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N D I C E
I - ESTERILIZAO E DESINFECO -------------------------------------------------------- 3
Esteriliza o e Desinfec o
I - ESTERILIZAO E DESINFECO
Esterilizao o processo de destruio por meio de agentes
fsicos ou qumicos de todas as formas de vida microbiana
(vrus, bactrias, fungos e esporos) presentes num material.
A esterilizao pode ser realizada por agentes fsicos e
qumicos.
1.
Calor mido
2.
1.1.
Autoclavao - um processo de esterilizao pelo
vapor sob presso em cmaras conhecidas como autoclaves
onde vapor de gua mantido em temperatura acima de
100oC, pelo emprego de presso maior que a atmosfrica, a
uma temperatura de 121oC. O tempo de exposio depende do
material a ser esterilizado. Este processo utilizado
para esterilizar vidraria, instrumentos cirrgicos, meios
de cultivo e outros.
1.2.
Tindalizao ou esterilizao fracionada - Processo
de esterilizao na temperatura de 100oC durante 30
minutos,
repetindo-se o
aquecimento
2
a
3
dias
consecutivos. Este processo usado na bacteriologia para
a esterilizao de certos meios de cultura que se alteram
em temperaturas elevada, como meios contendo acares,
leite etc.
3.
Calor Seco
2.1.
Forno de Pasteur - Neste processo so empregados
fornos ou estufas, onde a temperatura pode ser regulada e
mantida
pelo
tempo
necessrio
para
que
haja
esterilizao. realizada em temperatura de 170-180oC,
em estufas eltricas por 1 a 2 horas. O material a ser
esterilizado deve ser distribudo de modo uniforme para
facilitar a distribuio do calor que emana das paredes
laterais e da base da estufa. Este processo indicado
para
esterilizar
vidraria,
instrumentos
cirrgicos
passveis de serem oxidados pelo vapor, e materiais
impermeveis como ceras, pomadas, p e leos.
2.2.
Incinerao - um processo
descartveis
e
carcaa
de
experimentos.
usado
animais
para materiais
utilizados
em
2.3.
Flambagem - Aquecimento direto na chama do bico de
Bunsen
utilizado
em
rotina
de
laboratrio
para
esterilizao de alas de platina e bordas da boca de
tubos e bales.
Esteriliza o e Desinfec o
3.
3.1.
Tipos de filtros:
Radiaes
4.1.
Radiao ultra-violeta (UV) tem sido utilizada na
esterilizao do ar e de ambientes. Na indstria de
alimentos
so
aplicados
para
esterilizao
de
superfcies de pes, xaropes, sacos plsticos, garrafas
de gua mineral, carnes mantidas sob refrigerao.
Porm, seu uso limitado, devido a seu baixo poder de
penetrao, pois trata-se de radiao no ionizante.
4.2- Raios gama e raios X (radiaes ionizantes)tm alto
poder de penetrao. Raios gama tm sido empregados
na esterilizao de certas vacinas e sanitizao
de
alimentos embalados.
MTODOS QUMICOS
Esteriliza o e Desinfec o
MTODOS FSICO-QUMICOS
Estes mtodos associam o produto qumico com o uso de
equipamentos, garantindo assim a efetividade ao processo e
a segurana dos profissionais de sade, sendo utilizado
para materiais termosensveis.
DESINFECO E ASSEPSIA
* Desinfeco - A Desinfeco consiste na destruio ou
reduo dos microrganismos na forma vegetativa, presentes
num material inanimado ou superfcies inertes, mediante a
aplicao de agentes fsicos ou qumicos. A desinfeco no
implica a eliminao de todos microrganismos viveis, porm
elimina a potencialidade infecciosa do objeto, superfcies
ou local tratado.
* Assepsia - o termo usado para designar o processo de
desinfeco de
tecidos
vivos.
Os
anti-spticos
so
preparaes
contendo
substncias
microbiocidas
ou
microbiostticas podendo ser usadas na pele, mucosas e
ferimentos.
Exemplos:
solues
alcolicas,
solues
iodadas, solues de permanganato de potssio, formulaes
base de sais de prata, iodforos, etc.
Observaes:
No so recomendados a utilizao de iodofros no recmnascido, pois pode ocorrer absoro transcutnea de iodo
com supresso da funo tireoideana.
Esteriliza o e Desinfec o
AGENTES FSICOS:
AGENTES QUMICOS:
Principais compostos utilizados em desinfeco e assepsia:
Esteriliza o e Desinfec o
NOTAS:
As seguintes precaues devero ser tomadas para evitar
a sobrevivncia de microrganismos contaminantes, falhas de
esterilizao ou a recontaminao dos artigos esterilizados,
independentes do processo de esterilizao.
1.
2.
3.
4.
5.
devem
ser
Esteriliza o e Desinfec o
Materiais:
Swab estril
Placa com meio de cultura gar nutriente.
Antisspticos: Sabo lquido e Soluo lcool-iodado,
lcool 70% e lcool gel.
Tcnica:
1. Abrir
Resultado:
Ao dos Agentes
lcool Iodado
lcool 70%
Sabo
Sem anti-spticos
Crescimento Bacteriano
MORFOLOGIA
As
clulas
bacterianas
so
caracterizadas
morfologicamente pelo tamanho, forma e arranjo.
Tamanho - as bactrias so microscpicas medindo desde 0,3
por 0,8 m at 10 por 25 m. As espcies de maior
interesse mdico medem entre 0,5 a 1 m por 2 a 5 m.
Forma - as bactrias podem ser classificadas quanto a forma
em trs grupos bsicos:
Cocos - clulas esfricas.
Bacilos - clulas cilndricas, em forma de bastonetes.
Espirilos - clulas espiriladas. Algumas delas se comportam
como bacilos curvos, em forma de vrgula, que podem ser
denominados vbrios. Ex: Vibrio cholerae.
Arranjos - Grupamentos bacterianos.
Dependendo do plano e do nmero de divises atravs das
quais as bactrias continuam unidas, podem aparecer os
seguintes arranjos:
1.Cocos
Pares: diplococos (ex.: gonococos)
Cadeias: (ex.: estreptococos)
Ttrades ou cbicos (Sarcina)
Cocos em cachos (ex.: estafilococos)
2.Bacilos e espirilos apresentam-se em geral, como clulas
isoladas, porm ocasionalmente, pode-se observar: bacilos
aos pares (diplobacilos) ou em cadeia (estreptobacilos).
Aps a diviso de algumas bactrias, podem
ocorrer
movimentos caractersticos, por exemplo: um movimento
em
chicotada pode levar as bactrias a posies paralelas.
10
COLORAO SIMPLES
Tcnica de colorao caracterizada pelo uso de apenas um
corante, permitindo a observao da
forma, tamanho e
grupamento da clula bacteriana. Esta tcnica de colorao
bastante utilizada para a deteco de cocos que causam
meningite (Neisseria meningitidis), em amostra de lquido
cefalorraquidiano (LCR).
MTODO
1)Preparar o esfregao bacteriano em lminas;
2)Cobrir toda a lmina com soluo de azul de metileno, aguar
dar 5 minutos e desprezar o corante na pia;
3)Lavar a lmina rapidamente em gua corrente, secar com
papel de filtro ou temperatura ambiente (sem esfregar) e
observar em objetiva de imerso.
RESULTADO
Visualizar, descrever a
bactrias existente na lmina.
morfologia
arranjo
das
11
12
13
PREPARAO DO ESFREGAO
Colocar as amostras em lminas (novas e desengorduradas)
com aplicador de madeira. Escolher a partcula mais densa ou
uma mistura da amostra, quando s existirem pequenas
partculas purulentas ou mucosas. E com aplicador estirar a
amostra em 1/3 da lmina, deixar secar temperatura ambiente
e fixar como no procedimento anterior.
Tcnica:
1)Cobrir toda a lmina com fucsina fenicada.
2)Com auxlio de uma chama, aquecer a lmina, pela sua parte
inferior at emitir vapores. Repetir duas vezes esperando o
corante esfriar. Aguardar 5 minutos, no deixando o corante
nem ferver nem secar.
3)Lavar a lmina com gua corrente, suavemente.
4)Inclinar a lmina descorar com soluo lcool cido
clordrico, at no sair mais corante.
5)Lavar a lmina com gua corrente.
6)Cobrir o esfregao com soluo de azul de metileno de
Loeffler durante 30 segundos.
7)Lavar a lmina em gua corrente.
8)Deixar secar e observar ao microscpio, com a objetiva de
imerso.
Notas:
1.Na colorao de Ziehl, o aquecimento no deve ser feito
muito intenso, a ponto de ferver o corante, mas apenas at
ligeira emisso de vapores.
2.A colorao de fundo feita para corar bactrias e outras
estruturas
que
foram
diferenciadas,
para
o
efeito
contrastante ou distino entre as bactrias e clulas
presentes no material.
RESULTADO:
Visualizar, esquematizar e classificar as bactrias
existentes nas lminas. A classificao dever ser quanto
resistncia ou no das bactrias ao descoramento em lcool
cido.
Bactrias lcool cido resistente (BAAR) permanecem
coradas de vermelho pela fucsina.
Bactrias no lcool cido resistente (BNAAR) no retm
a fucsina, aparecem coradas pelo azul de metileno.
14
Resultado
Negativo
+
++
+++
de Violeta:
1g
2g
10ml
100ml
1g
2g
300ml
em frascos
de vidro
15
100ml
1ml
Azul de Loeffler
A)Azul de metileno
lcool a 95%
B)Soluo de hidrato de sdio a 0,01%
gua destilada
10,3g
30ml
1ml
100ml
16
consistncia,
quanto
aquele
em
que
os
nutrientes esto
dissolvidos em aquosa. So os caldos (broth). utilizado para
ativao das culturas, repiques de micro-organismos, provas
bioqumicas dentre outros.
Meio semi-slido: Esse meio possui na sua composio alm dos
nutrientes,
gar (polissacardeoextrado de
algas
marinhas) na concentrao de 0,075% a 0,5%. usado para
Meio slido:
um meio
que possui
na sua composio
nutrientes e uma concentrao de 1,0 a 2,0% de Agar e distribudo
em placas,tubos em vertical ou inclinados.
b)Quanto
a
procedncia:
os
meios
podem
artificiais sintticos, ou artificiais complexos.
-
ser:naturais,
Tcnica:
Preparao de meio lquido: Meio de B.H.I. (Brain-HeartInfusion).
Componentes do meio:
Infuso de corao ................... 250g
Infuso de crebro ................... 200g
Peptona ............................... 10g
Dextrose................................ 2g
Cloreto de Sdio ....................... 5g
Fosfato de Sdio ..................... .2,5g
gua destilada ....................... 100ml
Execuo:
a)Adicionar 100ml de gua destilada aos ingredientes
previamente pesados;
b)Dissolver o meio aquecendo em chama de bico de Bunsen
ou forno de microondas;
c)Distribuir o meio em tubos 16x16 aproximadamente 10ml
por tubo. Colocar tampo de algodo em cada tubo;
d)Autoclavar (121C por 15 a 20 minutos).
Preparao de meio slido: Meio gar nutriente (gar Base) ou
gar Gelose.
Componentes do meio:
Extrato de Carne ....................... 3g
Peptona ................................ 5g
gar .................................. 15g
gua destilada ...................... 1000ml
18
19
clnico
so:
agalactiae,
20
Teste de optoquina
Finalidade:
A optoquina (etil-hidrocuprenahidroclordrica) um
farmaco solvel em gua que se difunde rapidamente em meio
de cultura slido. Para este teste, em geral, utiliza-se o
disco de optoquina de6 mm contendo 5 g da droga. O teste
Interpretao:
Presena de halo 14 mm indica que a cultura sensvel
optoquina, sendo identificado Streptococcus pneumoniae.
Estreptococos -hemolticos
Teste da Bacitracina
Finalidade:
O teste tem a finalidade de diferenciar S. pyogenes de outras
cepas do grupo A de outros grupos de Streptococcus hemolticos (Grupo B, C e G).
Procedimento:
Interpretao:
A presena de halo de 10mm inibio ao redor do disco
interpretado como sensibilidade a bacitracina e indicativo
de S. pyogenes.
22
Teste de Camp
O
teste
visa
a
identificao
de
linhagens
agalactiae (grupo B). Estas linhagens produzem o
CAMP
(Christie,
Atkins e Munch-Petersen)
que
sinergicamente
com
a
-hemolisina
produzida
Staphylococcus aureus em gar sangue.
de S.
fator
atua
pelo
Procedimento:
Semear
perpendicularmente
(90)
a
colnia
de Streptococcus -hemoltico a ser testada, sem que haja
o contato com a estria de Staphylococcus aureus;
Interpretao:
23
clnico so:
epidermidis,
Morfologia celular
So cocos Gram positivos que podem apresentar-se
isolados ou em pares, em pequenas cadeias ou aglomerados em
cachos.
Identificao e diferenciao
a)Atividade enzimtica
Prova de coagulase:
A 0,5ml de plasma de coelho, adicionar 0,1ml de cultura
em caldo. Incubar em banho-maria a 37C e verificar a
intervalos de 30 minutos, se h formao de cogulo. O
Staphylococcus aureus produtor de coagulase.
Staphylococcus epidermidis, no produtor de coagulase,
usualmente
considerado
no
patognico
mas
pode
estar
envolvido
em
certas
situaes
clnicas:
endocardite
bacteriana, em cirurgia com prtese, em transplante de medula
e em cateterismo venoso.
b)Sensibilidade a novobiocina
Teste de novobiocina
Preparar uma suspenso em caldo e semear em gar. Colocar
um disco de novobiocina (5mg), incubar a 37C por 24 horas
e verificar a formao de um halo de inibio de 14mm.
Esse teste diferencia o S. saprophyticus (resistente ao
farmacoa) do S. epidermidis (sensvel a droga). O S.
saprophyticus causa relativamente freqente de infeco do
trato urinrio em pacientes jovens.
C) Teste de Fermentao do Manitol
Finalidade:
Verificar se o microrganismo tem a capacidade de fermentar o
manitol contendo 7,5% de cloreto de sdio.
Procedimento:
Leitura:
Formao de halo amarelo ao redor das colnias.
Interpretao:
Formao
de
halo
amarelo
ao
identifica Staphylococcus aureus;
redor
das
colnias,
Meio
permanece
inalterado
ao
redor
identifica Staphylococcus coagulase negativa.
das
colnias,
d) Teste da Catalase
O teste
da
estafilococos
negativa).
catalase
(catalase
Entretanto,
de Staphylococcus
utilizado
positiva)
dos
para
diferenciar
estreptococos
existem
relatos
aureus catalase
negativa
na
os
(catalase
literatura
relacionados
em
a
produo
de
gua e oxignio
22
23
Mtodos:
1.Qualitativo - Pesquisa que grupos de drogas antimicrobianas
so bactericidas para determinada espcie bacteriana numa
determinada
concentrao.
Ex.:
Tcnica
de
Kirby
Bauer(1966).
2.Quantitativo - Pesquisa que concentrao de determinada
droga
antimicrobiana
inibitria
para
uma
espcie
bacteriana isolada. Determinao da concentrao mnima
inibitria (CMI).
Mtodo de difuso com disco (Tcnica Kirby Bauer):
Difuso da droga, sob forma de disco ou comprimido na
superfcie do meio slido.
1. Padronizao do inculo bacteriano:
A partir da placa original da cultura bacteriana do
microrganismo a ser testado so transferidas 4 a 5 colnias
para um meio de cultura lquido (Caldo-Soja-Casena, Caldo
BHI, caldo Mueller-Hinton). Em seguida, incuba-se durante 2 a
4 horas. A densidade do inculo deve ser comparada com a
escala de turbidez de McFarland (cido sulfrico + cloreto de
brio), equivalente a 104 bactrias por ml de meio.
2. Semeio: Realizado atravs de swab estril embebido no
inculo bacteriano e passado em toda a rea da superfcie do
meio gar Mueller-Hinton (crescimento confluente). Deixar
secar por 2 minutos.
Com auxlio de uma pina estril colocar sob a
superfcie do meio inoculado os discos de antibiticos em
pontos eqidistantes (30 mm).
Incubar a temperatura ideal para o crescimento daquela
populao bacteriana por 18-24h.
Leitura: Observar halo de inibio em torno do disco de
antimicrobiano. O dimetro deste halo medido em mm
(halmetro) e comparado com a tabela recomendada pelo C L S I
(Clinical L a b o r a t o r y S tandards Institute, 2010). Para cada
agente antimicrobiano, o dimetro do halo poder ser
interpretado
como
sensvel
(S),
resistente
(R)
ou
intermedirio (I).
Utilizao de Drogas de baixa difuso: molculas grandes
polarizadas. Considerar pequenos halos como sensveis.
Drogas de
Considerar
e apolares.
os padres.
24
25
26
Tabela 1.
Limites para interpretao do antibiograma com 24
antibacterianos de uso corrente na teraputica clnica.
Antibacteriano
Smb.
Conc.
disco
Amicacina
Ampicilina ao
testar
microrganismos
Gram-negativos e
enterococos
Ampicilina ao
testar
estafilococos e
microrganismos
sensveis
penicilina G
Ampicilina ao
testar Haemophilus
sp.
Bacitracina
Carbenicilina ao
testar Proteus sp.
E E. coli.
Carbenicilina ao
testar Pseudomonas
aeruginosa
Cefalotina ao
relatar
sensibilidade a
todas as
cefalosporinas
Clindamicina ao
relatar
sensibilidade
clindamicina e
lindomicina
Cloranfenicol
Colistidina
Eritromicina
Estreptomicina
Gentamicina
Konanilcina
Nalidxico, cido
Neomicina
Nitrofurantona
Novoblocina
Oxocilina
Penicilina G. ao
testar
Estafilococos
Penicilina G. ao
testar outros
microrganismos
Penicilina G.
Sulfazotrin
(Sulfatomoxazol +
Trimetoprin)
Sulfonamidas
Tetraciclina
Tobramicina
Vancomicina
AM
30mcg
14 ou menos
15-18
17 ou mais
AP
10mcg
11 ou menos
12-13
14 ou mais
AP
10mcg
20 ou menos
21-28
29 ou mais
AP
10mcg
19 ou menos
BC
10un.
8 ou menos
9-12
13 ou mais
CR
100mcg
17 ou menos
18-22
23 ou mais
CR
100mcg
13 ou menos
14-16
17 ou mais
CF
30mcg
14 ou menos
15-17
CL
2mcg
14 ou menos
15-16
17 ou mais
CO
CL
EL
ET
GN
KN
AN
NO
NT
NV
OX
30mcg
10mcg
15mcg
20mcg
20mcg
30mcg
30mcg
30mcg
300mcg
30mcg
6mcg
12
8
13
11
12
13
13
12
14
17
9
ou menos
ou menos
ou menos
ou menos
ou menos
ou menos
ou menos
ou menos
ou menos
ou menos
ou menos
13-17
9-10
14-17
12-14
13-14
14-17
14-18
13-16
15-16
18-21
10-13
18
11
18
15
15
18
19
17
17
22
14
PN
10un.
20 ou menos
21-28
29 ou mais
PN
10un.
11 ou menos
12-21
22 ou mais
PL
50un.
8 ou menos
0-11
12 ou mais
SFT
25mcg
10 ou menos
11-15
16 ou mais
SF
TT
TB
VC
300mcg
30mcg
10mcg
30mcg
12
14
12
9
13-16
15-18
13-14
10-11
17
19
15
12
20 ou mais
18 ou mais
ou menos
ou menos
ou menos
ou menos
ou
ou
ou
ou
ou
ou
ou
ou
ou
ou
ou
ou
ou
ou
ou
mais
mais
mais
mais
mais
mais
mais
mais
mais
mais
mais
mais
mais
mais
mais
27
so
a) Meios de isolamento
gar salmonella Shigella (SS), gar Hektoen (HE), gar
MacConkey, gar Verde Brilhante, gar Eosina Azul de Metileno
(EMB), gar Xilose Lisina Desoxicolato (XLD) e gar Bismuto
Sulfito, etc.
b) Tcnica de semeio para isolamento
Transferir o inculo bacteriano para um ponto da
superfcie do meio de cultivo distribudo em placa e semear
pela tcnica de estrias utilizando a ala de platina
flambada. Incubar a placa a 37oC por 18-24h e fazer a
diferenciao e identificao bioqumica.
2 - IDENTIFICAO (Provas bioqumicas)
2-1.
Fermentao
glicose)
de
carboidratos
(lactose,
sacarose,
28
29
a) Princpio e meio
O meio de cultivo apropriado para teste de motilidade
bacteriana deve ser semi-slido (0,5% de agar) para permitir
a difuso de bactrias mveis. O meio SIM (S= H2S,I=Indol,
M=Motilidade) um dos meios utilizados para o teste de
motilidade, como tambm para o teste de indol que ser visto
em seguida.
b) Tcnica
Inocular em uma nica picada a colnia bacteriana
isolada no meio, utilizando-se a agulha de platina estril.
Incubar a 37oC por 18-24h.
c) Resultado
A
motilidade
bacteriana
detectada
pelo
exame
macroscpico do meio para se observar uma zona de crescimento
difuso (turbidez) que parte da linha de inoculao feita com
a agulha de platina.
2-4. Teste do Citrato
a) Princpio
Determinar se um microrganismo capaz de utilizar o
citrato como nica fonte de carbono para seu metabolismo e
crescimento. Se o citrato for utilizado, o nitrognio
(do fosfato de amnia) presente no meio tambm ser, havendo
liberao da amnia com a conseqente alcalinizao do meio.
b) Meio: gar Citrato de Simmons
Este um meio slido no qual a nica fonte de carbono
o citrato de sdio (obs: no contm protenas ou carboidratos
que so fontes de carbono,tendo como indicador de pH o azul
de bromotimol.
c) Tcnica
A bactria em estudo inoculada na superfcie do gar
inclinado em tubo fazendo-se estrias na superfcie do meio,
utilizando-se a ala de platina flambada. Incubar a 37oC por
18-24h ou at 3 dias, se necessrio.
d) Resultado
POSITIVO: meio azul (alcalino) - Utilizao do citrato
NEGATIVO: meio verde (neutro) - No utilizao do citrato
2-5. Teste da lisina descarboxilase
a) Princpio
Determinar a habilidade enzimtica de uma determinada
bactria em descarboxilar o aminocido lisina, com a
subsequente alcalinizao do meio devido a formao de amina
alcalina (cadaverina).
b) Meio LIA (gar lisina ferro)
Este
meio
contm
como
indicador
o
prpura
de
bromocresol:
cido: cor amarela -- pH < 5.2
Neutro a bsico: cor prpura -- pH = 6.8
c) Tcnica
A bactria teste inoculada em uma nica picada no meio
LIA em tubo de ensaio, utilizando-se uma agulha de platina
estril.
Em
seguida,
fazem-se
estrias
na
superfcie
inclinada. Incubar a 37oC por 24h.
d) Resultado
POSITIVO: meio prpura (alcalino) - Ocorreu a descarboxilao
da lisina e conseqente formao de aminas.
NEGATIVO: meio amarelo (cido) - No ocorreu a descarboxilao
da lisina. A acidificao do meio ocorre porque a bactria
fermenta uma pequena quantidade de glicose presente no meio.
2-6. Teste de Indol
a) Princpio
Determinar a habilidade do organismo em produzir o indol
(benzil pirrol) a partir da molcula de triptofano
ou
outros aminocido presentes no meio SIM. Quando ocorre a
degradao deste aminocido por bactrias que
possuem a
enzima
triptofanase
ocorre a formao de:
Indol,
cido pirvico e amnia. Este teste til para diferenciar a
E.coli (indol positiva) de outras enterobactrias.
b) Meio e reativo
Meio SIM
31
20E
(bio
Mrieux)
Identificao
de
32
um
sistema
computadorizado que consiste em um mdulo gerador de vcuo,
leitor-incubador, computador-impressora e um monitor de
computador. Este sistema utilizado com cartes de teste
VITEK
para
identificao
bacteriana
e
provas
de
susceptibilidade a antibiticos, totalmente automatizadas.
Este sistema permite a identificao de enterobactrias em 8
horas,
sendo
aceito
como
um mtodo
confivel
para
identificao
rpida
de
bacilos
gram
negativos
nos
laboratrios de microbiologia clnica.
Cada
carto
de
identificao
possui
30
testes
bioqumicos que no necessita adio de reagentes, evitando
erros. VITEK capaz de detectar mais de 300 espcies de
microrganismos (bactrias gram-negativas e gram-positivas e
leveduras).
Indol
Citrato de Simmons
H2S (TSI)
Urease
Motilidade
Lisina
Ornitina
Glicose
Lactose
Sacarose
+
+/d
d
+
+
d
-/+
d
+
-
d
+
+
+
+
+
-
+
+
+
+
+
+
d
-
+
+/dw
+
d
+
d
d
-/+
+
+w
+
+
+
+
+
+w
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+/+
+
+
+
-/+
d
+
dw
+
+
+
+/-/+
+
+
d
+
+
+
+/+
+
+
+
+
+
+
d
+
+
+
+
d
-
+
+
+
+
-/+
d
+
+
d_
(+) positivo,( - ) negativo, (d) positiva tardia, reao pode ocorrer em at 72h, (w) reao fraca, (+/-) maioria positiva,
(-/+) maioria negativa
33
densas
34
Pseudo-miclio
Hifa artrosporada
Epidermophyton sp Microsporum sp Trichophyton sp
A- Macrocondeos
B- Microcondeos
35
36
totalmente impediente
para
bactrias, por esta razo deve ser acrescido de antibiticos
que
inibem
o
crescimento
destes
microrganismos.
O
clorafenicol um dos antibiticos mais utilizados, pela
comodidade do seu uso, pois pode ser esterelizado na
autoclave e pelo seu amplo espectro de ao.
37
A composio
do
gar
Sabouraud
foi,inicialmente
proposta pelo micologista Raymond Jacques Sabouraud, em 1904,
e vem apresentando diversas modificaes com o passar dos
anos, com alteraes na quantidade de alguns componentes,
tais como a dextrose e a adio de substncias inibidoras ,
como o clorofenicol e a cicloeximida.
COMPOSIO DO MEIO GAR SABOURAUD:
Dextrose (glicose) ---- 20g
Peptona -------------- 10g
gar ------------------ 20g
gua ---------------- 1.000ml
pH final = 5.6
Dissolver
aquecendo
121C.
38
pode
ser
circular,
oval,
elptica,
39
40
41
42
laboratorial
para
estas
43
exemplo
pesquisa
de
de reao
anticorpos
de
floculao,
em
um
cujo objetivo
indivduo
com
suspeita
de
e quantitativo.
utilizada
como
triagem
produo
sfilis,
que
de
um
reage
anticorpo
com
este
denominado
complexo
de
reagina
na
cardiolopina-
por que a
reagina
suficientemente
lipoprotena
possvel
semelhante
para
que
os
que
ao
esta
substncia
complexo
anticorpos
de
seja
cardiolipina-
produzidos
contra o
fato
de
grande
importncia
nesse
teste
de
triagem
prova
de
VDRL.
Outro
dado
de
grande
44
importncia
de antgenos (fenmeno
conhecido como
pr-zona).
de
triagem,
qualitatiamente
quantitativamente
na
de
exposio.
Segue
abaixo
as
principais
causas
de
resultados falso-positivos:
1.
Infeces virais
ou bacterianas
em muitos
estados
3.
4.
5.
Doenas
treponmicas
no-sifilticas,
como
bouba,
45
resultado
observado
pela
floculao
que
ocorrer,
QUALITATIVA
PARA
DETECO
46
DE
47
COLETA DA AMOSTRA:
48
49
Referncia s Bibliogrfica s
50
IX REFERNCIAS
4. JAWETZ, E. et al.
Microbiologia
Mdica.
18.
ed.
Guanabara
Koogan, 1996.
5. KONEMAN E.W.; ALLEN S.D.; JANDA W.M.; SCHRECKENBERGER P.C. & WINN JNIOR W.C.
Diagnstico Microbiolgico Texto e Atlas colorido 5aed. Medsi,
2001.
11. SIDRIM,
J.J.C
&
ROCHA,
M.F.G.
MICOLOGIA
MDICA
LUZ
DE