a adenilato ciclase. Algumas toxinas podem
ativar ou bloquear a via de transduo de sinal: toxina da clera e a toxina da coqueluche.
9. Dois hormnios so os principais responsveis pelo equilbrio da concentrao da glicose
circulante: Glucagon e insulina.
10. O glucagon um hormnio que tem efeitos equivalentes ao da adrenalina no controle do
metabolismo do glicognio: possui um receptor da famlia dos receptores acoplados a
protena-G e ativa a cascata que se inicia com cAMP/PKA. Este liberado em condies de
hipoglicemia ativando processos degradativos para manuteno da glicemia sangunea. A PKA
(protena quinase ativada por cAMP) fosforila a fosforilase quinase tornando-a ativa. A
fosforilase quinase fosforila agora glicognio fosforilase. A glicognio fosforilase ativada
(quando fosforilada, glicognio fosforilase b a) catalisa a hidrlise de resduos de glicose do
glicognio liberando grupos de glicose-1-fosfato. No mesmo tempo, a fosforilase quinase,
ativada pela cascata do receptor de glucagon-protena-G, cAMP/PKA, fosforila a glicognio
sntase , a qual se torna inativa quando fosforilada (sntase I sintase D).
b) A insulina tem efeito oposto, promove a absoro de glicose pelo fgado e msculos e usa
deposio nas reservas de glicognio. Mas importante notar que a insulina tem mecanismos
de ao totalmente diferentes da adrenalina e do glucagon. Os receptores de insulina no
pertencem famlia dos receptores acoplados a protena-G e no tm ao sobre a adenilato
ciclase. Seus receptores so do grupo de receptores cujo domnio intracelular apresenta
atividade intrnseca de protena-quinase de tirosina. A insulina estimula fosfoprotenas
fosfatases. Para reverter a ao do glucagon, a insulina promove a ativao da fosfoprotena
fosfatase que catalisa a desfosforilao da glicognio fosforilase e da glicognio sintase,
levando a inativao da primeira (fosforilase a b) e ativao da segunda (sntase D
sintase I). Desta forma o fluxo glicoseglicognio favorecido. O transporte da glicose no
interior das clulas com a atuao da insulina um processo passivo mediado por uma famlia
de permeases denominadas GLUT (glicose transporter).
11. Respostas celulares rpidas desencadeadas por hormnios s podem ser obtidas atravs
da ativao, ou da inibio, de enzimas pr-existentes. Hormnios esterides (por exemplo
cortisol) quando secretados difundem-se pela membrana citoplasmtica e ligam-se ao seus
receptores intracelulares os quais, quando ativados, promovem no ncleo a regulao do
metabolismo pela induo da transcrio de genes que codificam enzimas especficas,
levando sntese de novo das protenas correspondentes, fenmeno conhecido como induo
enzimtica. Mas o mecanismo de induo enzimtica desencadeado por hormnios resulta
necessariamente numa resposta celular lenta, uma vez que os RNAs mensageiros (mRNAs)
precisam ser transcritos, processados, transportados para o citoplasma e
traduzidos para produzir as protenas enzimticas exigidas.
finalmente
12. A adrenalina estimula uma resposta local no msculo. A liberao de adrenalina induzida
por estmulo nervoso autnomo em situaes de perigo, exerccio fsico, e hipoglicemia e
induz a degradao do glicognio com os fins de fornecer glicose-1-fosfato como fonte de
energia para atividades musculares que permitem ao animal reagir a estas situaes.
13. Regulao da gliclise e gliconeognese
A gliclise uma das vias metablicas prinicipais para o fornecimento de energia. No fgado,
encontra-se tambm a gliconeognese, a qual , de forma geral, uma via antagnica da
gliclise. A regulao das duas vias feita de forma reciproca, isto , quando uma delas est
ativa, a outra est inibida. H trs vias sob controle metablico: as converses reversveis de:
(i) glicose para glicose-6-fosfato (hexoquinase e glicose-6-fosfatase); (ii) frutose-6-fosfato e
frutose-1,6-bisfosfato (fosfofrutoquinase e frutose-1,6-bisfosfatase; e (iii) fosfoenolpiruvato e
piruvato (piruvato quinase e fosfoenolpiruvato carboxiquinase, piruvato carboxilase).
A fosfofrutoquinase o principal ponto de regulao da gliclise. AMP e frutose-2,6-bisfosfato
agem como efetuadores alostricos positivos. A formao de frutose-2,6-bisfosfato est sob
controle hormonal. Em condies de hipoglicemia, o glucagon estimula a produo de cAMP
no fgado. Isso ativa a PKA a fosforilar e inativar a fosfofrutoquinase e ativar a frutosebisfosfatase-2, diminuindo a concentrao de frutose-2,6-bisfosfatase. Como resultado, o
equilbrio entre as reaes de fosfofrutoquinase alterado, em favor da sntese de frutose-6fosfato, aumentado o fluxo gliconeognico e a sntese de glicose-6-fosfato. Ao contrrio, em
condies de hiperglicemia, as concentraes de cAMP diminuram, e o consequente aumento
de frutose-2,6-bisfosfato ativa a fosfofrutoquinase e promove a gliclise.
FOTOSSNTESE
membrana
interna
praticamente
impermevel,
separadas
por
um
espao
intermembranar.
A equao geral da fotossntese :
6 CO2 + 6 H2O C6H12O6 + 6 O2 Go= +2.870 KJ x mol-1
3. As reaes dependentes de luz ocorrem na membrana tilacide e envolvem processos
semelhantes ao transporte de eltrons e fosforilao oxidativa da mitocndria. As reaes
independentes de luz ocorrem no estroma.
4. Os primeiros estudos de fotossntese realizados levaram concluso de que CO 2 era a
fonte do O2 gerado na fotossntese. Em 1931, entretanto, demonstrou-se que bactrias
fotossintetizantes anaerbicas, sintetizam glicose a partir de CO2, sem gerar O2:
CO2 + 2 H2S luz (CH2O) + 2 S + H2O
5. A reao geral da fotossntese pode ser demonstrada como segue:
CO2 + 2 H2A luz (CH2O) + 2 A + H2O
Em cianobactrias, H2A H2S, e em plantas, H2O. Isso sugere que a
fotossntese seja
um processo de duas fases, nos quais a energia solar utilizada para oxidar H2A (fase
clara):
2 H2A luz 2 A + 4[H]
e o agente redutor resultante [H] subsequentemente reduz CO2 (fase escura):
4[H] + CO2
(CH2O) + H2O
luz
7. Plantas e cianobactrias utilizam o poder redutor gerado pela oxidao de H 2O dirigida pela
luz para produzir NADPH.
9. Quando iluminado, o FS II passa para uma forma excitada e perde eltrons, os quais so
transportados por reaes de xido-reduo para o fotossistema I. O PS I iluminado
fornece eltrons para a reduo de NADP+. Como resultado temos a oxidao do FS II e a
reduo do FS I. A reposio de eltrons em PS II feita por eltrons provenientes da
oxidao de gua e, em PSI, por eltrons emitidos por PSII.
10.
11.
12.
13.
utilizados na fase escura para a sntese de carboidratos. A via pela qual as plantas
incorporam CO2 em carboidratos denominada de Ciclo de Calvin.
14.
O ciclo de Calvin engloba duas fases: (1) a fase de produo, na qual 3 molculas de
ribulose-5-fosfato reagem com 3 molculas de CO2, gerando 6 molculas de gliceraldedo3-fosfato, com o gasto de 9 ATPs e 6 NADPH + H +; (2) a fase de recuperao, na qual os
tomos de carbono de 5 gliceraldedo-3-fosfato entram em uma srie de reaes para dar
origem a 3 ribulose-5-fosfato, com as quais o ciclo recomea.
Grupo de discusso:
1.) Porque as folhas das plantas so verdes? Explique em termos de composio e espectro
de absoro dos pigmentos foliares.